单分散固体脂质颗粒组合物的制作方法

专利名称：单分散固体脂质颗粒组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及包含活性成分的单分散固体脂质颗粒组合物。
背景技术：
固体脂质颗粒组合物在制备给人类或动物给药一种或多种活性成分的递送系统或者用于制备疫苗中特别有用。特别地，所述给药采取如下给药途径，例如口服途径、静脉途径、皮下途径、肌内途径、鼻腔途径、肺途径、眼部途径和局部途径。
根据选择的给药途径，特别是给药水溶性和弱水溶性活性成分存在一定的问题。
因此，在口服途径中，保证良好的生物利用度是很重要的，即吸收的活性成分，也就是血流中存在的活性成分的百分比要足够，并且对于特定个体、对于不同剂型的摄取以及不同个体之间的生物利用度的改变应当令人满意。
弱水溶性分子。为了经由口服途径吸收，活性成分必须首先溶解或分散在消化分泌液中，然后穿过肠上皮。
将活性成分溶解或分散在水性介质中的方法是已知的，例如掺入自乳化系统、胶束或脂质体中。然而，就获得的悬浮液中的物质在储存时和在消化分泌液中不够稳定方面，这些产物不完全令人满意。
固体脂质颗粒的混悬液使得溶解或分散活性成分成为可能。特别地，当以小滴形式热分散，然后冷却和固化时，这些物质可包裹已经预先在熔融的脂质中溶解或分散的活性成分。这些方法的简易性使得它成为做为毫微粒的聚合物共沉淀系统的重要竞争者。
近来，已经研发了固体脂质毫微粒混悬液，也称为“SLNs”(固体脂质毫微粒)。这种类型的系统具有以下优点(i)能够在不含溶剂的条件下制备；(ii)可生物降解，(iii)不包含有毒的合成残余物(SLNs可由批准的药用赋形剂制备)和(iv)在聚结方面是稳定的。
在存在表面活性剂下SLNs是稳定的。然而，当分散相在一定浓度之外，即，很少的重量百分比(2至5％)时，不能保证在贮存和在制备过程中混悬液的胶体稳定性。而对于较高的浓度，则很难避免颗粒的聚集。
因此，文献EP 0 605 497描述了包含活性成分的脂质颗粒的水相混悬液。然而，根据所述文献获得的颗粒不是单分散的。现在，在口服给药中，固体脂质颗粒的颗粒分布均匀性是非常重要的参数，因为颗粒粒径决定(i)活性成分的释放速率，(ii)与胃肠道粘膜的相互作用(给予小颗粒大的发展空间，和因此导致的生物粘附性)，(iii)被消化酶、脂肪酶的降解，其是表面现象，和(iv)颗粒穿过肠上皮的通道。微囊法的预期效果为(i)活性成分的溶解和/或分散的改善，(ii)抗被消化酶和/或肠代谢酶例如CYP3A4(尤其是对于天然来源的活性物质)降解的保护作用，(iii)共递送P-糖蛋白抑制剂的可能性，(iv)当适宜时，在活性成分是刺激剂情况下对胃肠道粘膜的保护作用，和(v)当颗粒的组成提高了脂蛋白生成时，淋巴运输的增加。
在Westensen等人的文献US 5 785 976和US 5 885 486中描述了固体脂质颗粒混悬液。
在Westensen的文献US 6 197 349中描述了通过过度冷却熔化物(PSM)和其混悬物的颗粒来递送弱水溶性活性物质的系统。这些颗粒除了包含活性成分外，仅包含降低它们熔点的添加剂，也可以再加上稳定剂，特别是两性分子稳定剂。因而，它们不包含脂质本身。
在Westensen的文献US6 207 178中描述了各向异性形式的结晶性脂质颗粒的混悬液。
主要用于制备这些可结晶乳剂的方法为高压均化或充分混合，任选地超声粉碎、加热、然后冷却。在这两种情况下，获得的颗粒都具有明显小于1微米的直径。
水溶性分子。口服给药后水溶性分子的低生物利用度与它们低扩散进入肠上皮的生物膜有关。微囊法的预期效果为(i)在胃肠道吸收窗之前停留时间的延长(与小颗粒的生物粘附性相关)，(ii)抗被消化酶和/或肠代谢酶例如CYP3A4(尤其是对于天然来源的活性物质例如肽、蛋白和核苷酸)降解的保护作用，(iii)共递送P-糖蛋白抑制剂的可能性，(iv)靠近肠细胞粘膜的活性分子的局部浓度的增加，其促进了扩散，和(v)当适宜时，在活性成分是刺激剂的情况下，对胃肠道粘膜的保护作用，和(vi)当颗粒的组成提高了脂蛋白生成时，淋巴运输的增加。
制备用于亲水性分子的SLNs的方法的限制存在于它们与油中亲水性分子的低溶解性相关的弱包裹性。为了增加电荷含量(在颗粒中活性成分的质量百分比)，通过将活性成分溶解在水相中和首先制备水包油包水性复乳剂来包裹活性分子是可能的。
Garcia-Fuentes等人的文章，Colloids and SurfacesBBiointerfaces，27(2002)，159-168描述了通过复乳化制备用于口服施用蛋白质的脂质颗粒。然而，试验设计中使用了三棕榈精(甘油三酯)和卵磷脂(磷脂)的二氯甲烷溶液。因此，其不是不含有溶剂的方法。
而且，通过超声粉碎乳化导致标准的颗粒粒径范围限制在0.15-0.5μm。最后，为了赋予其在消化分泌液中更好的稳定性所使用的表面制剂为PEG硬脂酸酯。
然而，上述颗粒在5％重量以上浓度贮存时，易表现出大量且快速的聚集。
在鼻腔给药途径中，微囊法的预期效果为(i)在鼻粘膜之前停留时间的延长(与小颗粒的生物粘附性相关)，(ii)抗被酶降解的保护作用，(iii)靠近鼻粘膜的活性分子局部浓度的增加，其增加了扩散。在鼻腔给药中，固体脂质颗粒的颗粒分布均匀性是非常重要的参数，因为颗粒粒径决定(i)活性成分的释放速率，(ii)与鼻粘膜的相互作用(给予小颗粒大的发展空间，和因此导致的生物粘附性)，(iii)生物降解，和(iv)颗粒穿过鼻粘膜的通道。然而，相对于其它途径，尤其是相对于口服途径，导致生物利用度和效果的结果最好的粒径范围可偏移。
在肺部给药途径中，给药颗粒的颗粒分布也很重要。为了到达肺泡，活性分子必须包裹在具有特定的空气动力学特性的固体颗粒中。在已有的知识条件下，已知粒径分布集中在3-5μm可获得最佳递送。已提出许多方法用于制备颗粒具有约3-5μm的窄粒径分布的粉末雾化、在非溶剂中沉淀、使用超临界二氧化碳的技术。这种技术提供了用于制备这种颗粒的另一种选择。
在皮下给药情形中，可制备脂质微粒，作为另一种聚合物微球的选择。在Journal of Controlled Release 73(2001)339-350，Reithemeier等人的文章中，肽经由复乳剂方法包入三棕榈精颗粒中。然而，在这种情况下，也使用了有机溶剂。在皮下给药情形中，固体脂质颗粒的颗粒分布均匀性是非常重要的参数，因为颗粒粒径决定(i)活性成分的释放速率，(ii)颗粒的降解速率和它们在皮肤下的停留时间，和(iii)它们与免疫系统(巨噬细胞)的相互作用。这些限制实质上与肌内给药是相同的。
在静脉内给药途径中，为了在血流中与循环相一致，颗粒粒径必须小于1微米。
最后，在疫苗制剂中，颗粒粒径分布必须与抗原(抗原呈递细胞)的预期目标相适应，作为给药途径和免疫活性细胞的可接近性的函数。

发明内容
因而，本发明的目的是提供一种制备包含至少一种活性成分的单分散固体脂质颗粒的方法，其不存在现有技术的缺陷，特别适用于前述的给药途径。
本发明的另一目的是用于实施该方法的组合物。
最后，本发明的目的是这些组合物制备活性成分递送系统的用途。
因此，根据本发明，提供一种包含分散在连续水相中的单分散脂质相的组合物，其中脂质相包括至少一种可结晶的脂质，至少一种活性成分和至少一种包含两条脂肪酸链和一条聚乙二醇链的稳定可分散相的化合物。
术语“单分散”是指组合物中小滴或小球的颗粒分布非常窄。当多分散性小于或等于40％，优选约5％至30％，例如15％至25％时，可认为粒径分布非常窄。多分散性定义为中位值处曲线的标准偏差与小滴或小球平均直径的比率，所述中位值代表分散物质所占体积的变化作为小滴或小球直径的函数。
术语“固体脂质“或”可结晶的脂质“是指熔点高于室温的脂质，更精确地，指熔点从30至95℃，优选35至75℃的脂质。
根据本发明的组合物在需要的时间内，特别是在需要从中回收干燥颗粒，例如冷冻干燥颗粒的时间内是稳定的。术语“稳定的”是指颗粒保持个体化，没有聚集。有利地是，即使当分散相的浓度较高，特别是高于5％重量时，仍保持这种稳定性。
根据本发明的组合物有利地是与存在的高浓度的分散相是相容的。因而，其允许制备具有高浓度活性成分的给药系统。这样的给药系统具有限制摄取体积的优点，其改善了患者的接受性。
因此，分散相的含量可根据希望的用途在较宽范围内变化。因而，根据本发明的组合物可包含0.01％至30％重量的脂质相。
而且，在制备中，可将活性成分分配在脂质相和水相内。高含量的分散相允许平衡向脂质相转移，以提高包裹产率。
组合物的分散的脂质相可以是单相的，也可以包含第二水相，此水相作为内部相，分散在脂质相之中。
在第一种情况下，乳剂在可结晶脂质的熔点是简单的油/水乳剂。在冷却至可结晶脂质的固化点之后，分散的脂质相转换成固体脂质颗粒。
在第二种情况下，乳剂在可结晶脂质的熔点是简单的水/油/水复乳剂。一旦冷却，可获得作为分散相的包含含水腔或空隙(即，包含空气或气体)的固体脂质颗粒。
在这两种情况下，为了获得包含活性成分的单分散脂质颗粒，可能分离分散相。
根据本发明的组合物中分散相的平均直径通常为0.2至50微米，优选0.3至10微米，最优选1至6微米。
根据本发明的组合物包含做为稳定剂的稳定化合物，其具有两条脂肪酸链和一条聚乙二醇链。
用聚乙二醇部分醚化的甘油的脂肪酸酯特别优选用作稳定剂。脂肪酸可特别地是包含8至24个碳原子的饱和的或不饱和的、直链或支链的单羧酸或二羧酸。优选是硬脂酸。有利地是，稳定剂为包含25至1000，特别是32至200个聚乙二醇单元的聚乙二醇酯。
优选地，组合物包含0.001％至30％，优选1％至10％重量的稳定剂。
适宜时，根据本发明的组合物的水相可包含增稠剂。连续相的增稠剂有助于稳定乳剂。有利地，这样的增稠剂可以是藻酸盐，例如藻酸钠。组合物中增稠剂可占整个连续水相的比例为0.001％至10％重量，优选0.1％至5％重量。
连续水相可以包含例如海藻糖、电解质、缓冲剂或防腐剂。
组合物的连续水相也可包含其它的制剂，例如用于保证系统渗透性的药剂、防冻保护剂、缓冲剂或防腐剂。
防冻保护剂中可特别提及的是多元醇和电解质。特别的，例如，适宜的是甘油、甘露醇、葡萄糖、果糖、木糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇和二甲苯胺或其它多元醇，例如聚乙二醇。可提及的电解质为氯化钠。
根据本发明的组合物的分散脂质相包含至少一种可结晶的脂质。
可结晶的脂质中特别适宜的是天然的或合成的脂肪酸单、二或三甘油酯、天然的或合成蜡、蜡醇及其酯、脂肪醇及其酯和醚、脂肪酸及其酯、脂肪酸甘油酯和氢花植物油或动物油，单独使用或组合使用。
特别优选的，可提及的是包含8至24个碳原子的饱和的或不饱和的脂肪酸单、二或三甘油酯，例如三肉豆蔻酸甘油酯、甘油三棕榈酸酯、单硬脂酸甘油酯、棕榈酸十六酯和氢化橄榄油。
这样的脂质可从市场购得，特别地为下述商品名SuppocireDM、précitolATO5、Gél éol43/01、Gélucire62/05、Gélucire39/01、Gélucire50/02(Gattefossé)、Dynasan114、DYnasan116、Imwitor960K、Imwitor491、Imwitor900P、(Sasol)、Oliwax(QuimDis)。
分散相的固体脂质体具有微囊化水不溶性活性成分(该成分可以溶解或分散在固体脂质中)或水溶性活性成分(该活性成分可以溶解在复乳的内水相中或分散在脂质体中)的功能。
而且，脂质相包含至少两种活性成分是有利的。
活性成分可以是水溶性的或弱水溶性的。
特别地，对其中分散相包含内水相的组合物而言，单独或与弱水溶性活性成分联合运输亲水性活性成分是可能的。
根据本发明具体的实施方案，脂质相包含至少一种水溶性活性成分和至少一种弱水溶性活性成分。
特别地，活性成分可以是药用活性成分、兽用活性成分、植物保护活性成分、化妆用活性成分或农产品(agrifood)活性成分。而且，其可以是清洁剂、营养剂、抗原或疫苗。其优选是药用活性成分。
优选地，药用活性成分选自抗生素、降血脂药、抗高血压药、抗病毒剂、β阻滞剂、支气管扩张药、细胞抑制剂、精神调节剂、激素、血管扩张药、抗变态反应药、镇痛剂、解热药、解痉剂、抗炎剂、抗血管生成剂、抗菌剂、抗溃疡剂、抗真菌剂、抗寄生虫剂、抗糖尿病剂、抗癫痫剂、抗震颤麻痹药、抗偏头疼药、抗阿尔茨海默病剂、抗痤疮剂、抗青光眼剂、止喘药、安定药、抗抑郁药、抗焦虑药、安眠药、normothymic agent、镇静剂、精神兴奋药、抗骨质疏松药、抗关节炎药、抗凝血剂、抗银屑病剂、促血糖增高药、促食欲剂、减食欲剂、平喘剂、抗便秘剂、止泻剂、抗创伤剂、利尿剂、肌肉松弛剂、遗尿药物、勃起障碍药物、维生素、肽、蛋白质、抗癌剂、核酸、RNA、寡核苷酸、RNA构成酶和DNA。
而且，可证实联合活性成分和能改善口服吸收的药剂或酶抑制剂，例如P-糖蛋白抑制剂或蛋白酶抑制剂是有利的。
根据另一方面，本发明涉及制备包含分散在连续水相中的单分散脂质相的组合物的方法，其中所述脂质相包含至少一种可结晶的脂质、至少一种活性成分和稳定剂，包括如下步骤i.将活性成分引入可结晶的脂质中；ii.在稳定剂存在下，将获得的脂质相分散在水相中，以形成乳液；iii.使获得的乳液经过剪切处理，以形成单分散的乳剂。
根据本发明的另一方面，本发明涉及制备包含分散在连续水相中的单分散脂质相的组合物的方法，其中所述脂质相包含至少一种可结晶的脂质、至少一种活性成分、稳定剂和分散的水相，包括如下步骤i.适宜时，在存在亲脂性表面活性剂的条件下，将包含活性成分的水溶液分散在包含一种或多种活性成分的脂质熔化物中，ii.使获得的乳液经过剪切处理，使其单分散化；iii.在稳定剂存在下，将单分散乳液加入到水相中，以形成复乳剂；iv.使获得的复乳剂经过剪切处理，以形成单分散的复乳剂。
受控剪切使制备分散相的单分散小滴成为可能；然而，其也可控制小滴或小球的粒径。
优选地，所述受控剪切是通过将乳剂与移动的固体表面接触进行的，速率梯度表征为在垂直于移动中固体表面方向上的乳剂的流速保持恒定。这样的剪切可以在例如由两个同心且互相相对旋转的圆筒构成的小室，例如Couette小室中产生。在这种类型的小室中，剪切是以每分钟旋转的次数和两个圆筒之间的间距限定的。
关于所述方法的详细内容，可参见尤其是专利申请WO 97/38787、FR 2 767 064和WO 01/85319。
可将所得乳剂稀释至想要的浓度。
有利地是，这些方法中的一种或多种还可包括冷却以固化分散的脂质相的步骤。
因此，根据另一方面，本发明涉及包含溶于或分散于可结晶脂质中的活性成分的单分散脂质颗粒，其可通过分散根据本发明组合物的连续相来获得。
可根据本身已知的一种方法，例如冷冻干燥或雾化来除去水相。
根据本发明的组合物可获得可控粒径的单分散脂质颗粒。
因此，根据本发明的组合物特别适于制备递送水溶性和/或弱水溶性活性成分的系统。
附图简述参照下述实施例和附图可更加清楚地理解本发明，其显示

图1.实施例5的组合物的特征时间作为剪切速率的函数；图2.稀释至15％重量分散相的实施例6和7的组合物的特征时间作为剪切速率对数的函数；图3.稀释至15％重量分散相的实施例2和6的组合物的特征时间对数作为剪切速率的函数；图4.30天内实施例6的组合物的颗粒分布的改变；图5.30天内实施例7的组合物的颗粒分布的改变。
具体实施例方式
实施例应当理解，下面提到的乳剂就是本发明的组合物，使用该术语是为了更好地突出组合物中存在的多个相。
单分散乳剂是通过首先制备反相乳剂，再经过适宜的处理以使其单分散而获得的。然后，将反相乳剂引入到外水相中形成复乳剂。
单乳剂是通过简单地将脂肪相在水相中乳化获得的。
实施例1制备反相乳剂在水浴中保持65℃的容器内，将9.9克的PEG-30二多羟硬脂酸酯(dipolyhydroxystearate)(30聚乙二醇单元，Arlacel P135，购自Uniqema)和20.1g的蜡(SuppocireDM，购自Gattefossé，熔点为42℃至46℃的C8至C18饱和脂肪酸甘油酯的混合物)混合。将70g的预热至65℃的氯化钠水溶液(0.6g/l，0.4M)分散在这种脂肪相中。获得包含70％重量分散相的油包水类型的乳剂。
然后将获得的乳剂引入到加热至65℃的Couette装置中，进行剪切，限定自旋速度为400rpm，注射速率为7ml/分，相当于注射速度为0.7。
校准获得的乳剂，其分散相的平均粒径为400纳米，将其贮存在70℃烘箱中。
实施例2复乳剂将40g实施例1中获得的校准的反相乳剂稀释于60g预热至60℃的蜡中(SuppocireDM，C8至C18饱和脂肪酸甘油酯的混合物)，然后，仍旧在65℃，将6g如此获得的稀释校准的反相乳剂加入到4g由水和8％的稳定剂(Gélurire4414，购自Gattefossé，定义为单、二和三酸甘油酯和聚乙二醇与脂肪酸的单、二和三酯的限定的混合物)、11.5％的葡萄糖和0.5％的藻酸钠(HM120L，购自Aldrich)组成的水相中，形成复乳剂。该预混合物包含60％重量的分散相。
在65℃下，将预混合物经过Couette装置剪切，装置的转速为150rpm，注射速度为0.7。校准获得的乳剂，其分散相的平均粒径集中在约4μm。
在乳化后，乳液可被热稀释于包含11.5％葡萄糖的水溶液中，获得想要的脂质相含量。稀释后，将乳液贮存在5℃下。
实施例3复乳剂将实施例1中获得的反相乳剂如实施例2稀释后加入到仅包含5％稳定剂(Gélurire4414)和0.2％藻酸钠的水相中。
将实施例2获得的预混合物经过转速75rpm，注射速度为0.7的Couette装置剪切。校准获得的复乳剂，其分散相的平均粒径为6.86μm。
实施例4复乳剂如实施例2中制备复乳剂，不同是水相包含作为稳定剂的4％PEG-150二硬脂酸酯(StepanPEG6000DS，购自Stepan)和11.5％的葡萄糖。
将预混合物在200rpm和在0.7的注射速率下剪切，获得分散相具有平均直径集中在约4μm的复乳剂。
实施例5单乳剂5-1将6g在60℃水浴加热的蜡(SuppocireDM，C8至C18饱和脂肪酸甘油酯的混合物)加入到4g包含8％重量稳定剂(Gélucire4414)的水溶液中。
然后，将预混合物在Couette装置中在600rpm和在0.7的注射速率下剪切，获得具有平均直径集中在约1μm的单乳剂。
5-2将6g蜡(SuppocireDM，C8至C18饱和脂肪酸甘油酯的混合物)加入到4g包含8％重量稳定剂(Gélucire4414)和0.5％藻酸钠的水溶液中。
然后，将预混合物在Couette装置中在150rpm和在0.7的注射速率下剪切，获得其分散相具有平均直径集中在约6μm的单乳剂。
实施例6单乳剂如上述实施例，将36.5g蜡(SuppocireDM，C8至C18饱和脂肪酸甘油酯的混合物)加入到13.5g包含14.5％重量稳定剂(Gélucire4414)、4.3％重量海藻糖和0.85％重量藻酸钠的水溶液中。
然后，于58℃，将预混合物在Couette装置中在200rpm和在0.7的注射速率下剪切，获得其分散相具有平均直径集中在约4.8μm的单乳剂。
实施例7
单乳剂如实施例5，将36.5g蜡(SuppocireDM，C8至C18饱和脂肪酸甘油酯的混合物)加入到13.5g包含6.6％重量稳定剂(PEG-150二硬脂酸酯，StepanPEG6000DS，购自Stepan)、4.3％重量海藻糖的水溶液中。
然后，于57℃，将预混合物在Couette装置中在200rpm和在0.7的注射速率下剪切获得其分散相具有平均直径集中在约4.8μm的单乳剂。
乳剂的稳定性根据稳定性表征所制备的乳剂特别地，通过流变学研究来评价各种制剂的稳定性。用带有锥体几何学/盘几何学流变仪(RS2，Ademtec)研究乳剂的控制流，该流变仪具有下述特征-直径50mm-锥度0.04rad，-间距0.0453mm流变仪的温度恒定保持在25℃。
将根据上述实施例在某天制备的现有乳剂稀释至想要的脂质组成，然后分成等份于5ml小圆瓶中，以便在进行流变学研究之前每份样品都能接受同样的处理。将这些样品贮存在5℃下。
在每次测定前，轻轻振摇(翻转2至3次)小圆瓶，然后将乳剂小心地倾倒在盘中。
对每份乳剂进行研究发现，在特征时间之后粘性增加。在手振摇后可看到，粘度增加，并伴有乳状纹理的外观。采用的特征时间与获得的最大粘性相对应。
纹理的改变也可通过显微镜观察到。乳剂的纹理以存在的基本上相同尺寸的小球来表征。在粘度增加期间，小球聚集形成不规则和各向异性的分散相簇。
该现象是不可逆的。推测这些簇决定了流动期间的“干扰”现象。
特征时间取决于剪切速率(图1)。特别地，可观察到特征时间随着剪切速率增加而降低。
特征时间遵循以下类型的指数依赖性其点τ等于τ0X(E-γ/γc)，其中1/γc是该现象的特征时间。因此，当特征时间的对数是剪切速率的函数时，获得一曲线，在0剪切时其截距表示处在静息状态，即无剪切的贮存条件下所述物质的使用寿命。
图2中显示的曲线是针对分别稀释至15％重量分散相的实施例5和6的乳剂。这些乳剂的主要区别在于使用的稳定剂的性质。
发现，实施例6的乳剂的特征时间长。这一观测可能得出用包含长PEG链(150PEG单元)的化合物稳定分散相可以为乳剂提供更强的稳定性。另一方面，用包含短PEG链(32个PEG单元)的化合物稳定的乳剂具有较短的特征时间，因而具有较低的稳定性。
其次，还发现单乳剂的特征时间短于可比较的复乳剂的特征时间。图3显示了实施例2和5的分别稀释到15％分散相的乳剂的特征时间作为剪切速率的函数。用相同的化合物稳定这些乳剂。这些特征时间值表明复乳剂比可比较的单乳剂更加稳定。因此，表明在乳剂的分散脂质相中存在分散的水相可稳定乳剂，因而，可延长系统的寿命。
在补充实验中，可观察到混悬液中脂质颗粒的粒径分布的稳定性。
使用购自Malvern的具有150个小室的MasterSizer S激光颗粒测定仪进行颗粒分析，推断分散相的折射指数与在30JD扫描图像中使用的一致。
因此，图4和5分别显示了在不同的时间间隔测量的实施例5和6的乳剂的颗粒分布，其平均小球直径集中在约4μm。在测量中，将稀释至5％分散相的乳剂在5℃下保存。
发现用包含150个PEG单元的稳定剂制备的乳剂比用包含32个PEG单元的稳定剂获得的乳剂具有更好的稳定性。
实施例8冷冻干燥除去乳剂中的水相乳化后，将实施例2至7中获得的校准的乳剂热稀释(典型地在65℃)于包含11.5％海藻糖和0.25％重量透明质酸钠的水溶液中，得到比例为5％重量的脂质相。
然后冷冻乳剂并将其放置在冷冻干燥器(Lyovac GT2 Steris冷冻干燥器和Phoenix C75P Thermo Haake cryostat)中。
获得校准的脂质颗粒。
当通过光学显微镜观察时，获得的颗粒没有表现出任何聚集(再分散于包含表面活性剂的水溶液中)。
权利要求
1.包含分散在连续水相中的单分散脂质相的组合物，其中所述脂质相包含至少一种可结晶的脂质，至少一种活性成分和至少一种包括两条脂肪酸链和一条聚乙二醇链的稳定分散相的化合物。
2.权利要求1所述的组合物，其中内部水相分散在分散的脂质相中。
3.权利要求1或2所述的组合物，其中所述分散的脂质相有0.3至10微米的平均粒径。
4.权利要求1至3中任一项所述的组合物，包含0.01％至30％重量的脂质相。
5.权利要求1至4中任一项所述的组合物，包含0.001％至30％重量的用于稳定所述分散相的化合物。
6.权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中所述聚乙二醇链包含25至1000的乙二醇单元。
7.权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中所述连续水相也包含0.001％至10％重量的增稠剂。
8.权利要求7所述的组合物，其中所述增稠剂是藻酸盐。
9.权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中所述可结晶的脂质选自天然或合成的脂肪酸单、二或三甘油酯、天然蜡或合成蜡、蜡醇及其酯、脂肪醇及其酯和醚、脂肪酸及其酯、脂肪酸甘油酯和氢化的植物油或动物油，单独使用或混合使用。
10.权利要求9所述的组合物，其中所述可结晶的脂质为C12-C18单、二或三甘油酯。
11.权利要求1至10中任一项所述的组合物，其中所述连续水相包含冷冻保护剂。
12.权利要求11所述的组合物，其中所述冷冻保护剂为多元醇或盐。
13.权利要求1至12中任一项的组合物，其中所述脂质相包含至少两种活性成分。
14.权利要求1至13中任一项的组合物，其中所述脂质相包含至少一种水溶性活性成分。
15.权利要求1至14中任一项的组合物，其中所述脂质相包含至少一种弱水溶性活性成分。
16.权利要求1至15中任一项的组合物，其中所述脂质相包含至少一种水溶性活性成分和至少一种弱水溶性活性成分。
17.权利要求1至16中任一项所述的组合物，其中所述活性成分选自药用活性成分、兽用活性成分、植物保护活性成分、化妆用活性成分和农产品活性成分。
18.权利要求1至17中任一项所述的组合物，其中所述活性成分是清洁剂、营养物、抗原或疫苗。
19.权利要求1至18中任一项所述的组合物，其中所述水溶性药用活性成分选自抗生素、降血脂药、抗高血压药、抗病毒剂、β阻滞剂、支气管扩张药、细胞抑制剂、精神调节剂、激素、血管扩张药、抗变态反应药、镇痛剂、解热药、解痉剂、抗炎剂、抗血管生成剂、抗菌剂、抗溃疡剂、抗真菌剂、抗寄生虫剂、抗糖尿病剂、抗癫痫剂、抗震颤麻痹药、抗偏头痛药、抗阿尔茨海默氏病剂、抗痤疮剂、抗青光眼剂、止喘药、安定药、抗抑郁药、抗焦虑药、安眠药、normothymic agent、镇静剂、精神兴奋药、抗骨质疏松药、抗关节炎药、抗凝血剂、抗银屑病剂、升血糖药、促食欲剂、减食欲剂、平喘剂、抗便秘剂、止泻剂、抗创伤剂、利尿剂、肌肉松弛剂、遗尿药物、勃起障碍药物、维生素、肽、蛋白质、抗癌剂、核酸、RNA、寡核苷酸、RNA构成酶和DNA。
20.权利要求1至19中任一项所述的组合物，其中所述活性成分与改善口服吸收的药剂或酶抑制剂联合。
21.权利要求20所述的组合物，其中所述酶抑制剂为P-糖蛋白抑制剂或蛋白酶抑制剂。
22.制备包含分散在连续水相中的单分散脂质相的组合物的方法，其中所述脂质相包含至少一种可结晶的脂质、至少一种活性成分和一种稳定剂，包括如下步骤i将活性成分引入所述可结晶的脂质中；ii在稳定剂存在下，将获得的脂质相分散在水相中，以形成乳液；iii使获得的乳液经过剪切处理，以形成单分散的乳剂。
23.制备包含分散在连续水相中的单分散脂质相的组合物的方法，其中所述脂质相包含至少一种可结晶的脂质、至少一种活性成分、一种稳定剂和一种分散的水相，包括如下步骤在存在亲脂性表面活性剂的情况下，将包含活性成分的水溶液分散在适宜时，包含一种或多种活性成分的脂质熔化物中，i使获得的乳液经过剪切处理，以使其单分散化；ii在稳定剂存在下，将单分散乳液加入到水相中，以形成复乳剂；iii使获得的复乳剂经过剪切处理，以形成单分散复乳剂。
24.权利要求22和23任一项所述的方法，还包括冷却步骤，以固化分散的脂质相。
25.制备包含至少一种活性成分的单分散脂质颗粒的方法，包括除去按照权利要求22至24中任一项的方法制备的组合物中的水相。
26.权利要求25所述的方法，其中如果需要，在包含冷冻保护剂的溶液中稀释所述组合物后通过冷冻干燥除去所述水相。
27.权利要求1至21中任一项所述的组合物或可根据权利要求22至26中任一项所述方法获得的单分散脂质颗粒制备活性成分递送系统的用途。
全文摘要
本发明涉及包含分散在连续水相中的单分散脂质相的组合物，其中所述脂质相包含至少一种可结晶的脂质、至少一种活性成分和至少一种包括两条脂肪酸链和一条聚乙二醇链的化合物。本发明也涉及经由简单的单分散的O/W或W/O复乳剂制备所述组合物的方法。
文档编号A61K47/44GK1867320SQ200480030114
公开日2006年11月22日 申请日期2004年9月30日 优先权日2003年10月13日
发明者A·罗耶尔, J·比贝特, D·巴兹勒 申请人:埃法尔姆公司