一种HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒的制作方法
【专利摘要】一种HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒，包括盒体和位于盒体上方的盒盖，盒体具有容置腔，还包括固定座和海绵垫，所述固定座容置在上述容置腔内并纵向开设有6个容置孔和1个容置槽，6个所述容置孔的孔腔内分别容置有HMGA2-R引物试剂管、HMGA2-C引物试剂管、HMGA2-F1引物试剂管、HMGA2-F2引物试剂管、HMGA2-Taqman管和阳性对照质粒管；所述容置槽的槽腔内容置有PCR缓冲液试剂瓶；6个所述容置孔的孔腔的底部、所述容置槽的槽腔的底部分别铺设有所述的海绵垫；盒盖的一侧与盒体的开口处转动连接，另一侧向下弯折形成连接部，所述连接部朝向盒体的侧壁设有金属部件，相应的，所述盒体的侧壁对应金属部件处设有磁性部件；盒盖与盒体之间还设有密封条。本ARMS-qPCR检测试剂盒结构简单、密封性强。
【专利说明】-种HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒
【技术领域】
[OOOU 本实用新型设及一种检测试剂盒，尤其设及一种HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检 测试剂盒。
【背景技术】
[0002] 有研究表明：一个被命名为HMGA2的基因影响大脑智力（stein et al. 2012)。 HMGA2基因 rsl0784502位点基因型的不同会显著地影响大脑的脑容量。rsl0784502C/C基 因型人群的脑容量显著地大于C/T W及T/T型人群的脑容量。研究发现，脑容量的大小与 人类智力呈正相关。因此，HMGA2基因 rsl0784502不同的基因型是一个极好的智力预测指 标，对于我们国家优生优育W及儿童的培养具有重要的价值。
[000引可用于HMGA2基因 rsl0784502分型的技术很多，包括如DNA直接测序法、杂交巧 片法、焦磯酸测序法化及变性高效液相色谱法等。其中，DNA测序法为基因分型的金标准， 该方法存在如下缺点：检测的灵敏度不高，只有大于15%的突变才能检测到；费时，操作复 杂，对操作人员要求高；非闭管操作，设及PCR扩增后的操作，因此易被污染，造成结果的不 理想；通量太小，一次最多只能做24个，很难大规模开展。
[0004] 参考文献
[0005] Stein et al. 2012Identification of common variants associated with human hippocampal and intracranial volumes. Nature Genetics. 44 ;552-562 实用新型内容
[0006] 本实用新型所要解决的技术问题是针对技术现状提供一种密封性良好的HMGA2 基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒。
[0007] 本实用新型解决上述技术问题所采用的技术方案为；一种HMGA2基因分型的 ARMS-qPCR检测试剂盒，包括盒体和位于盒体上方的盒盖，所述盒体具有容置腔，还包括固 定座和海绵垫，所述固定座容置在上述容置腔内并纵向开设有6个容置孔和1个容置槽，6 个所述容置孔的孔腔内分别容置有HMGA2-R引物试剂管、HMGA2-C引物试剂管、HMGA2-F1引 物试剂管、HMGA2-巧引物试剂管、歷642-化9111311管和阳性对照质粒管；所述容置槽的槽腔 内容置有PCR缓冲液试剂瓶；6个所述容置孔的孔腔的底部、所述容置槽的槽腔的底部分别 铺设有所述的海绵垫；
[000引所述盒盖的一侧与盒体的开口处转动连接，另一侧向下弯折形成连接部，所述连 接部朝向盒体的侧壁设有金属部件，相应的，所述盒体的侧壁对应金属部件处设有磁性部 件；
[0009] 所述盒盖与盒体之间设有密封条，所述密封条紧固设置在盒盖与盒体开口端相接 触的端面并与盒体的容置腔的上端面相匹配。
[0010] 作为改进，HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒还包括备用容置槽，所述备用 容置槽的槽腔内容置有装有PCR缓冲液备用试剂瓶，所述备用容置槽的槽腔底部铺设有海 绵垫，所述备用容置槽与容置槽并列排布在固定座上。
[0011] 优选的，6个所述容置孔在固定座上分两排平行排列。
[0012] 优选的，6个所述容置孔分别为能容纳1. 5m化P管的孔洞，相应的，所述HMGA2-R 引物试剂管、HMGA2-C引物试剂管、HMGA2-F1引物试剂管、HMGA2-F2引物试剂管、 HMGA2-化qman管和阳性对照质粒管分别采用1. 5m化P管。
[0013] 优选的，所述金属部件为铁片，所述磁性部件为磁铁块。
[0014] 作为改进，所述磁性部件外凸地设置在盒盖的侧壁，所述连接部设置金属部件处 开设有凹槽，所述金属部件设置在该凹槽的槽底，在所述金属部件与磁性部件吸附在一起 的状态下，所述磁性部件完全容置在该凹槽的容置空间内。
[0015] 与现有技术相比，本实用新型的优点在于；本ARMS-qPCR检测试剂盒在盒盖和盒 体的连接处设置了磁性锁合机构（即金属部件和磁性部件），可W保证在盒盖与盒体闭合 时，保持密封状态，方便移动和运输；同时，盒盖与盒体之间设置了密封条，进一步增强了密 封性；另外，本ARMS-qPCR检测试剂盒在HMGA2rsl0918859位基因分型时具有敏感性高、特 异性强、耗时短等优点；此外，容置孔的孔槽与容置槽的槽腔底部都铺设有海绵垫，可W避 免试剂管与试剂瓶的底部磕碰破损，保证了各个容器的安全。
[0016] 本ARMS-qPCR检测试剂盒适用于HMGA2基因分型，其结构简单、设计合理、使用方 便、容易制造，且检测过程不易受污染其即保证了试剂盒密封性、安全性，又方便运输，可W 在给HMGA2基因分型时方便实验人员操作，提高了工作效率。
【专利附图】
【附图说明】
[0017] 图1为本实用新型实施例ARMS-qPCR检测试剂盒的结构示意图。
【具体实施方式】
[0018] W下结合附图实施例对本实用新型作进一步详细描述。
[0019] 本实施例的HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒，如图1所示，包括盒体1和 位于盒体1上方的盒盖2,盒体1为上端开口的中空的立方体盒体1，其具有容置腔。盒盖 2的一侧边与盒体1的开口端的一侧壁的顶端转动连接，例如较接或者通过一层膜连接，而 盒盖2的相对的一侧通过磁性锁合机构与盒体1连接。盒体1与盒盖2的具体连接方式为： 盒盖2的一侧与盒体1的开口处转动连接，另一侧向下弯折形成连接部11，连接部11朝向 盒体1的侧壁设有金属部件12-一铁片，相应的，盒体1的侧壁对应金属部件12处设有磁 性部件13-一磁铁块。磁铁块的位置应使盒盖2盖合在盒体1上，且盒盖2的连接部11贴 合在盒体1的侧壁上，该磁铁块正好与连接部11上的铁片相对应并吸合。
[0020] 本实施例的盒盖2与盒体1的连接方式可W保证在盒盖2与盒体1闭合时，保持 密封状态，W方便移动和运输。
[0021] 为了进一步增强本试剂盒的密封性，磁性部件13外凸地设置在盒盖2的侧壁，同 时，连接部11上设置金属部件12的内壁处开设有凹槽，而金属部件12固定在该凹槽的槽 底，当金属部件12与磁性部件13吸附在一起时，磁性部件13完全容置在该凹槽的容置空 间内。此时，因磁性部件13完成容置在了凹槽内，使得盒盖2和盒体1盖合时，盒盖2与盒 体1间无缝隙，增强了密封性。
[0022] 为了更进一步增强本实施例检测试剂盒的密封性，盒盖2与盒体1之间设有密封 条14,密封条14紧固设置在盒盖2与盒体1开口端相接触的端面并与盒体1的容置腔的上 端面相匹配，即密封条14固定（例如粘贴）在盒盖2的下端面，当盒盖2与盒体1闭合时， 密封条14恰好位于盒体1容置腔的上端面上，密封条14的形状为与容置腔相匹配的四边 形。
[002引本实施例的HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒还包括固定座15和海绵垫， 固定座15容置在盒体1容置腔内并纵向开设有6个容置孔、1个容置槽和1个备用容置槽， 6个容置孔的孔腔内分别容置有HMGA2-R引物试剂管4、HMGA2-C引物试剂管3、HMGA2-F1 引物试剂管5、HMGA2-巧引物试剂管6、歷642-化9111311管8和阳性对照质粒管7 ;容置槽的 槽腔内容置有PCR缓冲液试剂瓶10，备用容置槽的槽腔内容置有PCR缓冲液备用试剂瓶9。
[0024] 为了防止在运输过程中，试剂管、试剂瓶与盒体1或固定座15碰撞而破损，6个 容置孔的孔腔的底部、容置槽的槽腔的底部W及备用容置槽的槽腔的底部分别铺设有海绵 垫。在本实施例中，容置孔、容置槽和备用容置槽都是具有底部的空腔式结构，每个孔腔、槽 腔底部分别铺设有海绵垫，该样可W防止发生碰撞，对试剂管、试剂瓶能起到更好的保护和 缓冲作用，W保证各个容器的安全。
[0025] 当然，容置孔、容置槽和备用容置槽可W设计成没底的穿孔式结构，此时海绵垫可 W为一整块，其具体铺设在盒体1内固定座15下方的容置腔内。
[0026] 为了使得本实施例的ARMS-qPCR检测试剂盒结构更加整齐，6个容置孔在固定座 15上分两排平行排列，而备用容置槽与容置槽并列排布在固定座15上并位于容置孔的右 侦U，其中容置槽位于上方。位于上排的3个容置孔内从左至右分别放置HMGA2-C引物试剂 管3、HMGA2-F2引物试剂管6和阳性对照质粒管7,位于下排的3个容置孔内从左至右分别 放置HMGA2-R引物试剂管4、HMGA2-F1引物试剂管5和歷642-化9111311管8。该种排布格 局是根据使用本检测试剂盒来进行HMGA2基因分型时的操作步骤来设计的，可W使得检测 时，操作人员能有条理、有规律地选择相应的试剂。
[0027] 6个容置孔分别为能容纳1. 5m化P管（即离屯、管）的孔洞，相应的，HMGA2-R引 物试剂管4、HMGA2-C引物试剂管3、HMGA2-F1引物试剂管5、HMGA2-F2引物试剂管6、 HMGA2-化qman管8和阳性对照质粒管7分别采用1. 5m化P管。
[002引 6个容置孔中放置的EP管中分别装有浓度为10 ymol/L的如下引物：
[0029] HMGA2-R ;5' -CATTTTGCAGTCCGTCCCAC-3，
[0030] HMGA2-C ;5> -TCATTAGTTGTGAGAGAAGT-3>
[0031] HMGA2-F1 ;5, -CACATCCACTTGGATGTCTGC-3，
[0032] HMGA2-F2 ;5, -CACATCCACTTGGATGTCTGT-3，
[0033] 另外，PCR缓冲液试剂瓶10、PCR缓冲液备用试剂瓶9中盛装的PCR反应缓冲 酶液混合物包括浓度为 0. 4mmol/L 的 dNTPs，5mmol/L 的 Mg"，2xPCR Buffer, 1U/25 y L Goldstar Best "Tag。歷642-化911脚1管8中装有通用"Tagman探针，序列为；歷642-化911脚1 ; 5' -FAM-GCATGTATACGGAGCAATTG-3'，阳性对照质粒管7中装有阳性对照质粒。
[0034] 使用本实施例的ARMS-qPCR检测试剂盒进行HMGA2基因分型的操作方法如下；
[00对 1)取模板DNA
[0036] 取病人全血1血，常规提取DNA，取1 y LDNA作为模板。
[0037]。反应体系
[003引将各反应物质按照如下反应体系进行配比；
[0039] 反应体系为20 y 1，包括qPCR混合液10 y 1，参照引物或者ARMS引物各0. 5 y 1 (终 浓度0. 5 y M/L)，模板1 y 1 (10化g)，其余用(1化0补齐。
[0040]
【权利要求】
1. 一种HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒，包括盒体（1)和位于盒体（1)上方 的盒盖（2)，所述盒体（1)具有容置腔，其特征在于：还包括固定座（15)和海绵垫，所述固 定座（15)容置在上述容置腔内并纵向开设有6个容置孔和1个容置槽，6个所述容置孔的 孔腔内分别容置有HMGA2-R引物试剂管（4)、HMGA2-C引物试剂管（3)、HMGA2-F1引物试剂 管（5)、HMGA2-F2引物试剂管（6)、HMGA2-Taqman管⑶和阳性对照质粒管（7);所述容置 槽的槽腔内容置有PCR缓冲液试剂瓶（10) ;6个所述容置孔的孔腔的底部、所述容置槽的槽 腔的底部分别铺设有所述的海绵垫； 所述盒盖（2)的一侧与盒体（1)的开口处转动连接，另一侧向下弯折形成连接部（11)， 所述连接部（11)朝向盒体（1)的侧壁设有金属部件（12)，相应的，所述盒体（1)的侧壁对 应金属部件（12)处设有磁性部件（13); 所述盒盖（2)与盒体（1)之间设有密封条（14)，所述密封条（14)紧固设置在盒盖（2) 与盒体（1)开口端相接触的端面并与盒体（1)的容置腔的上端面相匹配。
2. 根据权利要求1所述的HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒，其特征在于：还 包括备用容置槽，所述备用容置槽的槽腔内容置有PCR缓冲液备用试剂瓶（9)，所述备用容 置槽的槽腔底部铺设有海绵垫，所述备用容置槽与容置槽并列排布在固定座（15)上。
3. 根据权利要求1所述的HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒，其特征在于：6个 所述容置孔在固定座（15)上分两排平行排列。
4. 根据权利要求1所述的HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒，其特征在 于：6个所述容置孔分别为能容纳1. 5mlEP管的孔洞，相应的，所述HMGA2-R引物试剂 管（4)、HMGA2-C引物试剂管（3)、HMGA2-F1引物试剂管（5)、HMGA2-F2引物试剂管（6)、 HMGA2-Taqman管（8)和阳性对照质粒管（7)分别采用1.5mlEP管。
5. 根据权利要求1所述的HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒，其特征在于：所 述金属部件（12)为铁片，所述磁性部件（13)为磁铁块。
6. 根据权利要求1所述的HMGA2基因分型的ARMS-qPCR检测试剂盒，其特征在于：所 述磁性部件（13)外凸地设置在盒盖（2)的侧壁，所述连接部（11)设置金属部件（12)处开 设有凹槽，所述金属部件（12)设置在该凹槽的槽底，在所述金属部件（12)与磁性部件（13) 吸附在一起的状态下，所述磁性部件（13)完全容置在该凹槽的容置空间内。
【文档编号】C12M1/34GK204185490SQ201420642727
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年10月31日 优先权日:2014年10月31日
【发明者】张道允, 巩子英, 张恒, 罗坚诚, 贾宁 申请人:江苏所罗门兄弟医学科技有限公司