一种饲料用霉菌毒素脱毒剂及其制备方法与应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于添加剂【技术领域】，具体公开了一种饲料用霉菌毒素脱毒剂及其制备方法与应用。所述霉菌毒素脱毒剂含有蒙脱石、膨润土、芽孢杆菌及其发酵浓缩物、灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物、酵母细胞壁多糖。本发明研制的霉菌毒素脱毒剂同时具有吸附和降解霉菌毒素的能力，能有效去除饲料中的霉菌毒素，减轻其对动物的伤害，降低胃肠道等疾病发生率。霉菌毒素脱毒剂制备方法简单，材料来源广泛，价格低廉，在饲料添加剂领域中具有广阔的市场应用价值。
【专利说明】一种饲料用霉菌毒素脱毒剂及其制备方法与应用
【技术领域】
[0001]本发明属于添加剂【技术领域】，具体涉及一种饲料用霉菌毒素脱毒剂及其制备方法与应用。
【背景技术】
[0002]霉菌毒素是一个全球性问题，据粮农组织估算，全世界每年有大约5?7%的粮食、饲料等农产品受到霉菌的侵害，25%的谷物被已知霉菌毒素污染，并造成每年数千亿美元的损失。20世纪90年代，加拿大饲料行业由霉菌毒素污染引起损失估计高于10亿美元，而美国则高达25亿美元，同时亚太地区生产的配合饲料受到霉菌毒素污染约为1.6亿吨，每年造成全球高达百亿美元的损失。
[0003]霉菌毒素是由一些真菌如曲霉菌、镰刀菌、青霉菌等在生长成熟后所产生的二级代谢产物，这些毒素在谷物的收获、储存、加工、运输等多个环节均可产生。目前已知的霉菌毒素有400余种，主要包括黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素等。这些毒素耐高温、耐加工过程中的各种处理，毒力强，对人和动物危害极大。如黄曲霉毒素对人畜有强烈的致病性和致癌性，是目前毒性最强危害最严重的真菌毒素。玉米赤霉烯酮(ZEA)是一种生殖系统毒素，可引起雌性激素过多，导致动物雌性化中毒，特别是对猪的作用尤为显著，会导致阴部发生病变，乳腺肿胀，并有卵巢囊肿发生，还可导致小牛性早熟，奶牛阴道炎，发情期延长等。呕吐毒素与奶牛采食量下降和产奶量下降密切相关。呕吐毒素具有免疫抑制作用，在奶牛体内表现更明显。
[0004]霉菌毒素在谷物、及谷物原料制成的饲料等产品中广泛存在，如玉米、小麦、大米、花生、麦麸、畜禽饲料等。多雨潮湿的环境极易造成饲料中的霉菌毒素超标。霉菌毒素的污染对畜禽类有严重的危害并导致动物产量下降，生长缓慢，免疫力低下，并导致各种疾病，给养殖业带来巨大的损失。
[0005]目前国内外霉菌毒素脱毒添加剂主要使用硅铝酸盐等多孔物理材料对霉菌毒素的吸附，虽然吸附率较高，但饲料中的营养成分比如氨基酸、维生素等均能被吸收，从而降低了食品、饲料等产品的营养价值。
[0006]微生物细胞壁具有对霉菌毒素的吸附作用，研究表明酵母葡聚糖能够有效的吸附霉菌毒素，有类似的作用还包括乳酸菌、芽孢杆菌细胞壁等。因上述微生物均为有益菌，因此既能保证吸附毒素的效果，又安全无毒。可减少无机的硅铝酸盐的用量，降低霉菌毒素脱毒剂对食品和饲料中的维生素等营养成分的吸附。专利号为201210530368.X的发明公开一种新型霉菌毒素脱毒剂，脱毒剂由10?20份藻类提取物、20?50份酵母细胞壁、30?50份蒙脱石、25?40份枯草芽孢杆菌组成；该脱毒剂能有效去除畜禽饲料中的霉菌毒素，并提高畜禽的机体免疫力，但是该脱毒剂的缺点是所述脱毒剂仅仅能通过吸附作用来消除饲料中的毒素，其清除效果不彻底。
【发明内容】
[0007]本发明的目的为了克服现有技术中饲料用霉菌毒素脱毒剂存在的上述缺陷，提供一种饲料用霉菌毒素脱毒剂。本发明所述脱毒剂能有效去除饲料或谷物原料中的黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素等霉菌毒素，有效提高畜禽饲料的原料利用率，增强动物免疫力，预防疾病，增加畜产品产量。
[0008]本发明的另一个目的是提供一种饲料用霉菌毒素脱毒剂的制备方法。
[0009]本发明的另一个目的是提供一种饲料用霉菌毒素脱毒剂的应用。
[0010]本发明的目的通过以下技术方案予以实现: 一种饲料用霉菌毒素脱毒剂，含有如下重量份数的各组分:蒙脱石30~80份、膨润土10~30份、芽孢杆菌及其发酵浓缩物I~15份、灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物I~15份、酵母细胞壁10~45份。
[0011]更优选地，所述脱毒剂含有如下重量份数的各组分:蒙脱石45份、膨润土 15份、芽孢杆菌及其发酵浓缩物5份、灭活乳酸菌及其发酵浓缩物10份、酵母细胞壁多糖25份。
[0012]优选地，所述芽孢杆菌选自枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的一种或一种以上；所述芽孢杆菌是农业部饲料添加剂中允许添加的有益微生物。所述复合乳酸菌包括保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌组成。
[0013]本发明的霉菌毒素脱毒剂原料来源广泛，安全卫生。含有较多种类的微生物细胞及多糖成分，如芽孢杆菌细胞、多种乳酸菌细胞、酵母细胞壁多糖。这些成分相互协调补充，能有效吸收玉米赤霉烯酮等多种毒素。本发明的霉菌毒素脱毒剂中含有的芽孢杆菌对多种霉菌毒素如黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素均有较好的吸附和降解作用，乳酸菌的代谢产物中的小分子物质如有机酸、无蛋白菌质、过氧化氢、蛋白质成分、羟基脂肪酸、酚类化合物等可抑制霉菌的生长，抑制霉菌毒素的产生以及具备降解霉菌毒素如黄曲霉毒素AFB1的功能。多种芽孢杆菌的发酵代谢产物中的热敏成分，以及芽孢杆菌的某些胞内酶对呕吐毒素和玉米赤霉烯酮起到降解作用。同时芽孢杆菌及乳酸菌细胞也具有一部分的吸附毒素的作用，这些活性成分及细胞壁共同协调，同时再加上酵母细胞壁对玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的吸附，增加了本发明对毒素的脱毒效果。因此本发明不单单是吸附作用，还能降解毒素而从根本上消除毒素，达到真正降低毒素的目的。
[0014]本发明所利用吸附和降解的双重脱毒能力，一方面无机和有机吸附材料对霉菌毒素的吸附，能降低动物毒素的摄入量，另一方面吸附材料中含有芽孢杆菌活性成分，可以降解玉米赤霉烯酮和呕吐毒素等，从而达到彻底降解毒素的目的。本发明中的蒙脱石、膨润土等对于黄曲霉毒素有很好的去除效果，能将黄曲霉毒素等降低至较低的水平。
[0015]脱毒剂制备方法如下:按照如上配方，将称量好的蒙脱石和膨润土用粉碎机粉碎后过筛，得到混合物一，然后将酵母细胞壁与混合物一混合，得到混合物二，将混合物二与芽孢杆菌及其发酵浓缩物、灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物混合，得到混合物三，混合物三经干燥、研碎后过150~200目筛，得到状产品，即为脱毒剂。
[0016]其中，所述芽孢杆菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的一种或一种以上进行发酵培
养;
52.发酵结束后，向发酵液中加入质量分数为0.1~0.5%的保护剂；
53.离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1%(W/V)的菌悬液；将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的的菌悬液按照0飞：(T3 :(T4 (三者不能同 时为零）的体积比混合得混合菌悬液；
54.50°C?70°C条件下，将步骤S3得到的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液， 将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的浓缩上清液按照0飞：(T2 :(T4 (三者不 能同时为零）的体积比混合得混合浓缩上清液；
55.将混合菌悬液与混合浓缩上清液按照1:8?16的体积比混合得到芽孢杆菌及其发 酵浓缩物。
[0017]所述灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤：
51.将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各自的发酵液中加入质量分数为0.ro. 5的保护剂；
53.将各发酵液灭活后，离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1% (W/V)的菌悬液；然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的菌悬液 按照体积比为广2 ：T4 ：T3 ：T5的比例混合后得到混合菌悬液；
54.50°C?70°C条件下，将步骤S3得到的各菌的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上 清液，然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的浓缩上清液按照 体积比为广2 ：T3 ：T5 ：T5的比例混合后得到混合浓缩上清液；
55.将混合菌悬液与混合浓缩上清液按照1:8?16的体积比混合得到灭活复合乳酸菌 及其发酵浓缩物。
[0018]所述保护剂为海藻酸钠和甘油的混合物或者脱脂牛奶。
[0019]所述灭活方法可以是冷冻灭活、热灭活或者化学灭活。
[0020]如上所述霉菌毒素脱毒剂在饲料脱毒中的应用。
[0021]所述脱毒剂在饲料中的添加量为1?5kg/t，同时饲料用水的添加量为0. 5?5g/ kg。
[0022]与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
现有技术中也有使用芽孢杆菌作为霉菌毒素脱毒剂的有效成分，但是现有技术中的脱 毒剂含有的芽孢杆菌并未提及是否含有芽孢杆菌的发酵产物，且所述芽孢杆菌仅仅为一种 枯草芽孢杆菌。芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌的发酵产物含有降解玉米赤霉烯 酮和呕吐毒素的活性物质，多种芽孢杆菌混合使用，可相互协调补充，提高脱毒剂降解毒素 的性能。另外乳酸菌及发酵产物，乳酸菌发酵产物能够有效降解动物体内的内毒素，对于提 高猪的免疫能力具有重要作用，同时乳酸菌细胞壁也具有良好的吸附毒素的效果，一般来 说，不同菌吸附毒素的种类和吸附强度都不尽相同，利用乳酸菌和芽孢杆菌以及添加的酵 母细胞壁的互补作用，可以增加吸附霉菌毒素的范围，提高脱毒剂的应用效果。
[0023]本发明结合多种有益菌，提高产品对毒素的吸附效果和作用范围。本发明富含多 种吸附和降解毒素的材料，能有效降低多种霉菌毒素如黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒 素等。本发明含有能降解霉菌毒素的芽孢杆菌活性成分，能够有效去除霉菌毒素，而不是简 单的吸附。本发明使用多种微生物的细胞壁，相互补充提高了产品的吸附效率。本发明含 有较多微生物活性成分，能够提高动物对营养的吸收。本发明中用于食品中的霉菌毒素的 基本成分为食品级，使用的灭活乳酸菌均为有益菌，因此可用于食品添加剂领域。【专利附图】
【附图说明】
[0024]图1.实施例1所述五种霉菌毒素脱毒剂对黄曲霉毒素AFB1的去除效果。
[0025]图2.实施例2所述五种霉菌毒素脱毒剂对黄曲霉毒素ZEA的去除效果。
[0026]图3.实施例3所述五种霉菌毒素脱毒剂对黄曲霉毒素DON的去除效果。
【具体实施方式】
[0027]下面结合说明书附图和具体实施例进一步详细说明本发明。除非特别说明，本发明采用的试剂、设备为本【技术领域】常规试剂和设备。
[0028]实施例1
所述脱毒剂含有如下重量份数的各组分:蒙脱石50份，膨润土 20份，灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物10份，芽孢杆菌及其发酵浓缩物10份、酵母细胞壁多糖20份。
[0029]脱毒剂制备方法:按照如上配方，将称量好的蒙脱石和膨润土用粉碎机粉碎后过筛，得到混合物一，然后将酵母细胞壁与混合物一混合，得到混合物二，将混合物二与芽孢杆菌及其发酵浓缩物、灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物混合，得到混合物三，混合物三经干燥、研碎后过150?200目筛,得到状产品，即为脱毒剂。
[0030]其中，所述芽孢杆菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将纳豆芽孢杆菌进行发酵培养；
52.发酵结束后，向发酵液中加入质量分数为0.4%的脱脂奶粉；
53.离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1%(W/V)的菌悬液；
54.70°C条件下，将步骤S3得到的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，
55.将菌悬液与浓缩上清液按照1:9的体积比混合得到芽孢杆菌及其发酵浓缩物。
[0031]所述灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各自的发酵液中加入质量分数为0.4的脱脂奶粉；
53.将各发酵液热灭活后，离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1% (W/V)的菌悬液；然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的菌悬液按照体积比为1:3:2:4的比例混合后得到混合菌悬液；
54.65°C条件下，将步骤S3得到的各菌的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的浓缩上清液按照体积比为1:2:4:4的比例混合后得到混合浓缩上清液；
55.将混合菌悬液与混合浓缩上清液按照1:15的体积比混合得到灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物。
[0032]实施例2
所述脱毒剂含有如下重量份数的各组分:蒙脱石70份，膨润土 10份，灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物2份，芽孢杆菌及其发酵浓缩物15份、酵母细胞壁多糖10份。
[0033]脱毒剂制备方法:同实施例1。
[0034]其中，所述芽孢杆菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌分别进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各发酵液中加入质量分数为0.3%的脱脂奶粉； 53.离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1%(W/V)的菌悬液；将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的菌悬液按照体积比为4:2:3的比例混合后得到混合菌悬液；
54.70°C条件下，将步骤S3得到的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，将保枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的浓缩上清液按照体积比为4:1:3的比例混合后得到混合浓缩上清液；
55.将菌悬液与浓缩上清液按照1:9的体积比混合得到芽孢杆菌及其发酵浓缩物。
[0035]所述灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各自的发酵液中加入质量分数为0.5%的脱脂奶粉；
53.将各发酵液冷冻灭活后，离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1% (W/V)的菌悬液；然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的菌悬液按照体积比为1:3:2:4的比例混合后得到混合菌悬液；
54.60°C条件下，将步骤S3得到的各菌的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的浓缩上清液按照体积比为1:2:4:4的比例混合后得到混合浓缩上清液；
55.将混合菌悬液与混合浓缩上清液按照1:15的体积比混合得到灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物。
[0036]实施例3
所述脱毒剂含有如下重量份数的各组分:蒙脱石45份，膨润土 15份，灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物10份，芽孢杆菌及其发酵浓缩物5份，酵母细胞壁多糖25份。
[0037]脱毒剂制备方法:同实施例1。
[0038]其中，所述芽孢杆菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌分别进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各发酵液中加入质量分数为0.3%的海藻酸钠和甘油的混合物；
53.离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1%(W/V)的菌悬液；将枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌的菌悬液按照体积比为3:1的比例混合后得到混合菌悬液；
54.55°C条件下，将步骤S3得到的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，将枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌的浓缩上清液按照体积比为4:1的比例混合后得到混合浓缩上清液；
55.将菌悬液与浓缩上清液按照1:9的体积比混合得到芽孢杆菌及其发酵浓缩物。
[0039]所述灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各自的发酵液中加入质量分数为0.3%的海藻酸钠和甘油的混合
物；
53.将各发酵液化学灭活后，离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1% (W/V)的菌悬液；然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的菌悬液按照体积比为1:3:2:4的比例混合后得到混合菌悬液；
54.70°C条件下，将步骤S3得到的各菌的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的浓缩上清液按照体积比为1:2:4:4的比例混合后得到混合浓缩上清液；
S5.将混合菌悬液与混合浓缩上清液按照1:15的体积比混合得到灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物。
[0040]实施例4
所述脱毒剂含有如下重量份数的各组分:蒙脱石30份，膨润土 30份，灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物15份，芽孢杆菌及其发酵浓缩物2份、酵母细胞壁多糖15份。
[0041]脱毒剂制备方法:同实施例1。
[0042]其中，所述芽孢杆菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌分别进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各发酵液中加入质量分数为0.2%的海藻酸钠和甘油的混合物；
53.离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1%(W/V)的菌悬液；将枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的菌悬液按照体积比为3:2的比例混合后得到混合菌悬液；
54.60°C条件下，将步骤S3得到的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，将枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的浓缩上清液按照体积比为4:3的比例混合后得到混合浓缩上清液；
55.将菌悬液与浓缩上清液按照1:9的体积比混合得到芽孢杆菌及其发酵浓缩物。
[0043]所述灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各自的发酵液中加入质量分数为0.5%的脱脂牛奶；
53.将各发酵液热灭活后，离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1% (W/V)的菌悬液；然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的菌悬液按照体积比为1:3:2:4的比例混合后得到混合菌悬液；
54.60°C条件下，将步骤S3得到的各菌的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的浓缩上清液按照体积比为1:2:4:4的比例混合后得到混合浓缩上清液；
55.将混合菌悬液与混合浓缩上清液按照1:15的体积比混合得到灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物。
[0044]实施例5
所述脱毒剂含有如下重量份数的各组分:蒙脱石50份，膨润土 15份，灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物5份，芽孢杆菌及其发酵浓缩物8份、酵母细胞壁多糖30份。
[0045]脱毒剂制备方法:同实施例1。
[0046]其中，所述芽孢杆菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:
51.将地衣芽孢杆菌进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各发酵液中加入质量分数为0.2%的脱脂牛奶；
53.离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1%(W/V)的菌悬液；
54.50°C条件下，将步骤S3得到的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液；
55.将菌悬液与浓缩上清液按照1:9的体积比混合得到芽孢杆菌及其发酵浓缩物。
[0047]所述灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物的制备方法包括以下步骤:51.将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别进行发酵培养；
52.发酵结束后，向各自的发酵液中加入质量分数为0.1%的脱脂牛奶；
53.将各发酵液热灭活后，离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1% (W/V)的菌悬液；然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的菌悬液按照体积比为1:3:2:4的比例混合后得到混合菌悬液；
54.55°C条件下，将步骤S3得到的各菌的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的浓缩上清液按照体积比为1:2:4:4的比例混合后得到混合浓缩上清液；
55.将混合菌悬液与混合浓缩上清液按照1:15的体积比混合得到灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物。
[0048]试验例I
取实施例1~5中所述的霉菌毒素脱毒剂0.005g加入到0.5g饲料(加入有AFB1 50ng)中，将上述饲料与脱毒剂混合均匀后，加入IOmL的蒸馏水，至于30°C，200r/min的条件下震荡Ih后，3000r/min的高速离心机离心，取上清液测定黄曲霉毒素的含量。
[0049]试验例2
取实施例1~5中所述的霉菌毒素脱毒剂0.005g加入到0.5g饲料(加入有玉米赤霉烯酮30ng)中，将上述饲料与脱毒剂混合均匀后,加入IOmL的蒸懼水,至于30°C, 200r/min的条件下震荡Ih后，3000r/min的高速离心机离心,取上清液测定玉米赤霉烯酮的含量。
[0050]试验例3
取实施例1~5中所述的霉菌毒素脱毒剂0.005g加入到0.5g饲料(加入有呕吐毒素IOOng)中，将上述饲料与脱毒剂混合均匀后，加入IOmL的蒸馏水，至于30°C，200r/min的条件下震荡Ih后，3000r/min的高速离心机离心，取上清液测定呕吐毒素的含量。
[0051]试验例I~3的结果如图1~3所示。实施例1、2、3、4、5中制备的脱毒剂分别为脱毒剂1、2、3、4、5。由图1~3结果可以看到霉菌毒素脱毒剂5对AFB1均具有脱毒效果，其中对AFBi的脱毒效果最高达到96%以上，其中对ZEA和DON的脱毒效率率也均达到60%以上。其中图1与图2中所示，脱毒剂3对AFBl和DON的毒素的吸附脱毒效率均为各组最高，从图2可知，脱毒剂3对于毒素ZEA的去除效率也高达64.3%，位于各组较高水平。因此本发明的各组脱毒剂对霉菌毒素尤其是黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素具有较好的脱毒效果，其中总体来说脱毒剂3去毒效果最好。`
[0052]试验例4
选取35±1日龄的30头健康小猪，平均体重为10.4±1.3 kg，将他们随机分成两组。一组为试验组，一组为对照组。试验组为:在猪饲料中加入2%。的实施例1所述的霉菌毒素脱毒剂，加入的比例为2 kg/t。每天测定小猪体重。观察小猪的健康状况并做出记录，连续监测20天。对照组为:该组饲喂基础日粮不添加脱毒剂。同样每天测定小猪体重。观察小猪的健康状况并做出记录，连续监测20天。结果见表1.表1霉菌毒素对小猪生长性能和致病率等影响
【权利要求】
1.一种饲料用霉菌毒素脱毒剂，其特征在于，含有如下重量份数的各组分:蒙脱石30~80份、膨润土 10~30份、芽孢杆菌及其发酵浓缩物I~15份、灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物I~15份、酵母细胞壁10~45份。
2.根据权利要求1所述霉菌毒素脱毒剂，其特征在于，所述脱毒剂含有如下重量份数的各组分:蒙脱石45份、膨润土 15份、芽孢杆菌及其发酵浓缩物5份、灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物10份、酵母细胞壁多糖25份。
3.根据权利要求1或2所述霉菌毒素脱毒剂，其特征在于，所述芽孢杆菌选自枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的一种或一种以上；所述复合乳酸菌包括保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌。
4.根据权利要求1或2所述霉菌毒素脱毒剂，其特征在于，所述芽孢杆菌及其发酵浓缩物的制备方法包括如下步骤: S1.将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的一种或一种以上进行发酵培养; S2.发酵结束后，向发酵液中加入质量分数为0.1-0.5%的保护剂； S3.离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1%(W/V)的菌悬液；将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的的菌悬液按照0-5:0-3:0-4的体积比混合得混合菌悬液，三者的体积比不能同时为零； S4.上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，将枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的浓缩上清液按照0-5:0-2:0-4的体积比混合得混合浓缩上清液，三者的体积比不能同时为零； S5.将混合菌悬液与混合浓缩上清液按照1:8~16的体积比混合得到芽孢杆菌及其发酵浓缩物。
5.根据权利要求1或2所述霉菌毒素脱毒剂，其特征在于，所述灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物的制备方法包括如下步骤: S1.将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌分别进行发酵培养； S2.发酵结束后，向各自的发酵液中加入质量分数为0.1-0.5的保护剂； S3.将各发酵液灭活后，离心收集菌体，同时得到上清液，用生理盐水将菌体稀释成1%(W/V)的菌悬液；然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的菌悬液按照体积比为广2:1-4:1-3:1-5的比例混合后得到混合菌悬液； S4.将步骤S3得到的各菌的上清液浓缩至原体积的1/10，得浓缩上清液，然后将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌的浓缩上清液按照体积比为广2:1-3:1-5:1-5的比例混合后得到混合浓缩上清液； S5.将混合菌悬液与混合浓缩上清液按照1:8~16的体积比混合得到灭活复合乳酸菌及其发酵浓缩物。
6.权利要求1至5任一项所述霉菌毒素脱毒剂在饲料脱毒中的应用。
7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述脱毒剂在饲料中的添加量为I~5kg/t，同时饲料用水的添加量为0.5~5g/kg。
【文档编号】A23L1/015GK103859165SQ201410080031
【公开日】2014年6月18日 申请日期:2014年3月6日 优先权日:2014年3月6日
【发明者】胡文锋, 胡学生, 庞旭, 潘海朋, 杨淑仪, 王丹凤, 何婷先, 胡学锋, 胡学华 申请人:苏州万生源生物科技有限公司