0. 5ym、0. 03ym粒度的A1203粉末上抛光成镜面。分别用2mol/LNa0H、（1+1)HN03、70%无水乙醇和二次水超声清洗， 处理后的电极室温晾干。将清洗好的裸玻碳电极、对电极（lcmXlcm的铂片电极)和参比电 极(饱和甘汞电极）放入0. 5111〇1/1^2304于-1. 2~+1. 6V范围内进行循环扫描至伏安图稳 定为止，活化电极，扫描速率为100mV/S。然后，将三电极放入含有6. 0X10 3m〇l/L3:2半胱 胺锌溶液的〇.lmol/L的氯化钾溶液中，在-1. 2~+1. 6V电位范围内，50mV/s循环扫描30 圈，制得CS-Zn/GCE修饰电极。
[0031]表征例: 利用循环伏安法制备3:2半胱胺锌/GCE修饰电极，图1为裸玻碳电极在6X10 3m〇l/L3:2半胱胺锌溶液的聚合循环伏安图（CVs)，图1显示，从初始电位-1. 2V开始以100mV/S 的扫描速率向1.6V扫描，第一圈出现氧化峰和还原峰，反向扫描时未见氧化还原峰。第二 圈开始只出现氧化峰，且随着扫描圈数的增加，曲线的电流变化值趋于稳定。由于3:2半胱 胺锌导电性能弱，随着扫描圈数的增加，聚合物膜电阻越来越大，聚合物薄膜的生长速率则 越来越小，当峰电流几乎不再变化，说明聚合物在电极表面不再生长。
[0032]检测例1: 修饰电极对铜离子的电化学反应： 研究过程中发现，修饰电极及裸玻碳电极在含有铜离子的缓冲溶液中并没有电化学响 应，而在0.lmol/L氯化钾溶液中两种修饰电极在-0. 5-0. 5V范围内存在电化学响应，两种 修饰电极和裸玻碳电极在氯化钾底液中的循环伏安曲线如图2所示。图2说明裸玻碳电极 在0.lmol/LKC1溶液中无电化学响应，而CS-Zn/GCE修饰电极在扫描电位范围内有氧化 峰，且存在电化学响应。
[0033]修饰电极对铜离子的检测： CS-Zn/GCE修饰电极对铜离子的检测： 移取40.OOmL的0.lmol/LKC1溶液到电解池中，采用精密移液管分别移取0. 02mL、 0. 08mL、0. 10mL、0. 14mL、0. 18mL、0. 20mL到电解池中，忽略体积变化，浓度分别为 5X10 5mol/L、2X10 4mol/L、2. 5X10 4mol/L、3. 5X10 4mol/L、4. 5X10 4mol/L、5X10 4mol/ L。CS-Zn/GCE修饰电极对不同浓度的铜离子的差分脉冲伏安曲线如图3所示。根据图3中 DPV曲线上响应电流随浓度变化而发生变化，得到其线性关系如图4所示。
[0034] 从图4可知，3:2半胱胺锌/GCE修饰电极对铜离子的响应电流与其浓度在一定范 围内呈线性关系，采用线性回归方法得其线性范围为0.01~0.5mmol/L，线性曲线关系为 I=-0. 1005C-1. 6E-5,相关系数为 0? 9863。
[0035] 检测例2: 修饰电极对赖氨酸铜的电化学反应： 通过研究修饰电极和裸玻碳电极在0.lmol/L氯化钾底液中对赖氨酸铜标准品的循环 伏安曲线表明（图5 )，修饰电极在赖氨酸铜标品溶液中并未响应，在一定范围内，修饰电极 能够通过测定饲料中游离铜离子，间接测定赖氨酸铜的螯合率。根据赖氨酸铜产品中游离 铜离子和总铜离子的测定值，计算螯合铜离子含量。
[0036]CS-Zn/GCE修饰电极对赖氨酸铜罄合率的检测 在相同实验条件下，取〇. 〇15g和0. 036g的赖氨酸铜产品的KC1溶液，多次测定样品1、2,各自的响应电流值Ip (1)、Ip (2)结果如表3、表4、图9和图10所示。通过表4中修饰 电极对赖氨酸铜产品的测定发现，修饰电极对赖氨酸铜溶液中游离铜离子的测定相对标准 偏差接近，测定的螯合率达到91. 78%和91. 93%。
[0037] 应用例： 将修饰电极用于水中的铜离子测试，图6、7、8分别为CS-Zn/GCE修饰电极对铜离子样 品1、2、3的DPV曲线；图9、10分别为CS-Zn/GCE修饰电极对赖氨酸铜样品1、2的DPV曲 线。
[0038] 表1-4为相应的测定结果： 表1铜离子RSD值测定
表格注释：例如表1中的"I=-〇. 1005C-1. 6E-5"为响应电流与浓度之间的拟合线性关 系，"1E-05" 代表 105。
【主权项】
1. 一种修饰电极的制备方法，其特征在于：包括步骤： 1) 将裸玻碳电极进行表面处理； 2) 将上步得到的电极、对电极、参比电极置于硫酸溶液中进行循环扫描至伏安图稳定 为止，活化电极； 3) 将该三电极再置于含有半胱胺螯合金属的溶液中，进行循环扫描，得到最终的修饰 电极。2. 根据权利要求1所述的一种修饰电极的制备方法，其特征在于：步骤1)中，表面处 理的方法为：打磨、抛光、清洗、干燥。3. 根据权利要求1所述的一种修饰电极的制备方法，其特征在于：步骤2)具体为：将 上步得到的电极、对电极、参比电极置于〇. 3-0. 8mol/L的硫酸溶液中进行循环扫描至伏安 图稳定为止，活化电极。4. 根据权利要求3所述的一种修饰电极的制备方法，其特征在于：扫描的范围 为-L 2~+1. 6V ;扫描的速率为80-120mv/s。5. 根据权利要求4所述的一种修饰电极的制备方法，其特征在于：步骤3)中，扫描的 圈数为25-35圈；扫描的速率为40-60mV/s。6. 根据权利要求1所述的一种修饰电极的制备方法，其特征在于：含有半胱胺螯合金 属的溶液为含有5X 10 3m〇l/L -8X 10 3m〇l/L半胱胺螯合锌与0. 08-0. 12mol/L KCl的溶 液。7. 根据权利要求6所述的一种修饰电极的制备方法，其特征在于：三电极系统置于含 有半胱胺螯合金属的溶液中进行循环扫描的圈数为25-35圈；扫描的速率为40-60mV/s。8. 权利要求1制备的修饰电极在铜离子及赖氨酸铜螯合率检测中的应用。
【专利摘要】本发明公开了修饰电极的制备方法与饲料添加剂赖氨酸铜中游离铜离子的测定应用，该制备方法，包括步骤：1）将裸玻碳电极进行表面处理；2）将上步得到的电极、对电极、参比电极置于硫酸溶液中进行循环扫描至伏安图稳定为止，活化电极；3）将三电极置于含有半胱氨螯合金属的溶液中，进行循环扫描，得到最终的修饰电极。也公开了修饰电极在铜离子及赖氨酸铜螯合率检测中的应用。本发明的制备方法简单，所制备的修饰电极用于铜离子和赖氨酸铜螯合率的检测，准确度高，检测方法简单，无需使用昂贵的仪器。
【IPC分类】G01N27/30, G01N27/48
【公开号】CN105004774
【申请号】CN201510404174
【发明人】舒绪刚, 周新华, 吴春丽, 吴信, 邱桂雄
【申请人】仲恺农业工程学院, 广州天科生物科技有限公司, 中国科学院亚热带农业生态研究所
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年7月10日