，分别为组1 :益智叶乙酸乙酯部位萃取物高剂量组（800 mg/kg b.w.)，组2 :益智叶 乙酸乙酯部位萃取物低剂量组（200 mg/kg b.w.)，组3 :益智叶正丁醇部位萃取物高剂量组 (800 mg/kg b.w.)，组4 :益智叶正丁醇部位萃取物低剂量组（200 mg/kg b.w.)，组5 :阳性 对照阿卡波糖组（75 mg/kg b.w.)、组6模型组（0. 5%CMC，0. 2 mL/10 g b.w.)，组7 :正常组 (0. 5%CMC,0. 2 mL/10 g b. w. )〇
[0027] 灌胃给药8天，每天观察小鼠的状态以及尿量和饮水量。第8天给药2 h后，眼内 眦取血，测餐后血糖(表2)。禁食不禁水10 h后，摘眼球取血，并处死解剖，分离肝脏。取出 的血，放于室温1 h后，离心，分离上清液，测空腹血糖值(表2)、总胆固醇TCH含量(表3)、 甘油三酯TG含量(表3)、丙二醛MDA含量(表4)以及超氧化物歧化酶S0D活力（表4)。取 出的肝脏，洗净，从肝大叶上剪取30 mg，用于测肝糖原含量(表5)。并且在给药的8天时间 里，每2天记录一次体重（图2)。
[0028] 实验结果 (1)对糖尿病小鼠血糖的影响
注：与空白组比较：#P〈〇. 05,，〈0. 01，_P〈0. 001 ;与模型组比较：*P〈0. 05,，〈0. 01， _P〈0. 001 ;与阿卡波糖比较：6P〈0. 05, 66P〈0. 01，666P〈0. 001 ;与造模后空腹血糖值比较： 'P〈0. 05，"P〈0. 01，WP〈0. 001。组1 :益智叶乙酸乙酯部位萃取物高剂量组，组2 :益智叶乙 酸乙酯部位萃取物低剂量组，组3 :益智叶正丁醇部位萃取物高剂量组，组4 :益智叶正丁醇 部位萃取物低剂量组，组5 :阳性对照阿卡波糖组，组6 :模型组，组7 :正常组。
[0029] 由表2看到，与组7比较，给药前空腹血糖值、给药后空腹血糖值及给药后餐后血 糖值中所有组均有极显著升高（P〈〇. 001)。剩余组与组6比较，给药前空腹血糖值中各组均 无显著性差异（P>〇. 05);给药后空腹血糖值中，组1、3、5非常显著性降低（P〈0. 01)，组2显 著性降低（P〈〇. 05)，组4无显著性差异（P>0. 05);给药后餐后血糖值中，只有组5有非常显 著性降低（P〈〇. 01)，其他组均无显著性差异（P>〇. 05)。组1、2、3、4与组5比较，给药前空 腹血糖值中，此4组均无显著性差异（P>0. 05);给药后空腹血糖值中，此4组均无显著性差 异（P>0. 05);给药后餐后血糖值中，此4组均有非常显著性升高（P〈0. 01)。给药后空腹血 糖值与给药前空腹血糖值比较，组1、3、5均有非常显著性降低（P〈0. 01)，组2有显著性降低 (P〈0. 05)，组4无显著性差异（P>0. 05)，组6有极显著升高（P〈0. 001)。
[0030] 由表2说明，阿卡波糖对糖尿病小鼠的餐后血糖有一定的治疗作用，而益智叶乙 酸乙酯部位萃取物高低剂量组、正丁醇部位萃取物高低剂量组对其餐后血糖效果不佳。经 过8天的给药后，除正丁醇部位萃取物低剂量组外，乙酸乙酯部位萃取物高低剂量组、正丁 醇部位萃取物高剂量组以及阿卡波糖组与给药前空腹血糖值相比，均能一定程度的降低糖 尿病小鼠空腹血糖值，且这4组组间无显著性差异（P>0. 05)，说明前三者对四氧嘧啶诱导 的糖尿病小鼠的降糖效果与阿卡波糖相当。
[0031] (2)对总胆固醇TCH含量、甘油三酯TG含量的影响
_P〈0. 001 ;与阿卡波糖比较：6P〈0. 05, 66P〈0. 01，666P〈0. 001 ;与造模后空腹血糖值比较： 'P〈0. 05，"P〈0. 01，WP〈0. 001。组1 :益智叶乙酸乙酯部位萃取物高剂量组，组2 :益智叶乙 酸乙酯部位萃取物低剂量组，组3 :益智叶正丁醇部位萃取物高剂量组，组4 :益智叶正丁醇 部位萃取物低剂量组，组5 :阳性对照阿卡波糖组，组6 :模型组，组7 :正常组。
[0032] 表3中，与组7比较，TCH中组6有极显著性升高（P〈0. 001)、TG中组6显著性升 高（P〈0. 05)，表明造成糖尿病小鼠血清中脂质代谢紊乱。剩下组与组6比较，组1、组5的 TCH含量显著性降低（P〈0. 05)，TG含量非常显著性降低（P〈0. 01);组2的TCH含量非常显 著性降低（P〈〇. 01)，TG含量显著性降低（P〈0. 05);组3的TCH、TG含量均非常显著性降低 (P〈0. 01);组4两种含量均无显著性差异（P>0. 05)。给药的5组之间比较，组间无显著性差 异（P>0. 05)。
[0033] 结果表明，除正丁醇部位萃取物低剂量组外，阳性对照药物阿卡波糖组、乙酸乙酯 部位萃取物高、低剂量组以及正丁醇部位萃取物高剂量组均能较好地降低小鼠血清中TCH、 TG含量，且此4组组间无显著性差异（P>0. 05)，说明这些部位萃取物能够使糖尿病机体的 脂质代谢紊乱症状得到改善。
[0034] (3)对丙二醛（MDA)含量和超氧化物歧化酶（S0D)活力的影响
注：与空白组比较：#P〈〇. 05, ##P〈0. 01，_P〈0. 001 ;与模型组比较：$〈0. 05,，〈0.01，_P〈0.001 ;与阿卡波糖比较：6P〈0. 05, 66P〈0. 01，666P〈0. 001;与造模后空腹血糖值比较： 'P〈0. 05，"P〈0. 01，WP〈0. 001。组1 :益智叶乙酸乙酯部位萃取物高剂量组，组2 :益智叶乙 酸乙酯部位萃取物低剂量组，组3 :益智叶正丁醇部位萃取物高剂量组，组4 :益智叶正丁醇 部位萃取物低剂量组，组5 :阳性对照阿卡波糖组，组6 :模型组，组7 :正常组。
[0035] 表4中，组6与组7比较，组6的MDA含量极显著升高（P〈0. 001)，S0D活性极显著 降低（P〈0. 001)，表明糖尿病小鼠血清中过氧化脂质代谢紊乱。给药组与组6比较，组1、组 3、组5中的MDA含量均极显著降低（P〈0. 001)，S0D活力均极显著升高（P〈0. 001);组2的 MDA含量极显著降低（P〈0. 001)，S0D活力非常显著升高（P〈0. 01);组4两项指标与组6的 比较，均无显著性差异（P>〇. 05)。给予萃取物的4组与组5比较，无显著性差异（P>0. 05)。
[0036] 表4表明，除正丁醇部位萃取物低剂量外，阳性对照药物阿卡波糖组、乙酸乙酯部 位萃取物高、低剂量组、正丁醇部位萃取物高剂量组均能较好地降低糖尿病小鼠血清MDA 含量，同时升高超氧化物歧化酶S0D活力。且效果最好的为正丁醇部位萃取物高剂量组，其 次为乙酸乙酯部位萃取物高剂量组和阿卡波糖组。这也说明这些部位萃取物可增强糖尿病 小鼠机体的抗氧化应急能力。
[0037] (4)体内对肝糖原含量的影响
注：与空白组比较：#P〈〇. 05, ##P〈0. 01，_P〈0. 001 ;与模型组比较：$〈0. 05,，〈0. 01， _P〈0. 001 ;与阿卡波糖比较：6P〈0. 05, 66P〈0. 01，666P〈0. 001 ;与造模后空腹血糖值比较： 'P〈0. 05，"P〈0. 01，WP〈0. 001。组1 :益智叶乙酸乙酯部位萃取物高剂量组，组2 :益智叶乙 酸乙酯部位萃取物低剂量组，组3 :益智叶正丁醇部位萃取物高剂量组，组4 :益智叶正丁醇 部位萃取物低剂量组，组5 :阳性对照阿卡波糖组，组6 :模型组，组7 :正常组。
[0038] 表5中，组6与组7比较，组6中的肝糖原含量极显著性降低（P〈0. 001)，表明糖尿 病小鼠的肝糖原含量下降明显。治疗组与组6比较，组1、组3非常显著性升高（P〈0. 01)，组 2、组5均极其显著性升高（P〈0. 001)，组4与组6比较肝糖原含量无显著性差异（P>0. 05)。 给予萃取物的4组与给予阿卡波糖的组5比较，组3有显著性降低（P〈0. 05)，组4有非常显 著性降低（P〈〇. 01)，组1和组2与组5比较无显著性差异（P>0. 05)。
[0039] 结果表明，除正丁醇部位萃取物低剂量组外，乙酸乙酯部位萃取物高剂量组、乙酸 乙酯部位萃取物低剂量组、正丁醇部位萃取物高剂量组及阿卡波糖组均能较好的促进血糖 转化为肝糖原，且阳性对照药物阿卡波糖效果最好。
[0040] (5)对小鼠体重的影响 由图2看到造模前各组小鼠体重无显著性差异，造模后糖尿病小鼠体重下降较多，第4 天开始灌胃给药，随着给药天数的增加，小鼠体重也在慢慢的回升，而模型组体重缓慢持续 下降，且空白组的小鼠体重一直持续上升。
【主权项】
1. 一种益智叶提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取益智叶，加入乙醇， 加热提取，提取的液体经浓缩干燥得乙醇总浸膏；将乙醇总浸膏分散于水中，依次用石油 醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各个萃取液挥干溶剂，分别得到石油醚部位萃取物、乙酸乙酯部 位萃取物和正丁醇部位萃取物。2. 如权利要求1所述的益智叶提取物的制备方法，其特征在于，乙醇的浓度为 60-75V%，加热提取时温度控制在50-60°C，提取3次，每次l-3h。3. 根据权利要求1或2所述制备方法制得的益智叶提取物，为益智叶的石油醚部位萃 取物、乙酸乙酯部位萃取物和/或正丁醇部位萃取物。4. 权利要求3所述的益智叶提取物在制备预防、治疗糖尿病药物或保健品方面的应 用。
【专利摘要】本发明属于植物提取技术领域，具体涉及一种益智叶提取物及其制备方法、应用。该益智叶提取物采用以下步骤获得：取益智叶，加入乙醇，加热提取，提取的液体经浓缩干燥得乙醇总浸膏；将乙醇总浸膏分散于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各个萃取液挥干溶剂，分别得到石油醚部位萃取物、乙酸乙酯部位萃取物和正丁醇部位萃取物。本发明经过体外结合体内实验，说明益智叶提取物在体外和体内均有一定降糖作用。
【IPC分类】A23L1/29, A61P3/10, A61K127/00, A61K36/9062
【公开号】CN105012826
【申请号】CN201510425389
【发明人】康文艺, 魏金凤, 朱晓娣, 何楠, 余琦
【申请人】河南大学
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2015年7月20日