一种蚂蚁花组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种蚂蚁花组织培养的快速繁殖方法，包括茎段的消毒、芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、炼苗移栽等步骤。本发明对蚂蚁花进行了组培再生体系的系列试验，意在迅速推广蚂蚁花优良种苗，也为蚂蚁花优良基因资源的保存与开发利用提供理论依据。
【专利说明】 一种蚂蚁花组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及植物组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]蚂蚁花，nepalensis Hook, f.，野牡丹科，直立亚灌木或灌木，叶片坚纸质，长圆状披针形或卵状披针形，顶端渐尖，基部心形至钝，长(5-) 7-13厘米，宽(1.5~)
2.5-3.8厘米，全缘，具缘毛，两面密被糙伏毛，基出脉5，叶柄极短，长1-4毫米，密被毛，产滇东南至滇西南，海拔550-1900米的开朗山坡草地、灌木丛边，路旁及田边’亦见于疏林缘、溪边湿润的地方，林中少见，此外，喜马拉雅?脉东部至泰国均有。蚂蚁花性味苦、涩、性凉。功能主治:清热利湿、消肿、主湿热黄疸、泻痢、外伤瘀肿。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是蚂蚁花组织培养的快速繁殖方法，本发明对蚂蚁花进行了组培再生体系的系列试验，意在迅速推广蚂蚁花优良种苗，也为蚂蚁花优良基因资源的保存与开发利用提供理论依据。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案:
取蚂蚁花的茎段，先用洗涤灵和次氯酸钠混合洗涤液清洗，再用自来水冲洗干净，将洗好的枝条剪成2-3cm长的带腋芽茎段，先用75%酒精处理30s，再在0.1%的氯化汞浸泡12min,期间不断摇晃，最后用无菌水冲洗4次，每次lmin，消毒处理过的蚂蚁花茎段接入培养基为SH+NAA0.15mg/L+6-BAl.5mg/L的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照 23001χ，光期 8h/d，温度 27土 TC，诱导出来的芽接入 SH+6-BA2.5mg/L+NAA0.25mg/l培养基中进行丛生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照35001x，光期 10h/d，温度 27 土 1°C，增殖后的芽苗接入 MS+BR1.0-1.5mg/L+IAA0.1-0.2mg/L的生根培养基中进行生根诱导，附加蔗糖60g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照65001x，光期18h/d，温度27 ± I °C，将生根数超过5条的组培苗松盖5d，开盖4d，炼苗结束后移栽至珍珠岩:黄沙=1: I的基质中，移栽时用塑料膜覆盖，保持温度25°C，湿度90%。
[0005]采用本发明制备的蚂蚁花成活率高，利用率大，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取蚂蚁花的茎段，先用洗涤灵和次氯酸钠混合洗涤液清洗，再用自来水冲洗干净，将洗好的枝条剪成2-3cm长的带腋芽茎段，先用75%酒精处理30s，再在0.1%的氯化汞浸泡12min,期间不断摇晃，最后用无菌水冲洗4次，每次lmin，消毒处理过的蚂蚁花茎段接入培养基为SH+NAA0.15mg/L+6-BAl.5mg/L的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照 23001χ，光期 8h/d，温度 27 土 1°C，诱导出来的芽接入 SH+6-BA2.5mg/L+NAA0.25mg/l培养基中进行丛生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照35001x,光期10h/d，温度27 土 1°C，增殖后的芽苗接入MS+BR1.0mg/L+IAA0.lmg/L的生根培养基中进行生根诱导，附加蔗糖60g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照65001x，光期18h/d，温度27土 1°C，将生根数超过5条的组培苗松盖5d，开盖4d，炼苗结束后移栽至珍珠岩:黄沙=1: I的基质中，移栽时用塑料膜覆盖，保持温度25°C，湿度90%，成活率88%。
[0008]实施例2
取蚂蚁花的茎段，先用洗涤灵和次氯酸钠混合洗涤液清洗，再用自来水冲洗干净，将洗好的枝条剪成2-3cm长的带腋芽茎段，先用75%酒精处理30s，再在0.1%的氯化汞浸泡12min,期间不断摇晃，最后用无菌水冲洗4次，每次lmin，消毒处理过的蚂蚁花茎段接入培养基为SH+NAA0.15mg/L+6-BAl.5mg/L的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照 23001χ，光期 8h/d，温度 27土 1°C，诱导出来的芽接入 SH+6-BA2.5mg/L+NAA0.25mg/l培养基中进行丛生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照35001x，光期10h/d，温度27土 1°C，增殖后的芽苗接入MS+BR1.5mg/L+IAA0.2mg/L的生根培养基中进行生根诱导，附加蔗糖60g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照65001x，光期18h/d，温度27 土 1°C，将生根数超过5条的组培苗松盖5d，开盖4d，炼苗结束后移栽至珍珠岩:黄沙=1: I的基质中，移栽时用塑料膜覆盖，保持温度25°C，湿度90%，成活率89%。
[0009]实施例3
取蚂蚁花的茎段，先用洗涤灵和次氯酸钠混合洗涤液清洗，再用自来水冲洗干净，将洗好的枝条剪成2-3cm长的带腋芽茎段，先用75%酒精处理30s，再在0.1%的氯化汞浸泡12min,期间不断摇晃，最后用无菌水冲洗4次，每次lmin，消毒处理过的蚂蚁花茎段接入培养基为SH+NAA0.15mg/L+6-BAl.5mg/L的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照 23001χ，光期 8h/d，温度 27土 TC，诱导出来的芽接入 SH+6-BA2.5mg/L+NAA0.25mg/l培养基中进行丛生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照35001x，光期10h/d，温度27土1°C，增殖后的芽苗接入MS+BR1.5mg/L+IAA0.lmg/L的生根培养基中进行生根诱导，附加蔗糖60g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照65001x，光期18h/d，温度27 土 1°C，将生根数超过5条的组培苗松盖5d，开盖4d，炼苗结束后移栽至珍珠岩:黄沙=1: I的基质中，移栽时用塑料膜覆盖，保持温度25°C，湿度90%，成活率92%。
【权利要求】
1.一种蚂蚁花组织培养的快速繁殖方法，包括茎段的消毒、芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、炼苗移栽其主要步骤如下: (1)取蚂蚁花成熟的种子，对其进行消毒处理； (2)将步骤(I)消毒处理过的蚂蚁花茎段接入培养基为SH+NAA0.15mg/L+6-BAl.5mg/L的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照23001x，光期8h/d，温度 27±1°C ； (3)取步骤(2)诱导出来的芽接入SH+6-BA2.5mg/L+NAA0.25mg/l培养基中进行丛生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照35001χ，光期10h/d，温度27 +TC ； (4)取步骤(3)增殖后的芽苗接入MS+BR1.0-1.5mg/L+IAA0.1-0.2mg/L的生根培养基中进行生根诱导，附加蔗糖60g/L,琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照65001χ,光期18h/d，温度27±1。。； (5)取步骤(4)生根数超过5条的组培苗进行炼苗移栽。
2.按照权利要求1所述的一种蚂蚁花组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述蚂蚁花无菌茎段的获得为，取蚂蚁花的茎段，先用洗涤灵和次氯酸钠混合洗涤液清洗，再用自来水冲洗干净，将洗好的枝条剪成2-3cm长的带腋芽茎段，先用75%酒精处理30s,再在0.1%的氯化萊浸泡12min,期间不断摇晃,最后用无菌水冲洗4次,每次lmin。
3.按照权利要求1所述的一种蚂蚁花组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(5)中移栽的方法为将生根数超过5条的组培苗松盖5d,开盖4d,炼苗结束后移栽至珍珠岩:黄沙=1: I的基质中，移栽时用塑料膜覆盖，保持温度25°C，湿度90%。
【文档编号】A01H4/00GK104285798SQ201410550336
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司