L，10支试管以1支空白管和一支标准管进行组合分为5组，分别在 35°C、45°C、55°C、65°C、75°C水浴反应1. 5h后，在696nm波长测定吸光度，以确定显色反应 的最佳温度；
[0031] (4)显色时间的确定
[0032] 用移液枪分别移取5份超纯水和5份没食子酸标准液，所述标准液的体积均为 0. 16mL，分别置于5支空白管和5支标准管中；向10支试管均加入超纯水和10%福林酚试 剂，所述超纯水和10%福林酚试剂的取样体积分别为〇. 8mL和0. 48mL;涡旋振荡，混匀静止 3min后向10支试管加入12%碳酸钠溶液，所述的碳酸钠溶液体积为0. 16mL，最后用超纯 水定容至4mL，10支试管以1支空白管和一支标准管进行组合分为5组，于45°C分别水浴 0. 5h、lh、l. 5h、2h、2. 5h后，在696nm波长测定吸光度，以确定显色反应完全所需最佳时间；
[0033] (5)没食子酸标准曲线的建立
[0034] 根据以上优化的检测体系建立标准曲线：用移液枪移取0yL、20yL、40yL、 60yL、80yL、100yL、120yL、140yL、160yL、180yL、200yL、220yL、240yL没食子酸 标准液于13支具塞试管中，向13支试管均加入超纯水和10%福林酚试剂，所述超纯水 和10%福林酚试剂的取样体积分别为0.81^、0.481^;涡旋振荡，混匀静止31^11后向13 支标准管加入12%碳酸钠溶液，所述的碳酸钠溶液体积为0. 16mL，最后用超纯水定容至 4mL，13支标准管于45°C水浴0. 5h后，在696nm波长处测定吸光度。分别以以吸光度值 和没食子酸浓度为纵、横坐标绘制标准曲线，并用最小二乘法得到拟合直线回归方程：y= 0. 0694x+0. 0019,R2= 0. 9996。
[0035] 所述的步骤（1)中优选地最佳测定波长为696nm;
[0036] 步骤（2)中优选地显色稳定剂和显色剂的最佳体积比为1:3,显色稳定剂最佳体 积为〇. 16mL，显色剂最佳体积为0. 48mL;
[0037] 步骤（3)中优选地最佳显色温度为45°C;
[0038] 步骤（4)优选地最佳显色时间为0? 5h;
[0039] 步骤（5)优选地，所述标准曲线测量的检测体系中多酚终浓度范围为0~6yg/ mL，确定试剂盒标准液的终浓度为4yg/mL。
[0040] 使用权利要求1和权利要求3所述的试剂盒进行饮品总多酚含量检测方法，其特 征在于测定步骤如下：
[0041] (1)用移液枪分别移取超纯水、标准液和液态待测样品，所述的超纯水、标准液和 待测样品的取样体积均为0. 16mL，分别置于试剂空白管、标准管和样品管中；
[0042] (2)在步骤（1)的试剂空白管、标准管和样品管中分别加入超纯水，所述的超纯水 取样体积为〇. 8mL;
[0043] (3)避光状态，在步骤（2)的试剂空白管、标准管和样品管中分别加入显色剂，所 述显色剂的取样体积为0. 48mL，涡旋振荡，室温下避光静置3min;
[0044] (4)避光状态，在步骤（3)的试剂空白管、标准管和样品管中分别加入显色稳定 剂，所述的显色稳定剂的取样体积均为〇. 16mL，3支管均用超纯水定容至4mL，所述的超纯 水的取样体积为2. 4mL，涡旋振荡充分混匀，45°C水浴30min后用紫外分光光度计或半自动 生化分析仪测定；
[0045] (5)取步骤（4)所得各管的混合液在半自动生化分析仪上测定，测定遵循以下顺 序：
[0046] a)在半自动生化分析仪上设定相关参数，波长（696nm)，温度（37°C)，延迟时间 (2s)，测量时间（2s)，试剂空白（要），标准值（4.0yg/mL)，吸入量（1000yL);
[0047] b)按半自动生化分析仪操作提示，依次吸入蒸馏水、试剂空白、标准液（定标）、样 品进行测定，直接读取屏幕上显示的数值，即试剂空白吸光值、标准液吸光值、系数、样品液 吸光值及样品液总多酚浓度；
[0048] (6)取步骤（4)所得各管的混合液用5mm比色皿在紫外分光光度计上测定，试剂空 白调零，测定标准液和样品液吸光度值，按以下公式计算测定结果： A样
[0049] 计算公式：CV# = -XC# A标
[0050] 其中C# :样品液浓度；A# :样品液吸光度；A# :标准液吸光度值；C# :标准液浓度 (已知）。
[0051] 有益效果：本发明试剂盒在紫外分光光度计和半自动生化分析仪的应用简单易 行、灵敏度高、无需制定标曲，大大缩短检测时间，尤以半自动生化分析仪的应用，可直观读 取检测结果，降低检测难度。
[0052] 本发明采用优化的Folio-Ciocalteu法，饮品样本与组合试剂在45°C水浴反应 0.5h后显色，降低了显色反应时间；该检测试剂盒构造简单，操作迅速简便、廉价、检测时 间短、灵敏度高，尤以在半自动生化分析仪上应用更为便捷，可直接读取样品的测定浓度， 检测结果直观性好；还可同时对多个饮品样本进行显色和检测，高效、准确、快捷，易于批量 检测。
【附图说明】
[0053] 下面结合附图，用本发明的实例来进一步阐述本发明。应当理解，这些实例仅用于 说明本发明而不是限制本发明的范围。
[0054] 图1为没食子酸标准液和茶多酚标准液的光谱吸收曲线；
[0055] 图2为12%碳酸钠用量对显色反应的影响；
[0056] 图3为10%福林酚含量对显色反应的影响；
[0057] 图4为温度对显色反应的影响；
[0058] 图5为时间对显色反应的影响；
[0059] 图6为没食子酸标准曲线。
【具体实施方式】
[0060] 下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于 此：
[0061] -种用于检测饮品总多酚含量的试剂盒，所述试剂盒包括：显色剂（氧化剂）、显 色稳定剂，标准液；
[0062] 其中所述显色剂（氧化剂）为福林酚试剂，体积浓度为10%;
[0063] 所述显色稳定剂为碳酸钠溶液，质量体积浓度为12% ;
[0064] 所述标准液为没食子酸溶液，质量浓度为0.lmg/mL。
[0065] -种饮品总多酚含量检测方法，包括以下步骤：
[0066] (1)用移液枪分别移取超纯水、标准液和液态待测样品，所述的超纯水、标准液和 待测样品的取样体积均为〇. 16mL，分别置于试剂空白管、标准管和样品管中；
[0067] (2)在步骤（1)的试剂空白管、标准管和样品管中分别加入超纯水，所述的超纯水 取样体积为〇. 8mL。
[0068] (3)避光状态，在步骤（2)的试剂空白管、标准管和样品管中分别加入显色剂，所 述的显色剂的取样体积为0. 48mL，涡旋振荡，室温下避光静置3min;
[0069] (4)避光状态，在步骤（3)的试剂空白管、标准管和样品管中分别加入显色稳定 剂，所述的显色稳定剂的取样体积均为〇. 16mL，3支管均用超纯水定容至4mL，所述的超纯 水的取样体积为2. 4mL，涡旋振荡充分混匀，45°C暗处水浴30min上机测定；
[0070] (5)取步骤（4)所得各管的混合液在半自动生化分析仪上测定，测定遵循以下顺 序：
[0071]a)在半自动生化分析仪上设定相关参数，波长（696nm)，温度（37°C)，延迟时间 (2s)，测量时间（2s)，试剂空白（要），标准值（4.0yg/mL)，吸入量（1000yL);
[0072] b)按半自动生化分析仪操作提示，依次吸入超纯水、试剂空白、标准液（定标）、样 品进行测定，直接读取屏幕上显示的数值，即试剂空白液吸光值、标准液的吸光值、系数、样 品液吸光值及样品液浓度。
[0073] (6)取步骤（4)所得各管的混合液用紫外分光光度计测定，用5mm比色皿上机测 定，试剂空白调零，测定标准液和样品液吸光度值，按以下公式计算测定结果：
[0074] 计算公式：
[0075] C# :样品管浓度；A# :样品管吸光度；Ae :标准管吸光度值；Ce :标准液浓度（已 知）。
[0076] 实施例1 :Folin_Ciocalteu检测体系的建立
[0077] 本实施例的组合试剂为标准液a、标准液b、显色剂、显色稳定剂；
[0078] 1、所用试剂的配置：
[0079] 标准液a的配置：分子天平称取5mg没食子酸标准品，溶于50mL