;磁性微球体系中，第二桥连物（如链霉亲和素等）的工作浓度优选 0. l-2μg/ml，磁性微球的工作浓度优选0. lmg/ml-2mg/ml。将各试剂成分的浓度设定在此 范围内，既能避免由于浓度过低导致光信号低，影响试剂检测的灵敏度；又能避免浓度过高 所造成的成本浪费。可根据具体情况调整。
[0024] 可以理解的，为了达到定量测定的目的，该试剂盒还可以包括梅毒螺旋体抗体浓 度为0. 05mIU/ml-10mIU/ml的校准品溶液和浓度为100mIU/ml-1000mIU/ml的校准品溶液。 通过样本与校准品溶液RLU的比例关系，计算出测定结果。
[0025] 同样可以理解的，该试剂盒中的各组分均含有BSA(牛血清白蛋白）和防腐剂，BSA 浓度为〇. 01-0. 5g/ml，防腐剂为山梨酸钾、苯甲酸钠、叠氮钠、亚硝酸钠、Proclin系列中的 任一种或两种以上混合物。
[0026] 适用于本发明的磁性微球也称为磁珠或磁球，可以是本领域中常用的磁性微球。 优选的是，本发明使用的磁球，是将纳米级的Fe 203或Fe 304磁性粒子和有机高分子材料进行 复合，形成具有超顺磁性和极大量蛋白吸附容量的微米级的固相微球，具有在外加磁场作 用下可迅速被磁化，在撤走磁场后剩磁为零的属性。其中，所述有机高分子材料的种类没有 特别限制，可根据需要进行选择。
[0027] 本发明所使用的磁性微球应能满足直径为0. 1-5 y m，磁性微球还可以通过表面改 性而带有多种活性功能基团，包括但不限于-〇H、-C00H、-NH2。
[0028] 在其中一个实施例中，所述磁性微球为Fe203或Fe 304磁性纳米粒子与有机高分子 材料的复合体，并具有〇. 1-5 y m的粒径，并且，所述磁性微球任选地通过表面改性而带有 一种或多种活性功能基团。
[0029] 在其中一个实施例中，所述第一桥连物和第二桥连物为生物素和链霉亲和素，或 者硫氰酸荧光素和抗异硫氰酸荧光素抗体，或者标签蛋白和标签蛋白抗体中的任一组。可 根据具体需要灵活选择。
[0030] 在其中一个实施例中，当第一桥连物和第二桥连物为生物素和链霉亲和素时，所 述间接连接标记示踪物的梅毒螺旋体重组抗原1由标记抗异硫氰酸荧光素抗体的标记示 踪物，和标记异硫氰酸荧光素的梅毒螺旋体重组抗原1组成；或所述间接连接标记示踪物 的梅毒螺旋体重组抗原1由标记标签蛋白抗体的标记示踪物，和标记标签蛋白的梅毒螺旋 体重组抗原1组成；
[0031] 当第一桥连物和第二桥连物为硫氰酸荧光素和抗异硫氰酸荧光素抗体时，所述间 接连接标记示踪物的梅毒螺旋体重组抗原1由标记链霉亲和素的标记示踪物，和标记生物 素的梅毒螺旋体重组抗原1组成；或所述间接连接标记示踪物的梅毒螺旋体重组抗原1由 标记标签蛋白抗体的标记示踪物，和标记标签蛋白的梅毒螺旋体重组抗原1组成；
[0032] 当第一桥连物和第二桥连物为标签蛋白和标签蛋白抗体时，所述间接连接标记示 踪物的梅毒螺旋体重组抗原1由标记链霉亲和素的标记示踪物，和标记生物素的梅毒螺旋 体重组抗原1组成；或所述间接连接标记示踪物的梅毒螺旋体重组抗原1由标记抗异硫氰 酸荧光素抗体的标记示踪物，和标记异硫氰酸荧光素的梅毒螺旋体重组抗原1组成。
[0033] 即在上述标记物体系中，如使用间接搭桥连接方式，以不影响桥连物体系和磁性 微球体系中通过桥连物连接梅毒螺旋体重组抗原2与磁性微球为原则进行选取。除此外， 上述标记物体系中采用何种连接方式（直接连接或间接搭桥连接）并不对桥连物体系和磁 性微球体系造成影响或限定，既可在标记物体系中选用直接连接，也可采用间接连接。
[0034] 并且，上述标记物体系中，标记示踪物的工作浓度优选5ng/ml-500ng/ml，梅毒螺 旋体重组抗原1的工作浓度优选50ng/ml-5000ng/ml，异硫氰酸荧光素的工作浓度优选 5ng/ml-500ng/ml，抗异硫氰酸焚光素抗体的工作浓度优选1-20 y g/ml，生物素的工作浓度 优选5ng/ml-500ng/ml，链霉亲和素的工作浓度优选0. 1-2 y g/ml，标签蛋白的工作浓度优 选5ng/ml-500ng/ml，标签蛋白抗体的工作浓度优选5ng/ml-500ng/ml。
[0035] 上述标记示踪物包括以下几种：1、化学发光免疫分析使用的能够直接发光的标记 物，如鲁米诺及其衍生物、异鲁米诺或其衍生物、叮啶酯等；2、化学发光酶免疫分析使用的 配合相应的发光底物可以发光的标记物，如碱性磷酸酶或过氧化物酶等。
[0036] 在其中一个实施例中，所述标记示踪物为发光标记物，选自：金刚烷，鲁米诺及其 衍生物，异鲁米诺及其衍生物，叮啶酯。优选N-(4-氨基丁基）-N-乙基异鲁米诺（ABEI)，与 上述发光标记物配合的氧化系统包括H 202-微过氧化物酶、H202-过氧化氢酶、H20 2-乳过氧 化物酶、H202-次氯血红素、H20 2-氯化血红素、次氯酸盐-C〇Cl2、过硫酸盐、过氧化钾、高碘酸 钠、H 202-K3Fe (CN) 6、黄嘌呤-次黄嘌呤氧化酶、叔丁醇钾中的至少一种。。
[0037] 上述发光标记物是指在发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放 能量的化合物，该化合物能够经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体， 当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子（hM)。
[0038] 在其中一个实施例中，所述标记示踪物为化学发光催化剂，选自：碱性磷酸酶，过 氧化物酶。使用时，配合相应的化学发光底物即可发光被定量检测，所述化学发光底物包括 NaOH和H 202，还包括金刚烷、鲁米诺及其衍生物、异鲁米诺或其衍生物中的至少一种，优选 N- (4-氨基丁基）-N-乙基异鲁米诺（ABEI)。
[0039] 在其中一个实施例中，所述标记物体系或桥连物体系中，所述梅毒螺旋体重组抗 原由梅毒螺旋体重组抗原Tppl7、梅毒螺旋体重组抗原Tpp47和梅毒螺旋体重组抗原Tppl5 分别与标记示踪物或第一桥连物反应后混合得到，所述梅毒螺旋体重组抗原Tppl7、梅毒螺 旋体重组抗原Tpp47和梅毒螺旋体重组抗原Tppl5的质量比为3-6:3:1-2。优选质量比为 6:3:1、3:3:2、6:3:3或3:3:1。具体为：将梅毒螺旋体重组抗原Tpp 17、梅毒螺旋体重组抗 原Tpp47和梅毒螺旋体重组抗原Tppl5分别投料与标记示踪物或第一桥连物反应，再根据 需要对上述反应产物进行稀释得到工作溶液（混合稀释）。采用上述比例配合的梅毒螺旋 体重组抗原混合溶液，可以显著提高试剂检测的灵敏度和降低一定的非特异性结合。
[0040] 在其中一个实施例中，该试剂盒还包括4)特异性添加剂：包括结合剂和辅助成 分，所述结合剂为新生牛血清、羊血清、鼠血清、马血清、牛血清白蛋白、羊抗人IgA、兔抗人 IgA、鼠抗人IgA中的至少一种；所述辅助成分为二硫苏糖醇（DTT)、2-(N-吗啉代）乙磺酸 (MES)、乙二醇、丙三醇、酪蛋白、乙二胺四乙酸盐（EDTA)中的至少一种。
[0041] 本发明人通过大量的实验研宄发现，在常规梅毒螺旋体抗体检测中，特异性和 灵敏度低的另一个原因是在样本中有大量干扰物，如：类风湿性因子（RF)、人抗小鼠抗体 (HAMA)，嗜异性抗体，抗核抗体（ANA)等多种干扰免疫反应的因子。
[0042] 在上述研宄基础上，本发明的检测试剂盒中，还加入了特异性添加剂，与样本中的 干扰物结合，从而避免干扰物对检测过程的干扰，提高了检测特异性和灵敏度。人血清中 含有一些特定的抗体，这些抗体会跟免疫检验中使用的动物抗体或抗原结合，从而导致检 测结果的假阳性或假阴性干扰，这些特定的抗体称为异嗜性抗体。特异性添加剂中所含有 的动物源性的抗体成分含有足够的特异性结合位点，能主动结合异嗜性抗体，而添加剂中 的其他物质则会提供一个稳定的异嗜性抗体发生特异性结合反应的液体环境。当异嗜性抗 体与动物源性的抗体发生结合以后，便不能在桥联免疫测定系统中的标记抗原与梅毒抗体 了，从而有效的消除了非特异性结合，提高了梅毒检测试剂的灵敏度。
[0043] 上述特异性添加剂中，新生牛血清的体积百分浓度优选10-20 %、羊血清的体积 百分浓度优选〇. 1-10%、鼠血清（鼠源性免疫球蛋白）的体积百分浓度优选〇. 1-10%、马 血清的体积百分浓度优选〇. 1-5%、牛血清白蛋白的浓度优选0. l_15g/L、羊抗人IgA的浓 度优选0. l-5g/L、兔抗人IgA的浓度优选0. l-5g/L、鼠抗人IgA的浓度优选0. l-5g/L ;二 硫苏糖醇