一种用于葡萄糖测定试剂盒的复合稳定剂的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于葡萄糖测定试剂盒的复合稳定剂，复合稳定剂包括牛血清白蛋白、海藻糖、丙三醇、表面活性剂Brij35和液体生物防腐剂Proclin300，各组分的含量为：牛血清白蛋白5~15g/L、海藻糖5~15g/L、丙三醇10~20g/L、Brij350.5~2g/L、Proclin3000.5~2g/L。通过上述方式，本发明的复合稳定剂用于葡萄糖测定试剂盒中，不仅保证了试剂盒检测结果的准确性，还能够使该试剂盒测定结果更为稳定，可有效延长试剂盒的保存时间。另外，该复合稳定剂成本低廉，配制简单，因此值得进一步推广使用。
【专利说明】一种用于葡萄糖测定试剂盒的复合稳定剂
【技术领域】
[0001] 本发明涉及体外诊断领域，特别是涉及一种用于葡萄糖测定试剂盒的复合稳定 剂。
【背景技术】
[0002] 血液中的葡萄糖是人类生命活动的必要物质，它的氧化反应放出的热量是人类生 命活动所需能量的重要来源，是人体内重要的生理指标，所以血糖必须保持一定的水平才 能维持体内各器官和组织的需要，其含量测定对临床检测具有重要意义。目前血糖的主要 检测方法有葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法。由于后者检测试剂盒成本较高，价格较贵，大部 分医疗机构首选以葡萄糖氧化酶法作为检测原理的葡萄糖测定试剂盒，但是由于该试剂盒 包含葡萄糖氧化酶和过氧化物酶，而酶活性易受到pH、温度、紫外线、重金属盐、抑制剂、激 活剂等各种因素的干扰，导致葡萄糖测定试剂盒缺乏稳定性，保存时间短，直接影响到临床 使用。
[0003] 目前关于葡萄糖测定试剂及其稳定性的报道非常有限。专利CN101571485A提 供了一种葡萄糖检测试剂盒，但未加入任何稳定剂，未对试剂盒的稳定性进行说明；专利 CN200510111883. 4提供了一种酶复合稳定剂，对单独的过氧化物酶溶液具有良好的稳定效 果，但并未提及对于成分更加复杂的试剂盒也可起到类似的稳定作用，且该稳定剂组成成 分较复杂，包含牛血清白蛋白、乙二醇二乙醚二胺四乙酸（EGTA)、1，2-二硫代苏糖醇、葡萄 糖酸钾、氯化钠 、Proclin 300、醋酸镁等，容易对检测结果产生干扰。因此研究一种配制简 单、成本低廉、对葡萄糖测定试剂盒有良好稳定效果的复合稳定剂，是非常必要的。
【发明内容】
[0004] 本发明主要解决的技术问题是提供一种用于葡萄糖测定试剂盒的复合稳定剂，该 复合稳定剂要配制简单、成本低廉且对葡萄糖测定试剂盒有良好的稳定效果。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种用于葡萄糖测 定试剂盒的复合稳定剂，所述复合稳定剂包括牛血清白蛋白、海藻糖、丙三醇、表面活性剂 Brij 35和液体生物防腐剂Proclin 300,各组分的含量为：牛血清白蛋白5?15 g/L、海藻 糖 5?15 g/L、丙三醇 10?20 g/L、Brij 35 0.5?2.0 g/L、Proclin 300 0.5?2.0 g/L。
[0006] 在本发明一个较佳实施例中，所述复合稳定剂组分的含量为：牛血清白蛋白10 g/L、海藻糖 10 g/L、丙三醇 15 g/L、表面活性剂 fcij 35 1 g/L 和 Proclin 300 1 g/L。
[0007] 在本发明一个较佳实施例中，所述复合稳定剂应用于葡萄糖测定试剂盒中，所述 葡萄糖测定试剂盒包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂的组分为：十二水磷酸氢二钠 21.488 g/L、磷酸二氢钾1.371 g/L、氯化镁0.609 g/L、4-氨基安替比林0.508 g/L，所述 第二试剂的组分为：十二水磷酸氢二钠21.488 g/L、磷酸二氢钾1.371 g/L、ESPAS 1.476 g/L、葡萄糖氧化酶20000 U/L、过氧化物酶1500 U/L。
[0008] 在本发明一个较佳实施例中，所述复合稳定剂的使用量在总胆固醇测定试剂盒中 的体积分数为1%。
[0009] 本发明的有益效果是：本发明的复合稳定剂用于葡萄糖测定试剂盒中，不仅保证 了试剂盒检测结果的准确性，还能够使该试剂盒测定结果更为稳定，可有效延长试剂盒的 保存时间。另外，该复合稳定剂成本低廉，配制简单，因此值得进一步推广使用。
【具体实施方式】
[0010] 下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施 例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通 技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范 围。
[0011] 本发明以下实施例中涉及的仪器有：uv Blue Star紫外分光光度计1台（北京莱 伯泰科仪器有限公司，亦或者其它品牌）；恒温数显水浴锅1台（上海梅香仪器有限公司，亦 或者其它品牌)。
[0012] 实施例1 : 提供一种用于葡萄糖测定试剂盒的复合稳定剂，所述复合稳定剂组分的含量为：牛血 清白蛋白10 g/L、海藻糖10 g/L、丙三醇15 g/L、表面活性剂Brij 35 1 g/L和Proclin 300 1 g/L，将上述各组分充分溶解、混合后，即可制得一种液体复合稳定剂成品。
[0013] 将实施例1应用于葡萄糖测定试剂盒，并从稳定效期和使用量两方面进行评价。
[0014] (一）稳定效期试验 1、材料准备：配制实施例1所述复合稳定剂； 配制葡萄糖测定试剂盒，由试剂1和试剂2组成，组分如下： 试剂1:十二水磷酸氢二钠21.488 g/L、磷酸二氢钾1.371 g/L、氯化镁0.609 g/L、 4-氨基安替比林0.508 g/L; 试剂2:十二水磷酸氢二钠21.488 g/L、磷酸二氢钾1.371 g/L、ESPAS 1.476 g/L、葡 萄糖氧化酶20000 U/L、过氧化物酶1500 U/L。
[0015] 2、测定方法 按实施例1配制复合稳定剂，按1%(ν/ν)的量加入葡萄糖测定试剂盒中(试剂1和试剂 2均按此量添加)，与不添加复合稳定剂的葡萄糖测定试剂盒分别测定样本中葡萄糖含量。 本试验以英国朗道质控血清水平2 (质控2)和质控血清水平3 (质控3)为样本，标准品另 购，采用紫外可见分光光度计进行检测，设一个空白测试、一个标准测试、两个样本测试(空 白测试以蒸馏水代替样本)。样本与试剂1和试剂2的比例为：15yL : lOOOyL : 500yL， 设定的主波长为505nm、副波长为660nm，样本与试剂1混勻后，37°C孵育3. 5min，读取各 管吸光度A1，加入试剂2混匀后反应5min，读取吸光度A2,每管的吸光度变化Λ A=A2-A1， 扣除试剂空白后计算出样本、标准品的吸光度变化值Λ ，然后根据公式葡萄糖 (mg/dUzAAi^/AA^^X Cs?l计算出样本中葡萄糖含量（Cs?l为标准品浓度)。质控2 葡萄糖的靶值为lllmg/dL，质控3葡萄糖的靶值为281mg/dL，允许偏差范围在±10%。
[0016] 根据以上测定方法，以同批次同瓶装的质控血清2、质控血清3作为检测样本，分 别用添加1% (V/V)复合稳定剂的葡萄糖测定试剂盒和不添加复合稳定剂的葡萄糖测定试 剂盒进行检测，每7天检测一次，检测周期50天，计算得到测定结果的标准偏差（SD)和有 效期天数，标准偏差这项可反映测定结果的稳定性。
[0017] 3、测定结果 稳定效期试验结果数据详见下表。
【权利要求】
1. 一种用于葡萄糖测定试剂盒的复合稳定剂，其特征在于，所述复合稳定剂包括牛血 清白蛋白、海藻糖、丙三醇、表面活性剂Brij 35和液体生物防腐剂Proclin 300,各组分的 含量为：牛血清白蛋白5?15 g/L、海藻糖5?15 g/L、丙三醇1(Γ20 g/L、Brij 35 0.5?2.0 g/L、Proclin 300 0.5?2.0 g/L。
2. 根据权利要求1所述的复合稳定剂，其特征在于，所述复合稳定剂组分的含量为： 牛血清白蛋白10 g/L、海藻糖10 g/L、丙三醇15 g/L、表面活性剂Brij 35 1 g/L和 Proclin 300 1 g/L。
3. 根据权利要求1所述的复合稳定剂，其特征在于，所述复合稳定剂应用于葡萄糖测 定试剂盒中，所述葡萄糖测定试剂盒包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂的组分为： 十二水磷酸氢二钠2L 488 g/L、磷酸二氢钾L 371 g/L、氯化镁0.609 g/L、4-氨基安 替比林0.508 g/L，所述第二试剂的组分为：十二水磷酸氢二钠21.488 g/L、磷酸二氢钾 1.371 g/L、N-乙基-N- (3-磺丙基）-3-甲氧基苯胺钠盐（ESPAS) 1.476 g/L、葡萄糖氧化 酶20000 U/L、过氧化物酶1500 U/L。
4. 根据权利要求1所述的复合稳定剂，其特征在于，所述复合稳定剂的使用量在总胆 固醇测定试剂盒中的体积分数为1%。
【文档编号】C12Q1/54GK104195221SQ201410404619
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年8月18日 优先权日:2014年8月18日
【发明者】杨灵勇, 周丽霞 申请人:苏州康铭诚业医用科技有限公司