含有芽孢杆菌的菌剂及应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了含有解淀粉芽孢杆菌（bacillusamyloliquefaciens）的菌剂及其制备方法,涉及微生物领域。该菌剂中水含量不高于35%，是将芽孢杆菌发酵液用载体吸附后制得的。本发明菌剂兼有有机肥、微生物肥的优点，能提高肥料利用率，增加土壤有机质，促进作物根际微生物繁殖，改善土壤的理化性质和生物活性，为作物的生长提供全面、均衡的营养，并能预防和降低土传病害的发生，使作物的产量和品质得到显著提升。
【专利说明】含有芽孢杆菌的菌剂及应用
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明涉及微生物领域，更具体地说是涉及到一种芽孢杆菌(如amyloliquefaciens )的菌剂及应用。
【背景技术】
[0003]随着化肥的大量使用，其利用率不断降低、土壤板结及盐溃化已是众所周知的事实。这说明，仅靠大量增施化肥来提高作物产量及品质是有限的，更何况还有污染环境等一系列的问题。为此各国的科研工作者一直在努力探索各种方法以解决上述弊端。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供含有芽孢杆菌活菌的菌剂，该菌剂兼有有机肥、微生物肥的优点，能提高肥料利用率，增加土壤有机质，促进作物根际微生物繁殖，改善土壤的理化性质和生物活性，为作物的生长提供全面、均衡的营养，并能预防和降低土传病害的发生，使作物的产量和品质得到显著提升。
[0005]本发明的另一目的是提供上述菌剂用于农作物栽培时的肥料或基质方面的应用。
[0006]本发明的目的采用如下技术方案实现。
[0007]含有芽孢杆菌的菌剂，水含量不高于35%，是将芽孢杆菌发酵液用载体吸附后制得的。
[0008]所述芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌amyloli quefaci ens ) K_8,其微生物保藏号为 CGMCC N0.6486。
[0009]所述芽孢杆菌发酵液与载体的质量比为(I~50): 100。
[0010]芽孢杆菌发酵液的活菌含量不低于I X 107cfu/mL,芽孢率高于10%。
[0011 ] 所述发酵液是将解淀粉芽孢杆菌{bacillus amyloli quefaci ens )K_8接种发酵培养基培养后获得的；所述发酵培养基含有下述成分:葡萄糖5~10g/L,糖蜜10~30g/L,蚕蛹粉5~10g/L，玉米浆5~20g/L，氯化钠10~20g/L，碳酸钙I~10g/L，硫酸镁0.1~lg/L，硫酸锰 0.01 ~0.lg/L，氯化亚铁 0.02 ~0.08g/L, ρΗ7.0 ~7.5。
[0012]选择稻壳、锯末、麦壳中一种物质，过筛，得到所述载体；或者选择稻壳、锯末、麦壳中两种以上物质混合均匀，过筛，得到所述载体。
[0013]所述筛的筛孔直径为I~5mm。
[0014]所述载体还可以采用如下方法制备:选择稻壳、锯末、麦壳、树叶、杂草和秸杆中的一种或两种以上物质作为基质；在所述基质中添加米糠、酒糟、玉米粉或麸皮，接种复合菌剂，得到发酵床；将发酵床平铺在猪圈中，进猪饲养，得到所述载体。
[0015]所述菌剂用于农作物栽培时的肥料或基质方面的应用。
[0016]解淀粉芽抱杆菌amyloliquefaci ens) K-8 已于 2012 年 08 月 28 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCCJia:北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，其保藏号为CGMCC N0.6486。
[0017]有益效果:
本发明含有芽孢杆菌的菌剂兼有有机肥、微生物肥的优点，该菌剂不仅含有解淀粉芽孢杆菌(Mcillus还含有其发酵过程中的代谢物,能够显著提高
农作物产量和品质。本发明含有芽孢杆菌的菌剂中芽孢含量很高，对高温、紫外线、干燥、电离辐射和很多有毒的化学物质都有很强的抗性，在加工过程中菌体存活率高，获得的制剂活芽孢含量高、货架期长、产品质量稳定。如果，采用发酵床载体，那么菌剂中还含有光合菌、乳酸菌、酵母菌、放线菌、双歧杆菌、解磷解钾菌等其它有益微生物，以及发酵床腐熟和发酵后产生的糖类、蛋白质、有机酸、氨基酸、维生素、微量元素、N、P、K等物质。
[0018]本发明菌剂用作农作物栽培时的肥料或基质作物肥料时，增加土壤有机质，促进作物根际微生物繁殖，改善土壤的理化性质和生物活性，为作物的生长提供全面、均衡的营养，而且生物利用率高，能预防和降低土传病害的发生，使作物的产量和品质得到显著提升，降低成本、减少污染。
【具体实施方式】
[0019]以下结合实施例对本发明作进一步的说明。
[0020]本发明培养基中使用的溶剂为水，通气比是指每分钟通气量(m3)与发酵液体积Cm3)之比。
[0021]实施例1 本实施例介绍了采用稻壳、锯末、麦壳作为载体制备含有解淀粉芽孢杆菌(如amyloli quefaci ens ) K-8 的活菌制剂。解淀粉芽抱杆菌(bad Ilus amyloli quefaci ens )K-8缩写为菌株Κ-8。
[0022]1、稻壳、锯末、麦壳作为载体
选择新鲜、无霉变、无团块、无虫、疏松干燥的稻壳或麦壳作为原材料，机械粉碎后过孔径为2mm的振动筛,得到稻壳或麦壳载体。
[0023]选用新鲜、无霉变、无团块、无虫、疏松干燥的锯末直接过孔径为2mm的振动筛，得到锯末载体。
[0024]上述载体可以单独使用，也可以混合使用。本实施例1中是单独使用。
[0025]2、菌株K-8发酵液的制备 菌株K-8发酵液的制备如下:
(I)一级种子液制备:挑取LB固体培养基上的菌株K-8单菌落接种于一级种子摇瓶中，在30°C、150r/min下培养24h，得到一级种子液。一级种子摇瓶体积为250mL，LB液态培养基的装液量50ml。
[0026](2) 二级种子液制备:二级种子液培养基配方(g/L)为:葡萄糖25、蔗糖25、蛋白粉10、酵母粉15、磷酸二氢钾0.5、硫酸锰0.05。将一级种子液接入二级种子液培养基中，接种量为2% (V/V)，得到二级种子液。培养条件为:通气比为1:1，搅拌转速为200r/min，培养温度30°C，罐压0.01MPa，培养时间为18h_20h。
[0027](3)菌株K-8发酵液的制备:发酵培养基成分及含量:葡萄糖5g/L、糖蜜20g/L，蚕蛹粉5g/L、玉米浆15g/L，氯化钠15g/L，碳酸钙 5g/L，硫酸镁 0.5g/L，硫酸锰 0.05g/L，氯化亚铁 0.04g/L, pH7.0 ~7.5。
[0028]培养工艺:发酵罐装液量75%，接种量2%(V/V)，转速150r/min，罐压0.01Mpa0培养时间Oh~8h，控制气液比为0.5:1，温度28 V ;培养时间8h~24h，控制气液比为1:1,温度300C ;培养时间24h以后，控制气液比为0.8:1，温度32。。。
[0029]培养过程中，发酵液中的活菌含量及芽孢含量如表1所不。培养时间为28h_32h,收获发酵液，该发酵液含有发酵代谢产物，菌株K-8活菌含量为69.3~72.8X 108cfu/mL，芽孢率不低于90%。
[0030]表1发酵液中的活菌含量及芽孢含量
【权利要求】
1.一种含有芽孢杆菌的菌剂，其特征在于:该菌剂中水含量不高于35%，是将芽孢杆菌发酵液用载体吸附后制得的。
2.根据权利要求1所述含有芽孢杆菌的菌剂，其特征在于:所述芽孢杆菌为解淀粉芽抱杆菌K-8,其微生物保藏号为 CGMCC N0.6486。
3.根据权利要求2所述含有芽孢杆菌的菌剂，其特征在于:所述芽孢杆菌发酵液与载体的质量比为(I~50):100ο
4.根据权利要求3所述含有芽孢杆菌的菌剂，其特征在于:芽孢杆菌发酵液的活菌含量不低于I X 107cfu/mL,芽孢率高于10%。
5.根据权利要求4所述含有芽孢杆菌的菌剂，其特征在于:所述发酵液是将解淀粉芽孢杆菌amyloliquefaciens) K-8接种发酵培养基培养后获得的；所述发酵培养基含有下述成分:葡萄糖5~10g/L,糖蜜10~30g/L,蚕蛹粉5~10g/L,玉米衆5~20g/L，氯化钠10~20g/L，碳酸钙I~10g/L，硫酸镁0.1~lg/L，硫酸锰0.01~0.lg/L，氯化亚铁 0.02 ~0.08g/L, ρΗ7.0 ~7.5。
6.根据权利要求1-5之一所述含有芽孢杆菌的菌剂,其特征在于:选择稻壳、锯末、麦壳中一种物质，过筛，得到所述载体；或者选择稻壳、锯末、麦壳中两种以上物质混合均匀，过筛，得到所述载体。
7.根据权利要求6所述含有芽孢杆菌的菌剂，其特征在于:所述筛的筛孔直径为I~5mm ο
8.根据权利要求1-5之一所述含有芽孢杆菌的菌剂，其特征在于所述载体采用如下方法制备:选择稻壳、锯末、麦壳、树叶、杂草和稻杆中的一种或两种以上物质作为基质；在所述基质中添加米糠、酒糟、玉米粉或麸皮，接种复合菌剂，得到发酵床；将发酵床平铺在猪圈中，进猪饲养，得到所述载体。
9.权利要求1所述菌剂用于农作物栽培时的肥料或基质方面的应用。
【文档编号】C05F11/08GK103626532SQ201310607764
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年11月27日 优先权日:2013年11月27日
【发明者】李际军, 魏鸿刚, 王 琦, 温学标, 赵福兵 申请人:江苏苏滨生物农化有限公司