一种快速定量检测amh的试纸的制作方法
【专利说明】
【技术领域】
[0001]本实用新型属于临床医学诊断领域，具体涉及一种用于定量检测抗苗勒氏管激素(AMH)的试纸。
【【背景技术】】
[0002]抗苗勒氏管激素(AMH)是转化生长因子β超家族的成员之一，由两个相同的70kb亚基通过二硫键连接组成的二聚糖蛋白，相对分子质量为140X 103，主要由处于生长期卵泡中颗粒细胞所分泌。AMH在调控卵泡生长和发育，维持卵巢储备功能中发挥重要作用，是评估卵巢储备功能的客观准确指标。
[0003]而临床上主要是根据年龄、窦卵泡数目、滤泡刺激激素和雌激素水平等来评估卵巢功能。这些传统方法检查容易受到各种因素影响而产生误差，同时容易受到检测者主观判断而产生结果偏倚;此外，还受到月经周期的时限制约，且其检测数值根据月经周期的波动而波动，因而无法准确及时给予判断。此外还可以通过酶联免疫技术(ELISA)检测抗苗勒氏管激素(AMH)，但同样存在以下缺点:检测设备要求高，成本高;干扰因素较多，重复性不好;检测时间长。因此酶联免疫技术检测抗苗勒氏管激素(AMH)不适合临床快速诊断。
[0004]鉴于目前尚无快速的定量检测方法，本实用新型的目的是提供一种可用于快速定量检测抗苗勒氏管激素(AMH)的试纸以及一种可用于快速定量检测抗苗勒氏管激素(AMH)的试纸盒，所述试纸和试纸盒具有方便快捷、操作简单、结果准确等优点。
【【实用新型内容】】
[0005]本实用新型的一个目的是提供一种快速定量检测AMH的试纸，本实用新型所述快速定量检测AMH的试纸具有方便快捷、操作简单、结果准确等优点，适于临床快速诊断。
[0006]本实用新型的技术方案是:
[0007]—种用于定量检测AMH的试纸，包括支撑垫片I，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜2，所述硝酸纤维素膜的一端上方层叠连接吸水垫3，另一端上方层叠连接偶合物垫片4，所述偶合物垫片上方层叠连接样本垫片5，所述样本垫片另一端部的下方设有第一固定部件6，上方设有第二固定部件7，其特征在于，所述硝酸纤维素膜2中间部位设有检测线8并包被有AMH蛋白抗体，检测线两边分别设有控制线9，所述偶合物垫片4上涂布有金标记的AMH单克隆抗体或多克隆抗体以及控制线偶合物。
[0008]进一步地，所述控制线9包被有抗DNP抗体，所述控制线偶合物为DNP-BSA标记的胶体金。
[0009]进一步地，所述第一固定部件6为双面胶，第二固定部件7为单面胶。
[0010]进一步地，所述试纸外还包括一外壳10，所述外壳包裹所述试纸外，露出样本垫片
5、硝酸纤维素膜2上的检测线8和两条控制线9、以及吸水垫3。
[0011]所述外壳优选塑料外壳。
[0012]进一步地，所述两条控制线9与检测线8为平行设置。
[0013]本实用新型所述的试纸盒具有方便携带和贮存的优点。
[0014]本实用新型所述的快速定量检测AMH的试纸或试纸盒的工作原理是:采用双向侧流免疫反应原理，通过双抗体夹心法制备而成。检验时样本中的AMH抗原首先与偶合垫上的AMH抗体偶合物发生免疫反应，形成免疫复合物。其后免疫复合物随着样本在硝基纤维素膜上层析流动，当免疫复合物层析至硝基纤维素膜上的检测区(AMH检测线)时，与预先包被在硝基纤维素膜上的抗AMH抗体发生反应从而被固定在硝基纤维素膜的检测线上。血液中的AMH越多，检测线上的复合物越多，条带上的光密度值就越高。同时，在检测过程中，控制线偶合物(即DNP-BSA标记的胶体金)，也会随样本在硝基纤维素膜上层析，当层析至硝基纤维素膜的控制线时，DNP-BSA胶体金会与预先包被在硝基纤维素膜上的抗DNP抗体发生反应从而被固定在对照区(控制线)上。由于胶体金为红色，因而固定在硝基纤维素膜控制线上的抗DNP中的DNP-BSA胶体金免疫复合物将显示红色。当样本中不含AMH时，则只显示两条控制线。当样本含AMH时，检测线就会清晰的显示出来。
[0015]当反应结束后，利用多功能免疫检测仪(瑞莱生物工程(深圳)有限公司)将控制线和检测线的光密度进行分析，并将所分析得到的结果进行运算，从而得到相对光密度值(RI)。然后检测仪根据已预先设置在检测仪内的标准曲线对AMH的浓度进行计算并显示结果，以ng/mL为单位表示。
【【附图说明】】
[0016]图1是本实用新型所述快速定量检测AMH的试纸的一种优选实施方式的结构示意图。
[0017]其中，1:支撑垫片，2:硝酸纤维素膜，3:吸水垫，4:偶合物垫片，5:样本垫片，6:第一固定部件，7:第二固定部件，8:检测线，9:控制线。
[0018]图2是本实用新型所述快速定量检测AMH的试纸盒的一种优选实施方式的示图。
[0019]其中，3:吸水垫，5:样本垫片，8:检测线，9:控制线，10:外壳。
【【具体实施方式】】
[0020]以下结合附图对本实用新型所述快速定量检测AMH的试纸或试纸盒进行详细说明，不能理解为是对本实用新型的限制。以下实施例中所使用的材料和试剂除特别说明外，均为普通市售。
[0021 ]【实施例1】制备快速定量检测AMH的试纸
[0022]如图1所示的试纸结构，包括支撑垫片I，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜2，所述硝酸纤维素膜的一端上方层叠连接吸水垫3，另一端上方层叠连接偶合物垫片4，所述偶合物垫片远离硝酸纤维素膜2的一端上方层叠连接样本垫片5，所述样本垫片另一端部的下方粘接第一固定部件6，优选双面胶，上方粘接第二固定部件7，优选单面胶，其特征在于，所述硝酸纤维素膜2中间部位检测线8包被有AMH抗体，检测线两边分别设有控制线9，所述偶合物垫片4上涂布有金标记的AMH单克隆抗体以及控制线偶合物。
[0023]所述控制线9包被有抗DNP抗体，所述控制线偶合物为DNP-BSA标记的胶体金。
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