专利名称：一种蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂、其制备方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂、其制备方法及其在制备治疗和预防糖尿病、肥胖症及癌症的药物组合物中的应用。
背景技术：
蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTPs)是一类信号传导酶，它们通过调节细胞内酪氨酸的磷酸化水平来控制细胞的成长、分化、代谢；细胞迁移、基因转录、离子通道开闭、免疫反应、细胞凋亡以及成骨发育也受到PTPs的调控。PTPs紊乱可导致多种疾病，如癌症、糖尿病、肥胖症和骨质疏松症。在人类基因组中，迄今为止发现有130余种基因编码PTP，这些高特异性PTP不仅与癌抑制和发生的信号通路相关，而且它们的功能异常可直接导致人类不同疾病的发生。与疾病发生相关的的PTP作用机制及其抑制剂的筛选，一直是国内外研究的热点。PTPases包括一大家庭跨膜(受体型)和胞内(非受体型)酶，参与调控一系列重要生命过程。有几种PTPases可能在胰岛素通路中受体或受体后环节影响胰岛素影响作用。目前研究主要集中在SHP-2和PTP1B。PTPlB是第一个被成功分离的蛋白质酪氨酸磷酸酶。该酶为一个37KD的胞内酶，通过含有35个氨基酸残基的C末端被定位于细胞内质网上，在第215位的Cys是PTPBl的催化活性中心。研究表明，PTPlB通过胰岛素受体(Insulin Receptor, IR)和胰岛素受体底物(Insulin Receptor Substrate, IRS),来阻断胰岛素信号转导通路,最终影响血液中匍萄糖向细胞内的转运，表现出血糖升闻的现象另外。另外考虑到PTPlB基因敲除的小鼠对肥胖症具有免疫性，所以可以肯定PTPlB在肥胖症的发病过程中起着重要的作用。故而PTPlB是开发新抗糖尿病和肥胖药物的作用靶点。蛋白酪氨酸憐酸酶SHP2[Src homology 2(SH2)domain containingphosphotyrosinephosphatase 2, SHP2]是一种由PTPNll基因编码，细胞质内广泛表达的非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)。SHP2通过参与多种细胞内讯息传递如MAPkinase、Jak-Stat及PI3kinase等途径，在细胞的增殖及分化等过程起重要作用。PTPNll被确定为原癌基因，也是许多其他原癌基因信号通路的重要组成部分，因此，SHP2作为治疗Noonan综合症、幼年型粒单核细胞白血病等，以及其他可能相关肿瘤疾病的潜在药物靶点。迄今，现有技术中尚没有关于从玫烟色棒束孢发酵产物中提取蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂的报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种新的蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂、其制备方法及其在制备治疗和预防糖尿病、肥胖症及癌症的药物组合物中的应用。为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案如下。一种蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂，是如下(a)或(b)、
(a)、具有如下结构式的化合物；
权利要求
1.一种蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂，是如下(a)或(b) (a)、具有如下结构式的化合物；
2.根据权利要求I所述的蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂，其特征在于其药用衍生物为药用盐，此药用盐为保持所述(a)的生物有效性且由非毒性的有机酸、无机酸、有机碱或无机碱形成的药学常用酸加成盐或碱加成盐。
3.根据权利要求2所述的蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂，其特征在于制备所述酸加成盐所用的无机酸为盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸或硝酸，制备所述酸加成盐 所用的有机酸为对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、苹果酸、虎珀酸、乳酸、富马酸；制备所述碱加成盐所用的碱性制剂为铵、钾、钠或季铵氢氧化物。
4.根据权利要求I所述的蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂，其特征在于其药用衍生物的形式为酯、醚衍生物，或者为通过双键的氧化引入醛、酸或醇功能基；或者为在环内引入磺酸基；或者为通过Witting反应引入含有4-10个碳的链。
5.根据权利要求4所述的蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂，其特征在于通过Witting反应引入的链中携带OR^NR2R3或卤素，其中R1H为H或含有1-5个碳的烷基，卤素为F、Cl.Br 或 I。
6.权利要求I所述蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂的制备方法，其特征在于虫生真菌玫烟色棒束孢固体或液体发酵液用乙酸乙酯、乙醇、甲醇或氯仿甲醇混合溶剂提取，所得提取物用硅胶柱层析分离，所得玫烟菌素即为权利要求I中的蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂(a)。
7.权利要求6所述蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂的制备方法其特征步骤在于 A、发酵培养将所述玫烟色棒束孢菌株以接种针接种至改良马铃薯葡萄糖培养基中，260C，150rpm摇床培养7天，得种子液；将种子液接种至大米培养基，26°C光照培养30天，得发酵物；其中，所述改良马铃薯葡萄糖培养基的配方为200重量份的去皮土豆、20重量份的的葡萄糖、3重量份的KH2PO4U. 5重量份的MgS04、0. I重量份的柠檬酸、O. 01重量份的维生素B1，溶于1000重量份的无菌水，pH 6. 5，121°C灭菌20min，即得；所述大米培养基的配方为80重量份的大米、100重量份的无菌水，浸泡12h，pH自然，121°C灭菌30min，即得； B:提取分离发酵物用等体积的乙酸乙酯室温下浸泡提取48h，用旋转蒸发仪45°C减压蒸馏至干，得浸膏样品，将此浸膏样品与I. 2倍重、100目 200目的硅胶充分搅拌混合，干燥，研磨均匀成粉末状，使浸膏样品充分吸附于硅胶颗粒上，然后进行常压硅胶柱层析，硅胶柱规格为300目 400目，用石油醚/乙酸乙酯系统梯度洗脱，梯度洗脱的 流程为 100:0, 95:5,90:10,80:20，60:40，50:50，v/v，收集洗脱液，45 °C 减压蒸馏，浓缩 后用有机溶剂洗涤；在上述石油醚/乙酸乙酯的80 20洗脱段得到的组分进一步进行上述常压硅胶柱层析，并再次用石油醚/乙酸乙酯系统梯度洗脱，梯度洗脱的流程为100:0, 50:1,20:1, 15:1, 10:1,5:1, v/v，收集洗脱液，45°C减压蒸馏，在5:1洗脱段得到玫烟菌素，即为权利要求I中的蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂(a)。
8.权利要求6所述蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂的制备方法其特征步骤在于 A、发酵培养将所述玫烟色棒束孢菌株以接种针接种至改良马铃薯葡萄糖培养基中，260C，150rpm摇床培养7天，得种子液；将种子液接种至大米培养基，26°C光照培养30天，得发酵物；其中，所述改良马铃薯葡萄糖培养基的配方为200重量份的去皮土豆、20重量份的的葡萄糖、3重量份的KH2PO4U. 5重量份的MgS04、0. I重量份的柠檬酸、O. 01重量份的维生素B1，溶于1000重量份的无菌水，pH 6. 5，121°C灭菌20min，即得；所述大米培养基的配方为80重量份的大米、100重量份的无菌水，浸泡12h，pH自然，121°C灭菌30min，即得； B :提取分离发酵物用等体积的乙酸乙酯室温下浸泡提取48h，用旋转蒸发仪45°C减压蒸馏至干，得浸膏样品，将此浸膏样品与I. 2倍重、100目 200目的硅胶充分搅拌混合，干燥，研磨均匀成粉末状，使浸膏样品充分吸附于硅胶颗粒上，然后进行常压硅胶柱层析，硅胶柱规格为300目 400目，用石油醚/乙酸乙酯系统梯度洗脱，梯度洗脱的流程为10O: O, 95:5, 90:10, 80:20, 60:40, 50:50, v/v,收集洗脱液，45V减压蒸馏，浓缩后用有机溶剂洗涤；合并各洗脱段的洗脱液，并再次进行上述常压硅胶柱层析，层析后再次用石油醚/乙酸乙酯系统梯度洗脱，梯度洗脱的流程为100:0, 50:1,20:1, 15:1, 10:1,5:1, v/v,收集洗脱液，45°C减压蒸馏；再次合并各洗脱段的洗脱液并重复100:0, 50:1,20:1, 15:1, 10:1,5:1,v/v的石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱流程，在5:1洗脱段得到玫烟菌素，即为权利要求I中的蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂(a)。
9.权利要求6所述蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂的制备方法其特征步骤在于 A、发酵培养将所述玫烟色棒束孢菌株以接种针接种至改良马铃薯葡萄糖培养基中，260C，150rpm摇床培养7天，得种子液；将种子液接种至大米培养基，26°C光照培养30天，得发酵物；其中，所述改良马铃薯葡萄糖培养基的配方为200重量份的去皮土豆、20重量份的的葡萄糖、3重量份的KH2PO4U. 5重量份的MgS04、0. I重量份的柠檬酸、O. 01重量份的维生素B1，溶于1000重量份的无菌水，pH 6. 5，121°C灭菌20min，即得；所述大米培养基的配方为80重量份的大米、100重量份的无菌水，浸泡12h，pH自然，121°C灭菌30min，即得； B :提取分离发酵物用等体积的乙酸乙酯室温下浸泡提取48h，用旋转蒸发仪45°C减压蒸馏至干，得浸膏样品，将此浸膏样品与I. 2倍重、100目 200目的硅胶充分搅拌混合，干燥，研磨均匀成粉末状，使浸膏样品充分吸附于硅胶颗粒上，然后进行常压硅胶柱层析，硅胶柱规格为300目 400目，用石油醚/乙酸乙酯系统梯度洗脱，梯度洗脱的流程为10O: O, 95:5, 90:10, 80:20, 60:40, 50:50, v/v,收集洗脱液，45V减压蒸馏，浓缩后用有机溶剂洗涤；在上述石油醚/乙酸乙酯的80 20洗脱段得到的组分进一步进行上述常压硅胶柱层析，并用氯仿/甲醇系统梯度洗脱，梯度洗脱的流程为100:0，95:5，90:10，v/v，在90 :10洗脱段得到玫烟菌素，即为权利要求I中的蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂(a)。
10.权利要求I所述蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂的用途，其特征在于用于制备治疗和预防糖尿病、肥胖症及癌症的药物组合物。
全文摘要
本发明公开了一种蛋白质络氨酸磷酸酶抑制剂其制备方法是利用玫烟色棒束孢固体或液体发酵液用乙酸乙酯、乙醇、甲醇或氯仿甲醇混合溶剂提取，所得提取物用硅胶柱层析分离，即得。其可用于制备治疗和预防糖尿病、肥胖症及癌症的药物组合物。
文档编号C12P17/12GK102675199SQ20121015855
公开日2012年9月19日 申请日期2012年5月22日 优先权日2012年5月22日
发明者张军, 罗都强 申请人:河北大学