本发明涉及植物组织培养技术领域,尤其是一种天麻的组培快繁方法。
背景技术:
天麻,学名为Gastrodia elata Bl.,又名赤箭、独摇芝、离母、合离草、神草、鬼督邮、木浦、明天麻、定风草、白龙皮等,是兰科天麻属多年生草本植物。根状茎肥厚,无绿叶,蒴果倒卵状椭圆形,常以块茎或种子繁殖,其根茎入药用以治疗头晕目眩、肢体麻木、小儿惊风等症,是名贵中药,与琼珍灵芝合用治疗头痛失眠。
天麻的繁殖方式主要为块茎繁殖、种子繁殖,生产上一般采用块茎繁殖。
但块茎繁殖效率很低,难以满足天麻植物规模化生产的需求。
技术实现要素:
本发明的目的是提供一种天麻的组培快繁方法,这种方法可以解决繁殖率低的问题。
为了解决上述问题,本发明采用的技术方案是:
这种天麻的组培快繁方法,其特征在于包括以下步骤:
A、配置培养基:包括愈伤组织诱导培养基、分化培养基、生根壮苗培养基;
愈伤组织诱导培养基是以MS培养基为基本培养基,添加0.3毫克/升~0.5毫克/升2,4-二氯苯氧醋酸、5克/升~10克/升香蕉汁、1克/升~2克/升壳聚糖;
分化培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升~0.3毫克/升赤霉素、0.1毫克/升~0.2毫克/升萘乙酸、2克/升~5克/升活性炭、3克/升~6克/升黄瓜汁;
生根壮苗培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.3毫克/升~0.5毫克/升萘乙酸、0.1毫克/升~0.3毫克/升天冬氨酸、0.3毫克/升~0.45毫克/升半胱氨酸0.2毫克/升~0.25毫克/升柠檬酸;
B、选取天麻腋芽作为外植体,将所述腋芽浸泡于浓度为1%的次氯酸钠溶液中浸泡10分钟~20分钟,用无菌水清洗3次~5次;
C、接种于愈伤组织诱导培养基,控制光照为1600LUX~1900LUX,温度为23℃~25℃,培养至产生愈伤组织;
D、接种于分化培养基,控制光照为1700LUX~1900LUX,温度为22℃~26℃,培养至产生原球茎;
E、接种于生根壮苗培养基,控制光照为1500LUX~1780LUX,温度为22℃~26℃,培养至长出3~5片叶子,并且苗高3厘米~5厘米;
F、炼苗培养,移栽入大田。
由于采用了上述技术方案,本发明与现有技术相比具有如下有益效果:
本发明以腋芽作为外植体进行快速繁殖,培养周期短,生根壮苗率高达92.5%;可大规模繁殖天麻苗,具有广阔的应用前景。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详述:
实施例1
本实施例天麻的组培快繁方法包括以下步骤:
选取天麻腋芽作为外植体,将所述腋芽浸泡于浓度为1%的次氯酸钠溶液中浸泡10分钟,用无菌水清洗4次;接种于愈伤组织诱导培养基,控制光照为1600LUX~1650LUX,温度为23℃~25℃,培养至产生愈伤组织;接种于分化培养基,控制光照为1790LUX~1830LUX,温度为22℃~26℃,培养至产生原球茎;接种于生根壮苗培养基,控制光照为1500LUX~1523LUX,温度为22℃~26℃,培养至长出3片叶子,并且苗高4厘米;炼苗培养,移栽入大田。
愈伤组织诱导培养基是以MS培养基为基本培养基,添加0.3毫克/升2,4-二氯苯氧醋酸、7.5克/升香蕉汁、1克/升壳聚糖;
分化培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升赤霉素、0.1毫克/升萘乙酸、4克/升活性炭、3克/升黄瓜汁;
生根壮苗培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.5毫克/升萘乙酸、0.1毫克/升天冬氨酸、0.45毫克/升半胱氨酸、0.23毫克/升柠檬酸。
采用本实施例方法培养天麻,生根壮苗率为91.8%。
实施例2
本实施例天麻的组培快繁方法包括以下步骤:
选取天麻腋芽作为外植体,将所述腋芽浸泡于浓度为1%的次氯酸钠溶液中浸泡15分钟,用无菌水清洗5次;接种于愈伤组织诱导培养基,控制光照为1780LUX~1815LUX,温度为23℃~25℃,培养至产生愈伤组织;接种于分化培养基,控制光照为1700LUX~1715LUX,温度为22℃~26℃,培养至产生原球茎;接种于生根壮苗培养基,控制光照为1765LUX~1780LUX,温度为22℃~26℃,培养至长出4片叶子,并且苗高5厘米;炼苗培养,移栽入大田。
愈伤组织诱导培养基是以MS培养基为基本培养基,添加0.4毫克/升2,4-二氯苯氧醋酸、10克/升香蕉汁、1.5克/升壳聚糖;
分化培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.3毫克/升赤霉素、0.15毫克/升萘乙酸、4克/升活性炭、5克/升黄瓜汁;
生根壮苗培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.3毫克/升萘乙酸、0.2毫克/升天冬氨酸、0.4毫克/升半胱氨酸、0.25毫克/升柠檬酸。
采用本实施例方法培养天麻,生根壮苗率为92.5%。
实施例3
本实施例天麻的组培快繁方法包括以下步骤:
选取天麻腋芽作为外植体,将所述腋芽浸泡于浓度为1%的次氯酸钠溶液中浸泡20分钟,用无菌水清洗3次;接种于愈伤组织诱导培养基,控制光照为1860LUX~1900LUX,温度为23℃~25℃,培养至产生愈伤组织;接种于分化培养基,控制光照为1870LUX~1900LUX,温度为22℃~26℃,培养至产生原球茎;接种于生根壮苗培养基,控制光照为1500LUX~1520LUX,温度为22℃~26℃,培养至长出5片叶子,并且苗高3厘米;炼苗培养,移栽入大田。
愈伤组织诱导培养基是以MS培养基为基本培养基,添加0.5毫克/升2,4-二氯苯氧醋酸、5克/升香蕉汁、2克/升壳聚糖;
分化培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.25毫克/升赤霉素、0.2毫克/升萘乙酸、2克/升活性炭、6克/升黄瓜汁;
生根壮苗培养基以1/2MS培养基为基本培养基,添加0.4毫克/升萘乙酸、0.3毫克/升天冬氨酸、0.3毫克/升半胱氨酸、0.2毫克/升柠檬酸。
采用本实施例方法培养天麻,生根壮苗率为92.2%。