一种酿酒酵母菌菌株及应用的制作方法

一种酿酒酵母菌菌株及应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种能直接利用大豆糖蜜进行发酵的酿酒酵母菌（Saccharomyces?cerevisiae）菌株及其应用。该酿酒酵母菌能有效降解大豆糖蜜中的抗营养因子包括棉籽糖和水苏糖，提高大豆糖蜜在饲料中的添加量，并且发酵过程不需要稀释大豆糖蜜，不需要对底物进行灭菌，也不需要进行成分调整，从而大大简化了发酵工艺并降低成本。
【专利说明】一种酿酒酵母菌菌株及应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)菌株及应用。具体而言，本发明涉及一种能直接利用大豆糖蜜而无需经过灭菌、稀释和成分调整处理的菌株酿酒酵母菌，以及利用该菌株以大豆糖蜜为唯一的发酵原料进行发酵的方法。
【背景技术】
[0002]大豆糖蜜是以大豆为原料生产大豆浓缩蛋白过程中得到的纯天然副产品。生产大豆浓缩蛋白的方法包括酸提、醇提等，最终得到的可溶性物质即是大豆糖蜜。其外观呈棕黄色粘稠液状，有特殊清香味，味甘、微苦，因富含糖类物质，呈流动性，所以命名为大豆糖蜜。其主要成分含量为:粗蛋白质(大豆乳清蛋白)5%-8%，碳水化合物50%-55%，蔗糖15%-20%，单糖5-10%，大豆低聚糖15%-20%，水苏糖+棉籽糖10%-15%，大豆异黄铜2%_4%，总脂类及磷脂5%-8%，灰份(主要是P3+、Ca2+、Mg2+、K+、Fe2+) 4%左右，固型物60%左右。其中，以上指标只是对大豆糖蜜作出的含量表述，大豆糖蜜的定义并不是通过以上含量来定义的，它只是生产大豆浓缩蛋白过程中，醇溶部分物质后，剩余部分经过浓缩处理后的产品，因其富含糖类物质，颜色和流动性类似蜂蜜，所以命名为大豆糖蜜。
[0003]大豆糖蜜中含有多种营养物质，含大豆异黄酮、大豆低聚糖、大豆乳清蛋白、蔗糖、单糖及大豆中原有的水溶性矿物元素等。大豆糖蜜价格低廉，可用来提取大豆异黄铜、大豆低聚糖等。同时，它又是酵母等微生物发酵的良好营养物质，可用作微生物的培养基。鉴于以上优点，可利用微生物对大豆糖蜜进行发酵，用来合成或降解目标物。
[0004]此外，大豆糖蜜作为一种天然副产物，具有丰富的营养成分和一定的矿物元素，还可用作饲料添加剂。结合微生物发酵方法对大豆糖蜜进行处理，一方面大豆糖蜜中的营养成分得到充分利用，一方面微生物也可为动物提供单细胞蛋白、维生素等物质，并调节动物体内微生态平衡，增强动物的防病抗病能力，提高动物的生长性能。微生物细胞中含有丰富的蛋白质，单细胞蛋白则是指从单细胞生物的纯培养基或混合培养基中提取得到的总蛋白或者微生物细胞其本身。微生物所含的营养物质极为丰富，除蛋白质外，还含有丰富的碳水化合物、脂类、维生素及矿物质。用单细胞蛋白作为蛋白饲料喂养家禽、家畜，不仅产率高,还能增强禽畜机体免疫力。
[0005]这样的方法已经在例如，高玉荣等人申请的中国专利CN201010292389.3中公开，其中利用热带假丝酵母CGMCC2.587和益生性乳酸菌嗜酸乳杆菌CGMCC1.1854，其通过大豆糖蜜的除杂、成分调整、灭菌、两段发酵、离心和干燥来生产益生性单细胞蛋白饲料，大豆糖蜜的用量为百分比浓度15-20%，并辅配一些其他营养物质。
[0006]然而，大豆糖蜜虽然营养丰富、价格低廉，但其通常不能直接用作饲料而且添加量有一定限制。这主要是受保存期和抗营养因子的影响。抗营养因子通过干扰营养物质的消化吸收、破坏正常的新陈代谢和引起动物不良的生理反应等多种方式危害动物尤其是幼龄动物的生长和健康。其中，大豆低聚糖是抗营养因子的主要成分之一，其是大豆中可溶性糖的总称，包括棉籽糖和 水苏糖等。大量的低聚糖在动物体内不能被消化，经微生物分解产生气体，造成动物胀气、消化不良。
[0007]因此，希望研究出一种方法，能够有效降低大豆糖蜜中的低聚物尤其是棉籽糖和水苏糖的含量，从而能够提高大豆糖蜜在饲料中的添加量，降低饲料成本。目前通常常用的一种方法是利用ct -半乳糖苷酶来水解棉籽糖和水苏糖。例如，Ang6lica Pataro Reis等人报道了利用土曲霉(Aspergillus Terreus)产生的半乳糖苷酶和转化酶,来水解大豆糖蜜的低聚半乳糖(Ang6lica Pataro Reis, Valeria Monteze Guimaraes.Hydrolysisof Galacto-oligosaccharides in Soy Molasses by a -galactosidases and Invertasefrom Aspergillus terreus[J].BARZILIANARCHIVES OF BIOLOGYAND TECHNOLOGY,2010，53(3):719-729)。

【发明内容】

[0008]待解决的技术问题
[0009]然而，为了保证微生物的良好生长，通常需要对发酵底物进行稀释、灭菌、成分调整等处理，致使整体工序复杂化。此外，由于用于发酵的设备需要具有耐压耐酸碱等特性，在发酵过程中还需要监测发酵条件的各种参数，使得运转成本也大大增加。
[0010]迄今为止，关于酿酒酵母菌直接以原始浓度的大豆糖蜜不经稀释、发酵且不经过成分调整而作为唯一的发酵原料，来降解大豆糖蜜中的抗营养因子(棉籽糖、水苏糖)的含量，从而提高大豆糖蜜在饲料中的添加比例的方法报道在国内外文献中还未发现。因此，寻找一种能有效分解大豆糖蜜中的低聚糖、并且发酵工艺简单的菌株仍是需要解决的问题。
[0011]解决方案
[0012]本发明人进行了广泛的研究以实现上述目的。根据研究，本发明有以下发现。
[0013]本发明通过从大豆糖蜜中进行菌株分离、培养，获得一株能直接利用纯大豆糖蜜的非工程菌野生酿酒酵母菌(Saccharomyc`escerevisiae)WBRD2.12052301,已于 2012 年 06月01日保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏号为=CGMCC N0.6183。本发明的发明人发现，该酿酒酵母菌能够快速发酵，在发酵过程中能产生较高含量的生物蛋白。而且，该酿酒酵母菌可以以纯大豆糖蜜为唯一的发酵原料，快速降解大豆糖蜜中的低聚糖(主要是棉籽糖、水苏糖)的含量，富集单细胞蛋白。此法处理的大豆糖蜜，解决了大豆糖蜜在饲料应用中因抗营养因子(棉籽糖、水苏糖)含量高而导致的添加量受限的问题，提升了大豆糖蜜在饲料应用中的蛋白含量。基于以上发现完成本发明。
[0014]一方面，本发明提供一种酿酒酵母菌WBRD2.12052301，其中所述酿酒酵母菌WBRD2.12052301于2012年06月01日保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏号为:CGMCC N0.6183。
[0015]再一方面，本发明提供包含酿酒酵母菌WBRD2.12052301所产生蛋白的蛋白组合物。该蛋白组合物可以来源于上述从酿酒酵母菌WBRD2.12052301的细胞破碎物中或从含有所述酿酒酵母菌的培养基中分离得到。其中，酿酒酵母菌的细胞破碎物可通过，例如超声破碎、向酵母菌添加裂解液来获得。此外，蛋白组合物中也可以含有该酵母菌所产生的一种或多种蛋白以及其它非酵母菌产生的物质。
[0016]再一方面，本发明还提供一种分解水苏糖和/或棉籽糖的方法，所述方法利用酿酒酵母菌WBRD2.12052301或包含该酵母菌所产生蛋白的蛋白组合物来分解底物中的水苏糖和/或棉籽糖。该底物可以是任何含有水苏糖和/或棉籽糖的物质，例如，但不限于大豆糖蜜。根据此方法，也可利用本发明的酿酒酵母菌WBRD2.12052301或上述的蛋白组合物同时分解棉籽糖和水苏糖。
[0017]再一方面，本发明还提供一种发酵方法，该方法使用酿酒酵母菌WBRD2.12052301进行发酵。具体而言，该发酵方法中的底物中可含有低聚糖，比如棉籽糖、水苏糖或其二者。进一步，该发酵方法中的底物中可以含有大豆糖蜜。在一个具体的实施方式中，该发酵方法中的底物可以是大豆糖蜜。
[0018]具体而言，本发明的发酵方法可包括以下步骤:
[0019]I)菌株的活化。将酿酒酵母菌WBRD2.12052301接种到培养基中或者培养基上，于一定温度下恒温培养。其中菌株活化的温度优选为28°C，但不限于此。其中用于活化菌株的培养基可以是，例如固体培养基、液体培养基和半固体培养基。其中固体培养基可以是，例如斜面培养基，但不限于此。培养基的配方可以根据本领域普通技术人员掌握的技术来进行选择。在本发明的一个实施方式中，培养基组成可包括(单位1L):麦芽汁粉130g，琼脂粉10-20g，用蒸馏水定容至1L。
[0020]2)种子液的制备。对活化的菌株进行初步的扩大培养。其中制备种子液的温度优选为28°C，但不限于此。其中，用于制备种子液的培养基优选为液体培养基，但不限于此。进一步地，液体种子液培养基的组成在一个实施方式中如下所示(单位1L):蔗糖25g，葡萄糖25g,蛋白胨IOg,鱼蛋白胨5g,玉米衆膏Ig,磷酸二氢钾3g,硫酸镁0.5g。
[0021]3)接种并开始发酵。按照一定比例将种子液接种到培养基中开始进行发酵。
[0022]示例性地，可用大豆糖蜜作为本发明的发酵底物。并且，可以不对大豆糖蜜进行灭菌，也可以不用为了适合菌株生长而对大豆糖蜜进行PH调节，此外，还可以不对用于发酵的大豆糖蜜进行稀释。
[0023]尽管本发明没有具体描述，但本领域技术人员也可想到，豆柏与大豆糖蜜同样是以大豆生产浓缩蛋白的过程中得到的产物，豆柏与大豆糖蜜具有相似的组成，其都含有水苏糖、棉籽糖，并且都因为这两种物质的存在会在用于饲料用途时引起动物胀气。因此，本发明还可涉及利用本发明的酿酒酵母菌WBRD2.12052301对豆柏进行发酵的方法，以及相应的应用。
[0024]在该发酵过程中，可以按照实际情况的需要，选择对底物进行灭菌或不进行灭菌。在该发酵过程中，可以按照实际情况的需要，对底物进行稀释或不对底物进行稀释。在该发酵过程中，可以根据酵母菌的最适生长条件，比如PH、温度等来设置发酵参数。例如，对底物进行组分调整。或者，也可以不对底物进行组分调整。
[0025]本发明还涉及在利用本发明的酵母菌WBRD2.12052301对可发酵底物进行发酵的过程中所产生的发酵组合物。比如，该可发酵底物可以是大豆糖蜜，发酵组合物中可以含有,例如乙醇。此外,该组合物中可包括蛋白。进一步地，该蛋白可包括单细胞蛋白。
[0026]示例而言，发酵组合物可以是单细胞蛋白组合物，其中所述单细胞蛋白组合物包括进行过发酵的酿酒酵母菌WBRD2.12052301。
[0027]在一些情况下，本发明的发酵组合物可用于饲料。具体而言，利用本发明的酵母菌WBRD2.12052301进行发酵而得到的发酵组合物可直接用作饲料或者与其它物质结合用作饲料。因此，本发明还可涉及一种饲料，其中该饲料含有利用本发明的酵母菌对可发酵底物进行发酵而产生的发酵组合物。再者，本发明还可涉及本发明的酵母菌WBRD2.12052301在制备饲料中的用途。利用本发明的酵母菌制备饲料的具体步骤在本领域技术人员的技术范围内，并可以参考现有技术进行具体实施。比如，发酵大豆糖蜜的制备及在配合资料中的添加方法可以如图1进行。
[0028]
[0029]向大豆糖蜜中添加本发明的酵母菌WBRD2.12052301进行发酵，所得的发酵产物中的抗营养成分棉籽糖和水苏糖可以得到有效降低，由此，可提高饲料中大豆糖蜜的添加比例，降低成本。因此，本发明还涉及一种提高饲料中的大豆糖蜜的添加比例的方法，其中所述方法包括向饲料中添加酿酒酵母菌WBRD2.12052301的步骤。
[0030]本文的可发酵底物是指可为本发明的酿酒酵母菌WBRD2.12052301所利用而进行发酵的底物。其可以含有棉籽糖、水苏糖或其二者。具体而言，可以利用含有棉籽糖、水苏糖或其二者的底物进行发酵。以棉籽糖为例，棉籽糖存在于许多富含碳水化合物的植物中，其在大豆、豌豆、扁豆中作为能量供给物质。其还存在于谷物(小麦和黑麦等)和绿叶蔬菜比如卷心菜、芦笑、朝鲜蓟(artichokes)、抱子甘蓝(brussel sprouts)和球花甘蓝中。本领域的技术人员可以根据实际需要选择性地利用这些植物进行发酵。此外，尽管本发明没有具体示例，但也可利用含有棉籽糖的其它植物进行发酵。
[0031]一方面，通过使用含有酿酒酵母菌WBRD2.12052301的酵母菌对可发酵底物进行发酵的过程中产生的发酵组合物中可含有醇。在一个示例性实施方式中，所产生的组合物中含有乙醇。
[0032]此外，本发明还提供通过发酵生产产物的方法，该方法包括提供可发酵底物和酿酒酵母菌WBRD2.12052301，并使该酵母菌在底物的存在下进行发酵而产生产物。该方法还可进一步包括将所产生的产物分离出来的步骤。所产生的产物并不具体限定，其可以是蛋白，也可以是由发酵底物转化产生的物质。例如，通过该方法得到的产物可以是单细胞蛋白，也可以是醇比如乙醇。例如，本发明可提供一种生产乙醇的方法，其中该方法利用酿酒酵母菌WBRD2.12052301进行发酵。具体而言，可以利用大豆糖蜜为发酵底物，从而生产乙醇。`
[0033]本发明的效果
[0034]本发明的优点在于，本发明的酿酒酵母WBRD2.12052301可以大豆糖蜜为唯一的发酵原料，原料不需要稀释、不需要灭菌，不需要成分调整，可直接利用其有效成分，生产单细胞蛋白。工艺简单、方法便捷，利于操作处理。
[0035]本发明的另一优点在于酿酒酵母WBRD2.12052301解决了大豆糖蜜在饲料应用中由于抗营养因子导致的添加量受限问题。具体而言，根据中国饲料信息网饲料研究中介绍中说明大豆糖蜜在各种养殖动物中的少量的添加具有正向效果，其添加比例为:家禽饲料中添加5-10% ;奶牛饲料中添加10-20% ;鱼饲料中添加3-5% ;猪饲料中添加3-5%，受添加限制的因素主要取决于大豆糖蜜中的抗营养因子(棉籽糖、水苏糖)的高含量。而利用本发明的酿酒酵母进行发酵，一方面利用了大豆糖蜜成本低且营养丰富的优点，同时也不会因其本身的高含量抗营养子而影响动物的吸收。经验证，利用本发明的酵母菌发酵过的大豆糖蜜在饲料中的添加量可提高一倍。
[0036]酿酒酵母WBRD2.12052301可以高效快速的降解大豆糖蜜中的棉籽糖、水苏糖。由此可有效地提高大豆糖蜜在饲料中的添加比例，并且发酵过程中产生的芳香类物质又可以提高其在饲料中的适口性和诱食性。
[0037]本发明的优点还在于酿酒酵母WBRD2.12052301直接发酵大豆糖蜜可以得到含量较高的单细胞蛋白。将发酵产物添加到饲料中可以增加饲料中的蛋白含量。
【专利附图】

【附图说明】
[0038]现在将参考本发明的附图所图示的某些示例性实施方式来详细地描述本发明的上述和其它特征，下文给出的这些实施方式仅仅用于示例说明，因此不是对本发明的限制，其中:
[0039]图1为发酵大豆糖蜜的制备及在配合资料中的添加方法的示例性方法。
[0040]图2为酿酒酵母菌WBRD2.12052301的显微镜形态照片(1000X )。
[0041]图3为酿酒酵母菌WBRD2.12052301的菌落形态照片。
图4为酿酒酵母菌WBRD2.12052301的基因鉴定序列(SEQ:1D:NO:1序列)。
【具体实施方式】
[0042]下面将参照附图详细地描述本发明的示例性实施方式，以使本领域的普通技术人员能够容易地实施本发明。尽管将结合示例性实施方式描述本发明，但应当理解，本说明书无意将本发明局限于这些示例性实施方式。相反，本发明不仅要涵盖这些示例性实施方式，还要涵盖由权利要求所限定的本发明的精神和范围内的各种替代形式、修改、等效形式和其它实施方式。
[0043]在本发明的上下文中`，除非明确有相反说明，术语“包括”和例如“包含”的变形可理解为表示包含了所述的组分或成分，但是并非不排除任何其它的组分或成分。并且该术语是开放式的，允许有列举之外的对象存在，只要所述的基本的或新的特征没有被所列举之外的对象的存在而改变，但排除现有技术的实施方式。
[0044]在本发明的上下文中，只要是术语“菌株”涉及酵母菌，其包括种类潜在的遗传变体或亚型；例如，从特定地点及时采集的菌种分离株，或被确证为在核苷酸水平上与同种其他成员不一致的分离株。
[0045]在本发明的上下文中，术语“发酵”是涉及微生物的生命活动的过程。进一步地，“发酵”是指利用微生物生产代谢产物或分解有机物的过程。微生物是包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物等在内的一大类生物群体。本发明中的发酵主要是指利用酵母菌的发酵过程。
[0046]本文中，术语“可发酵底物”是指能为微生物所利用，比如作为能源物质为微生物所利用或者其中含有可被微生物转化的物质。概括而言，参与微生物的代谢活动的各种物质或其与其它物质的组合物均可称为可发酵底物。可发酵底物可以是，比如含有棉籽糖和/或水苏糖的物质，比如大豆糖蜜或豆柏，但不限于此。在一个具体的实施方式中，可发酵底物可以是大豆糖蜜。
[0047]在本发明的上下文中，术语“发酵产物”包括发酵工艺中的任何产物，包括固体、液体或气体产物。
[0048]在本发明的上下文中，术语“培养基”是指适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。培养基可包括天然培养基、合成培养基和半合成培养基。可以根据需要配置不同的培养基来培养微生物。例如，在具体的发酵过程中使用的大豆糖蜜是适合本发明的酿酒酵母菌WBRD2.12052301生长的一种天然培养基。在菌种的活化中，又可配置如下成分的斜面培养基来培养本发明的酿酒酵母菌(单位1L):麦芽汁粉130g，琼脂粉10-20g，用蒸馏水定容至1L，其中不对PH进行调节。
[0049]在本发明的上下文中，术语“工程菌”是指用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株。所述的菌类细胞株可称为受体菌。在本发明中，受体菌可以是本发明的酿酒酵母菌而外源基因是从本发明的酿酒酵母菌以外的微生物中提取的基因。或者，受体菌可以是本发明的酿酒酵母菌以外的微生物而外源基因来源于本发明的酿酒酵母菌。制备工程菌的方法在本领域技术人员的技术范围内，因此在本发明中并不具体叙述。
[0050]以下示例说明利用本发明的酿酒酵母菌进行发酵的方法。
[0051]菌种的分离:
[0052]本发明的酿酒酵母菌是通过如下常规的过程获得:将采集自益海(防城港)大豆工业有限公司存储的大豆糖蜜样品进行菌种分离，筛分得到一株表面光滑、有白色脊状突起、显微镜观察菌体呈卵圆形的酿酒酵母菌，其18S rRNA碱基序列(SEQ:1D: NO:1序列，1716bp)见图4所示。筛分方法参照文献(高玉荣，刘洋等人报道了大豆糖蜜高产单细胞蛋白菌株的筛选及其生长条件[J].中国酿造，2010，8:33-36)
[0053]菌种的活化:
[0054]将分离得到的酿酒酵母菌WBRD2.12052301接种到斜面培养基上，于28°C恒温培养1-2天，待菌体布满斜面为宜，斜面培养基组成包括(单位1L):麦芽汁粉130g (OXOID有限责任公司)，琼脂粉10-20g (阿拉丁工业有限公司)，用蒸馏水定容至1L，PH值不作调整。
[0055]种子液的制备:
[0056]从上述斜面中挑取一大环`菌丝体接种至灭菌后的液体种子培养基中，于28°C、220r/min恒温培养20-24小时，菌浓度可以达到1~3X 108cfu/ml ;液体种子培养基组成包括(单位1L):蔗糖25g (上海凌峰化学试剂有限公司，AR级)，葡萄糖25g (国药集团化学试齐陏限公司，AR级)，蛋白胨IOg (0X0ID有限责任公司)，鱼蛋白胨5g (国药集团化学试剂有限公司，BR级)，玉米浆膏Ig (上海酷灵精细化学品有限公司，USP级)，磷酸二氢钾3g，硫酸镁0.5g，PH不作调整；将液体种子培养基于121°C灭菌20min后冷却。
[0057]发酵阶段:
[0058]将大豆糖蜜不做稀释、也不做添加任务额外的物质，按照糖蜜重量的20%接种上述种子液，在28°C恒温发酵培养24小时。
[0059]实施例1:利用酿酒酵母菌WBRD2.12052301分解大豆糖蜜中的抗营养因子
[0060]如上所述进行菌种活化，制备种子液，并进行发酵。在发酵过程中，对大豆糖蜜不做稀释，也不添加任何额外的物质，按照糖蜜重量的20%接种上述种子液，在28°C恒温静置发酵培养24小时。
[0061]结果，大豆糖蜜中的棉籽糖由初始质量百分浓度2.52%降解到0.52%，降解率79.36% ;水苏糖由初始质量百分浓度8.64%降解到3.32%，降解率61.57%。将发酵液真空抽滤，得到的菌体在60°C以下干燥处理可以得到蛋白质含量由初始的质量百分比9.18%提高到15.6% (以干基计)的高蛋白饲料，蛋白含量的测定方法采用常规的凯氏定氮法。
[0062]根据以上结果，经过24小时的发酵过程，大豆糖蜜中的水苏糖和棉籽糖得到有效降解，解决了传统中棉籽糖和水苏糖难利用的问题，从而可以替代传统用α-半乳糖苷酶来水解棉籽糖、水苏糖的方法。此外，由于不需要对底物进行灭菌，也不需要调节底物的ΡΗ，且不需要用水稀释底物，因此大大简化了生产工序并降低了成本。发酵过程中，菌体生长速度快，单细胞蛋白饲料中的蛋白含量高，经短时间的发酵即可得到高蛋白饲料。
[0063]实施例2:不接种进行发酵
[0064]如实施例1所述进行菌种活化，制备种子液，并进行发酵。不同之处在于，在发酵阶段对原始糖蜜不接种本发明的酵母菌，进行空白培养作为对照。
[0065]结果，在与实施例1相同的条件下进行处理但不接种本发明酵母菌的对照例中，大豆糖蜜中的棉籽糖由初始质量百分浓度2.52%降解到2.51% ;水苏糖由初始质量百分浓度8.64%降解到8.61%，基本上没有降解效果。
[0066]实施例3:利用酿酒酵母菌WBRD2.12052301生产乙醇
[0067]如实施例1所述进行菌种活化，制备种子液，并进行发酵。在发酵过程中，对大豆糖蜜不做稀释，也不添加任何额外的物质，按照糖蜜重量的20%接种上述种子液，在28°C恒温静置发酵培养24小时。
[0068]在发酵过程中Oh和24h各取样5ml，通过GC顶空的方法测试，发酵结束时组合物中的乙醇百分含量由发酵前的质量百分比0.296%增加到3.168%。该结果说明，利用本发明的酒酵母菌WBRD2.12052301，可产生乙醇。
[0069]因此，本发明具有以下有益效果:
[0070]本发明的优点在于酿酒酵母菌WBRD2.12052301可以以大豆糖蜜为唯一的发酵原料进行发酵，原料不需要稀释、不需要灭菌，不需要成分调整，可直接利用其有效成分。而目前已报道的利用大豆糖蜜的菌株专利都是不能直接以大豆糖蜜为唯一的发酵原料，需要对大豆糖蜜做5~10倍的稀释处理，并需辅配一些氮源及营养因子来满足菌株的发酵需求。相比之下，本发明工艺简单、成本低廉，利于操作处理。
[0071]本发明的另一优点在于酿酒酵母菌WBRD2.12052301解决了大豆糖蜜在饲料应用中由于抗营养因子导致的添加量受限问题。酿酒酵母菌WBRD2.12052301可以快速降低大豆糖蜜中的低聚糖(棉籽糖、水苏糖)的含量，高效快速的降解大豆糖蜜中的棉籽糖、水苏糖，降解率可达到60%以上。可有效地提高大豆糖蜜在饲料中的添加比例，并且发酵过程中产生的芳香类物质又可以提高其在饲料中的适口性和诱食性。
[0072]本发明为大豆糖蜜充分的利用开辟了一种新方法，解决了以往大豆糖蜜在饲料中添加量受限、难利用、利用慢的问题。
[0073]本发明的优点还在于酿酒酵母菌WBRD2.12052301直接发酵大豆糖蜜可以得到15%以上的单细胞蛋白。应用到饲料中可以提高饲料中蛋白含量。
[0074]已经参考本发明的示例性实施方式对本发明进行了详细描述。然而，本领域技术人员将会理解，可以在不偏离本发明的原理和精神的情况下对这些实施方式进行改变。
[0075]参考引入
[0076]本申请通篇引用的所有参考资料(包括参考文献、已授权专利、公开的专利申请和共同未决的专利申请等)的内容特意整体地引入本文以供参考。
【权利要求】
1.一种酿酒酵母菌，保藏号为=CGMCC N0.6183。
2.一种蛋白组合物，其中所述蛋白组合物包含由权利要求1所述的酿酒酵母菌所产生的蛋白。
3.一种分解水苏糖和/或棉籽糖的方法，所述方法利用权利要求1所述的酿酒酵母菌或权利要求2所述的蛋白组合物来分解底物中的水苏糖和/或棉籽糖。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述方法以大豆糖蜜为底物。
5.一种发酵方法，所述方法使用权利要求1所述的酿酒酵母菌进行发酵。
6.如权利要求5所述的方法，其中发酵底物中含有低聚糖。
7.如权利要求5所述的方法，其中发酵底物中含有棉籽糖、水苏糖或其二者。
8.如权利要求5所述的方法，其中所述发酵底物含有大豆糖蜜。
9.如权利要求5所述的方法，其中所述发酵底物为大豆糖蜜。
10.如权利要求5所述的方法，其中所述发酵产物用于饲料。
11.如权利要求1所述的酿酒酵母菌在制备饲料中的用途。
12.一种发酵组合物，所述发酵组合物在使用酵母菌对可发酵底物进行发酵的过程中产生，其中所述酵母菌包括权利要求1所述的酿酒酵母菌。
13.如权利要求12所述的发酵组合物，其中所述发酵组合物中包括乙醇。
14.一种饲料，其中所述 饲料包含权利要求12所述的发酵组合物。
15.一种生产乙醇的方法，其中所述方法包括利用权利要求1所述的酿酒酵母菌进行发酵。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述方法利用大豆糖蜜作为发酵底物。
【文档编号】C12P7/08GK103805525SQ201210448425
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2012年11月9日 优先权日:2012年11月9日
【发明者】石兴利, 吴学智, 关慧琴 申请人:丰益(上海)生物技术研发中心有限公司