L，平均值+SEM，P= 0. 01)(表和图5)。相反地，来自PTC组织的样品中的甲状腺球蛋白浓度比来自良性结节的 样品中的低巧9.4±24yg/mL对比 664±146yg/mL，p= 0.008)(表和图5)。
[0095]PTN和PTN/Tg值W及病理结果列于下表中。
[0096] 表.具有病理学结果的多效生长因子和多效生长因子/甲状腺球蛋白的比例
[0097]
[009引本实施例的结果表明，FNA洗脱样品中的多效生长因子水平在乳头状甲状腺癌组 织中比在正常甲状腺组织或良性甲状腺结节中的高。
[0099] 实施例5
[0100] 本实施例说明了用于诊断甲状腺结节的方法，所述诊断是通过确定甲状腺结节的 样品中的多效生长因子与甲状腺球蛋白的比例。
[0101] 根据实施例4中所描述的测定结果计算多效生长因子与甲状腺球蛋白的比例 (PTN/Tg)。在正常甲状腺组织中的平均PTN/Tg比例为2950±888pg/mg。PTN/Tg的比值在 良性结节中较低，所述良性结节包括腺瘤样/胶体结节、滤泡性腺瘤和在受慢性淋己细胞 性甲状腺炎影响的甲状腺中的良性结节（图6A和6B)。在乳头状甲状腺癌组织中的PTN/ Tg比值高于在良性结节中的比值（9490±4730pg/mg对比357±145pg/mg，P<0. 001)(图6A 和6B)。PTN/Tg比例并未显现出与结节大小有关联。获取自患有Graves病患者的良性结 节的样品表现出较高的多效生长因子与甲状腺球蛋白比例（图6B)。
[0102] 本实施例的结果表明，在FNA洗脱样品中的多效生长因子与甲状腺球蛋白的比例 在乳头状甲状腺癌组织中比在良性甲状腺结节中高。
[0103] 在本申请中引用的所有参考文献，包括出版物、专利申请和专利，通过引用并入本 申请，如同每个参考文献被单独并具体地指出W通过引用被并入本申请并且在本申请中全 部阐述。
[0104] 在描述本发明的上下文中（特别是在W下权利要求的上下文中），使用术语"一" 和"一个"和"该"和"至少一个"和类似指代被解释为同时包括单数和复数，除非本申请另 有说明或与上下文明显矛盾。术语"至少一个"连有一个或多个项目的列表（例如，"A和B 的至少一个"），该术语的使用应被解释为是指从列出的项目中选出的一个项目（A或B)或 所列项目（A和B)两个或更多个的任意组合，除非在此另有说明或与上下文明显矛盾。除非 另有说明，术语"包括"、"具有"、"含有"和"包含"将被理解为开放式术语（即，意思是"包 括但不限于"）。除非在此另有说明，本文数值范围的描述仅旨在用作在该范围内单独参考 各个分别数值的速记方法，并且各个分别的值被并入说明书中，如同在本申请中单独列举 一样。可任何合适的顺序进行本申请所描述的所有方法，除非在此另外指出或另外与 上下文明显矛盾。本申请中所提供任何和所有实施例，或示例性语言的使用（例如，"如")， 仅仅是为了更好地阐明本发明，而不会构成对本发明范围的限制，除非另有说明。说明书中 的任何语言不应被解释为表示任何未要求保护的元素作为实践本发明的必需元素。
[0105] 在本申请中描述了本发明的优选实施方式，包括发明人已知的用于实施本发明的 最佳模式。在阅读了前面的描述后，该些优选实施方式的变化对于本领域的普通技术人员 可W是明显的。发明人期望技术人员酌情采用该些变化，并且发明人希望本发明也可 不同于该里具体描述的方式来实践。因此，本发明包括本申请所附的权利要求中所述主题 的由适用法律所允许的所有修改和等同物。此外，本发明包括在所有可能的变化中的上述 元素的任何组合，除非本申请中另外指出或与上下文明显矛盾。
【主权项】
1. 一种用于诊断对象中生长的方法，所述方法包括： (a) 提供获取自对象的生长样品； (b) 通过免疫测定来分析所述样品以确定中期因子的水平； (c) 将从所述样品确定的中期因子的水平与对照比较；以及 (d) 基于从所述样品确定的中期因子的水平和所述对照的比较，提供对所述生长为良 性生长或恶性生长的诊断。2. 根据权利要求1所述的方法，其中所述对照是在良性生长中的中期因子水平，并且 与所述对照比较，从所述样品确定的相等的或降低的中期因子水平是良性生长的诊断依 据。3. 根据权利要求1或2所述的方法，其中所述对照是良性生长中的中期因子水平，并且 与所述对照比较，从所述样品确定的升高的中期因子水平是恶性生长的诊断依据。4. 根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中所述样品是通过外科活检、开放活 检或针刺活检获得。5. 根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中所述样品是通过细针穿刺获得。6. 根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其中所述生长是甲状腺结节。7. 根据权利要求1-6中任意一项所述的方法，其中所述生长是肿瘤。8. 根据权利要求1-7中任意一项所述的方法，所述方法还包括对所述生长的常规组织 学或细胞学的检查。9. 根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中所述免疫测定是夹心酶联免疫吸附 测定（ELISA)，所述夹心酶联免疫吸附测定包括将所述样品与溶液接触的步骤，所述溶液包 括与人中期因子特异性结合的抗体。10. 根据权利要求9所述的方法，其中所述抗体偶联至选自下组的标记：生物素、放射 性核素、焚光分子、化学发光分子和酶。11. 根据权利要求9或10所述的方法，其中所述溶液包括聚合物。12. 根据权利要求11所述的方法，其中所述聚合物是聚-L-赖氨酸。13. 根据权利要求12所述的方法，其中在所述溶液中聚-L-赖氨酸的浓度是10 y g/ mLo14. 一种用于诊断对象中生长的试剂盒，所述试剂盒包括： (a) 抗体，所述抗体与人中期因子特异性结合，以及 (b) 指导材料，所述指导材料用于通过免疫测定来确定与对照比较的、获取自对象的生 长样品中的中期因子水平，并指示从所述样品确定的所述中期因子水平是良性生长或恶性 生长的诊断依据。15. 根据权利要求14所述的试剂盒，其中所述指导材料描述将所述样品与溶液接触的 步骤，所述溶液包括（i)所述与人中期因子特异性结合的抗体和（ii)聚合物。16. 根据权利要求14或15所述的试剂盒，所述试剂盒还包括溶液，所述溶液包括（i) 所述与人中期因子特异性结合的抗体和（ii)聚合物。17. 根据权利要求15或16所述的试剂盒，其中所述聚合物是聚-L-赖氨酸。18. 根据权利要求14-17中任意一项所述的试剂盒，其中所述生长是甲状腺结节。19. 根据权利要求14-18中任意一项所述的试剂盒，所述试剂盒还包括一个或多个对 照中期因子水平的指示。20. -种用于诊断对象中生长的方法，所述方法包括： (a) 提供获取自对象的生长样品； (b) 通过免疫测定来分析所述样品以确定多效生长因子的水平； (c) 将从所述样品确定的多效生长因子的水平与对照比较；以及 (d) 基于从所述样品确定的多效生长因子的水平和所述对照的比较，提供对所述生长 为良性生长或恶性生长的诊断。21. 根据权利要求20所述的方法，其中所述对照是在良性生长中的多效生长因子的水 平，并且与所述对照比较，从所述样品确定的相等的或降低的多效生长因子水平是良性生 长的诊断依据。22. 根据权利要求20或21所述的方法，其中所述对照是良性生长中的多效生长因子的 水平，并且与所述对照比较，从所述样品确定的升高的多效生长因子水平是恶性生长的诊 断依据。23. 根据权利要求20-22中任意一项所述的方法，其中所述样品是通过外科活检、开放 活检或针刺活检获得。24. 根据权利要求20-23中任意一项所述的方法，其中所述样品是通过细针穿刺获得。25. 根据权利要求20-24中任意一项所述的方法，其中所述生长是甲状腺结节。26. 根据权利要求20-25中任意一项所述的方法，其中所述生长是肿瘤。27. 根据权利要求20-26中任意一项所述的方法，所述方法还包括对所述生长的常规 组织学或细胞学的检查。28. 根据权利要求20-27中任意一项所述的方法，其中所述免疫测定是夹心酶联免疫 吸附测定（ELISA)，所述夹心酶联免疫吸附测定包括将所述样品与溶液接触的步骤，所述溶 液包括与人多效生长因子特异性结合的抗体。29. 根据权利要求28所述的方法，其中所述抗体偶联至选自下组的标记：生物素、放射 性核素、焚光分子、化学发光分子和酶。30. 根据权利要求28或29所述的方法，其中所述溶液包括聚合物。31. 根据权利要求30所述的方法，其中所述聚合物是聚-L-赖氨酸。32. 根据权利要求31所述的方法，其中在所述溶液中聚-L-赖氨酸的浓度是10 y g/ mLo33. -种用于诊断对象中生长的试剂盒，所述试剂盒包括： (a) 抗体，所述抗体与人多效生长因子特异性结合，以及 (b) 指导材料，所述指导材料用于通过免疫测定来确定与对照比较的、获取自对象的生 长样品的多效生长因子水平，并指示从所述样品确定的所述多效生长因子水平是良性生长 或恶性生长的诊断依据。34. 根据权利要求33所述的试剂盒，其中所述指导材料描述将所述样品与溶液接触的 步骤，所述溶液包括（i)所述与人多效生长因子特异性结合的抗体和（ii)聚合物。35. 根据权利要求33或34所述的试剂盒，所述试剂盒还包括溶液，所述溶液包括（i) 所述与人多效生长因子特异性结合的抗体和（ii)聚合物。36. 根据权利要求34或35所述的试剂盒，其中所述聚合物是聚-L-赖氨酸。37. 根据权利要求33-36中任意一项所述的试剂盒，其中所述生长是甲状腺结节。38. 根据权利要求33-37中任意一项所述的试剂盒，所述试剂盒还包括一个或多个对 照多效生长因子水平的指示。
【专利摘要】本申请提供了用于诊断对象中生长的方法和试剂盒，所述诊断通过提供取自对象的生长样品，通过免疫测定来确定所述样品中的中期因子或多效生长因子的水平，并且将从所述样品中确定的中期因子或多效生长因子水平与对照进行比较来实现。与所述对照比较，所述样品中升高的中期因子或多效生长因子水平是恶性生长的诊断依据，而与所述对照比较，所述样品中相等的或降低的中期因子或多效生长因子水平是良性生长的诊断依据。生长是指例如乳头状甲状腺癌(PTC)。
【IPC分类】G01N33/74, G01N33/543, G01N33/574
【公开号】CN104956224
【申请号】CN201380070622
【发明人】J·巴伦, Y·H·季
【申请人】美国政府卫生与公共服务部
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2013年11月15日
【公告号】EP2923203A1, US20150301057, WO2014081633A1