专利名称：一种前列地尔纳米粒制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种前列地尔纳米粒制剂及其制备方法，该制剂主要用于 经皮给药，用于治疗糖尿病性溃疡、肢末端缺血症、烧伤等疾病，属于药 品技术领域。
技术背景前列地尔是一种疗效确切的血管扩张药，是一种人体生理物质，该药 品临床上广泛用于冠心病，脉管炎，血栓病，勃起障碍症的治疗。对溃疡 性疾病，如糖尿病性溃疡，肢末端缺血，烧伤、外伤引起的溃疡也有较好 疗效。该药品目前的给药方式主要为注射剂型，包括粘膜给药的尿道栓剂， 软膏剂。其中软膏剂主要用来治疗糖尿病性溃疡。糖尿病性溃疡主要病因 是存在微循环障碍，目前治疗药物较少，且大多数是采用全身给药方式， 到达患病部位药物浓度较低，而市场部分外用治疗溃疡药物大多只起到杀 菌，收敛作用，没有从根本上解决病因。前列地尔可较好改善微循环，直 接在溃疡面上给药，可最大限度上增加患病部位药物浓度，以发挥作用， 同时避免全身给药导致药物首过效应及全身副作用。前列地尔化学性质极不稳定，对水、热不稳定，很容易降解，体内静脉给药，肺循环一次可灭活90%以上。因此需要连续给药。而前列地尔对 血管刺激性很强，对临床应用有一定限制。因此，研究者开发了一些可以 保护前列地尔稳定性的新剂型。如采用脂微球技术制备的前列地尔乳注射液，a-环糊精包合技术制备的前列地尔包合物粉针，环糊精包合的前列地尔软膏，以及前列地尔脂质体技术等。使用脂微球及脂质体技术，可在体 内、外保护前列地尔药物，减少前列地尔在体内血液循环首过效应，延缓 药物作用时间，并具有耙向作用，减少药物对血管产生的刺激性，但由于 是全身给药，到达患病溃疡部位药物浓度较低，药效减弱，而全身副作用 增强。环糊精包合虽可提高药物体外稳定性，但对首过效应没有明显帮助。 目前已上市的前列地尔软膏采用环糊精包合前列地尔，虽然比全身给药的 注射剂药物作用更为直接、快速、局部有较高药物浓度，但仍存在肺循环 的灭活作用，刺激性大，稳定差的弱点。目前，有关前列地尔公开的文献及专利较多，其中与本申请有一定关联的，包括欧洲专利EP0097481，前列地尔脂肪乳制备方法，该专利涉 及到了一种前列地尔水包油脂肪乳注射液的制备方法。中国专利02110290， 注射用前列腺素EJ旨质体冻干粉针及其生产工艺，该专利涉及到一种前列 地尔脂质体的制备方法。前列地尔环糊精包合物制备专利，该专利涉及一 种前列地尔环糊精包合的制备方法。以上专利均未涉及经皮给药剂型。而 目前市场上已上市的前列地尔软膏处方主要是经a—环糊精包合的前列地 尔，以凡士林为基质直接配制而成，未涉及本申请技术。目前存在的技术， 无论是采用了保护前列地尔技术的脂肪乳注射液，脂质体注射液，环糊精 包合物冻干粉针，还是采用了体外稳定的前列地尔包合物软膏，对于溃疡 病的治疗都存在一定的缺陷，目前临床上还没有一种在化学和生理上都稳 定的经皮给药的前列地尔制剂。 发明内容本发明就是为了解决上述问题而提供一种前列地尔纳米粒制剂及其制 备方法，它是一种在化学和生理上都稳定的经皮给药的前列地尔制剂。为解决上述技术问题，本发明是这样实现的 一种前列地尔纳米粒制 剂，它由下述原料按重量比组成前列地尔脂质成分乳化剂赋形基质水=0.01 0.1:0.5 10:0.5 5:500 950: 5 95。所述的脂质成分是Cs-C3o脂肪酸类、Q-C3。脂肪酸甘油脂类、C8-Qo脂 肪醇类中的一种或他们的混合物。所述的Q-C30脂肪酸类为硬脂酸、棕榈酸、花生酸、山嵛酸、大豆油、麻油、玉米油、橄榄油中的一种或他们的混合物；C8-C3Q脂肪酸甘油脂类 为单甘脂、三硬脂酸甘油酯、单硬脂酸甘油、肉豆蔻酸甘油酯、三月桂酸 甘油酯、山嵛酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、混和酸甘 油酯、脂肪酸聚甘油酯中的一种或他们的混合物；C8-C3Q脂肪醇类为十六 醇、十八醇、鲸腊醇、乳腊、胆固醇中的一种或他们的混合物。所述的乳化剂成分是大豆卵磷脂，蛋黄卵磷酯、伯洛沙姆、吐温类、胆 酸钠、去氧胆酸、牛磺胆酸任意一种或任意混和物。所述的赋形基质是聚乙二醇类，包括聚乙二醇400、聚乙二醇IOOO、聚 乙二醇1500、聚乙二醇3350、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000中的一种或 他们的任意混和物或是凡士林或是卡波姆类中的卡波姆934、卡波姆940、 卡波姆974、卡波姆981或是甲基纤维素、羧甲基纤维素、丙烯酸树脂压 敏胶中的任意一种或他们的混和物。一种前列地尔纳米粒制剂的制备方法，它包括下述步骤按所述重量 比取前列地尔和脂质成分及乳化剂，加热至60-7(TC,使其熔化或溶解,加入前列地尔，加入水,保温至60-8(TC,使用剪切机剪切，形成初乳，然后放入高 压均质机中，在20-100MPa压力下，循环3-10次，迅速冷却至室温，按比例 加入赋形基质，进行搅拌至均匀，放料，包装，即得。一种前列地尔纳米粒经皮制剂的制备方法，采用冷却乳均方法制备， 按所述重量比取前列地尔、脂质成分及乳化剂，在液氮或干冰中固化，在 球磨机中研磨成100iim以下的微粒，并分散在水中，搅拌剪切形成初乳， 然后在室温下放入高压均质机中，在20-100N高压均质循环3-5次，放料， 按比例加入赋形基质，搅拌至均匀，包装，即得。所用的高压均质机和剪切机可以采用超声波粉碎机和胶体磨或微射流 替代。一种前列地尔纳米粒制剂的制备方法，采用微乳法制备，按上述重量 比取前列地尔、脂质成分及乳化剂，和温水，制成外观透明或半透明的o/w 型微乳，然后迅速冷却，加入按重量比例的赋形基质，搅拌至均匀，包装， 即得。一种前列地尔纳米粒制剂的制备方法，采用蒸发法制备，按上述重量 比取前列地尔与脂质成分，加入有机溶剂，溶解，进行薄膜蒸发，蒸去有 机溶剂，然后，加入按比例的乳化剂及水，加入按比例取的赋形剂基质， 搅拌至均匀，放料，即得。前列地尔纳米粒，与软膏基质进行混合制备软膏；与凝胶基质的卡波 姆或纤维素类进行混合得到凝胶；与贴剂基质丙烯酸压敏胶混合，压制成 贴片，得到前列地尔纳米粒贴片。本发明的优点效果及特征如下本发明得到的前列地尔纳米粒制剂，采用了将前列地尔包裹成纳米粒 技术，再采用赋形基质固定而得到的，减少了纳米粒重新聚集机会，使前 列地尔纳米粒更趋于稳定。优点是克服了前列地尔的化学及生理不稳定性， 不但使体外稳定性得到增强，同时，延缓了体内循环降解速度，减少了首 过效应，增加了药物经皮吸收，更易于聚集在患病部位(耙向性)，提高局 部患病部位药物浓度，缓释长效，减少全身副作用，减少药物刺激性。本发明将前列地尔包裹制成一种纳米粒物质，进而同软膏或凝胶基质 或贴剂基质混合，使基质在纳米粒中起到架桥固定作用，固定纳米粒状态， 进而制备成软膏、凝胶、贴剂等经皮给药剂型，所采用的纳米粒技术可以 是固体脂质纳米粒技术，可以是脂微球技术，也可以是脂质体技术，本发明优选固体脂质纳米粒技术(SLN)。
具体实施方式
实施例l:本发明的前列地尔纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成，前列 地尔单硬脂酸甘油脂大豆卵磷酯与P188伯洛沙姆混和物(3: 2):聚 乙二醇4000与聚乙二醇400按3: 2的混合物:水岣.03g: 10 g: 2.5 g: 910g- 95 g。按上述重量比取单硬酯酸甘油酯，大豆卵磷酯与P188伯洛沙姆混和物 (3: 2)，加热至6(TC，使溶化，加入前列地尔0.03g，混匀，加入同样温 度的按上述比例的水，保温情况下进行剪切搅拌5分钟，然后放料进高压 均质机，升高压力至50MPa下循环5次，放料，迅速冷却至室温，按上述 比例加入聚乙二醇4000与聚乙二醇400的混合物(3: 2)，进行充分搅拌，即得。
前列地尔纳米粒粒经测定，取实施例1得到的样品100mg，溶于10ml 蒸馏水，使用激光散射光谱仪(PCS)进行粒经测定，结果，90%粒径分布 在100-150nm。药物含量测定，称取按实施例1制备的样品lg，加入甲醇， 定容为10ml，进行冷冻2小时，迅速过滤，续滤液为供试品，按照高效液 相法，采用C18柱，流动相为0. 02mol/L磷酸二氢钾(PH=4. 7) (40 :60)，流速l.Oml/min 柱温室温，测定波长为214nm，按外标 法测定，测定结果含量为27 U g/g。
药物分布及包封率测定，按实施例1得到的样品100mg，加蒸馏水10ml， 使用截留分子量5000的超滤离心管，以5000rpm离心，得滤液，按照上述 高效液相法测定，结果测得药物包封率92%。
药物体外释放测定取按实施例1制备的样品5g，采用表玻片法(watch glass，WG)，将药物装入铝质软膏池中，将样品池放入溶出仪(天大药物溶 出仪2RD6-B型)中，以0.5%十二烷基硫酸钠的磷酸盐缓冲液(PH4.0)溶 液为释放溶剂。溶剂温度为37°C±0.5°C。进行96小时测定。同时进行前 列地尔a -环糊精包合物聚乙二醇软膏释放对照。证明本发明纳米粒软膏具 有缓释，长效作用。测定同时检测前列地尔及降解产物PGA!， PGA,可折 算成PGE,，经96小时释放，释放率测定，结果为释放了97%药物，而在 48小时内释放了 70%。
局部刺激性毒性试验，目的是观察动物完整皮肤及破损皮肤接触受试 药物后所产生的毒性效应。取按实施例1制备的样品，及采用前列地尔原 料药制备的聚乙二醇软膏为对照。新西兰家免20只，体重2-2.5kg，雌雄各半，雌性无孕。将家免随机分 为5组，第一组为对照组(涂赋形剂)，第二、第三组为试验组(完整皮肤 和破损皮肤)，第四、第五组为对照组(完整皮肤和破损皮肤)，每组4只， 雌雄各半。于给药前24h，采用剪，剃刀及脱毛剂硫化钠将背部脊柱两侧去 毛，去毛面积约为体表面积的10%，约15cmX10cm。去毛后24h检査去毛 皮肤是否因去毛而受伤，受伤皮肤不宜做完好皮肤毒性试验，破损皮肤的 制作采用一次性注射器针头将去毛消毒皮肤划伤划一 形伤口，长宽均 为5cm，以渗血为度。受试物均涂于脱毛区，并用无菌纱布及无剌激性胶 布加以固定。分笼饲养。给药24h后，用温水洗去残留的药物，去除药物 后lh， 24h， 48h， 72h至第7天，每天观察并记录动物体重，皮肤毛发， 眼和粘膜，呼吸，中枢神经，旧肢活动及其它中毒表现。试验结果，于去 除药物后lh， 24h， 48h， 72 h， 7天观察上述家免，赋形剂组及试验组完整 皮肤和破损皮肤未出现毒性反应，但对照组完整皮肤涂抹部位出现红斑现 象。显示具有一定刺激性，对照组破损皮肤组，破损皮肤在给药期间有红 肿，去药后24h后消失。显示具有一定刺激性。 实施例2
本发明的前列地尔纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成，前列
地尔三棕榈酸甘油酯蛋黄卵磷酯聚乙二醇6000与聚乙二醇400混合 物(2: 1):水二0.01g: lg: 2g: 900g: 95g。
制备方法按实施例2的各种原料重量比取原料，其制备方法也可以采 用冷却乳均方法制备，按所述重量比取前列地尔及蛋黄卵磷酯，在液氮中 固化，在球磨机中研磨成100um以下的微粒，将分散在水中，搅拌剪切形成初乳，然后在室温下放入高压均质机中，在20MPa高压均质机中循环5 次，放料，按比例加入聚乙二醇6000与聚乙二醇400混合物(2: 1)，搅 拌至均匀，包装，即得。 实施例3
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成，前列地尔山 俞酸甘油酯大豆卵磷酯卡波姆940:水二0.05g: 0.5g: 0.5g: 700g: 30g。
制备方法中，除将卡波姆事先用5倍水水合2小时后投料外，其它同
实施例1 。
实施例4
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成前列地尔单 硬脂酸酯大豆卵磷脂与牛磺胆酸混合物聚乙二醇1000:水
:0.1g:10g:5g:500g:85g。
制备方法同实施例2，但在干冰中固化，在100MPa高压均质机中循环
实施例5
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成前列地尔大 豆油蛋黄卵磷脂与去氧胆酸(2: 1)混合物聚乙二醇1500:水i.05g: 8g: l,5g: 800g: 50g。
制备方法按实施例1进行，但加热温度为70°C，在20Mpa压力循环10 次。本例中，大豆油可以用麻油、玉米油、橄榄油替换。 实施例6
本发明者的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成前列地尔胆固醇大豆卵磷脂与P188伯洛沙姆(2: 1)混合物卡波姆974:水=
0.07g: 5g: 2g: 800g- 93g。
按上述重量比取前列地尔及胆固醇溶于20ml氯仿中，薄膜蒸发去掉氯 仿，加入按上述重量比的乳化剂大豆卵磷酯及P188伯洛沙姆分散水溶液， 振荡，超声5分钟，加800g水合卡波姆974，搅拌均匀，得成品。 实施例7
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成前列地尔大 豆油大豆卵磷酯聚乙二醇水二0.03g:8g: 2 g: 820g: 93g。
按上述重量比取前列地尔及大豆油、大豆卵磷脂、聚乙二醇及水，按 照实施例1方法制备。
实施例8
按实施例1的制备方法，可以采用超声粉碎法替代高压乳匀法，即采 用超声粉碎机将初乳样品进行IO分钟超声粉碎，其它同实施例1。 实施例9
按实施例1的制备方法，可以采用胶体磨法替代高压乳匀法，即采用 胶体磨对样品进行乳化均质20次，其它同实施例1 。 实施例10
按实施例1的制备方法，可以采用微射流替代高压乳匀法,其它同例1。 实施例11
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成前列地尔三 月桂酸甘油酯大豆卵磷酯与吐温20 (4: l)混合物聚乙二醇3350与聚 乙二醇400混和物水二0.03g: 6g: 3g: 600g: 20g 。按上述重量比取三月桂酸甘油酯，加热至7(TC，使溶化，加入前列地
尔，搅拌均匀，加入等温含乳化剂大豆卵磷脂与吐温20的水溶液，迅速搅 拌混合5分钟，降温至室温，加入按上述重量比的聚乙二醇3350与聚乙二 醇400的混合物(5: 3)，搅拌混合均匀得成品。 实施例12
按实施例1得到的前列地尔纳米粒，加入丙烯酸酯类压敏胶，混合均匀 后，在无纺布或高分子聚合物衬材上涂布，压制成贴片。 实施例13
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成前列地尔鲸 腊醇胆酸钠凡士林水二0,03g: 10g: 2g: 500g: 5g。
按上述重量比取鲸腊醇及前列地尔，加热至7(TC溶化，加入胆酸钠和 水，按照实施例1的方法制备纳米粒，然后按比例取凡士林，进行混合， 即得。
实施例14
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成，前列地尔三硬 脂酸甘油酯胆酸钠和胆固醇的混合物卡波姆934:水二0.08g: 3g: lg:
730g: 60g。
制备方法同实施例2，在50MPa高压均质机中循环4次。 实施例15
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成，前列地尔肉 豆蔻酸甘油酯蛋黄卵磷酯卡波姆981:水=0.6§: 0.7g: 0.8g: 550g:
35g。制备方法同实施例l，但加热温度为55t:，在100Mpa压力循环3次。 实施例16
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成，前列地尔三 肉豆蔻酸甘油酯蛋黄卵磷酯甲基纤维素7jC = 0.5g: 7g: 2.5g: 750g:
70g。
制备方法采用微乳法制备，按上述重量比取前列地尔脂质成分及三肉
豆蔻酸甘油酯、蛋黄卵磷酯和温水，制成外观透明或半透明的o/w型微乳，
然后迅速冷却，加入按重量比例的甲基纤维素，搅拌至均匀，包装，即得。
实施例17
本发明的纳米粒经皮制剂，由下述原料按重量比组成，前列地尔混 和酸甘油酯和脂肪酸聚甘油酯混合物蛋黄卵磷酯甲基纤维素和羧甲基 纤维素的任意比混合物水二0.5g: 8g: 4g: 850g: 80g。 制备方法同实施例1。
实施例18
实施例16中的甲基纤维素和羧甲基纤维素混合物可以由羧甲基纤维素 和丙烯酸树脂压敏胶的任意比混合物替代。 实施例19
实施例1中的单硬酯酸甘油脂可以由脂肪酸、棕榈酸、花生酸、山嵛 酸、单甘脂、十六醇、十八醇、乳腊中的一种或其它们的任意混合物替代， 其它同实施例l。
权利要求
1、一种前列地尔纳米粒制剂，其特征是它由下述原料按重量比组成，前列地尔∶脂质成分∶乳化剂∶赋形基质∶水＝0.01～0.1∶0.5～10∶0.5～5∶500～950∶5～95。
2、 根据权利要求1所述的前列地尔纳米粒制剂，其特征在于所述的脂质成分为CVC30脂肪酸类、Cs-C3。脂肪酸甘油脂类、Cs-C30脂肪醇类中的一种或他们的混合物。
3、 根据权利要求2所述的前列地尔纳米粒制剂，其特征在于所述的 Q-C3o脂肪酸类为硬脂酸、棕榈酸、花生酸、山嵛酸、大豆油、麻油、玉米 油、橄榄油中的一种或他们的混合物；Q-C3。脂肪酸甘油脂类为单甘脂、 三硬脂酸甘油酯、单硬脂酸甘油、肉豆蔻酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、山 嵛酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、混和酸甘油酯、脂肪 酸聚甘油酯中的一种或他们的混合物；C8-Qo脂肪醇类为十六醇、十八醇、 鲸腊醇、乳腊、胆固醇中的一种或他们的混合物。
4、 根据权利要求1所述的前列地尔纳米粒制剂，其特征在于所述的乳 化剂成分为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷酯、伯洛沙姆、吐温类、胆酸钠、去氧 胆酸、牛磺胆酸中任意一种或任意混和物。
5、 根据权利要求l所述的前列地尔纳米粒制剂，其特征在于所述的赋 形基质是聚乙二醇类，包括聚乙二醇400、聚乙二醇IOOO、聚乙二醇1500、 聚乙二醇3350、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000中的一种或他们的任意混 和物；或是凡士林、卡波姆类中的卡波姆934、卡波姆940、卡波姆974、卡波姆981、甲基纤维素、羧甲基纤维素、丙烯酸树脂压敏胶中的任意一种或他们的混和物。
6、 一种权利要求1所述的前列地尔纳米粒制剂的制备方法，其特征在于它包括下述步骤按所述重量比取前列地尔和脂质成分及乳化剂，加热至60-7(TC，使其熔化或溶解，加入前列地尔，加入水，保温至60-8(TC， 使用剪切机剪切，形成初乳，然后放入高压均质机中，在20-100MPa压力 下，循环3-10次，迅速冷却至室温,按比例加入赋形基质,进行搅拌至均匀， 放料，包装，即得。
7、 一种权利要求1所述的前列地尔纳米粒制剂的制备方法，其特征在 于采用冷却乳均方法制备，按所述重量比取前列地尔脂质成分及乳化剂， 在液氮或干冰中固化，在球磨机中研磨成100um以下的微粒，并分散在水 中，搅拌剪切形成初乳，然后在室温下放入高压均质机中，在20-100N高 压均质循环3-5次，放料，按比例加入赋形基质，搅拌至均匀，包装，即得。
8、 一种权利要求6或7所述的前列地尔纳米粒制剂的制备方法，其特 征在于所用的高压均质机和剪切机可以由超声波粉碎机、胶体磨或微射流 替代。
9、 一种权利要求1所述的前列地尔纳米粒制剂的制备方法，其特征在 于采用微乳法制备，按上述重量比取前列地尔脂质成分及乳化剂，和温水， 制成外观透明或半透明的0/W型微乳，然后迅速冷却，加入按重量比例的 赋形基质，搅拌至均匀，包装，即得。
10、 一种权利要求1所述的前列地尔纳米粒制剂的制备方法，其特征 在于采用蒸发法制备，按上述重量比取前列地尔与脂质成分，加入有机溶齐U，溶解，进行薄膜蒸发，蒸去有机溶剂，然后，加入按比例的乳化剂及 水，加入按比例取的赋形剂基质，搅拌至均匀，放料，即得。
全文摘要
本发明涉及一种前列地尔纳米粒制剂及其制备方法，该制剂主要用于经皮给药，用于治疗糖尿病性溃疡、肢末端缺血症、烧伤等疾病，属于药品技术领域。它由下述原料按重量比组成，前列地尔∶脂质成分∶乳化剂∶赋形基质∶水＝0.01～0.1∶0.5～10∶0.5～5∶500～950∶5～95。本发明优点是克服了前列地尔的化学及生理不稳定性，使体外稳定性得到增强，同时，减少体内肺循环的灭活作用导致的前列地尔降解，提高局部患病部位药物浓度，更易于聚集在患病部位，缓释长效，减少药物刺激性。
文档编号A61K31/557GK101322712SQ20071001169
公开日2008年12月17日 申请日期2007年6月14日 优先权日2007年6月14日
发明者张乃先, 莉 艾, 董英杰, 邹小峰 申请人:沈阳市万嘉生物技术研究所