专利名称：灯盏花素包合物、含灯盏花素包合物的药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明属于制药领域，涉及一种灯盏花素包合物，本发明还涉及灯盏花素包合物的制备方法、含灯盏花素包合物的药物组合物及其制备方法。
背景技术：
灯盏花素是从菊科飞蓬属植物灯盏花中提取出来的黄酮类有效成分，其主要活性成分是灯盏花素，即4’，5，6-三羟基黄酮-7-葡萄糖醛酸苷。药理研究表明灯盏花素能够大大降低血液粘度，抑制血小板聚合和血栓形成，具有良好的活血化瘀作用，对改善脑血循环，增加脑血流量，降低脑血管阻力，急性脑缺血改善，增加血液纤溶酶活性，防治血液血栓形成等功效显著。
但是，灯盏花素为水不溶、油不溶弱酸性药物，在有机溶剂中的溶解度也很小，在碱性溶液中溶解，油/水分配系数低。目前灯盏花素的剂型有多种，注射用剂型有粉针剂、冻干粉、输液制剂、脂质体冻干粉针剂，口服剂型有普通片剂、软胶囊剂、滴丸、分散片、控释片等，研究表明灯盏花素静脉注射给药后在体内吸收快，半衰期短，体内消除迅速，有效血药浓度维持时间短，而口服灯盏花素普通片后绝对生物利用度很低，几乎不吸收，但其适应症——心脑血管疾病大多是慢性的，治愈难度大，恢复期和后遗症期治疗周期长，注射给药不方便，而口服给药须采用大剂量多次给药才能达到治疗目的，不仅易造成血药浓度峰谷波动现象，且病人的顺应性差，疗效不稳定。因此，需要研究一种新剂型，克服灯盏花素注射给药半衰期过短、体内消除迅速，口服给药生物利用度低的双重缺点的同时，又能保证灯盏花素的治病疗效，使患者用药方便。
环糊精是直链淀粉在由芽孢杆菌产生的环糊精葡萄糖基转移酶作用下生成的一系列环状低聚糖的总体，通常含有6-12个D-吡喃葡萄糖单元，它是由7个葡萄糖分子通过糖苷键结合而呈环形排列的筒状结构，常用来包合疏水性药物，形成环糊精包合物，即“分子微囊”。
发明内容
本发明的目的是提供一种可提高灯盏花素溶出速率和生物利用度的灯盏花素包合物。
本发明另一个目的是提供该灯盏花素包合物的制备方法。
本发明还有一个目的是提供含有上述灯盏花素包合物的药物组合物。
本发明再有一个目的是提供上述药物组合物的制备方法。
本发明的技术方案是根据β-环糊精筒状结构内部呈疏水性，故疏水性客分子易被包合，灯盏花素不溶于水，以分子状态存在，疏水性增加，易被β-环糊精分子包入，形成包合物。包合物的形成主要由主客分子物质量的比所决定，包合物形成时的时间和温度也有一定的影响，时间过短和温度过低包合物不易形成，时间过长和温度过高则稳定性不高。
本发明的目的是通过下列措施来实现的一种灯盏花素包合物，它是通过下列步骤得到的按主客分子比为1∶0.5-3的比例取β-环糊精和灯盏花素，分别配成溶液，在60-80℃下将灯盏花素溶液加入β-环糊精溶液中，包合2-4小时，沉淀，沉淀物洗涤干燥即得黄色粉末状的灯盏花素β-环糊精包合物。
所述的灯盏花素包合物，其中进行包合的灯盏花素溶液采用N，N-二甲基酰胺为溶剂；β-环糊精采用饱和水溶液；加入方法为将灯盏花素溶液缓慢滴入β-环糊精溶液中，恒温搅拌；洗涤方法为将沉淀物用适量乙醇洗涤。
所述的灯盏花素包合物，其中最佳包合条件为主客分子比为1∶2，包合时间为2小时，包合温度为70℃。
所述的灯盏花素包合物的制备方法，它包括下列步骤按主客分子比为1∶0.5-3的比例取β-环糊精和灯盏花素，分别配成溶液，在60-80℃下将灯盏花素溶液加入β-环糊精溶液中，包合2-4小时，沉淀，沉淀物洗涤干燥即可。
所述的灯盏花素包合物的制备方法，其中进行包合的灯盏花素溶液采用N，N-二甲基酰胺为溶剂；β-环糊精采用饱和水溶液；加入方法为将灯盏花素溶液缓慢滴入β-环糊精溶液中，恒温搅拌；洗涤方法为将沉淀物用适量乙醇洗涤。
所述的灯盏花素包合物的制备方法，其中最佳包合条件为主客分子比为1∶2，包合时间为2小时，包合温度为70℃。
上述灯盏花素包合物与药学上可接受的载体形成药物组合物。
所述的药物组合物，其剂型为药学上允许的任何剂型，通常是片剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂、滴丸剂。
所述的药物组合物的制备方法，它是将灯盏花素包合物与药学上可接受的辅料混合均匀，过100目筛，常规工艺制成所需要剂型。
所述的药物组合物的制备方法，其中辅料含崩解剂、稀释剂、填充剂、赋形剂或矫味剂中的一种或多种。
所述的药物组合物的制备方法，其中辅料占药物组合物重量百分比为崩解剂8-12％，稀释剂23-27％，矫味剂28-32％。
所述的药物组合物的制备方法，其中崩解剂为交联羧甲基纤维素钠(CCNa)，稀释剂为微晶纤维素(MCC)。
本发明的有益效果一、包合物的鉴定1、紫外光谱法精密称取β-环糊精0.850g置50ml容量瓶中，加蒸馏水适量溶解并稀释至刻度，摇匀。另精密称取灯盏花素15.6mg，置500ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。精密量取β-环糊精溶液0、0.5、1.0、2.0、4.0ml于5个10ml的量瓶中，分别加上述灯盏花素溶液1.0ml，加水至刻度，摇匀。将配制的5种溶液在200至500nm波长范围内扫描1、灯盏花素3.12mg/ml，β-环糊精0.0000mg/ml；2、灯盏花素，β-环糊精0.8556mg/ml；3、灯盏花素3.12mg/ml，β-环糊精1.7112mg/ml；4、灯盏花素3.12mg/ml，β-环糊精3.4224mg/ml；5、灯盏花素3.12mg/ml，β-环糊精6.8448mg/ml。
灯盏花素与不同浓度β-环糊精溶液紫外吸收情况表明，相同浓度的灯盏花素与不同浓度的β-环糊精所组成的溶液，随着β-环糊精浓度的逐渐升高其紫外吸收度依次降低，说明在溶液中灯盏花索与β-环糊精相互作用，并形成了包合物。
2、X-射线衍射法测试条件管压40KV，管流50mA，铜靶石墨单色器，DS＝SS＝1°，RS＝0.15mm，室温，Cu-Ka靶，扫描速度2°/min。X-射线衍射法常用于鉴定晶体化合物，各晶体物质在相同的角度处具有不同的晶面间距，从而显示出不同的衍射峰。结果见图1-4。在β-环糊精和灯盏花素图中出现的衍射峰在物理混合物图中均可以找到，混合物显示了灯盏花素原料和β-环糊精衍射峰叠加，表明混合物为灯盏花素与β-环糊精的机械混合；而包合物完全是新的衍射图形，出现了新的衍射角6.260，17.940，说明有新的衍射峰产生，而在灯盏花素衍射角为19.080，23.020，30.000，31.580时所出现的衍射峰却消失，同时包合物衍射图谱显示，在灯盏花素衍射图谱中衍射角为25.880的特征衍射峰强度由原来的3096下降为1636，由此可以判断包合物已形成了一种新的物相。
3、红外光谱法扫描条件溴化钾压片法，分辩率4cm-1，扫描范围4000～400cm-1。结果见图5-8，混合物的红外光谱图是β-环糊精和灯盏花素红外光谱图的叠加，在1083-1724cm-1范围内所出现的灯盏花素特征峰都可以在物理混合物的图谱中找到，并且峰强度没有任何改变，说明β-环糊精和灯盏花素只是简单的机械混合，并未发生作用；而包合物的图谱中显示在1083-1724cm-1范围内所出现的峰已经发生了位移，并且峰的强度有明显的减弱，说明环糊精已经包合了灯盏花素，产生了屏蔽作用，所以峰强度有所降低，同时在762.12，739.95，708.35cm-1处出现了新的吸收峰，在物理混合物中未有显示，说明已形成新的物质，证明包合物形成。
通过多种包合物鉴定实验表明，灯盏花素与β-环糊精已经形成了一种新的物相，证明包合物形成。
二、灯盏花素β-环糊精包合物片和普通市售片的比较1、溶出度的比较按转篮法操作。溶出条件以900ml水为溶出介质，转篮转速(100±1)rpm，温度(37±0.5)℃，将制成的灯盏花素片称重后，放入溶出杯中，定时取样2ml(并补以同温度同样量的溶出介质)，用0.8μm的微孔滤膜滤过，置10ml的容量瓶中，用配好的显色剂AlCl3溶液(0.1mol/L)稀释至刻度，然后用紫外进行检测，检测波长为335nm，根据标准曲线方程计算出药物浓度并求得溶出百分率。同样方法检测普通市售片的溶出度。结果见表1及图9。
表1灯盏花素包合物片与普通片溶出度比较
根据溶出度数据比较可知，包含物片明显比市售普通片体外溶出效果要好，在120min内包合物片的累积溶出百分率达到了75％以上，而普通市售片的累积溶出百分率在同一时间内只有9.6％，说明将灯盏花素制成包合物用合适的辅料压片后可明显地提高其溶出度。
2、崩解度的比较灯盏花素包合物片在40s内全部崩解，而普通片在4min内才全部崩解，表明包合物片比普通片崩解迅速。(崩解度测定方法按2000版药典二部附录72规定)三、灯盏花素β-环糊精包合物片药动学实验大鼠分别口服灯盏花素包合物片及普通片后其主要有效成分灯盏花素的经时平均血药浓度曲线见图10。药时数据是采用中国药理学会3P87实用药代计算程度进行处理，根据药代动力学房室模型的判断方法，确定口服灯盏花素包合物片后灯盏花素在体内的过程符合一室模型，药代动力学参数见表2。
表2灯盏花素包合物片与普通片药代动力学参数比较
通过药动学参数结果比较表明，包合物片与普通片相比药物在体内的达峰时间(Tmax)缩短了2.74min，体现了灯盏花素包合物的速释作用，促进药物在体内的吸收，达峰浓度(Cmax)升高了0.0313μg/ml，在体内的滞留时间(MRT)缩短了27.66min，消除半衰期T1/2缩短了14.34min，包合物片比普通片在体内消除迅速，使药物在达到治病疗效的同时不会在体内滞留很长时间。相对生物利用度为110.68％，说明将灯盏花素制成包合物后会有效地改善其在体内的吸收效果，比普通片吸收迅速，明显地提高了生物利用度。
文献报导(陈新谦，金有豫。新编药物学。第14版。北京人民卫生出版社，1997，277。)灯盏花素口服吸收不好，普通片剂口服绝对生物利用度极低，只有0.40±0.196(参见葛庆华，周臻等，灯盏花素在犬体内的药动学和绝对生物利用度研究。中国医药工业杂志，2003，34(12)618-620)。根据上图可知，灯盏花素包合物与普通片比较，包合后最高血药浓度为0.338μg/ml，普通片最高血药浓度为0.184μg/ml，这说明包合后吸收效果更好。
图1是灯盏花素X-射线衍射图。
图2是β-环糊精X-射线衍射图。
图3是灯盏花素与β-环糊精混合物X-射线衍射图。
图4是灯盏花素β-环糊精包合物X-射线衍射图。
图5是灯盏花素红外光谱图。
图6是β-环糊精红外光谱图。
图7是灯盏花素与β-环糊精混合物红外光谱图。
图8是灯盏花素β-环糊精包合物红外光谱图。
图9是灯盏花素包合物片与普通片溶出度比较图。
图10是灯盏花素包合物片与普通片药代动力学参数比较图。
具体实施例方式
以下通过实施例对本发明作进一步的阐述。
实施例1灯盏花素β-环糊精包合物的制备按主客分子比为1∶2的比例取β-环糊精和灯盏花素，分别配成溶液(灯盏花素溶液采用N，N-二甲基酰胺为溶剂，β-环糊精采用饱和水溶液)，在70℃下将灯盏花素溶液缓慢滴入β-环糊精溶液中，恒温搅拌，包合2小时，抽滤，沉淀，将沉淀物用适量乙醇洗涤后，干燥即得黄色粉末状的灯盏花素β-环糊精包合物。
实施例2灯盏花素包合物片剂的制备处方1000片处方量为有效成分灯盏花素β-环糊精包合物(含灯盏花素20g)44g
崩解剂交联羧甲基纤维素钠 30g稀释剂和干粘合剂微晶纤维素75g矫味剂甘露醇 90g填充剂乳糖61g制备方法将灯盏花素β-环糊精包合物与上述辅料按处方量混合均匀，过100目筛，采用直接压片法进行压片，压成1000片，每片含主药量20mg。
实施例3灯盏花素包合物颗粒剂的制备处方1000克处方量为有效成分灯盏花素β-环糊精包合物(含灯盏花素20g)44g崩解剂交联羧甲基纤维素钠 30g稀释剂和干粘合剂微晶纤维素75g矫味剂甘露醇 90g甜叶素 1g填充剂糊精60g制备方法将灯盏花素β-环糊精包合物与上述辅料按处方量混合均匀，过100目筛，采用70％乙醇制粒，干燥、整粒、制成1000g，每克含主药量20mg。
实施例4灯盏花素包合物散剂的制备处方1000袋处方量为有效成分灯盏花素β-环糊精包合物(含灯盏花素20g)44g崩解剂交联羧甲基纤维素钠 30g稀释剂和干粘合剂微晶纤维素75g矫味剂甘露醇 90g填充剂乳糖61g制备方法将灯盏花素β-环糊精包合物与上述辅料按处方量混合均匀，过100目筛，分装，每袋0.3g，制成1000袋，每袋含主药量20mg。
实施例5灯盏花素包合物胶囊剂的制备处方1000粒处方量为有效成分灯盏花素β-环糊精包合物(含灯盏花素20g)44g崩解剂交联羧甲基纤维素钠 30g
稀释剂和干粘合剂微晶纤维素75g矫味剂甘露醇 90g填充剂乳糖61g制备方法将灯盏花素β-环糊精包合物与上述辅料按处方量混合均匀，过100目筛，胶囊填充，每粒装量0.3g，制成1000粒，每粒含主药量20mg。
权利要求
1.一种灯盏花素包合物，其特征在于它是通过下列步骤得到的按主客分子比为1∶0.5-3的比例取β-环糊精和灯盏花素，分别配成溶液，在60-80℃下将灯盏花素溶液加入β-环糊精溶液中，包合2-4小时，沉淀，沉淀物洗涤干燥即得灯盏花素β-环糊精包合物。
2.根据权利要求1所述的灯盏花素包合物，其特征在于进行包合的灯盏花素溶液采用N，N-二甲基酰胺为溶剂；β-环糊精采用饱和水溶液；加入方法为将灯盏花素溶液缓慢滴入β-环糊精溶液中，恒温搅拌；洗涤方法为将沉淀物用适量乙醇洗涤。
3.根据权利要求1所述的灯盏花素包合物，其特征在于最佳包合条件为主客分子比为1∶2，包合时间为2小时，包合温度为70℃。
4.权利要求1所述的灯盏花素包合物的制备方法，其特征在于它包括下列步骤按主客分子比为1∶0.5-3的比例取β-环糊精和灯盏花素，分别配成溶液，在60-80℃下将灯盏花素溶液加入β-环糊精溶液中，包合2-4小时，沉淀，沉淀物洗涤干燥即可。
5.根据权利要求4所述的灯盏花素包合物的制备方法，其特征在于进行包合的灯盏花素溶液采用N，N-二甲基酰胺为溶剂；β-环糊精采用饱和水溶液；加入方法为将灯盏花素溶液缓慢滴入β-环糊精溶液中，恒温搅拌；洗涤方法为将沉淀物用适量乙醇洗涤。
6.根据权利要求4所述的灯盏花素包合物的制备方法，其特征在于最佳包合条件为主客分子比为1∶2，包合时间为2小时，包合温度为70℃。
7.权利要求1所述灯盏花素包合物与药学上可接受的载体形成的药物组合物。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其剂型为药学上允许的任何剂型。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其剂型是片剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂或滴丸剂。
10.权利要求7所述的药物组合物的制备方法，它是将权利要求1所述的灯盏花素包合物与药学上可接受的辅料混合均匀，过100目筛，常规工艺制成所需要剂型。
11.根据权利要求10所述的药物组合物的制备方法，其中辅料含崩解剂、稀释剂、填充剂、赋形剂或矫味剂中的一种或多种。
12.根据权利要求11所述的药物组合物的制备方法，其中辅料占药物组合物重量百分比为崩解剂8-12％，稀释剂23-27％，矫味剂28-32％。
13.根据权利要求11或12所述的药物组合物的制备方法，其中崩解剂为交联羧甲基纤维素钠，稀释剂为微晶纤维素。
全文摘要
本发明公开了一种灯盏花素包合物、含灯盏花素包合物的药物组合物及其制备方法。该灯盏花素包合物通过下列步骤得到的按主客分子比为1∶0.5－3的比例取β－环糊精和灯盏花素，分别配成溶液，在60－80℃下将灯盏花素溶液加入β－环糊精溶液中，包合2－4小时，沉淀，沉淀物洗涤干燥即得灯盏花素β－环糊精包合物。该包合物可与药学上可接受的载体形成的药物组合物。该药物组合物的制备方法是将灯盏花素包合物与药学上可接受的辅料混合均匀，过100目筛，常规工艺制成所需剂型。该包合物可提高灯盏花素溶出速率和生物利用度，该药物组合物使用方便，疗效好。
文档编号A61K9/14GK1759842SQ200510041220
公开日2006年4月19日 申请日期2005年7月28日 优先权日2005年7月28日
发明者濮存海, 刘美辉 申请人:南京中山制药厂