脂肽抗菌衍生物组合物及其应用方法

专利名称：脂肽抗菌衍生物组合物及其应用方法
技术领域：
总体来讲，本发明涉及感染性疾病的治疗，更特别地，涉及脂肽抗菌衍生物组合物的制备方法和化合物，所述脂肽抗菌衍生物组合物包括脂肽抗菌素的衍生物及其治疗用途。
背景技术：
在发达国家，除了健康的宿主免疫应答之外，应用抗菌素的治疗方案目前代表了对大多数感染性疾病的主要治疗手段。一类有效对抗革兰氏阳性菌的重要抗菌素是脂肽抗菌素。一般而言，脂肽抗菌素可具有亲脂片断乙酰化的环状肽核心或环状缩酚肽核心。所述亲脂片断(例如，非饱和脂肪酸)的长度各异，且其长度可以影响特定脂肽的活性。
然而，由于抗菌素的广泛使用，对这些和其它抗菌素的抗药性正在成为对几种原先可治疗的感染性疾病控制的世界性的不断增加的常见问题。例如，由革兰氏阳性菌，抗药性生物体，如那些抗万古霉素肠球菌(VRE)和抗甲氧苯青霉素的金黄色葡萄球菌(MRSA)引起的感染正在增加。此外，医院内感染(即那些在医院中引起的感染)的首要原因目前归因于革兰氏阳性球菌，而且对多种抗菌素有抗性的细菌正在变得常见。
由于对目前抗菌素治疗有抗性的微生物株系的无约束增加，所以亟需新的抗菌素和具有新作用机理的抗菌素的开发。本发明满足了这样的需求，并进一步提供了其它相关的优点。
发明概述简言之，本发明提供了脂肽衍生物，特别是安福霉素或天冬菌素(aspartocin)的衍生物，以及这些脂肽的组合物，其用于治疗或预防例如原发感染位置、从原发疾病状态产生的继发感染或与异物有关的感染。
一方面，本发明提供了基于安福霉素或基于天冬菌素的脂肽抗菌素，其中所述抗菌素包括环肽“核心”和亲脂取代基。所述环肽核心包括一或多个氨基酸及其衍生物，所述氨基酸具有氨基的侧链，其通常位于所述核心大环肽的9位。在一个实施方案中，所述核心大环肽核心的氨基酸是Dab9。所述大环肽核心还包括至少一种氨基末端外环氨基酸，通常为Asp或Asn。在另一实施方案中，所述氨基末端外环氨基酸位于核心肽的环部分与亲脂取代基之间。
另一方面，本发明提供了具有结构式(IIa)R2-L-R-R3特征的抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中R为安福霉素或天冬菌素核心环肽；R1是位于所述R核心环肽的氨基酸1位的OH或NH2；L选自至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，-R′C(＝O)-，-R′OC(＝O)(NR′)-和-O-PhC(＝O)-；R2选自-C(＝O)R5，-C(＝O)OR5，-C(＝O)NHR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NHR4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NHR4和-C(＝NR4)NR4R4；R3选自-OR5，-SR5，NR5R5，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)R5，-C(＝O)OR5，-C(＝O)NR5R5，-C(＝S)NR5R5，-C(＝NR5)NR5R5，-C(＝O)H，-R5C(＝O)，-SO2R5，-S(＝O)R5，-P(＝O)(OR5)2，-P(＝O)(OR5)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素，三卤代甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元杂芳基，取代的5至10元杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸；R4独立地选自(C7-C10)烃基，(C17-C26)芳基烃基和17至26元的杂芳烃基，链长度为7-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸；R5独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基和6至26元的杂芳基烃基，链长度为5-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及上述的任意组合，以及；R′独立地是一种或多种如R3或R5定义的相同或不同的取代基。
在某些实施方案中，本公开可提供任意的前述的化合物，其中R1是OH或R1是NH2。在其它实施方案中，在任意的前述化合物中，R2是-C(＝O)OR5或-C(＝O)R5，或者是-C(＝O)NHR4，-C(＝S)NHR4或-C(＝NR4)NHR4。在其它实施方案中，可提供任意的前述化合物，其中R3是选自甘氨酸，β-丙氨酸，肌氨酸，赖氨酸或其任意组合的至少一种氨基酸，或者是选自Gly，β-丙氨酸，GABA，5-氨基戊酸，6-氨基己酸，Lys，gDab，Sar，Orn，Dap，hLys或其任意组合的至少一种氨基酸。在相关实施方案中，所述R3氨基酸包括选自甘氨酸-赖氨酸或肌氨酸-赖氨酸的二氨基酸。在某些实施方案中，可提供任意的前述的化合物，其中R3还包括至少一种保护基团。在某些实施方案中，在任意前述化合物中，L是选自对氨基苯乙酰基，(对氨基苯丙酰基)n，其中n为1或2，间氨基苯乙酰基，(间氨基苯丙酰基)n，其中n为1或2，邻氨基苯乙酰基，(邻氨基苯丙酰基)n，其中n为1或2，GABA，对氨基苯甲酸(PABA)，间氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸，对肼基苯甲酸，间肼基苯甲酸，邻肼基苯甲酸，对氨基-反式-肉桂基，间氨基-反式-肉桂基，邻氨基-反式-肉桂基，L-BBTA或上述任意组合的至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸。在某些实施方案中，R2和R3可被含有10-15个碳原子链长度的直链饱和脂肪部分或羟基脂肪部分任意取代。在一些实施方案中，提供了特定的化合物，例如表6D中的化合物91，表16中的化合物331或化合物332，表6D中的化合物86，表7中的化合物87或280，或表8中的化合物89。
再一方面，本发明了提供了具有结构(IIa)特征的R2-L-R-R3的抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中R为安福霉素或天冬菌素核心环肽；R1是位于所述R核心环肽的氨基酸1位的OH或NH2；L选自至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，-R′C(＝O)-，和-R′OC(＝O)(NR′)-；R2选自-OR5，-SR5，-NR5R5，-C(＝O)OR5，-C(＝O)R5，-C(＝O)NHR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NHR4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NHR4，-C(＝NR4)NR4R4，-R5C(＝O)，-SO2R5，-S(＝O)R5，-P(＝O)(OR5)2，-P(＝O)(OR5)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基；R3为氢；R4独立地选自(C7-C10)烃基，(C17-C26)芳基烷基和17至26元的杂芳基烷基，链长度为7-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，以及至少一种取代氨基酸；R5独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基和6至26元的杂芳基烃基，链长度为5-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及其任意组合，以及；R′独立地是一种或多种如R2或R5定义的相同或不同的取代基。
在某些实施方案中，本公开内容可提供任意的前述化合物，其中R1是OH或R1是NH2。在其它实施方案中，在任意的前述化合物中，R2是-C(＝O)R5，-C(＝O)NHR4，-C(＝S)NHR4或-C(＝NR4)NHR4。在其它实施方案中，在任意的前述化合物中，R5是10至20元的杂芳烃基，或链长度为5-17个碳原子的直链的饱和脂肪部分或羟基脂肪部分，或R4是链长度为8-16个碳原子的直链的饱和脂肪部分或羟基脂肪部分。在一些实施方案中，L是至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸，例如甘氨酸，肌氨酸，苯基甘氨酸，苯基丙氨酸，O-甲基-天冬氨酸，O-叔丁基-天冬氨酸，对氨基苯甲酸(PABA)，间氨基苯甲酸，对肼基-苯甲酸，对氨基苯丙酸，(对氨基苯丙酸)n，其中n为1或2，L-BBTA，间氨基-苯乙酸，对氨基-苯乙酸(Apa)，对氨基-反式-肉桂酸，邻氨基苯甲酸，邻，邻二氨基苯甲酸，邻，间二氨基苯甲酸，邻，对二氨基苯甲酸，间，对-二氨基苯甲酸，间，间二氨基苯甲酸，邻氨基苯乙酸，间氨基苯乙酸，对-氨基苯乙酸(Apa)，氨基噻唑乙酸或上述任意组合。在其它实施方案中，可提供任意的前述化合物，其中R3是选自Gly，β-丙氨酸，GABA，5-氨基戊酸，6-氨基己酸，Lys，gDab，Sar，Orn，Dap或hLys中的至少一种氨基酸。在其它实施方案中，R3还包括至少一种保护基团。在其它实施方案中，任意的前述化合物中还包括表3中的化合物103，105，106，107，112，115，116，118，311，313，314，315，316，317，344，345，346，358，359或360；表6D中的化合物104，108，109，111，113，122，119，281，293，294，296，297，300，301，303，310，312或361；表6C中的化合物117，表7中的化合物21，85，282，283，284，285或123，表8中的化合物120，表14中的化合物305，320，319，337，374，337，305，320或319，表4中的化合物286，321，304，254，307，295或291，或表6A中的化合物288，306，290，362，289，292，287或302。
另一方面，本发明提供了有结构式(IVa)R2-L-R-L-R3特征的抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中R为安福霉素或天冬菌素核心环肽；R1是位于所述R核心环肽的氨基酸1位的OH或NH2；L独立地选自至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，C(＝O)-，-R′C(＝O)-，-SO2，-C(＝S)-，-P(＝O)-，-OP(＝O)-，-OC(＝O)-，-R′OC(＝O)(NR′)-，-NHC(＝O)-，-O-PhC(＝O)-和-NR′C(＝O)-，条件为在Dab9上L是-C(＝O)-；R2选自-OR4，-SR4，NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素，三卤代甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5-10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸以及至少一种取代氨基酸；R3选自-C(＝O)OR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-CO2H，取代的(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，取代的(C5-C10)芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)联芳基，取代的5至10元的杂芳基，取代的(C6-C26)芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸以及至少一种取代氨基酸，条件为R3含有-C(＝O)-，-C(＝S)-或-C(＝NR4)-中的至少一种；R4独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳烃基和6至26元的杂芳烃基，链长度为5-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及上述的任意组合；以及R′是独立的一种或多种如R2，R3或R4定义的相同或不同的取代基。
在某些实施方案中，本公开内容可提供任意的前述化合物，其中R1是OH或R1是NH2。在其它实施方案中，在任意的前述化合物中，R3是-C(＝O)-或-C(＝S)-。在其它实施方案中，任意的前述化合物中包括表12中的化合物210，373，223，237，235或81。在某些实施方案中，R3是选自Gly，β-丙氨酸，GABA，5-氨基戊酸，6-氨基己酸，Lys，gDab，Sar，Orn，Dap和hLys的至少一种氨基酸或取代氨基酸。在其它实施方案中，R3还含有至少一种保护基团。
另一方面，本发明提供了抗菌化合物及其药物可接受的盐，例如表1中的化合物3；表10中的化合物4；表13中的化合物60；表16中的化合物128；表1中的化合物147；表10中的化合物199；表4中的化合物253；或表4中的化合物278。
另一方面，任意的前述化合物可以是结构单一的，或者其可以是包含一或多种结构不同化合物混合的组合形式。在某些实施方案中，本发明的所述化合物可以是游离酸或游离碱的形式，或者是盐的形式，例如药物可接受的盐。在其它实施方案中，所述核心环肽是β-异构体，脱水异构体或者是二脱水异构体。
另一方面，本发明提供了包含任意前述化合物的药物组合物。在一些实施方案中，所述组合物包含一种或多种本发明的化合物和药物或生理可接受的载体、赋形剂或稀释剂。所述载体、赋形剂或稀释剂的确切特性依赖于所述组合物的所需用途，并适用于或为环境与工业用途所接受，可适用于或为兽医用途所接受，可适用于或为人类用途所接受(即药物可接受的)。
另一方面，本发明提供了合成本发明所述化合物的方法。在一个实施方案中，本发明的所述化合物可以从基于安福霉素或基于天冬菌素的母体脂肽抗菌素制备得到，所述母体脂肽抗菌素可通过将所述母体抗菌素与诸如适当保护的氨基酸的适当的保护试剂，在适于将所述试剂连接于环外氨基酸的氨基末端氨基或大环Dab9残基的β-氮的条件下反应，从培养物中分离获得。在某些实施方案中，可将保护基团去除得到本发明的化合物，所述化合物具有含有或不含有接头的特异氨基末端取代基，含有或不含有接头的Dab9取代基，及上述的任意组合。在一些实施方案中，这些母体抗菌素是化合物的混合物，所述化合物之间的大环肽核心或亲脂取代基的结构不同。在某些实施方案中，本发明所得的氨基末端或Dab9衍生物可作为化合物的混合物得到，其结构和相对量可通过含有所述母体抗菌素混合物的结构和相对量计算出来。在某些其它的实施方案中，包含所述母体抗菌素混合物的成分化合物是在氨基末端氨基酸或大环Dab9残基的衍生反应之前相互分开和分离。可选择地，可以在任意保护基团的去除之前或之后，对所述氨基末端氨基酸或Dab9衍生反应的反应产物进行分开和分离，从而得到结构单一的本发明所述氨基末端氨基酸或Dab9衍生物及其任意组合。
在其它相关方面，位于所述母体抗菌素氨基末端的脂肪酸部分的结构还是未知的。在某些实施方案中，可将所述亲脂脂肪酸部分去除，并用亲脂取代基，氨基酸取代基及其组合取代，任意地通过具有特意结构的接头基团L连接，从而得到具有准确定义取代基的本发明的氨基末端氨基酸或Dab9衍生物，其可含有或不含有接头。在一个实施方案中，可在所述母体抗菌混合物的大环Dab9残基的β-氨基基团进行保护和脱脂得到脱脂中间产物，然后在乙酰化条件下，将该脱脂中间产物与所需的亲脂取代基反应，得到具有准确定义亲脂部分的的合成抗菌素。在另一实施方案中，可根据上述方法，将该合成抗菌素衍生得到本发明的Dab9衍生物。
通过上述合成途径可得到保护的中间产物化合物，这些中间产物构成了本发明的另一方面(如以上和这里所描述的，含有保护基团)。
另一方面，本发明提供了抑制诸如革兰氏阳性菌的微生物生长的方法。所述方法通常涉及将微生物与有效量的本发明的一或多种化合物(或其可接受的盐)接触从而抑制所述微生物的生长。可采用所述方法获得的微生物处置效果(microbistatic effect)，其中所述微生物的生长被抑制，或达到了微生物被杀死的杀灭微生物效果。
在相关方面，本发明提供了治疗或预防诸如人、植物或动物的个体中的微生物感染的方法，所述感染例如革兰氏阳性菌引起的感染。在某些实施方案中，所述方法涉及向个体进行有效量的一或多种本发明化合物或组合物的给药，从而治疗或预防所述感染。根据所述感染的特性，可以系统地给药或局部应用所述化合物或组合物。在某些实施方案中，可使用本发明的化合物或组合物治疗或预防皮肤和皮肤结构感染(包括并发感染)或肺炎。
附图的简要描述

图1所示为本发明衍生性脂肽抗菌化合物的示例性β-异构体。
图2所示为本发明衍生性脂肽抗菌化合物的示例性脱水和二脱水异构体。
图3所示为制备本发明衍生性脂肽抗菌化合物的两种常用合成方法(方案I)。
图4A-4I所示为多种脂肽衍生物对粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)的杀菌曲线。
图5A-5K所示为多种脂肽衍生物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的杀菌曲线。
发明详述如上所述，本发明提供了应用和制备抗菌脂肽衍生物来治疗或预防感染性疾病的组合物和方法。因此，总体上，本发明涉及意外的发现，即某些脂肽抗菌素可被化学修饰，以最大化其在体外和体内的抗菌活性。特别地，这些脂肽抗菌素可用于治疗或预防在多种情况(例如，医院内感染，痤疮和与血管内渗透相关的诸如使用皮下注射针，导管，以及其它医疗设备的感染)中产生的革兰氏阳性菌涉及的感染，该革兰氏阳性菌例如肠球菌，链球菌，和葡萄球菌。以下更详细讨论的是适合用于本发明以及代表性的组合物和治疗用途之内的应用的脂肽衍生物。
在更详细的阐明本发明之前，理解在下文中使用的某些术语的定义是很有帮助的。
在此使用的“氨基酸”是指天然氨基酸(那些自然存在的)，取代的天然氨基酸，非天然氨基酸，取代的非天然氨基酸，或其任意组合。在此设定的天然氨基酸的名称为标准的单字母或三字母编码。天然极性氨基酸包括天冬酰胺(Asp或N)和谷氨酰胺(Gln或Q)；和碱性氨基酸，例如精氨酸(Arg或R)，赖氨酸(Lys或K)，组氨酸(His或H)，及其衍生物；以及酸性氨基酸，例如天冬氨酸(Asp或D)和谷氨酸(Glu或E)，及其衍生物。天然疏水氨基酸包括色氨酸(TrpW)，苯丙氨酸(Phe或F)，异亮氨酸(Ile或I)，亮氨酸(Leu或L)，甲硫氨酸(Met或M)，缬氨酸(Val或V)，及其衍生物；和其它非极性氨基酸，例如甘氨酸(Gly或G)，丙氨酸(Ala或A)，脯氨酸(Pro或P)，及其衍生物。中等极性的天然氨基酸包括丝氨酸(Ser或S)，苏氨酸(Thr或T)，酪氨酸(Tyr或Y)，半胱氨酸(Cys或C)，及其衍生物。除非特别指明，所述的任意氨基酸都可以是D-或L-构型。大写字母代表的是L-对应体氨基酸；小写字母代表的是D-对应体氨基酸。
其它示例性氨基酸包括肉桂酸(例如氨基肉桂酸，氨基-反式-肉桂酸，氨基-顺式-肉桂酸，邻氨基肉桂酸，间氨基肉桂酸，对氨基肉桂酸，邻氨基-反式-肉桂酸，间氨基-反式-肉桂酸，对-氨基-反式-肉桂酸，邻氨基-顺式-肉桂酸，间氨基-顺式-肉桂酸，对-氨基-顺式-肉桂酸)，苯基甘氨酸(Phg)，2，3-二氨基丁酸(Dab)，2，4-二氨基丁酸(gDab)，2，3-二氨基丙酸(Dap)，β-甲基天冬氨酸(MeAsp)，还己基丙氨酸(β-Cha)，正亮氨酸(Nle)，正缬氨酸(Nvl)，六氢异烟酸(Ina)，六氢哌啶羧酸(homoproline)(Pip或hPro)，苯乙酸(例如氨基苯乙酸，二氨基苯乙酸，三氨基苯乙酸，邻氨基苯乙酸，间氨基苯乙酸，对氨基苯乙酸(Apa)，邻，邻二氨基苯乙酸，邻，间二氨基苯乙酸，邻，对二氨基苯乙酸，间，间二氨基苯乙酸，间，对二氨基苯乙酸，邻，邻，间三氨基苯乙酸，邻，邻，对三氨基苯乙酸，邻，间，对三氨基苯乙酸，间，间，对三氨基苯乙酸，邻，间，间三氨基苯乙酸，邻，邻，间三氨基苯乙酸)，苯丙酸(例如氨基苯丙酸，二氨基苯丙酸，三氨基苯丙酸，邻氨基苯丙酸，间氨基苯丙酸，对氨基苯丙酸(Apa)，邻，邻二氨基苯丙酸，邻，间二氨基苯丙酸，邻，对二氨基苯丙酸，间，间二氨基苯丙酸，间，对二氨基苯丙酸，邻，邻，间三氨基苯丙酸，邻，邻，对三氨基苯丙酸，邻，间，对三氨基苯丙酸，间，间，对三氨基苯丙酸，邻，间，间三氨基苯丙酸，邻，邻，间三氨基苯丙酸)，2-氨基丁酸(Abu)，肌氨酸(Sar或N-甲基甘氨酸)，6-氨基己酸(Ahx)，para-氟-苯丙氨酸(p-F-Phe)，γ-氨基丁酸(GABA)，苯甲酸(例如氨基苯甲酸，二氨基苯甲酸，三氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸，间氨基苯甲酸，对氨基苯甲酸(PABA)，邻，邻二氨基苯甲酸，邻，间二氨基苯甲酸，邻，对二氨基苯甲酸，间，间二氨基苯甲酸，间，对二氨基苯甲酸，邻，邻，间三氨基苯甲酸，邻，邻，对三氨基苯甲酸，邻，间，对三氨基苯甲酸，间，间，对三氨基苯甲酸，邻，间，间三氨基苯甲酸，邻，邻，间三氨基苯甲酸)，肼基苯甲酸(例如二肼基苯甲酸，三肼基苯甲酸，邻肼基苯甲酸，间肼基苯甲酸，对肼基苯甲酸(PABA)，邻，邻二肼基苯甲酸，邻，间二肼基苯甲酸，邻，对二肼基苯甲酸，间，间二肼基苯甲酸，间，对二肼基苯甲酸，邻，邻，间三肼基苯甲酸，邻，邻，对三肼基苯甲酸，邻，间，对三肼基苯甲酸，间，间，对三肼基苯甲酸，邻，间，间三肼基苯甲酸，邻，邻，间三肼基苯甲酸)，同源苯基丙氨酸(homophenylalanine)(homoPhe或hPhe)，β-氰基丙氨酸(β-氰基-Ala)，酪氨酸的甲基或乙基芳基酯(分别为Tyr(Me)或Tyr(Et))，氨基丁酸(Aib，也称为α，α-二甲基甘氨酸)，S-甲基半胱氨酸(MeCys)，N，N’-二甲基精氨酸((Me)2Arg)，羟脯氨酸(Hyp)，瓜氨酸(Cit)，N，N，N，-三甲基赖氨酸或N，N，N，-(CH3)3-赖氨酸或γ，γ，γ-三甲基赖氨酸((Me)3Lys)，同源赖氨酸(homolysine)(homoLys或hLys)，5-氨基戊酸或氨基戊酸(5-Ava)，(S)-3-苯并[b]噻吩-3-氨基丙酸(L-BBTA)，焦谷氨酸(pGlu)，氨基噻唑乙酸，2-氨基-噻唑-4-乙酸，氨基庚酸，氨基辛酸，氨基壬酸，氨基癸酸，氨基十一酸，氨基十二酸，7-氨基庚酸，8-氨基辛酸，9-氨基壬酸，10-氨基癸酸，11-氨基十一酸，12-氨基十二酸，3-或4-mercaptoproline衍生物，N5-乙酰-N5-羟基-L-鸟氨酸，α-N-羟氨基酸等等。抗菌脂肽类似物或其衍生物可包括以上提到的任意一种氨基酸或其组合或者以上提到的任意取代的任意一种氨基酸或其组合。
在此使用的“ATCC”是指美国类型培养物收藏中心，马纳萨斯，弗吉尼亚州20108(参见www.atcc.org)，“NRRL”是指生物处理研究单位，农业应用研究国家中心，皮奥里亚，伊利诺斯州61604(参见nrrl.ncaur.usda.org)。
在本说明书中，除非特别指明，任意浓度范围，百分比范围，比例范围，或整数范围应该理解为包括所述引用范围内的任何整数和其适当的分数(例如整数的十分之一和百分之一)。本发明所用“约”或“主要包括”是指±15％。选项的使用(例如，“或”)应理解为其中一种，两种或所述选项的任意组合。此外，应当理解，本发明描述的所述结构和取代基的不同组合衍生出的单个化合物或化合物群，就如每一个化合物或化合物群都被单独地公开的相同程度被本发明公开。所以，对特定结构或特定取代基的选择都在本发明的范围之内。
本发明使用的“烃基”是指从母体烷烃，烯烃或炔烃的单个碳原子去除一个氢得到的饱和的，不饱和的，支链的，直链的或环状的单价烃基。通常的烃基包括甲基；乙基，例如乙烷基，乙烯基，乙炔基；丙基，例如丙烷-1-基，丙烷-2-基，环丙烷-1-基，丙-1-烯-1-基，丙-1-烯-2-基，丙-2-烯-1-基(烯丙基)，环丙-1-烯-1-基；环丙-2-烯-1-基，丙-1-炔-1-基，丙-2-炔-1-基等等；丁基，例如丁烷-1-基，丁烷-2-基，2-甲基-丙烷-1-基，2-甲基-丙烷-2-基，环丁烷-1-基，丁-1-烯-1-基，丁-1-烯-2-基，2-甲基-丙-1-烯-1-基，丁-2-烯-1-基，丁-2-烯-2-基，丁-1，3-二烯-1-基，丁-1，3-二烯-2-基，环丁-1-烯-1-基，环丁-1-烯-3-基，环丁-1，3-二烯-1-基，丁-1-炔-1-基，丁-1-炔-3-基，丁-3-炔-1-基等等。
术语“烃基”特别意图包括含有1-25碳原子的直链或支链烃，更优选为5-20碳原子，最优选为10-18碳原子。所述烃基可具有多种水平和程度的饱和，即，只含有碳-碳单键的基团，含有一或多个碳-碳双键的基团，含有一或多个碳-碳三键的基团，以及含有碳-碳单键，双键和三键混合物的基团。当意图描述饱和的特定水平时，可使用“烷基”，“烯基”和“炔基”进行表达。“低级烃基”的表达是指含有1-8个碳原子的烃基。所述烃基可以是取代的或者是未取代的。
“烷基”是指饱和的支链，直链或环烷基。常见的烷基包括甲烷基；乙烷基；丙烷基，例如丙烷-1-基，丙烷-2-基(异丙基)，环丙-1-基等等；丁烷基，例如丁烷-1-基，丁烷-2-基(仲丁基)，2-甲基丙-1-基(异丁基)，2-甲基-丙-2-基(叔丁基)，环丁-1-基等等。
“烯基”是指通过从母体烯烃的单个碳原子上去除一个氢原子得到的具有至少一个碳-碳双键的不饱和支链，直链，环烃基或其组合。对所述双键而言，所述基团可以是顺式或反式构象的。常见的烯基包括乙烯基；丙烯基，例如丙-1-烯-1-基，丙-1-烯-2-基，丙-2-烯-1-基(烯丙基)，丙-2-烯-2-基，环丙-1-烯-1-基；环丙-2-烯-1-基；丁烯基，例如丁-1-烯-1-基，丁-1-烯-2-基，2-甲基-丙-1-烯-1-基，丁-2-烯-1-基，丁-2-烯-1-基，丁-2-烯-2-基，丁-1，3-二烯-1-基，丁-1，3-二烯-2-基，环丁-1-烯-1-基，环丁-1-烯-3-基，环丁-1，3-二烯-1-基等等。所述烯基可以是取代的或未取代的。
“炔基”是指通过从母体炔烃的单个碳原子上去除一个氢原子得到的具有至少一个碳-碳三键的不饱和支链，直链或环烃基。常见的炔基包括乙炔基；丙炔基，例如丙-1-炔-1-基，丙-2-炔-1-基等等；丁炔基，例如丁-1-炔-1-基，丁-1-炔-3-基，丁-3-炔-1-基等等。
“亚烃基”是指通过从母体烷烃，烯烃或炔烃的两个不同碳原子上分别去除一个氢原子，或从母体烷烃，烯烃或炔烃的单个碳原子上去除两个氢原子得到饱和或不饱和、支链、直链或环状二价烃基。所述的两个单价自由基中心(radical center)或所述二价自由基的每价都可与相同或不同的原子成键。常见的亚烃基包括亚甲基；亚乙基，例如乙烷-1，1-二基，乙烷-1，2-二基，乙烯-1，1-二基，乙烯-1，2-二基；亚丙基，例如丙烷-1，1-二基，丙烷-1，2-二基，丙烷-2，2-二基，丙烷-1，3-二基，环丙烷-1，1-二基，环丙烷-1，2-二基，丙-1-烯-1，1-二基，丙-1-烯-1，2-二基，丙-2-烯-1，2-二基，丙-2-烯-1，3-二基，环丙-1-烯-1，2-二基，环丙-2-烯-1，2-二基，环丙-2-烯-1，1-二基，丙-1-炔-1，3-二基等等；亚丁基，例如丁烷-1，1-二基，丁烷-1，2-二基，丁烷-1，3-二基，丁烷-1，4-二基，丁烷-2，2-二基，2-甲基-丙烷-1，1-二基，2-甲基-丙烷-1，2-二基，环丁烷-1，1-二基，环丁烷-1，2-二基，环丁烷-1，3-二基，丁-1-烯-1，1-二基，丁-1-烯-1，2-二基，丁-1-烯-1，3-二基，丁-1-烯-1，4-二基，2-甲基-丙-1-烯-1，1-二基，2-亚甲基methanylidene-丙烷-1，1-二基，丁-1，3-二烯-1，1-二基，丁-1，3-二烯-1，2-二基，丁-1，3-二烯-1，3-二基，丁-1，3-二烯-1，4-二基，环丁-1-烯-1，2-二基，环丁-1-烯-1，3-二基，环丁-2-烯-1，2-二基，环丁-1，3-二-烯-1，2-二基，环丁-1，3-二-烯-1，3-二基，丁-1-炔-1，3-二基，丁-1-炔-1，4-二基，丁-1，3-二炔-1，-二基等等。当意图描述饱和的特定水平时，可使用“亚烷基”，“亚烯基”和“亚炔基”进行表达。在优选实施方案中，所述亚烷基是(C1-C4)亚烷基。其它优选的是饱和的脂肪族亚烷基，其中所述自由基中心位于所述末端的碳原子上，例如，甲烷二基(亚甲基)；乙烷-1，2-二基(桥亚乙基)；丙烷-1，3-二基(propano)；丁烷-1，4-二基(butano)；等等(可参见如下所定义的alkyleno)。
“烃二基(alkyleno)”是指通过对直链母体烷烃，烯烃或炔烃的两个末端碳原子分别去除一个氢原子得到具有两个末端单价自由基中心的直链烃二基。常见的烃二基包括亚甲基；乙烃二基(ethyleno)，例如桥亚乙基，亚乙烯基，亚乙炔基；丙烃二基(propyleno)，例如丙烷二基(propano)，丙[1]烯二基(prop[1]eno)，丙[1，2]二烯二基(propa[1，2]dieno)，丙[1]炔二基(prop[1]yno)等等；丁烃二基(butylenos)，例如丁烷二基(butano)，丁[1]烯二基(but[1]eno)，丁[2]烯二基(but[2]eno)，丁[1，3]二烯二基(buta[1，3]dieno)，丁[1]炔二基(but[1]yno)，丁[2]炔二基(but[2]yno)，丁[1，3]二炔二基(but[1，3]diyno)等等。当意图描述饱和的特定水平时，可使用“烷二基(alkno)”，“烯二基(alkeno)”和“炔二基(alkyne)”进行表达。在优选实施方案中，所述烯二基是(C1-C6)或(C1-C4)烯二基。其它优选的是直链饱和的烷二基，例如，亚甲基，桥亚乙基，丙烷二基，丁烷二基等等。
“杂烃基，杂烷基，杂烯基，杂烷基，杂亚烃基和杂烃二基”分别是指其一个或多个碳原子(以及任意相连的氢原子)分别独立地被相同或不同的杂原子或杂原子基团取代的烃基，烷基，烯基，炔基，亚烃基和烃二基。常见的杂原子或杂原子基团包括-O-，-S-，-Se-，-O-O-，-S-S-，-O-S-，-O-S-O-，-O-NR′-，-NR′-，-NR′-NR′-，＝N-N＝，-N＝N-，-N＝N-NR′-，-PH-，-P(＝O)2-，-O-P(＝O)2-，-SH2-，-S(＝O)2-，-SnH2-等等，及上述的组合，包括-NR′-S(＝O)2-，其中每个R′独立地选自本发明所定义的氢，烃基，烷基，烯基，炔基，芳基，芳烃基，杂芳基和杂芳烃基。
“芳基”是指通过从母体芳环系统的单个碳原子上去除一个氢原子得到的单价芳烃基。常见的芳基包括选自苯并苊(aceanthrylene)，苊烯(acenaphthylene)，醋菲烯(acephenanthrylene)，蒽，甘菊环，苯，草屈(chrysene)，晕苯(coronene)，荧蒽，芴，己省(hexacene)，己芬(hexaphene)，hexalene，不对称引达省(as-indacene)，对称引达省(s-indacene)，茚满(indane)，茚，萘，octacene，octaphene，氯甲桥萘(octalene)，卵苯(ovalene)，戊-2，4-二烯，戊省(pentacene)，pentalene，二苯并菲(pentaphene)，苝(perylene)，phenalene，菲(phenanthrene)，苉(picene)，pleiadene，芘(pyrene)，皮蒽(pyranthrene)，玉红省(rubicene)，苯并菲(triphenylene)，trinaphthalene等等的基团。在优选实施方案中，所述芳基是(C5-C14)芳基，更优选为(C5-C10)芳基。特别优选的芳基是茂基(cyclopentadienyl)，苯基和萘基。所述芳基可以是取代的或未取代的。
“芳基烃基”是指其中与碳原子，通常是末端或sp3碳原子成键的一个氢原子被芳基所取代的脂肪烃基。常见的芳烃基包括苯甲基，2-苯乙烷-1-基，2-苯乙烯-1-基，萘甲基，2-萘甲烷-1-基，2-萘乙烯-1-基，萘苯甲基，2-萘苯乙烷-1-基等等。当意图描述特定的烃基部分时，可使用“芳基烷基”，“芳基烯基”和“芳基炔基”进行命名。在优选实施方案中，所述芳基烃基是(C6-C20)芳基烃基，例如所述芳基烃基的烷基，烯基或炔基部分为(C1-C3)，所述芳基部分为(C5-C10)。
“杂芳基”是指从单环或稠环(即公用相邻原子对的环)的母体杂芳环系统的单个原子上去除一个氢原子得到的单价杂芳基团。常见的杂芳基包括来自吖啶，砷杂茚(arsindole)，咔唑，β-咔啉，色原烷，色烯，噌啉，呋喃，咪唑，吲唑，吲哚，二氢吲哚，吲嗪，异苯并呋喃，异色烯，异吲哚，异二氢吲哚，异喹啉，异噻唑，异噁唑，二氮杂萘，噁二唑，噁唑，萘嵌间二氮杂苯，菲啶，邻二氮杂菲，吩嗪，酞嗪，蝶啶，嘌呤，吡喃，吡嗪，吡唑，哒嗪，吡啶，嘧啶，吡咯，吡咯嗪(pyrrolizine)，喹唑啉，喹啉，喹嗪，喹喔啉，四唑，噻重氮，噻唑，噻吩，三唑，氧杂蒽等等的基团。在优选实施方案中，所述杂芳基是5-14元的杂芳基，特别优选为5-10元的杂芳基。最优选的杂芳基是那些来自噻吩，吡咯，苯并噻吩，苯并呋喃，吲哚，吡啶，喹啉，咪唑，噁唑和吡嗪的杂芳基。所述杂芳基可以是取代的或未取代的。
“杂芳基烃基”是指非环状的烃基，其中一个与碳原子，通常为末端或sp3碳原子成键的氢原子被杂芳基取代。当涉及特别的烃基部分时，使用杂芳烷基，杂芳烯基或杂芳炔基的命名。在优选实施方案中，所述杂芳烃基是6-20元的杂芳烃基，例如所述杂芳烃基的烷基、烯基或炔基部分是1-6元的，所述杂芳基部分是5-14元的杂芳基。在特定的优选实施方案中，所述杂芳烃基是6-13元的杂芳烃基，例如所述烷基、烯基或炔基部分是1-3元的，所述杂芳基部分是5-10元的杂芳基。
“酰基”基团是指C(＝O)-R″基团，其中R″优选地选自氢，羟基，烃基，卤代烃基，环烃基，任意为一或多个烃基，卤代烃基，烷氧基，卤素和取代的氨基所取代的芳基，任意为一或多个烃基，卤代烃基，烷氧基，卤素和取代的氨基(通过环碳成键)所取代的杂芳基，以及任意为一或多个烃基，卤代烃基，烷氧基，卤素和取代的氨基所取代的杂脂肪烷基。酰基基团包括醛，酮，酸，酸卤化物，酯和酰胺。优选的酰基基团是羧基基团，例如，酸和酯。酯包括氨基酸酯衍生物。所述酰基可以在所述酰基基团的任一末端连接于化合物主链，即可通过C或R″连接。如果所述酰基通过R″相连，那么C可以为其它取代基所取代，例如氢，烷基等等。
“取代”是指某个基团上的一或多个氢原子独立地被所述相同或不同的取代基所取代。常见的取代基包括-X，-R13，-O-，＝O，-OR，-SR13，-S-，＝S，-NR13R13，＝NR13，CX3，-CF3，-CN，-OCN，-SCN，-NO，NO2，＝N2，-N3，-S(＝O)2O-，-S(＝O)2OH，-S(＝O)2R13，-OS(＝O)2O-，-OS(＝O)2OH，-OS(＝O)2R13，-P(＝O)(O-)2，-P(＝O)(OH)(O-)，-OP(＝O)2(O-)，-C(＝O)R13，-C(＝S)R13，-C(＝O)OR13，-C(＝O)O-，-C(＝S)OR13，-NR13-C(＝O)-N(R13)2，-NR13-C(＝S)-N(R13)2，和-C(＝NR13)NR13R13，其中每个X独立地是卤素；每个R13独立地是氢，卤素，烃基，芳基，芳烃基，芳芳基，芳基杂烃基，杂芳基，杂芳基烃基NR14R14，-C(＝O)R14，和-S(＝O)2R14；每个R14独立地是氢，烷基，烷基，炔基，芳基，芳基烷基，芳基杂烷基，芳基芳基，杂芳基或杂芳基烷基。无论有或没有一种或多种取代，含取代基的芳基以对位(p-)，间位(m-)或邻位(o-)构象或其任意组合连接。
“药物可接受的盐”是指药物可接受的本发明的化合物的盐，其具有所述母体化合物所需要的药物活性。这些盐包括(1)与无机酸形成的酸加成盐，所述无机酸例如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸等等；或者是与有机酸形成的酸加成盐，所述有机酸例如乙酸，丙酸，己酸，环戊烷丙酸，乙醇酸，丙酮酸，乳酸，丙二酸，琥珀酸，苹果酸，马来酸，延胡索酸，酒石酸，柠檬酸，苯甲酸，3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸，甲磺酸，乙磺酸，1，2-乙二磺酸，2-羟基乙磺酸，苯磺酸，4-氯苯磺酸，2-萘磺酸，4-甲苯磺酸，樟脑磺酸，4-甲基二环[2.2.2]-癸-2-烯-1-羧酸，葡庚糖酸，3-苯丙酸，三甲基乙酸，叔丁基乙酸，月桂磺酸，葡糖酸，谷氨酸，羟萘甲酸，水杨酸，硬脂酸，粘康酸(muconic acid)等等；或(2)当存在于所述母体化合物中的酸性质子被金属离子，如碱金属离子，碱土金属离子或铝离子所取代；或被有机碱，如乙醇胺，二乙醇胺，三乙醇胺，N-泛影葡胺(methylglucamine)等等结合形成的盐。
另一方面，任意的上述化合物可含有来自天冬菌素的核心肽。天然产生的天冬菌素与天然产生的安福霉素的区别仅在于其酰基末端区域。通常，本发明的化合物可以含有所述天然产生的酰基末端，或在安福霉素或天冬菌素的所述核心肽上连接有不同的(非天然的)酰基末端。
通过与制备安福霉素核心肽相似或相同的方法，可制备具有天冬菌素核心肽的本发明的衍生脂肽化合物，其区别仅在于所述起始材料的来源不同，所述起始材料来自于不同的链霉菌属(例如，暗灰链霉菌(Streptomyces canus)可产生安福霉素，而灰色链霉菌(Streptomyces griseus)则可产生天冬菌素)。除非特别指明，在本文所述的任意对本发明脂肽衍生物合成的描述中，应当理解“基于安福霉素”和“基于天冬菌素”是可以相互替换的，而不改变本发明范围。
本发明通过下述缩写命名本发明的取代基，包括环己基(cHex或cHexyl)，邻吡啶甲酸(picolinic acid)(Pla)，2-吡嗪羧酸(Pca)，乙酰基(Ac)，琥珀酸(Suc)。在对实施例中所列化合物进行命名时，“安福霉素”(或“天冬菌素”)之前的取代基，例如酰基尾巴(acyl tail)或氨基酸，是与所述核心肽的氨基末端连接；而列于“安福霉素-9-”之后的取代基则是连接于所述肽核心Dab9位上的取代基。此外，短式Cn(例如，C10，C12，C15)是指含有n个碳原子、诸如酰基尾巴的直碳链的化合物。在酰基尾巴的例子中，通过下述示例性结构式的方式，可知Cn的命名可等同地描述酰基尾巴，Cn等于CH3-(CH2)i-C(＝O)-，其中i＝n-2。在特定的例子中，C15命名的酰基尾巴指以下结构式CH3-(CH2)13-C(＝O)-。如上所述，在对化合物的命名中，小写的斜体“o”，“m”或“p”分别是指邻位、间位和对位的取代位置。如本文所述，“Ph”是指苯环，而“-OSu”是指琥珀酰亚胺活化的化合物，例如氨基酸(Ala-OSu)，其可通过本文所述的反应来制备(参见，例如，实施例1)或可商业购买(例如从Bachem California Inc.托兰斯，加利福尼亚州购买)。
脂肽抗菌素及其衍生物如上所述，本发明提供了脂肽抗菌素衍生物，其药物可接受的盐以及用途。本发明的所述脂肽抗菌衍生物包括“核心环肽”(在此也可指“核心大环肽”)和氨基末端亲脂取代基。所述“核心环肽”是指去除所述氨基末端亲脂取代基后留下的亲脂抗菌素的环肽部分或环缩酚肽，其可以包括一或多个环外氨基酸。本发明的所述脂肽抗菌素衍生物可包括与所述核心环肽连接的亲脂取代基，该取代基(1)直接(例如，作为氨基或氨基亲脂取代基)，(2)通过一或多个插入的环外氨基酸，或(3)通过“接头”(L)与所述核心环肽连接，所述“接头”(L)如上所述，通过直接或通过一或多个插入的环外氨基酸与所述核心环肽连接。在优选实施方案中，“核心环肽”可来自A1437，天冬菌素或安福霉素，更优选地，来自天冬菌素或安福霉素。
常见的安福霉素类脂肽抗菌素包括安福霉素(颖霉素(glumamycin))(海因曼等人(Heinemann et al.)，1953，Antibiot.Chemother.31239-1242；藤野等人(Fujino et al.)，1965，Bull.Chem.Soc.Jap.38515；博丹斯泽斯基等人(Bodanszky et al.)，1973，J.Am.Chem.Soc.952352；柴田等人(Shibata et al.)，美国专利第3,160,561号)；天冬菌素(沙爱等人(Shay et al.)，美国专利第3,057,779号；沙爱等人(Shay et al.)，1960，Antibiotics Ann.194；豪斯曼等人(Hausmanet al.)，1964，Antimicrob.Ag.Chemother.352；豪斯曼等人(Hausman etal.)，1969，J.Antibiotics 22207；马丁等人(Martin et al.)，1960，J.Am.Chem.Soc.2079)；晶霉素(郭泽等人(Gauze et al.)，1957，Antibiotiki 29-14)；抗菌素A1437(哈曼等人(Hammann et al.)，欧洲专利第0629636 B1号；哈曼等人(Hammann et al.)，美国专利第6,194,383号；拉特莱尔等人(Lattrell et al.)，美国专利第5,629,288号)；friulimycin(福特西等人(Vertesy et al.)，2000，J.Antibiotics 53816)；津枝霉素(tsushimycin)(诸寺等人(Shoji et al.)，1968，J.Antibiotics 21439；西村等人(Nishimura et al.)，美国专利第3,781,420号)；及沙阿霉素(zaomycin)(涸沼(Hinuma)，1954，J.Antibiotics 7(4)134-136；黑谷(Kuroya)，1960，Antibiotics Ann.194；黑谷(Kuroya)，日本专利第8150号)。所述安福霉素类脂肽抗菌素表现出对诸如链球菌，葡萄球菌和肠球菌的革兰氏阳性菌的抗菌活性，并且含有在其氨基末端被亲脂脂肪酸乙酰化的大环肽“核心”。
用于与本发明化合物组合或用于通过本发明的方法衍生出来的其它脂肽抗菌物的例子包括，天冬霉素(laspartomycin)(乌美泽瓦等人(Umezawa et al.)，美国专利第3,639,582号；长绳等人(Naganawa etal.)，1968，J.Antibiot.2155；长绳等人(Naganawa et al.)，1970，J.Antibiot.23423)，短杆霉素(brevistin)(诸寺等人(Shoji et al.)，1976，J.Antibiotics.29380)，蜡状菌素A(cerexin A)(诸寺等人(Shoji et al.)，1976，J.Antibiotics.291268)，蜡状菌素B(诸寺等人(Shoji et al.)，1976，J.Antibiotics.291275)，达托霉素(daptomycin)(德波诺等人(Debono et.al.)，1988，J.Antibiotics.411093)，抗菌素A-30912(霍恩等人(Hoehn et al.)，美国专利第5,039,789号)，抗菌素A-54145(深田等人(Fukada et al.)，美国专利第5,039,789号；博克等人(Boeck etal.)，1990，J.Antibiotics.43587)，和抗菌素A-21978C(德波诺等人(Debono et.al.)，1988，J.Antibiotics.411093)。
在此使用的“安福霉素脂肽抗菌素”或“天冬菌素脂肽抗菌素”是指包含大环脂核心的抗菌素，所述核心包括含有侧链的氨基酸，所述侧链具有诸如Dab残基的伯氨基团，和诸如脂肪酸部分的亲脂取代基。安福霉素或天冬菌素核心大环肽包括至少一种环外氨基酸，其通常为Asn或Asp。所述环外氨基酸(一个或多个)可被夹在所述环肽和所述亲脂取代及之间，或夹在所述环肽和具有亲脂取代基的接头之间。在本发明的某一方面，R是指安福霉素或天冬菌素核心环肽，如下式所示
如本文所述，在上述核心环肽部分中，从所述环外氨基酸延伸出的虚线是指例如接头L、一或多个其它环外氨基酸、亲脂取代基或其组合的连接位点。从Dab9残基延伸出的虚线是指连接例如接头L、一或多个其它环外氨基酸、亲脂取代基或其组合的连接位点。可选择地，上述核心环肽部分可与下式等同或交换(其中所述核心环肽的氨基末端现在位与该式的右侧) 在某些实施方案中，所述核心环肽部分的R1可为OH(即所述环烷氨基酸是Asp)，且这样的化合物可使用其如下的IUPAC命名(《CRC化学和物理学手册》(CRC Handbook of Chemistry andPhysics)，CRC Press，Inc.，Boca Raton，FL，Weast，R.C，(ed.)且作为参考)3-氨基-N-[16-(1-氨基-乙基)-31-(1-羧基-乙基)-22，28-二-(羧甲基)-13-异丙基-4-甲基-2，6，12，15，18，21，24，27，30，33-十氧基-1，5，11，14，17，20，23，26，29，32-十氮杂三环[32.4.0.07，11]三十八烷-3-基]琥珀酸。
所述肽的三环、大环核心被命名为“2，6，12，15，18，21，24，27，30，33-十氧基-1，5，11，14，17，20，23，26，29，32-十氮杂三环[32.4.0.07，11]三十八烷”，其中Pro11代表一个环，Pip3代表另一个环，所述环肽的环内酰胺核心代表第三个、31元环。所述三环核心的每个氮的位置是1，5，11，14，17，20，23，26，2和32。所述三环核心的每个羰基的位置是2，6，12，15，18，21，24，27，30和33。将所述多个氮和羰基，其单个氮和羰基结合时，代表了所述环肽核心的酰胺键。位于3，7，13，16，19，22，25，28，31和34的碳是构成所述核心环肽的氨基酸的α-碳。位于4位的碳原子是所述Dab2侧链的β-碳，其通过与所述脂肽的羧基末端环化形成了环内酰胺。
所述Dab2的β-甲基侧链位于4位，称为“4-甲基”。所述Dab2的α-氮是指位于所述3位的“3-氨基”取代基。所述″N-[″部分和所述″]-琥珀酸″部分代表的是Asp1氨基酸(即当R1为-OH的时候)，其可作为例如酰基尾巴(即在Asp1)的取代位点。β-Asp4的侧链是指位于所述三环核心31位的“1-羧乙基”。Asp5和Asp7的侧链分别是指位于所述三环核心28和22位的“双-羧甲基”。Val10的侧链是指位于所述三环核心13位的“异丙基”。最后，所述Dab9侧链是指位于所述三环核心16位的“氨基乙基”，其可作为Dab9取代基的取代位点。应该理解，当R1是NH2时(即，当所述环外氨基酸是Asn时)，除非“琥珀酸”被“琥珀酰亚胺”所替换，否则的话对核心环脂肽的命名都是相同的。
以示例性的方式，化合物C15-安福霉素-9-(β-Ala)可被命名为“3-(十五酰基)氨基-N-[16-[1-(3-氨基-丙酰氨基)-乙基]-31-(1-羧乙基)-22，28-二-(羧甲基)-13-异丙基-4-甲基-2，6，12，15，18，21，24，27，30，33-十氧基-1，5，11，14，17，20，23，26，29，32-十氮杂三环[32.4.0.07，11]三十八烷-3-基]-琥珀酸”，其中，为明晰起见，将两个取代基，所述酰基末端C15基团(相当于“十五酰基”)和所述Dab9β-Ala基团(相当于[″1-(3-氨基-丙酰氨基)-乙基]″)写为粗体。
在一个实施方案中，基于安福霉素的脂肽抗菌素具有下述结构式I的特征 其中，R1是OH或NH2；且R2和R3各独立地选自氢，-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，氨基酸或取代氨基酸。一些示例性和独立选择的取代基包括-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基；其中R4独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C16)芳基烃基和6至16元的杂芳基烃基，链长度为6-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及上述的任意组合；条件为R2和R3不能同时为氢。
在某些实施方案中，在所提供的结构(I)中间产物中，R1是OH或NH2；R2是氢；R3具有保护基团，例如保护的氨基酸Gly，Sar，β-丙氨酸，Gly-Lys或Sar-Lys。
在其它实施方案中，基于安福霉素的脂肽抗菌素具有下述结构式II的特征 其中，R1是OH或NH2；L选自至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸，C(＝O)-，-R′C(＝O)-，-SO2，-C(＝S)-，-P(＝O)-，-OP(＝O)-，-OC(＝O)-，-R′OC(＝O)(NR′R″)-，-NHC(＝O)-，-O-PhC(＝O)-或-NR′C(＝O)-；且R2和R3各独立地选自氢，-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸。一些示例性和独立选择的取代基包括-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基；其中R4独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C16)芳基烃基和6至16元的杂芳基烃基，链长度为6-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及上述的任意组合；R’和R”独立地为R2、R3或R4所定义的一种或多种相同或不同的取代基，约定条件为R2和R3不能同时为氢。
在优选实施方案中，在所提供的结构式(II)中R1是OH或NH2；L选自至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，-R′C(＝O)-，-R′OC(＝O)(NR′)-和-O-PhC(＝O)-，其中R′独立地是如本发明R3和R5定义的一或多种相同或不同的取代基；R2独立地选自-C(＝O)R5，-C(＝O)OR5，-C(＝O)NHR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NHR4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NHR4和-C(＝NR4)NR4R4；R3独立地选自-OR5，-SR5，NR5R5，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)R5，-C(＝O)OR5，-C(＝O)NR5R5，-C(＝S)NR5R5，-C(＝NR5)NR5R5，-C(＝O)H，-R5C(＝O)，-SO2R5，-S(＝O)R5，-P(＝O)(OR5)2，-P(＝O)(OR5)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素，三卤甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸；其中每个R4独立地选自(C7-C10)烃基，(C17-C26)芳基烃基和17至26元的杂芳基烃基，链长度为7-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸；且其中每个R5独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基和6至26元的杂芳基烃基，链长度为5-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及其任意组合。
在某些实施方案中，R2是-C(＝O)OR5或-C(＝O)R5，或是-C(＝O)NHR4，-C(＝S)NHR4或-C(＝NR4)NHR4。在其它实施方案中，R3是选自甘氨酸，β-丙氨酸，肌氨酸，赖氨酸或其任意组合的至少一种氨基酸，或者是选自Gly，β-丙氨酸，GABA，5-氨基戊酸，6-氨基己酸，Lys，gDab，Sar，Orn，Dap，hLys或其任意组合的至少一种氨基酸。在相关实施方案中，所述R3包括二氨基酸，例如甘氨酸-赖氨酸或肌氨酸-赖氨酸。优选地，R3是氨基酸甘氨酸或β-丙氨酸。在某些实施方案中，R2和R3可任意地被链长为10-15碳原子的直链饱和脂肪部分或羟基脂肪部分所取代。在结构式(II)的中间产物为优选的特定的实施方案中，如本文所述，在所提供的任意的前述化合物中，R3还可以包括至少一个保护基团。
在一些实施方案中，结构式(II)中的L是至少一种氨基酸或至少一种取代的氨基酸。例如，所述氨基酸或取代的氨基酸可以是对氨基苯乙酰基，(对氨基苯丙酰基)n，其中n为1或2，间氨基苯乙酰基，(间氨基苯丙酰基)n，其中n为1或2，邻氨基苯乙酰基，(邻氨基苯丙酰基)n，其中n为1或2，GABA，对氨基苯甲酸(PABA)，间氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸，对肼基苯甲酸，间肼基苯甲酸，邻肼基苯甲酸，对氨基-反式-肉桂基，间氨基-反式-肉桂基，邻氨基-反式-肉桂基，L-BBTA或上述的任意组合的氨基酸或取代氨基酸。优选地，L是对氨基苯乙酰基，PABA，间氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸，对氨基-反式-肉桂基，间氨基-反式-肉桂基，邻氨基-反式-肉桂基或其任意组合。在某些实施方案中，本发明提供了某些用于例如治疗或预防微生物感染的抗菌脂肽化合物。结构式(II)化合物的示例性衍生物包括化合物91，331，332，86，87，280或89。在优选实施方案中，本发明提供的是化合物280。
在另一实施方案中，基于安福霉素的脂肽抗菌素具有下述结构式II的特征 其中，R1是OH或NH2；L选自至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，-R′C(＝O)-和-R′OC(＝O)(NR′)-，其中R′是独立的一种或多种如R2或R5定义的相同或不同的取代基。
R2选自-OR5，-SR5，NR5R5，-C(＝O)OR5，-C(＝O)R5，-C(＝O)NHR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NHR4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NHR4，-C(＝NR4)NR4R4，-R5C(＝O)，-SO2R5，-S(＝O)R5，-P(＝O)(OR5)2，-P(＝O)(OR5)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基；R3是氢；其中每个R4独立地选自(C7-C10)烃基，(C17-C26)芳基烃基，17至26元的杂芳基烃基，链长度为7-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸；且其中每个R5独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基和6至26元的杂芳基烃基，链长度为5-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及其任意组合。
在某些实施方案中，R2是-C(＝O)R5，-C(＝O)NHR4，-C(＝S)NHR4或-C(＝NR4)NHR4。在其它实施方案中，R5是10至20元的杂芳基烃基，或含有5-17个碳原子链长度的直链的饱和脂肪部分或羟基脂肪部分。在其它实施方案中，R4是含有8-16个碳原子链长度的直链的饱和脂肪部分或羟基脂肪部分。在一些实施方案中，L是至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸，例如甘氨酸，肌氨酸，苯甘氨酸，苯丙氨酸，O-甲基天冬氨酸，O-t-丁基天冬氨酸，p-氨基苯甲酸(PABA)，间氨基苯甲酸，对肼基苯甲酸，p-氨基苯丙酸，(p-氨基苯丙酸)n，其中n为1或2，L-BBTA，间氨基苯乙酸，p-氨基苯乙酸(Apa)，对氨基-反式-肉桂酸，邻氨基苯甲酸，邻，邻-二氨基苯甲酸，邻，间二氨基苯甲酸，邻，对二氨基苯甲酸，间，对二氨基苯甲酸，间，间二氨基苯甲酸，邻氨基苯乙酸，间氨基苯乙酸，对氨基苯乙酸(Apa)，氨基噻唑乙酸或上述的任意组合。优选地，L是间氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸，间，间二氨基苯甲酸，氨基噻唑乙酸，或PABA，最优选地，L是PABA。
在另一实施方案中，R3是选自Gly，β-丙氨酸，GABA，5-氨基戊酸，6-氨基己酸，Lys，gDab，Sar，Orn，Dap或hLys的至少一种氨基酸。可选择地，在所提供的结构式(II)衍生物中间产物中，R3还可以包括至少一个保护基团。
在优选实施方案中，本发明公开的抗菌化合物可治疗或预防诸如由革兰氏阳性菌引起的微生物感染。示例性的化合物包括21，85，103，104，105，106，107，108，109，110，111，112，113，115，116，117，118，119，120，122，123，254，281，282，283，284，285，286，287，288，289，290，291，292，293，294，295，296，297，300，301，302，303，304，305，306，307，310，311，312，313，314，315，316，317，319，320，321，337，344，345，346，358，359，360，361，362和374。在优选实施方案中，本发明的脂肽衍生物包括化合物85或108或119。
在其它实施方案中，基于安福霉素的脂肽抗菌素具有下述结构式III的特征 其中，R1是OH或NH2；L选自至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸，C(＝O)-，-R′C(＝O)-，-SO2，-C(＝S)-，-P(＝O)-，-OP(＝O)-，-OC(＝O)-，-R′OC(＝O)(NR′R″)-，-NHC(＝O)-，-O-PhC(＝O)-或-NR′C(＝O)-；且R2和R3各独立地选自氢，-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-SOR4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，天然氨基酸，非天然氨基酸，以及取代的天然和非天然氨基酸。一些示例性和独立选择的取代基包括-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基；其中R4独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C16)芳基烃基和6至16元的杂芳基烃基，含有6-25个碳原子链长度的支链或直链的饱和的或单个或多个不饱和脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及上述的任意组合；且每个R′和R″是独立的一种或多种如R2，R3或R4定义的相同或不同的取代基；约定条件为R2和R3不能同时为氢。
在某些实施方案中，在所提供的结构(III)中间产物中，R1是OH或NH2；L是选自Gly或Sar的氨基酸；R2是氢；且R3是具有保护基团的氨基酸，例如Lys。
在另一实施方案中，基于安福霉素的脂肽抗菌素具有下述结构式IV的特征
其中，R1是OH或NH2；L选自至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸，C(＝O)-，-R′C(＝O)-，-OC(＝O)-，-C(＝O)R′-，-SO2，-C(＝S)-，-P(＝O)-，-OP(＝O)-，-R′OC(＝O)(NR′R″)-，-NHC(＝O)-，-O-PhC(＝O)-或-NR′C(＝O)-；且R2和R3各独立地选自氢，-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素，三卤甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸或取代氨基酸。一些示例性和独立选择的取代基包括-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基；其中R4独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C16)芳烃基和6至16元的杂芳烃基，链长度为6-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及其任意组合；且每个R′是独立的一种或多种如R2，R3或R4定义的相同或不同的取代基；约定条件为R2和R3不能同时为氢。
在优选实施方案中，在所提供的结构(IV)的基于安福霉素或天冬菌素的脂肽抗菌素中，R1是OH或NH2；L独立地选自至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，C(＝O)-，-R′C(＝O)-，-SO2，-C(＝S)-，-P(＝O)-，-OP(＝O)-，-OC(＝O)-，-R′OC(＝O)(NR′)-，-NHC(＝O)-，-O-PhC(＝O)-或-NR′C(＝O)-，约定条件为在Dab9上L是-C(＝O)-；其中R′是独立的一种或多种如R2，R3或R4定义的相同或不同的取代基；R2选自-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素，三卤甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸；R3选自-C(＝O)OR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-CO2H，取代的(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，取代的(C5-C10)芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)联芳基，取代的5至10元的杂芳基，取代的(C6-C26)芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸，约定条件为R3含有-C(＝O)-，-C(＝S)-或-C(＝NR4)-中的至少一种；其中R4独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基和6至26元的杂芳基烃基，链长度为5-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及其任意组合。
在某些实施方案中，在本发明所提供的结构(IV)的脂肽衍生物中，R1是OH或R1是NH2。在其它实施方案中，R3是-C(＝O)-或-C(＝S)-。在其它优选实施方案中，所提供的化合物都具有抗菌活性。示例性的化合物包括化合物81，210，223，235，237或373。在某些实施方案中，R3是选自Gly，β-丙氨酸，GABA，5-氨基戊酸，6-氨基己酸，Lys，gDab，Sar，Orn，Dap和hLys的至少一种氨基酸或取代氨基酸。在结构(IV)中间产物为优选的特定实施方案中，如本文所述，在所提供的任意的上述化合物中，R3还可以包括至少一个保护基团。
在其它实施方案中，提供了抗菌脂肽衍生物及其药物可接受的盐，例如化合物3，4，60，128，147，199，253或278。这些衍生物或那些在本文中描述过的衍生物中的任意一种都可以与药物可接受的载体，赋型剂或稀释剂进一步配方使用。
在某些实施方案中，本发明公开的脂肽衍生物可以是结构单一的，或者所述衍生物可以包含一或多种结构不同化合物的混合物的组合物的形式存在。在某些实施方案中，本发明的化合物可以游离酸或游离碱的形式存在，或以盐的形式存在，例如药物可接受的盐。在另一实施方案中，所述核心环肽可以是β-异构体，脱水异构体或二脱水异构体。
为方便起见，可将安福霉素核心环肽的衍生物简写为以下形式(Ia) R2-R-R3；(IIa) R2-L-R-R3；(IIIa)R2-R-L-R3；以及(IVa) R2-L-R-L-R3其中R是安福霉素核心环肽(其包括了在1位与R1结合的环外氨基酸)，R2和R3可以是本发明所述的任意取代基，包括，例如氢，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，氨基酸和取代氨基酸等等，约定条件为R2和R3不能同时为氢。任意地，R2和R3可以通过本发明所述的接头L部分与所述核心环肽连接，所述接头L部分包括本领域所属人员公知的与氮形成共价键的任意化学官能团。示例性的连接基团L可包括酰胺，亚酰胺，磺酰胺，亚磺酰胺，脒，碳酸根，氨基甲酸酯，硫脲，尿素等等。在某些实施方案中，L选自一或多种氨基酸，一或多种取代氨基酸，-C(＝O)-，-SO2，-C(＝S)-，-P(＝O)-，-OP(＝O)-，-OC(＝O)-，-R′OC(＝O)(NR′R″)-，-NHC(＝O)-，-O-PhC(＝O)-和-NR′C(＝O)-；且R′各自独立地是一或多种如R2，R3或R4定义的相同或不同的取代基。
众所周知，从培养物中分离的脂肽抗菌素(例如，安福霉素，天冬菌素)通常都含有化合物的混合物，所述化合物根据其大环核心结构(以下定义)或其亲脂取代基(例如，脂肪酸部分)的不同而不同。如本文所述，可将含有多种不同化合物的所述混合物以亚混合物或结构单一化合物相互分开或分离。如本文所使用的，对“脂肽抗菌素”的术语意图包括，尤其是通过所述生产菌株天然产生的所述混合物，以及从中分离的任何亚混合物或结构单一化合物或其衍生形式。
此外，可将所述核心环肽进行修饰成为β-异构体，脱水异构体和二脱水异构体。例如，可将安福霉素或天冬菌素核心环肽的所述Asp-Gly对(分别位于5，6位和7，8位)从α-连接修饰成为β-连接。在所述修饰中，所述连续肽主链的天冬氨酸残基从α-酸变成了β-酸。在不考虑可能的立体化学变化的情况下，所得的β-异构体可能包含以下三种可能的结构修饰(a)5，6-β和7，8-α，(b)5，6-α和7，8-β，或(c)5，6-β和7，8-β。这些安福霉素或天冬菌素核心环肽β-异构体的每一个都具有与所有α-安福霉素核心环肽相同的分子量。类似地，可对安福霉素核心环肽的所述Asp-Gly对(分别位于5，6位和7，8位)进行修饰，从而失去水分子得到脱水异构体或二脱水异构体。通过失去一分子水，可以得到两种可能的单脱水异构体。如果两个位点都进行了修饰，通过失去两分子水，可以形成二脱水异构体。就像对所述单个天冬氨酸残基的立体化学进行的修饰一样，应该理解β-异构体和脱水异构体是可以组合的，对所述单个天冬氨酸残基的立体化学进行的修饰也一样。所以，就像这里使用的，术语“脂肽抗菌素”意图包括任意这些修饰结构或其组合物。示例性的安福霉素核心环肽β-异构体如图1所示。示例性的安福霉素核心环肽脱水和二脱水异构体如图2所示。
“结构单一”是指这样的化合物组合物，其中所述组合物中含有的所述个体分子的基本百分比，例如为95％-100％范围且优选约为95％，96％，97％，98％，99％或更多，每一分子都含有以所述相同顺序和相同键相互结合的相同数量和种类的原子。本发明使用的“结构单一”并非为了相互区别不同的几何异构体或不同的旋光异构体。例如，本发明所述的顺式和反式-丁-2，3-烯的混合物就认为是结构单一的，是一种消旋混合物。当意图说明包括大部分百分比的单几何异构体或旋光异构体时，可分别使用“几何单一”和“旋光或对应异构单一”的名称。
同样，短语“结构单一”也并不需要区分分子的互变异构形式或离子化状态，或分子的其它形式，其是平衡现象或其它可逆的互换现象的结果。所以，例如，即使在有机酸中，一些羧基是质子化状态的(COOH)，而其它的是脱质子态的(COO-)，所述有机酸的组合物都可以被认为是结构单一的。类似地，除非另有指明，含有酮类和烯醇类互变体的混合物的组合物也认为是结构单一的。
在一些实施方案中，本发明的所述化合物是产自培养物的母体安福霉素型脂肽抗菌素的脂肽衍生物。这些母体安福霉素型脂肽抗菌素的例子包括安福霉素(双霉素(glumamycin))，天冬菌素，晶霉素，friulimycin，津枝霉素(tsushimycin)和沙河霉素(zaomycin)。本领域所属技术人员应该意识到，通过生产菌株和培养条件可以大部分地指明通式(I)到(IV)的所述环外氨基酸和亲脂取代基R2的结构。本领域所属技术人员还应该意识到，在这些实施方案中，所述母体安福霉素型脂肽抗菌素可包括所述化合物之间的环外氨基酸或亲脂取代基R2的结构不同的化合物的混合物。以下将更详细地讨论本发明所述化合物的合成，本发明的所述化合物可通过适当筛选所述母体安福霉素型脂肽抗菌素用作起始材料获得。例如，尽管从培养物分离制备的天冬菌素，安福霉素，沙河霉素和津枝霉素包含化合物的混合物，但认为它们都具有相同的安福霉素型大环核心所述安福霉素型环肽核心R，其中R1是OH。类似地，在friulimycin的制备中，认为所述混合物的成分都具有相同的安福霉素型环肽核心所述安福霉素型环肽核心R，其中R1是NH2。所以，应该理解，含这些相关的抗菌混合物的所述化合物仅区别于其亲脂取代基(即脂肪酸部分)。可选择地，抗菌素A1437包含化合物的混合物，所述化合物仅区别于其安福霉素型大环核心的结构和脂肪酸部分(参见，例如，美国专利第6,194,383号)。
所有这些不同的母体安福霉素型脂肽抗菌素都可用作起始材料，生产本发明所需要的脂肽抗菌素(例如，具有特异性亲脂取代基或Dab9取代基)。在对所述核心大环肽进行衍生反应之前，通过分开和分离所述母体的基于安福霉素型的脂肽抗菌素起始材料，或着，可选择地，如以下更详细描述的，在衍生反应之后分离所的混合物的成分化合物，可获得本发明的结构单一脂肽衍生物。
此外，在多种情况下，这些母体安福霉素型脂肽抗菌素的所述脂肪酸部分的确切结构是未知的。可以通过将所述母体安福霉素型脂肽抗菌素起始材料脱脂，并将所述脱脂中间产物与脂肪酸或具有特异结构的其它取代基(例如，亲脂取代基)反应，获得具有特定结构脂肪酸部分的本发明化合物。可将所得产物任意进行衍生反应，例如，在所述Dab9残基，可产生在所述氨基末端具有特异亲脂取代基的本发明的Dab9衍生物。可选择地，可以对通过母体安福霉素型脂肽抗菌素进行衍生反应制备的本发明的Dab9衍生物进行脱脂，并且将所述Dab9衍生的脱脂中间产物与脂肪酸或具有特异结构的其它取代基反应。
适合用于生产适当脂肪酸部分或适合将适当脂肪酸部分连接于所述核心大环肽的脂肪酸是本领域内公知的(参见，例如RmppChemie Lexicon，法尔贝教授(Prof.Falbe)和雷吉茨教授(Prof.Regitz)，9thEdition，Georg Thieme Verlag Stuttgart，New York；以及霍雷(Hawley)，3rdEdition，Van Nostrand Reinhold Company，NewYork，在此将每一个全部引用并作为参考)。在一个实施方案中，所选择的脂肪酸可得到具有脂肪酸部分的本发明所述化合物，该脂肪酸部分与公知的安福霉素型脂肽抗菌素的脂肪酸部分完全相同。这些脂肪酸是本领域所属人员公知的。可提供示例性的例子，例如美国专利第6,194,383号(特别参见第5-8栏)，在此将其全部引用作为参考。
然而，所述脂肪酸并不需要与公知的安福霉素型脂肽抗菌素的脂肪酸相对应。适合的脂肪酸可以包括非支链的和饱和的脂肪酸(例如己酸，庚酸，辛酸，壬酸，癸酸，十一酸，月桂酸，十三酸，肉豆蔻酸，十五酸，棕榈酸，十七酸，硬脂酸，十九酸，花生酸，二十二烷酸，廿四烷酸，pentacosenoic等等)；支链的和饱和的脂肪酸(例如异丁酸，异戊酸，异棕榈酸等等，以及在所述前-异构型中的对应酸，并可包含甲氧基或羟基取代基)；一烯酸(例如三桠酸(obtusilic)，癸烯酸(caproleic)，月桂烯酸(lauroleic)，天台乌药酸(linderic)，肉豆蔻烯酸(myristoleic)，抹香鲸酸(physeteric)，子此酸(tsuzuic)，棕榈油酸(palmitoleic)，岩芹酸(petroselinic)，油酸(oleic)，异油酸(vaccenic)，鳕油酸(gadoleic)，二十碳-11-烯酸(gondoic)，鲸蜡烯酸(cetoleic)，芥酸(erucic)，神经酸(nervonic)等等)；和聚烯酸(例如亚油酸(linoleic)，花生四烯酸(arachidonic)，十八碳四烯酸(stearidonic)等等，以及亚甲基插入的聚烯烃，聚亚甲基插入的聚烯烃，轭合的脂肪酸和卤化的脂肪酸)。参见美国专利第6,194,383号，在此将其全部引用作为参考。
在某些优选实施方案中，所述脂肪酸是具有6-25碳原子链长度的脂肪酸部分或羟基脂肪酸部分，且更优选为10-20碳原子。所述脂肪酸或羟基脂肪酸可以是支链或直链的，饱和或单或多不饱和的，及上述的组合。在一个实施方案中，所述脂肪酸是含有10-18碳原子的饱和或单不饱和脂肪酸，其可以是直链或单分支的，优选为异-或前-异构型。在另一实施方案中，所述脂肪酸是含有10-18碳原子的饱和或单不饱和的羟基脂肪酸，其可以是直链或单分支的，优选为异-或前-异构型。在特定的实施方案中，所述羟基脂肪酸在2，3位或所述链的末端羟基化。
在某些方面，作为例子所示的具有结构式(I)-(III)的化合物，R2(例如，亲脂取代基)可以直接与所述Asp或Asn的氨基末端氨基连接，R3取代基可直接连接于Dab9的β-氨基，其中R2和R3独立地选自氢，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，天然氨基酸，非天然氨基酸以及取代的天然和非天然氨基酸；其中R2和R3不能同时为氢。一些示例性和独立选择的取代基包括-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基；其中每个R4独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C16)芳基烃基和6至16元的杂芳基烃基，含有6-25个碳原子链长度的支链或直链的饱和的或单个或多个不饱和脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及其任意组合。
在结构式(I)-(IV)的化合物中，R1可以是OH或NH2，其意味着所述氨基末端环外氨基酸分别是Asp残基或Asn残基。如本领域所公知的，所述氨基末端环外氨基酸是Asp还是Asn，依赖于对本发明所述脂肽衍生物合成中用作起始材料的基于安福霉素的母体脂肽抗菌素，或含有特异亲脂取代基和/或Dab9取代基的本发明衍生物的选择。例如，其中氨基末端环外氨基酸是Asp的脂肽衍生物可以从安福霉素，天冬菌素，津枝霉素中，或从抗菌素A1437的Asp部分制备。其中氨基末端环外氨基酸是Asn的本发明脂肽衍生物可以从friulimycin中或抗菌素A1437的Asn部分制备。根据例如美国专利第6,194,383号中所述的的方法，可将培养的抗菌素A1437的制品中分离抗菌素A1437的Asp和Asn部分，在此将其全部引用作为参考。
在另一些方面，在结构式(I)-(IV)的衍生抗菌化合物中，可具有R3取代基，R3可包括氢，-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素，三卤甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，天然氨基酸，非天然氨基酸以及取代的天然和非天然氨基酸。一些示例性和独立选择的取代基包括-OR4，-SR4，-NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基；其中每个R4独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C16)芳基烃基和6至16元的杂芳基烃基，链长度为6-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，及上述的任意组合，伯氨基或仲氨基，一或多种氨基酸，一或多种取代氨基酸。在一个优选实施方案中，所述Dab9的β-氨基直接与R3取代基连接，形成了具有通式-NHR3的伯胺或仲胺，其中R3是氢，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，天然氨基酸，非天然氨基酸以及取代的天然和非天然氨基酸，及上述的任意组合。在另一优选实施方案中，所述伯氨基或仲氨基可通过任意连接部分放置于远离如结构式(I)-(III)化合物中所述的大环的Dab9残基，如本文所述，例如在化合物结构式(III)-(IV)中。本发明部分地基于，在所述氨基末端环外氨基酸、或在所述大环Dab9残基、或在这两个位点上衍生的基于安福霉素的脂肽抗菌素，基本上保持了源自其所衍生的所述母体安福霉素型脂肽抗菌素的相同的抗菌性质，但却具有改变的溶解性这一意外发现。例如，当与其衍生出的母体安福霉素型脂肽抗菌素进行比较时，这可使得基于安福霉素的脂肽抗菌衍生物具有改善的治疗性质或治疗谱。
无需与理论结合，将R2或R3或两者同时连接至所述核心大环肽的任意连接部分被优选引入足量原子，从而将所加成的取代基与所述核心环肽分隔在约1至约10。通常，连接基团是部分，当其与所述连接基团成键的氨基末端环外氨基酸氨基的氮原子或所述Dab9β-氮原子连接时，可得到在本发明的所述化合物能够使用的生理条件下稳定的连接。适合的连接的例子包括酰胺，亚酰胺，磺酰胺，亚磺酰胺，脒，碳酸根，氨基甲酸酯，硫脲，尿素等等。相应的，适合的连接基团的例子包括一或多种氨基酸，一或多种取代氨基酸，一或多种氨基酸以及一或多种取代氨基酸的组合，-C(＝O)-，-S(＝O)2-，-C(＝NH)-，-NHC(＝O)-，-NHC(＝S)-，-NHC(＝O)NH-，-NHC(＝S)NH-和-C(＝O)O-基团。
本领域所属技术人员应当理解，要达到所述R2或R3取代基与所述核心环肽之间的特定间距所必需的确切原子数，在其它事件中，依赖于所述原子的种类(例如，N，O，S，C等等)以及含有所述连接部分的键(例如，单键，双键，三键等等)，所以，如果需要的话，需要选择其它取代基来获得适当的间距。例如，所述其它的间隔物取代基，可存在或不存在，可包括适于间隔作用的碳或杂原子的任意组合。在某些实施方案中，所述接头L还可包含间隔物部分，所述间隔物部分可以是亲水或疏水的，较长或较短的，刚性的，半刚性的或柔性的。例如，含有所述间隔物的适合基团包括-CH2-，-CH＝CH-，-C≡C-，-O-，-S-，-NH-，-NH-NH-，-N＝N-，-C(＝O)-，-S(＝O)2-，-S(＝O)2-O-，-C(＝NH)-等等。其它适于间隔的间隔物是本领域内公知的，包括烃基，杂烃基，脂肪杂原子桥，芳基，芳基芳基，芳基烃基，杂芳基，杂芳基-杂芳基，取代的杂芳基-杂芳基，杂芳基烃基，杂芳基-杂烃基等等。所以间隔物可包括碳-碳单键，双键，三键，或芳香族碳-碳键，氮-氮键，碳-氮键，碳-氧键或碳-硫键，所以，也可包括诸如羰基，醚，硫醚，氨甲酰，氨磺酰，脲，尿烷，肼等等的官能团。
本领域所属技术人员熟知的这些和其它基团，可用于多种组合来制备适合的间隔物和组合的接头-间隔物。此外，所述间隔物可以被本发明所述的一或多种相同或不同的取代基任意取代。选择适合的接头或间隔物是本领域所属技术人员应有的技能。例如，当所需是刚性接头或间隔物时，其可以是刚性的聚不饱和烃基或芳基，联芳基，杂芳基等等。当所述是柔性接头或间隔物时，其可以是柔性的多肽，例如Gly-Gly-Gly，或者是柔性的饱和烷基或杂烷基。亲水性接头或间隔物可以是，例如诸如聚亚烷基二醇的聚醇或聚醚，例如。疏水性接头或间隔物可以是，例如烃基或芳基。
在具有结构通式(I)-(IV)衍生物的某些优选实施方案中，取代基R2或R3可以是一或多个氨基酸，所述氨基酸可通过其末端羧基与所述环外氨基酸的氨基末端氨基，或所述大环Dab9残基的β-氨基连接，形成酰胺键。这类氨基酸可包括α-，β-和γ-氨基酸。所述氨基酸可任意包括侧链部分，例如二十种遗传编码氨基酸或其类似物中的一种的侧链部分。在某些优选实施方案中，所述取代基是选自甘氨酸，脯氨酸，哌可酸(pipecolic acid)，肌氨酸，苯丙氨酸，苯甘氨酸，天冬酰胺，酪氨酸，色氨酸，亮氨酸，丙氨酸，异亮氨酸，缬氨酸，谷氨酰胺，苏氨酸，β-丙氨酸，2，4-二氨基丁酸，2，3-二氨基丙酸，β-甲基天冬氨酸，环己基丙氨酸，六氢异烟酸(isonipecotic acid)，鸟氨酸，和6-氨基己酸的氨基酸。在其它优选实施方案中，加入了不止一种氨基酸取代基，例如，甘氨酸-亮氨酸，甘氨酸-赖氨酸，赖氨酸-甘氨酸，甘氨酸-亮氨酸，脯氨酸-甘氨酸，(β-丙氨酸)-(6-氨基己酸)，(β-丙氨酸)-鸟氨酸，(β-丙氨酸)-赖氨酸，甘氨酸-丙氨酸，(6-氨基己酸)-甘氨酸，甘氨酸-(6-氨基己酸)，甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸，甘氨酸-赖氨酸-甘氨酸，甘氨酸-甘氨酸-赖氨酸，甘氨酸-赖氨酸-赖氨酸，赖氨酸-赖氨酸-赖氨酸，赖氨酸-赖氨酸，甘氨酸-缬氨酸，脯氨酸-赖氨酸，甘氨酸-鸟氨酸，甘氨酸-(2，3-二氨基丁酸)，甘氨酸-(2，3-二氨基丙酸)，甘氨酸-同源赖氨酸，肌氨酸-(6-氨基己酸)，肌氨酸-赖氨酸。所述氨基酸中的任意手性中心可以是R-或S-构型。适合氨基酸的例子包括所述二十个遗传编码的氨基酸；多种列示于法斯曼(Fasman)，《CRC生物化学与分子生物学实用手册》(CRC Practical Handbook atBiochemistry and Molecular Biology)，1989，CRC Press，Inc.，BocaRaton，FL 4-60页，以及列示于法斯曼(Fasman)，1989，上述材料69页中的α，β-不饱和氨基酸。其它适合的氨基酸对本领域所属技术人员而言是显而易见的。
合成的方法使用商业可获得的起始材料或通过常规合成或生物合成方法制备的起始材料，可以若干不同的合成途径合成本发明的所述化合物。图3所示为两种常见的合成方法。
在方案(I)中，R和R1与在结构通式(I)-(IV)的前述定义的一样。根据方案(I)，母体安福霉素型脂肽抗菌素(或抗菌素混合物)10与适当的保护反应剂12结合，该保护反应剂在所述特异示例性的例子中为Fmoc-保护的甘氨酸，得到Dab9保护的中间产物(或中间产物的混合物)14。所述保护的反应物可以是在本发明描述的任意取代基，包括亲脂取代基，其它有机取代基，一或多种氨基酸(天然的，非天然的，取代的等等)等等。诸如抗菌素(或抗菌素混合物)10的伯氨与诸如反应物12的羧酸结合产生酰胺键的反应条件对本领域所属技术人员是公知的，并且可以在与多肽和蛋白质合成相关的任意标准合成方法或文献的概要中找到。参见，例如马驰，J(March，J.)，Advanced OrganicChemistry；Reactions，Mechanisms and Structure，4thed.，1992；拉洛克(Larock)，Comprehensive Organic Transformations，VCH，NewYork，1999；博丹扎斯基(Bodanzsky)，Principles of Peptide Synthesis，Springer Verlag，1984；博丹扎斯基(Bodanzsky)，Practice of PeptideSynthesis，Springer Verlag，1984；劳埃德-威廉等人(Lloyd-Williams etal.)，Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins，CRC Press，1997特别是105-114页)；以及阿瑟顿(Atherton)和夏帕德(Sheppard)，Solid Phase Peptide SynthesisA Practical Approach，IRL Press，1989)。本领域公知的方法中，也可以使用可替换的反应基团，例如异氰酸酯(其可产生尿素)以及其它在此列示的基团。
然后将保护的中间产物14脱保护，得到Dab9衍生物(或衍生物混合物)16。尽管所述方法以Fmoc保护基团来进行说明，但本领域所属技术人员应该理解可以采用其它的保护基团。此外，在其它情况下，反应物12可以包括其它或额外的需要保护的官能团。适合对广泛不同官能团进行保护的基团，及其脱保护条件是公知的，对本领域所属技术人员而言也是显而易见的。也可以找到对广泛官能团的选择性保护的特别指导，例如，参见格林(Greene)和武兹(Wuts)，Protective Groups in Organic Synthesis，3rdedition，1999(″格林(Greene)和武兹(Wuts)″)。优选的保护基团是那些可容易去除的保护基团。保护伯氨的优选基团是叔丁氧羰基(“t-Boc”)，9-芴甲氧羰基(“Fmoc”)和苯甲氧羰基(“Z”)。如本文所述，如果所述母体安福霉素型脂肽抗菌素10是单独成分的混合物，那么本领域所属技术人员应意识到，可以获得衍生物16的混合物，并且可以经过单独地、部分或完全地分离或纯化来得到具有可变R1基团的一系列单独的衍生物16。采用所述方法制备的代表性的衍生物16列示于表16以及实施例367，378，369，370，371和372中。
从已知可产生所述抗菌素的微生物培养物中可分离得到母体安福霉素型脂肽抗菌素10。产生安福霉素型脂肽抗菌素的微生物是众所周知的，其分离条件，适于进一步纯化的条件以及所得抗菌素也是公知的。例如，产生安福霉素(双霉素)的菌株包括暗灰链霉菌(Streptomyces canus)(ATCC #12237；参见(海因曼等人(Heinemann etal.)，1953，Antibiot.Chemother.31239-1242)和沙阿霉素链霉菌(Streptomyces zaomyceticus)(ATCC#13876；参见柴田等人(Shibata etal.)，美国专利第3,160,561号)。产生天冬菌素的菌株包括灰色链霉菌螺旋亚种(Streptomyces griseus subspecies sprialis)(ATCC #13733；参见(沙爱等人(Shay et al.)，美国专利第3,057,779号)和紫色链霉菌(Streptomyces violaceus)(Rossi-Doria)Waksman(ATCC #13734；参见美国专利第3,057,779号)。产生晶霉素的菌株包括紫黑色链霉菌晶霉素变种(Streptomyces violaceoniger var.crystallomycini)(郭泽等人(Gauze et al.)，1957，Antibiotiki 29-14)。产生抗菌素A1437的菌株包括游动放线菌(Actinoplanes sp.)(DSM #7358；参见哈曼等人(Hammann et al.)，美国专利第6,194,383号)。产生friulimycin的菌株包括Actinoplanes friuliensis(HAG#010964)。产生津枝霉素的菌株包括假浅灰链霉菌(Streptomyces pseudogriseolus)(冈见(Okami)与梅尺(Umezawa))(ATCC pseudogriseolus #21139和#21140；参见西村等人(Nishimura et al.)，美国专利第3,781,420号)和假浅灰链霉菌葡糖发酵亚种(Streptomyces pseudogriseolus subspecies glucofermentans)(西村(Nishimura)与小津(Otsuka))(ATCC #21141；参见西村等人(Nishimura et al.)，美国专利第3,781,420号)。产生沙河霉素的菌株包括沙阿霉素链霉菌(Streptomyces zaomyceticus)(涸沼(Hinuma)，NRRL #B-2038)。所述多种脂肽抗菌素的培养和分离条件在本发明中已有描述，并可在以上引用的专利和文献，以及与诸多这些抗菌素相关的之前提到的多份文献中找到。
以下描述是在生物反应器中采用发酵制备基于安福霉素脂肽化合物的示例性方法。可通过发酵在700L的不锈钢生物反应器中生产基于安福霉素的脂肽。通过在含有1.0％右旋糖，0.5％糖蜜，1.0％ Bacto蛋白胨和0.1％ CaCO3的100mL自来水培养基中接种来自灰色链霉菌螺旋亚种(NRRL B-3290；BSP-M707)斜面上刮取的孢子和菌丝。将所述接种培养基在约28℃的温度在每分钟约180转(RPM)的旋转摇床上培养约48小时，以提供完全和均一的植物性生长。然后将该种子生长物(10ml)转移至2L烧瓶中的400ml相同培养基中，并在相同条件下进行培养，然后将其加入到16L发酵罐中的9.6L相同培养基中，在48小时后，200rpm和5Lpm的通气条件下得到了第3阶段的种子。将这样的最终种子接种于500L培养基，所述培养基含有1g/LCaCO3，10g/L Grandma′s Molasses(未硫化)，10g/L Difco Bacto蛋白胨和20g/L发酵葡萄糖，灭菌前调至pH7.1。在搅拌速度200rpm，空气流量125Lpm和28℃的条件下进行发酵，还需要添加除沫剂Mazu DF204。114小时后收集所述发酵产物。
发酵完成后，可使用下述示例性方法获得所述基于安福霉素脂肽的粗制备产物。通过离心可去除所述发酵液中的细胞和其它固体，将上清液(470L)用HCl调至pH3.3，并在14℃静置2小时。离心去除所述沉淀。将所述上清液调至pH7.0，加入硫酸铵从而沉淀所述粗抗菌素复合物。离心收集所述沉淀，溶解于水，调至pH7.0，冷冻干燥得到了含有5-7％所述基于安福霉素脂肽复合物的2058g固体。
为了进一步纯化所述基于安福霉素的脂肽，可采用如下的示例性的螯合方法。将含有5-7％所述基于安福霉素脂肽复合物的68.3g黑色粗产物溶于500ml蒸馏水，搅拌中调至pH7.0，从而最大化其水溶解度。可能会形成一些水不溶物，将其离心分离，然后将剩余的上清液调至pH3.5。将所述基于安福霉素的脂肽复合物进行两次连续的1-丁醇提取(500ml，300ml)，然后将所述合并的丁醇相中加入600ml水。搅拌所得两相体系，用1N NaOH调至pH8.0，使得所述基于安福霉素的脂肽复合物在水相中为钠盐。向所述分离的水相中加入氯化钙(2.642g)，通过两次连续提取(500ml，250ml)，所述基于安福霉素的脂肽被提取入作为螯合物的1-丁醇中。为了去除钙，将所述1-丁醇相合并，与900ml水混合，调至pH3.0，所述1-丁醇相从所述水相中分离，并用150ml水洗涤。将基于安福霉素的脂肽的1-丁醇相与500ml水合并，调至pH7.0。为了去除残留色素，将含有所述抗菌素复合物的水相调至pH3.0，并与500ml 1-丁醇混合。将所述1-丁醇相分离，用150ml水洗涤(pH2-3)，与500ml水混合，将所述混合物调至pH7.0。将作为部分钠盐的含有所述基于安福霉素脂肽复合物的水相真空蒸发去除残留的1-丁醇，冷冻干燥后得到3.6g白色粉末。可使用纯化复合物的HPLC分析，通过计算所述复合物在9.4-10.6分钟的215nm峰的百分面积，测定所述基于安福霉素的脂肽的纯度(优选为约85％-约95％纯，更优选为约90％-约95％纯)。所采用的HPLC系统可以是Prodigy5μODS(2)柱子，进行八分钟pH7.2，0.05M磷酸缓冲液中10％-75％乙腈的梯度洗脱。
如上所述，在大多数情况下，从培养物中分离出安福霉素型的脂肽抗菌素或抗菌素10的混合物是根据R1和所述环肽核心R的结构不同而不同的化合物混合物。例如，安福霉素是化合物10的混合物，其中R1是异-和前-异C12和C13脂肪酸的混合物。天冬菌素是化合物10的混合物，其中R1是异-和前-异C13和C14脂肪酸的混合物。津枝霉素是化合物10的混合物，其中R1是异-和前-异C14和C15脂肪酸的混合物。在安福霉素、天冬菌素和津枝霉素中，所述核心环肽通过环外天冬氨酸氨基酸与R1相连。Friulimycin是化合物10的混合物，其中R1是异-和前-异C13和C15脂肪酸的混合物。在Friulimycin中，所述核心环肽通过环外天冬氨酰胺氨基酸与R1相连。抗菌素A1437是化合物11的混合物，其中R1是异-和前-异C13，C14和C15脂肪酸的混合物，且所述环外氨基酸可以是天冬氨酸或天冬酰胺。在许多情况下，有利于较多或较少生产一种或多种所述混合物中的化合物的培养条件是公知的(参见，例如J.Biotechnology 7283-292，1988)。这些方法可与本发明共同使用，从而提供具有确定摩尔比的脂肪酸部分的Dab9衍生物的混合物。
从培养物中分离的安福霉素型脂肽抗菌素(抗菌素混合物)10可直接用于方案(I)，而无需先经过所述混合物多种成分的分离和纯化。或者它们可以根据所述脂肪酸先进行分离，成为结构单一的化合物或亚组分或亚混合物，例如抗菌素A1437的情况，则根据所述环外氨基酸(例如，天冬氨酸和天冬酰胺)进行分离。对抗菌素制备物的单独组分或亚混合物进行分离的方法是本领域内公知的。特别适合的方法可见，例如，美国专利第6,194.383号(特别是第10-12栏)，以及下文中的实施例部分。
在一些情况下，基于安福霉素的脂肽抗菌素(抗菌素混合物)10的所述脂肪酸部分的结构是未知的。在某些情况下，在所述氨基末端具有特定取代基的本发明的衍生化合物是所需要的，例如氨基酸部分或大环Dab9位。在其它情况下，相对于例如，所述亲脂取代基的结构单一，几何单一或旋光单一的衍生物是所需要的。因此，相对于从培养的抗菌制备物中分离成分的方法，更方便或需要的是用特定取代基取代所述培养抗菌素(抗菌素混合物)10的所述天然脂肪酸部分，所述脂肪酸部分可以是特异的脂肪酸部分，或可与本发明所述的N-末端共价结合的任意其它部分。如方案(I)所示，可通过若干策略达到这一目的。
如第一种策略所述，首先可对安福霉素型脂肽抗菌素(抗菌素混合物)10的大环Dab9残基的β-氨基进行保护，得到保护的中间产物(或中间产物混合物)18。此外，当示例的保护基团是Fmoc时，本领域所属技术人员应该明白也可以使用其它常见的公知的氨基保护基团。然后将保护的中间产物(或中间产物混合物)18脱脂或脱酰化，得到保护的安福霉素型大环核心20。然后将保护的核心20与反应基团22结合，所述反应基团可如羧酸所列示，也可使用标准化学试剂得到保护的安福霉素型脂肽抗菌素24。如本文所述，本领域所属技术人员应该理解，如本发明所述，任意可与所述N-末端反应的反应基团都可用来生产其它的安福霉素型脂肽抗菌素24。
在示例性的羧酸22中，与其羰基-C(＝O)-结合的Rx可表示为结构式(I)或(III)的R2，或者结构式(II)或(IV)的R2-L。简言之，该羧酸可以通过以下示例性方法活化和纯化(参见下述实施例1)。可将所述羧酸在惰性气氛中溶解于干燥的二甲基甲酰胺(DMF)，然后加入羟基琥珀酰亚胺，在冰浴上冷却。然后，以十分钟间隔向所述反应混合物中加入相等的两份二环己基碳二亚胺，完成之后，在冰浴中搅拌所述混合物，使其升至室温，然后再搅拌至少2小时。将所得粗产物真空浓缩，用异丙醇和己烷重结晶纯化，得到较高的产量和相对干净的活化的酯。
采用以下示例性方法可将所述活化羧酸加入到保护的核心大环肽中(还是参见实施例)。将保护的基于安福霉素的核心肽20(例如安福霉素-9-Fmoc)溶解于水，然后用二甲基甲酰胺稀释。向所述溶液中缓慢加入碳酸氢钠，然后将所述混合物在冰浴冷却。继续保持于冰上，向所述反应混合物中加入预先溶解于DMF中的酰活化酯22的溶液，然后在室温下继续搅拌至少6小时进行反应。向所述反应中加入哌啶并继续搅拌所述混合物1小时。过滤所述反应物，用另外的二甲基甲酰胺洗涤所述不溶物，然后将所述滤液真空浓缩直至干燥。使用溶解于氯仿的甲醇(或溶解于乙酸乙酯的甲醇)的梯度系统的快速色谱，以较高的总产量和纯度得到了所需要的结合有酰基尾巴的安福霉素。
可将保护的抗菌素24脱保护得到化合物26，然后与试剂12反应得到保护的Dab9衍生物28，再经过脱保护后，可得到Dab9衍生物30。采用以下示例性方法可将取代基加入到所述大环Dab9残基中(参见实施例)。将所述酰基轭合的安福霉素悬浮于二甲基甲酰胺，加入碳酸氢钠，然后在冰浴冷却，再在室温搅拌6小时进行反应。将所得粗产物真空浓缩，然后置于所需要的标准脱保护条件。使用溶解于水的乙腈的梯度系统的C18 Prepack B&J固相柱子进行终纯化，以较高的产量和纯度得到了较干净的产物。
当母体安福霉素型脂肽抗菌素(或抗菌素混合物)10是具有所述相同诸如安福霉素、天冬菌素、friulimycin、津枝霉素或沙河霉素的安福霉素型大环核心的化合物的混合物时，本方法可用来合成结构单一的本发明的Dab9衍生物，而无需相互分离所述母体安福霉素型脂肽抗菌素10的各种脂肪酸部分。脱脂反应(或脱酰反应)可得到含有各种脂肪酸和所述相同的保护的安福霉素型大环核心19的混合物。采用任意公知的方法，例如高效液相色谱、逆流提取、离心、过滤、沉淀、离子交换色谱、凝胶电泳、亲和层析等等，可将所述保护的大环核心19从该混合物中以较高的纯度分离出来。可直接使用或通常可用于分离特异的保护大环核心的具体方法可见于，德波诺等人(Debono et.al.)，1988，J.Antibiotics.411093和美国专利第5,039,789号(参见，例如第30-34栏))，都将其引用作为参考。其它可直接脱脂，脱酰化和重酰化母体安福霉素型脂肽抗菌素10的化学试剂和方法可见于拉特莱尔等人的(Lattrell et al.)，美国专利第5,629,288号，将其公开内容引用作为参考。
在优选方式中，将保护的Dab9衍生物14脱脂/或脱酰化可得到作为关键中间产物的保护的安福霉素型大环核心19。如本文所述，中间产物19具有不同的Dab9取代基。中间产物19还可以和反应基团22反应，得到保护的Dab9衍生物28，将其脱保护后，得到Dab9衍生物30。该优选方式的优点在于，不需要对所述大环Dab9β-氨基基团分别保护，且以更少的总的步骤得到了Dab9衍生物30。
一般地，保护的安福霉素型脂肽抗菌素(或抗菌素混合物)18或保护的Dab9衍生物14(或衍生物混合物)的所述脂肪酸部分可用酶切割。所述酶可以是例如诸如肽酶、酯酶或硫解酶的降解酶，对此本领域中有无数的例子。优选地，所述酶是脱酰酶。
在示例性的实施方案中，所述切割步骤涉及在适当的培养基中培养可产生脱酰酶的微生物，将保护的Dab9衍生物(或衍生物混合物)14或保护的抗菌素(或抗菌素混合物)18与含有所述脱酰酶的培养基接触。产生脱酰酶的微生物是本领域所属技术人员公知的。在优选实施方案中，微生物犹他游动放线菌(Actinoplanes utahensis)(NRRL #12052)可产生适合的脱酰酶。
对本领域所属技术人员同样公知培养这种酶的生长接种物，接种培养基，培养培养基以及培养条件，对犹他游动放线菌(NRRL#12052)的示例性方法可见于博克等人(Boeck et al.)，1988，J.Antibiot.411085；德波诺等人(Debono et.al.)，1988，J.Antibiotics.411093；美国专利第4,524,135号(参见，例如，22-23栏)；美国专利第5,039,789号(参见，例如，29栏，9-63行)。
在一个实施方案中，通过将化合物14或18与含有的犹他游动放线菌(NRRL #12052)培养基在约29℃接触4-16小时，可以对其进行脱脂反应。所述反应可通过色谱或其它常规技术监测，从而可允许如所需要的更短或更长的孵育。其它用于对化合物14或18进行脱脂的方法可见于德波诺等人(Debono et.al.)，1988，J.Antibiotics.411093；美国专利第5,039,789号(参见，例如，29-34栏)和美国专利第5,629,288号。
尽管方案(I)说明在本发明的某些Dab9衍生物中，取代基R6可通过酰胺键与所述大环Dab9残基连接，但本领域所属技术人员还是应该意识到，可以通过所述方案的常规改变可以合成包括其它键的Dab9衍生物。此外，在某些情况下，取代基R3可包括需要保护的其它官能团。在其它事件中，所述保护基团的确定依赖于所需要保护的官能团和存在于所述分子上的其它保护基团，这对本领域所属技术人员而言是显而易见的。可见于上述的“格林(Greene)和武兹(Wuts)”中的指南。
尽管方案(I)说明在本发明的某些Dab9衍生物中，取代基R2或R2-L可通过酰胺键与所述N-末端连接，但本领域所属技术人员还是应该意识到，可以通过所述方案的常规改变可以合成包括其它键的衍生物。此外，在某些情况下，取代基R2或R2-L可包括需要保护的其它官能团。在其它事件中，所述保护基团的确定依赖于所需要保护的官能团和存在于所述分子上的其它保护基团，这对本领域所属技术人员而言是显而易见的。可见于上述的“格林(Greene)和武兹(Wuts)”中的指南。
采用标准的方法，例如高效液相色谱，逆流提取，离心，过滤，沉淀，离子交换色谱，凝胶电泳，亲和层析，快速层析等等，可对本发明的所述衍生化合物分离和纯化。分离的具体方法可见于下面的实施例。使用国际申请WO02/055537中所述的提取纯化方法，可对本发明的任意不同的母体抗菌素，核心环状化合物，中间产物化合物或衍生抗菌素化合物进行分离和纯化，在此将其引用并作为参考。例如，对最常用制备本发明的所述衍生脂肽抗菌化合物而言，可采用Waters SymmetryPrep C18或C8柱子(7μm，19×150mm)的BioCADSprintTMPerfusion Chromatography(灌注色谱系统)进行HPLC纯化。此外，可在具有996 Photodiode Detector(Waters，Milord，MA)的Waters 2695分离系统中使用SpherisorbS3柱子(ODS2，2.0×100mm)进行纯度分析。例如，可以0.25mL/min(每种洗脱液都含有0.1％三氟乙酸)的流速，用40-80％溶解于Milli-Q水的乙腈线性梯度洗脱液对40℃的柱子洗脱15分钟，所的数据可使用，例如，Millennium32TMChromatography Manager V4 software(Waters，Milford，MA)的软件进行处理。
本领域所属技术人员应该理解，本发明的所述衍生化合物，以及本发明的多种化合物类型，都可具有互变异构现象，构象异性，几何异性或旋光异性。虽然在本说明书和权利要求中的所述通式仅表示出了所述可能的互变体，构象异构形式，旋光异构形式或几何异构形式中的一种，但应该理解本发明包括了具有一或多种本发明所述用途的化合物的互变体，构象异构形式，旋光异构形式或几何异构形式中的任意一种，以及这些不同形式的混合物。
此外，虽然并未说明所述多种示例性安福霉素型大环核心的手性中的确切的旋光构型，但应该理解所述结构的说明是意图以捷径的方式(short-hand)来描述这些核心，而并非是限制性的方式。还应理解，无论已知或未知，所述特异的旋光构型是所述安福霉素型脂肽抗菌素的大环核心拥有的旋光构型。
同样，在某些情况下，尽管本发明的所述脂肽衍生物从中衍生的含有所述多种母体安福霉素型脂肽抗菌素的多肽大环的结构可能是正确的，但在其它的时间也可能会发生错误。再一次地，所述结构说明是以捷径的方式对所述多种化合物进行描述的，而并非是限制性的方式。还应该理解，在本发明的所述衍生化合物中，所述多肽大环的结构是那些特异衍生物从中衍生出的所述母体安福霉素型脂肽抗菌素所具有的结构。
脂肽衍生物的特性正如在体外和体内分析中的情况，本发明的所述脂肽衍生物通常具有对革兰氏阳性菌的抗菌活性，类似于常规安福霉素型脂肽抗菌素表现出来的活性。此外，与常规安福霉素型脂肽抗菌素相比，本发明的多种所述脂肽衍生物具有惊人的改善的治疗潜力(例如，降低的毒性，改善的活性谱，以及强化的药代动力学/药效性质)，使得本发明所述氨基末端或Dab9衍生物尤其适合于对抗感染的治疗用途(例如，系统给药)或者有利于的给药方案，所述感染是由例如革兰氏阳性菌(例如，金黄色葡萄球菌属，链球菌属，肠球菌属)引起的。
可使用例如本领域中公知的体外检测分析方法，例如标准NCCLS细菌抑制分析或最低抑制浓度(MIC)检测，来鉴定本发明的抗菌脂肽化合物的活性。参见，例如，National Committee on ClinicalLaboratory Standards ″Performance Standards for AntimicrobialSusceptibility Testing″《抗菌素敏感性实验的检验标准》，NCCLSDocument M100-S5 Vol.14，No.16，December 1994；″Methods fordilution antimicrobial susceptibility test for bacteria that growaerobically-Third Edition″，《需氧生长细菌的稀释抗菌素敏感性实验的方法-第三版》Approved Standard M7-A3《批准标准M7-A3》，National Committee for Clinical Standards，Villanova，PA(″ApprovedStandard M7-A3″)。当MIC低于约64μg/mL时，认为抗菌化合物有活性。在某些优选的实施方案中，所述化合物对诸如细菌(特别是革兰氏阳性菌)的微生物的MIC低于约64μg/mL，低于约32μg/mL，低于约16μg/mL，或低于约4μg/mL。在某些实施方案中，具有低毒性和显著抗菌活性(例如，低于4μg/mL或低于16μg/mL)的抗菌脂肽化合物可优选地用于治疗或预防系统性感染，包括对于耐药性微生物的感染。在其它实施方案中，本发明的抗菌脂肽化合物可优选地用于治疗或预防局部感染(例如皮肤感染)。实施例中提供了适于确定与特定给药方式相关的抗菌活性的特异的体外和体内分析。
有助于鉴定本法明脂肽衍生化合物性质的示例性药代动力参数是脂肽衍生物的抗生素后效应(PAE)。例如，使用具有某种浓度的脂肽衍生物处理具有106-107(菌落形成单位每毫升)(CFU/ml)起始计数的细菌培养物，对平行(对照)培养物不处理。处理后，从所述培养物中去除所述脂肽衍生物(例如，通过用新鲜的无脂肽衍生物的培养基进行1∶1000稀释)，对未处理培养物进行同样的操作。然后继续孵育所述培养物并监测细菌随时间的生长。由此，PAE可定义为与未处理的对照相比，脂肽衍生物处理的培养物增加1log10的CFU数量所需要的时间(可以分钟或小时进行度量)。根据背景资料而无需根据理论，具有可检测PAE活性的脂肽衍生物，似乎为宿主免疫系统提供额外的时间去除细菌，所述细菌可以在抗生素处理下存活，且在该抗菌素被循环系统降解，去除或过滤后继续繁殖。较长的PAE值可以影响抗菌治疗的临床效果(即，可用较低的脂肽衍生物剂量治疗感染或给药频率可降低)。
本发明所述脂肽衍生化合物的抗菌性质的其它测量方法包括杀菌曲线检测。杀菌曲线试验通常设计将微生物暴露于不同浓度(例如，化合物MIC的数倍)的检测化合物。在暴露于检测化合物之前，所述微生物可以是处于对数生长期的培养物，或在特定的宿主组织(例如肺)中停留至多24小时。在选定的时间点，分析每份培养物或组织样本的存活微生物滴度，根据化合物抑制生长或杀死细菌所需的时间进行校正。在微生物领域内，如果某种化合物在24小时内杀死了99.9％的细菌细胞，则该化合物就是抗菌素(参见，例如，NCCLS指南M26-A，Vol.19 N#18)。
可使用一系列体内模型来评估本发明脂肽衍生化合物的抗菌性质。例如，可以通过测定防止小鼠受到微生物感染的所述化合物的能力，来检测本发明抗菌化合物的效用，所述微生物感染例如，由包括金双色葡萄球菌，肺炎链球菌和粪肠球菌的革兰氏阳性菌引起或相关的感染或疾病。简言之，通常采用超过一个LD50剂量(50％致死剂量，例如2-3倍LD50)的细菌接种物单独感染(例如向腹膜内(i.p.))小鼠。LD50是杀死50％受感染诸如小鼠群体的细菌剂量。在感染后的某段时间内对小鼠进行单独处理，例如，用本发明的脂肽衍生物静脉(i.v.)处理。然后对所述小鼠监测一段时间(例如，几天至一周或几周)，来观察所述检测脂肽衍生物是否可以保护小鼠免于致命的系统性感染，或可以防止其它感染症状的出现。
其它可用来评估例如本发明抗菌脂肽效果的示例性的体内模型包括(A)肺感染(肺炎)的小鼠(鼠类)模型，其中所述细菌感染是鼻内给药的(i.n.)；(B)鼠类大腿肌肉模型，其中所述细菌感染是向正常或中型粒细胞减少(免疫妥协)的小鼠肌肉给药的(i.m.)；(C)鼠类大腿肌肉模型(i.m.感染)/肺感染的组合。一般地，测定本发明的每一种脂肽衍生物的ED50(50％有效剂量)。如本文所使用的，ED50是指(a)保护50％感染动物(例如，所述的i.p.和肺炎模型)，或(b)在处理后24小时产生50％最大的log减少(例如，所述大腿肌肉和肺组织模型)中的有效剂量。在某些实施方案中，ED50值可从约0.1mg/kg到约50mg/kg，或从约0.15mg/kg到约30mg/kg，或从约0.2mg/kg到约15mg/kg，或从约0.25mg/kg到约10mg/kg。
还可使用其它示例性的体内模型来表征本发明抗菌化合物的药代动力学和药理学参数。可检测的一些参数包括化合物的体内半衰期，清除速率和清除率，分配体积和生物可利用度。例如，简言之，可对小鼠或大鼠进行单剂量i.v.或口服(p.o.)给药化合物。在不同时间点(从1分钟到72小时)，从处理的动物中收集血液，并通过例如液相色谱质谱联用(LC/MS)检测，定量脂肽衍生物在离体血浆中的浓度。定量完成后，可适用本领域公知的方法，例如具有单指数衰变和线性回归分析的室模型，计算药代动力学参数(参见，例如，凡挺等人(Fantin et al.)，Antimicrob.Agents Chemotherap.351413，1991)。
配方和组合物可通过常规的混合、溶解、制粒、制糖衣、研磨、乳化、包封、诱入、冻干等方式制备含有本发明所述抗菌脂肽衍生物的药物组合物。可使用促进活性抗菌脂肽衍生物配方进入用于药物制剂的一或多种生理可接受载体，稀释剂，赋型剂或佐剂，通过常规方式按配方制造药物组合物。可将单独的抗菌脂肽衍生物、多种抗菌脂肽衍生物、或与一或多种具有工业或生物学活性的制剂结合的抗菌脂肽衍生物，与药物可接受的载体、稀释剂或赋型剂按配方分别制备出本发明的工业或制药组合物。
用于治疗的药物可接受载体，稀释剂或赋型剂是制药领域内公知的，在本文中也有描述，例如，参见雷明顿制药学(Remington′sPharmaceutical Sciences)，Mack Publishing Co.A.R格纳罗(A.R.Gennaro)编，18thEdition，1990)和CRC Handbook of Food，Drug，and Cosmetic Excipients，CRC Press LLC，S.C.斯莫林斯基(S.C.Smolinski)编，1992。在某些实施方案中，可与药物或生理可接受载体，稀释剂或赋型剂配制的抗菌脂肽衍生物是诸如水或甘露醇溶液(例如约1％至约20％)的水溶性的，疏水性的(例如油或脂肪)，或其组合(例如，油和水乳液)。在某些实施方案中，在此所述的任意药物组合物都是无菌的。
具有足量抗菌脂肽来治疗或预防感染的本发明的所述配方是，例如特别适于局部(例如，乳剂，药膏，皮肤贴片，滴眼液，滴耳液，香波)应用或给药。其它给药方式包括，口服，非肠道，舌下，膀胱冲洗，阴道，直肠，肠，栓剂，鼻内或吸入。本发明使用的术语非肠道包括皮下，静脉，肌肉，动脉内，腹腔内，腹膜内，关节内，眼内或眼球后，耳内，鞘内，腔内，体腔内，脊柱内，肺内或跨肺，滑膜内，尿道内注射或输注技术。可对本发明的药物组合组进行组方，以使其中含有所述抗菌脂肽的所述组合物，在对个体进行给药后有生物可利用性。可通过多种已经建立的技术，例如基于细菌，色谱或抗体(例如ELISA)的分析技术监测给药后血清和其它组织中的脂肽水平。在某些实施方案中，可将抗菌脂肽衍生物配制成适于对所需诸如动物或人的个体(例如，具有革兰氏阳性菌感染)靶位点的局部应用的制剂。
如本领域内公知的，适当的制剂依赖于所选择的给药方式。例如，在局部给药的示例性实施方案中，可将本发明的抗菌脂肽衍生物配制成溶液，凝胶，药膏，乳剂，悬液，膏药等等。系统性制剂是另外的实施方案，其包括了设计为通过注射，例如皮下，静脉，肌肉，鞘内或腹膜内给药，以及那些设计为通过经皮的，经粘膜的，口服的，鼻内的或肺的给药。在一种实施方案中，所述系统性制剂是无菌的。在注射的实施方案中，可将本发明的所述抗菌脂肽衍生物配制成水溶液，优选为生理匹配的溶液或缓冲液，例如Hank’s溶液，Ringer’s溶液，甘露醇溶液或生理盐水缓冲液。在某些实施方案中，本发明所述的任意组合物可以含有配方制剂，例如悬浮剂，稳定剂或分散剂。可选择地，在使用之前，所述抗菌脂肽衍生物可以是固体形式(例如，粉末)，以适合适当载体的构建(例如，无菌的无热源的水)。在经粘膜的实施方案中，可在所述制剂中使用适于穿透所述屏障的穿透剂，助溶剂或软化剂。例如，1-十二烷基六氢-2H-氮杂环庚-2-酮(月桂氮卓酮)(Azone)，油酸，丙二醇，甲醇，二乙二醇乙氧二醇单乙基酯(Transcutol)，聚山梨酸聚乙烯山梨醇单月桂酸酯(Tween-20)，以及7-氯-1-甲基-5-苯基-3H-1，4-苯并二氮杂卓-2酮的药(安定)(Diazepam)，肉豆蔻酸异丙酯，以及其它本领域公知的可用于本发明任意组合物中的其它这类渗透剂，助溶剂或软化剂。
在其它实施方案中，为了对所治疗的个体或患者进行口服摄取，所述抗菌脂肽衍生物可与片剂，丸剂，糖衣，胶囊，液体，凝胶，糖浆，膏剂，悬液等等形式的药物可接受载体进行配制。在诸如粉末、胶囊或片剂的适于口服固体制剂的某些实施方案中，适合的赋型剂包括填充剂，例如糖(例如，乳糖，蔗糖，甘露醇，山梨醇)；纤维素制剂，例如玉米淀粉，小麦淀粉，水稻淀粉，土豆淀粉，明胶，黄芪胶(gum tragacanth)，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；制粒制剂；或粘合剂。任意地，可加入崩解剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮，琼脂或褐藻酸(或其盐，例如褐藻酸钠)。如有需要，使用标准技术，固体药剂形式可以是糖衣或肠衣的。在诸如悬液、酏剂或溶液的口服液体制剂的一些实施方案中，适当的载体，赋型剂或稀释剂包括水，乙二醇，油，乙醇或其组合。此外，还可以加入调味剂，防腐剂，增稠剂，保湿剂，着色剂等等。在含服给药的实施方案中，所述组合物可以采取如本领域所熟知和本发明所述的诸如片剂或锭剂形式的制剂。
在适于通过吸入给药的实施方案中，基于本发明的用途的所述化合物可以配制成方便得给药方式，例如鼻内给药的滴剂形式，或压缩包装的气雾剂形式，或具有适当喷射剂(例如，二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氯四氟乙烷，二氧化碳或其它适合的气体)的喷雾形式。在某些实施方案中，所述滴剂或气雾剂组合物是无菌的。在压缩气雾剂的情况下，可通过传输定量阀来确定所述药量单位。例如适合用于吸入剂或吸入器的明胶的胶囊或药筒，可配制成含有所述化合物和诸如乳糖或淀粉的适当粉末基质的粉末混合物。
在其它实施方案中，可将所述抗菌脂肽衍生物配制成诸如栓剂或滞留灌肠剂的直肠或阴道组合物，例如含有常规的栓剂基质，例如可可脂或其它甘油酯。
除了所述的制剂，还可以将所述抗菌脂肽衍生物配制成储存式(depot)制剂。例如，可将本发明的抗菌脂肽衍生物配制成缓释配方的形式，使其具有更长时间的活性。这样的长效配方可通过植入(例如，皮下或肌肉)或肌肉注射给药。在某些实施方案中，所述化合物可与适当的聚合物(包括聚交酯，聚乙交酯，聚己内酯，及其混合物)，疏水材料(包括生理可接受的油，其可以是乳浊液的形式)，离子交换树脂，或保守的略溶的衍生物(例如略溶的盐)进行配制。
可选择地，可以采用其它的药物传输系统。在某些实施方案中，所述化合物可与作为传输载体的脂质体或乳浊液进行配制。也可以使用某些有机溶剂，例如二甲亚砜(DMSO)。此外，还可以使用持续释放系统传输所述抗菌脂肽衍生物，例如含有所述治疗药剂的固体或半固体聚合物(例如，热糊剂)的半通透性基质。根据其化学性质，持续释放胶囊可以释放所述化合物几天，几周，或直到约100天。
考虑到某些本发明所述抗菌脂肽衍生物的羧基是酸性的，或者所述取代基R2，R3，R4和接头L可以包括酸性或碱性取代基，所以可将所述抗菌脂肽衍生物作为游离酸，游离碱或药物可接受的盐，包括在任意的上述制剂中。药物可接受的盐是基本保留所述游离酸或游离碱的抗菌活性的盐，其可分别通过与碱或酸反应制备。对本领域所述技术人员而言，适合的酸和碱是公知的。药物可接受的盐在水溶性或其它质子溶剂中比其对应的游离碱或游离酸的形式更易溶。
所述脂肽组合物可作为单剂量单位向个体给药(例如，片剂，胶囊，注射或凝胶)，或者所述组合物可作为多剂量单位向个体给药(例如，以气雾剂或可注射形式)。例如，所述抗菌脂肽制剂可灭菌后包装入有刻度的一次性使用的、塑料的层压的小袋或塑料管，其可提供常规、可测量的分配。在一个实施例中，所述包装可具有对个体，或个体上或体内的靶表面的有限区域进行分配有0.5ml所述抗菌脂肽组合物(例如，液滴，凝胶或注射形式)的刻度，来治疗或预防感染。靶表面，例如，可以是皮肤感染(例如引起坏死的筋膜炎或其它并发的皮肤感染)的直接区域，所述靶表面区域依赖于感染的程度。
根据存在的不同药物可接受赋型剂的数量和种类，可以多种形式提供所述抗菌脂肽合物。例如，所述脂肽组合物可以是固体，半固体，液体，洗液，乳剂，软膏，粘固剂，糊剂，凝胶或气雾剂的形式。在优选实施方案中，所述脂肽制剂可以是液体或凝胶的形式。适于本发明所述脂肽制剂组合物中使用的药物可接受赋型剂可任意包括，例如，增稠剂，缓冲剂，溶剂，保湿剂，防腐剂，螯合剂(例如，EDTA或EGTA)，油脂化合物，软化剂，抗氧化剂，佐剂等等。适于与本发明所述抗菌脂肽衍生物或其组合物共同使用的示例性缓冲剂包括单羧酸酯或二羧酸酯化合物(例如，乙酸酯，延胡索酸酯，丙二酸酯，琥珀酸酯或酒石酸酯)。示例性的防腐剂包括苯甲酸，苯甲醇，苯氧乙醇，羟基苯甲酸甲酯，羟基苯甲酸丙酯等等。每一种这些赋型剂的功能在本发明的内容中不是相互排斥的。例如，甘油可用作溶剂或保湿剂或增稠剂。
工业和治疗应用本发明的所述抗菌脂肽衍生物可在广泛的应用中抑制微生物的生长或杀死微生物(例如，革兰氏阳性菌)。例如，所述抗菌脂肽衍生物可用作诸多材料，包括食品，化妆品，药剂或其它含有营养剂的材料中的杀菌剂或防腐剂。所述抗菌脂肽衍生物还可用来治疗或预防个体中与微生物感染相关或由微生物感染引起的疾病，所述个体例如人，植物或动物，优选为人(包括免疫妥协的或具有免疫能力的个体)。例如，本发明的所述抗菌脂肽衍生物可用于缓解、治疗或预防多种临床状态，例如并发的皮肤或皮肤结构感染(例如引起坏死的筋膜炎)，手术创伤感染，腹内感染，尿道感染或肾盂肾炎，医院感染，社区获得感染(community-acquired infections)(例如肺炎)，感染性心内膜炎等等。
在某些实施方案中，本发明的活性抗菌化合物可对革兰氏阳性菌具有活性，例如链球菌(包括化脓性链球菌(S.pyogenes)，肺炎链球菌(S.pneumoniae)，草绿色链球菌(Viridans Streptococci))，葡萄球菌(包括金黄色酿脓葡萄球菌(S.aureus)，表皮葡萄球菌(S.epidermidis)，凝固酶阴性(coagulase-negative Staphylococci))和肠球菌(包括粪肠球菌(E.faecalis)，淀粉肠球菌(E.faecium))，以及抗生素耐药微生物，例如甲氧西林耐药性金黄色酿脓葡萄球菌(MRSA)，甲氧西林耐药性表皮葡萄球菌(MRSE)，万古霉素(vancomycin)耐药性肠球菌(VRE)，万古霉素-中间体金黄色酿脓葡萄球菌(VISA)，青霉素耐药性肺炎链球菌，多重耐药(MDR)微生物。对本发明抗菌化合物还对其它示例性的革兰氏阳性菌具有活性，包括杆菌(Bacillus spp.)，棒状杆菌(Corynebacterium spp.)，类白喉菌(diphtheroids)，李斯特菌(Listeriaspp.)等等。
对于杀菌剂或防腐剂的工业用途而言，所述抗菌脂肽衍生物可以单独加入到所需的组合物中，或以所述相同或不同抗菌脂肽衍生物的混合物，或者与其它抗菌剂(例如，抗真菌药，抗病毒药，抗菌药)合并加入到组合物中。所述抗菌脂肽衍生物可作为化合物本身提供，或与多种本发明所述的药物可接受载体，稀释剂或赋型剂组合，混合或掺合来提供。
当治疗性地用于治疗或预防微生物感染或相关疾病时，本发明的抗菌脂肽衍生物可作为所述相同或不同的抗菌脂肽衍生物进行单独地给药或应用，或与其它抗菌剂或其它药物活性剂合并应用或给药。所述抗菌脂肽衍生物其本身可进行给药或应用，或作为药物组合物进行给药或应用。所述特异的药物制剂依赖于本发明所述的所需要的给药方式，对本领域所述技术人员而言也是显而易见的。
如本发明所述的抗菌脂肽衍生物或其组合物的治疗效用是基于成功的临床结果，并不需要100％地清除参与或与所述感染相关的微生物。例如，感染的位点达到抗菌活性的水平使得所述所述宿主存活、感染消退或致病因素清除，该水平就足够了。当宿主防御处于最大有效时，例如在另外的健康个体中，仅有微小的抗菌效果会有作用。例如，只将所述的生物体负载降低一个log(以10为因数)值，就可使得所述宿主的防御控制所述感染。在某些实施方案中，临床治疗的成功多依赖于增加早期的杀菌效果而不是长期效果，因为这可为宿主防御机理的活化提供时间。例如，对致命的急性感染(例如，引起坏死性筋膜炎)或严重的慢性感染(例如，感染性心内膜炎)而言，这是需要的。
根据特殊的应用或指示，能以有效量使用本发明的所述抗菌脂肽衍生物或其组合物来达到所需目的。例如，对杀菌剂或防腐剂的使用而言，可将抗菌有效量的抗菌脂肽衍生物或其组合物用于或加入需要杀菌或防腐的所述材料中。“抗菌有效量”是指可抑制靶微生物，或可杀死靶微生物的本发明的抗菌脂肽衍生物或其组合物的量。尽管所述实际用量依赖于所述特定的靶微生物和应用方式，对杀菌剂或防腐剂的使用而言，通常还是以相对较低的量向需要杀菌或防腐的材料中加入或应用所述抗菌脂肽衍生物或其组合物。通常，所述抗菌脂肽衍生物含量低于所述杀菌溶液和要保存材料的5％重量比，优选为低于约1％重量比，更优选为低于约0.1％重量比。本领域所述技术人员可确定对特殊应用或指示的特定的抗菌脂肽衍生物的抗菌有效量，无需使用例如本发明所述的体外或体内分析进行过多的实验。
应该理解，在此使用的术语“抑制”和“杀菌”是指以统计学显著的方式(即抗菌有效)，以某种剂量或某一时间给药的所述组合物或化合物足以减少、抑制、减弱、预防、消灭、根除、或改变微生物生长或存活的至少一个方面或标记。例如，可通过测量暴露于抗菌脂肽衍生物之前的菌落形成数量(CFU)，与暴露于抗菌脂肽衍生物之后的细菌CFU，来测定细菌生长或存活的抑制(体外或体内)。
对治疗或预防微生物感染的应用而言，可以治疗有效量给药或应用本发明的所述抗菌脂肽衍生物或其组合物。在此，“治疗有效量”是指有效缓解所述微生物感染症状，或缓解、治疗或预防微生物感染的量。如本文所述，本领域所属技术人员应熟知治疗有效量的确定。在杀菌剂和防腐剂的情况中，可使用例如本发明所述的体外或体内分析方法，确定治疗或预防微生物感染的局部给药的治疗有效剂量。所述治疗可应用于可见或不可见的情况的所述感染。应该理解，用于本发明的术语“治疗”、“预防”和“缓解”是指统计学显著的方式(即抗菌有效)，以某种剂量或某一时间给药的所述组合物或化合物足以减少、抑制、减弱、预防、消灭、根除、或改变微生物生长或存活的至少一个方面或标记。
在治疗或预防并发和非并发皮肤或皮肤结构感染中，本发明的所述组合物和方法是治疗有效的。示例性的并发和非并发皮肤感染包括脓疱性皮炎(impetigo)，毛囊炎(folliculitis)，疔疮(furunculosis)(疖(furuncle)或皮肤烫伤(skin boil))，臁疮(ecthyma)，丹毒(erysipelas)，蜂窝组织炎(cellulitis)，急性甲沟炎(acute paronychia)，瘭疽(felon)，坏死性筋膜炎(necrotizing fasciitis)，葡萄球菌属烫伤性皮肤感染(Staphylococcal scalded skin infection)，结节性淋巴管炎(nodularlymphangitis)，切割蜂窝组织炎(preseptal cellulitis)，或眼眶蜂窝组织炎(periorbital cellulitis)。可采用乳剂、洗液、药膏或凝胶(或以部分包被于敷料的任意形式)，或可注射的溶液，乳浊液或悬液等方式将本发明所述的脂肽制剂应用于所述受侵染的区域。所述脂肽制剂的给药可以是一天多次、一天一次或更低的频率间隔(例如一周一次或更低)，治疗的长度可与存在的病灶或预防病灶复发等长。可选择地，可将所述脂肽组合物配制成口服或系统性给药，来治疗或预防并发的皮肤或皮肤结构感染。在某些实施方案中，通过向需要有效量的抗菌化合物或其组合物来治疗或预防所述并发皮肤感染的个体给药，提供用于治疗或预防诸如并发性皮肤或皮肤结构感染的微生物感染的方法中的抗菌化合物或其组合物。
在治疗或预防并发腹内感染时，本发明的所述组合物和方法是治疗有效的。根据背景，并发性腹内感染是临床实践的问题，并且耗费相当多的医院资源，例如，急诊服务，影像服务，手术室时间，实验室服务，抗生素治疗和不同程度的住院治疗。治疗结果在很大程度上受到诊断和适当干预的快速性以及抗感染治疗的及时和效用的影响。术后(医院)感染通常是更具耐药性的菌群引起的，可包括绿浓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)，甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌、肠球菌和念珠菌。对这些感染而言，推荐进行复合多重药物治疗，因为充分的经验性治疗在降低致死性方面相当重要。然而，这些感染在临床研究中依然是相当重要的方面。在某些实施方案中，可将本发明所述脂肽抗菌化合物及其组合物用于治疗或预防微生物感染的方法，所述微生物感染包括并发性腹内感染，例如那些因为金黄色葡萄球菌或与之相关的感染。
可将本发明所述脂肽抗菌化合物及其组合物用于治疗或预防微生物感染的方法，所述微生物感染包括并发性腹内感染，例如那些因为金黄色葡萄球菌或与之相关的感染。
在治疗或预防并发性尿道感染或肾盂肾炎时，本发明的所述组合物和方法是治疗有效的。根据背景，并发性尿道感染(cUTI)为男性或女性中的一种临床症状，发生在存在功能性或解剖性尿道异常或导管插入术的情况下，其特征由发烧，寒战，不适，胁痛(flank parin)，背痛的系统性或局部性的征兆或症状发展而来。肾盂肾炎定义为一种系统性，上升的尿道感染，以发烧，寒战，胁痛(flank parin)，恶心或呕吐为临床表现，其常与从所述尿道中分离到的相同病原体的细菌有关。在众多情况下，cUTI和肾盂肾炎是由来自所述肠杆菌(Enterobacteriaceae)和其它包括肠球菌和假单胞菌属(Pseudomonasspp)的病原体的致病原引起的。在某些实施方案中，可将本发明的脂肽抗菌化合物及其组合物用于治疗或预防诸如并发性尿道感染或肾盂肾炎的微生物感染的方法中。
如本文所述，“并发性”感染是指一种疾病状态，在所述状态下，疾病过程或事件可以叠加，将所述疾病的症状和过程变得更加严重---“并发症”并不是所述疾病或感染的本质部分，尽管所述并发症可以从所述疾病或感染、或从独立的病因中产生。
本发明所述组合物和方法的其它治疗价值的例子可以是对医院感染的治疗。例如由金黄色葡萄球菌导产生的感染可导致脓疱病的病灶或感染伤口，也可能与疾病诱导和医源性的心脏手术，血液透析，整形外科手术和嗜中性白血球减少症之后增高的感染率有关。的鼻和鼻内承载的葡萄球菌可在医院内引起寄居于患者或医院工作人员鼻通道或鼻内位点的所述相同葡萄球菌株系的爆发。虽然已经对鼻内寄居的彻底清除反复关注，但其治疗结果却不尽如人意。与彻底清相反，局部抗菌物质，例如杆菌肽，四环素和氯己定(chlorhexidine)的使用，导致了鼻内寄居的抑制。在某些实施方案中，可将所述抗菌化合物及其组合物用于治疗或预防医院感染(例如医院性肺炎)，社区获得性肺炎(即由通常在医院设施之外的，例如肺炎链球菌，嗜血流感菌，支原体的微生物引起的)，耐药性细菌的感染(例如VRE和MRSA)，心内膜炎(急性或亚急性的)等等。
对系统性给药而言，可一开始通过体外或体内分析估计治疗有效剂量。例如，可在动物模型中配制剂量，来得到循环抗菌脂肽衍生物浓度范围，其包括在细胞培养中测定的MIC。使用本领域公知技术，可在例如动物模型中从体内数据估计起始剂量。基于动物的数据，本领域所属技术人员很容易优化对人进行给药。可选择地，通过比较所述特异抗菌脂肽衍生物和已知抗菌剂的MIC，并对所述起始剂量进行调节，可以根据已知安福霉素型脂肽抗菌素(例如，安福霉素，天冬菌素，晶霉素，抗生素A1437，friulimycin，双霉素，津枝霉素和沙河霉素)的给药剂量确定起始剂量。通过常规优化，可从这些起始值中得到最适的剂量。
可单独地对剂量和间隔进行调节，提供足以维持治疗效果的一或多种活性抗菌脂肽衍生物的血浆水平。通常通过注射给药的患者剂量从约0.1到约200mg/kg/天，优选为从约1.5到约15mg/kg/天。在某些脂肽衍生物实施方案中，可通过每天单剂量给药，特定时间间隔的每天多剂量给药来达到治疗有效的血清水平。在其它实施方案中，还可以通过较低频率的剂量安排，例如两天一次，一周两次，一周一次，或剂量之间的更长间隔，或任意组合得到治疗有效的血清水平。例如，给药安排的组合可以用来达到治疗有效剂量，例如在一天或多天的多剂量后变为较低频率的剂量，例如每两天一次，一周两次或一周一次或更长。
在局部给药或选择性摄取的情况下，抗菌脂肽衍生物的所述有效局部浓度与血浆浓度无关。无需过多的实验，本领域所属技术人员就可优化治疗有效局部剂量。抗菌脂肽衍生物的给药量依赖于需要治疗的所述患者，所述患者体重，痛苦的严重程度，给药方式和开处方医生的判断。
当感染是可检测的，或甚至是不可检测的时候，所述抗菌治疗可以间歇地重复。所述治疗可单独进行，或与其它药物，例如其它抗生物或抗菌素，或本发明的其它抗菌脂肽衍生物联合进行。
优选地，本发明所述的抗菌脂肽衍生物的治疗有效剂量可具有治疗性效果，而不会引起基本的毒性。可使用标准制药方法在细胞培养或实验动物中测定所述抗菌脂肽衍生物的毒性，例如通过测定所述LD50剂量(杀死50％群体的剂量)或所述LD100剂量(杀死100％群体的剂量)。其它的毒性测定方法是最大耐受剂量法(MTD)，其测定的是不伴随致死性或致命毒性的剂量水平。在毒性和治疗效果之间的所述剂量比是治疗指数。优选的是具有较高治疗指数的抗菌脂肽衍生物。可将从这些细胞培养分析和动物实验中获得的数据用来配制用于人类患者的无毒剂量范围。本发明所述抗菌脂肽衍生物的剂量优选为包括极少或没有毒性的所述有效剂量的循环浓度范围。根据所采用的药剂形式和给药方式，所述剂量可在该范围内变动。根据所述患者的情况或其需求，医生可选择确切的制剂，给药方式和剂量(参见，例如，芬格尔等人(Fingl et al.)，1975，治疗的药学基础(The Pharmacological Basis of Therapeutics)，第1章)。
例如，为了检测急性毒性，可在诸如Swiss CD1小鼠的动物模型中检测本发明的脂肽抗菌素，来测定所述MTD。在某些实施方案中，用于检测特异化合物毒性的动物在实验开始前约为5-6周龄，重22-26g。可通过静脉(i.v.)方式向所述尾静脉给药所述脂肽，剂量从约50mg/kg到约500mg/kg，或从约75mg/kg到约250mg/kg，或从约100mg/kg到约200mg/kg，或剂量为100mg/kg或低于100mg/kg。通常在给药后立即，给药1-2小时后，给药5-8小时后，以及在此之后每天一次观察所述动物。观察内容包括所述小鼠的活力水平和根据所给药剂量产生的任意物理副作用。在第0天(即将给药之前)和第7天记录所述动物的重量。对安福霉素和天冬菌素观察到的MTD约为100mg/kg。所以，可以认为MTD的大于安福霉素和天冬菌素(即，在具有可检测的或甚至检测不到的副作用之前，该个体可以耐受更多的化合物)的脂肽衍生物具有比安福霉素和天冬菌素更低的毒性。在某些实施方案中，本发明所述脂肽化合物的所述毒性(MTD)为100mg/kg或低于100mg/kg，而在其它实施方案中，所述化合物的MTD为200mg/kg或低于200mg/kg。例如，本发明的某些示例性脂肽抗菌衍生物在200-400mg/kg(i.v.)并不表现出急性毒性(MTD)(例如，化合物4，199，278和280)。在某些其它实施方案中，本发明的某些示例性脂肽抗菌衍生物在50mg/kg-400mg/kg(i.v.)表现出毒性(MTD)(例如，化合物3，85，108和119)。
本说明书和/或列示于申请数据清单中涉及的所有美国专利，美国专利申请公开，美国专利申请，外国专利，外国专利申请以及非专利公开出版物，都被全文引用作为参考。本发明使用以下实施例进行说，所述实施例目的在于说明本发明，而不是为了对本发明进行限制。
优选实施方案描述实施例提供用于本方法使用的原料和试剂的供应商包括SigmaAldrich(和Fluka)(Oakville，Ontario)，Advanced Chemtech(Louisville，Kentucky)，Bachem(Torrance，California)，Lancaster(Windham，NewHampshire)，Chem-Impex International(Wooddale，Illinois)和Acros(Morris Plains，New Jersey)。
实施例1 活化酸的制备众所周知，任意一种羧酸都可以通过以下或类似的反应进行活化。在此以示例性而非限制性的方式对活化的十五烷酸琥珀酰亚胺基酯的制备进行了描述。
将十五烷酸(1.07g，4.4mmol)溶解于22ml干燥的二甲基甲酰胺(DMF)中。加入羟基琥珀酰亚胺(0.52g，4.5mmol)，在冰浴中冷却所述混合物。间隔十分钟向所述反应混合物中加入相等的两份二环己基碳二亚胺(1.07g，5.2mmol)，完成之后在约4℃搅拌所述混合物20分钟。使所述混合物升温至室温，且继续搅拌不少于6小时。将所得粗产物真空浓缩，用异丙醇重新溶解来纯化，然后用己烷对所述产物进行结晶，得到相对较干净的十五烷酸琥珀酰亚胺-1-基酯(1.32g，3.9mmol)。如上所述，可将例如C10-C25脂肪酸的多种羧酸用于生成活化的琥珀酰亚胺基酯。
实施例2 C15-安福霉素将安福霉素-9-Fmoc(2.0g，1.5mmol，79％纯)溶解于10mL H2O，再用100mL DMF稀释。向所述混合物中缓慢加入1M碳酸氢钠溶液(7.5mL)，然后冰浴冷却。继续保持于冰上，向所述反应混合物中缓慢加入预先溶解于15mL DMF中的实施例1的十五烷酸琥珀酰亚胺-1-基酯(1.32g，3.9mmol)的溶液，然后在室温下继续搅拌至少8小时进行反应。向所述反应中加入哌啶(20mL，20％v/v)，再继续搅拌所述混合物1小时。过滤所有固体，用额外的DMF(约15mL)洗涤所述不溶物，然后将所述滤液真空浓缩直至干。使用溶解于乙酸乙酯的甲醇梯度系统(40％甲醇到纯甲醇，增量为20％)的快速色谱，得到了标题化合物(1.34g，67％收率)，纯度为75％，对C60H97N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1320，实测为1320。还使用HPLC(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸的5％乙腈水溶液至95％乙腈)进行纯化。
实施例3 C15-安福霉素-9-GLY将实施例2中的化合物C15-安福霉素(52mg，0.039mmol)悬浮于2.5mL DMF，然后加入197μL 1M碳酸氢钠(水溶液，0.20mmol)。将所述反应混合物冰浴冷却。继续保持于冰上，向所述反应混合物中缓慢加入预先溶解于0.5mL DMF中的琥珀酰亚胺活化的N-叔丁氧羰基甘氨酸(1.5当量，根据实施例1中对十五烷酸琥珀酰亚胺-1-基酯化合物所述的方法进行制备)，然后在室温下继续搅拌至少8小时进行反应。在真空浓缩前，在标准条件下用3mL 4M溶解于二噁烷的HCl对所述产物进行脱保护30分钟，然后将所述溶剂真空蒸发得到标题化合物。将标题化合物HPLC纯化(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸的25％乙腈水溶液至95％乙腈)，并且冷冻干燥(34mg，63％收率)，纯度为89％，对C62H100N14O21(M)的计算MS(MALDI)值为1378，实测为1377。
实施例4 C15-安福霉素-9-GLY-LYS将实施例2中的化合物C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)悬浮于2mL DMF，然后加入115μL 1M碳酸氢钠(水溶液，0.12mmol)。将所述反应混合物冰浴冷却。继续保持于冰上，向所述反应混合物中缓慢加入预先溶解于0.5mL DMF中的琥珀酰亚胺活化的N-(2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酰基)甘氨酸(1.5当量，根据实施例1中对十五烷酸琥珀酰亚胺-1-基酯化合物的描述进行制备)，然后在室温下继续搅拌至少12小时进行反应。向所述反应中加入哌啶(0.4mL，20％v/v)，继续搅拌1小时，然后真空浓缩。将所述粗产物与2mL 4M溶解于二噁烷的HCl反应1小时，然后真空浓缩得到标题化合物。将所述标题化合物用HPLC纯化(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸的25％乙腈水溶液至95％乙腈)，并且冷冻干燥(14mg，41％收率)，纯度为80％，对C68H112N16O22(M)计算的MS(MALDI)值为1506，实测为1505。
实施例5 C15-安福霉素-9-LEU将实施例2的化合物C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)悬浮于2mL DMF，然后加入114μL 1M碳酸氢钠(水溶液，0.11mmol)。将所述反应混合物冰浴冷却。继续保持于冰上，向所述反应混合物中缓慢加入预先溶解于0.5mL DMF中的琥珀酰亚胺活化的2-N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)亮氨酸(1.5当量，根据实施例1中十五酸琥珀酰亚胺-1-酯化合物的描述进行制备)，然后在室温下继续搅拌至少8小时进行反应。向所述反应中加入哌啶(400mL，20％v/v)，继续搅拌1小时，然后真空蒸发得到标题化合物。将所述标题化合物用HPLC纯化(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸的25％乙腈水溶液至95％乙腈)，并且冷冻干燥(5mg，15％收率)，纯度为74％，对C66H108N14O21(M)计算的MS(MALDI)值为1434，实测为1433。
实施例6 C10-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(20mg，0.015mmol)和癸酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，48％收率)，纯度为89％，对C55H87N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1250，实测为1249。
实施例7 C11-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(20mg，0.015mmol)和十一烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，10％收率)，纯度为88％，对C56H89N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1264，实测为1263。
实施例8 C12-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(20mg，0.015mmol)和十二烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，15％收率)，纯度为87％，对C57H91N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1278，实测为1277。
实施例9 C13-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(20mg，0.015mmol)和十三烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，41％收率)，纯度为80％，对C58H93N13O20的MS(MALDI)计算值为(M)1292，实测为1291。
实施例10 C14-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(20mg，0.015mmol)和十四烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，35％收率)，纯度为80％，对C59H95N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1306，实测为1305。
实施例11 C16-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(20mg，0.015mmol)和十六烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，54％收率)，纯度为96％，对C61H99N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1335，实测为1334。
实施例12 C17-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(20mg，0.015mmol)和十七烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，49％收率)，纯度为94％，对C62H101N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1349，实测为1348。
实施例13 C18-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(20mg，0.015mmol)和十八烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，24％收率)，纯度为92％，对C63H103N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1363，实测为1362。
实施例14 油酰-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(18.5mg，0.014mmol)和十八碳-9-烯酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，63％收率)，纯度为98％，对C63H101N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1361，实测为1360。实施例15CH3-(CH2)11-O-p-PH-C(＝O)-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)和4-十二烷氧基苯甲酸(4-dodecyloxy-benzoic acid)可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，16％收率)，纯度为88％，对C64H97N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1385，实测为1384。
实施例16 CH3-(CH2)15-O-p-PH-C(＝O)--安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)和对十六烷氧基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，12％收率)，纯度为70％，对C68H105N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1441，实测为1440。
实施例17 HO-(CH2)15-C(＝O)-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.023mmol)和16-羟基-十六烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，26％收率)，纯度为85％，对C61H99N13O21的MS(MALDI)计算值为(M)1351，实测为1351。
实施例18 CH3-(CH2)9-O-p-PH-C(＝O)--安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.023mmol)和对癸氧基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，26％收率)，纯度为69％，对C62H93N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1356，实测为1355。
实施例19 CH3-(CH2)7-O-p-PH-C(＝O)--安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.023mmol)和对辛氧基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，27％收率)，纯度为85％，对C60H89N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1328，实测为1327。
实施例20 CH3-(CH2)11-NH-琥珀酰基-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.023mmol)和N-十二烷基琥珀酰胺酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，26％收率)，纯度为83％，对C61H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1364，实测为1363。
实施例21 C12-p-肼基苯甲酸-安福霉素在实施例2所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.023mmol)和4-(N’-十三烷基-肼基)-苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，12％收率)，纯度为70％，对C65H99N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1427，实测为1426。
实施例22 C15-安福霉素-9-GABA在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(26mg，0.020mmol)和(S)-2，4-双-叔丁氧羰基-氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，40％收率)，纯度为85％，对C64H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1406，实测为1405。
实施例23 C14-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例10中的C14-安福霉素(20mg，0.015mmol)和N-叔丁氧羰基-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，10％收率)，纯度为87％，对C61H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1364，实测为1365。
实施例24 C15-安福霉素-9-SAR在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和N-叔丁氧羰基-N-甲基甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(24mg，57％收率)，纯度为100％，对C63H102N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1392，实测为1391。
实施例25 C15-安福霉素-9-AHX在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和6-叔丁氧羰基氨基己酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(25mg，58％收率)，纯度为92％，对C66H108N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1434，实测为1433。
实施例26 C15-安福霉素-9-INA在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(45mg，0.034mmol)和N-叔丁氧基羰基-六氢异烟酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，23％收率)，纯度为89％，对C66H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1432，实测为1431。
实施例27 C15-安福霉素-9-(P-NO2-PHE)在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-叔丁氧羰基-对硝基-苯丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，26％收率)，纯度为99％，对C69H105N15O23(M)的MS(MALDI)计算值为1513，实测为1512。
实施例28 C15-安福霉素-9-GLY-PHE在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-(N叔丁氧羰基苯丙氨酰)-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，26％收率)，纯度为77％，对C71H109N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1525，实测为1524。
实施例29 C15-安福霉素-9-GLU在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和(S)-2-叔丁氧羰基-戊二酸-5-叔丁基酯可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，30％收率)，纯度为92％，对C65H104N14O23(M)的MS(MALDI)计算值为1450，实测为1449。
实施例30 C15-安福霉素-9-(P-F-PHE)在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-叔丁氧羰基-对氟-苯丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，27％收率)，纯度为99％，对C69H105N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1486，实测为1485。
实施例31 C15-安福霉素-9-(β-CHA)在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-叔丁氧羰基-β-环己基丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，12％收率)，纯度为83％，对C69H112N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1474，实测为1473。
实施例32 C15-安福霉素-9-HPHE在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和(S)-2-叔丁氧羰基-氨基-4-苯基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，27％收率)，纯度为90％，对C70H108N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1482，实测为1481。
实施例33 C15-安福霉素-9-GLY-GLY-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和(N-叔丁氧羰基甘氨酰)甘氨酰甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(13mg，38％收率)，纯度为89％，对C66H106N16O23(M)的MS(MALDI)计算值为1492，实测为1491。
实施例34 C15-安福霉素-9-C(＝O)-(CH2)10-NH2在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和11-叔丁氧羰基氨基十一烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，26％收率)，纯度为74％，对C71H118N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1504，实测为1503。
实施例35 C15-安福霉素-9-(β-氰-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和(S)2-叔丁氧羰基氨基-3-氰-丙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，22％收率)，纯度为99％，对C64H101N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1417，实测为1416。
实施例36 C15-安福霉素-9-ILE在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和N-叔丁氧羰基异亮氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(13mg，30％收率)，纯度为77％，对C66H108N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1434，实测为1433。
实施例37 C15-安福霉素-9-GLY-VAL在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和(N-叔丁氧羰基缬氨酰)-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，30％收率)，纯度为96％，对C67H109N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1477，实测为1476。
实施例38 C15-安福霉素-9-ASN在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和N-叔丁氧羰基天冬酰胺可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18mg，41％收率)，纯度为100％，对C64H109N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1435，实测为1434。
实施例39 C15-安福霉素-9-TYR在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和N-叔丁氧羰基酪氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，9％收率)，纯度为89％，对C69H106N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1484，实测为1483。
实施例40 C15-安福霉素-9-TRP在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和N-叔丁氧羰基色氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，20％收率)，纯度为92％，对C71H107N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1507，实测为1506。
实施例41 C15-安福霉素-9-PHG在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和(S)-叔丁氧羰基氨基-苯基甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，23％收率)，纯度为97％，对C68H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1454，实测为1453。
实施例42 C15-安福霉素-9-GLY-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-(叔丁氧羰基甘氨酰)-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，28％收率)，纯度为98％，对C64H103N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1435，实测为1434。
实施例43 C15-安福霉素-9-GLN在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(38mg，0.029mmol)和N-叔丁氧羰基谷氨酰胺可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，17％收率)，纯度为88％，对C65H105N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1449，实测为1448。
实施例44 C15-安福霉素-9-THR在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(41mg，0.031mmol)和(2S，3S)-2-叔丁氧羰基氨基-3羟基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，16％收率)，纯度为74％，对C64H104N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1422，实测为1421。
实施例45 C15-安福霉素-9-PRO-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和N-(N-叔-丁氧羰基甘氨酰)脯氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，40％收率)，纯度为84％，对C67H107N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1475，实测为1474。
实施例46 C15-安福霉素-9-GLY-LEU在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和N-(N-叔丁氧羰基亮氨酰)-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，26％收率)，纯度为98％，对C68H111N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1491，实测为1490。
实施例47 C15-安福霉素-9-TYR(ET)在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和用于实施例3中方法所述的N-叔丁氧羰基-O-乙基酪氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，20％收率)，纯度为74％，对C71H110N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1512，实测为1511。
实施例48 C15-安福霉素-9-GLY-SUC在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(35mg，0.027mmol)化合物加入到的N-叔丁氧羰基-甘氨酸中。经过HPLC纯化后，将所述中间产物冷冻干燥。在第二步中，在溶于DMF(3mL)的二异丙基乙基胺(DIEA，1mL)存在的条件下，将所述中间产物与N，N’-二琥珀酰亚胺碳酸盐混合，室温保持一小时，然后通过真空蒸发得到所述标题化合物的粗产物。将所述粗产物HPLC纯化(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸25％乙腈水溶液至95％乙腈)和冷冻干燥(9mg，23％收率)，纯度为93％，对C66H104N14O24(M)的MS(MALDI)计算值为1478，实测为1477。
实施例49 C15-安福霉素-9-GLY-AC在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(35mg，0.027mmol)化合物与N-叔丁氧羰基-甘氨酸结合。经过HPLC纯化后，将所述中间产物冷冻干燥。在第二步中，在溶于DMF(3mL)的DIEA(1mL)存在的条件下，将所述中间产物与乙脱水(25μL)混合，室温保持一小时，然后通过真空蒸发得到所述标题化合物的粗产物。将所述粗产物HPLC纯化(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸25％乙腈水溶液至95％乙腈)和冷冻干燥(4mg，11％收率)，纯度为89％，对C64H102N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1419，实测为1420。
实施例50 C13-安福霉素-9-GABA在实施例3所述的方法中使用实施例9中的C13-安福霉素(25mg，0.019mmol)和γ-N-叔丁氧羰基氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，38％收率)，纯度为100％，对C62H100N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1378，实测为1377。
实施例51 C14-安福霉素-9-GLY-LYS在实施例3所述的方法中使用实施例10中的C14-安福霉素(25mg，0.019mmol)和(N，N’-双叔丁氧羰基赖氨酸)甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化(梯度，20-45％乙腈水溶液，含有0.1％三氟乙酸)和冷冻干燥(10mg，35％收率)，纯度为94％，对C67H110N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1492，实测为1491。
实施例52 C15-安福霉素-9-TYR(ME)在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-叔丁氧羰基-O-甲基酪氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，9％收率)，纯度为67％，对C70H108N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1498，实测为1497。
实施例53 C13-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例9中的C13-安福霉素(20mg，0.015mmol)和N-(叔丁氧羰基)甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，59％收率)，纯度为99％，对C60H96N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1349，实测为1348。
实施例54 C13-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例9中的C13-安福霉素(20mg，0.015mmol)和N-(叔丁氧羰基)β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，58％收率)，纯度为93％，对C61H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1364，实测为1363。
实施例55 C13-安福霉素-9-SAR在实施例3所述的方法中使用实施例9中的C13-安福霉素(20mg，0.015mmol)和N-(叔丁氧羰基)肌氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，58％收率)，纯度为95％，对C61H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1364，实测为1363。
实施例56 C13-安福霉素-9-AHX在实施例3所述的方法中使用实施例9中的C13-安福霉素(20mg，0.015mmol)和6-叔丁氧羰基-氨基己酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18mg，84％收率)，纯度为98％，对C64H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1406，实测为1405。
实施例57 C12-安福霉素-9-GABA在实施例3所述的方法中使用实施例8中的C12-安福霉素(25mg，0.020mmol)和γ-N-叔丁氧羰基-氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(15mg，58％收率)，纯度为97％，对C61H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1364，实测为1363。
实施例58 C12-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例8中的C12-安福霉素(25mg，0.020mmol)和N-(叔丁氧羰基)甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，40％收率)，纯度为96％，对C59H94N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1335，实测为1334。
实施例59 C14-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例10中的C14-安福霉素(107mg，0.082mmol)和N-(叔丁氧羰基)β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(66mg，59％收率)，纯度为94％，对C62H100N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1378，实测为1377。
实施例60 C14-安福霉素-9-SAR在实施例3所述的方法中使用实施例10中的C14-安福霉素(22mg，0.017mmol)和N-(叔丁氧羰基)肌氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，30％收率)，纯度为89％，对C62H100N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1378，实测为1377。
实施例61 C14-安福霉素-9-AHX在实施例3所述的方法中使用实施例10中的C14-安福霉素(22mg，0.017mmol)和6-(叔丁氧羰基)-氨基己酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，38％收率)，纯度为87％，对C65H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1420，实测为1419。
实施例62 C14-安福霉素-9-GABA在实施例3所述的方法中使用实施例10中的C14-安福霉素(22mg，0.017mmol)和γ-N-叔丁氧羰基-氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，17％收率)，纯度为88％，对C63H102N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1392，实测为1391。
实施例63 C13-安福霉素-9-ALA在实施例3所述的方法中使用实施例9中的C13-安福霉素(22mg，0.017mmol)和N-叔丁氧羰基-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，40％收率)，纯度为84％，对C61H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1364，实测为1363。
实施例64 C13-安福霉素-9-(D-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例9中的C13-安福霉素(22mg，0.017mmol)和D-N-叔丁氧羰基-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(13mg，57％收率)，纯度为89％，对C61H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1364，实测为1363。
实施例65 C13-安福霉素-9-(D-PRO)在实施例3所述的方法中使用实施例9中的C13-安福霉素(22mg，0.017mmol)和D-N-叔-丁氧羰基-脯氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，47％收率)，纯度为90％，对C63H100N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1390，实测为1389。
实施例66 C15-安福霉素-9-(D-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(22mg，0.017mmol)和D-N-叔丁氧羰基-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，43％收率)，纯度为85％，对C63H102N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1392，实测为1391。
实施例67 C15-安福霉素-9-(D-PRO)在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(22mg，0.017mmol)和D-N-叔丁氧羰基-脯氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，47％收率)，纯度为77％，对C65H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1418，实测为1417。
实施例68 C15-安福霉素-9-GLY-GABA在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(38mg，0.029mmol)化合物与N-叔丁氧羰基-甘氨酸结合。将所述中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例3所述的方法中使用所述中间产物和γ-N-叔丁氧羰基-氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(13mg，31％收率)，纯度为74％，对C65H105N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1449，实测为1448。
实施例69 C15-安福霉素-9-GLY-(D-ALA)在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)化合物与N-叔丁氧羰基-甘氨酰琥珀酰亚胺结合。将所得中间产物HPLC纯化。在第二步中，在实施例3所述的方法中使用所述纯化的中间产物和D-N-(叔丁氧羰基)丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，37％收率)，纯度为75％，对C65H105N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1449，实测为1448。
实施例70 C15-安福霉素-9-(β-ALA)-AHX在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.018mmol)化合物与N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化。在第二步中，在实施例3所述的方法中使用所述纯化的中间产物和6-N-(叔丁氧羰基)氨基己酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(21mg，74％收率)，纯度为84％，对C69H113N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1505，实测为1504。
实施例71 C15-安福霉素-9-GABA-VAL在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)化合物与γ-N-叔丁氧羰基-氨基丁酸偶合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例3所述的方法中使用所述纯化的中间产物和N-(叔丁氧羰基)缬氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(15.6mg，55％收率)，纯度为92％，对C69H113N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1505，实测为1504。
实施例72 C15-安福霉素-9-GABA-AHX在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)化合物与γ-N-叔丁氧羰基-氨基丁酸偶合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例3所述的方法中使用所述纯化的中间产物和6-叔丁氧羰基-氨基己酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12.8mg，44％收率)，纯度为100％，对C70H115N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1519，实测为1518。
实施例73 C12-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例8中的C12-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(21.8mg，71％收率)，纯度为86％，对C60H96N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1349，实测为1348。
实施例74 C12-安福霉素-9-SAR在实施例3所述的方法中使用实施例8中的C12-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-叔丁氧羰基-肌氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(19.7mg，64％收率)，纯度为78％，对C60H96N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1349，实测为1348。
实施例75 C16-安福霉素-9-SAR在实施例3所述的方法中使用实施例11中的C16-安福霉素(30mg，0.022mmol)和N-叔丁氧羰基-肌氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18.5mg，58％收率)，纯度为85％，对C64H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1406，实测为1405。
实施例76 C10-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例6中的C10-安福霉素(30mg，0.024mmol)和N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化(梯度，20-45％乙腈水溶液，含有0.1％三氟乙酸)和冷冻干燥(14.2mg，47％收率)，纯度为87％，对C58H92N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1321，实测为1320。
实施例77 C10-安福霉素-9-SAR在实施例3所述的方法中使用实施例6中的C10-安福霉素(30mg，0.024mmol)和N-叔丁氧羰基-肌氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18.4mg，61％收率)，纯度为78％，对C58H92N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1321，实测为1320。
实施例78 C17-安福霉素-9-SAR在实施例3所述的方法中使用实施例12中的C17-安福霉素(30mg，0.024mmol)和N-叔丁氧羰基-肌氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(20mg，62％收率)，纯度为83％，对C65H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1420，实测为1419。
实施例79 C16-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例11中的C16-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(17.8mg，56％收率)，纯度为93％，对C64H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1406，实测为1405。
实施例80 C17-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例12中的C17-安福霉素(30mg，0.022mmol)和N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(13.9mg，43％收率)，纯度为86％，对C65H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1420，实测为1419。
实施例81 C15-安福霉素-9-GLY-C6在实施例3所述的方法中使用实施例3中的C15-安福霉素(21mg，0.0014mmol)和己酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，9％收率)，纯度为98％，对C68H110N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1476，实测为1477。
实施例82 C15-安福霉素-9-ALA在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(20mg，0.015mmol)和N-叔丁氧羰基-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6.3mg，30％收率)，纯度为78％，对C63H102N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1392，实测为1391。
实施例83 CH3-(CH2)15-NH-C(O＝)-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例249中的CH3-(CH2)15-NH-C(O＝)-安福霉素(20mg，0.0147mmol)和N-叔丁氧羰基-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，9.5％收率)，纯度为66％，对C64H105N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1421，实测为1420。
实施例84 CH3-(CH2)15-SO2-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例99中的C16-SO2-Gly-安福霉素(30mg，0.022mmol)和N-叔丁氧羰基-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，16％收率)，纯度为81％，对C65H107N15O23S(M)的MS(MALDI)计算值为1499，实测为1498。
实施例85 C12-PABA-安福霉素在第一步中，如实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)化合物与对-N-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，在DIEA(20μL，0.11mmol)存在的条件下，将得自第一步的所述中间产物与溶于DMF(5mL)的十二烷酰氯(7μL，0.033mmol)混合，在惰性气氛下保持3小时得到标题化合物。将所述标题产物真空浓缩，HPLC纯化(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸的25％乙腈水溶液至95％乙腈)和冷冻干燥(13.2mg)，纯度为93％，对C64H96N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1398，实测为1397。
实施例86 C12-(P-APA)-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例119中的C12-(对氨基苯乙酰基)-安福霉素(30mg，0.0023mmol)和N-叔丁氧羰基-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，15％收率)，纯度为81％，对C67H101N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1469，实测为1468。
实施例87 C12-PABA-安福霉素-9-GLY将实施例271中的安福霉素-9-(N-Fmoc-Glycyl)(11.3mg)溶解于0.2mL DMF，0.02mL水和0.03mL 1M碳酸氢钠中。在室温搅拌条件下，60分钟内分两次向所述溶液中加入等量的N-十二烷酰基-对氨基苯甲酸琥珀酰亚胺-1-基酯(7mg，使用如实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例274制备)。再继续搅拌20分钟后，用含有约300mg乙酸铵的5mL甲醇稀释所述反应。以2mL/分钟的速度用甲醇在Sephadex LH-20柱上洗脱，分离所述标题化合物，并将其冷冻干燥(9.5mg)，纯度为88％，对C66H99N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1455，实测为1454。
实施例88 CH3-(CH2)11-O-p-PH-C(O＝)-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例15中的CH3-(CH2)11-O-p-PH-C(O＝)-安福霉素(30mg，0.0021mmol)和N-叔丁氧羰基-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，27％收率)，纯度为84％，对C66H100N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1442，实测为1441。
实施例89 C12-(对-反式-肉桂酰)-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例120中的C12-(对-反式-肉桂酰)-安福霉素(30mg，0.0021mmol)和N-叔丁氧羰基-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，23％收率)，纯度为85％，对C68H101N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1481，实测为1480。
实施例90 CH3-(CH2)11-O-p-PH-C(O＝)-GLY-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例121中的CH3-(CH2)11-O-p-PH-C(O＝)-GLY-安福霉素(30mg，0.0021mmol)和N-叔丁氧羰基-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6.5mg，19％收率)，纯度为88％，对C68H103N15O23(M)的MS(MALDI)计算值为1499，实测为1498。
实施例91 C14-PABA-GLY-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例271中的安福霉素-9-(N-Fmoc-Glycyl)(11.3mg)和N-十二烷酰-对氨基苯甲酰甘氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯(6.3mg，使用如实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例276制备)可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6.8mg)，纯度为86％，对C68H102N16O23(M)的MS(MALDI)计算值为1512，实测为1512。
实施例92 CH3-(CH2)11-NH-C(O＝)-安福霉素-9-GLY将实施例271中的安福霉素-9-(N-Fmoc-Glycyl)(8.6mg，0.023mmol)溶解于0.2mL DMF，0.2mL水中。然后加入0.002mL十二烷基异氰酸酯。将所述混合物在30℃进行搅拌，用HPLC监控。30分钟后，加入0.01mL哌啶并在室温混合。再40分钟后，用含有约300mg乙酸铵的5mL甲醇稀释所述反应。以2mL/分钟的速度用甲醇在Sephadex LH-20柱(2.5×42cm)上洗脱分离所述标题化合物。将含有所述标题化合物的组分合并，真空脱去所述溶剂。再将所述标题化合物重新溶解于2mL蒸馏水，将所述样品冷冻干燥(5.5mg)，纯度为77％，对C60H97N15O21(M+Na)+的MS(FAB)计算值为1386，实测为1386。
实施例93 C15-安福霉素-9-AHX-GLY在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(38mg，0.029mmol)化合物与6-叔丁氧羰基-氨基己酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例3所述的方法中使用所述纯化的中间产物和N-叔丁氧羰基-甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12.7mg，30％收率)，纯度为99％，对C68H111N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1491，实测为1490。
实施例94 C15-安福霉素-9-GABA-GABA在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)化合物与γ-N-叔丁氧羰基-氨基丁酸结合。将所得中间产物HPLC纯化。在第二步中，在实施例3所述的方法中使用所述纯化的中间产物和γ-N-叔丁氧羰基-氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3.7mg，9％收率)，纯度为99％，对C68H111N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1491，实测为1490。
实施例95 C15-安福霉素-9-HPRO在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(23mg，0.017mmol)和(S)-N-叔丁氧羰基-六氢哌啶羧酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3.2mg，13％收率)，纯度为70％，对C66H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1432，实测为1431。
实施例96 C15-安福霉素-9-(D-PIP)在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(175mg，0.133mmol)和(R)-N-叔丁氧羰基-六氢哌啶羧酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(60mg，32％收率)，纯度为77％，对C66H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1432，实测为1431。
实施例97 CH3-(CH2)11-NH-C(＝O)-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例273中的安福霉素-9-(N-Fmoc-β-Ala)(58mg)和十二烷基异氰酸酯可得到标题化合物(20.7mg)，纯度为91％，对C61H99N15O21(M)的MS(FAB)计算值为1379，实测为1379。
实施例98 CH3-(CH2)11-NH-C(＝O)-安福霉素-9-SAR在实施例3所述的方法中使用实施例272中的安福霉素-9-(N-Fmoc-Sar)(62mg)和十二烷基异氰酸酯可得到标题化合物(12.2mg)，纯度为80％，对C61H99N15O21(M)的MS(FAB)计算值为1379，实测为1380。
实施例99 CH3-(CH2)15-SO2-GLY-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与N-叔丁氧羰基甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在惰性气氛中将所得纯化的中间产物溶解于10mL DMF。加入十五烷基磺酰氯(13.7mg，0.044mmol)，将所述混合物搅拌过夜得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸的25％乙腈水溶液至95％乙腈)和冷冻干燥(5mg)，纯度为89％，对C63H104N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1442，实测为1441。
实施例100 CH3-(CH2)9-SO2-PHE-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与N-叔丁氧羰基苯丙氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，如实施例99的方法所述，将所得纯化的中间产物与癸基磺酰氯结合得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，21％收率)，纯度为91％，对C64H98N14O22S(M)的MS(MALDI)计算值为1448，实测为1447。
实施例101 CH3-(CH2)9-SO2-GLY-安福霉素-9-LYS在第一步中，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与N-叔丁氧羰基甘氨酸结合，然后在第二步中，如实施例99的方法所述，采用癸基磺酰氯结合得到第二中间产物，将所述第二中间产物HPLC纯化和冷冻干燥。在第三步中，如实施例4的方法所述，将所述第二中间产物与2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸结合得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，5.7％收率)，纯度为83％，对C65H108N16O23S(M)的MS(MALDI)计算值为1514，实测为1513。
实施例102 CH3-(CH2)9-SO2-GLY-安福霉素-9-GLY
在第一步中，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与N-叔丁氧羰基甘氨酸结合，然后在第二步中，如实施例99的方法所述，采用癸基磺酰氯结合得到第二中间产物，将所述第二中间产物HPLC纯化和冷冻干燥。在第三步中，如实施例3的方法所述，将所述第二中间产物与N-叔丁氧羰基甘氨酸结合得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，18％收率)，纯度为78％，对C61H99N15O23S(M)的MS(MALDI)计算值为1443，实测为1442。
实施例103 C12-GLY-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(16.3mg)与N-十二烷酰甘氨酸琥珀酰亚胺-1-酯(7.3mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例273制备)结合，得到标题化合物(10.5mg)，纯度为90％，对C59H94N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1335，实测为1336。
实施例104 C8-(P-APA)-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(11.1mg)与N-辛烷酰-对氨基苯乙酸酸琥珀酰亚胺-1-基酯(7.8mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例274制备)结合，得到标题化合物(7.1mg)，纯度为85％，对C61H90N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1335，实测为1335。
实施例105 C14-GLY-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(26mg，0.020mmol)与N-叔丁氧羰基甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用所述纯化的中间产物和十四烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6.4mg，24％收率)，纯度为92％，对C61H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1364，实测为1363。
实施例106 C16-GLY-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(26mg，0.020mmol)与N-叔丁氧羰基甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用所述纯化的中间产物和十六烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9.7mg，35％收率)，纯度为96％，对C63H102N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1392，实测为1391。
实施例107 C18-GLY-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(26mg，0.020mmol)与N-叔丁氧羰基甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用所述纯化的中间产物和十八烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8.2mg，29％收率)，纯度为84％，对C65H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1420，实测为1419。
实施例108 C12-(P-氨基苯丙酰)-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(10.6mg)与N-十二烷酰-对氨基苯丙氨酸琥珀酰亚胺-1-酯(6.1mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例2744制备)结合，得到标题化合物(6.3mg)，纯度为93％，对C66H100N14O21的MS(FAB)计算值为(M)1426，实测为1426。
实施例109 C12-(P-氨基苯丙酰)2-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与4-叔丁氧羰基-氨基苯丙氨酸。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，如实施例3的方法所述，将所述纯化的中间产物与4-叔丁氧羰基-氨基苯丙氨酸结合。将所得第二中间产物HPLC纯化和冷冻干燥。在第三步中，在实施例2所述的方法中使用纯化的第二中间产物与十二烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(1.5mg，4％收率)，纯度为86％，对C75H109N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1573，实测为1572。
实施例110 CH3-(CH2)9-O-P-PH-C(＝O)-GLY-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与N-叔丁氧羰基甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用纯化的第二中间产物与对癸氧基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8.9mg，28％收率)，纯度为88％，对C64H96N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1414，实测为1413。
实施例111 C12-(M--APA)-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(11mg)与N-十二烷酰-间氨基苯乙酸琥珀酰亚胺-1-基酯(6.6mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例274制备)结合，得到标题化合物(8.5mg)，纯度为86％，对C65H98N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1412，实测为1412。
实施例112 C12-[ASP-(OtBu)]-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(16.3mg)与N-十五烷酰-O-叔丁基天冬氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯(7.2mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例274制备)结合，得到标题化合物(10.6mg)，纯度为68％，对C68H110N14O23(M)的MS(FAB)计算值为1492，实测为1492。
实施例113 C10-(M-APA)-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与3-叔丁氧羰基氨基苯乙酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用纯化的第二中间产物与癸酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18.9mg，26％收率)，纯度为93％，对C63H94N14O21的MS(MALDI)计算值为(M)1384，实测为1383。
实施例114 (CH3-(CH2)7)(CH3-(CH2)5)CH-C(＝O)-GLY-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与N-(2-己基-癸酰)甘氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯(7.0mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例274制备)结合，得到标题化合物(14.4mg)，纯度为84％，对C61H99N13O20(M)的MS(FAB)计算值为1335，实测为1335。
实施例115 C15-PHG-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(16.3mg)与N-十五烷酰基苯丙氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯(9.9mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例274制备)结合，得到标题化合物(6.3mg)，纯度为75％，对C68H104N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1454，实测为1454。
实施例116 C15-(D-PHE)-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与D-N-叔丁氧羰基苯丙氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用纯化的中间产物与十五烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，33％收率)，纯度为60％，对C69H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1468，实测为1467。
实施例117 PH-O-(CH2)12-GLY-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(16.3mg)与N-(11-苯氧基十一烷酰)甘氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯(7.5mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例276制备)结合，得到标题化合物(12.4mg)，纯度为87％，对C64H96N14O22(M)的MS(FAB)计算值为1414，实测为1414。
实施例118 C10-(L-BBTA)-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与(S)-3-苯[b]-3-噻吩-3-基-2-叔丁氧羰基氨基丙酸结合，将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用纯化的中间产物与癸酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，12％收率)，纯度为84％，对C66H96N14O21S(M)的MS(MALDI)计算值为1454，实测为1453。
实施例119 C12-(P-APA)-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与4-叔丁氧羰基氨基乙酸结合，将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用纯化的中间产物与十二烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，31％收率)，纯度为75％，对C65H98N14O21的MS(MALDI)计算值为(M)1412，实测为1411。
实施例120 C12-(P-氨基-反式-肉桂酰)-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(11.1mg)与N-十二烷酰-对氨基-反式-肉桂酸琥珀酰二亚胺-1-基酯(7.8mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例274制备)结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7.4mg)，纯度为84％，对C66H98N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1424，实测为1424。
实施例121 CH3-(CH2)11-O-P-PH-C(＝O)-GLY-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与N-叔丁氧羰基甘氨酸结合，将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用纯化的中间产物与对十二烷氧基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，30％收率)，纯度为86％，对C66H100N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1442，实测为1441。
实施例122 CH3-(CH2)9-(P-APA)-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与4-叔丁氧羰基氨基苯乙酸结合，将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用纯化的中间产物与癸酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，7％收率)，纯度为62％，对C63H94N14O21的MS(MALDI)计算值为(M)1384，实测为1383。
实施例123 C12-PABA-GLY-安福霉素如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(15.8mg)与N-(N-十二烷酰-对氨基苯甲酰基)甘氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯(6.3mg，用实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯，根据实施例276制备)结合，得到标题化合物(7.6mg)，纯度为82％，对C66H99N15O22的MS(FAB)计算值为(M)1455，实测为1455。
实施例124 C15-安福霉素-9-(D-ORN)如实施例4的方法所述，使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)与(D)-5-叔丁氧羰基氨基-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)-氨基戊酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(13mg，44％收率)，纯度为85％，对C65H107N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1435，实测为1434。
实施例125 C14-安福霉素-9-GLY-LYS如实施例4的方法所述，使用实施例10中的C14-安福霉素(100mg，0.077mmol)与N-(2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酰)甘氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(60.5mg，54％收率)，纯度为85％，对C67H110N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1492，实测为1491。
实施例126 C14-安福霉素-9-LYS如实施例4的方法所述，使用实施例10中的C14-安福霉素(22mg，0.017mmol)与2-N-叔丁氧羰基-6-N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，38％收率)，纯度为77％，对C65H107N15O21的MS(MALDI)计算值为(M)1435，实测为1434。
实施例127 C14-安福霉素-9-ORN如实施例4的方法所述，使用实施例10中的C14-安福霉素(22mg，0.017mmol)与6-N-叔丁氧羰基-2-N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)鸟氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，30％收率)，纯度为78％，对C64H105N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1421，实测为1420。
实施例128 C13-安福霉素-9-GLY-LYS如实施例4的方法所述，使用实施例9中的C14-安福霉素(25mg，0.019mmol)与N-(2-N-叔丁氧羰基-6-N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酰)甘氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(13mg，46％收率)，纯度为93％，对C66H108N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1478，实测为1477。
实施例129 C15-安福霉素-9-LYS如实施例4的方法所述，使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)与2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，30％收率)，纯度为99％，对C66H109N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1449，实测为1448。
实施例130 C15-安福霉素-9-ORN如实施例4的方法所述，使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)与6-N-叔丁氧羰基-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)鸟氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，34％收率)，纯度为98％，对C65H107N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1435，实测为1434。
实施例131 C15-安福霉素-9-GDAB如实施例4的方法所述，使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)与(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丁酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，31％收率)，纯度为96％，对C64H105N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1421，实测为1420。
实施例132 C15-安福霉素-9-DAP如实施例4的方法所述，使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)与(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丙酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，31％收率)，纯度为73％，对C63H103N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1407，实测为1406。
实施例133 C13-安福霉素-9-LYS如实施例4的方法所述，使用实施例9中的C13-安福霉素(20mg，0.015mmol)与2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，37％收率)，纯度为97％，对C64H105N15O21的MS(MALDI)计算值为(M)1421，实测为1420。
实施例134 C13-安福霉素-9-ORN如实施例4的方法所述，使用实施例9中的C13-安福霉素(20mg，0.015mmol)与6-N-叔丁氧羰基-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)鸟氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，42％收率)，纯度为86％，对C63H103N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1407，实测为1406。
实施例135 C13-安福霉素-9-GDAB如实施例4的方法所述，使用实施例9中的C13-安福霉素(20mg，0.015mmol)与(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丁酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，57％收率)，纯度为92％，对C62H101N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1393，实测为1392。
实施例136 C13-安福霉素-9-DAP如实施例4的方法所述，使用实施例9中的C13-安福霉素(20mg，0.015mmol)与(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丙酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，43％收率)，纯度为93％，对C61H99N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1379，实测为1378。
实施例137 C12-安福霉素-9-LYS如实施例4的方法所述，使用实施例8中的C12-安福霉素(25mg，0.020mmol)与2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(14mg，53％收率)，纯度为100％，对C63H103N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1407，实测为1407。
实施例138 C12-安福霉素-9-GDAB如实施例4的方法所述，使用实施例8中的C12-安福霉素(25mg，0.020mmol)与(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丁酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，23％收率)，纯度为100％，对C61H99N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1379，实测为1378。
实施例139 C14-安福霉素-9-GDAB如实施例4的方法所述，使用实施例10中的C14-安福霉素(22mg，0.017mmol)与(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丁酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，26％收率)，纯度为84％，对C63H103N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1407，实测为1406。
实施例140 C14-安福霉素-9-DAP如实施例4的方法所述，使用实施例10中的C14-安福霉素(22mg，0.017mmol)与(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丙酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，26％收率)，纯度为70％，对C62H101N15O21的MS(MALDI)计算值为(M)1393，实测为1392。
实施例141 C16-安福霉素-9-GLY-LYS如实施例4的方法所述，使用实施例11中的C16-安福霉素(30mg，0.022mmol)与N-(2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酰)甘氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4.5mg，13％收率)，纯度为79％，对C69H114N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1520，实测为1519。
实施例142 C17-安福霉素-9-GLY-LYS如实施例4的方法所述，使用实施例12中的C17-安福霉素(30mg，0.022mmol)与N-(2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酰)甘氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5.2mg，15％收率)，纯度为82％，对C70H116N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1534，实测为1533。
实施例143 C12-安福霉素-9-GLY-LYS如实施例4的方法所述，使用实施例8中的C12-安福霉素(30mg，0.023mmol)与N-(2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酰)甘氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3.4mg，10％收率)，纯度为80％，对C65H106N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1464，实测为1463。
实施例144 C15-安福霉素-9-SAR-ORN如实施例4的方法所述，使用实施例24中的C15-安福霉素-9-SAR(27mg，0.020mmol)与6-N-叔丁氧羰基-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)鸟氨酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，16％收率)，纯度为89％，对C68H112N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1506，实测为1505。
实施例145 C15-安福霉素-9-SAR-GDAB如实施例4的方法所述，使用实施例24中的C15-安福霉素-9-SAR(27mg，0.020mmol)与(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丁酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5.8mg，19％收率)，纯度为92％，对C67H110N16O22的MS(MALDI)计算值为(M)1492，实测为1491。
实施例146 C15-安福霉素-9-SAR-DAP如实施例4的方法所述，使用实施例24中的C15-安福霉素-9-SAR(27mg，0.020mmol)与(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丙酸结合，得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4.7mg，16％收率)，纯度为83％，对C66H108N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1478，实测为1477。
实施例147 C15-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例4所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(250mg，0.189mmol)和N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(26.1mg，10％收率)，纯度为91％，对C63H102N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1392，实测为1391。
实施例148 C15-安福霉素-9-(β-ALA)-ORN在实施例4所述的方法中使用实施例147中的C15-安福霉素-9-(β-Ala)(35mg，0.025mmol)和6-N-叔丁氧羰基-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)鸟氨酸结合可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9.1mg，23％收率)，纯度为97％，对C68H112N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1506，实测为1505。
实施例149 C15-安福霉素-9-(β-ALA)的β异构体使用实施例147中所述的方法可得到标题化合物，所述标题化合物是所述反应的次级产物(安福霉素核心多肽β-异构体)。将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8.8mg，3％收率)，纯度为86％，对C63H102N14O21的MS(MALDI)计算值为(M)1392，实测为1391。
实施例150 C15-安福霉素-9-(β-ALA)的脱水异构体使用实施例147中所述的方法可得到标题化合物，所述标题化合物是所述反应的次级产物(安福霉素核心多肽脱水异构体)。将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18.4mg，7％收率)，纯度为80％，对C63H100N14O20(M)的MS(MALDI)计算值为1374，实测为1373。
实施例151 C15-安福霉素-9-(D-PRO)-(D-LYS)在实施例4所述的方法中使用实施例67中的C15-安福霉素-9-(D-PRO)(60mg，0.042mmol)和(D)-2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸结合可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(1.8mg，3％收率)，纯度为93％，对C71H116N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1546，实测为1545。
实施例152 C15-安福霉素-9-GLY-(D-LYS)在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)与N-叔丁氧羰基-甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例4所述的方法中使用所述纯化的中间产物和(D)-6-N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)-2-N-(叔丁氧羰基)赖氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(16mg，58％收率)，纯度为82％，对C68H112N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1506，实测为1505。
实施例153 C15-安福霉素-9-GLY-ORN在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)与N-叔丁氧羰基-甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例4所述的方法中使用所述纯化的中间产物和2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)鸟氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18mg，66％收率)，纯度为68％，对C67H110N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1492，实测为1491。
实施例154 C15-安福霉素-9-GLY-GDAB在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)与N-叔丁氧羰基-甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例4所述的方法中使用所述纯化的中间产物和(S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9.6mg，34％收率)，纯度为80％，对C66H108N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1478，实测为1477。
实施例155 C15-安福霉素-9-(β-ALA)-GLY在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)与N-叔丁氧羰基-β-甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例4所述的方法中使用所述纯化的中间产物和2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(19mg，61％收率)，纯度为84％，对C69H114N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1520，实测为1519。
实施例156 C15-安福霉素-9-GABA-LYS在第一步中，如实施例3的方法所述，将C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)与γ-N-叔丁氧羰基氨基丁酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例4所述的方法中使用所述纯化的中间产物和2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(19.2mg，66％收率)，纯度为95％，对C70H116N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1534，实测为1533。
实施例157 C15-安福霉素-9-GLY-DAP在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(22mg，0.017mmol)与N-叔丁氧羰基-甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例4所述的方法中使用所述纯化的中间产物和(S)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)丙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8.7mg，36％收率)，纯度为73％，对C65H106N16O22的MS(MALDI)计算值为(M)1464，实测为1463。
实施例158 C15-安福霉素-9-GLY-HLYS在第一步中，如实施例3的方法所述，将实施例2中的C15-安福霉素(35mg，0.027mmol)与N-叔丁氧羰基-甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例4所述的方法中使用所述纯化的中间产物和(S)-2-叔丁氧羰基氨基-7-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)庚酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6.8mg，17％收率)，纯度为91％，对C69H114N16O22的MS(MALDI)计算值为(M)1520，实测为1519。
实施例159 C15-安福霉素-9-GABA-GDAB在第一步中，如实施例3的方法所述，将C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)与γ-N-叔丁氧羰基氨基丁酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例4所述的方法中使用所述纯化的中间产物和(S)-2-N-叔丁氧羰基氨基-4-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(17.2mg，46％收率)，纯度为76％，对C68H112N16O22的MS(MALDI)计算值为(M)1506，实测为1505。
实施例160 C15-安福霉素-9-PRO使用实施例2中的C15-安福霉素(45mg，0.034mmol)和用于实施例5中方法所述的N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)脯氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，23％收率)，纯度为85％，对C65H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1418，实测为1417。
实施例161 C15-安福霉素-9-AIB在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和2-N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)-2，2-二甲基甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，25％收率)，纯度为82％，对C64H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1406，实测为1405。
实施例162 C15-安福霉素-9-MECYS
在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和(S)-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基-3-甲基硫烷基丙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，23％收率)，纯度为98％，对C64H104N14O21S的MS(MALDI)计算值为(M)1438，实测为1437。
实施例163 C15-安福霉素-9-NVL在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和(S)-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基戊酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，21％收率)，纯度为97％，对C65H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1420，实测为1419。
实施例164 C15-安福霉素-9-ABU在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和(S)-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，25％收率)，纯度为92％，对C64H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1406，实测为1405。
实施例165 C15-安福霉素-9-CIT在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和(S)-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)-5-脲基戊酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，25％收率)，纯度为89％，对C66H108N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1478，实测为1477。
实施例166 C15-安福霉素-9-(ME)2ARG在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.030mmol)和(S)-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)-N，N’-甲基精氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，4％收率)，纯度为87％，对C68H113N17O21(M)的MS(MALDI)计算值为1505，实测为1504。
实施例167 C15-安福霉素-9-HYP在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和(S)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸-1-(9H-芴-9-基-甲基)酯可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，37％收率)，纯度为71％，对C65H104N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1434，实测为1433。
实施例168 C15-安福霉素-9-(P-APA)在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(35mg，0.027mmol)和4-N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基苯乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，10％收率)，纯度为90％，对C68H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1454，实测为1453。
实施例169 C15-安福霉素-9-VAL在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)缬氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，21％收率)，纯度为64％，对C65H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1420，实测为1419。
实施例170 C15-安福霉素-9-(ME)3LYS在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(31mg，0.023mmol)和[(S)-5-羧基-5-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)戊基]-三甲基铵可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，23％收率)，纯度为87％，对C69H116N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1492，实测为1491。
实施例171 C15-安福霉素-9-NLE在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和(S)-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)己酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，34％收率)，纯度为95％，对C66H108N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1434，实测为1433。
实施例172 C15-安福霉素-9-LYS在实施例5所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(26mg，0.019mmol)和6-甲酰基-N-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，343％收率)，纯度为88％，对C67H109N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1477，实测为1476。
实施例173 C15-安福霉素-9-(β-ALA)-(5-AVA)在实施例5所述的方法中使用实施例147中的C15-安福霉素-9-(β-ALA)(33mg，0.025mmol)和5-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)戊酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，21％收率)，纯度为83％，对C68H111N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1491，实测为1490。
实施例174 C15-安福霉素-9-(β-ALA)-VAL在第一步中，如实施例3的方法所述，将化合物C15-安福霉素(26mg，0.019mmol)与N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化。在第二步中，在实施例5所述的方法中使用所述纯化的中间产物和N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)缬氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，35％收率)，纯度为76％，对C68H111N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1491，实测为1490。
实施例175 C15-安福霉素-9-(β-ALA)-VAL的β-异构体使用实施例147中所述的方法可得到标题化合物，所述标题化合物是所述反应的次级产物(安福霉素核心多肽β-异构体)。将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2.2mg，7％收率)，纯度为91％，对C68H111N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1491，实测为1490。
实施例176 C15-安福霉素-9-(5-AVA)-(β-ALA)在第一步中，如实施例3的方法所述，将化合物C15-安福霉素(36mg，0.028mmol)与5-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)戊酸结合。将所得中间产物HPLC纯化。在第二步中，在实施例5所述的方法中使用所述纯化的中间产物和N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10.8mg，27％收率)，纯度为99％，对C68H111N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1491，实测为1490。
实施例177 FMOC-甘氨酸树脂(GR)的制备将N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)甘氨酸(1.45g，4.8mmol)和DIEA(2.83mL，16mmol)溶液在二氯甲烷(DCM，20mL)中与2-氯三苯甲基氨树脂(2.11g，4mmol)混合。室温搅拌2小时后，将所述树脂过滤，用DCM∶甲醇∶DIEA(17∶2∶1)的混合溶液洗涤三次，再分别用DCM，DMF最后用DCM各自洗涤两次。然后将所述GR树脂干燥(4.5g，4mmol)。
实施例178 FMOC-赖氨酸(BOC)-树脂(KR)的制备如实施例177中所述的方法，使用2-氯三苯甲基氨树脂(2.11g，4mmol)和2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸可得到标题化合物KR(4.5g，4mmol)。
实施例179 FMOC-肌氨酸树脂(SR)的制备如实施例177中所述的方法，使用2-氯三苯甲基氨树脂(2.11g，4mmol)和N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)肌氨酸可得到标题化合物SR(4.5g，4mmol)。
实施例180 FMOC-甘氨酸-赖氨酸(BOC)-OH(GK)的制备将实施例178中的树脂KR(0.75g，0.67mmol)悬浮于DMF(5mL)和哌啶(1mL，20％v/v)中。所述混合物搅拌30分钟之后，将所述树脂过滤，并用DMF洗涤(两次，每次5mL)。将所述树脂悬浮于8mLDMF中。向所述混合物中加入N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)甘氨酸(1.57g，3.35mmol)，O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲阳离子六氟磷酸盐(1.27g，3.35mmol)，1-羟苯并三唑(0.51g，3.35mmol)和0.74mL N-甲基吗啉(6.7mmol)，室温搅拌6小时。过滤后，将所述树脂用DMF洗涤(两次，每次5mL)。使用5mL乙酸∶四氟乙烷∶DCM(2∶2∶6)的混合物裂解所述树脂。2小时后，将所述裂解的树脂过滤，将含有所述产物的滤液真空浓缩，得到粉末状(240mg)的相对干净的标题化合物(GK)。
实施例181 FMOC-D-亮氨酸-甘氨酸-OH(DLG)的制备如实施例180中所述的方法，使用实施例177中的化合物GR(0.75g，0.67mmol)和N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)亮氨酸可得到标题化合物dLG(154mg)。
实施例182 6-FMOC-氨基己氧基-甘氨酸-OH(AG)的制备如实施例180中所述的方法，使用实施例177中的化合物GR(0.75g，0.67mmol)和6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基胺)己酸可得到标题化合物AG(163mg)。
实施例183 6-FMOC-氨基己酰基-肌氨酸-OH(AS)的制备如实施例180中所述的方法，使用实施例179中的化合物SR(0.75g，0.67mmol)和6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基胺)己酸可得到标题化合物AS(161mg)。
实施例184 FMOC-赖氨酸(BOC)-肌氨酸-OH(KS)的制备如实施例180中所述的方法，使用实施例179中的化合物SR(0.75g，0.67mmol)和2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸可得到标题化合物KS(201mg)。
实施例185 FMOC-赖氨酸(BOC)-甘氨酸-甘氨酸-OH(KGG)的制备将实施例177中的树脂GR(0.75g，0.67mmol)悬浮于DMF(5mL)和哌啶(1mL，20％v/v)中。所述混合物搅拌30分钟之后，将所述树脂过滤，并用DMF洗涤(两次，每次5mL)。将所述树脂悬浮于8mLDMF中。向所述混合物中加入N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)甘氨酸(1-57g，3.35mmol)，O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲阳离子六氟磷酸盐(1.27g，3.35mmol)，1-羟基苯并三唑(0.51g，3.35mmol)和0.74mL N-甲基吗啉(6.7mmol)，室温搅拌6小时。过滤后，将所述树脂用DMF洗涤(两次，每次5mL)，并悬浮于55mL DMF中。再加入2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸(1.57g，3.35mmol)，O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲阳离子六氟磷酸盐(1.27g，3.35mmol)，1-羟基苯并三唑(0.51g，3.35mmol)和0.74mL N-甲基吗啉(6.7mmol)。将所述混合物室温搅拌6小时。过滤后，将所述树脂用DMF洗涤(两次，每次5mL)。使用5mL的乙酸∶四氟乙烷∶DCM(2∶2∶6)的混合物裂解所述树脂。2小时后，将所述裂解的树脂过滤，将含有所述产物的滤液真空浓缩，得到粉末状(170mg)的相对干净的标题化合物(KGG)。
实施例186 FMOC-甘氨酸-赖氨酸(BOC)-甘氨酸-OH(GKG)的制备将树脂KGR(0.67mmol)悬浮于DMF(5mL)和哌啶(1mL，20％v/v)中。所述混合物搅拌30分钟之后，将所述树脂过滤，并用DMF洗涤(两次，每次5mL)。将所述树脂悬浮于8mL DMF中。向所述混合物中加入N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)甘氨酸(1.0g，3.35mmol)，O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲阳离子六氟磷酸盐(1.27g，3.35mmol)，1-羟基苯并三唑(0.51g，3.35mmol)和0.74mL N-甲基吗啉(6.7mmol)，室温搅拌6小时。过滤后，将所述树脂用DMF洗涤(两次，每次5mL)。使用4mL的乙酸∶四氟乙烷∶DCM(2∶2∶6)的混合物裂解所述树脂。2小时后，将所述裂解的树脂过滤，将含有所述产物的滤液真空浓缩，得到粉末状(180mg)的相对干净的标题化合物(GKG)。
实施例187 FMOC-赖氨酸(BOC)-赖氨酸(BOC)-甘氨酸-OH(KKG)的制备将树脂KGR(0.67mmol)悬浮于DMF(5mL)和哌啶(1mL，20％v/v)中。所述混合物搅拌30分钟之后，将所述树脂过滤，并用DMF洗涤(两次，每次5mL)。将所述树脂悬浮于8mL DMF中。向所述混合物中加入2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸(1.5g，3.35mmol)，O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲阳离子六氟磷酸盐(1.27g，3.35mmol)，1-羟基苯并三唑(0.51g，3.35mmol)和0.74mL N-甲基吗啉(6.7mmol)，室温搅拌6小时。过滤后，将所述树脂用DMF洗涤(两次，每次5mL)。使用4mL的乙酸∶四氟乙烷∶DCM(2∶2∶6)的混合物裂解所述树脂。2小时后，将所述裂解的树脂过滤，将含有所述产物的滤液真空浓缩，得到粉末状(310mg)的相对干净的标题化合物(KKG)。
实施例188 FMOC-赖氨酸(BOC)-赖氨酸(BOC)-OH(KK)的制备如实施例187中所述的方法，使用实施例178中的化合物KR(0.75g，0.67mmol)和2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸可得到标题化合物KK(350mg)。
实施例189 FMOC-赖氨酸(BOC)-赖氨酸(BOC)-赖氨酸(BOC)-OH(KKK)的制备如实施例187中所述的方法，使用两组2-N-叔丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酸和实施例178中的KR(0.75g，0.67mmol)可得到标题化合物KKK(350mg)。
实施例190 C15-安福霉素-9-GLY-LYS-GLY如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例186中的多肽GKG可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(20mg，68％收率)，纯度为77％，对C70H115N17O23(M)的MS(MALDI)计算值为1563，实测为1562。
实施例191 C15-安福霉素-9-GLY-LYS-LYS如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例187中的多肽KKG可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(16mg，52％收率)，纯度为74％，对C74H124N18O23(M)的MS(MALDI)计算值为1634，实测为1633。
实施例192 C15-安福霉素-9-GLY-GLY-LYS如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例185中的多肽KGG可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(20mg，54％收率)，纯度为88％，对C70H115N17O23(M)的MS(MALDI)计算值为1563，实测为1562。
实施例193 C15-安福霉素-9-LYS-GLY如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例180中的多肽GK可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18mg，63％收率)，纯度为91％，对C68H112N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1506，实测为1505。
实施例194 C15-安福霉素-9-LYS-LYS如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例188中的多肽KK可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，23％收率)，纯度为72％，对C72H121N17O22(M)的MS(MALDI)计算值为1577，实测为1576。
实施例195 C15-安福霉素-9-LYS-LYS-LYS如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例189中的多肽KKK可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18mg，56％收率)，纯度为91％，对C78H133N19O23(M)的MS(MALDI)计算值为1705，实测为1704。
实施例196 C15-安福霉素-9-GLY-(D-LEU)如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例181中的多肽dLG可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5.4mg，19％收率)，纯度为83％，对C68H111N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1491，实测为1490。
实施例197 C15-安福霉素-9-GLY-AHX如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例182中的多肽AG可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4.1mg，15％收率)，纯度为98％，对C68H111N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1491，实测为1490。
实施例198 C15-安福霉素-9-SAR-AHX如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例183中的多肽AS可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3.5mg，12％收率)，纯度为98％，对C69H113N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1505，实测为1504。
实施例199 C15-安福霉素-9-SAR-LYS如实施例4中所述的方法，使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和实施例184中的多肽KS可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2.5mg，9％收率)，纯度为84％，对C69H114N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1520，实测为1519。
实施例200 C15-安福霉素-9-DAP-(β-N-(B-ALA))如实施例4中所述的方法，使用C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和(S)-3-[(9H-芴-9-基-甲氧羰基)-β-丙氨酰]氨基-2-叔丁氧羰基氨基丙酸(后者化合物是依照实施例180制备的)可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2.8mg，7％收率)，纯度为85％，对C66H108N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1478，实测为1477。
实施例201 C15-安福霉素-9-C6将实施例2中的化合物C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)悬浮于1mL DMF，然后加入102μL 1M碳酸氢钠(水溶液，0.10mmol)。将所述反应混合物冰浴冷却。继续保持于冰上，向所述反应混合物中缓慢加入预先溶解于0.5mL DMF中的琥珀酰亚胺活化的己酸(1.5当量，根据实施例1中十五酸琥珀酰亚胺-1-酯化合物的描述进行制备)，然后在室温下继续搅拌至少8小时，得到标题化合物的粗产物。将所述粗产物真空干燥浓缩，使用HPLC(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸的5％乙腈水溶液至95％乙腈)进行纯化，并进行冷冻干燥(5mg，17％收率)，纯度为80％，对C66H107N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1419，实测为1418。
实施例202 C15-安福霉素-9-PLA在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和邻吡啶甲酸(picolinic acid)可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，31％收率)，纯度为100％，对C66H100N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1426，实测为1425。
实施例203 C15-安福霉素-9-PCA在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和2-吡嗪羧酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，34％收率)，纯度为97％，对C65H99N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1427，实测为1426。
实施例204 C15-安福霉素-9-(氨甲酰-LEU)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-氨甲酰亮氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，36％收率)，纯度为100％，对C67H109N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1477，实测为1476。
实施例205 C15-安福霉素-9-C8在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)和辛酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，15％收率)，纯度为85％，对C68H111N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1447，实测为1446。
实施例206 C15-安福霉素-9-C己基在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和环己烷羧酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，27％收率)，纯度为86％，对C67H107N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1431，实测为1430。
实施例207 C15-安福霉素-9-C4在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)和丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，24％收率)，纯度为70％，对C64H103N13O21的MS(MALDI)计算值为(M)1391，实测为1390。
实施例208 C15-安福霉素-9-(2-降莰烷乙酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和2-降茨烷乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，27％收率)，纯度为91％，对C69H109N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1457，实测为1456。
实施例209 C15-安福霉素-9-(N-苯甲酰基-TYR-PABA)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和(S)-4-[2-苯甲酰基氨基-3-(4-羟基-苯基)-丙酰基氨基]-苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，11％收率)，纯度为91％，对C83H115N15O24(M)的MS(MALDI)计算值为1707，实测为1706。
实施例210 C15-安福霉素-9-((S)-(+)-5-氧-2-四氢呋喃羰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和(S)-(+)-5-氧-2-四氢呋喃羧酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，22％收率)，纯度为80％，对C65H101N13O23(M)的MS(MALDI)计算值为1433，实测为1433。
实施例211 C15-安福霉素-9-苯丙炔基在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和苯丙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，10％收率)，纯度为70％，对C69H101N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1449，实测为1448。
实施例212 C15-安福霉素-9-(氨基甲酰-β-ALA)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N-氨基甲酰基-β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(14mg，43％收率)，纯度为99％，对C64H103N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1435，实测为1434。
实施例213 C15-安福霉素-9-丙烯醛基在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和丙烯酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，10％收率)，纯度为95％，对C63H99N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1375，实测为1374。
实施例214 C15-安福霉素-9-(1-萘基乙酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和1-萘基乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，27％收率)，纯度为93％，对C72H105N13O21的MS(MALDI)计算值为(M)1489，实测为1488。
实施例215 C15-安福霉素-9-(4-苯氧基苯甲酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和4-苯氧基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，15％收率)，纯度为87％，对C73H105N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1517，实测为1516。
实施例216 C15-安福霉素-9-(2-萘基乙酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和2-萘基乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，15％收率)，纯度为84％，对C72H105N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1489，实测为1488。
实施例217 C15-安福霉素-9-(2-呋喃基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和呋喃-2-羧酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，31％收率)，纯度为80％，对C65H99N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1415，实测为1414。
实施例218 C15-安福霉素-9-巴豆酰基在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和丁-2-烯酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，22％收率)，纯度为91％，对C64H101N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1389，实测为1388。
实施例219 C15-安福霉素-9-(3，4-(亚甲基二氧)苯乙酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和3，4-(亚甲基二氧)苯乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，33％收率)，纯度为90％，对C69H103N13O23(M)的MS(MALDI)计算值为1483，实测为1482。
实施例220 C15-安福霉素-9-C10在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)和癸酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(10mg，37％收率)，纯度为80％，对C70H115N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1475，实测为1474。
实施例221 C15-安福霉素-9-(γ-氧-苊丁基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)和γ-氧-苊丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，25％收率)，纯度为77％，对C76H109N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1557，实测为1556。
实施例222 C15-安福霉素-9-氢化肉桂酰基在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)和氢化肉桂酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，23％收率)，纯度为76％，对C69H105N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1453，实测为1452。
实施例223 C15-安福霉素-9-(α-酮-丁基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(23mg，0.018mmol)和α-酮-丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，37％收率)，纯度为87％，对C64H101N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1405，实测为1404。
实施例224 C15-安福霉素-9-香叶草基在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(23mg，0.018mmol)和3，7--二甲基-辛-2，6-二烯酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，12％收率)，纯度为88％，对C70H111N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1471，实测为1470。
实施例225 C15-安福霉素-9-(O-茴香基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.018mmol)和2-甲氧基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，34％收率)，纯度为85％，对C68H103N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1455，实测为1454。
实施例226 C15-安福霉素-9-苯乙酰基在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和苯乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，22％收率)，纯度为94％，对C68H103N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1439，实测为1438。
实施例227 C15-安福霉素-9-(2-丁炔基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(23mg，0.018mmol)和丁-2-炔酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，29％收率)，纯度为84％，对C64H99N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1387，实测为1386。
实施例228 C15-安福霉素-9-(3，5-双(CF3)苯乙酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(23mg，0.018mmol)和3，5-双(三氟甲基)苯乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，26％收率)，纯度为85％，对C70H101F6N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1575，实测为1574。
实施例229 C15-安福霉素-9-(3，4-亚甲基二氧-肉桂酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(23mg，0.018mmol)和3，4-亚甲基二氧-肉桂酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，18％收率)，纯度为81％，对C70H103N13O23(M)的MS(MALDI)计算值为1495，实测为1494。
实施例230 C15-安福霉素-9-(反式-肉桂酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.019mmol)和反式-肉桂酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6mg，23％收率)，纯度为84％，对C69H103N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1451，实测为1450。
实施例231 C15-安福霉素-9-乙酰氧基乙酰基在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(23mg，0.018mmol)和乙酰氧基乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(1mg，4％收率)，纯度为85％，对C64H101N13O23(M)的MS(MALDI)计算值为1421，实测为1420。
实施例232 C15-安福霉素-9-(1-金刚烷基羰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和1-金刚烷羧酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，15％收率)，纯度为93％，对C71H111N13O21的MS(MALDI)计算值为(M)1483，实测为1482。
实施例233 C15-安福霉素-9-(4-可替宁羰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和4-可替宁羧酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(18mg，52％收率)，纯度为94％，对C71H107N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1523，实测为1522。
实施例234 C15-安福霉素-9-(4-氟代苯甲酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和4-氟苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，25％收率)，纯度为82％，对C68H102FN13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1457，实测为1456。
实施例235 C15-安福霉素-9-(S-乙酰基硫代羟乙酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和S-乙酰基硫代羟基乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，7％收率)，纯度为95％，对C64H101N13O22S(M)的MS(MALDI)计算值为1437，实测为1436。
实施例236 C15-安福霉素-9-(4-丁氧基苯甲酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和4-丁氧基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，13％收率)，纯度为78％，对C71H109N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1497，实测为1496。
实施例237 C15-安福霉素-9-(6-氧代庚酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和6-氧代庚酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，30％收率)，纯度为98％，对C67H107N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1447，实测为1446。
实施例238 C15-安福霉素-9-油酸酯在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和十八碳-9-烯酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，37％收率)，纯度为94％，对C78H129N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1585，实测为1584。
实施例239 C15-安福霉素-9-(4-戊基苯甲酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(24mg，0.019mmol)和4-戊基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，11％收率)，纯度为74％，对C72H111N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1495，实测为1494。
实施例240 C15-安福霉素-9-(3-苯氧基苯甲酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和3-苯氧基苯甲酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，17％收率)，纯度为87％，对C73H105N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1517，实测为1516。
实施例241 C15-安福霉素-9-(C(＝O)-(CH2)2-哌啶)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和用于实施例201中的3-哌啶基-1-基-丙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8.5mg，31％收率)，纯度为84％，对C68H110N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1460，实测为1459。
实施例242 C15-安福霉素-9-(N，N’-二甲基-GABA)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和N，N’-二甲基-γ-氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6.2mg，23％收率)，纯度为98％，对C66H108N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1434，实测为1433。
实施例243 C15-安福霉素-9-(N-乙基-GLY)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(42mg，0.032mmol)和N，乙基甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5.2mg，12％收率)，纯度为80％，对C64H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1406，实测为1405。
实施例244 C15-安福霉素-9-SAR-(N，N’-二甲基-GLY)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和N，N’-二甲基甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9mg，32％收率)，纯度为99％，对C67H109N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1477，实测为1476。
实施例245 C15-安福霉素-9-(N-苯甲基-GLY)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(55mg，0.042mmol)和N-苯甲基甘氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，8％收率)，纯度为78％，对C69H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1468，实测为1467。
实施例246 C15-安福霉素-9-(N，N’-二乙基-β-ALA)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(26mg，0.020mmol)和N，N’-二乙基-β-丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(19.2mg，67％收率)，纯度为91％，对C67H110N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1448，实测为1447。
实施例247 C10-安福霉素-9-C10
在实施例201所述的方法中使用实施例6中的C10-安福霉素(30mg，0.024mmol)和癸酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，22％收率)，纯度为79％，对C65H105N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1405，实测为1404。
实施例248 C15-安福霉素-9-(N-甲基-GABA)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(23mg，0.017mmol)和N-叔丁氧羰基-4-甲基-γ-氨基丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5.2mg，21％收率)，纯度为88％，对C65H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1420，实测为1420。
实施例249 CH3-(CH2)15-NH-C(＝O)-安福霉素在室温在惰性气氛下将安福霉素-9-Fmoc(50mg，0-038mmol，79％纯)溶解于5mL DMF。向所述反应物中加入1-异氰酸-十五烷(8.8mg，0.06mmol)和DIEA(26μL，0.15mmol)，将所述混合物搅拌过夜。向所述反应中加入哌啶(1mL，20％v/v)，将所述反应物再搅拌3小时。过滤所有固体，用额外的DMF(约2mL)洗涤所述不溶物，然后将所述滤液真空浓缩直至干燥。使用HPLC(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸的25％乙腈水溶液至95％乙腈)进行纯化，冷冻干燥得到了标题化合物(21mg，40％收率)，纯度为94％，对C62H102N14O20(M)的MS(MALDI)计算值为1364，实测为1363。
实施例250 C15-安福霉素-9-PGLU在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素和焦谷氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(13.1mg，30％收率)，纯度为86％，对C65H102N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1432，实测为1434。
实施例251 CH3-(CH2)11-NH-C(＝O)-安福霉素在实施例249所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)和1-异氰酸十六烷可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，7％收率)，纯度为77％，对C58H94N14O20(M)的MS(MALDI)计算值为1307，实测为1306。
实施例252 CH3-(CH2)7-NH-C(＝O)-安福霉素在实施例249所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(50mg，0.011mmol)和异氰酸辛酯可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(8mg，17％收率)，纯度为85％，对C54H86N14O20(M)的MS(MALDI)计算值为1252，实测为1251。
实施例253 CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-安福霉素在实施例249所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(51mg，0.011mmol)和异氰酸十四酯可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(23mg，45％收率)，纯度为77％，对C60H98N14O20(M)的MS(MALDI)计算值为1336，实测为1336。
实施例254 CH3-(CH2)11-NH-C(＝O)-GLY-安福霉素在实施例3所述的方法中使用安福霉素-9-Fmoc(15.8mg)和十二烷基酰氨基甘氨酸琥酸酰亚胺-1-基酯(12.8mg，使用如实施例1中制备的琥珀酰亚胺基酯根据实施例275制备)可得到标题化合物(13.2mg)，纯度为93％，对C60H97N15O21(M)的MS(FAB)计算值为1365，实测为1365。
实施例255 C15-安福霉素-C(＝O)-NH-N-丁基在惰性气氛中，将实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.0023mmol)悬浮于2mL DFM，然后加入约4μL 1-异氰酰丁烷(0.035mmol)。将所述混合物搅拌过夜，然后真空浓缩可得所述标题化合物，将所述标题化合物进行HPLC(梯度，30分钟内由含有0.1％三氟乙酸25％乙腈水溶液至95％乙腈)纯化，冷冻干燥得到了标题化合物(2mg，6％收率)，纯度为87％，对C65H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1420，实测为1419。
实施例256 C15-安福霉素-C(＝O)-NH-N-环己基在实施例255所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和1-异氰酸环己烷可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，9％收率)，纯度为70％，对C67H108N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1446，实测为1445。
实施例257 C15-安福霉素-C(＝O)-NH-糠基在实施例255所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和2-异氰酸甲基呋喃可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，9％收率)，纯度为73％，对C66H102N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1444，实测为1443。
实施例258 C15-安福霉素-C(＝O)-NH-2-氟代苯甲基在实施例255所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和2-氟代苯甲基异氰酸酯可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，6％收率)，纯度为93％，对C68H103FN14O2(M)的MS(MALDI)计算值为1472，实测为1471。
实施例259 C15-安福霉素-C(＝O)-NH-M-CF3-苯基在实施例255所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和间-(三氟甲基)苯基异氰酸酯可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(5mg，15％收率)，纯度为95％，对C68H101F3N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1508，实测为1507。
实施例260 C15-安福霉素-C(＝O)-NH-P-CF3-苯基在实施例255所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和对(三氟甲基)苯基异氰酸酯可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，12％收率)，纯度为86％，对C68H101F3N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1508，实测为1507。
实施例261 C15-安福霉素-C(＝O)-NH-3-氟代苯基在实施例255所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和用于实施例255中的3-氟代苯基异氰酸酯可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，12％收率)，纯度为86％，对C67H108FN14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1458，实测为1457。
实施例262 C15-安福霉素-(D-SER)将实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.0020mmol)悬浮于1mLDFM，然后加入约300μL 1M碳酸氢钠(水溶液，0.20mmol)。将所述反应混合物冰浴冷却。继续保持于冰上，向所述反应混合物中缓慢加入预先溶解于0.5mL DMF中的琥珀酰亚胺活化的(D)-3-O-叔丁基-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)丝氨酸(1.5当量，根据实施例1中十五酸琥珀酰亚胺-1-酯化合物的描述进行制备)，然后在室温下继续搅拌约12小时进行反应。向所述反应中加入哌啶(0.5mL，20％v/v)，再继续搅拌所述混合物1小时。然后真空浓缩。将所述粗产物与2mL混合物(46∶46∶2∶2的三氟乙酸∶DCM∶水∶三异丙基硅烷)再混合一小时，然后真空干燥得到所述标题产物，将所述标题产物进行HPLC(梯度，30分钟由含有0.1％三氟乙酸5％乙腈水溶液至95％乙腈)纯化，以及真空干燥(8mg，28％收率)，纯度为81％，对C63H102N14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1408，实测为1407。
实施例263 C15-安福霉素-(D-TYR)在实施例262所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和(D)-O-叔丁基-N-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)酪氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(12mg，39％收率)，纯度为77％，对C69H106FN14O22(M)的MS(MALDI)计算值为1484，实测为1486。
实施例264 C15-安福霉素-(D-TRP)在实施例262所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和(D)-3-[2-羧基-2-(9H-芴-9-基-甲氧羰基氨基)乙基]-吲哚-1-羧酸-叔丁基酯可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(11mg，36％收率)，纯度为80％，对C71H107N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1507，实测为1506。
实施例265 C13-安福霉素-9-GLU将实施例9中的C13-安福霉素(25mg，0.0019mmol)悬浮于1mLDFM，然后加入约300μL 1M碳酸氢钠(水溶液，0.20mmol)。将所述反应混合物冰浴冷却。继续保持于冰上，向所述反应混合物中缓慢加入预先溶解于0.5mL DMF中的琥珀酰亚胺活化的(L)-2-叔丁氧羰基氨基-戊二酸-5-叔丁基酯(1.5当量，根据实施例1中十五酸琥珀酰亚胺-1-酯化合物的描述进行制备)，然后在室温下继续搅拌约12小时进行反应。然后真空浓缩。将所述粗产物与2mL混合物(46∶46∶2∶2的三氟乙酸∶DCM∶水∶三异丙基硅烷)再混合一小时，然后真空干燥得到所述标题产物，将所述标题产物进行HPLC(梯度，30分钟由含有0.1％三氟乙酸5％乙腈水溶液至95％乙腈)纯化，以及真空干燥(8mg，30％收率)，纯度为86％，对C63H100N14O23(M)的MS(MALDI)计算值为1422，实测为1421。
实施例266 C15-安福霉素-9-(4-羟基苯甲基)将实施例2中的C15-安福霉素(38mg，0.029mmol)悬浮于2.5mLDFM，然后加入70μL冰乙酸(pH约为4-5)。然后向所述反应物中加入预先溶解于1mL DMF中的4-羟基苯甲醛(37mg，0.303mmol)，将所述混合物搅拌约24小时。一小时间内向所述溶液中加入两次等量的氰基硼氢化物(总共40mg，0.637mmol)，继续搅拌5小时，真空去除所述溶剂后可得到所述标题化合物。将所述标题产物进行HPLC(梯度，30分钟由含有0.1％三氟乙酸5％乙腈水溶液至95％乙腈)纯化，以及真空干燥(14mg，34％收率)，纯度为99％，对C67H101N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1441，实测为1440。
实施例267 C15-安福霉素-9-N，N-DI-(P-羟基苯甲基)采用实施例20所述的方法可得所述标题化合物，所述标题化合物是所述反应的二级产物(二烷基)。将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，9％收率)，纯度为93％，对C74H109N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1533，实测为1533。
实施例268 C15-安福霉素-9-(N，N-二甲基甘氨酸)在实施例20所述的方法中使用实施例24中的C15-安福霉素-9-Sar(15mg，0.011mmol)和甲醛可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9.5mg，59％收率)，纯度为98％，对C64H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1406，实测为1405。
实施例269 CH3-(CH2)9-SO2-GLY-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与N-叔丁氧羰基-甘氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，使所述纯化的中间产物在惰性气氛中溶解于10mL DMF。加入癸基磺酰氯(13.7mg，0.044mmol)，将所述混合物搅拌过夜可得到标题化合物，将所述标题化合物进行HPLC(梯度，30分钟由含有0.1％三氟乙酸5％乙腈水溶液至95％乙腈)纯化，以及冷冻干燥(5mg)，纯度为89％，对C57H92N14O22S(M)的MS(MALDI)计算值为1357，实测为1357。
实施例270 CH3-(CH2)15-SO2-PHE-安福霉素在第一步中，将安福霉素-9-Fmoc(30mg，0.022mmol)与N-叔丁氧羰基-苯丙氨酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，使用实施例99中所述的方法，将所述纯化的中间产物与十五烷基磺酰氯结合可得到标题化合物，将所述标题化合物进行HPLC和冷冻干燥(7mg，21收率)，纯度为91％，对C70H110N14O22S(M)的MS(MALDI)计算值为1532，实测为1532。
实施例271 安福霉素-9-(N-FMOC-GLY)的制备将安福霉素-9-(N-FMOC-甘氨酰)复合物(1.25g，如以上描述发酵制备)溶解于磷酸铵缓冲液(0.2M，pH7.2)，与1250mL溶液化的脱酰酶合并，在28℃的培养箱中放置9天。将所述产物与438g硫酸铵合并，用1N HCl将pH值调节到3.5，然后过滤去除沉淀物质。将所述沉淀与170mL 1-丁醇和170mL水合并，弃去水相，用水洗涤1-丁醇相。然后将所述1-丁醇相与水混合并调节至pH5.0。重复1-丁醇相的提取，将所述合并的水相真空蒸发去除残留的丁醇。将所述残留的水相冷冻干燥得到500mg白色粉末，即粗产物。将所述粗安福霉素-9-(N-FMOC-甘氨酸)(400mg)溶解于10mL pH6.6的磷酸钠缓冲液，用0.45微米的PVDF膜过滤。将所述滤液注入Delta-Pak C18 radicalpak柱(2.5×21cm，Waters Corp.)。使用乙腈修饰的磷酸钠缓冲的洗脱剂(22-28％乙腈)在室温以5mL/分钟对所述产物洗脱120分钟。将含有所述产物的组分(通过分析HPLC测定)合并，然后真空蒸发所述乙腈。通过在1.0g EnviChrom-P树脂(Supelco)上进行吸收对所述蒸发的样品脱盐；用8mL蒸馏水洗涤所述树脂，然后用20mL 60％乙腈将所述产物从所述树脂上洗脱下来。真空蒸发乙腈，将所述残留产物溶液冷冻干燥可得到107mg所述标题化合物(HPLC纯度95％(215nm时的UV面积％))。
实施例272 安福霉素-9-(N-FMOC-SAR)的制备如实施例271所述，孵育3天后可将安福霉素-9-(N-FMOC-肌氨酰)复合物(2g)转化得到所述标题化合物(911mg)。
实施例273 安福霉素-9-(N-FMOC-β-ALA)的制备如实施例271所述，孵育3天后可将安福霉素-9-(N-FMOC-β-丙氨酸)复合物(2g)转化得到所述标题化合物(1267mg)。
实施例274P-(N-十二烷酰氨基)-苯甲酸的制备将4-氨基苯甲酸(0.94g，6.85mmol)溶解于5mL吡啶，加入十二烷酰氯(1.58mL，6.85mmol)。室温搅拌所述混合物4小时。用水稀释(50mL)后将所述产物沉淀，过滤，干燥后可得到1.96g所述标题化合物。
实施例275 N-十二烷基氨基甘氨酸的制备将甘氨酸(0.40g，5.25mmol)和0.91mL二异丙基乙胺(5.25mmol)溶解于4mL DMF和6mL水。加入溶解于7mL四氢呋喃的十二烷基异氰酸酯(0.72mL，3.0mmol)，将所述混合物在室温搅拌1小时。加入水(40mL)，用乙酸乙酯将所述产物洗涤两次。用6N HCl酸化所述水相，过滤所得沉淀，干燥后可得到575mg所述标题化合物。
实施例274P-十二烷氧基苯甲酰甘氨酸的制备向溶解于4mL四氢呋喃的4-十二烷氧基苯甲酸(0.47g，1.53mmol)和0.27mL二异丙基乙胺(1.55mmol)溶液中加入氟代-N，N，N，N，-四甲基foramidinium-六氟磷酸盐(0.41g，1.54mmol)，将所述反应物在室温搅拌15分钟。向所述混合物中加入溶解有甘氨酸乙基酯盐酸盐(0.45g，3.2mmol)和DIEA(0.53mL，3.04mmol)的5mL四氢呋喃和5mL二氯甲烷。将所述混合物在室温搅拌数小时，然后用50mL 1N的盐酸稀释，用乙酸乙酯进行萃取。用水，饱和碳酸氢钠和盐水洗涤所述有机相，然后用硫酸镁干燥。真空蒸发后用己烷研磨可得所述产物(0.44g)。将所述产物溶解于10mL甲醇和5mL四氢呋喃，用3mL 1N的氢氧化钠处理，然后在室温搅拌1小时。数分钟后，有较浓厚的沉淀形成。然后用水(20mL)稀释所述混合物，在加热至40℃使其均一。用5mL 1N HCl酸化所述混合物，将所述沉淀过滤并干燥，可得到0.34g所述标题化合物。
实施例277 CH3-(CH2)13-NH-C(O＝)-安福霉素-9-GLY-LYS在实施例3所述的方法中使用实施例253中的CH3-(CH2)13-NH-C(O＝)-安福霉素(50mg)和琥珀酰亚胺活化的N-(2-N-丁氧羰基-6-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)赖氨酰甘氨酸(58mg，根据实施例1所述制备)可得到标题化合物(16mg，28％收率)，纯度为80％，对C68H113N17O22(M)的MS(MALDI)计算值为1521，实测为1520。
实施例278 CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例253中的CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-安福霉素(30mg)和N-(叔丁氧羰基)-β-丙氨酸可得到标题化合物(8mg，25％收率)，纯度为70％，对C63H103N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1407，实测为1406。
实施例279 CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-安福霉素-9-GLY在实施例3所述的方法中使用实施例253中的CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-安福霉素(40mg)和N-(叔丁氧羰基)甘氨酸可得到标题化合物(8mg，31％收率)，纯度为74％，对C62H101N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1393，实测为1392。
实施例280 C12-PABA-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例3所述的方法中使用实施例85中的C12-对氨基苯甲酰-安福霉素(80mg)和用于实施例3中的N-(叔丁氧羰基)-β-甘氨酸可得到标题化合物(4mg，4％收率)，纯度为73％，对C67H101N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1469，实测为1468。
实施例281 C16-(p-APA)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(40mg)与4-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例3所述的方法中使用所述纯化的中间产物与十六烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物进行HPLC纯化和冷冻干燥(7.4mg，17％收率)，纯度为83％，对C69H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1468，实测为1467。
实施例282 C8-PABA-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(45mg)与对-N-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与辛酰氯混合可得到所述标题化合物(13.3mg，28％收率)，纯度为70％，对C60H88N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1341，实测为1340。
实施例283 C10-PABA-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(45mg)与对-N-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与癸酰氯混合可得到所述标题化合物(7.8mg，16％收率)，纯度为91.4％，对C62H92N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1369，实测为1368。
实施例284 C11-PABA-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(25mg)与对-N-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与十一烷酰氯混合可得到所述标题化合物(1.7mg，6％收率)，纯度为93％，对C63H94N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1384，实测为1382。
实施例285 C13-PABA-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(45mg)与对-N-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第-步的中间产物与十三烷酰氯混合可得到所述标题化合物(2mg，4％收率)，纯度为75％，对C65H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1412，实测为1411。
实施例286 CH3-(CH2)10-NH-C(＝O)-(β-ALA)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十一烷基酯混合可得到所述标题化合物(7mg，23％收率)，纯度为91％，对C60H97N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1365，实测为1364。
实施例287 CH3-(CH2)15-NH-C(＝O)-(对苯乙酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(47mg)与对-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十六烷基酯混合可得到所述标题化合物(6.3mg，12％收率)，纯度为90％，对C70H109N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1497，实测为1495。
实施例288 CH3-(CH2)7-NH-C(＝O)-(对苯乙酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(47mg)与对-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸辛酯混合可得到所述标题化合物(6.3mg，24％收率)，纯度为84％，对C62H93N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1384，实测为1383。
实施例289 CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-(对苯乙酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(47mg)与对-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十四烷基酯混合可得到所述标题化合物(4.3mg，8％收率)，纯度为81％，对C68H105N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1469，实测为1467。
实施例290 CH3-(CH2)10-NH-C(＝O)-(对苯乙酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(47mg)与对-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十一烷基酯混合可得到所述标题化合物(5.4mg，11％收率)，纯度为79％，对C65H99N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1427，实测为1425。
实施例291 CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-(GABA)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(40mg)与对-N-叔丁氧羰基-γ-氨基丁酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十四烷基酯混合可得到所述标题化合物(3mg，7.4％收率)，纯度为95％，对C64H105N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1421，实测为1422。
实施例292 CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-(M-苯乙酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(75mg)与间-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十四烷基酯混合可得到所述标题化合物(3.8mg，5％收率)，纯度为90％，对C68H105N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1469，实测为1469。
实施例293 C10-(M-氨基苯甲酰基)-安福霉素在在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(47mg)与间-N-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与癸酰氯混合可得到所述标题化合物(8.6mg，19.2％收率)，纯度为86.8％，对C62H92N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1369，实测为1370。
实施例294 C11-(M-氨基苯甲酰基)-安福霉素在在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(47mg)与间-N-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与十一烷酰氯混合可得到所述标题化合物(12.1mg，26.7％收率)，纯度为85.2％，对C63H94N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1384，实测为1384。
实施例295 CH3-(CH2)13-NH-C(O＝)-(β-ALA)安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(40mg)与N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十四烷基酯混合可得到所述标题化合物(8mg，19.7％收率)，纯度为73.9％，对C63H103N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1407，实测为1408。
实施例296 C12-(M-氨基苯甲酰基)-安福霉素在在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(47mg)与间-N-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与十二烷酰氯混合可得到所述标题化合物(3.5mg，7.6％收率)，纯度为97％，对C64H96N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1398，实测为1399。
实施例297 C13-(M-氨基苯甲酰基)-安福霉素在在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(47mg)与间-N-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与十三烷酰氯混合可得到所述标题化合物(3.8mg，8.2％收率)，纯度为96％，对C65H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1412，实测为1413。
实施例298 硼酸盐-频哪醇-酯-树脂将Wang Resin树脂(1.38g，0.94meq/g，1.30mmol反应位点)在DCM(DCM)中浸泡1小时。排干所述溶剂，将所述珠子悬浮于新鲜的DCM(5mL)。向所述浆液中加入4-羧基苯基硼酸频哪醇酯(1g)，N，N-二甲基氨基吡啶(20mg)和HOBt(90mg)。将所述溶液搅拌20分钟，加入纯的DIPC(700μL，4.0mmol)。将所述溶液室温搅拌24小时。排干所述反应混合物，用DMF，DMSO/H2O，MeOH和DCM洗涤所述珠子。认为树脂的装载是定量的。
实施例299 4’-辛基-联苯基-4-羧基-安福霉素A部分将来自样品PRE-1476的树脂结合的硼酸频哪醇酯样品(112mg，0.94mmol/g，0.105mmol)在DME中浸泡30分钟。将所述溶剂排干，更换为新鲜的300μL DME。向所述浆液中加入4-N-辛基溴苯(100μL，大为过量)，PdCl2(dppf)-DCM(9mg，0.0105mmol)和CsCO3(200μL，2M(aq)，0.42mmol)。将所述反应容器密封，加热至在80℃保持3小时。排干所述溶剂，用H2O，MeOH，DMF，DMSO和DCM洗涤所述珠子。然后将所述珠子悬浮于250μL DCM/750μLTFA中1小时。将这一步骤的所述溶液收集，浓缩，得到油。将脂化的联苯基羧酸用MeOH结晶出来，过滤，用冷的MeOH洗涤，真空干燥。
B部分将脂化的联苯基羧酸(6.5mg，0.0209mmol)，HOBt(3.52mg，0.23mmol)和DIPC(3.6μL，0.23mmol)合并于200μLDMF中，室温搅拌1.5小时。向所述溶液中加入安福霉素-9-Fmoc(22mg，0.0167)和溶解于200μL DMSO中的DIEA(50μL；大量过量)，然后将所述反应混合物在室温搅拌40分钟。此时，将所述溶液倒入Et2O中，离心收集所得沉淀。将所述固体重新溶解于1mL20％哌啶的DMF溶液中，室温静置1小时后加入Et2O，离心收集所得固体。用Et2O洗涤所述固体，并真空干燥。用RP-HPLC纯化所述粗固体，冷冻干燥所述产物可得到所述标题化合物(0.56mg，2.4％收率)，纯度为67.3％，对C66H93N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1389，实测为1389。
实施例300 C13-(P-APA)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与4-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用所述纯化的中间产物与十三烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物进行HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，6.8％收率)，纯度为95％，对C66H100N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1426，实测为1427。
实施例301 C14-(P-APA)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与4-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用所述纯化的中间产物与十四烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物进行HPLC纯化和冷冻干燥(1mg，3.4％收率)，纯度为93％，对C67H102N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1440，实测为1441。
实施例302 CH3-(CH2)15-NH-C(＝O)-(M-苯乙酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与间-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十六烷基酯混合可得到所述标题化合物(2.4mg，7.8％收率)，纯度为72％，对C70H109N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1497，实测为1497。
实施例303 C14-(M-APA)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与间-丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用所述纯化的中间产物与十四烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物进行HPLC纯化和冷冻干燥(6.5mg，21.8％收率)，纯度为74％，对C67H102N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1440，实测为1441。
实施例304 CH3-(CH2)10-NH-C(＝O)-GABA-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(40mg)与N-叔丁氧羰基-γ-氨基丁酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十一烷基酯混合可得到所述标题化合物(2mg，5.1％收率)，纯度为83.6％，对C61H99N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1379，实测为1380。
实施例305 N，N’-二-C8-(M，M-二氨基苯甲酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与间，间-N，N’-二-叔丁氧羰基-氨基苯甲酸结合。在第二步中，如实施例85的方法所述，将来自第一步的中间产物与辛酰氯混合可得到所述标题化合物(3.7mg，11％收率)，纯度为99.5％，对C68H103N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1483，实测为1484。
实施例306 CH3-(CH2)7-NH-C(＝O)-(M-苯乙酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与间-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸辛酯混合可得到所述标题化合物(4.7mg，16.4％收率)，纯度为89％，对C62H93N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1384，实测为1385。
实施例307 CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-GLY-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(35mg)与N-叔丁氧羰基-甘氨酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸十四烷基酯混合可得到所述标题化合物(13mg，36.6％收率)，纯度为70.9％，对C62H101N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1393，实测为1394。
实施例308 1-十二烷基-1H-(1，2，3)-三唑-4-羧酸将丙炔酸(46μL，0.7419mmol)和1-叠氮基-十二烷(156.8mg，0.7419mmol)的混合物在盖紧的小管中加热到120℃，保持14小时，可得到白色，晶体状固体的所述标题三唑(189.3mg，91％收率)。所述产物无需进一步纯化即可使用。
实施例309 1-十二烷基-1H-(1，2，3)-三唑-4-羧基-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(47mg)与实施例308的1-十二烷基-1H-(1，2，3)-三唑-4-羧酸结合可得到所述标题化合物(1.3mg，2.9％收率)，纯度为83％，对C60H94N16O20(M)的MS(MALDI)计算值为1359，实测为1361。
实施例310 C15-(M-APA)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与间-丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用所述纯化的中间产物与十四烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物进行HPLC纯化和冷冻干燥(1.1mg，3％收率)，纯度为79％，对C68H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1454，实测为1455。
实施例311 C13-(ASP-(OME))-安福霉素使用实施例112中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与N-十三烷酰-O-甲基-天冬氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯(39mg)结合可得到标题化合物(3.7mg，12％收率)，纯度为93％，对C63H100N14O23(M)的MS(MALDI)计算值为1422，实测为1421。
实施例312 C15-(P-APA)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与4-N-叔丁氧羰基-氨基苯乙酸结合。将所得中间产物HPLC纯化并冷冻干燥。在第二步中，在实施例2所述的方法中使用所述纯化的中间产物与十五烷酸可得到标题化合物，将所述标题化合物进行HPLC纯化和冷冻干燥(1.7mg)，纯度为73.9％，对C68H104N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1454，实测为1457。
实施例313 C15-(ASP-(OME))-安福霉素使用实施例112中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(66mg)与N-十五烷酰-O-甲基-天冬氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯结合可得到标题化合物(14.3mg)，纯度为91％，对C65H104N14O23的MS(MALDI)计算值为(M)1450，实测为1450。
实施例314 C11-(ASP-(OTBU))-安福霉素使用实施例112中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(60mg)与N-十一烷酰-O-t-丁基-天冬氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯结合可得到标题化合物(16.6mg)，纯度为85％，对C64H102N14O23(M)的MS(MALDI)计算值为1436，实测为1437。
实施例315 C13-(ASP-(OTBU))-安福霉素使用实施例112中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(58mg)与N-十三烷酰-O-叔丁基-天冬氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯结合可得到标题化合物(20.5mg)，纯度为93％，对C66H106N14O23(M)的MS(MALDI)计算值为1464，实测为1465。
实施例316 C11-(ASP-(OME))-安福霉素使用实施例112中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(66mg)与N-十一烷酰-O-甲基-天冬氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯结合可得到标题化合物(10.1mg)，纯度为92％，对C61H96N14O23的MS(MALDI)计算值为(M)1393，实测为1394。
实施例317 C15-(ASP-(OME))-安福霉素使用实施例112中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与N-十五烷酰-O-甲基-天冬氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯结合可得到标题化合物(15.3mg，45％收率)，纯度为93％，对C65H104N14O23(M)的MS(ES+)计算值为1450，实测为1451。
实施例318 C15-安福霉素-9-C(＝O)-NH-(o-CF3-苯基)在实施例255所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(30mg，0.023mmol)和邻-(三氟甲基)苯基异氰酸酯结合可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，21.9％收率)，纯度为96％，对C68H101F3N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1508，实测为1510。
实施例319 N，N’-二-C6-(M，M-二氨基苯甲酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例274中所述的方法，使用间，间-二氨基苯甲酸与己酰氯制备了N，N’-二-C6-(间，间-二氨基苯甲酸)。在第二步中，如实施例299(B部分)的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与与N，N’-二-C6-(间，间-二氨基苯甲酸)结合可得到所述标题化合物(8.6mg，20％收率)，纯度为95％，对C64H95N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1427，实测为1428。
实施例320 N，N’-二-C12-(M，M-二氨基苯甲酰基)-安福霉素在第一步中，使用实施例274中所述的方法，使用间，间-二氨基苯甲酸与十二烷酰氯制备了N，N’-二-C12-(间，间-二氨基苯甲酸)。在第二步中，如实施例299(B部分)的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与N，N’-二-C12-(间，间-二氨基苯甲酸)结合可得到所述标题化合物(1.7mg，4％收率)，纯度为94％，对C76H119N15O22(M)的MS(MALDI)计算值为1595，实测为1596。
实施例321 CH3-(CH2)7-NH-C(＝O)-(β-ALA)-安福霉素在第一步中，使用实施例3中所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与N-叔丁氧羰基-β-丙氨酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，将来自第一步的中间产物与异氰酸辛酯混合可得到所述标题化合物(5mg，18％收率)，纯度为89.5％，对C57H91N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1322，实测为1323。
实施例322 (4-苯基苯甲酰基)-安福霉素使用实施例299(B部分)的方法，将安福霉素-9-Fmoc(70mg)与4-苯基苯甲酸结合可得到所述标题化合物(8.8mg，13％收率)，纯度为97.6％，对C58H77N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1276，实测为1277。
实施例323 (2-(苯甲基)-苯甲酰基)-安福霉素使用实施例299(B部分)的方法，将安福霉素-9-Fmoc(70mg)与2-(苯甲基)苯甲酸结合可得到所述标题化合物(15.3mg，22％收率)，纯度为95.7％，对C59H79N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1290，实测为1291。
实施例324 N，N’-二乙基-PABA-安福霉素使用实施例299(B部分)的方法，将安福霉素-9-Fmoc(70mg)与对-N，N’-二乙基氨基苯甲酸(N，N’-二乙基-PABA)结合可得到所述标题化合物(15.1mg，22％收率)，纯度为98.4％，对C56H82N14O20(M)的MS(MALDI)计算值为1271，实测为1272。
实施例325 (3，4，5-三甲氧基苯甲酰)-安福霉素使用实施例299(B部分)的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(70mg)与3，4，5-三甲氧基苯甲酸结合可得到所述标题化合物(7.9mg，11.4％收率)，纯度为89.2％，对C57H83N13O23(M)的MS(MALDI)计算值为1318，实测为1319。
实施例326 (4-叔丁基苯甲酰)-安福霉素使用实施例299(B部分)的方法，将安福霉素-9-Fmoc(70mg)与4-叔丁基苯甲酸结合可得到所述标题化合物(9.2mg，13.4％收率)，纯度为91.5％，对C56H81N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1256，实测为1257。
实施例327 (3-(苯氧基)-苯甲酰)-安福霉素使用实施例299(B部分)的方法，将安福霉素-9-Fmoc(70mg)与3-(苯氧基)苯甲酸结合可得到所述标题化合物(5.9mg，8.7％收率)，纯度为92％，对C58H77N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1292，实测为1293。
实施例328 C15-安福霉素-9-(D-DAP)在实施例4所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(27mg，0.020mmol)和(R)-2-叔丁氧羰基氨基-3-(9H-芴-9-基-甲氧羰基)氨基丙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7mg，12％收率)，纯度为88.5％，对C63H103N15O21的MS(MALDI)计算值为(M)1407，实测为1407。
实施例329 CH3-(CH2)13-NH-C(＝O)-安福霉素的β-异构体使用实施例253的方法可得到所述标题化合物，所述产物是所述反应的次级产物(即相当于安福霉素核心多肽β-异构体)。使用MS和分析HPLC对所述标题化合物进行鉴定，将其HPLC纯化和冷冻干燥(4mg，1.6％收率)，纯度为97.5％，对C60H98N14O20(M)的MS(MALDI)计算值为1336，实测为1336。
实施例330 CH3-(CH2)10-NH-C(＝O)-(GABA)安福霉素的β-异构体使用实施例304的方法可得到所述标题化合物，所述产物是所述反应的次级产物(即相当于安福霉素核心多肽β-异构体)。使用MS和分析HPLC对所述标题化合物进行鉴定，将其HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，5％收率)，纯度为99.9％，对C61H99N15O21的MS(MALDI)计算值为(M)1379，实测为1379。
实施例331 LYS-GLY-安福霉素-9-C15
在第一步中，如实施例299(B部分)的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(70mg)与Boc-Lys(Boc)-Gly(ChemImpex)结合可得到Boc-Lys(Boc)-Gly-安福霉素。在第二步中，如实施例299(B部分)的方法所述，将十五酸与Boc-Lys(Boc)-Gly-安福霉素结合可得到Boc-Lys(Boc)-Gly-安福霉素-9-C15。经过如实施例299(B部分)所述的方法操作后，将该产物在标准条件下(4N HCl/二噁烷)脱保护可得到所述标题化合物(14mg，17.5％收率)，纯度为90％，对C68H112N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1506，实测为1507。
实施例332 LYS-GLY-安福霉素-9-C13在第一步中，将安福霉素-9-Fmoc(70mg)与Boc-Lys(Boc)-Gly结合，然后在第二步中再与十三酸结合，最后采用实施例331所述的方法脱保护后可得到所述标题化合物(11mg，17.8％收率)，纯度为89％，对C66H108N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1478，实测为1479。
实施例333 (11-(苯氧基)十一烷酰基)-安福霉素如实施例299(B部分)的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(100mg)与11-(苯氧基)十一酸结合可得到所述标题化合物(37.7mg，36.8％收率)，纯度为94％，对C62H93N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1356，实测为1357。
实施例334 N-C12-((1S，4S)-4-氨基环己基羧酸)在第一步中，将4-氨基环己基羧酸(1.12mL)溶解于DMF(5mL)，加入DIEA(0.824mL)，然后将所述混合物冷却至0℃。加入十二烷酰氯(3.64mL)，将所述混合物搅拌1.5小时。将所述混合物萃取入EtOAc，用HCl(1M(水溶液))洗涤3次，然后用NaCl(饱和的)洗涤4次，用MgSO4干燥。将所得固体与热己烷共同研磨，过滤，并用己烷洗涤，所得到的小型白色针状晶体可进行进一步使用，而不需其它的纯化或鉴定。
实施例335 C12-((1S，4S)-4-氨基环己基羰基)-安福霉素在第一步中，如实施例334所述的方法，使用十二烷酰氯和(1S，4S)-4-氨基环己基羧酸可得到N-C12-(1S，4S)-4-氨基环己基羧酸。在第二步中，如实施例299(B部分)所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc(100mg)与N-C12-(1S，4S)-4-氨基环己基羧酸结合可得到所述标题化合物(16mg，21.5％收率)，纯度为76.7％，对C64H102N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1404，实测为1405。
实施例336 (2-十二烷酰氨基-4噻唑)-乙酸在第一步中，如实施例334所述的方法，使十二烷酰氯和(2-氨基-噻唑-4-基)乙酸酯结合可得到(2-十二烷酰氨基-噻唑-4-基)乙酸乙酯粗产物。在第二步中，将所述(2-十二烷酰氨基-噻唑-4-基)乙酸乙酯的粗产物在THF/H2O中使用LiOH(2倍过量)脱保护可得到所述标题化合物粗产物，所述粗产物可直接使用而无需进一步纯化或鉴定。
实施例337 (2-十二烷酰氨基-噻唑-4-基)-乙酰-安福霉素在第一步中，如实施例299(B部分)的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(100mg)与(2-十二烷酰氨基-噻唑-4-基)乙酸(如实施例336制备的粗产物)结合可得到所述标题化合物(8.1mg，9.2％收率)，纯度为89％，对C64H99N15O21S(M)的MS(MALDI)计算值为1447，实测为1448。
实施例338 8-十二烷氧基-喹啉-2羧酸在第一步中，向在DMF(干燥的，10mL)中搅拌的8-羟基喹啉-2-羧酸甲酯(2.11mmol)溶液中加入十二烷基溴(767μL，3.2mmol)，NaI(478mg，3.2mmol)和NaH(76mg，3.2mmol)，然后将所述红色反应物搅拌过夜。将旋转蒸发去除溶液后所得的粗材料提取入DCM，用水洗涤，用Na2SO4干燥，然后过滤。将所得溶液蒸发至干燥，通过HPLC可得到所需要的中间产物8-十二烷氧基-喹啉-2-羧酸甲酯，经HPLC(无梯度，75％乙腈，25％水)可得169mg(约14％收率)。然后，使用实施例336中所述的方法，将该中间产物在THF/H2O中使用LiOH脱保护可得到所述标题化合物，所述标题化合物可进一步使用而无需其它的纯化或表征。
实施例339 (8-十二烷氧基-喹啉-2-羰基)-安福霉素如实施例2的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与8-十二烷氧基-喹啉-2-羧酸(如实施例338制备)结合可得到所述标题化合物(24.5mg，37％收率)，纯度为95％，对C67H98N14O21的MS(ES+)计算值为(M)1436，实测为1437。
实施例340 (8-十二烷氧基-喹啉-2-羰基)-安福霉素的β-异构体使用实施例339所述的方法可得到所述标题化合物，所述化合物是所述反应的次级产物(即相当于安福霉素核心多肽的β-异构体)。使用MS和分析HPLC对所述标题化合物进行鉴定，将其HPLC纯化和冷冻干燥(7.1mg，11％收率)，纯度为95％，对C67H98N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1436，实测为1437。
实施例341 C15-安福霉素-9-PHE在实施例3所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(57mg，0.043mmol)和琥珀酰亚胺活化的N-叔丁氧羰基苯丙氨酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(57mg，5.5％收率)，纯度为85.5％，对C69H106N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1468，实测为1470。
实施例342 C15-安福霉素-9-C15在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(57mg，0.0438mmol)和十五酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(2mg，3.6％收率)，纯度为87.7％，对C75H125N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1545，实测为1547。
实施例343 C15-安福霉素-9-([2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]乙酰基)在实施例201所述的方法中使用实施例2中的C15-安福霉素(40mg，0.031mmol)和[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙氧基]乙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(3mg，7.9％收率)，纯度为87％，对C67H109N13O24(M)的MS(MALDI)计算值为1481，实测为1484。
实施例344 C10-SAR-安福霉素在第一步中，根据实施例274的方法用癸酰氯和肌氨酸进行制备，再如实施例1所述将其转化为琥珀酰亚胺基酯的方法得到N-癸酰肌氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯。在第二步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(25mg)与N-癸酰肌氨酸琥珀酰亚胺-1-酯结合可得到所述标题化合物(11mg，42.3％收率)，纯度为99.1％，对C58H92N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1321，实测为1323。
实施例345 C14-SAR-安福霉素在第一步中，根据实施例274的方法用十四烷酰氯和肌氨酸进行制备，再如实施例1所述将其转化为琥珀酰亚胺基酯的方法得到N-癸酰肌氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯。在第二步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(40mg)与N-十四烷酰肌氨酸琥珀酰亚胺-1-沸腾酯结合可得到所述标题化合物(1mg，2.4％收率)，纯度为80.9％，对C62H100N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1378，实测为1380。
实施例346 C8-SAR-安福霉素在第一步中，根据实施例274的方法用辛酰氯和肌氨酸进行制备，再如实施例1所述将其转化为琥珀酰亚胺基酯的方法得到N-癸酰肌氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯。在第二步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(40mg)与N-辛酰肌氨酸琥珀酰亚胺-1-基酯结合可得到所述标题化合物(1.9mg，3.1％收率)，纯度为98.2％，对C56H88N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1293，实测为1295。
实施例347 C15-安福霉素-9-C12根据实施例201的方法使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和十二酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7.3mg，27％收率)，纯度为87.8％，对C72H119N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1503，实测为1505。
实施例348 C15-安福霉素-9-(11-苯氧基十一酰基)根据实施例201的方法使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和11-苯氧基十一酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7.9mg，27％收率)，纯度为75.2％，对C77H121N13O22(M)的MS(MALDI)计算值为1581，实测为1583。
实施例349 C15-安福霉素-9-(3-呋喃-2-丙烯酰)根据实施例201的方法使用实施例2中的C15-安福霉素(25mg，0.019mmol)和3-呋喃-2-基丙烯酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(13mg，48.1％收率)，纯度为94％，对C67H101N13O22的MS(MALDI)计算值为(M)1441，实测为1442。
实施例350 C15-安福霉素-9-(3-(苯磺酰基)丙酰基)根据实施例201的方法使用实施例2中的C15-安福霉素(26mg，0.020mmol)和3-(苯磺酰基)丙酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(7.3mg，27％收率)，纯度为92.6％，对C69H105N13O23S(M)的MS(MALDI)计算值为1517，实测为1519。
实施例351 C15-安福霉素-9-(4-(芘-2-基)-丁酰基)根据实施例201的方法使用实施例2中的C15-安福霉素(26mg，0.020mmol)和4-(芘-2-基)-丁酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(9.3mg，12.2％收率)，纯度为90.4％，对C80H111N13O21(M)的MS(MALDI)计算值为1591，实测为1591。
实施例352 C15-安福霉素-9-SUC将实施例2中的C15-安福霉素(38mg)和琥珀脱水(30mg)溶解于DMF，然后加入DIPEA(1当量)，将所述混合物搅拌过夜。经过HPLC纯化和冷冻干燥的可得到所述标题化合物(6mg，14.6％收率)，纯度为99.1％，对C64H101N13O23(M)的MS(MALDI)计算值为1421，实测为1423。
实施例353 C15-安福霉素-9-PRO-LYS如实施例3的方法所述，将实施例2中的安福霉素-9-Fmoc(24mg，0.018mmol)与琥珀酰亚胺活化的(α-N-Fmoc，ε-N’-叔丁氧羰基赖氨酰)脯氨酸结合。然后如实施例2所述的方法(仅使用了所述脱保护和分离/纯化步骤)，将所得中间产物HPLC纯化和冷冻干燥，使用哌啶脱保护可得到所述标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6.1mg，22.6％收率)，纯度为88.9％，对C71H116N16O22(M)的MS(MALDI)计算值为1546，实测为1548。
实施例354 BoC-安福霉素在0℃搅拌时(冰浴)，将安福霉素-9-Fmoc(151.2mg，0.11mmol)溶解于水(5mL)，用NaOH(1M)将所述pH调至约12。在0℃搅拌时，将二-叔丁基二碳酸酯溶解于乙腈，将所得混合物搅拌直至反应完全(过夜)。然后加入溶解于DMF的哌啶(20％v/v)去除位于Dab9位上的Fmoc基团，如实施例2所述的方法制得所述标题化合物(仅使用了所述脱保护和分离/纯化步骤)。所的化合物可直接使用。
实施例355 安福霉素-9-(β-ALA)如实施例3的方法所述，将Boc-安福霉素(20mg，如实施例354所制备)与Boc-β-Ala-OSu(Bachem AG，瑞士)结合可得到所述标题化合物(9.2mg，16.4％收率)，纯度为91.4％，对C48H74N14O20(M)的MS(MALDI)计算值为1167，实测为1169。
实施例356 安福霉素-9-SAR如实施例3的方法所述，将Boc-安福霉素(20mg，如实施例354所制备)与Boc-肌氨酸-OSu(Bachem AG，瑞士)结合可得到所述标题化合物(11.3mg，57.9％收率)，纯度为81.5％，对C48H74N14O20(M)的MS(MALDI)计算值为1167，实测为1169。
实施例357 GLY-安福霉素-9-FMOC如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-FMOC(176.5mg，0.134mmol)与琥珀酰亚胺活化的N-叔丁氧羰基甘氨酸结合可得到标题化合物(160.2mg)，所述标题化合物可直接进一步使用而无需其它的纯化或表征。
实施例358 C6-GLY-安福霉素-9-FMOC在实施例2所述的方法中将实施例357中制备的GLY-安福霉素-9-FMOC(25mg，0.018mmol)与琥珀酰亚胺活化的正己酸结合可得到标题化合物(7.9mg，31.7％收率)，纯度为83.9％，对C53H82N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1251，实测为1253。
实施例359 C8-GLY-安福霉素-9-FMOC在实施例2所述的方法中将实施例357中制备的GLY-安福霉素-9-FMOC(25mg，0.018mmol)与琥珀酰亚胺活化的正辛酸结合可得到标题化合物(3.7mg，16.1％收率)，纯度为82％，对C55H86N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1279，实测为1281。
实施例360 C10-GLY-安福霉素-9-FMOC在实施例2所述的方法中将实施例357中制备的GLY-安福霉素-9-FMOC(25mg，0.018mmol)与琥珀酰亚胺活化的正癸酸结合可得到标题化合物(8.7mg，37.8％收率)，纯度为91.7％，对C57H90N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1307，实测为1309。
实施例361 C8-(M-APA)-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与间-叔丁氧羰基氨基苯乙酸结合。将所述中间产物HPLC纯化和冷冻干燥。在第二步中，如实施例2的方法所述，使用所述纯化的中间产物和辛酸可得到标题化合物，将所述标题化合物HPLC纯化和冷冻干燥(6.9mg，18％收率)，纯度为72％，对C61H90N14O21(M)的MS(MALDI)计算值为1355，实测为1357。
实施例362 CH3-(CH2)10-NH-C(＝O)-(M-苯乙酰基)-安福霉素在第一步中，如实施例3的方法所述，将安福霉素-9-Fmoc(30mg)与间-N-叔丁氧羰基氨基苯乙酸结合。在第二步中，如实施例3的方法所述，使用得自第一步中的所述中间产物和异氰酸十一烷基酯可得所述标题化合物(2.3mg，1.5％收率)，纯度为82％，对C65H99N15O21(M)的MS(MALDI)计算值为1427，实测为1429。
实施例363 1-金刚烷-C(＝O)-安福霉素如实施例2的方法所述，将安福霉素-9-FMOC与琥珀酰亚胺活化的金刚烷-1-羧酸结合可得到标题化合物(4.1mg)，纯度为90％，对C56H83N13O20(M)的MS(FAB)计算值为1258，实测为1259。
实施例364 (10-甲基-十一碳-2-烯酰基)-安福霉素从Streptomyces canus发酵可得安福霉素复合物，随后可将所述复合物用于液相色谱(LC)和MS以鉴定所述标题化合物。一旦在所述安福霉素复合物中鉴定出标题化合物，可用HPLC纯化，并直接用其制备衍生的脂肽抗生素(2.0mg)，纯度为98％，对C57H89N13O20(M)的MS(FAB)计算值为1276，实测为1277。
实施例365 (10-甲基-十二碳-2-烯酰基)-安福霉素如实施例364所述，可制备并分析安福霉素复合物。所述标题化合物可用HPLC纯化，并直接用来制备衍生的脂肽抗生素(11.0mg)，纯度为97％，对C58H91N13O20(M)的MS(FAB)计算值为1290，实测为1291。
实施例366 (12-甲基-十四碳-2-烯酰基)-冬门托星(Aspartocin)如实施例364所述，可从Streptomyces griseus发酵制备安福霉素复合物并对其进行分析。所述标题化合物可用HPLC纯化，并直接用来制备衍生的脂肽抗生素(10.0mg)，纯度为96％，对C60H95N13O20(M)的MS(MALDI)计算值为1319，实测为1319。
实施例367 (10-甲基-十二碳-2-烯酰基)-安福霉素-9-GLY在实施例2所述的方法中将实施例365中制备的(10-甲基-十二碳-2-烯酰基)-安福霉素与琥珀酰亚胺活化的Fmoc-甘氨酸结合可得到标题化合物(10.5mg)，纯度为84％，对C60H94N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1347，实测为1348。
实施例368 (10-甲基-十二碳-2-烯酰基)-安福霉素-9-SAR在实施例2所述的方法中将实施例365中制备的(10-甲基-十二碳-2-烯酰基)-安福霉素与琥珀酰亚胺活化的Fmoc-肌氨酸结合可得到标题化合物(10.6mg)，纯度为89％，对C61H96N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1362，实测为1362。
实施例369 (10-甲基-十二碳-2-烯酰基)-安福霉素-9-(β-ALA)在实施例2所述的方法中将实施例365中制备的(10-甲基-十二碳-2-烯酰基)-安福霉素与琥珀酰亚胺活化的Fmoc-β-丙氨酸结合可得到标题化合物(10.9mg)，纯度为86％，对C61H96N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1362，实测为1362。
实施例370 (12-甲基-十四碳-2-烯酰基)-冬门托星-9-GLY在实施例2所述的方法中将实施例366中制备的(12-甲基-十四碳-2-烯酰基)-冬门托星与琥珀酰亚胺活化的Fmoc-甘氨酸结合可得到标题化合物(10.5mg)，纯度为80％，对C62H98N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1376，实测为1376。
实施例371 (12-甲基-十四碳-2-烯酰基)-冬门托星-9-SAR在实施例2所述的方法中将实施例365中制备的(12-甲基-十四碳-2-烯酰基)-冬门托星与琥珀酰亚胺活化的Fmoc-肌氨酸结合可得到标题化合物(11.6mg)，纯度为91％，对C63H100N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1390，实测为1390。
实施例372 (12-甲基-十四碳-2-烯酰基)-冬门托星-9-(β-ALA)在实施例2所述的方法中将实施例365中制备的(12-甲基-十四碳-2-烯酰基)-冬门托星与琥珀酰亚胺活化的Fmoc-β-丙氨酸结合可得到标题化合物(11.8mg)，纯度为91％，对C63H100N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1390，实测为1390。
实施例373 (12-乙酰氨基十二碳烯酰基)-安福霉素根据实施例2所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc与琥珀酰亚胺活化的12-乙酰氨基十二酸结合可得到标题化合物(11mg)，纯度为78％，对C59H94N14O21(M)的MS(FAB)计算值为1335，实测为1336。
实施例374 (12-氨基十二碳烯酰基)-安福霉素根据实施例2所述的方法，将安福霉素-9-Fmoc与琥珀酰亚胺活化的N-Fmoc-12-氨基十二酸结合可得到标题化合物(5mg)，纯度为84％，对C57H92N14O20(M)的MS(FAB)计算值为1293，实测为1293。
实施例375 抗菌素活性分析以下将对本文所述的抗菌脂肽衍生物对革兰氏阳性菌的抗菌活性进行检测。使用稍加修改的NCCLS指导M7-A6(2003年)对本发明的所述抗菌脂肽衍生物的最低抑制浓度(MIC)进行测定，所述修改在于使用双倍的系列稀释来稀释所述检测化合物。使用的是肉汤相微稀释法(broth phase microdilution method)。使用来自18-24小时血液琼脂平板培养的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)(MSSA)的分离的克隆来接种阳离子调节的Mueller-Hinton肉汤(CAMHB)，所述肉汤中添加有0.625mM钙。向含有10μL浓度递增的本发明每种化合物的溶液(相邻孔的浓度都加倍，浓度从约0.125μg/mL到64μg/mL)的96孔培养板中，加入90μL具有105集落形成单位(CFU)/mL培养物的细菌悬液。还包括了仅含有培养基的阴性对照和仅含有细菌和培养的阳性生长对照。将所述培养平板在约37℃培养24小时后测定其MIC。本发明的几种抗菌脂肽衍生物的活性如表1-16所示。测试抗菌化合物的最低MIC浓度可完全抑制细菌的生长。然而，对化合物进行多次活性检测得到了一系列MIC值。所有MIC值的单位都是μg/mL，如上所述，所述天然安福霉素复合物对如上培养的MSSA的MIC值约为1.4μg/mL。在表1-16中，R为安福霉素或冬门托星的核心环肽，其可以是β-异构体，脱水，二脱水，及其任意组合的形式。本领域所属技术人员都应理解在表1-16中每一结构式中1位的环外氨基酸的氨基基团和Dab9的氨基基团仅仅是为了说明取代基与所述核心环肽的结合位点，而不应理解为肼基(即为了方便起见显示的氨基基团实际上是本文所述的结构式R的一部分)。此外，本领域所属技术人员还应理解，来自表1-16所示的结构和取代基的各种组合的单个化合物或化合物族，都被本发明以相同的程度公开，就像每一个化合物或化合物族都被单独地公开一样。
表1
表2
表3
表4
表6A
表6B
表6C
表6D
表7
表8
表9
表10
表11
表12
表13 化合物#/MICGly＝甘氨酸，β-Ala＝β-丙氨酸，GABA＝γ-氨基丁酸，Sar＝肌氨酸，Orn＝鸟氨酸，Dap＝2，3-二氨基丙酸，gDab＝2，4-二氨基丁酸，Gly-Lys＝甘氨酸-赖氨酸表14
说明核心是核心肽的β-异构体表15
表16
实施例376 MIC分析中化合物的比较在多种培养基条件下，对本发明的抗菌脂肽衍生物测定了对革兰氏阳性菌的抗菌活性。如实施例376所述对所述抗菌脂肽衍生物的平均抑制浓度(MIC)进行测定。表17中列举了所使用的多种培养基。测试抗菌化合物的最低浓度MIC可完全抑制细菌的生长，如表18所示。
在多种分析条件下，本发明中的一些脂肽抗菌衍生物对革兰性阳性菌表现出比其它化合物更广谱的活性。在某些实施方案中，当与具有直接相连的亲脂性取代基作为直链碳末端(即没有Dab9取代)的化合物相比较时，那些具有通过脲联接与所述氨基末端的氨基酸相连的特异亲脂取代基的化合物具有出乎意料的更佳的活性。例如，可参照化合物253与化合物2和化合物11相比较。在另一实施方案中，在所述Dab9位添加二肽(甘氨酸-赖氨酸)产生的化合物具有意外的活性，尤其是对培养基E和F中的金黄色葡萄球菌(参见，例如化合物199相对于化合物2)。相对于化合物12，增加血清和肉汤对抗金黄色葡萄球菌的MIC的Dab9取代的另一个例子是化合物80。此外，与本发明的化合物衍生物相比，根据所述Dab9取代基，肉汤和血清MIC的相对差异，突出了已知化合物的意料不到的和独特的区别(参见，例如化合物15与化合物88相比，化合物2与化合物147相比)。而且，作为Dab9结构中较小变化的结果，可以观察到意料不到的MIC分布变化(例如，D-对L-氨基酸)。例如，参见化合物160(相对于化合物67)，化合物69(相对于化合物4)。综上，就如对某些Dab9衍生物观察到的，钙作用的区别是意料不到的，并且对肉汤MIC作用巨大(相对于化合物92，化合物98和化合物97参见化合物251)。
表17化合的MIC检测中所用的菌株和培养基
缩写CAMHB(阳离子调节的Mueller-Hinton液体培养基)，VRE(万古霉素耐药性肠球菌)，MDR(多种药物抗性)，VSE(万古霉素敏感的肠球菌)，MSSA(甲氧苯青霉素敏感的金黄色葡萄球菌)，VISA(万古霉素中间体金黄色葡萄球菌)，MRSA(甲氧苯青霉素耐药性金黄色葡萄球菌)，MRSE(甲氧苯青霉素耐药性表皮葡萄球菌)，PISP(青霉素中间体肺炎链球菌)，PRSP(青霉素耐药性肺炎链球菌)，PSSP(青霉素敏感的肺炎链球菌)和PenS(青霉素敏感)。
表18 广谱比较的数据
A-M代表表17中定义的培养基条件实施例377 脂肽衍生物的杀菌活性对生长至对数期的，悬浮于含有0.625mM Ca2+的阳离子-调节的Mueller-Hinton肉汤中的，浓度为106CFU/ml的金黄色葡萄球菌(SAU0017和粪肠球菌(EFS0004)有机体进行了杀菌曲线实验。将所述培养物随后暴露于不同浓度(即，多个所述MIC)的脂肽衍生物，在约37℃进行孵育。在约0-约24小时的选定时间点，分析每种培养物的样品的存活有机体的滴度(titre)(CFU/ml)，然后与每种化合物所需的杀菌时间比较。根据NCCLS指南M26-A(Vol.19 N#18)，如果某化合物在24小时后可杀死99.9％的细菌，则该化合物可认为是杀菌剂。
与通常作为抑菌剂的万古霉素(参见图4A和5A)相比，本发明的所述脂肽衍生物在24小时内对粪肠球菌(图4)和金黄色葡萄球菌(图5)是完全的杀菌剂。例如，化合物3，85，4，128，60，119，199，147，253，278和280是快速的杀菌剂，通常可在6小时内杀死≥99.9％的金黄色葡萄球菌和/或粪肠球菌(浓度通常在所述化合物MIC的两倍(2)稀释以内)。一些化合物(例如108和75)在约2到约4小时内是杀菌剂。本发明的所述脂肽抗菌衍生物是高性能杀菌剂，而这是潜在治疗效果的一个参数。
实施例378 脂肽衍生物的抗菌后效果采用生长于对数期的金黄色葡萄球菌进行后抗菌效果(PAE)实验，所述金黄色葡萄球菌暴露于不同浓度(低(0.5×)至高(4×)倍的所述MIC)脂肽衍生物一(1)小时，然后去除所述药物。去除所述脂肽化合物之后，每小时测定细菌滴度来检测细菌再生长。所述PAE持续时间可定义为暴露于抗菌素的细菌和未暴露细菌，要达到增加1log10单位的CFU/ml所需要的时间差。
表19 抗菌后效果(小时)
*用于化合物4和147的MIC是1μg/mL，用于化合物278和280的MIC是2μg/mL。
化合物4，147，278和80表现出较长的抗菌效果，从0.6小时(以0.5×MIC暴露1小时)到3.2小时(以4×MIC暴露1小时)，许多都是剂量依赖的。本发明脂肽衍生物表现出的快速杀菌性质和较长的PAE是优于许多公知抗菌化合物的优点。
实施例379 脂肽衍生物的体内半衰期所述化合物的系统半衰期是可检测的药代动力学参数，其有助于测定本发明抗菌脂肽衍生物单次i.v.给药后的效率。简而言之，可将待测化合物溶解于5％甘露醇(然后再调pH)，使浓度为1mg/mL(w/v)。以终剂量10mg/kg所述脂肽衍生物对Swiss CD1小鼠(5-6周龄，雌性)或Sprague Dawley大鼠(雄性)进行侧尾静脉的静脉注射给药。在不同时刻(对小鼠而言从约4分钟至约24小时，对大鼠而言为从约4分钟至48或72小时)将鼠处死并采集血液。使用液相色谱(LC)和质谱(MS)定量测定离体血浆中的脂肽衍生物浓度。如表19所示，在i.v.给药后，本发明脂肽衍生物在小鼠和大鼠中表现出罕见的长半衰期。
表20 不同脂肽衍生化合物的体内半衰期
*化合物是指“化合物编号” 数值为分钟，类似的酸性脂肽，达托霉素(daptomycin)的半衰期为54分钟(以10mg/kg皮下给药)到108分钟(以10mg/kg i.p.给药)(参见沙夫塔等人(Safdar et al.)，Antimicrob.Agents Chemother.4863，2004；路易等人(Louie et al.)，Antimicrob.Agents Chemother.45845，2001)。
实施例380 感染防护的体内小鼠模型在腹膜内(i.p.)小鼠模型中(即将细菌进行腹膜内注射，将化合物进行静脉给药(i.v.))，检测本发明抗菌脂肽衍生物对革兰氏阳性菌的抗菌活性。使小鼠感染金黄色葡萄球菌，肺炎链球菌和粪肠球菌，其制备如下将金黄色葡萄球菌Smith(SAU0017，ATCC 19636)在胰酶解酪蛋白大豆肉汤(trypticase soy broth)中生长过夜，收集后重悬于含5％粘蛋白(Sigma Chemical Co.)的新鲜培养基中；将肺炎链球菌(SPN 0032，ATCC 1081)在血液琼脂平板上培养过夜，重悬于0.9％的灭菌盐水中；将粪肠球菌EFS0040(临床分离物)在血液心脏浸泡肉汤(blood heart infusion broth)中培养过夜，洗涤后重悬于0.9％盐水中，并与等体积的灭菌鼠粪提取物混合。分别采用以下剂量对Swiss CD1小鼠i.p.注射细菌金黄色葡萄球菌为106CFU/鼠；肺炎链球菌为102CFU/鼠；或粪肠球菌为107.5CFU/鼠。在感染后立即(对粪肠球菌)或感染2小时(对金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌)后对小鼠进行一种以下组合物的i.v.处理，这些组合物是(1)配制于5％甘露醇溶液中的剂量约0.1mg/kg至约10mg/kg的脂肽衍生物；(2)药剂体积为10mg/kg的单独的5％甘露醇载体；或(3)剂量与所述脂肽衍生化合物类似的公知的母体脂肽抗生素，例如安福霉素或天冬菌素，或其它抗生素，例如万古霉素。观察所述小鼠，治疗后7天记录死亡情况。使用李德(Reed)和梅恩科(Meunch)的方法(Am.J.Hyg.27493，1938)计算每种化合物的ED50。令人惊奇的是，这些脂肽化合物中的几种表现出与母体安福霉素或天冬菌素相当或更强的活性。此外，本领域公知安福霉素是有毒性的(参见蒂斯克等人(Tisch et al.)，Antibiotics Ann.551011，1954，显示安福霉素的LD50为177mg/kg；还可参见海因曼等人(Heinemann et al.)，Antibiot.Chemother.31239，1953)。
表21 脂肽衍生物在小鼠中的ED50(mg/kg)*
*显示为范围的结果来自多次实验。
实施例381 体内肺感染模型在鼻内(i.n.)鼠肺感染模型中(即将细菌鼻内(i.n.)吸入，将脂肽化合物静脉给药(i.v.))，检测本发明抗菌脂肽衍生物对革兰氏阳性菌的抗菌活性。将肺炎链球菌(SPN 0032，ATCC 1081)在5％绵羊血液琼脂平板上37℃培养24小时，收获后重悬于0.9％的灭菌盐水中。用2％异氟烷麻醉一组8只Swiss CD1小鼠，向每只小鼠的鼻孔逐滴i.n.感染50μl所述制备的细菌接种物(即剂量约106CFU/鼠)。感染后3，24和28小时，所述组的小鼠接受i.v.的(1)配制于5％D-甘露醇溶液中的剂量约0.3mg/kg，1mg/kg，3mg/kg或10mg/kg的脂肽衍生物；(2)剂量体积为10mL/kg的单独的5％甘露醇载体；或(3)剂量类似所述脂肽衍生化合物的公知的抗生素，例如万古霉素。观察所述小鼠，治疗10天后记录死亡情况。使用李德(Reed)和梅恩科(Meunch)的方法(Am.J.Hyg.27493，1938)计算每种化合物的ED50。如表22所示，在i.v.给药后，在约1.0mg/kg至约2.5mg/kg的范围内，代表性的化合物4，147，278和280表现出十分有效的ED50值。
表22 肺炎链球菌的肺(类肺炎)感染
*显示为范围的结果来自多次实验。
实施例382 中性白细胞减少小鼠中的体内肺感染模型在鼻内(i.n.)免疫妥协的鼠肺感染模型中(即将细菌鼻内(i.n.)接种，将脂肽化合物静脉给药(i.v.))，检测本发明抗菌脂肽衍生物对革兰氏阳性菌的抗菌活性。将肺炎链球菌(SPN 0002)在5％绵羊血液琼脂平板上37℃培养24小时，收获后重悬于0.9％盐水中。在感染前4天和1天，对一组3-4只Swiss CD1小鼠进行环磷酰胺(SigmaChemical Co.；150mg/kg，i.p.)给药，使其中性白细胞减少。在感染前18-24小时，向每只小鼠的鼻孔逐滴i.n.感染50μl所述制备的细菌接种物(即剂量约5×106CFU/鼠)。感染后18-24小时，所述组的小鼠接受i.v.的(1)配制于5％甘露醇溶液中的剂量约1mg/kg，3mg/kg，10mg/kg或30mg/kg的脂肽衍生物；(2)剂量体积为10mL/kg的单独的5％甘露醇载体；或(3)剂量类似所述脂肽衍生化合物的公知的抗生素，例如青霉素。抗菌处理后18-24小时，处死所述小鼠并收集肺。将肺匀浆后涂布于血液琼脂培养抽样，在37℃培养24小时，然后进行CFU计数。计算每种化合物的EKill(杀菌效果；即相对于起始处理时间CFU计数的log10CFU/肺的降低)和EMax(最大降低效果；即相对于24小时的对照CFU计数的log10CFU/肺的降低)。
当感染后18-24小时给药时，相比未治疗小鼠检测到的治疗小鼠肺中CFU的降低表明，所述脂肽衍生物显示出剂量依赖的抗菌效果。在所述最高剂量水平(30mg/kg)，例如，化合物147表现出4.0log10CFU/肺的降低(P＜0.001)，而青霉素表现出具有可比性的2.58log10CFU/肺的降低。这些化合物的EKill分别为3.2和1.8log10CFU/肺的降低。所以，本实施例和实施例381都说明本发明的脂肽抗菌衍生物对诸如肺炎的急性肺感染具有治疗效果。
实施例383 中性白细胞减少小鼠中的局部组织感染模型在肌肉(i.m.)内的鼠肺感染模型中(即将细菌肌肉(i.m.)注射，将脂肽化合物静脉给药(i.v.))，检测本发明抗菌脂肽衍生物对革兰氏阳性菌的抗菌活性。将金黄色葡萄球菌(SAU0017)在5％绵羊血液琼脂平板上37℃培养24小时，收获后重悬于0.9％盐水。在感染前4天和1天，对一组3-4只Swiss CD1小鼠进行环磷酰胺(Sigma ChemicalCo.；150mg/kg，i.p.)给药，使其中性白细胞减少。在感染当天，使用胰酶解酪蛋白大豆肉汤中过夜培养的金黄色葡萄球菌Smith(SAU0017，ATCC 19636)培养物向动物的每条大腿进行肌肉注射(即剂量约105CFU/大腿)。感染后2小时，所述组的小鼠接受i.v.的(1)配制于5％甘露醇溶液中的剂量约1mg/kg到约80mg/kg的脂肽衍生物；(2)剂量体积为10ml/kg的单独的5％甘露醇载体；或(3)剂量类似所述脂肽衍生化合物的公知的抗生素，例如万古霉素。抗菌处理后24小时，处死所述小鼠并收集大腿。将大腿匀浆后涂布于血液琼脂培养抽样，在37℃培养24小时，然后进行CFU计数。使用非线性回归确定所述ED50和EMax。从其它方程可估测出在24小时内在所述大腿中达到抑菌效果的抗生素剂量。通过处理初始和处理后24小时(相对于计算最大效果)的差值计算EKill。
表23 金黄色葡萄球菌的大腿感染
*显示为范围的结果来自多次实验。
如表23所示，代表性化合物3，4，128，147，278和280的ED50值从约1mg/kg至约8mg/kg。在相同实验中，采用常规抑制剂量(在24小时在感染组织中产生抑菌效果所需的剂量)约1mg/kg至约11mg/kg，这些相同代表性化合物的最大效果(在处理后24小时在感染组织中的细菌计数的log降低)为约-2.8logs至约-4.9logs，所以，本实施例说明本发明的所述脂肽抗菌衍生物对急性局部组织感染具有治疗效果。
实施例384 体内合并的肺和大腿肌肉感染模型在合并的i.m./i.n.鼠大腿/肺感染模型中(即将细菌进行i.m./i.n.给药，将脂肽化合物静脉给药(i.v.))，检测本发明抗菌脂肽衍生物对革兰氏阳性菌的抗菌活性。将肺炎链球菌(SPN 0002，ATCC 10813)在5％绵羊血液琼脂平板上37℃培养24小时，收获后重悬于0.9％盐水。用2％异氟烷麻醉一组3-4只Swiss CD1小鼠，向每只小鼠的鼻孔逐滴i.n.感染50μl所述制备的细菌接种物(即剂量约106CFU/鼠)。i.n.接种后，立即向每只小鼠的每条大腿肌肉i.m.注射0.1ml制备的细菌接种物(即剂量约105CFU/鼠)。感染后4小时，所述组的小鼠接受i.v.的(1)配制于5％甘露醇溶液中的剂量约0.16mg/kg，0.32mg/kg，0.63mg/kg 1.25mg/kg，2.5mg/kg，5mg/kg或10mg/kg的脂肽衍生物；(2)剂量体积为10mg/kg的单独的5％甘露醇载体；或(3)剂量类似所述脂肽衍生化合物的公知的抗生素，例如万古霉素。抗菌处理后24小时，处死所述小鼠，收集肺和大腿。将所述大腿和肺匀浆后涂布于血液琼脂培养抽样，在37℃培养24小时，然后进行CFU计数。使用非线性回归确定所述ED50和EMax。从其它方程可估测出在24小时内在所述大腿中达到抑菌效果的所述抗生素剂量。通过处理初始和处理后24小时(相对于计算最大效果)的差值计算EKill。
在使用肺炎链球菌的合并的鼠肺和大腿肌肉感染模型中，代表性的化合物147，278和280的ED50值对肺组织而言为约0.25mg/kg至约1.5mg/kg；对大腿肌肉组织而言，为约1mg/kg至约2mg/kg。在相同实验中，对肺组织而言，使用约0.4mg/kg至约1.5mg/kg的常规抑制剂量，这些相同代表性化合物的最大效果(在处理后24小时在感染组织中的细菌计数的log降低)为约-3.6logs至约-4.4logs。同样，在相同实验中，对大腿肌肉组织而言，使用约1mg/kg至约2mg/kg的常规抑制剂量，这些相同代表性化合物的最大效果(在处理后24小时在感染组织中的细菌计数的log降低)为约-5.4logs至约-6logs。所以，本实施例说明本发明的所述脂肽抗菌衍生物对急性系统感染(如菌血症)具有治疗效果。
权利要求
1.结构式(II)的抗菌化合物及其药物可接受的盐 其中R1是OH或NH2；L选自至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，-R′C(＝O)-，-R′OC(＝O)(NR′)-和-O-PhC(＝O)-；R2选自-C(＝O)R5，-C(＝O)OR5，-C(＝O)NHR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NHR4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NHR4和-C(＝NR4)NR4R4；R3选自-OR5，-SR5，NR5R5，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)R5，-C(＝O)OR5，-C(＝O)NR5R5，-C(＝S)NR5R5，-C(＝NR5)NR5R5，-C(＝O)H，-R5C(＝O)，-SO2R5，-S(＝O)R5，-P(＝O)(OR5)2，-P(＝O)(OR5)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素，三卤甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5至10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸；R4独立地选自(C7-C10)烃基，(C17-C26)芳基烃基和17至26元的杂芳基烃基，链长度为7-25个碳原子的支链或直链的、饱和的或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸；R5独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基和6至26元的杂芳基烃基，链长度为5-25个碳原子的支链或直链的、饱和或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，及上述的任意组合，及；R′独立地为一种或多种如R3或R5定义的相同或不同的取代基。
2.如权利要求1所述的化合物，其中R1是OH。
3.如权利要求1所述的化合物，其中R1是NH2。
4.如权利要求1所述的化合物，其中R2是-C(＝O)OR5或-C(＝O)R5。
5.如权利要求1所述的化合物，其中R2是-C(＝O)R5。
6.如权利要求1所述的化合物，其中R2是-C(＝O)NHR4，-C(＝S)NHR4或-C(＝NR4)NHR4。
7.如权利要求6所述的化合物，其中R2是-C(＝O)NHR4。
8.如权利要求1所述的化合物，其中R3是选自甘氨酸，β-丙氨酸，肌氨酸，赖氨酸或其任意组合的至少一种氨基酸。
9.如权利要求8所述的化合物，其中所述至少一种氨基酸是选自甘氨酸-赖氨酸或肌氨酸-赖氨酸的二氨基酸。
10.如权利要求8所述的化合物，其中所述至少一种氨基酸是甘氨酸。
11.如权利要求8所述的化合物，其中所述至少一种氨基酸是β-丙氨酸。
12.如权利要求5所述的化合物，其中所述化合物是表6D中的化合物91，或表16中的化合物331或332。
13.如权利要求1-11中任一权利要求所述的化合物，其中L是选自对氨基苯乙酰基，(对氨基苯丙酰基)n，其中n为1或2，间氨基苯乙酰基，(间氨基苯丙酰基)n，其中n为1或2，邻氨基苯乙酰基，(邻氨基苯丙酰基)n，其中n为1或2，GABA，对氨基苯甲酸(PABA)，间氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸，对肼基苯甲酸，间肼基苯甲酸，邻肼基苯甲酸，对氨基-反式-肉桂基，间氨基-反式-肉桂基，邻氨基-反式-肉桂基，L-BBTA或其任意组合的至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸。
14.如权利要求4所述的化合物，其中L是选自对氨基苯乙酰基，PABA，间氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸，对氨基-反式-肉桂基，间氨基-反式-肉桂基，邻氨基-反式-肉桂基或其任意组合的至少一种氨基酸。
15.如权利要求14所述的化合物，其中R5是链长度为10-15个碳原子的直链饱和脂肪部分或羟基脂肪部分。
16.如权利要求14或15所述的化合物，其中所述化合物是表6D中的化合物86，或表7中的化合物87或280，或表8中的化合物89。
17.如权利要求14所述的化合物，其中所述化合物是表7中的化合物280。
18.如权利要求1所述的化合物，其中R3是选自Gly，β-丙氨酸，GABA，5-氨基戊酸，6-氨基己酸，Lys，gDab，Sar，Orn，Dap，hLys或其任意组合的至少一种氨基酸。
19.如权利要求1，13和18中任一权利要求所述的化合物，其中所述R3还包括至少一种保护基团。
20.基于结构式(II)的抗菌化合物及其药物可接受的盐 其中R1是OH或NH2；L选自至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，-R′C(＝O)-，和-R′OC(＝O)(NR′)-；R2选自-OR5，-SR5，-NR5R5，-C(＝O)OR5，-C(＝O)R5，-C(＝O)NHR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NHR4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NHR4，-C(＝NR4)NR4R4，-R5C(＝O)，-SO2R5，-S(＝O)R5，-P(＝O)(OR5)2，-P(＝O)(OR5)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素和三卤甲基；R3为氢；R4独立地选自(C7-C10)烃基，(C17-C26)芳基烃基和17至26元的杂芳基烃基，链长度为7-25个碳原子的支链或直链的、饱和或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，以及至少一种取代氨基酸；R5独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基和6至26元的杂芳基烃基，链长度为5-25个碳原子的支链或直链的、饱和或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸及其任意组合，及；R′独立地为一种或多种如R2或R5定义的相同或不同的取代基。
21.如权利要求20所述的化合物，其中R1是OH。
22.如权利要求20所述的化合物，其中R1是NH2。
23.如权利要求20所述的化合物，其中R2是-C(＝O)NHR4，-C(＝S)NHR4或-C(＝NR4)NHR4。
24.如权利要求20所述的化合物，其中R2是-C(＝O)R5。
25.如权利要求24所述的化合物，其中R5是10至20元的杂芳基烷基，或链长度为5-17个碳原子的直链饱和脂肪部分或羟基脂肪部分。
26.如权利要求24所述的化合物，其中L是选自甘氨酸，肌氨酸，苯基甘氨酸，苯基丙氨酸，O-甲基-天冬氨酸，O-叔丁基-天冬氨酸，对氨基苯甲酸(PABA)，间氨基苯甲酸，对肼基苯甲酸，对氨基苯丙酸，(对氨基苯丙酸)n，其中n为1或2，和L-BBTA，间氨基-苯乙酸，对氨基-苯乙酸(Apa)，对氨基-反式-肉桂酸或其任意组合的至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸。
27.如权利要求24至26中任一权利要求所述的化合物，其中所述化合物是表3中的化合物103，105，106，107，112，115，116，118，311，313，314，315，316，317，344，345，346，358，359或360。
28.如权利要求24至26中任一权利要求所述的化合物，其中所述化合物是表6D中的化合物104，108，109，111，113，122，119，281，293，294，296，297，300，301，303，310，312或361。
29.如权利要求28所述的化合物，其中所述化合物是表6D中的化合物108。
30.如权利要求28所述的化合物，其中所述化合物是表6D中的化合物119。
31.如权利要求24至26中任一权利要求所述的化合物，其中所述化合物是表6B中的化合物110，表6C中的化合物117，表7中的化合物21，85，282，283，284，285或123，或表8中的化合物120。
32.如权利要求31所述的化合物，其中所述化合物是表7中的化合物85。
33.如权利要求24所述的化合物，其中所述化合物是表14中的化合物374，337，305，320或319。
34.如权利要求20所述的化合物，其中R2是-C(＝O)NHR4。
35.如权利要求34所述的化合物，其中R4是链长度为8-16个碳原子的直链饱和脂肪部分或羟基脂肪部分。
36.如权利要求34或35所述的化合物，其中所述化合物是表4中的化合物286，321，304，254，307，295或291。
37.如权利要求34或35所述的化合物，其中所述化合物是表6A中的化合物288，306，290，362，289，292，287或302。
38.如权利要求20所述的化合物，其中L是至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸。
39.如权利要求38所述的化合物，其中所述至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸是对氨基苯甲酸(PABA)，间氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸，邻，邻-二氨基苯甲酸，邻，间-二氨基苯甲酸，邻，对-二氨基苯甲酸，间，对-二氨基苯甲酸，间，间-二氨基苯甲酸，邻氨基-苯乙酸，间氨基-苯乙酸，对氨基-苯乙酸(Apa)，氨基噻唑乙酸，或其任意组合。
40.如权利要求38所述的化合物，其中所述至少一种氨基酸或至少一种取代氨基酸是间，间-二氨基苯甲酸或氨基噻唑乙酸。
41.如权利要求40所述的化合物，其中所述化合物是表14中的化合物305，320，319或337。
42.如权利要求38所述的化合物，其中所述至少一种氨基酸是间氨基苯甲酸或邻氨基苯甲酸。
43.如权利要求42所述的化合物，其中所述化合物是表6A中的化合物306，362，292或302。
44.如权利要求38所述的化合物，其中所述至少一种氨基酸是对氨基苯甲酸(PABA)。
45.如权利要求44所述的化合物，其中所述化合物是表7中的化合物282，283，284，85，285或123，或表6A中的化合物288，290，289或287。
46.如权利要求44所述的化合物，其中R2是-C(＝O)OR5或-C(＝O)R5。
47.如权利要求46所述的化合物，其中R2是-C(＝O)R5，且所述化合物是表7中的化合物282，283，284，85或285。
48.如权利要求44所述的化合物，其中R2是-C(＝O)NHR4，-C(＝S)NHR4或-C(＝NR4)NHR4。
49.如权利要求48所述的化合物，其中R2是-C(＝O)NHR4，且所述化合物是表6A中的化合物288，290，289或287。
50.如权利要求20所述的化合物，其中R3是选自Gly，β-丙氨酸，GABA，5-氨基戊酸，6-氨基己酸，Lys，gDab，Sar，Orn，Dap和hLys的至少一种氨基酸或取代氨基酸。
51.如权利要求20，39和50中任一权利要求所述的化合物，其中所述R3还包括至少一种保护基团。
52.结构式(IV)的抗菌化合物及其药物可接受的盐 其中R1是OH或NH2；L独立地选自至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，-C(＝O)-，-R′C(＝O)-，-SO2，-C(＝S)-，-P(＝O)-，-OP(＝O)-，-OC(＝O)-，-R′OC(＝O)(N R′)-，-NHC(＝O)-，-O-PhC(＝O)-和-NR′C(＝O)-，其条件是在Dab9上L是-C(＝O)-；R2选自-OR4，-SR4，NR4R4，-CN，-NO2，-N3，-C(＝O)OR4，-C(＝O)R4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-SO2R4，-S(＝O)R4，-P(＝O)(OR4)2，-P(＝O)(OR4)，-CO2H，-SO3H，-PO3H，卤素，三卤甲基，(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)烃基，(C1-C25)杂烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，(C5-C10)芳基，取代的(C5-C10)芳基，(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，(C5-C15)联芳基，取代的(C5-C15)联芳基，5-10元的杂芳基，取代的5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基，取代的(C6-C26)芳基烃基，6至26元的杂芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸；R3选自-C(＝O)OR4，-C(＝O)NR4R4，-C(＝S)NR4R4，-C(＝NR4)NR4R4，-C(＝O)H，-R4C(＝O)，-CO2H，取代的(C1-C25)烃基，取代的(C1-C25)杂烃基，取代的(C5-C10)芳基，取代的(C5-C15)芳基芳基，取代的(C5-C15)联芳基，取代的5至10元的杂芳基，取代的(C6-C26)芳基烃基，取代的6至26元的杂芳基烃基，至少一种氨基酸和至少一种取代氨基酸，其条件是R3含有-C(＝O)-，-C(＝S)-或-C(＝NR4)-中的至少一种；R4独立地选自氢，(C1-C10)烃基，(C5-C10)芳基，5至10元的杂芳基，(C6-C26)芳基烃基和6至26元的杂芳基烃基，链长度为5-25个碳原子的支链或直链的、饱和或单重或多重不饱和的脂肪部分或羟基脂肪部分，伯胺或仲胺，至少一种氨基酸，至少一种取代氨基酸，及上述的任意组合；R′独立地为一种或多种如R2，R3或R4定义的相同或不同的取代基。
53.如权利要求52所述的化合物，其中R1是OH。
54.如权利要求52所述的化合物，其中R1是NH2。
55.如权利要求52所述的化合物，其中R3包含-C(＝O)-或-C(＝S)-中的至少一种。
56.如权利要求52所述的化合物，其中R3是-C(＝O)-。
57.如权利要求56所述的化合物，其中所述化合物是表12中的化合物210，373，223，237，235或81。
58.如权利要求52所述的化合物，其中R3是选自Gly，β-丙氨酸，GABA，5-氨基戊酸，6-氨基己酸，Lys，gDab，Sar，Orn，Dap和hLys的至少一种氨基酸或取代氨基酸。
59.如权利要求52或58所述的化合物，其中L和R3中至少一个还包括至少一种保护基团。
60.抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中所述化合物是表1中的化合物3。
61.抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中所述化合物是表10中的化合物4。
62.抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中所述化合物是表13中的化合物60。
63.抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中所述化合物是表16中的化合物128。
64.抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中所述化合物是表1中的化合物147。
65.抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中所述化合物是表10中的化合物199。
66.抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中所述化合物是表4中的化合物253。
67.抗菌化合物及其药物可接受的盐，其中所述化合物是表4中的化合物278。
68.药物组合物，包含权利要求1，20或52所述的抗菌化合物和药物可接受的载体赋型剂或稀释剂。
69.治疗微生物感染的方法，包括将权利要求1，20或52所述的化合物对需要治疗的个体给药。
70.治疗微生物感染的方法，包括将权利要68所述的药物组合物对需要治疗的个体给药。
71.应用在治疗微生物感染的方法中的权利要求1，20或52所述的化合物。
72.应用在治疗微生物感染的方法中的权利要求68所述的药物组合物。
全文摘要
本发明提供了对微生物具有抗菌活性的脂肽抗菌素衍生物，合成这些抗菌衍生物和类似物的方法和化合物，以及以多种方式包括在治疗和预防微生物传染中使用所述化合物的方法。
文档编号A61K38/00GK1839150SQ200480020655
公开日2006年9月27日 申请日期2004年6月28日 优先权日2003年7月17日
发明者戴尔·R·卡梅伦, 文森特·A·博伊德, 理查德·A·利斯, 威廉·V·柯伦, 唐纳德·B·博德斯, 保罗·W·M·斯加尔比, 雪莉·A·瓦克维希·斯加尔比, 马修·诺德维尔, 陈玉琛, 贾琦, 多米尼克·迪古尔 申请人:麦根克斯有限公司