专利名称：分析亮氨酸生产过程中的沉淀剂邻二甲苯-4-磺酸的方法
技术领域：
本发明涉及分析化学领域，特别涉及到用HPLC法分析亮氨酸生产过程中的沉淀剂邻二甲苯-4-磺酸的方法。
背景技术：
在提取法生产亮氨酸的过程中，常采用邻二甲苯-4-磺酸作为沉淀剂，从复杂的氨基酸混合溶液中选择性地沉淀亮氨酸，所形成的亮氨酸-沉淀剂复合物还需要通过氨解脱除沉淀剂、脱色等一系列精制过程，最终得到亮氨酸成品。其工艺流程如图1 ;而分析、监控生产过程各环节的沉淀剂含量是保证生产正常运行和产品质量的必要条件，主要包括
(I)沉淀液；(2)沉淀母液；(3)氨解母液；(4)脱色液。邻二甲苯-4-磺酸是带苯环的有机化合物，在266nm有较强的紫外吸收峰，可以采用紫外分光光度法进行测定。但在上述样品中都存在同样具有紫外吸收的干扰物质。因此，需要采用HPLC等分离手段预先实现了邻二甲苯-4-磺酸和干扰物质的分离后，才能完成邻二甲苯-4-磺酸的测定。
发明内容
本发明的目的是提供分析亮氨酸生产过程中的沉淀剂邻二甲苯-4-磺酸的方法，它采用HPLC法进行分析，从而保证亮氨酸生产的正常和稳定运行，实现对亮氨酸产品的质量控制。为了解决背景技术所存在的问题，本发明的分析方法为1)取样、制样取亮氨酸生产过程中的沉淀液、沉淀母液、氨解母液、脱色液，分别以适当的倍数稀释，使稀释液中邻二甲苯-4-磺酸的浓度在O. l-10mmol/L范围内，再将稀释液通过微孔过滤器过滤，将滤液作为分析溶液；2)设置流动相流速为O. 8-1. OmL/min,检测波长为266nm，柱温为室温；3)采用六通进样阀将制成的分析溶液20uL注入液相色谱仪中，记录色谱图，进行色谱分析。本发明分析方法选用C18，4. 6mmX 150mm分离柱，以醋酸钠缓冲液-有机相作为流动相，其中有机相为甲醇、乙腈，优选乙腈，醋酸钠缓冲液为醋酸与醋酸钠混合配制的缓冲溶液，在流动相中有机相与醋酸钠缓冲液的体积比为10 90-40 60，优选为20 80，醋酸钠缓冲液中醋酸浓度为O. 10-0. 20mol/L，优选为0. 15mol/L，醋酸钠缓冲液的pH值为4. 5-6. 8，优选为6. O。本发明具有以下有益效果1、采用碳十八烧基反向键合相色谱柱(C18,4. 6_X 150mm),能够有效地分离样品中的邻二甲苯-4-磺酸和各种干扰物质，准确测定样品中的邻二甲苯-4-磺酸浓度。2、简便、快速，能准确地分析亮氨酸生产过程中提取的各种样品的邻二甲苯-4-磺酸浓度，确保对生产过程的监控。
图1是现有技术的工艺流程图2是本发明实施例选用沉淀液后的示意图；图3是本发明实施例选用沉淀母液的示意图；图4是本发明实施例选用氨解母液的示意图；图5是本发明实施例选用脱色液的示意图。
具体实施例方式本具体实施方式
采用以下分析方法为1)取样、制样取亮氨酸生产过程中的沉淀液、沉淀母液、氨解母液、脱色液，分别以适当的倍数稀释，使稀释液中邻二甲苯-4-磺酸的浓度在0. 1-lOmmol/L范围内，再将稀释液通过微孔过滤器过滤，将滤液作为分析溶液；2)设置流动相流速为0. 8-1. OmL/min，检测波长为266nm，柱温为室温；3)采用六通进样阀将制成的分析溶液20uL注入液相色谱仪中，记录色谱图，进行色谱分析。本发明分析方法选用C18，4. 6mmX 150mm分离柱，以醋酸钠缓冲液-有机相作为流动相，其中有机相乙腈，醋酸钠缓冲液为醋酸与醋酸钠混合配制的缓冲溶液，在流动相中有机相与醋酸钠缓冲液的体积比为20 80，醋酸钠缓冲液中醋酸浓度为0. 15mol/L，醋酸钠缓冲液的PH值为6.0。实施例1 :(I)仪器与试剂高效液相色谱仪=LabTech高效液相色谱系统及色谱工作站；色谱柱C18,4.6mmX 150mm ;流动相取无水醋酸钠8. 2g，加水900mL溶解，滴加36%的醋酸至pH为6. 5，再补加水至IOOOmL,此为醋酸钠缓冲液，将乙腈与醋酸钠缓冲液以20 80(体积比)的比例混合，经0. 45um微孔滤膜过滤，并超声波脱气；流速1.OmL/min ；检测波长266nm；柱温室温；进样体积20uL。(2)实验步骤分别取亮氨酸生产过程中的沉淀液、沉淀母液、氨解母液、脱色液10. OOmL于IOOmL容量瓶中，以水稀释并定容。再分别取上述稀释液1. OOmL，加流动相定容至10mL，即得各种样品的分析液。在进样前，还需采用0. 45um微孔滤膜过滤，取滤液进样进行HPLC分析，记录色谱图。结果见附图1-图5。从附图1-图5可以看出，样品溶液中存在的一些干扰组分在邻二甲苯-4-磺酸之前出峰，采用上述方法，实现了干扰物质和邻二甲苯-4-磺酸的分离，可对样品中的邻二甲苯-4-磺酸含量进行准确测定。
权利要求
1.分析亮氨酸生产过程中的沉淀剂邻二甲苯-4-磺酸的方法，其特征在于的它的分析方法为1)取样、制样取亮氨酸生产过程中的沉淀液、沉淀母液、氨解母液、脱色液，分别以适当的倍数稀释，使稀释液中邻二甲苯-4-磺酸的浓度在O. 1-lOmmol/L范围内，再将稀释液通过微孔过滤器过滤，将滤液作为分析溶液；2)设置流动相流速为O. 8-1. OmL/min，检测波长为266nm，柱温为室温；3)采用六通进样阀将制成的分析溶液20uL注入液相色谱仪中，记录色谱图，进行色谱分析。
2.根据权利要求1所述的分析亮氨酸生产过程中的沉淀剂邻二甲苯-4-磺酸的方法，其特征在于本分析分析方法选用C18，4. 6mmX 150mm分离柱，以醋酸钠缓冲液-有机相作为流动相，其中有机相为甲醇、乙腈，醋酸钠缓冲液为醋酸与醋酸钠混合配制的缓冲溶液，在流动相中有机相与醋酸钠缓冲液的体积比为10 90-40 60，醋酸钠缓冲液中醋酸浓度为O. 10-0. 20mol/L,醋酸钠缓冲液的pH值为4. 5-6. 8。
全文摘要
分析亮氨酸生产过程中的沉淀剂邻二甲苯-4-磺酸的方法，它涉及分析化学领域。它的分析方法为1)取样、制样取亮氨酸生产过程中的沉淀液、沉淀母液、氨解母液、脱色液，分别以适当的倍数稀释，使稀释液中邻二甲苯-4-磺酸的浓度在0.1-10mmol/L范围内，再将稀释液通过微孔过滤器过滤，将滤液作为分析溶液；2)设置流动相流速为0.8-1.0mL/min，检测波长为266nm，柱温为室温；3)采用六通进样阀将制成的分析溶液20uL注入液相色谱仪中，记录色谱图，进行色谱分析；本发明采用HPLC法进行分析，从而保证亮氨酸生产的正常和稳定运行，实现对亮氨酸产品的质量控制。
文档编号G01N30/02GK103048399SQ20121052101
公开日2013年4月17日 申请日期2012年12月7日 优先权日2012年12月7日
发明者刘勋 申请人:重庆工贸职业技术学院