专利名称：含牛蒡子苷元的药用组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种含牛蒡子苷元的药用组合物及其制备方法，具体为牛蒡子苷元与环糊精包合物。
背景技术：
牛蒡ArctiumlappaL.为菊科(Compositae)牛蒡属植物，其种子、根、叶均可入药。牛蒡常用的药用部位为其果实，称牛蒡子。其味辛苦、寒。具疏散风热、宣肺透疹、消肿解毒之功效，用于风热感冒、咳嗽痰多、咽喉肿痛、斑疹不透、风疹作痒、痈肿疮毒等症。牛蒡子中主要含有木脂素及其苷类。自然界中已发现的木脂素的种类有很多，近年的研究表明不同结构类型的木脂素的生理和药理活性不尽相同。牛蒡子中的木脂素类成分主要含牛蒡子苷和牛蒡子苷元(arctigenin)。牛蒡子苷元分子式C21H24O6；分子量372；结构式如下 牛蒡子苷元的分子结构据报道，大鼠口服牛蒡(Arctium lappa)种子中的高含量成分牛蒡子苷经大鼠肠道菌群转化为代谢物牛蒡子苷元，表明牛蒡子苷为苷元活性前体物质。牛蒡子苷元活性报道主要有以下几方面1、抗病毒和抗炎；2)免疫调节作用；3)降血糖作用；4)抗肿瘤作用。
由于牛蒡子苷元为脂溶性化合物，其制剂应用尤其是注射给药受到限制，尚未发现相关报告。本发明通过试验研究解决了牛蒡子苷元溶解性问题，扩大了牛蒡子苷元的应用范围，并提高了牛蒡子苷元的生物利用度。
发明内容
本发明的目的是提供一种含牛蒡子苷元的药用组合物及其制备方法，在不改变牛蒡子苷元结构的前提下，增加牛蒡子苷元水溶性，克服牛蒡子苷元溶解性差之缺陷，并增加其生物利用度。其特征是选择环糊精衍生物作为包合材料，将牛蒡子苷元制成包合物，以此增加牛蒡子苷元在水中的溶解度。环糊精与牛蒡子苷元的比例可以是3g-30g∶1g范围的任何一种比例。进一步优选的环糊精与牛蒡子苷元的比例是3g-10g∶1g。所说的环糊精衍生物包括各种取代度的α-环糊精衍生物、β-环糊精衍生物、羟丙基-γ-环糊精衍生物及磺丁基醚-β-环糊精衍生物等，其中羟羟丙基-β-环糊精为优选环糊精。
本发明的技术解决方案是将牛蒡子苷元加入适量的有机溶剂溶解，在搅拌情况下，滴加到水溶解的环糊精衍生物溶液中，继续搅拌混合溶液，使环糊精衍生物将牛蒡子苷元包合完全。由此制备具有较好水溶性的制剂。
具体工艺如下取1重量份的牛蒡子苷元，用约150重量份60％乙醇加热溶解；取3-30重量份的环糊精衍生物，加两倍环糊精衍生物量的水搅拌溶解，至环糊精衍生物溶液呈粘稠状。
将两份溶液放入水浴中，高速搅拌情况下，将牛蒡子苷元溶液滴加到环糊精衍生物溶液中。继续搅拌溶液，直至呈粘稠状。得到牛蒡子苷元环糊精混合物。
牛蒡子苷元环糊精包合物加入一种或多种药用辅料可制成任何一种药剂学上的剂型，如口服的片剂、胶囊剂；注射用的注射剂等等。
牛蒡子苷元组合物抗炎剂量范围为每人每日125-500mg，用法可以静脉注射，也可口服。因为该给药剂量是根据动物药理试验推算而得，鉴于动物与人体的差异性，故实际临床用量可以允许有所调整。
具体实施例方式下列实施例旨在进一步举例描述本发明，而不是以任何方式限制本发明，在不背离本发明的精神和原则的前提下，对本发明所做的本领域普通技术人员容易实现的任何改动都将落入本发明的待批权利要求范围之内。
本发明所述的牛蒡子苷元自制。实施例中羟丙基-β-环糊精采用西安德立生化工提供的市售品。羟丙基-α-环糊精、羟丙基-γ-环糊精购自广州市泰龙生化有限公司。
制备例1制备牛蒡子苷牛蒡子磨成粗粉，经石油醚、乙酸乙酯和80％乙醇依次回流提取，分别回收溶剂，取醇提物部分。将此提取物用水调至一定体积，用正丁醇萃取，回收正丁醇，得正丁醇萃取物，取上述正丁醇萃取物干膏，进行大孔吸附树脂柱层析(干膏与树脂的比例为1∶30)。先用水洗至洗脱液无色，然后改用30％乙醇洗脱至其液无色，回收乙醇后浓缩静置，继而出现灰白色粉末颗粒。灰白色粉末通过硅胶H减压柱(干法装柱)，以氯仿-甲醇(9∶1)洗脱，回收溶剂后，得纯白色结晶即为牛蒡子苷，HPLC法测得纯度为98.3％。
制备例2制备牛蒡子苷元取制备例1中牛蒡子苷加入无菌水中加热溶解，放冷，加入适量蜗牛酶，37℃恒温摇床培养36小时，加入乙醇中止酶解反应，将酶解液减压蒸干，残留物加氯仿溶解，取氯仿液，回收溶剂得降解物，将所得降解物通过硅胶H减压柱(干法装柱)，以氯仿-甲醇梯度洗脱，回收溶剂后，得纯白色结晶即为牛蒡子苷元，HPLC法测得纯度为98.2％。
实施例1取牛蒡子苷元100mg，用60％乙醇约15mL加热使之溶解；称取羟丙基-β-环糊精3.0g，加水5mL室温下搅拌溶解。滴加牛蒡子苷元溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例2取牛蒡子苷元100mg，用70％乙醇约15mL加热使之溶解；称取羟丙基-β-环糊精0.3g，加水15mL室温下搅拌溶解。滴加牛蒡子苷元溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例3取牛蒡子苷元100mg，用65％乙醇约15mL加热使之溶解；称取羟丙基-β-环糊精1.0g，加水10mL室温下搅拌溶解。滴加牛蒡子苷元溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例4取牛蒡子苷元100mg，用丙酮约5mL加热使之溶解；称取羟丙基-α-环糊精2.0g，加水5mL室温下搅拌溶解。滴加牛蒡子苷元溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例5取牛蒡子苷元100mg，用无水乙醇约15mL加热使之溶解；称取羟丙基-γ-环糊精1.3g，加水5mL室温下搅拌溶解。滴加牛蒡子苷元溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例6取牛蒡子苷元100mg，用甲醇约15mL加热使之溶解；称取磺丁基醚-β-环糊精3.0g，加水20mL室温下搅拌溶解。滴加牛蒡子苷元溶液。加完溶液，继续搅拌，直至溶液呈粘稠状，减压干燥，即得。
实施例7称取实施例3制备牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精包合物1000g，过80目筛，加入微晶纤维素1000g作为稀释剂组成制剂配方，混匀，加入粘合剂制软材，用24目筛制粒，干燥后整粒，加入适量润滑剂，压片，包衣，即得，含药量为100mg/片。
实施例8称取实施例3制备牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精包合物100g，加注射用水制成1000ml，过0.2μm膜，分装10ml/瓶，轧盖，121℃灭菌15分钟，即得10mg/ml。
试验例1牛蒡子苷元环糊精包合物溶解度测定分别精密称取研成细粉牛蒡子苷元5mg和牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精包合物500mg(按实施例3制备)，置于25±2℃50ml蒸馏水中，每隔5分钟强力振摇30秒钟；观察30分钟内的溶解情况。牛蒡子苷元仍有可见溶质颗粒，其水溶解度小于0.1mg/ml，属水几乎不溶物质；牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精则完全溶解。
另精密称取研成细粉牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精包合物3000mg(按实施例3制备)，置于25℃±2℃30ml蒸馏水中，每隔5分钟强力振摇30秒钟；观察30分钟内的溶解情况，牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精完全溶解。因此牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精水溶解度大于100mg/ml，属水溶物质。
试验例2牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精包合物与牛蒡子苷元口服生物利用度比较。
1.药液配制称取牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精包合物(按实施例2制备)适量，加去离子水溶解，配成浓度为含牛蒡子苷元5mg/mL溶液，为样A；称取牛蒡子苷元适量，加1％羧甲基纤维素钠溶液混悬，制成5mg/mL混悬液，为样B。
2.灌胃给药方案大鼠禁食16h，自由饮水，分别灌胃给药样A和样B，剂量分别为50mg/kg。分别于给药前5min和给药后15min、30min、45min、60min、90min、120min、180min、240min、300min、、360min、480min取血，分离血清。
3.样品处理血浆样品的处理精密吸取血浆便样品0.2mL，精密加入冷藏的10％三氯乙酸40μL，涡旋3min，12000r/min离心10min，吸取上清液约120μL置于尖底进样瓶中，HPLC自动进样。
4样品的测定4.1仪器1100系列高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；包括G1312A二元泵，G1313A自动进样器，4.2血浆样品测定的色谱条件色谱柱discover ODS柱(250mm×4mm，5μm)；流动相甲醇∶水(60∶50)；流速1mL/min检测波长280nm。
4.3结果表1牛蒡子苷元包合物与牛蒡子苷元的生物利用度比较
上述结果显示口服牛蒡子苷元羟丙基-β-环糊精包合物血药浓度(Cmax)远高于口服牛蒡子苷元血药浓度(Cmax)，表明牛蒡子苷元包合物生物利用度有较大提高。
试验例3牛蒡子苷元包合物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
1.材料与动物牛蒡子苷元包合物分别按实施例7、8制备后用于灌胃与注射。
地塞米松批号0601146，郑州羚锐制药有限公司生产。
二甲苯杭州中山化学有限公司生产。
昆明种小鼠，昆明医学院实验动物中心提供。
2.分组及方法取昆明种小白鼠80只，随机分为8组。模型组(羟丙基-β-环糊精)、牛蒡子苷元包合物高剂量组(ip，100mg/kg)、中剂量组(ip，50mg/kg)、低剂量组(ip，25mg/kg)、牛蒡子苷元包合物高剂量组(ig，100mg/kg)、中剂量组(ig，50mg/kg)、低剂量组(ig，25mg/kg)、地塞米松阳性对照组(ip，2mg/kg)。给药后40min，将50μl二甲苯涂于小鼠右耳廓两面致炎，左耳作为对照，致炎后1h断颈处死动力，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9mm的打孔器分别在同一部位打下耳片，即时称重，计算各组肿胀度及抑制率。
肿胀度(mg)＝左耳耳片重(mg)—右耳耳片重(mg)抑制率(％)＝(模型组平均耳片重—给药组平均耳片重)/模型组平均耳片重×100％3.结果牛蒡子苷元包合物(25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg)无论口服还是腹腔注射均可显著抑制二甲苯引起的耳廓肿胀，但注射效果优于口服。详见表1。
表1牛蒡子苷元包合物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(x±s，n＝10)
注与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
权利要求
1.一种含牛蒡子苷元和环糊精衍生物的药物组合物，其特征在于牛蒡子苷元被包含在环糊精衍生物中，二者配比为牛蒡子苷元1g、环糊精衍生物3g～30g。
2.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于牛蒡子苷元被包含在环糊精衍生物中，二者配比为牛蒡子苷元1g、环糊精衍生物3g～10g。
3.权利要求1的药物组合物，其特征在于环糊精衍生物可以选自各种取代度的α-环糊精衍生物、β-环糊精衍生物、γ-环糊精衍生物及磺丁基醚-β-环糊精衍生物。
4.权利要求1的药物组合物，其特征在于环糊精衍生物优选为羟丙基-β-环糊精衍生物。
5.权利要求1的药物组合物的制备方法，其特征在于取1重量份的牛蒡子苷元，用适当溶剂溶解；取3-30重量份的环糊精衍生物，加适量的水搅拌溶解，高速搅拌情况下，将牛蒡子苷元溶液滴加到环糊精衍生物溶液中，继续搅拌溶液，直至呈粘稠状，得到牛蒡子苷元环糊精混合物。
6.权利要求1的药用组合物加入一种或多种药用辅料制成任何一种药剂学上的剂型。
全文摘要
一种含牛蒡子苷元的药用组合物及其制备方法，具体为牛蒡子苷元被包合在环糊精衍生物中，且二者配比在1g∶3g－30g范围内，该组合物可有效增加牛蒡子苷元的溶解度及生物利用度。
文档编号A61P3/00GK101036644SQ200710135648
公开日2007年9月19日 申请日期2007年3月7日 优先权日2006年3月13日
发明者滕厚雷, 于翠翠, 韩飞, 翟大伟, 刘军锋, 邵萌 申请人:海南盛科天然药物研究院有限公司