量子点 粒径为3-7皿。在一些具体实施例中，所述加热反应的反应温度为210-240°C，反应时间为 3-6h，制得的巧光碳量子点粒径为3-8nm。
[0049] 本发明所述制备方法制得的巧光碳量子点可W与抗体结合进行免疫层析分析。抗 体结合的巧光碳量子点越多，对应的巧光强度越强，利用其巧光信号的强弱可W进行定量 分析。因此本发明还提供了所述制备方法制得的巧光碳量子点在制备免疫层析产品中的应 用。
[0050] 在一些实施方案中，所述的免疫层析产品中所述巧光碳量子点与抗体直接相连。 本发明所述巧光碳量子点表面含有駿基、横酸基和哲基，可W通过调节抑值使所述巧光碳 量子点表面带上负电荷，通过静电作用可W吸附带正电性的抗体，与单抗或者多抗连接在 一起获得连接有巧光碳量子点的抗体。连接有巧光碳量子点的抗体可W涂布在加样区，获 得免疫层析试条。
[CK)5U 其中，所述调节抑值的溶液可W选自有机酸盐或无机酸盐。如碳酸钢，碳酸钟，碳 酸氨钟，醋酸钟，己醇钟，己醇钢或醋酸钢中的一种或几种。
[0化2] 在一些实施方案中，所述的免疫层析产品中所述巧光碳量子点与抗体通过亲和素 和生物素间接相连。本发明所述巧光碳量子点具有良好的抑值耐受性，在抑5-10条件下 稳定。在缓冲液体系下，通过偶联剂处理可W与链酶亲和素交联，然后与生物素标记的抗体 结合，获得结合巧光碳量子点的抗体。获得的结合巧光碳量子点的抗体可W存储或者分装 备用。
[0化3] 其中，所述偶联剂为二环已基二亚胺值CC)、二异丙基碳二亚胺值IC)、4-环了氨 基化晚、1-哲基苯并二氮挫、1-哲基-7-偶氮苯并二氮挫、1- (3-二甲基氨基丙基）-3-己基 二亚胺巧DCI)、4-二甲氨基化晚中的一种或几种。
[0化4] 本发明所述的应用中所述免疫层析产品可W为本领域技术人员公知的任意一种 产品形式。包括免疫层析试剂盒和免疫层析试纸条。
[0化5] 本发明还提供了一种免疫层析试纸条，包括所述制备方法制得的巧光碳量子点。
[0056] 在一些优选实施方案中，所述的免疫层析试纸条包括依次设置的加样区、结合物 释放区、反应区和吸水区；所述结合物释放区为包被结合有巧光碳量子点的抗体的结合物 释放垫；所述反应区为分为测试区和控制区，所述反应区为测试区包被与抗体结合的抗原、 控制区包被抗鼠IgG抗体的固体支持物。
[0057] 其中，本领域技术人员可W理解所述结合有巧光碳量子点的抗体中所述巧光碳量 子点可W与抗体直接相连，也可W是所述巧光碳量子点通过亲和素和生物素与抗体间接相 连。
[0化引进一步的，在一些优选实施方案中，所述的免疫层析试纸条还包括背衬，所述加样 区、结合物释放区、反应区和吸水区依次相互搭接的粘贴在背衬上。
[0059] 其中，本领域技术人员可W理解所述免疫层析试纸条中加样区、结合物释放区、反 应区和吸水区的材料可W按照本领域的公知常识进行选择。
[0060] 在一些实施方案中，所述免疫层析试纸条中所述加样区、结合物释放区为玻璃纤 维素膜。
[0061] 在一些实施方案中，所述免疫层析试纸条中所述反应区中的固体支持物为硝酸纤 维素膜。
[0062] 在一些实施方案中，所述免疫层析试纸条中吸水区为吸水滤纸。
[0063] 在一些实施方案中，本发明所述背衬支持加样区、结合物释放区、反应区和吸水区 粘结固定。所述背衬优选为PVC板。
[0064] 本发明还提供了所述免疫层析试纸条的制备方法，包括：
[0065] 步骤1 ;将结合有巧光碳量子点的抗体喷涂在结合物释放垫上获得结合物释放 区；
[0066] 步骤2 ;将抗原和抗鼠IgG抗体喷涂在反应区的固体支持物上，分别形成测试区、 控制区获得反应区；
[0067] 步骤3 ;将加样区、结合物释放区、反应区和吸水区依次相互搭接的粘贴在背衬上 即得。
[0068] 本领域技术人员可W理解，本发明所述免疫层析试纸条上喷涂的抗体和抗原针对 不同检测物的选择与检测物相适应的抗体和抗原。
[0069] 本发明还提供了一种免疫层析试剂盒，包括所述制备方法制得的巧光碳量子点。
[0070] 在一些优选实施方案中，所述的免疫层析试剂盒包括免疫层析试纸条和独立设置 的结合有巧光碳量子点的抗体；所述免疫层析试纸条包括依次设置的加样区、反应区和吸 水区；所述反应区为分为测试区和控制区，所述反应区为测试区包被与抗体结合的抗原、控 制区包被抗鼠IgG抗体的固体支持物。检测时将检测物与独立设置的结合有巧光碳量子点 的抗体混合后滴加到加样区进行检测。
[0071] 同样，本领域技术人员可W理解所述结合有巧光碳量子点的抗体中所述巧光碳量 子点可W与抗体直接相连，也可W是所述巧光碳量子点通过亲和素和生物素与抗体间接相 连。
[0072] 进一步的，在一些优选实施方案中，所述的免疫层析试剂盒中的所述的免疫层析 试纸条还包括背衬，所述加样区、反应区和吸水区依次相互搭接的粘贴在背衬上。
[0073] 其中，本领域技术人员可W理解所述的免疫层析试剂盒中的所述免疫层析试纸条 中加样区反应区和吸水区的材料可W按照本领域的公知常识进行选择。
[0074] 在一些实施方案中，所述的免疫层析试剂盒中的所述免疫层析试纸条中所述加样 区为玻璃纤维素膜。
[0075] 在一些实施方案中，所述的免疫层析试剂盒中的所述免疫层析试纸条中所述反应 区中的固体支持物为硝酸纤维素膜。
[0076] 在一些实施方案中，所述的免疫层析试剂盒中的所述免疫层析试纸条中吸水区为 吸水滤纸。
[0077] 在一些实施方案中，本发明所述背衬支持加样区、结合物释放区、反应区和吸水区 粘结固定。所述背衬优选为PVC板。
[007引本发明还提供了所述的免疫层析试剂盒中的所述免疫层析试纸条的制备方法，包 括：
[0079] 步骤1 ;将抗原和抗鼠IgG抗体喷涂在反应区的固体支持物上，分别形成测试区、 控制区获得反应区；
[0080] 步骤2 ;将加样区、反应区和吸水区依次相互搭接的粘贴在背衬上即得。
[0081] 本领域技术人员可W理解，本发明所述免疫层析试剂盒中免疫层析试纸条上喷涂 的抗原针对不同检测物可W选择与检测物相适应的抗原。
[0082] 本发明所述制备巧光碳量子点的方法W动植物胶体为原料制备碳量子点，动植物 胶体含有苯环等共辆分子，在反应过程中可形成共辆团聚的碳量子点，巧光性能较高。进一 步的，在加热反应过程中加入聚合物可有效提高巧光碳量子点巧光效率。实验结果显示，本 发明所述制备巧光碳量子点的方法制得的巧光量子效率可达到30%?50%。
[0083] 为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明进行详细阐述。
[0084] 实施例1、巧光量子效率的检测方法及计算方法
[0085] 采用参比法测定巧光量子效率。通过选择吸收光谱中标准溶液与待测物溶液吸收 曲线的相交点所对应的波长作为激发波长，W此来激发待测物和标准物，获得相应的巧光 强度。选用硫酸奎宁在0. 〇5mol/L的硫酸溶液中的巧光量子效率为55%为标准，计算巧光 碳量子点巧光量子效率。巧光碳量子点巧光量子效率（cpc )的计算公式为；
[0086]
【主权项】
1. 一种制备荧光碳量子点的方法，将动植物胶体与水混合，在密闭体系中加热反应，然 后冷却至室温离心取上清液。
2. 根据权利要求1所述的方法，加热反应过程中加入聚合物。
3. 根据权利要求1或2所述的方法，所述动植物胶体为卡拉胶、阿拉伯胶、瓜尔胶、骨 胶、啫喱胶中的一种或几种的混合物。
4. 根据权利要求1-3任意一项所述的方法，所述动植物胶体与水的质量比为1:20? 1:100〇
5. 根据权利要求1-4任意一项所述的方法，所述聚合物为聚苯胺、聚吡咯或硅油。
6. 根据权利要求2-5任意一项所述的方法，所述聚合物的加入量为Iwt% -15wt%。
7. 根据权利要求1-6任意一项所述的方法，所述加热反应的反应温度为140-240°C，反 应时间为2-12h。
8. 根据权利要求1-7任意一项所述的方法，所述离心的转速为10000rpm-15000rpm，离 心时间为30min_90min。
9. 权利要求1-8任意一项所述制备方法制得的荧光碳量子点。
10. 权利要求9所述的荧光碳量子点在制备免疫层析产品中的应用。
11. 根据权利要求10所述应用，所述荧光碳量子点与抗体直接相连或通过亲和素和生 物素间接相连。
12. 根据权利要求10所述应用，所述免疫层析产品为免疫层析试纸条或免疫层析试剂 盒。
【专利摘要】本发明属于免疫层析技术领域，具体涉及一种制备荧光碳量子点的方法，尤其是一种制备荧光碳量子点的方法及制得的荧光碳量子点以及在免疫层析试条上的应用。发明所述制备荧光碳量子点的方法以动植物胶体为原料制备碳量子点，动植物胶体含有苯环等共轭分子，在反应过程中可形成共轭团聚的碳量子点，荧光性能较高。进一步的，在加热反应过程中加入聚合物可有效提高荧光碳量子点荧光效率。实验结果显示，发明所述制备荧光碳量子点的方法制得的荧光量子效率可达到30％～50％。
【IPC分类】G01N33-533, G01N27-26
【公开号】CN104569375
【申请号】CN201510046934
【发明人】吴天景
【申请人】三诺生物传感股份有限公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2015年1月29日