一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法，该方法，将生淀粉用缓冲液调浆成醪液；将淀粉酶和糖化酶的混合酶加入到醪液中，反应，将反应后醪液离心，所得沉淀物热风干燥，粉碎，得到混合物A；将嗜酸乳杆菌活化，扩大培养，接种到发酵液体培养基中，厌氧培养18?20h，得到嗜酸乳杆菌培养液；取黄精、芡实和赤小豆，超微粉碎，煎煮，浓缩，得浓缩液；将浓缩液加入到嗜酸乳杆菌培养液中，继续厌氧培养3?4h，得到嗜酸乳杆菌发酵液；向发酵液中混合物A，搅拌，离心收集沉淀物；在所得沉淀物中加入碳酸钙或氯化钙后，制成颗粒料；将颗粒料，热风干燥，即制备出嗜酸乳杆菌饲料添加剂。本发明饲料添加剂含水量低，活菌数为160?390亿/g。
【专利说明】
一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种饲料添加剂，具体的说是一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方 法。
【背景技术】
[0002] 嗜酸乳杆菌属于乳杆菌属，革兰氏阳性杆菌，杆的末端呈圆形，主要存在小肠中， 释放乳酸，乙酸和一些对有害菌起作用的抗菌素，但是抑菌作用比较弱。嗜酸乳杆菌不仅在 胃中，它还是人体小肠内的主要益生菌。在胃中能存活的致病菌的胃部是个小型〃消毒车 间"，这是由于胃液具有很强的酸性。嗜酸乳杆菌调整肠道菌群平衡，抑制肠道不良微生物 的增殖。嗜酸乳杆菌对致病微生物具有拮抗作用。嗜酸乳杆菌能分泌抗生物素类物质(嗜酸 乳菌素(8(^(1〇1；[11)、嗜酸杆菌素(3(^(10卩11；[1；[11)、乳酸菌素（1361：0(^(1011)，对肠道致病菌产 生的拮抗作用。因此，将高活性嗜酸乳杆菌做成饲料添加剂，对家禽、家畜的生长均有较好 的促进作用，然而目前技术上存在活性低，含菌量少等等技术缺陷。
【发明内容】
[0003] 本发明目的是为解决上述技术问题的不足，提供一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制 备方法，其具有方法简单，所制备的嗜酸乳杆菌饲料添加剂含水量为4.0-6.5%，活菌数为 160-390亿/g，添加剂保存两年嗜酸乳杆菌仍然能保存96-98%菌种活性。
[0004] -种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤： 步骤一、将生淀粉用pH值4.6的缓冲液调浆，成生淀粉质量浓度为40-55%的醪液;将淀 粉酶和糖化酶按质量比1:4比例进行混合，得到混合酶;按照混合酶的质量为醪液质量的 1.5-2%，将混合酶加入到醪液中，混合均匀后，置于50-55°(：下反应16-3011，调整?!1值为4.5-4.7，得到反应后醪液;将反应后醪液4000-5000rpm离心15-20min，所得沉淀物在50-60 °C热 风干燥，粉碎至80-160目，得到混合物A，备用； 步骤二、将嗜酸乳杆菌冻干菌粉采用质量百分比为9-12%灭菌脱脂乳水溶液，37°C的温 度下活化3次;活化后的嗜酸乳杆菌划线接种至MRS固体培养基;37°C培养24-32 h，长出单 个菌落后，采用接种环取1-2环接种至50-100mL的MRS液体培养基中，37°C的温度下进行扩 大培养24-32 h，得到扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液，备用； 步骤三、按照重量份数取黄精1-8份、芡实6-7份和赤小豆3-5份，置于超微粉碎机中进 行超微粉碎，过60-80目筛，在所得中药粉末中添加其重量15-25倍的水，浸泡5-8小时，然后 置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎2-3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液 进行5-6倍浓缩，得到浓缩液，备用； 步骤四、将扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液接种到发酵液体培养基中，接种量为发酵液体 培养基质量的3%_5%，37°C的温度下厌氧培养，18-20h，得到嗜酸乳杆菌培养液;在嗜酸乳杆 菌培养液中加入其体积2%_3%的浓缩液，37°C的温度下继续厌氧培养3-4h，得到嗜酸乳杆菌 发酵液； 所述发酵液体培养基中各成分的质量百分比含量为：1.5-3%乳清粉，1.5%牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸镁，0.025 %硫酸锰，0.22 %乙酸钠和0.2 %磷酸氢二钾，余量为 水，pH值为5.8; 步骤五、向培养的嗜酸乳杆菌发酵液中加入其质量1-10%的混合物A，在20-25Γ下， 180-220rpm搅拌30-60min，然后10000-15000rpm离心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其 质量0.5-1.5%的碳酸钙或氯化钙，混合均匀，采用制粒机将其制备成粒度大小为20-40目的 颗粒料； 步骤六、将所制备的颗粒料在低温热风沸腾干燥机中，用40-55Γ热风进行干燥，颗粒 料在低温热风沸腾干燥机中停留10_20min，即制备出嗜酸乳杆菌饲料添加剂。
[0005] 所述pH值4.6的缓冲液优选为磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液或醋酸-醋酸钠缓冲液。
[0006] 有益效果是： 1、本发明嗜酸乳杆菌饲料添加剂，针对嗜酸乳杆菌菌体特点，利用本发明中的混合物A 对乳酸菌进行包埋；因包埋菌种自生的差异，不同的包埋原料和包埋工艺，对菌种的保护效 果千差万别。本发明与其他的包埋体相比，具有耐热性好、硬度大和安全性好等优点，且保 护效果好;结合各步骤中中药成分的添加，可增加菌种活性，延长其保持活性的周期，使所 制备的菌粉活菌数在160-390亿/g，保存两年仍然能保存95%菌种活性。
[0007] 2、本发明工艺中各步骤的有机结合，保证采用的原料中药与饲用枯草芽孢杆菌相 互作用，最终使所制备的饲料添加剂适用于各种动物，包括家禽，家畜等，可促进动物肠胃 对营养物质的吸收，可促进动物健康快速生长。实验验证，本发明饲料添加剂在饲料中添加 后，可明显提高动物机体的抗病性，加快动物生长速度。且本发明饲料添加剂不含防腐剂， 对畜体无损害，具有广阔的市场应用前景。
【具体实施方式】
[0008] 一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤： 步骤一、将生淀粉用pH值4.6的缓冲液调浆，成生淀粉质量浓度为40-55%的醪液;将淀 粉酶和糖化酶按质量比1:4比例进行混合，得到混合酶;按照混合酶的质量为醪液质量的 1.5-2%，将混合酶加入到醪液中，混合均匀后，置于50-55°(：下反应16-3011，调整?!1值为4.5-4.7，得到反应后醪液;将反应后醪液4000-5000rpm离心15-20min，所得沉淀物在50-60 °C热 风干燥，粉碎至80-160目，得到混合物A，备用； 步骤二、将嗜酸乳杆菌冻干菌粉采用质量百分比为9-12%灭菌脱脂乳水溶液，37°C的温 度下活化3次;活化后的嗜酸乳杆菌划线接种至MRS固体培养基;37°C培养24-32 h，长出单 个菌落后，采用接种环取1-2环接种至50-100mL的MRS液体培养基中，37°C的温度下进行扩 大培养24-32 h，得到扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液，备用； 步骤三、按照重量份数取黄精1-8份、芡实6-7份和赤小豆3-5份，置于超微粉碎机中进 行超微粉碎，过60-80目筛，在所得中药粉末中添加其重量15-25倍的水，浸泡5-8小时，然后 置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎2-3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液 进行5-6倍浓缩，得到浓缩液，备用； 步骤四、将扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液接种到发酵液体培养基中，接种量为发酵液体 培养基质量的3%_5%，37°C的温度下厌氧培养，18-20h，得到嗜酸乳杆菌培养液;在嗜酸乳杆 菌培养液中加入其体积2%-3%的浓缩液，37°C的温度下继续厌氧培养3-4h，得到嗜酸乳杆菌 发酵液； 所述发酵液体培养基中各成分的质量百分比含量为：1.5-3%乳清粉，1.5%牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸镁，0.025 %硫酸锰，0.22 %乙酸钠和0.2 %磷酸氢二钾，余量为 水，pH值为5.8; 步骤五、向培养的嗜酸乳杆菌发酵液中加入其质量1-10%的混合物A，在20-25Γ下， 180-220rpm搅拌30-60min，然后10000-15000rpm离心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其 质量0.5-1.5%的碳酸钙或氯化钙，混合均匀，采用制粒机将其制备成粒度大小为20-40目的 颗粒料； 步骤六、将所制备的颗粒料在低温热风沸腾干燥机中，用40-55Γ热风进行干燥，颗粒 料在低温热风沸腾干燥机中停留10_20min，即制备出嗜酸乳杆菌饲料添加剂。
[0009] 所述pH值4.6的缓冲液优选为磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液或醋酸-醋酸钠缓冲液。
[0010] 实施例1 一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤： 步骤一、将生淀粉用pH值4.6的磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液调浆成生淀粉质量浓度为 40%的醪液;将淀粉酶和糖化酶按质量比1:4比例进行混合，得到混合酶;按照混合酶的质量 为醪液质量的1.5%，将混合酶加入到醪液中，混合均匀后，置于50°C下反应16-30h，调整pH 值为4.5，得到反应后醪液;将反应后醪液4000rpm离心20min，所得沉淀物在50 °C热风干燥， 粉碎至80目，得到混合物A，备用； 步骤二、将嗜酸乳杆菌冻干菌粉采用质量百分比为9%灭菌脱脂乳水溶液，37°C的温度 下活化3次;活化后的嗜酸乳杆菌划线接种至MRS固体培养基;37°C培养24 h，长出单个菌落 后，采用接种环取1环接种至50mL的MRS液体培养基中，37 °C的温度下进行扩大培养24h，得 到扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液； 步骤三、按照重量份数取黄精1份、芡实6份和赤小豆3份，置于超微粉碎机中进行超微 粉碎，过60目筛，在所得中药粉末中添加其重量15倍的水，浸泡5小时，然后置于容器中煎 煮，先煮沸腾半小时再文火煎2小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行5倍浓缩，得 到浓缩液，备用； 步骤四、将扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液接种到发酵液体培养基中，接种量为发酵液体 培养基质量的3%，37°C的温度下厌氧培养，18h，得到嗜酸乳杆菌培养液;在嗜酸乳杆菌培养 液中加入其体积2%_3%的浓缩液，37°C的温度下继续厌氧培养3-4h，得到嗜酸乳杆菌发酵 液； 所述发酵液体培养基中各成分的质量百分比含量为：1.5%乳清粉，1.5%牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸镁，0.025 %硫酸锰，0.22 %乙酸钠和0.2 %磷酸氢二钾，余量为 水，pH值为5.8; 步骤五、向培养的嗜酸乳杆菌发酵液中加入其质量1%的混合物A，在20°C下，180rpm搅 拌30min，然后lOOOOrpm离心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其质量0.5-1.5%的碳酸f丐或 氯化钙，混合均匀，采用制粒机将其制备成粒度大小为20-40目的颗粒料； 步骤六、将所制备的颗粒料在低温热风沸腾干燥机中，用40°C热风进行干燥，颗粒料在 低温热风沸腾干燥机中停留l〇min，即制备出嗜酸乳杆菌饲料添加剂。
[0011] 所制备的嗜酸乳杆菌饲料添加剂含水量为6.5%，活菌数为160亿/g，添加剂保存两 年嗜酸乳杆菌仍然能保存96%菌种活性。
[0012] 实施例2 一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤： 步骤一、将生淀粉用pH值4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液调浆成生淀粉浓度为55%(W/V)的醪 液;将淀粉酶和糖化酶按质量比1:4比例进行混合，得到混合酶;按照混合酶的质量为醪液 质量的2%，将混合酶加入到醪液中，混合均匀后，置于55°C下反应30h，调整pH值为4.7,得到 反应后醪液;将反应后醪液5000rpm离心20min，所得沉淀物在60 °C热风干燥，粉碎至160目， 得到混合物A，备用； 步骤二、将嗜酸乳杆菌冻干菌粉采用质量百分比为12%灭菌脱脂乳水溶液，37°C的温度 下活化3次;活化后的嗜酸乳杆菌划线接种至MRS固体培养基;37°C培养32 h，长出单个菌落 后，采用接种环取2环接种至100mL的MRS液体培养基中，37°C的温度下进行扩大培养32 h， 得到扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液；所述发酵液体培养基中各成分的质量百分比含量为： 3%乳清粉，1.5%牛肉膏，1.5%蛋白胨，0.058%硫酸镁，0.025%硫酸锰，0.22%乙酸钠和 0.2 %磷酸氢二钾，余量为水，pH值为5.8; 步骤三、按照重量份数取黄精8份、芡实7份和赤小豆5份，置于超微粉碎机中进行超微 粉碎，过80目筛，在所得中药粉末中添加其重量25倍的水，浸泡8小时，然后置于容器中煎 煮，先煮沸腾半小时再文火煎3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行6倍浓缩，得 到浓缩液，备用； 步骤四、将扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液接种到发酵液体培养基中，接种量为发酵液体 培养基质量的5%，37°C的温度下厌氧培养，20h，得到嗜酸乳杆菌培养液;在嗜酸乳杆菌培 养液中加入其体积3%的浓缩液，37 °C的温度下继续厌氧培养4h，得到嗜酸乳杆菌发酵液； 步骤五、向培养的嗜酸乳杆菌发酵液中加入其质量10%的混合物A，在25°C下，220rpm 搅拌60min，然后15000rpm离心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其质量1.5%的碳酸|丐或氯 化钙，混合均匀，采用制粒机将其制备成粒度大小为40目的颗粒料； 步骤六、将所制备的颗粒料在低温热风沸腾干燥机中，用55°C热风进行干燥，颗粒料在 低温热风沸腾干燥机中停留20min，即制备出嗜酸乳杆菌饲料添加剂。
[0013] 所制备的嗜酸乳杆菌饲料添加剂含水量为4.0%，活菌数为300亿/g，添加剂保存两 年嗜酸乳杆菌仍然能保存97%菌种活性。
[0014] 实施例3 一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤： 步骤一、将生淀粉用pH值4.6的磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液调浆成生淀粉浓度为45%(W/ V)的醪液;将淀粉酶和糖化酶按质量比1:4比例进行混合，得到混合酶;按照混合酶的质量 为醪液质量的1.8%，将混合酶加入到醪液中，混合均匀后，置于52°C下反应20h，调整pH值为 4.6，得到反应后醪液;将反应后醪液4500rpm离心18min，所得沉淀物在55 °C热风干燥，粉碎 至100目，得到混合物A，备用； 步骤二、将嗜酸乳杆菌冻干菌粉采用质量百分比为10%灭菌脱脂乳水溶液，37°C的温度 下活化3次;活化后的嗜酸乳杆菌划线接种至MRS固体培养基;37°C培养30h，长出单个菌落 后，采用接种环取2环接种至80mL的MRS液体培养基中，37 °C的温度下进行扩大培养30h，得 到扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液； 所述发酵液体培养基中各成分的质量百分比含量为:2%乳清粉，1.5%牛肉膏，1.5% 蛋白胨，0.058 %硫酸镁，0.025 %硫酸锰，0.22 %乙酸钠和0.2 %磷酸氢二钾，余量为水，pH 值为5.8; 步骤三、按照重量份数取黄精5份、芡实6.5份和赤小豆4份，置于超微粉碎机中进行超 微粉碎，过70目筛，在所得中药粉末中添加其重量20倍的水，浸泡6小时，然后置于容器中煎 煮，先煮沸腾半小时再文火煎2.6小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行5.5倍浓 缩，得到浓缩液，备用； 步骤四、将扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液接种到发酵液体培养基中，接种量为发酵液体 培养基质量的4%，37°C的温度下厌氧培养，19h，得到嗜酸乳杆菌培养液;在嗜酸乳杆菌培养 液中加入其体积2.5%的浓缩液，37 °C的温度下继续厌氧培养3.5h，得到嗜酸乳杆菌发酵液； 步骤五、向培养的嗜酸乳杆菌发酵液中加入其质量8%的混合物A，在22°C下，200rpm搅 拌50min，然后12000rpm离心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其质量1.0%的碳酸|丐或氯化 钙，混合均匀，采用制粒机将其制备成粒度大小为30目的颗粒料； 步骤六、将所制备的颗粒料在低温热风沸腾干燥机中，用45°C热风进行干燥，颗粒料在 低温热风沸腾干燥机中停留15min，即制备出嗜酸乳杆菌饲料添加剂。
[0015] 所制备的嗜酸乳杆菌饲料添加剂含水量为5.6%，活菌数为390亿/g，添加剂保存两 年嗜酸乳杆菌仍然能保存98%菌种活性。
[0016] 实施例4 一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤： 步骤一、将生淀粉用pH值4.6的缓冲液调浆，成生淀粉质量浓度为45%的醪液;将淀粉酶 和糖化酶按质量比1:4比例进行混合，得到混合酶;按照混合酶的质量为醪液质量的1.7%， 将混合酶加入到醪液中，混合均匀后，置于52°C下反应16-30h，调整pH值为4.6,得到反应后 醪液;将反应后醪液4500rpm离心18min，所得沉淀物在55 °C热风干燥，粉碎至180目，得到混 合物A，备用； 步骤二、将嗜酸乳杆菌冻干菌粉采用质量百分比为10%灭菌脱脂乳水溶液，37°C的温度 下活化3次;活化后的嗜酸乳杆菌划线接种至MRS固体培养基;37°C培养28h，长出单个菌落 后，采用接种环取2环接种至80mL的MRS液体培养基中，37 °C的温度下进行扩大培养3 lh，得 到扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液，备用； 步骤三、按照重量份数取黄精7份、芡实6份和赤小豆5份，置于超微粉碎机中进行超微 粉碎，过60-80目筛，在所得中药粉末中添加其重量19倍的水，浸泡7小时，然后置于容器中 煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎2.5小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液进行6倍浓 缩，得到浓缩液，备用； 步骤四、将扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液接种到发酵液体培养基中，接种量为发酵液体 培养基质量的5%，37°C的温度下厌氧培养，20h，得到嗜酸乳杆菌培养液;在嗜酸乳杆菌培 养液中加入其体积3%的浓缩液，37 °C的温度下继续厌氧培养3-4h，得到嗜酸乳杆菌发酵液； 所述发酵液体培养基中各成分的质量百分比含量为：2.5%乳清粉，1.5%牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸镁，0.025 %硫酸锰，0.22 %乙酸钠和0.2 %磷酸氢二钾，余量为 水，pH值为5.8; 步骤五、向培养的嗜酸乳杆菌发酵液中加入其质量8%的混合物A，在22°C下，200rpm搅 拌50min，然后12000rpm离心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其质量1.2%的碳酸|丐或氯化 钙，混合均匀，采用制粒机将其制备成粒度大小为30目的颗粒料； 步骤六、将所制备的颗粒料在低温热风沸腾干燥机中，用50°C热风进行干燥，颗粒料在 低温热风沸腾干燥机中停留15min，即制备出嗜酸乳杆菌饲料添加剂。
[0017] 所述PH值4.6的缓冲液优选为磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液或醋酸-醋酸钠缓冲液。
[0018] 所制备的嗜酸乳杆菌饲料添加剂含水量为5.6%，活菌数为190亿/g，添加剂保存两 年嗜酸乳杆菌仍然能保存98%菌种活性。
[0019] 相关动物实验 采用由本发明中的嗜酸乳杆菌饲料添加剂，对其效果进行相关实验验证。选300只刚断 奶的仔兔，平均分成三组，每组1〇〇只，分别为试验组、对照组和空白组，三组饲喂不同的嗜 酸乳杆菌饲料添加剂，试验组在断奶后饲喂的添加本发明所制备的嗜酸乳杆菌饲料添加剂 的饲料，对照组饲喂的饲料中添加普通饲料添加剂，空白组饲喂的兔饲料中不添加饲料添 加剂。空白组、试验组和对照组饲喂断奶仔兔在其他条件完全相同的环境中让仔兔尽可能 高性能生长，统计断奶后6周的生长过程中断奶仔兔的平均日采食量、平均日增重和平均生 病率，其中平均生病率为一组仔兔6周所有生病次数与仔兔数量的比值。经统计，结果如表1 所示： 表1:
由以上数据可知，试验组的仔兔的平均日采食量和平均日增重均较对照组和空白组 高，平均生病率明显较低，本发明制备的嗜酸乳杆菌饲料添加剂可明显增加动物体重，提高 免疫力，有效减轻食欲不振、消化不良、饲料利用率低、抗病力下降、生长缓慢、甚至死亡等 问题，从而提高仔兔的生长性能。对动物的生长，具有明显的促进作用。
[0020] 本发明中所述嗜酸乳杆菌为普通菌株，可通过市场购买得到。
【主权项】
1. 一种嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于:包括以下步骤： 步骤一、将生淀粉用pH值4.6的缓冲液调浆，成生淀粉质量浓度为40-55%的醪液;将淀 粉酶和糖化酶按质量比1:4比例进行混合，得到混合酶;按照混合酶的质量为醪液质量的 1.5-2%，将混合酶加入到醪液中，混合均匀后，置于50-55°(：下反应16-3011，调整?!1值为4.5-4.7，得到反应后醪液;将反应后醪液4000-5000rpm离心15-20min，所得沉淀物在50-60 °C热 风干燥，粉碎至80-160目，得到混合物A，备用； 步骤二、将嗜酸乳杆菌冻干菌粉采用质量百分比为9-12%灭菌脱脂乳水溶液，37°C的温 度下活化3次;活化后的嗜酸乳杆菌划线接种至MRS固体培养基;37°C培养24-32 h，长出单 个菌落后，采用接种环取1-2环接种至50-100mL的MRS液体培养基中，37°C的温度下进行扩 大培养24-32 h，得到扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液，备用； 步骤三、按照重量份数取黄精1-8份、芡实6-7份和赤小豆3-5份，置于超微粉碎机中进 行超微粉碎，过60-80目筛，在所得中药粉末中添加其重量15-25倍的水，浸泡5-8小时，然后 置于容器中煎煮，先煮沸腾半小时再文火煎2-3小时，煎煮后进行过滤，除去渣滓，所得滤液 进行5-6倍浓缩，得到浓缩液，备用； 步骤四、将扩大培养后嗜酸乳杆菌菌液接种到发酵液体培养基中，接种量为发酵液体 培养基质量的3%_5%，37°C的温度下厌氧培养，18-20h，得到嗜酸乳杆菌培养液;在嗜酸乳杆 菌培养液中加入其体积2%_3%的浓缩液，37°C的温度下继续厌氧培养3-4h，得到嗜酸乳杆菌 发酵液； 所述发酵液体培养基中各成分的质量百分比含量为：1.5-3%乳清粉，1.5 %牛肉霄， 1.5 %蛋白胨，0.058 %硫酸镁，0.025 %硫酸锰，0.22 %乙酸钠和0.2 %磷酸氢二钾，余量为 水，pH值为5.8; 步骤五、向培养的嗜酸乳杆菌发酵液中加入其质量1-10%的混合物A，在20-25Γ下， 180-220rpm搅拌30-60min，然后10000-15000rpm离心收集沉淀物;在所得沉淀物中加入其 质量0.5-1.5%的碳酸钙或氯化钙，混合均匀，采用制粒机将其制备成粒度大小为20-40目的 颗粒料； 步骤六、将所制备的颗粒料在低温热风沸腾干燥机中，用40-55Γ热风进行干燥，颗粒 料在低温热风沸腾干燥机中停留10_20min，即制备出嗜酸乳杆菌饲料添加剂。2. 如权利要求1所述嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于:所述pH值4.6的 缓冲液为磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液或醋酸-醋酸钠缓冲液。3. 如权利要求1所述嗜酸乳杆菌饲料添加剂的制备方法所制备的嗜酸乳杆菌饲料添加 剂，其特征在于:含水量为4.0-6.5%，活菌数为160-390亿/g。
【文档编号】C12N1/20GK105994959SQ201610500890
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月30日
【发明人】岳占州, 王新昌, 安建军, 杨雪莲, 岳朝鹏, 张亚飞
【申请人】河南省岳氏精忠科技有限公司