水溶性cc-1065类似物及其缀合物的制作方法

专利名称：水溶性cc-1065类似物及其缀合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及对映异构纯和/或非对映异构纯的式(I)-(IV)化合物以及式(I)-(IV)化合物的对映异构和/或非对映异构混合物。
意外地发现，式(III)的化合物展示出高的细胞毒性商(cytotoxicityquotient)，此外，式(I)和(II)的母体化合物显示出比现有领域的类似化合物更高的细胞毒性和更大的水溶性。这些性质使得式(III)的化合物特别适合用于递药，包括药物靶向和控释应用。
附图简述

图1说明了开环化合物重排为包含环丙基的化合物。
图2说明了通过将DAN烷化单位偶联至DNA结合单位而制备的一些药物。
图3说明了本发明的一些β-吡喃半乳糖缀合物的制备。
图4示意了DNA结合剂13的制备。
图5说明了DNA结合剂19的制备。
图6描述了DNA结合剂27的制备。
图7说明了DNA结合剂30的制备。
图8说明了从DNA结合剂41制备化合物37-39。
图9说明了药物45的合成。
图10描述了药物33的合成。
图11说明了缀合物36的制备。
图12描述了连接基-药物缀合物47a-f的合成。
图13示意了连接基-药物缀合物48c-d的合成。
图14说明了连接基-药物缀合物50a-c的制备。
图15描述了活化的连接基57-60的合成。
图16示意了缀合物8a和8a′对人肺癌细胞系A549的体外细胞毒性。
图17示意了ADEPT体内实验的治疗进度表。
图18示意了ADEPT体内实验中的受治和对照小鼠的肿瘤体积。
发明描述 提供下列详述，从而可以更充分地理解本发明。
定义 除非另有定义，本文使用的所有化学和科学术语一般具有与本领域普通技术人员通常所理解的相同的意义。
在用于本文时，术语“抗体”指全长免疫球蛋白分子、全长免疫球蛋白分子的免疫活性部分、或全长免疫球蛋白分子或其活性部分的衍生物，即包含抗原结合位置的分子，所述抗原结合位置可免疫特异性地结合相关标靶或其部分的抗原，这些标靶包括但不限于肿瘤细胞。免疫球蛋白可以是任何类型(例如IgG、IgE、IgM、IgD、IgA、和IgY)、种类(例如IgG1、IgG2，、IgG3、IgG4、IgA1、和IgA2)、或子类的免疫球蛋白分子。免疫球蛋白可以源自任何物种，例如人、啮齿动物(例如小鼠、大鼠、或仓鼠)、驴、绵羊、兔子、山羊、豚鼠、骆驼(camelid)、马、牛、或鸡，但优选源自人、鼠、或兔子。可用于本发明的抗体包括但不限于单克隆的、多克隆的、双特异性的、人、人化、或嵌合抗体、单链抗体、Fv片段、Fab片段、F(ab′)片段、F(ab′)2片段、由Fab表达库产生的片段、抗独特型抗体、CDRs、和免疫特异性地结合至相关抗原的任何上述抗体的表位结合片段。
术语“离去基团”指可以被另一个基团取代的基团。这些离去基团是本领域公知的，实例包括但不限于卤素(氟、氯、溴、碘)、磺酸盐(例如甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、和三氟甲磺酸盐)、琥珀酰亚胺-N-氧化物、对硝基苯氧化物、五氟苯氧化物、四氟苯氧化物、羧酸盐、和烷氧基羧酸盐。
术语“水溶性基团”指在水性环境中充分溶剂化并为它所连接的化合物提供改善的水溶性的官能团。水溶性基团的实例包括但不限于醇和多元醇、直链或环状糖、伯、仲、叔或季胺和聚胺、硫酸盐基团、羧酸盐基团、磷酸盐基团、膦酸盐基团、抗坏血酸盐基团、包括聚乙二醇的二醇、和聚醚。
当用于形容“烷基”、“杂烷基”、“环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”等时，术语“取代(的)”表示所述“烷基”、“杂烷基”、“环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、或“杂芳基”基团包含一个或多个取代基，所述取代基包括但不限于OH、＝O、＝S、＝NRh、＝N-ORh、SH、NH2、NO2、NO、N3、CF3、CN、OCN、SCN、NCO、NCS、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rh、SRh、S(O)Rh、S(O)ORh、S(O)2Rh、S(O)2ORh、OS(O)Rh、OS(O)ORh、OS(O)2Rh、OS(O)2ORh、OP(O)(ORh)(ORi)、P(O)(ORh)(ORi)、ORh、NHRi、N(Rh)Ri、+N(Rh)(Ri)Rj、Si(Rh)(Ri)(Rj)、C(O)Rh、C(O)ORh、C(O)N(Ri)Rh、OC(O)Rh、 OC(O)ORh、 OC(O)N(Rh)Ri、N(Ri)C(O)Rh、N(Ri)C(O)ORh、N(Ri)C(O)N(Rj)Rh、这些取代基的硫代衍生物、或任何这些取代基的质子化或去质子化形式，其中Rh、Ri、和Rj独立地选自H和任选取代的C1-15烷基、C1-15杂烷基、C3-15环烷基、C3-15杂环烷基、C4-15芳基、或C4-15杂芳基或其组合，Rh、Ri、和Rj中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个碳环或杂环。
在用于本文时，术语“芳基”指碳环芳族取代基，它可以由一个环或稠合到一起的两个或更多个环组成。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、和蒽基。
在用于本文时，术语“杂芳基”指碳环芳族取代基，它可以由一个环或稠合到一起的两个或更多个环组成，其中一个环内的至少一个碳被杂原子代替。杂芳基的实例包括但不限于吡啶基、呋喃基、吡咯基、三唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、苯并异噁唑基、和喹啉基。
在用于本文时，术语“烷基”指直链或支化、饱和或不饱和的烃取代基。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、辛基、癸基、异丙基、仲丁基、异丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、乙烯基、烯丙基、1-丁烯基、2-丁烯基、异丁烯基、1-戊烯基、和2-戊烯基。
在用于本文时，术语“杂烷基”指直链或支化、饱和或不饱和的烃取代基，其中至少一个碳被杂原子代替。实例包括但不限于甲基氧基甲基、乙基氧基甲基、甲基氧基乙基、乙基氧基乙基、甲基氨基甲基、二甲基氨基甲基、甲基氨基乙基、二甲基氨基乙基、甲硫基甲基、乙硫基甲基、乙硫基乙基、和甲硫基乙基。
在用于本文时，术语“环烷基”指饱和或不饱和的非芳族碳环取代基，它可以由一个环或稠合到一起的两个或更多个环组成。实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环戊二烯基、环己基、环己烯基、1，3-环己二烯基、萘烷基、和1，4-环己二烯基。
在用于本文时，术语“杂环烷基”指饱和或不饱和的非芳族环烃取代基，它可以由一个环或稠合到一起的两个或更多个环组成，其中一个环内的至少一个碳被杂原子代替。实例包括但不限于四氢呋喃基、吡咯烷基、哌啶基、1，4-二噁烷基、十氢喹啉基、哌嗪基、噁唑烷基、和吗啉基。
例如在“亚烷基”相对于“烷基”中后缀(extension)“-亚基”相对于“-基”是指与在所述例如“烷基”中通过一个共价单键与一个部分相连的一价基团相反，所述例如“亚烷基”是通过两个共价单键或一个双键与一个或两个其它部分相连的二价部分。术语“亚烷基”因此指直链或支化、饱和或不饱和的烃部分；术语“亚杂烷基”在用于本文时指直链或支化、饱和或不饱和的烃部分，其中至少一个碳被杂原子代替；术语“亚芳基”在用于本文时指碳环芳族部分，它可以由一个环或稠合到一起的两个或更多个环组成；术语“亚杂芳基”在用于本文时指碳环芳族部分，它可以由一个环或稠合到一起的两个或更多个环组成，其中一个环内的至少一个碳被杂原子代替；术语“亚环烷基”在用于本文时指饱和或不饱和的非芳族碳环部分，它可以由一个环或稠合到一起的两个或更多个环组成；术语“亚杂环烷基”在用于本文时指饱和或不饱和的非芳族环烃部分，它可以由一个环或稠合到一起的两个或更多个环组成，其中一个环内的至少一个碳被杂原子代替。示例性二价部分包括其中一个氢原子被除去的上面为一价基团给出的实例。
“聚亚烷基”、“聚亚杂烷基”、“聚亚芳基”、“聚亚杂芳基”、“聚亚环烷基”、“聚亚杂环烷基”等中的前缀“聚”表示两个或更多个这种“-亚基”部分，如亚烷基部分结合到一起形成支化或未支化的多价部分，其中包含用于连接相邻部分的一个或多个位置。
本发明的某些化合物具有手性中心或双键；两种或更多种异构体的任何组成的对映异构、非对映异构、和几何异构混合物、以及单独的异构体都包括在本发明的范围内。
本发明的化合物还可以在构成这些化合物的一个或多个原子中包含非天然比例的原子同位素。无论是否有放射活性，本发明化合物的所有同位素变体都将包括在本发明的范围内。
在用于本文时，短语“药学活性的盐”指本发明化合物的药学上可接受的有机或无机盐。对于包含一个或多个碱性基团如胺基团的化合物，可以形成酸加成盐。对于包含一个或多个酸性基团如羧酸基团的化合物，可以形成碱加成盐。对于包含酸性和碱性基团两者的化合物，还可以获得两性离子作为盐。在药学上可接受的盐包含多个带电原子的情况下，可以具有多个抗衡离子。
短语“药学上可接受的溶剂化物”指一个或多个溶剂分子与本发明化合物的缔合物。形成药学上可接受的溶剂化物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、和乙酸。
下文的术语“缀合物”指式(III)的化合物。
下文的术语“连接基-药物缀合物”指式(IV)的化合物。
下文的药物指式(I)、(II)、(VII)、(VIII)、(I′)、或(II′)的化合物。
术语“靶向部分”指任何分子，所述分子与标靶位置处或附近、标靶细胞之上、之内或附近、或标靶组织或器官(附近)特异性或相对过量存在的部分如受体、受体复合物、底物、抗原决定物、或其它接受部分特异性结合或反应性缔合或复合，或者所述分子可以通过其性质，例如通过EPR效应，通过其它机理将缀合物靶向至标靶位置。靶向部分的实例包括但不限于适体、抗体或抗体片段、聚合物、枝聚物(dendrimer)、凝集素、生物响应调节剂、酶、维生素、生长因子、甾体、糖残基、低聚糖残基、载体蛋白、和激素、或其任何组合。
短语“改善化合物的药动学性质的部分”指以一定的方式改变本发明化合物的药动学性质，从而可以获得更好的治疗效果的部分。所述部分可以例如提高水溶性、增加循环时间、或减少免疫原性。
术语“连接基团”指将化合物的一个结构元素连接到所述同一化合物的一个或多个其它结构元素的化合物结构元素。
短语“表示支化程度的数字”用于指闭括号后的下标数字，表示有多少单位的括号内的部分分别直接连接到就在相应的开括号左面的部分。例如，在A-(B)b中，b是表示支化程度的数字，意味着b个单位B全都直接连接到A。这意味着当b为2时，该式简化成B-A-B。
短语“表示聚合程度的数字”用于指闭括号后的下标数字，表示有多少单位的括号内的部分相互连接。例如，在A-(B)b中，b是表示聚合程度的数字，意味着当b为2时，该式简化成A-B-B。
术语“单释放间隔基”指在自我牺牲后可以释放一个部分的自消除间隔基。
术语“多释放间隔基”指在重复的自我牺牲后可以释放两个或更多个部分的自消除间隔基。
术语“电子级联间隔基”指支化或未支化的自消除间隔基，它可以通过一个或多个1，2+2n电子级联消除而自我消除(n≥1)。
术语“ω-氨基氨基羰基环化间隔基”指在形成环脲(cyclic ureum)衍生物下，可以通过环化过程而消除的自消除间隔基。
术语“间隔基体系”指单间隔基部分或偶联到一起的两个或更多个相同或不同的间隔基部分。间隔基体系可以是支化或未支化的，可以包含用于连接Z以及V1和任选的L的一个或多个位置。
在说明书及其权利要求书中，动词“包括”、“具有”、“包含”及其连词以其非限制性意义使用，意味着包括动词之后或之前的内容，但不排除没有明确提及的内容。此外，用不定冠词“a”或“an”修饰元素并不排除存在多于一个元素的可能性，除非上下文清楚地要求存在一个且只有一个元素。不定冠词“a”或“an”因此通常意味着“至少一”。
在整个说明书和权利要求书的通用结构中，使用字母定义结构元素。这些字母中的一些可能被误以为表示原子，例如C、N、O、P、K、B、F、S、U、V、W、I、和Y。为避免混淆，只要这些字母不表示原子，就用加粗字体给出它们。
当用一个或多个形容词和/或形容短语修饰a)一列名词中的第一个名词或b)一列名词中的任何位置的名词，并且所述名词和形容词一起由单词“和”引领时，则形容词不仅修饰所述名词，而且修改后面所有的独立名词，除非上下文另有说明。这意味着例如短语“任选取代的C1-4烷基、C1-4杂烷基、C3-7环烷基、或C3-7杂环烷基”应该理解为“任选取代的C1-4烷基、任选取代的C1-4杂烷基、任选取代的C3-7环烷基、或任选取代的C3-7杂环烷基”。
在整个说明书和权利要求书中，画出了分子结构或其部分。通常在这些图形中，用线表示原子之间的键，在一些情况下，用粗体或断线或楔形线表示立体化学。通常，止于空处的线(“松散”末端)，即没有另一条线或具体原子与其相连的一端表示CH3基团。对于表示本发明化合物的图形，这是正确的。对于表示本发明化合物的结构元素的那些结构，止于空处的线可以暗示化合物的另一个结构元素的连接位置。在大多数图形中，这用垂直并穿过“松散”线条的波浪线表示。
此外，画出了结构或其部分，假设结构从左向右读，意味着例如在式(III)化合物的图形中，V2总是位于该结构的左侧(当存在时)，Z总是位于右侧。
下列简写用于本文并具有指示的定义Aloc烯丙基氧基羰基；Asc抗坏血酸盐；Boc＝叔丁基氧基羰基；DCC＝N，N′-二环己基碳二亚胺；DIPEA二异丙基乙胺；DME1，2-二甲氧基乙烷；DMF＝N，N-二甲基甲酰胺；Fmoc＝9-芴基甲基氧基羰基；HOBt1-羟基苯并三唑；HOSu＝N-羟基琥珀酰亚胺；NMMN-甲基吗啉；PABA＝对氨基苄醇；PBS磷酸盐缓冲的盐水；PNP＝对硝基苯氧化物；PNPCl＝对硝基苯基氯甲酸酯；PNP2O＝双(对硝基苯基)碳酸酯；SCID重症联合免疫缺陷(severe combinedimmunodeficiency)；TFA三氟乙酸；THF四氢呋喃。
药物、连接基-药物缀合物、和缀合物 本发明提供了可以归属于DNA结合型烷化剂CC-1065和duocarmycins类的新药。此外，本发明涉及这些药物的新缀合物和连接基-药物缀合物，它们可以作为或不作为所述缀合物的中间体。
认为本发明的药物可用于治疗以不期望的(细胞)增殖为特征的疾病。例如，本发明的药物可以用于治疗肿瘤、癌症、免疫疾病、或感染性疾病。
在一方面，认为本发明的缀合物可用于将式(I)和(II)的药物靶向到特定的标靶位置，缀合物可以在标靶位置被转化成一种或多种药物或被诱导转化为一种或多种所述药物。本发明还可以用于从缀合物中(非特异性地)控制释放一种或多种所述药物，从而例如强化药动学性质。
意外地发现，式(III)的化合物具有高的细胞毒性商，此外，式(I)和(II)的母体化合物显示出比现有领域的相似化合物更高的细胞毒性和更大的水溶性。不受任何理论的约束，对于高细胞毒性商的解释可能是，这种药物中存在水溶性基团以及连接离去基团的稍受屏蔽的碳。药物的水溶性提高可以使化合物能够更好地达到其(胞内)标靶，从而在从缀合物中释放后提高其细胞毒性，同时它还可以降低缀合物的聚集，并由于药物从缀合物中的过早释放而减少缀合物的副作用，因为释放的药物由于极性提高，可能在进入(非靶向)细胞时不太有效。位阻可以减少缀合物造成的生物分子的直接烷基化以及药物造成的非-DNA烷基化，从而减少非特异性(细胞)毒性。因此，本发明在式(I)和(II)的化合物中组合水溶性和空间屏蔽的概念可以导致具有更大的水溶性和更高的选择性的药物，并导致本发明的缀合物具有提高的细胞毒性商。
药物 在一方面，本发明提供了式(I)或(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物
其中 R1选自卤素和OSO2Ru，其中Ru选自任选取代的C1-6烷基、C1-6全卤代烷基、苄基、和苯基； R2选自H和任选取代的C1-8烷基； R3、R3′、R4、和R4′独立地选自H和任选取代的C1-8烷基，其中R2、R3、R3′、R4、和R4′中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的碳环或杂环； X2选自O、C(R14)(R14′)和NR14′，其中R14选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基，其中R14′可以不存在或选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基； 每个R5、R5′、R6、R6′、R7、和R7′独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rk、SRk、S(O)Rk、S(O)2Rk、S(O)ORk、S(O)2ORk、OS(O)Rk、OS(O)2Rk、OS(O)ORk、OS(O)2ORk、ORk、NHRk、N(Rk)RL、+N(Rk)(RL)Rm、P(O)(ORk)(ORL)、OP(O)(ORk)(ORL)、SiRkRLRm、C(O)Rk、C(O)ORk、C(O)N(RL)Rk、OC(O)Rk、OC(O)ORk、OC(O)N(Rk)RL、N(RL)C(O)Rk、N(RL)C(O)ORk、和N(RL)C(O)N(Rm)Rk，其中Rk、RL、和Rm独立地选自H和任选取代的C1-4烷基、C1-4杂烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、C4-12芳基、或C4-12杂芳基，Rk、RL、和Rm中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环， 和/或R5+R5′、和/或R6+R6′、和/或R7+R7′独立地为＝O、＝S、或＝NR12，R12选自H和任选取代的C1-6烷基， 和/或R5′和R6′、和/或R6′和R7′、和/或R7′和R14′不存在，这意味着携带R5′和R6′、和/或R6′和R7′、和/或R7′和R14′的原子之间分别存在双键， R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、R14、和R14′中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环； X1选自O、S、和NR13，其中R13选自H和任选取代的C1-8烷基； X3选自O、S、和NR15，其中R15选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基， 或者-X3-代表-X3a和X3b-，其中X3a与X4所连接的碳相连，X3b在R10的邻位与苯环相连，其中X3a独立地选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基，X3b选自与R8相同的取代基组； X4选自N和CR16，其中R16选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基； X5选自O、S、和NR17，其中R17选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基； R8、R9、R10、和R11分别独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rx、SRx、S(O)Rx、S(O)2Rx、S(O)ORx、S(O)2ORx、OS(O)Rx、OS(O)2Rx、OS(O)ORx、OS(O)2ORx、ORx、NHRx、N(Rx)Ry、+N(Rx)(Ry)Rz、P(O)(ORx)(ORy)、OP(O)(ORx)(ORy)、SiRxRyRz、C(O)Rx、 C(O)ORx、C(O)N(Ry)Rx、OC(O)Rx、 OC(O)ORx、OC(O)N(Rx)Ry、N(Ry)C(O)Rx、N(Ry)C(O)ORx、N(Ry)C(O)N(Rz)Rx、和水溶性基团，其中Rx、Ry、和Rz独立地选自H和任选取代的C1-15烷基、C1-15杂烷基、C3-15环烷基、C3-15杂环烷基、C4-15芳基、或C4-15杂芳基，Rx、Ry、和Rz中的一个或多个任选的取代基任选地为水溶性基团，Rx、Ry、和Rz中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环，R8、R9、R10、和R11中的至少一个包括至少一个水溶性基团，R8、R9、R10、R11、或X3b中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环； a和b独立地选自0和1； c选自0、1、和2； 条件是在式(I)的化合物中，存在的R2、R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中的至少一个不是氢。
应该理解，本发明涉及对映异构纯和/或非对映异构纯的式(I)-(IV)化合物以及式(I)和(II)化合物的对映异构和/或非对映异构混合物。
关于本文给出的式(I)和(II)化合物及其含环丙基类似物的取代效果，没有指定式(I)和(II)化合物及其含环丙基类似物的具体作用机理。
式(I)或(II)化合物中的R1是离去基团。在本发明的一个实施方案中，式(I)或(II)化合物中的离去基团R1是卤素。在另一个实施方案中，R1选自氯(Cl)、溴(Br)、和碘(I)。在还一个实施方案中，R1是氯(Cl)。在还一个实施方案中，R1是溴(Br)。通过改变离去基团R1，可以调整开环药物的烷基化活性，并影响开环药物转化为包含环丙基的药物的速度。如果R1的离去能力太好，这也可以使开环药物变成烷基化剂，这可能降低式(I)和(II)化合物的缀合物的细胞毒性商，因为药物可能在仍结合在缀合物中时便能够烷基化。另一方面，如果R1是太差的离去基团，开环药物就不能闭合以形成据信是活性成分的包含环丙基的药物，这可降低其细胞毒性，并很可能降低细胞毒性商。
另一种调整开环药物及其含环丙基衍生物的烷基化活性的手段可以是，通过选择存在的R2、R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中的至少一个不为氢，稍微屏蔽连接离去基团或者可能发生亲核攻击的碳。屏蔽所述碳可以减少式(I)和(II)化合物及其含环丙基类似物以及其缀合物的非特异性烷基化作用。尽管引入位阻也可能影响DNA烷基化速度，但假设非特异性烷基化相对于DNA烷基化可能会受到更大的影响，这可能是合理的，因为据推测，后者发生在药物理想地定位进行亲核攻击结合到DNA小沟上以后。式(II)化合物中携带R1的碳是仲碳原子，与R2为H时的式(I)化合物中携带R1的碳相比，已经稍微受到屏蔽。在这方面，式(II)化合物可以与其中R2不为H的式(I)化合物相比。然而，通过选择存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中的一个或多个不为氢，可以实现进一步的屏蔽。
在一个实施方案中，式(I)化合物中的R2是任选取代的C1-8烷基。在另一个实施方案中，R2是任选取代的直链C1-8烷基。在另一个实施方案中，R2是未取代的直链C1-8烷基。在另一个实施方案中，R2是甲基。
备选地或同时地，通过选择R3、R3′、R4、和R4′中的一个或多个不为氢，可以对携带R1的碳引入空间屏蔽。在一个实施方案中，R3、R3′、R4、和R4′分别为H。在另一个实施方案中，R3和R3′两者均为H。在另一个实施方案中，R4和R4′两者均为H。在另一个实施方案中，R3和R3′中一个为C1-8烷基，而另一个为H。在另一个实施方案中，R4和R4′中一个为C1-8烷基，而另一个为H。在另一个实施方案中，R3和R3′中一个为C1-8烷基，R4和R4′中一个为C1-8烷基，其它为H。在另一个实施方案中，R3和R3′两者独立地选自C1-8烷基。在另一个实施方案中，R4和R4′两者独立地选自C1-8烷基。在另一个实施方案中，R2为H，R3、R3′、R4、和R4′中的一个选自C1-8烷基。在另一个实施方案中，R2为H，R3、R3′、R4、和R4′中的一个选自甲基。在另一个实施方案中，R2为H，R3、R3′、R4、和R4′中的两个独立地选自C1-8烷基。在还一个实施方案中，R2为H，R3、R3′、R4、和R4′中的两个为甲基。
通过X1的性质，也可以影响式(I)或(II)化合物或其含环丙基类似物的烷基化活性。X1的性质可以影响开环药物环合成环丙基类似物的速度和条件和/或DNA亲核攻击打开环丙基环的速度，因此影响烷基化行为。在一个实施方案中，X1为O。
取代基R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、和X2以及与携带X1的环的左手侧相连的环的大小可以例如分别独立或者两个或更多个结合到一起影响药物的药动学性质，影响水溶性，影响聚集行为，影响DNA烷基化过程，或影响DNA结合强度。此外，尤其是R5和R5′还可以影响能够发生亲核攻击的碳的屏蔽程度。在一个实施方案中，R5和R5′两者均为H。在另一个实施方案中，R5和R5′中至少一个不为氢。在另一个实施方案中，R5不为氢。在另一个实施方案中，R2为氢，R5或R5′中至少一个不为氢。在还一个实施方案中，R5选自硝基、卤素、氨基、羟基、和任选取代的烷基氨基、烷基羰基氨基、烷氧基羰基氨基、烷基氧基、烷基羰基氧基、烷基氨基羰基氧基、或C1-4烷基。在还一个实施方案中，R5为任选取代的直链C1-4烷基。在另一个实施方案中，R5是未取代的直链C1-4烷基。在另一个实施方案中，R5是甲基。
尽管可以通过几种方法调整化合物如式(I)和(II)的烷基化速度和效率，在本发明的一个方面，通过引入位阻实现这个目标，对于式(I)的化合物，选择存在的R2、R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为氢，对于式(II)的化合物，任选使存在的R2、R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中一个或多个不为氢。
在本发明的一个方面，式(I)和(II)的化合物可以分别由式(Ia)和(IIa)的化合物表示
在一个实施方案中，(Ia)或(IIa)中的R6和R7两者均为H。
在另一方面，式(I)和(II)的化合物可以分别由式(Ib)和(IIb)的化合物表示
在一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的X2为N。
在一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的X2为CH。
在一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的R5、R6、和R7分别为H。
在一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的R5、R6、和R7分别为H，X2为CH。
在另一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的R5和R7分别为H，R6为CO2Me。
在另一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的R5和R7分别为H，R6为OMe。
在另一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的R5和R7分别为H，R6为CN。
在还一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的R5选自硝基、卤素、氨基、羟基、和任选取代的烷基氨基、烷基羰基氨基、烷氧基羰基氨基、烷基氧基、烷基羰基氧基、烷基氨基羰基氧基、或C1-4烷基。在还一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的R5为任选取代的直链C1-4烷基。在另一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的R5是未取代的直链C1-4烷基。在另一个实施方案中，(Ib)或(IIb)中的R5是甲基。
在还一方面，式(I)和(II)的化合物可以分别由式(Ic)和(IIc)的化合物表示
在一个实施方案中，(Ic)或(IIc)中的X2为NH。
在另一个实施方案中，(Ic)或(IIc)中的R6和R7分别为H和CO2CH3，X2为NH。
在另一个实施方案中，(Ic)或(IIc)中的R7和R6分别为H和CO2CH3，X2为NH。
在另一个实施方案中，(Ic)或(IIc)中的R6为CH3，X2为NH。
在还一方面，式(I)和(II)的化合物可以分别由式(Id)和(IId)的化合物表示
在一个实施方案中，(Id)或(IId)中的X2为NH。
在一个实施方案中，(Id)或(IId)中的R6和R6′一起为＝O。
在另一个实施方案中，(Id)或(IId)中的R7和R7′分别为CO2CH3和CH3。
在另一个实施方案中，在式(Id)或(IId)的化合物中，X2为NH，R6和R6′一起为＝O，R7和R7′分别为CO2CH3和CH3。
在一个实施方案中，X3为NH。
在另一个实施方案中，X3为O。
在一个实施方案中，X4为CH。
在一个实施方案中，X5为O。
水溶性基团是为式(I)和(II)的化合物提供比现有领域的类似化合物更高的溶解度的基团。它还可以防止或减少本发明化合物的聚集，或者减少副作用。水溶性基团的实例包括但不限于-NH2、-NH-、-NHRa、-NRa-、-N(Ra)(Rb)、-+N(Ra)(Rb)-、-+N(Ra)(Rb)(Rc)、-COOH、-COORa、-OP(O)(OH)2、-OP(O)(OH)O-、 -OP(O)(ORa)O-、 -OP(O)(OH)ORa、 -OP(O)(ORb)ORa、-P(O)(OH)2、-P(O)(OH)O-、-P(O)(ORa)OH、-P(O)(ORa)O-、-P(O)(ORa)(ORb)、-OS(O)2OH、-OS(O)2O-、-OS(O)2ORa、-S(O)2OH、-S(O)2O-、-S(O)2ORa、-OS(O)OH、-OS(O)O-、-OS(O)ORa、-S(O)OH、-S(O)O-、-OS(O)-、-S(O)ORa、-OS(O)2-、-OS(O)2Ra、-S(O)2-、-S(O)2Ra、-OS(O)Ra、-S(O)-、-S(O)Ra、-OH、-SH、-(OCH2CH2)v′OH、-(OCH2CH2)v′O-、-(OCH2CH2)v′ORa、糖部分、低聚糖部分、和寡肽部分、或其质子化或去质子化形式以及其它任何组合，其中Ra、Rb、和Rc独立地选自H和任选取代的C1-3烷基，Ra、Rb、和Rc中的两个或更多个任选地结合以形成一个或多个碳环或杂环，v′是选自1至100的整数。水溶性基团可以位于R8、R9、R10、和/或R11内的任何位置，或者可以构成整个R8、R9、R10、或R11部分。水溶性基团可以例如位于任何内部位置，是主链的一部分，是环结构的一部分，是悬挂到主链或环上的官能团，或位于R8、R9、R10、或R11取代基与剩余分子相连的位置。
在一个实施方案中，R8、R9、R10、和R11中的一个包含水溶性基团。
在另一个实施方案中，R8、R9、和R10中的一个包含水溶性基团。
在还一个实施方案中，R8包含水溶性基团。
在还一个实施方案中，R9包含水溶性基团。
在还一个实施方案中，R10包含水溶性基团。
在一个实施方案中，水溶性基团是羧酸基团。
在另一个实施方案中，水溶性基团是氨基。
在另一个实施方案中，水溶性基团是伯氨基。
在另一个实施方案中，水溶性基团是仲氨基。
在另一个实施方案中，水溶性基团是叔氨基。
在另一个实施方案中，水溶性基团是季氨基。
在一个实施方案中，水溶性基团是二甲基氨基。
在另一个实施方案中，水溶性基团是吗啉代(morpholino)基团。
在还一个实施方案中，水溶性基团是1-甲基哌啶-4-基。
在还一个实施方案中，水溶性基团是甲基氨基。
在还一个实施方案中，水溶性基团是哌啶-4-基。
在还一个实施方案中，水溶性基团是氨基(NH2)基团。
在还一个实施方案中，水溶性基团是N-甲基-N-(羧甲基)氨基。
在还一个实施方案中，水溶性基团是N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基。
在还一个实施方案中，水溶性基团不是醚基团(-O-、-ORa)，不是低聚醚或聚醚基团。
在还一个实施方案中，水溶性基团不是酰胺基团，不是寡肽或多肽基团。
在还一个实施方案中，水溶性基团不是这样的伯氨基、仲氨基、或叔氨基，其中氮原子直接连接(并因此共轭)到芳族部分或作为芳族部分组成部分的仲氨基或叔氨基中，所述氮原子作为芳环体系中的原子。
在还一个实施方案中，水溶性基团不是连接到芳环体系的羟基。
在一个实施方案中，R8、R9、R10、或R11选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，R8、R9、或R10选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，R8选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，R9选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，R10选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在一个实施方案中，R8、R9、R10、或R11选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、和2-(N，N-二甲基氨基)-乙酰基氨基。
在另一个实施方案中，R8、R9、或R10选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、和2-(N，N-二甲基氨基)-乙酰基氨基。
在另一个实施方案中，R8选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、和2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基。
在一个实施方案中，R8是2-(吗啉-4-基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R8是(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基。
在还一个实施方案中，R8是2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基。
在还一个实施方案中，R8是2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基。
在还一个实施方案中，R9是2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基。
在还一个实施方案中，R10是2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R8、R9、R10、或R11选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R8、R9、R10、或R11选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)-乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R8、R9、或R10选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R8选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R8选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R9选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R10选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R8是2-(甲基氨基)乙氧基。
在还一个实施方案中，R8是2-氨基乙氧基。
在还一个实施方案中，R8是2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基。
在还一个实施方案中，R8是2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
当R8、R9、R10、或R11中的一个包含水溶性基团时，其它取代基可以分别独立地为氢、包含另一个水溶性基团的取代基或不含水溶性基团的取代基。
在一个实施方案中，R9、R10、和R11分别为氢。
在一个实施方案中，R8包含水溶性基团，R9、R10、和R11分别为氢。
在另一个实施方案中，R8包含水溶性基团，R9为甲氧基。
在另一个实施方案中，R9为甲氧基，R10和R11分别为氢。
在另一个实施方案中，R8包含水溶性基团，R9为甲氧基，R10和R11分别为氢。
在另一个实施方案中，R8是2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基，R9为甲氧基，R10和R11分别为氢。
在另一个实施方案中，R9或R10是包含水溶性基团的取代基，R8不为氢。
在另一个实施方案中，R9是包含水溶性基团的取代基，R8不为氢。
在另一个实施方案中，R10是包含水溶性基团的取代基，R8不为氢。
在另一个实施方案中，R8选自
其中X33选自O、S、和NR15，其中R15如上面所定义，Ra和Rb如上面所定义，NRaRb通过碳原子1-4中的任何一个与苯环相连。在另一个实施方案中，NRaRb通过碳原子2或4与苯环相连。
R8也可以是下式的取代基
其中X3′、X4′、X5′、R8′、R9′、R10′、和R11′分别具有与上面X3、X4、X5、R8、R9、R10、和R11定义相同的意义，除了当R8、R9、R10、或R11中已经存在另一个水溶性基团时，R8′、R9′、R10′、和R11′不必包含水溶性基团，其中R8″可以选自H和任选取代的C1-5烷基或C1-5杂烷基，并任选与R9或R11结合形成任选取代的脂族或芳族杂环。
在一个实施方案中，R8或R8″和R11、和/或R8′和R11′可以结合，与连接原子一起形成任选取代的二氢吡咯。
式(I)和(II)的化合物具有的一个优点是，它们具有比现有领域的类似化合物更高的水溶性。例如羧酸基团或脂族仲氨基的存在可以明显提高水溶性。同时，这种基团可以防止式(I)或(II)的化合物穿越生物屏障，尤其是当它是非极性屏障如细胞膜时。这可能是有益的，尤其是当式(I)或(II)的化合物在从缀合物中释放之前通过与靶向部分缀合被递送到靶向细胞时。当式(I)或(II)的化合物例如在循环中过早地从缀合物中释放时，它可能不能或只能中度非特异性地进入(非靶向)细胞，因为其膜转位能力可能受到了损坏。这样可以导致提高的选择性和因此更少的副作用。
在一个实施方案中，R2不为氢。
在另一个实施方案中，R2为H，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H。
在另一个实施方案中，R2为H，X1为O，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CH，X5为O，X3为NH，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R8、R9、R10、或R11选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R8、R9、或R10选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R8选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R9选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R10选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R8、R9、R10、或R11选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R8、R9、或R10选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R8选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X4为CR16，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R8选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X4为CR16，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R10和R11两者均为H，R8选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，在式(Ib)或(IIb)的化合物中，R2为H，X1为O，X2为CR14，X4为CR16，X5为O，X3为NR15，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R10和R11两者均为H，R9选自H和OMe，R8选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，R2为H，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R8选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，R2为H，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R9选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，R2为H，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R10选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在另一个实施方案中，R2为H，存在的R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中至少一个不为H，R8选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在一个实施方案中，R5不为NO2。
在另一个实施方案中，取代基R1、R2、R3、R3′、R4、R4′、R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、和R17中的至少一个包含或者作为部分COOH。
在另一个实施方案中，取代基R1、R2、R3、R3′、R4、R4′、R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、和R17中的至少一个包含或者作为部分COOH，如果只存在一个COOH部分且所述COOH部分包含在R8、R9、R10、或R11中，则R8、R9、R10、或R11中存在至少另一个水溶性基团。
在另一个实施方案中，取代基R8、R9、R10、和R11中的至少一个包含或者作为部分COOH。
在另一个实施方案中，取代基R8、R9、R10、和R11中的至少一个包含或者作为部分COOH，R8、R9、R10、或R11中存在至少另一个水溶性基团。
在另一个实施方案中，R8、R9、R10、和R11中的至少一个水溶性基团是没有与芳族部分或羰基共轭的脂族仲胺部分。
在还一个实施方案中，R8选自

和

和

和

和

和

和
在还一个实施方案中，R8、R9、R10、和R11中的至少一个水溶性基团是没有与芳族部分或羰基共轭的脂族仲胺部分，取代基R1、R2、R3、R3′、R4、R4′、R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、和R17中的至少一个包含或者作为部分COOH。
在还一个实施方案中，R8、R9、R10、和R11中的至少一个水溶性基团是没有与芳族部分或羰基共轭的脂族仲胺部分，取代基R8、R9、R10、和R1中的至少一个包含或者作为部分COOH。
在还一个实施方案中，取代基R8、R9、R10、和R11中的至少一个包含COOH部分和没有与芳族部分或羰基共轭的脂族仲胺部分。
在一个实施方案中，本发明的化合物由式(Ib1)、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
其中R8a是包含水溶性基团的取代基，R9a是H或任选取代的C1-15烷氧基。
在另一个实施方案中，本发明的化合物由式(Ib2)、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
其中R8a′是包含水溶性基团的取代基，R9a′是H或任选取代的C1-15烷氧基。
在一个实施方案中，本发明涉及式(Ib1)或(Ib2)的化合物，其中R8a或R8a′分别选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
在一个实施方案中，本发明涉及式(Ib1)或(Ib2)的化合物，其中R8a或R8a′分别选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，本发明涉及式(Ib1)的化合物，其中R8a选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
在另一个实施方案中，本发明涉及式(Ib1)的化合物，其中R8a选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基，R9a为H。
在另一个实施方案中，本发明涉及式(Ib1)的化合物，其中R8a选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基，R9a为甲氧基。
在一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
其中R1a为氯(Cl)或溴(Br)，R2a和R5b分别为甲基和H，或分别为H和甲基，R8d选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基，R9d选自H和甲氧基。
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在还一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在还一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在还一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在还一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由式(Ib3)、或其(1R)异构体或由两种异构体的混合物表示
其中R5a具有与上面R5定义相同的意义，除了它不能为氢。
在一个实施方案中，式(Ib3)化合物中的R5a选自硝基、卤素、氨基、羟基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羰基氨基、任选取代的烷氧基羰基氨基、任选取代的烷基氧基、任选取代的烷基羰基氧基、任选取代的烷基氨基羰基氧基、和任选取代的C1-4烷基。在还一个实施方案中，式(Ib3)化合物中的R5a为任选取代的直链C1-4烷基。在另一个实施方案中，式(Ib3)化合物中的R5a是未取代的直链C1-4烷基。在另一个实施方案中，式(Ib3)化合物中的R5a是甲基。
在另一个实施方案中，本发明的化合物由式(Ib3-1)、或其(1R)异构体或由两种异构体的混合物表示
其中每个R100a独立地为甲基、羧甲基、2-甲氧基-2-氧代乙基、或氢。
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R)异构体或由两种异构体的混合物表示
在另一方面，本发明涉及式(I′)或(II′)的化合物
其中所有取代基具有与上面式(I)和(II)化合物所述相同的意义。据称，伴随着消除H-R1，式(I)和(II)化合物可以在体内分别转化为(I′)和(II′)，如图1中对式(I)化合物的示意说明。
因此，本发明涉及式(I′)和(II′)的化合物，所述化合物包含环丙基，由式(I)或(II)化合物的重排同时从中消除H-R1而得到。
应该理解，在的整个说明书中，当提到式(I)或(II)化合物时，它包括分别提到式(I′)或(II′)的化合物，除非涉及不存在于(I′)和(II′)中的(I)和(II)的结构部分或上下文另有说明。同样，当提到式(I)或(II)的结构部分(片段)、连接基-药物缀合物、或缀合物时，它包括分别提到式(I′)或(II′)的类似结构部分(片段)、连接基-药物缀合物、或缀合物，除非涉及不存在于(I′)和(II′)中的(I)和(II)的结构部分或上下文另有说明。
在不同的方面，本发明涉及式(VII)或(VIII)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物
其中 R1选自卤素和OSO2Ru，其中Ru选自任选取代的C1-6烷基、C1-6全卤代烷基、苄基、和苯基； R2选自H和任选取代的C1-8烷基； R3、R3′、R4、和R4′独立地选自H和任选取代的C1-8烷基，其中R2、R3、R3′、R4、和R4′中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的碳环或杂环； X2选自O、C(R14)(R14′)和NR14′，其中R14选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基，其中R14′可以不存在或选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基； 每个R5、R5′、R6、R6′、R7、和R7′独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rk、SRk、S(O)Rk、S(O)2Rk、S(O)ORk、S(O)2ORk、OS(O)Rk、OS(O)2Rk、OS(O)ORk、OS(O)2ORk、ORk、NHRk、N(Rk)RL、+N(Rk)(RL)Rm、P(O)(ORk)(ORL)、OP(O)(ORk)(ORL)、SiRkRLRm、C(O)Rk、C(O)ORk、C(O)N(RL)Rk、OC(O)Rk、OC(O)ORk、OC(O)N(Rk)RL、N(RL)C(O)Rk、N(RL)C(O)ORk、和N(RL)C(O)N(Rm)Rk，其中Rk、RL、和Rm独立地选自H和任选取代的C1-4烷基、C1-4杂烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、C4-12芳基、或C4-12杂芳基，Rk、RL、和Rm中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环， 和/或R5+R5′、和/或R6+R6′、和/或R7+R7′独立地为＝O、＝S、或＝NR12，R12选自H和任选取代的C1-6烷基， 和/或R5′和R6′、和/或R6′和R7′、和/或R7′和R14′不存在，这意味着携带R5′和R6′、和/或R6′和R7′、和/或R7′和R14′的原子之间分别存在双键， R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、R14、和R14′中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环； X1选自O、S、和NR13，其中R13选自H和任选取代的C1-8烷基； X3选自O、S、和NR15，其中R15选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基， 或者-X3-代表-X3a和X3b-，其中X3a与X4所连接的碳相连，X3b在R10的邻位与苯环相连，其中X3a独立地选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基，X3b选自与R8相同的取代基组； X4选自N和CR16，其中R16选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基； X5选自O、S、和NR17，其中R17选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基； R8、R9、R10、和R11分别独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rx、SRx、S(O)Rx、S(O)2Rx、S(O)ORx、S(O)2ORx、OS(O)Rx、OS(O)2Rx、OS(O)ORx、OS(O)2ORx、ORx、NHRx、N(Rx)Ry、+N(Rx)(Ry)Rz、P(O)(ORx)(ORy)、OP(O)(ORx)(ORy)、SiRxRyRz、C(O)Rx、C(O)ORx、C(O)N(Ry)Rx、OC(O)Rx、OC(O)ORx、OC(O)N(Rx)Ry、N(Ry)C(O)Rx、N(Ry)C(O)ORx、N(Ry)C(O)N(Rz)Rx、和水溶性基团，其中Rx、Ry、和Rz独立地选自H和任选取代的C1-15烷基、C1-15杂烷基、C3-15环烷基、C3-15杂环烷基、C4-15芳基、或C4-15杂芳基，Rx、Ry、和Rz中的一个或多个任选的取代基任选地为水溶性基团，Rx、Ry、和Rz中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环，R8、R9、R10、和R11中的至少一个包括至少一个水溶性基团，R8、R9、R10、R11、或X3b中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环； a和b独立地选自0和1； c选自0、1、和2； 条件是 a)取代基R1、R2、R3、R3′、R4、R4′、R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、和R17中的至少一个包含或作为部分COOH，如果只存在一个COOH部分且所述COOH部分包含在R8、R9、R10、或R11内，则R8、R9、R10、或R11中存在至少另一个水溶性基团，和/或 b)R8、R9、R10、和R11中的至少一个水溶性基团是没有与芳族部分或羰基共轭的脂族仲胺部分，和/或 c)R8选自

和

和

和

和

和

和

，和/或 d)R9为OMe，R8为OCH2CH2N(CH3)2。
式(VII)和(VIII)的化合物具有比现有领域的类似化合物更高的水溶性。式(VII)和(VIII)化合物的缀合物因此可以具有比现有领域的类似化合物的缀合物更好的性质。式(VII)和(VIII)的缀合物可以例如具有改善的水溶性，显示更少的聚集，并显示更少的副作用，因为当这种缀合物在进入标靶细胞之前，过早地从所述缀合物中释放式(VII)或(VIII)化合物时，会释放出不太能有效进入细胞、包括非靶向细胞的化合物，因为它的极性比不含水溶性基团的化合物要强。式(VII)或(VIII)化合物中任选存在羧酸基团或脂族仲氨基还为缀合物的制备提供了有用(额外)的便利。
应该注意，上面为式(I)和(II)化合物提供的所谓性质和实施方案也适用于式(VII)和(VIII)的化合物，除非它们涉及不存在于(VII)和(VIII)中的(I)和(II)的结构部分或上下文另有说明。因此应该理解，在整个说明书中，当提到式(I)或(II)化合物时，它包括分别提到式(VII)或(VIII)的化合物，除非涉及不存在于(VII)和(VIII)中的(I)和(II)的结构部分或上下文另有说明。同样，当提到式(I)或(II)的结构部分(片段)、连接基-药物缀合物、或缀合物时，它包括分别提到式(VII)或(VIII)的类似结构部分(片段)、连接基-药物缀合物、或缀合物，除非涉及不存在于(VII)和(VIII)中的(I)和(II)的结构部分或上下文另有说明。同样，当提到式(I′)或(II′)化合物时，应该理解为它包括提到式(VII)或(VIII)化合物的含环丙基类似物，除非涉及不存在于(VII)和(VIII)的含环丙基类似物中的(I′)和(II′)的结构部分或上下文另有说明。
缀合物和连接基-药物缀合物 在另一方面，本发明涉及式(I)或(II)化合物的缀合物，所述缀合物可以在体内通过一个或多个步骤分别转化为式(I)或(II)的化合物。这些缀合物可以有利地影响式(I)或(II)化合物的药动学性质和其它特性。在一个实施方案中，本发明涉及缀合物，所述缀合物包括缀合到至少一个前部分(promoiety)上的式(I)或(II)化合物，前部分为可以在体内被除去以释放式(I)或(II)化合物的部分。在另一个实施方案中，本发明涉及缀合物，所述缀合物包括缀合到一个前部分上的式(I)或(II)化合物。
在另一方面，本发明涉及式(III)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物
其中 V2不存在或者是功能部分； 每个L2独立地不存在或者是将V2连接到L或L不存在时连接到V1或Y的连接基团； 每个L独立地不存在或者是将L2或当L2不存在时将V2连接到一个或多个V1和/或Y的连接基团； 每个V1独立地为H或条件可裂解或条件可转化的部分，它们可以通过化学、光化学、物理、生物学、或酶过程裂解或转化； 每个Y独立地不存在或者是自消除间隔基体系，它包括1个或多个自消除间隔基，并连接至V1、任选的L、和一个或多个Z； 每个p和q是表示支化程度的数字，分别独立地为正整数； z是等于或小于一个或多个V1-Y部分内的Z连接位置总数的正整数； 每个Z独立地为上面定义的式(I)或(II)化合物，其中X1、R6、R7、R8、R9、R10、和R11中的一个或多个还可以任选地被式(V)的取代基取代
其中每个V2′、L2′、L′、V1′、Y′、Z′、p′、q′、和z′具有与V2、L2、L、V1、Y、Z、p、q和z定义相同的意义，式(V)的一个或多个取代基通过Y′或当Y′不存在时通过V1′独立地连接至X1、R6、R7、R8、R9、R10、和R11中的一个或多个， 每个Z通过X1或R6、R7、R8、R9、R10、或R11中的原子连接到Y或当Y不存在时连接到V1； 条件是所述一个或多个V1和一个或多个V1′中的至少一个不为H。
从式(III)中应该理解，L可以连接到V1和/或连接到Y。如果L连接到Y，这意味着V1和L两者、以及一个或多个Z被连接到Y。如果Y不存在，则L必须连接到V1；L不能直接连接到Z。
本文将连接到式(I)或(II)化合物的V2(-L2-L(-V1-Y)p)q(Z)z-1和一个或多个V2′(-L2′-L′(-V1′-Y′)p′)q′(Z′)z′-1部分称为前部分。
本发明还涉及式(IV)的化合物或其学上可接受的盐或溶剂化物
其中 RM是反应性部分，L、V1、Y、Z、p、和z如上面所定义，除了L现在将RM连接至一个或多个V1和/或Y，V1、Y、和Z可以包含保护基团，上面定义的Z中任选存在的一个或多个V2′-L2′部分可以任选和独立地被反应性部分RM′代替，其中，如果(IV)中存在多于1个反应性部分，则反应性部分是相同或不同的。这些连接基-药物缀合物可以被认为是或不是式(III)化合物的中间体。
本文将连接到式(I)或(II)化合物的RM-L(-V1-Y)p(Z)z-1和一个或多个RM′-L′(-V1′-Y′)p′(Z′)z′-1部分称为前部分。
应该理解，本发明涉及对映异构纯和/或非对映异构纯的式(III)和(IV)化合物以及式(III)和(IV)化合物的对映异构和/或非对映异构混合物。
当式(III)或(IV)化合物中的一个或多个Y和/或V1部分包含不与Z偶联的Z连接位置时，例如由于合成过程中的不完全偶联反应，这些连接位置被认为连接至H、OH、或离去基团作为代替。如果所有所述连接位置都连接至Z，则z等于所述连接位置的数目；否则，z更低。本发明的化合物可以作为混合物存在，其中混合物的每种组分具有不同的z值。例如，化合物可以作为两种独立化合物的混合物存在，一种化合物中z为4，另一种化合物中z为3。此外，对于给定的z，化合物可以作为异构体的混合物存在，因为Z可以连接到一个或多个Y和/或V1部分内的不同连接位置。
为清楚起见，当提到在式(III)或(IV)内将一个第一部分连接到其它部分时，通常只提及紧挨着式(III)或(IV)内的所述第一部分的那些所述其它部分。应该理解，如果一个所述其它部分不存在，则所述第一部分实际上按顺序连接到存在的下一个部分，除非另有明确的说明。例如，如果提及“V1从Y上裂解”，该短语实际上指“V1从Y上裂解，或者如果不存在Y，则从Z上裂解”，当提到不含Y的化合物时，应该理解为“V1从Z上裂解”。
在式(III)或(IV)的化合物中，式(I)或(II)的化合物可以通过其水溶性基团与前部分缀合。通过这种方式，水溶性基团可以为式(III)或(IV)的化合物提供较小的水溶性，但在除去所述前部分后，可以再为Z提供水溶性。
在说明书中，无论何时提及V2、L2、L、V1、Y、Z、RM、p、q、或z，都应该理解为相同的内容可以分别用于每个V2′、L2′、L′、V1′、Y′、Z′、RM′、p′、q′、或z′。
V1部分 在式(III)或(IV)的化合物中，V1部分可以是条件可裂解或可转化的基团。换句话说，将它设计成在进入或处于特定的条件下时，可通过化学、光化学、物理、生物学、或酶过程转化和/或从Y上裂解。这种条件可以是例如将本发明的化合物置于水性环境中，从而导致V1水解，或者将本发明的化合物置于含酶的环境中，所述酶可以识别并裂解V1，或者将本发明的化合物置于还原条件下，从而导致还原和/或除去V1，或者使本发明的化合物与辐射如UV光接触，从而导致转化和/或裂解，或者使本发明的化合物与热接触，从而导致转化和/或裂解，或者使本发明的化合物处于减小的压力下，从而导致转化(例如逆环加成)和/或裂解，或者使本发明的化合物处于升高的压力或高压下，从而导致转化和/或裂解。在将本发明的化合物施用至动物如哺乳动物，如人后，可以满足这种条件当通过例如内部因素(例如标靶特异性酶或缺氧)的存在或外部因素(例如辐射、磁场)的应用，将化合物定位在例如特定的器官、组织、细胞、亚细胞标靶、或微生物标靶时，可以满足所述条件，或者在施用后，已经可以直接满足所述条件(例如普遍存在的酶)。
通常，V1的转化将直接或间接导致V1从Y上裂解。本发明的化合物可以在每个前部分中包含多于一个V1部分(p和/或q>1)。这些V1部分可以相同或不同，可以需要或不需要相同的条件进行转化和/或裂解。
在本发明的一个方面，将缀合物用于将一个或多个部分Z靶向至标靶细胞。在这种情况下，V1部分可以例如包含底物分子，所述底物分子被标靶细胞附近或标靶细胞，例如肿瘤细胞内部存在的酶裂解。V1可以例如包含底物，所述底物被酶裂解，与其它身体部分相比，所述酶以升高的水平存在于标靶细胞附近或内部，或者被只存在于标靶细胞附近或内部的酶裂解。
重要的是意识到，如果只基于所述V1在标靶位置的选择性转化和/或裂解获得标靶细胞特异性，则引起裂解的条件至少应该在某种程度上优选是标靶细胞特异性的，而本发明化合物中另一种标靶特异性部分如V2部分的存在减少或排除了这种需要。例如，当V2引起选择性内化进入标靶细胞中时，其它细胞中也存在的酶可以转化和/或裂解V1。在一个实施方案中，V1的转化和/或裂解在胞内发生。
在一个实施方案中，V1包含二肽、三肽、四肽或寡肽，它们由可被蛋白水解酶识别的氨基酸序列组成，所述蛋白水解酶存在于标靶细胞如肿瘤细胞附近或内部，为例如纤溶酶、组织蛋白酶、组织蛋白酶B、前列腺特异性抗原(PSA)、尿激酶型纤溶酶原活化剂(u-PA)、或基质金属蛋白酶家族的成员。在一个实施方案中，V1是肽。在另一个实施方案中，V1是二肽。在另一个实施方案中，V1是三肽。在另一个实施方案中，V1是四肽。在还一个实施方案中，V1是肽模拟物。
在另一个实施方案中，V1包含可被肿瘤细胞附近或内部存在的β-葡糖醛酸糖苷酶识别的β-葡糖苷酸。
在一个实施方案中，V1包含酶的底物。
在一个实施方案中，V1包含胞外酶的底物。
在另一个实施方案中，V1包含胞内酶的底物。
在还一个实施方案中，V1包含溶酶体酶的底物。
在还一个实施方案中，V1包含丝氨酸蛋白酶纤溶酶的底物。
在还一个实施方案中，V1包含一种或多种组织蛋白酶，如组织蛋白酶B的底物。
在还一个实施方案中，V1包含半乳糖苷酶的底物。
当V1在胞外裂解时，一个或多个Z部分可以在胞外被释放。这可以提供优点，即这些Z部分不仅能够直接影响活化位置周围的细胞(例如标靶阳性细胞)，而且能够由于扩散(旁观效果)而影响稍微远离活化位置的细胞(例如标靶阴性细胞)。
通过例如抗体导向的酶前药疗法(ADEPT)、聚合物导向的酶前药疗法(PDEPT)或高分子导向的酶前药疗法(MDEPT)、病毒导向的酶前药疗法(VDEPT)、或基因导向的酶前药疗法(GDEPT)，也可以将裂解V1的酶运输到标靶细胞或标靶组织附近或内部。
在一个实施方案中，V1的转化和/或裂解通过与抗体相连的酶发生。
在另一个实施方案中，V1包含部分如硝基(杂化)芳族部分，所述部分可以通过在缺氧条件下还原或通过硝基还原酶还原而转化和/或裂解。在还原硝基并裂解所得部分后，消除间隔基体系Y(如果存在)，导致释放一个或多个部分Z。
在一个实施方案中，本发明涉及一种化合物，其中V1为己糖或戊糖或庚糖的单糖、二糖、或低聚糖，己糖或戊糖或庚糖也可以包括在脱氧糖或氨基糖的组中，属于D-系列或L-系列，在二糖或低聚糖中可以相同或不同。这种V1通常由糖苷酶裂解。
在另一个实施方案中，V1具有式C(ORa′)Rb′CHRc′Rd′，其中Ra′为羟基保护基团、任选与R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、R14、或R14′形成环的任选取代的C1-8烷基、或任选地被甲基、羟甲基、和/或式-NRe′Rf′的基团取代的单糖、二糖或低聚糖残基，其中Re′和Rf′相同或不同，选自氢、C1-6烷基、或氨基保护基团，其中糖残基的羟基任选受到保护；Rb′、Rc′、和Rd′独立地选自氢、任选取代的C1-8烷基或C1-8环烷基、或式-NRe′Rf′的基团，其中Re′和Rf′具有与上面相同的意义。
在一个实施方案中，本发明涉及缀合物，其中V1是包含天然L-氨基酸、非天然D-氨基酸、或合成氨基酸、或肽模拟物、或其任何组合的二肽、三肽、四肽、或寡肽部分。
在另一个实施方案中，本发明涉及化合物，其中V1包括三肽。三肽可以通过其C-末端连接到Y。在一个实施方案中，三肽的C-末端氨基酸残基选自精氨酸、瓜氨酸、和赖氨酸，三肽的中间氨基酸残基选自丙胺酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙胺酸、环己基甘氨酸、色氨酸和脯氨酸，三肽的N-末端氨基酸残基选自任何天然或非天然氨基酸。
在另一个实施方案中，本发明涉及化合物，其中V1包括二肽。二肽可以通过其C-末端连接到Y。在一个实施方案中，二肽的C-末端氨基酸残基选自丙胺酸、精氨酸、瓜氨酸、和赖氨酸，二肽的N-末端氨基酸残基选自任何天然或非天然氨基酸。
在一个实施方案中，当V1的N-末端氨基酸的α-氨基没有偶联到L时，该氨基酸可以用偶联到α-氨基的合适阻断基团官能化，或者可以是非天然氨基酸，从而防止V1由于例如普遍存在的酶或外肽酶而不期望地过早降解。
在另一个实施方案中，V1选自D-丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、D-缬氨酰亮氨酰赖氨酸、D-丙氨酰亮氨酰赖氨酸、D-缬氨酰苯丙氨酰赖氨酸、D-缬氨酰色氨酰赖氨酸、D-丙氨酰色氨酰赖氨酸、丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、缬氨酰亮氨酰赖氨酸、丙氨酰亮氨酰赖氨酸、缬氨酰苯丙氨酰赖氨酸、缬氨酰色氨酰赖氨酸、丙氨酰色氨酰赖氨酸、D-丙氨酰苯丙氨酰瓜氨酸、D-缬氨酰亮氨酰瓜氨酸、D-丙氨酰亮氨酰瓜氨酸、D-缬氨酰苯丙氨酰瓜氨酸、D-缬氨酰色氨酰瓜氨酸、D-丙氨酰色氨酰瓜氨酸、丙氨酰苯丙氨酰瓜氨酸、缬氨酰亮氨酰瓜氨酸、丙氨酰亮氨酰瓜氨酸、缬氨酰苯丙氨酰瓜氨酸、缬氨酰色氨酰瓜氨酸、和丙氨酰色氨酰瓜氨酸。
在还一个实施方案中，V1选自苯丙氨酰赖氨酸、缬氨酰赖氨酸、缬氨酰苯丙氨酸、D-苯丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、苯丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、甘氨酰苯丙氨酰赖氨酸、丙氨酰赖氨酸、缬氨酰瓜氨酸、N-甲基缬氨酰瓜氨酸、苯丙氨酰瓜氨酸、异亮氨酰瓜氨酸、色氨酰赖氨酸、色氨酰瓜氨酸、苯丙氨酰精氨酸、苯丙氨酰丙胺酸、甘氨酰苯丙氨酰亮氨酰甘氨酸、丙氨酰亮氨酰丙氨酰亮氨酸、丙氨酰精氨酰精氨酸、苯丙氨酰-N9-甲苯磺酰基精氨酸、苯丙氨酰-N9-硝基精氨酸、亮氨酰赖氨酸、亮氨酰瓜氨酸、和苯丙氨酰-O-苯甲酰苏氨酸。
在另一个实施方案中，V1选自苯丙氨酰赖氨酸、缬氨酰赖氨酸、和缬氨酰瓜氨酸。
因此，在一个实施方案中，本发明涉及化合物，其中V1包含可以被酶裂解的底物，所述酶为蛋白水解酶、纤溶酶、组织蛋白酶、组织蛋白酶B、β-葡糖醛酸糖苷酶、半乳糖苷酶、前列腺特异性抗原(PSA)、尿激酶型纤溶酶原活化剂(u-PA)、基质金属蛋白酶家族的成员，或者为通过定向酶前药疗法如ADEPT、VDEPT、MDEPT、GDEPT、或PDEPT定位的酶，或者其中V1包含部分，所述部分可以通过在缺氧条件下还原或者通过被硝基还原酶还原而裂解或转化。
在本发明的另一方面，本发明的缀合物(还)用于改善Z的(药动学)性质。当无需在标靶位置选择性除去前部分时，所述前部分的V1可以例如作为或包含这样的基团，所述基团可被普遍存在的酶如循环中存在的酯酶或胞内酶如蛋白酶和磷酸酯酶裂解，可通过pH控制的分子内环化而裂解，或通过酸催化、碱催化、或非催化的水解而裂解，或者V1可以例如作为或包含二硫化物或与邻近的部分形成二硫化物。因此，V1可以任选与L和/或Y的连接原子一起例如形成碳酸酯、氨基甲酸酯、脲、酯、酰胺、亚胺、腙、肟、二硫化物、缩醛、或缩酮基团。这意味着，V1还可以任选与L和/或Y的连接原子一起例如作为-OC(O)-、-C(O)O-、-OC(O)O-、-OC(O)N(Rd)-、-N(Rd)C(O)-、-C(O)N(Rd)-、-N(Rd)C(O)O-、-N(Rd)C(O)N(Re)-、-C(O)-、-OC(Rd)(Re)-、-C(Rd)(Re)O-、-OC(Rd)(Re)O-、-C(Rd)(Re)-、-S-、-S-S-、-C＝，＝C-、-N＝，＝N-、-C＝N-、-N＝C-、-O-N＝，＝N-O-、-C＝N-O-、-O-N＝C-、-N(Rf)-N＝，＝N-N(Rf)-、-N(Rf)-N＝C-、或-C＝N-N(Rf)-，其中Rd、Re、和Rf独立地选自H和任选取代的C1-10烷基或芳基，Rd、Re、和Rf中的两个或更多个结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环。
如果V1或V1-Y作为整个前部分，或者L与Y而不是V1相连，在这种情况下，V1可以例如选自Rg-[O(RnO)P(O)]pp-、Rg-C(O)-、Rg-OC(O)-、和Rg-N(Rn)C(O)-，其中pp选自1至3，每个Rg和Rn独立地选自H和任选取代的C1-15烷基、C1-15杂烷基、C1-15环烷基、C1-15杂环烷基、C4-15芳基、或C4-15杂芳基，Rg和Rn任选地结合形成任选取代的碳环或杂环。
在一个实施方案中，V1选自膦酰基、苯基氨基羰基、4-(哌啶子基)哌啶子基羰基、哌嗪子基羰基、和4-甲基哌嗪子基羰基。
应该注意，在单糖、二糖或低聚糖部分或二肽、三肽、四肽或寡肽形式中，或者在任何其它形式中，V1都可以包含保护基团。当置于将要转化和/或裂解相应的未保护V1的条件下时，包括这种受保护V1的本发明化合物不会释放任何Z部分。然而，当所述化合物脱保护时，这些化合物将在置于适当的条件下时释放一个或多个Z部分。包括这种受保护V1的化合物也落入本发明的范围内。尤其是，式(IV)化合物可以预想上述情况。用于官能团、尤其是用于氨基酸的合适保护基团是有机化学领域公知的，可以例如在T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley &Sons，New York，1981中找到。
式(III)和(IV)的化合物被设计成在转化和/或裂解一个或多个V1和V1′部分后，最终释放式(I)或(II)的化合物，或式(I′)或(II′)的化合物。然而，本发明不排除通过其它机理，从本发明的缀合物中释放式(I)或(II)的化合物、式(I′)或(II′)的化合物、或其衍生物。
在本发明的另一方面，式(III)的化合物作为用于制备式(I)或(II)化合物或另一种式(III)化合物的中间体。在这种情况下，例如V2、L2、L、和Y不存在，p、q、和z全为1，V1部分可以是保护基团。可以存在或不存在一个或多个V2′(-L2′-L′(-V1′-Y′)p′)q′(Z′)z′-1部分，其中V2′、L2′、L′、和Y′可以不存在或存在，p′、q′、和z′可以或不可以全为1。在一个实施方案中，式(III)的化合物是V1部分要连接的式(I)或(II)化合物。在另一个实施方案中，式(III)的化合物是V1部分和V2′(-L2′-L′(-V1′-Y′)p′)q′(Z′)z′-1部分要连接的式(I)或(II)化合物。在还一个实施方案中，式(III)的化合物是V1部分和V1′部分要连接的式(I)或(II)化合物。
在一个实施方案中，V1不是保护基团。
在另一个实施方案中，V2、L2、L、和Y不存在，p、q、和z全为1。
在另一个实施方案中，V1是化学可除去的基团(chemically removablegroup)。
在还一个实施方案中，V1是通过X1与Z相连的化学可除去基团。
在还一个实施方案中，V1是通过X1与Z相连的苄基。
在一个实施方案中，V1通过V1上的多于一个官能团与L相连。
在一个实施方案中，V1通过V1上的一个官能团与L相连。
在一个实施方案中，V1通过V1的一个天然或非天然氨基酸侧链的官能团与L相连。
在另一个实施方案中，V1的N-末端氨基酸通过其α-氨基与L相连。
自消除间隔基体系Y 当存在时，自消除间隔基体系Y将V1和任选的L连接到一个或多个部分Z。
自消除间隔基体系Y可以结合到本发明的缀合物中，以例如改善Z或整个缀合物的性质，提供合适的偶联化学，和/或在V1和Z之间产生空间。
本发明的化合物可以在每个前部分中包含多于一个间隔基体系Y。这些部分Y可以相同或不同。
在V1裂解或转化后，Y的左手侧可以变成不封闭的，这导致最终释放一个或多个部分Z。自消除间隔基体系可以例如是WO 02/083180和WO2004/043493中所述的那些，以及本领域技术人员已知的其它自消除间隔基，所述文献的全部内容纳入本文作为参考。
在一方面，本发明涉及化合物，其中Y选自 (W-)w(X-)x(A-)s (W-)w(X-)xC((A)s-)r或 (W-)w(X-)xC(D((A)s-)d)r或 (W-)w(X-)xC(D(E((A)s-)e)d)r、或 (W-)w(X-)xC(D(E(F((A)s-)f)e)d)r 其中 W和X分别为相同或不同的单释放1，2+2n电子级联间隔基(n≥1)； A是ω-氨基氨基羰基环化间隔基，在环化时可形成环脲衍生物； C、D、E、和F分别为自消除多释放间隔基或间隔基体系，在活化时可以分别最多释放r、d、e、和f个基团； s为0或1； r、d、e、和f是表示支化程度的数字； w和x是表示聚合程度的数字； r、d、e、和f独立地为2(包括2)至24(包括24)的整数； w和x独立地为0(包括0)至5(包括5)的整数。
在本发明的另一方面，自消除多释放间隔基体系C、D、E、和F独立地选自具有下式的部分
其中 B选自NR21、O、和S； P为C(R22)(R23)Q-(W-)w(X-)x； Q不存在或为-O-CO-； W和X分别为相同或不同的单释放1，2+2n电子级联间隔基(n≥1)； G、H、I、J、K、L、M、N、和O独立地选自具有下式的部分

或

或

或
G、J、和M还可以选自P的组和氢，条件是如果G、J、和M中的两个为氢，则剩余基团必须为
或为

或

或
同时缀合到下列基团上
R21选自H和任选取代的C1-6烷基； R22、R23、R24、和R25独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rx、SRx、S(O)Rx、S(O)2Rx、S(O)ORx、S(O)2ORx、OS(O)Rx、OS(O)2Rx、OS(O)ORx、OS(O)2ORx、ORx、NHRx、N(Rx)Rx1、+N(Rx)(Rx1)Rx2、P(O)(ORx)(ORx1)、OP(O)(ORx)(ORx1)、C(O)Rx、C(O)ORx、C(O)N(Rx1)Rx、OC(O)Rx、OC(O)ORx、OC(O)N(Rx)Rx1、N(Rx1)C(O)Rx、N(Rx1)C(O)ORx、和N(Rx1)C(O)N(Rx2)Rx，其中Rx、Rx1和Rx2独立地选自H和任选取代的C1-6烷基、C1-6杂烷基、C3-20环烷基、C3-20杂环烷基、C4-20芳基、或C4-20杂芳基，Rx、Rx1、和Rx2任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环，取代基R21、R22、R23、R24、和R25中的两个或更多个任选相互连接形成一个或多个脂族或芳族环状结构； g、h、i、j、k、l、m、n、o、h′、g′、k′、j′、n′、m′是表示支化程度的数字，并且独立地为0、1、或2，条件是 如果G＝氢或P，则g、h、i、h′、和g′全等于0； 如果J＝氢或P，则j、k、l、k′、和j′全等于0； 如果M＝氢或P，则m、n、o、n′、和m′全等于0； 如果G、H、I、J、K、L、M、N、或O为

或

或
则分别有g+g′＝1，h+h′＝1，i＝1，j+j′＝1，k+k′＝1，l＝1，m+m′＝1，n+n′＝1，或o＝1； 如果G、H、I、J、K、L、M、N、或O为
则分别有g+g′＝2，h+h′＝2，i＝2，j+j′＝2，k+k′＝2，l＝2，m+m′＝2，n+n′＝2，或o＝1； 如果g′＝0且G不为氢或P，则h、h′、和i等于0且g>0； 如果g＝0且G不为氢或P，则g′>0； 如果g′>0且h′＝0，则i＝0且h>0； 如果g′>0且h＝0，则h′>0且i>0； 如果j′＝0且J不为氢或P，则k、k′、和l等于0且j>0； 如果j＝0且J不为氢或P，则j′>0； 如果j′>0且k′＝0，则l＝0且k>0； 如果j′>0且k＝0，则k′>0且l>0； 如果m′＝0且M不为氢或P，则n、n′、和o等于0且m>0； 如果m＝0且M不为氢或P，则m′>0； 如果m′>0且n′＝0，则o＝0且n>0； 如果m′>0且n＝0，则n′>0且o>0； w和x是聚合的数字，并且独立地为0(包括0)至5(包括5)的数字。
根据本发明的另一个实施方案，1，2+2n电子级联间隔基W和X独立地选自具有下式的部分
其中 Q′＝-R30C＝CR31-、S、O、NR31、-R31C＝N-、或-N＝CR31-； B＝NR32、O、S； P＝C(R28)(R29)Q； Cd；R26、R27、B、和(T-)t(T′-)t′(T″-)t″P以一定的方式连接至Ca、Cb、Cc、和Cd，从而B和(T-)t(T′-)t′(T″-)t″P连接到两个相邻的碳原子上或连接到Ca和Cd上； Q不存在或为-O-CO-； t、t′、和t″是表示聚合程度的数字，并且独立地为0(包括0)至5(包括5)的整数； T、T′、和T″独立地选自具有下式的部分

或

或
R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、和R34独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rx、SRx、S(O)Rx、S(O)2Rx、S(O)ORx、S(O)2ORx、OS(O)Rx、OS(O)2Rx、OS(O)ORx、 OS(O)2ORx、 ORx、NHRx、N(Rx)Rx1、+N(Rx)(Rx1)Rx2、P(O)(ORx)(ORx1)、OP(O)(ORx)(ORx1)、C(O)Rx、C(O)ORx、C(O)N(Rx1)Rx、OC(O)Rx、OC(O)ORx、OC(O)N(Rx)Rx1、N(Rx1)C(O)Rx、N(Rx1)C(O)ORx、和N(Rx1)C(O)N(Rx2)Rx，其中Rx、Rx1和Rx2独立地选自H和任选取代的C1-6烷基、C1-6杂烷基、C3-20环烷基、C3-20杂环烷基、C4-20芳基、或C4-20杂芳基，Rx、Rx1、和Rx2任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环，取代基R26、R27、R28、R29、R30、R31、R32、R33、或R34中的两个或更多个任选相互连接形成一个或多个脂族或芳族环状结构。
在上式中，Q可以为O-CO，但它也可以不存在。例如，据报道，在自消除间隔基与离去基团之间具有苄醚连接、羰基氧基官能团不存在(Q不存在)的化合物可进行自消除xi。
根据本发明的另一个实施方案，ω-氨基氨基羰基环化消除间隔基A是具有下式的部分

或

或

或
其中 a是0或1的整数； b是0或1的整数； c是0或1的整数，条件是a+b+c＝2或3； R35和R36独立地选自H和任选取代的C1-6烷基； R37、R38、R39、R40、R41、和R42独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rx、SRx、S(O)Rx、S(O)2Rx、S(O)ORx、S(O)2ORx、OS(O)Rx、OS(O)2Rx、OS(O)ORx、OS(O)2ORx、ORx、NHRx、N(Rx)Rx1、+N(Rx)(Rx1)Rx2、P(O)(ORx)(ORx1)、OP(O)(ORx)(ORx1)、C(O)Rx、C(O)ORx、C(O)N(Rx1)Rx、OC(O)Rx、OC(O)ORx、OC(O)N(Rx)Rx1、N(Rx1)C(O)Rx、N(Rx1)C(O)ORx、和N(Rx1)C(O)N(Rx2)Rx，其中Rx、Rx1和Rx2独立地选自H和任选取代的C1-6烷基、C1-6杂烷基、C3-20环烷基、C3-20杂环烷基、C4-20芳基、或C4-20杂芳基，Rx、Rx1、和Rx2任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环，R35、R36、R37、R38、R39、R40、R41、和R42任选作为一个或多个任选取代的脂族或芳族环状结构的一部分，取代基R35、R36、R37、R38、R39、R40、R41、或R42中的两个或更多个任选相互连接形成一个或多个脂族或芳族碳环或杂环。
在一个实施方案中，本发明涉及化合物，其中X1为O，Y通过作为Y的一部分的ω-氨基氨基羰基环化间隔基与X1相连。
在一个实施方案中，间隔基体系Y选自
在另一个实施方案中，间隔基体系Y为
在另一个实施方案中，间隔基体系Y为
自消除间隔基的其它实例包括但不限于可以进行环化的间隔基xii，例如任选取代的4-氨基丁酸酰胺、适当取代的双环[2.2.1]和双环[2.2.2]环体系、和2-氨基苯基丙酸酰胺和“三甲基封锁”(“trimethyl-lock”)环化间隔基xiii。其中含胺离去基团连接在α-位的甘氨酸间隔基是本发明化合物的另一种有用的间隔基。xiv 在本发明的缀合物中，间隔基体系Y可以连接到多于一个V1部分。在这种情况下，这些V1部分之一的转化和/或裂解就可以触发一个或多个Z部分的释放。当在不同条件下转化或裂解的V1部分与同一个Y相连时，在将本发明的缀合物置于几种不同条件中的一种条件下时，可能发生一个或多个Z部分的释放。或者，可以使用需要触发两次或更多次以自身消除的间隔基体系Y。这种自消除间隔基的实例是N-二(羟乙基)甘氨酸(bicine)间隔基。xv当这种间隔基与连接到所述间隔基上的不同选择性可裂解V1部分组合使用时，可以提高Z释放的选择性，因为在释放Z之前，必须满足两种不同的条件。
连接基团L 连接基团L将一个或多个V1和/或Y部分连接到L2或RM。当L连接到V1时，合成可以更简洁，化合物可以不太趋于过早降解。将L连接到Y可能具有优点，即V1可以更容易地转化和/或裂解。将L连接到Y的其它原因可能是例如(一部分)Y在V1裂解后仍然与L结合，这防止了反应性小分子的释放，或者使化合物具有改善的(药动学)性质、溶解度、或聚集行为。L可以是将V1或Y直接连接到L2或RM的键。然而，另一方面，L是功能性连接或间隔一个或多个部分V1/Y和L2或RM部分的连接基团。在式(IV)的化合物中，间隔可以使反应配偶子(reaction partner)更易于接近反应性部分RM，例如在偶联功能部分时。在式(III)的化合物中，间隔可以提供更好的V1接近性，因为进一步除去了V2，尤其是在V1的酶裂解或转化的情况下，这样可以改善V1转化和/或裂解的速度。连接基团L可以是水溶性部分或包含一个或多个水溶性部分，从而L为式(III)或(IV)的化合物提供水溶性。L也可以是减少式(III)或(IV)化合物聚集的部分或包含一个或多个这种部分，所述部分可以作为或不作为还提高式(III)或(IV)化合物水溶性的部分。连接基团L必须在其两端包含合适的官能团，以提供与一个或多个V1和/或Y部分和L2或RM的选择性偶联。
在一方面，L部分是直链、支化、或枝状部分，从而它可以任选连接到多于一个V1和/或Y部分。支化通过一个或多个环状结构或者在一个或多个支化原子上发生，所述原子为例如碳、氮、硅、或磷。
与V1和/或Y相连的L中的分支数目不必等于分支的总数，因为在与V1/Y的偶联反应中，由于不完全的化学转化，并非所有分支都可以与V1和/或Y部分偶联。这意味着L可以包含不与V1或Y偶联的分支，而是以例如官能团、H、OH、或离去基团作为末端。
因此，当L支化时，本发明的化合物可以作为混合物存在，其中混合物的每种组分具有不同的p值。例如，化合物可以作为两种独立化合物的混合物存在，一种化合物中p为2，一种化合物中p为3。此外，对于给定的p，化合物可以作为异构体的混合物存在，因为V1/Y可以连接到L的不同分支上。
在一个实施方案中，L为键。
在另一个实施方案中，L为直链连接基。
在另一个实施方案中，L是通过包含叠氮基团的分子与包含乙炔基团的分子之间的环加成反应而形成的直链连接基。
在另一个实施方案中，L为支化连接基。
在另一个实施方案中，L为枝状连接基。枝状结构可以例如通过在包含叠氮基团的分子与包含乙炔基团的分子之间的环加成反应而形成。
在一个实施方案中，p为1。
在其它实施方案中，p是2或3或4或6或8或9。
在另一个实施方案中，L由下式表示
其中 X81和X82分别独立地为O、NR85、或S； 每个X83和X84分别独立地为O、NR86、或S； 每个x81、x82、x83和x84独立地为0或1； p″是表示支化程度的数字，并且为选自1(包括1)至128(包括128)的整数； p″′是表示支化程度的数字，并且为选自0(包括0)至127(包括127)的整数； p″+p″′≤128； 每个DD独立地为H、OH、或离去基团； R80不存在或者是枝状、支化或未支化的部分，选自任选取代的亚烷基或聚亚烷基、任选取代的亚杂烷基或聚亚杂烷基、任选取代的亚芳基或聚亚芳基、任选取代的亚杂芳基或聚亚杂芳基、任选取代的亚环烷基或聚亚环烷基、任选取代的亚杂环烷基或聚亚杂环烷基、-(CH2CH2O)v-、-亚烷基-(CH2CH2O)v-、-(CH2CH2O)v-亚烷基-、-亚烷基-(CH2CH2O)v-亚烷基-、-亚杂烷基-(CH2CH2O)v-、-(CH2CH2O)v-亚杂烷基-、-亚杂烷基-(CH2CH2O)v-亚烷基-、-亚杂烷基-(CH2CH2O)v-亚杂烷基-、-亚烷基-(CH2CH2O)v-亚杂烷基-、枝状结构、寡肽、或上述两种或更多种的任何组合； R85和R86独立地选自H和C1-8烷基； v选自1(包括1)至500(包括500)。
例如，L可以选自任选取代的C1-10亚烷基、C1-10亚烷基羰基、C1-12亚烷氧基羰基、C1-12羰基亚烷基、C1-12羰基亚烷氧基羰基、和(CH2CH2O)v-羰基。
在一个实施方案中，L选自
反应性部分RM和连接基团L2 式(IV)化合物中的反应性部分RM与连接基团L相连并能够与反应配偶子上的合适官能团反应。
在本发明的一个实施方案中，反应性部分RM被设计成与部分V2上的官能团反应，这导致形成式(III)的化合物。在该反应中，部分RM被转化为部分L2。在另一个实施方案中，反应性部分RM被设计成例如在体内与补偿部分原位反应，以得到可能是或不是式(III)化合物的化合物。
在本发明的一方面，反应性部分RM包含与反应配偶子如V2上的亲核基团如硫醇基团、氨基、或羟基反应的亲电基团。
在本发明的另一方面，反应性部分RM包含与反应配偶子如V2上的亲电基团如醛基团反应的亲核基团。
在本发明的另一方面，反应性部分RM包含与反应配偶子如V2上的合适补偿(complementary)环加成配偶子部分如二烯、烯烃、1，3-亲偶极、或1，3-偶极反应的环加成配偶子部分，如烯烃、二烯、1，3-偶极、或1，3-亲偶极。
在本发明的另一方面，反应性部分RM包含在金属催化、生物催化、或酶催化条件下，例如钯催化条件下与反应配偶子如V2上的合适补偿基团反应的基团。
在本发明的一方面，反应性部分RM为但不限于

或

或

或

或

或

或

或

或

或

或

或

或

或

或
其中 X8选自-Cl、-Br、-I、-F、-OH、-O-N-琥珀酰亚胺、-O-(4-硝基苯基)、-O-五氟苯基、-O-四氟苯基、-O-C(O)-R50、和-O-C(O)-OR50； X9选自-Cl、-Br、-I、-O-甲磺酰基、-O-三氟甲磺酰基、和-O-甲苯磺酰基； R50为C1-C10烷基或芳基。
在一个实施方案中，部分RM选自

和

和

和

和

和
这使得它能够与反应配偶子如部分V2上的硫醇基团反应。
在一个实施方案中，部分RM为
这使得它能够与反应配偶子如部分V2上的硫醇基团反应。
在另一个实施方案中，部分RM选自

和

和

和

和

和

和

和
这使得它能够与反应配偶子如部分V2上的氨基，如伯氨基或仲氨基反应。
在另一个实施方案中，部分RM选自

和

和

和
这使得它能够与反应配偶子如部分V2上的醛基团反应。
当反应性部分RM已经与V2反应时，式(III)化合物中的连接基团L2表示剩余的RM。该基团然后通过L与部分V2连接。剩余的基团可以为键。然而，通常，L2是连接基团。当式(III)的化合物不是通过式(IV)的化合物形成时，L2不表示剩余的RM，但可以表示类似或相同的部分，并且选自例如任选取代的C1-6亚烷基、C1-6亚杂烷基、C3-7亚环烷基、C3-7亚杂环烷基、C5-10亚芳基、和C5-10亚杂芳基。
在一个实施方案中，部分L2为键。
在另一个实施方案中，部分L2为但不限于

或

或

或

或

或

或

或

或

或

或

或

或
在另一个实施方案中，部分L2为
部分V2 部分V2是功能部分，这意味着它为本发明的化合物增加了额外的功能。
在一个实施方案中，V2是靶向部分。在另一个实施方案中，V2部分是改善本发明化合物的药动学性质的部分。在还一个实施方案中，V2部分是引起本发明化合物在标靶位置累积的部分。在还一个实施方案中，V2部分是改善本发明化合物的水溶性的部分。在还一个实施方案中，V2部分是提高本发明化合物的疏水性的部分。在还一个实施方案中，V2部分是减少本发明化合物的外渗(extravasation)的部分。在还一个实施方案中，V2部分是减少本发明化合物的排泄的部分。在还一个实施方案中，V2部分是降低本发明化合物的免疫原性的部分。在还一个实施方案中，V2部分是提高本发明化合物的循环时间的部分。在还一个实施方案中，V2部分是提高本发明化合物穿越生物屏障，如膜、细胞壁、或血脑屏障的能力的部分。在还一个实施方案中，V2部分是提高本发明化合物的内化能力的部分。在还一个实施方案中，V2部分是引起本发明化合物聚集的部分。在还一个实施方案中，V2部分是减少本发明化合物的聚集的部分。在还一个实施方案中，V2部分是引起本发明化合物形成胶束或脂质体的部分。在还一个实施方案中，V2部分是引起本发明化合物复合至另一种分子如生物分子的部分。在还一个实施方案中，V2部分是与互补核苷酸序列如RNA或DNA复合的聚核苷酸部分。V2部分是引起本发明化合物与另一部分如(官能化的)表面或固体担体结合、缔合、相互作用、或复合的部分。
在另一个实施方案中，V2具有两种或更多种不同的功能。
在本发明的一方面，部分V2在其范围内包括与受体、受体复合物、抗原、或与给定的标靶细胞群相关的其它接受部分结合或反应性缔合或复合的任何单元。V2可以是与希望经过治疗或生物学改性的细胞群的部分结合、复合、或反应的任何分子。V2部分的作用是将一个或多个部分Z递送到V2与之反应或V2与之结合的特定标靶细胞群。这些V2部分包括但不限于配适体、全长抗体和抗体片段、凝集素、生物响应调节剂、酶、维生素、生长因子、甾体、营养物、糖残基、低聚糖残基、激素、及其任何衍生物、或这些物质的任意组合。在结合、反应性缔合、或复合后，本发明的化合物可以内化或不内化。如果发生内化，V1的转化和/或裂解优选发生在标靶细胞内部。
有用的非免疫反应性蛋白质、多肽、或肽V2部分包括但不限于转铁蛋白、表皮生长因子(“EGF”)、铃蟾肽、胃泌素及其衍生物，尤其是包含四肽序列Trp-Met-Asp-Phe-NH2的那些、胃泌素释放肽、血小板衍生生长因子、IL-2、IL-6、转化生长因子(“TGF”)，如TGF-a和TGF-P、肿瘤生长因子、牛痘生长因子(“VGF”)、胰岛素和胰岛素样生长因子I和II、凝集素、和来自低密度脂蛋白的脱辅基蛋白质。
有用的多克隆抗体V2部分是杂化的抗体分子群。可以使用本领域公知的各种方法制备相关抗原的多克隆抗体。
有用的单克隆抗体V2部分是特定抗原(例如癌细胞抗原)的同种抗体群。可以使用本领域已知的用于制备单克隆抗体分子的任何技术制备相关抗原的单克隆抗体(mAb)。
有用的单克隆抗体V2部分包括但不限于人单克隆抗体、人化单克隆抗体、或嵌合人-鼠(或其它物种)单克隆抗体。可以通过本领域已知的许多技术中的任何一种制备人单克隆抗体。
V2部分也可以是双特异性抗体。制备双特异性抗体的方法是本领域已知的。
V2部分可以是抗体的功能活性片段、衍生物、或类似物，所述抗体可免疫特异性地结合到标靶细胞的抗原如癌细胞抗原上。在这点上，“功能活性”意味着片段、衍生物、或类似物能够得到抗-抗独特型抗体，所述抗体可以识别与产生所述片段、衍生物、或类似物的抗体相同的抗原。
其它有用的V2部分包括抗体的片段，包括但不限于F(ab′)2片段，它包含可变区、轻链恒定区和重链CH1域，可以通过胃蛋白酶消化抗体分子而制备，和Fab片段，它可以通过还原F(ab′)2片段的二硫化物桥而产生。其它有用的V2部分是抗体的重链和轻链二聚物，或其任何最小的片段如Fvs或单链抗体(SCAs)、域抗体、anticalins、affibodies，或具有与抗体相同、相似、或可比的特异性的任何其它分子。
此外，可以使用标准重组DNA技术制备重组抗体，如嵌合和人化的单克隆抗体，包括人和非人部分，它们是有用的V2部分。嵌合抗体是一种分子，其中不同的部分源自不同的动物种类，例如具有源自鼠单克隆的可变区和源自人免疫球蛋白恒定区的那些。人化抗体是来自非人物种的抗体分子，具有来自非人物种的一种或多种补充确定区(CDRs)和来自人免疫球蛋白分子的框架区。
完全人抗体作为V2部分是特别合意的。可以例如使用转基团小鼠产生这些抗体，所述转基团小鼠不能表达内生免疫球蛋白重链和轻链基因，但可以表达人重链和轻链基因。在其它实施方案中，V2部分是抗体的融合蛋白，或其功能活性片段或衍生物，例如其中抗体通过共价键(例如肽键)，在N-末端或C-末端与不是所述抗体的另一种蛋白质(或其部分，优选蛋白质的至少10、20、或50个氨基酸部分)的氨基酸序列融合。优选地，抗体或其片段在恒定域的N-末端与其它蛋白质共价连接。
V2部分抗体包括改性的类似物和衍生物，即通过共价连接任何类型的分子，只要这些共价连接允许抗体保留其抗原结合免疫特异性。例如，但不作为限制，抗体的衍生物和类似物包括经过进一步改性的那些，例如通过糖基化、乙酰化、peg化、二硫化物还原、磷酸化、酰胺化、通过已知的保护基团或阻断基团衍生、蛋白水解裂解、连接至其它蛋白质等。此外，类似物或衍生物可以包含一种或多种非天然氨基酸。
V2部分抗体包括在与Fc受体相互作用的氨基酸残基上具有修改(例如取代(例如半胱氨酸变成丝氨酸)、删除、或添加)的抗体。尤其是，它们包括在鉴定为参与Fc域和FcRn受体之间的相互作用的氨基酸残基上具有修改的抗体。也可以引入修改，以使抗体能够与连接基-药物缀合物在抗体的特定位置偶联。
在具体实施方案中，将癌症或肿瘤抗原的免疫特异性抗体用作本发明化合物、组合物、和方法中的V2部分。
癌细胞抗原的免疫特异性抗体可以从商业上获得，或者通过本领域技术人员已知的任何方法制备，例如化学合成或重组表达技术。编码癌细胞抗原的免疫特异性抗体的核苷酸序列可以从例如GenBank数据库或类似的数据库、商业或其它来源、文献出版物、或通过常规克隆和测序获得。
可用于治疗癌症的抗体的实例包括但不限于HERCEPTIN(曲妥单抗；Genentech，CA)，它是用于治疗患有转移性乳腺癌的患者的人化抗-HER2单克隆抗体；RITUXAN(利妥昔单抗；Genentech，CA)，它是用于治疗患有非霍奇金淋巴瘤的患者的嵌合抗-CD20单克隆抗体；OvaRex(oregovomab；AltaRex Corporation，MA)，它是用于治疗卵巢癌的鼠抗体；Panorex(依决可单抗；Glaxo Wellcome，NC)，它是用于治疗直肠结肠癌的鼠IgG2a抗体；IMC-BEC2(米妥莫单抗；ImClone Systems，NY)，它是用于治疗肺癌的鼠IgG抗体；IMC-C225(erbitux；Imclone Systems，NY)，它是用于治疗头颈癌的嵌合IgG抗体；Vitaxin(MedImmune，MD)，它是用于治疗肉瘤的人化抗体；Campath I/H(阿仑单抗；Leukosite，MA)，它是用于治疗慢性淋巴性白血病(CLL)的人化IgG1抗体；SGN-70(Seattle Genetics，WA)，它是用于治疗血液恶病质的人化抗-CD70抗体；Smart MI95(Protein Design Labs，CA)，它是用于治疗急性骨髓性白血病(AML)的人化IgG抗体；LymphoCide(依帕珠单抗，Immunomedics，NJ)，它是用于治疗非霍奇金淋巴瘤的人化IgG抗体；SGN-33(Seattle Genetics，WA)，它是用于治疗急性骨髓性白血病的人化抗-CD33抗体；Smart ID 10(Protein Design Labs，CA)，它是用于治疗非霍奇金淋巴瘤的人化抗体；Oncolym(Techniclone，CA)，它是用于治疗非霍奇金淋巴瘤的鼠抗体；Allomune(Bio Transplant，CA)，它是用于治疗霍奇金病或非霍奇金淋巴瘤的人化抗-CD2 mAb；抗-VEGF(Genentech，CA)，它是用于治疗肺癌和结肠直肠癌的人化抗体；SGN-40(Seattle Genetics，WA)，它是用于治疗多发性骨髓瘤的人化抗-CD40抗体；SGN-30(Seattle Genetics，WA)，它是用于治疗霍奇金病的嵌合抗-CD30抗体；CEAcide(Immunomedics，NJ)，它是用于治疗结肠直肠癌的人化抗-CEA抗体；IMC-1C11(ImClone Systems，NJ)，它是用于治疗结肠直肠癌、肺癌、和黑素瘤的抗-KDR嵌合抗体；和Cetuximab(ImClone Systems，NJ)，它是用于治疗表皮生长因子阳性癌的抗-EGFR嵌合抗体。
可用于治疗癌症的其它抗体包括但不限于对抗下列抗原的抗体CA125、CA15-3、CA19-9、L6、Lewis Y、Lewis X、α-胎蛋白、CA 242、胎盘碱性磷酸酯酶、前列腺特异性抗原、前列酸磷酸酯酶、表皮生长因子受体、HER2、EGFR、VEGF、MAGE-1、MAGE-2、MAGE-3、MAGE-4、抗转铁蛋白受体、p97、MUC1-KLH、MUC18、PSMA、CTLA4、CEA、gp100、MART1、PSA、IL-2受体、CD2、CD4、CD20、CD30、CD52、CD56、CD74、CD33、CD22、HLA-DR、HLA-DR10、人绒膜促性腺素、CD38、CD40、CD70、粘液素、P21、MPG、和Neu致癌基因产物。与肿瘤相关性抗原结合的许多其它内化或非内化抗体也可以用于本发明，其中的一些已经作了回顾。xvi. 在一些实施方案中，抗体是抗核抗体或能够与标靶细胞上表达的受体或受体复合物结合的抗体。受体或受体复合物可以包括免疫球蛋白基因总科成员、整联蛋白、趋化因子受体、TNF受体总科成员、细胞因子受体、主要组织相容性蛋白、补充控制蛋白、或凝集素。
在另一个具体实施方案中，与自身免疫疾病相关的抗原的免疫特异性抗体被用作本发明化合物、组合物、和方法中的V2部分。
在另一个具体实施方案中，病毒或微生物抗原的免疫特异性抗体被用作本发明化合物、组合物、和方法中的V2部分。在用于本文时，术语“病毒抗原”包括但不限于能够引发免疫响应的任何病毒肽或多肽蛋白。在用于本文时，术语“微生物抗原”包括但不限于能够引发免疫响应的任何微生物肽、多肽、蛋白质、糖、多糖、或脂质。
新抗体正在持续不断地被发现和开发出来，本发明提出这些新抗体也可以结合到本发明的化合物中。
V2可以通过例如V2上的杂原子与反应性部分RM反应。V2上可能存在的杂原子包括但不限于硫(在一个实施方案中来自巯基)、氧(在一个实施方案中来自羧基或羟基)、和氮(在一个实施方案中来自伯氨基或仲氨基)。V2也可以通过例如碳原子(在一个实施方案中来自羰基)反应。这些原子可以在V2的天然状态下存在于V2上，例如天然的抗体，或者可以通过化学修饰引入V2中。
通过用还原剂如二硫苏糖醇(DTT)或三(2-羧乙基)磷化氢(TCEP)还原抗体(片段)，可以在抗体或抗体片段中产生游离巯基。通过这种方式，可以获得经过改性的抗体，所述改性抗体可以具有1至约20个巯基，但通常为约1至约9个巯基。
或者，V2可以具有一个或多个碳水化合物基团，所述碳水化合物基团可以经过化学改性以具有一个或多个巯基。作为另一个备选方式，通过使V2上的氨基(例如来自赖氨酸部分)与2-亚氨基氢氯化硫醇(Traut′s试剂)或另一种产生巯基的试剂反应，可以产生巯基。
在一个实施方案中，V2部分是受体结合部分。
在另一个实施方案中，V2部分是抗体或抗体片段。
在另一个实施方案中，V2部分是单克隆抗体或其片段。
在一个实施方案中，V2具有一个或多个巯基，V2通过这些巯基的一个或多个硫原子与式(IV)化合物的一个或多个RM部分反应形成式(III)的化合物。
在还一个实施方案中，V2包含可以化学还原成巯基的二硫化物键(一个二硫化物键形成两个巯基)，然后巯基可以与一个或多个反应性部RM分反应。
在另一个实施方案中，V2包含约1至约3个巯基，所述巯基可以与一个或多个反应性部分RM反应。
在另一个实施方案中，V2包含约3至约5个巯基，所述巯基可以与一个或多个反应性部分RM反应。
在另一个实施方案中，V2包含约7至约9个巯基，所述巯基可以与一个或多个反应性部分RM反应。
在另一个实施方案中，V2可以具有一个或多个碳水化合物基团，所述碳水化合物基团可以经过化学改性以具有一个或多个巯基。V2通过这些一个或多个巯基的硫原子与RM部分反应。
在另一个实施方案中，V2可以具有一个或多个赖氨酸基团，所述赖氨酸基团可以经过化学改性以具有一个或多个巯基，所述巯基可以与一个或多个反应性部分RM反应。
可以与巯基反应的反应性部分包括但不限于氨基甲酰卤、酰卤、α-卤代乙酰胺、卤代甲基酮、乙烯基砜、马来酰亚胺、和2-二硫烷基吡啶。
在还一个实施方案中，V2可以具有一个或多个碳水化合物基团，所述碳水化合物基团可以被氧化以提供一个或多个醛基团。相应的醛然后可以与一个或多个反应性部分RM反应。可以与V2上的羰基反应的反应性部分包括但不限于肼、酰肼、胺、和羟胺。
在还一个实施方案中，V2可以具有一个或多个氨基，例如来自赖氨酸残基，所述氨基可以与一个或多个反应性部分RM反应。可以与氨基反应的反应性部分包括但不限于氨基甲酰卤、α-卤代乙酰胺、酰卤、醛、异氰酸酯、和异硫氰酸酯。
式(III)的缀合物可以作为混合物存在，其中混合物的每种组分具有不同的q值。例如，化合物可以作为两种独立化合物的混合物存在，一种化合物的q为3，另一种化合物的q为4。当分析式(III)的化合物时，理解为q可以是每个V2部分中L2-L(-V1-Y-)p(Z)z/q单元的(四舍五入的)均数。此外，对于给定的q，化合物可以作为异构体的混合物存在，因为q个L2-L(-V1-Y-)p(Z)z/q部分可以连接到V2的不同官能团上。应该注意，如果所有单元都是相同的和/或包含相同数目的Z部分，则每个单元中Z部分的数目只等于z/q。
在一个实施方案中，V2部分通过硫原子连接到L2。
在另一个实施方案中，V2部分通过硫原子连接到L2，q的范围为约1至约20。
在另一个实施方案中，V2部分通过硫原子连接到L2，q的范围为约1至约9。
在另一个实施方案中，V2部分通过硫原子连接到L2，q的范围为约1至约3。
在另一个实施方案中，V2部分通过硫原子连接到L2，q为约2。
在另一个实施方案中，V2部分通过硫原子连接到L2，q的范围为约3至约5。
在另一个实施方案中，V2部分通过硫原子连接到L2，q为约4。
在另一个实施方案中，V2部分通过硫原子连接到L2，q的范围为约7至约9。
在另一个实施方案中，V2部分通过硫原子连接到L2，q为约8。
在一个实施方案中，式(III)的化合物作为独立化合物的混合物存在。
在一个实施方案中，式(III)的化合物作为独立化合物的混合物存在，其中三种化合物的q分别为1、2和3。
在一个实施方案中，式(III)的化合物作为独立化合物的混合物存在，其中三种化合物的q分别为3、4和5。
在一个实施方案中，式(III)的化合物作为独立化合物的混合物存在，其中三种化合物的q分别为5、6和7。
在一个实施方案中，式(III)的化合物作为独立化合物的混合物存在，其中三种化合物的q分别为7、8和9。
在另一个实施方案中，V2部分通过氮原子连接到L2。
在还一个实施方案中，V2部分通过碳原子连接到L2。
在本发明的另一方面，V2部分包括任何单元，所述单元通过与受体、抗原、或与给定的标靶位置如标靶细胞群相关的其它接收部分结合或反应性缔合或复合以外的机理，引起本发明地化合物在标靶位置或其附近累积。一种实现该目标的方式是例如使用大的高分子作为V2部分，所述高分子通过提高的渗透性和保留(EPR)效果靶向至实体瘤组织。Ringsdorf报道了聚合物将抗肿瘤药靶向至肿瘤的用途。xvii通过这种EPR效果，由于血管源性肿瘤脉管体系的无组织病理学及其不连续的内皮，导致对大的高分子渗透性过高，和缺少有效的肿瘤淋巴排泄，使得高分子主动在实体瘤内累积。
V2部分可以例如为支化或未支化的聚合物，例如聚[N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺](HPMA)、聚(2-羟乙基甲基丙烯酸酯)(HEMA)、聚戊二酸或聚-L-戊二酸(PG)、羧甲基右旋糖(CMDex)、聚醛、壳聚糖、多肽、低聚乙二醇或聚乙二醇(PEG)，或共聚物，如HPMA共聚物、HPMA-甲基丙烯酸共聚物、HEMA-甲基丙烯酸共聚物、CMDex共聚物、β-环糊精共聚物、PEG共聚物、或聚(乳酸-共-乙醇酸)共聚物xviii。在本文档中，聚合物和共聚物两者都被称为聚合物。
聚合物可以通过任何合适的官能团与L2相连，在q范围为1至2的缀合物中，官能团可以位于聚合物的一端或两端，或者，官能团(还)可以位于悬挂在聚合物上的基团上，从而L2(还)通过这些悬挂基团连接到聚合物上，q通常为1至约100。任选地，聚合物还可以包含额外的靶向基团，所述靶向基团可以与接收部分如抗体或抗体衍生物结合或反应性缔合或复合，通过悬挂基团或端基与聚合物键合，从而改善对标靶位置的靶向。
或者，V2部分可以是枝状聚合物或蛋白质或蛋白质片段如白蛋白，它们没有靶向性质，除了由于其尺寸或分子量而能够在标靶位置累积。
在一个实施方案中，V2部分是聚合物。
在另一个实施方案中，V2部分是聚合物，q范围为1至约100。
在其它实施方案中，V2部分是聚合物，q范围为1至约500或400或300或200或100或小于100。
在另一个实施方案中，V2部分是聚合物且q范围为1至2。
在具体实施方案中，V2部分是低聚乙二醇或聚乙二醇或其衍生物。
在另一个实施方案中，V2部分是枝状聚合物、蛋白质、或蛋白质片段。
在另一个实施方案中，V2部分是在与受体或受体复合物结合、缔合、或复合之前或之后，能够将缀合物运输穿越生物屏障如细胞膜的部分。在一个实施方案中，V2部分是Tat肽或其衍生物、片段、或类似物，或具有相似的跨膜递送性质的部分。在另一个实施方案中，V2部分是蛋白质或蛋白质片段、抗体或抗体片段、受体结合部分或肽载体部分、或聚合或枝状部分、或其任何组合，它们连接有Tat肽或其衍生物、片段、或类似物，或具有相似的跨膜递送性质的部分。
因此，在本发明的一方面，部分V2是靶向部分，例如选自蛋白质或蛋白质片段、抗体或抗体片段、受体结合部分或肽载体部分、和聚合或枝状部分、或其任何组合。
在本发明的另一方面，V2部分是改善本发明缀合物的药动学性质的部分。例如，可以选择部分V2，使得缀合物的水溶性得到(进一步)改善。通过选择V2为亲水性部分，可以实现这个目标。或者，V2部分可以用于例如提高化合物在循环中的停留时间，减少化合物的溢出和排泄，减少聚集，和/或减少化合物的免疫原性。通过例如选择V2为聚乙二醇或低聚乙二醇或其衍生物，可以实现这个目标。当部分V2是改善本发明缀合物的药动学性质的部分时，V1是能够非特异性裂解或转化的部分，不存在V1′和V2′部分，化合物只用于改善一个或多个Z部分的(药动学)性质。
在一个实施方案中，V2是改善药动学性质的部分，V1是可以特异性裂解或转化的部分。
在另一个实施方案中，V2是低聚乙二醇或聚乙二醇或其衍生物，V1是可以特异性裂解或转化的部分。
在一个实施方案中，V2是改善药动学性质的部分，V1是可以非特异性裂解或转化的部分。
在另一个实施方案中，V2是低聚乙二醇或聚乙二醇或其衍生物，V1是可以非特异性裂解或转化的部分。
在另一个实施方案中，V2是低聚乙二醇或聚乙二醇或其衍生物，V1是可以被普遍存在的酶裂解的部分。
在另一个实施方案中，V2是低聚乙二醇或聚乙二醇或其衍生物，V1是可水解的部分。
在本发明的一方面，V2部分由式(VI)表示
其中V2＊、L2＊、L＊、V1＊、Y＊、p*、q*、和z*具有与说明书中定义的V2、L2、L、V1、Y、p、q、和z相同的意义，除了Y＊与L2相连。应该注意，z*实际上等于q。当式(III)的化合物包含由式(VI)表示的V2部分时，一个或多个L2部分因此与Y＊相连。应该理解，在说明书中，无论何时提到V2、L2、L、V1、Y、p、q、或z，相同的描述都可以分别用于每个V2＊、L2＊、L＊、V1＊、Y＊、p*、q*、或z*。
在式(III)的缀合物中使用式(VI)的V2部分意味着，同一前部分中可以存在两个条件可裂解或条件可转化的部分，因此可能需要两次独立的裂解/转化来完全除去前部分。在释放一个或多个Z前，必须满足两种不同的条件，这种需要可能有利地影响缀合物的性质。例如，它可以提高缀合物的靶向效率。两次转化/裂解可以在不同的胞外/胞内位置发生。在这种情况下，要通过第二次裂解或第二次转化除去的部分可以用于帮助将Z从第一胞外或胞内位置运输到第二胞外或胞内位置。
将明白，式(VI)的V2部分不仅可以用于式(I)或(II)化合物的缀合物，而且可以用于其它治疗药、诊断部分等的相似缀合物。
可以理解，功能部分V2可以具有几种组合的功能性质。例如，V2可以是改善本发明化合物的药动学性质的部分，同时还作为或包含靶向部分。
本发明的缀合物可以包含一个或多个前部分。这些前部分可以相同或不同。存在两个或更多个前部分可以有利地影响缀合物的性质。例如，它可以改善缀合物的水溶性和/或提高靶向效率。在一个实施方案中，当存在两个或更多个前部分时，所述前部分彼此不同。所述两个或更多个前部分可以具有不同的功能，可以在不同的条件下和不同的胞外/胞内位置被除去。
在一个实施方案中，存在一个与Z相连的前部分。
在另一个实施方案中，存在一个通过X1与Z相连的前部分。
在另一个实施方案中，存在两个与Z相连的前部分。
在另一个实施方案中，存在两个与Z相连的前部分，其中一个通过X1连接。
在还一个实施方案中，存在三个与Z相连的前部分。
在还一个实施方案中，存在三个与Z相连的前部分，其中一个通过X1连接。
在一个实施方案中，式(III)的化合物由式(III-1)或(III-2)的化合物表示
在另一个实施方案中，式(III)的化合物由式(III-3)或(III-4)的化合物表示
其中Y′连接到作为R8、R9、R10、或R11组成部分的原子上。
在一个实施方案中，p是1(包括1)至128(包括128)的整数。在另一个实施方案中，q是1(包括1)至1000(包括1000)的整数。在其它实施方案中，p是1(包括1)至64(包括64)或32(包括32)或16(包括16)或8(包括8)或4(包括4)或2(包括2)的整数。在其它实施方案中，q是1(包括1)至500(包括500)或400(包括400)或300(包括300)或200(包括200)或100(包括100)或16(包括16)或8(包括8)或6(包括6)或4(包括4)或2(包括2)的整数。
在一个实施方案中，如果有多于1个前部分与第一个Z相连，并且在前部分之一中存在多于一个连接Z部分的位置，则与所述第一个Z相连的其它所述前部分包含单个连接Z部分的位置。
在一个实施方案中，式(III)的化合物由下式表示
在一个实施方案中，式(IIIa)化合物中的p为1。
在另一个实施方案中，在式(IIIa)化合物中，p为1，z等于q。
在另一个实施方案中，式(IIIa)的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
其中R1a为氯(Cl)或溴(Br)，(AA)aa选自缬氨酰瓜氨酸、缬氨酰赖氨酸、苯丙氨酰赖氨酸、丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、和D-丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸，ss为1或2，R2a和R5b分别为甲基和H，或分别为H和甲基，R8d选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基，R9d选自H和甲氧基，LL选自
qq的范围为1至约20，rr和rr′分别独立地为1至约4，Ab是抗体或其片段或衍生物。
在一个实施方案中，式(III)的化合物由下式表示
在一个实施方案中，式(IIIa＊)化合物中的p*为1。
在另一个实施方案中，式(IIIa＊)化合物中的p*为1，z*等于q*。
在另一个实施方案中，式(III)的化合物由下式表示
在一个实施方案中，式(IIIb)化合物中的p为1。
在一个实施方案中，式(III)的化合物由下式表示
在一个实施方案中，式(IIIb＊)化合物中的p＊为1。
在另一个实施方案中，式(IIIb＊)化合物中的p*为1，z*等于q*。
在另一个实施方案中，式(IIIb＊)化合物中的V1是酶可裂解的底物。在另一个实施方案中，V1可以被胞内酶裂解。在另一个实施方案中，V1是任选取代的二烷基氨基羰基，其中两个烷基可以相同或不同，并任选相互连接形成任选取代的碳环或杂环。在还一个实施方案中，V1是哌嗪羰基。
在另一个实施方案中，式(IIIb＊)的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
其中R1a为氯(Cl)或溴(Br)，(AA)aa选自缬氨酰瓜氨酸、缬氨酰赖氨酸、苯丙氨酰赖氨酸、丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、和D-丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸，ss为1或2，R2a和R5b分别为甲基和H，或分别为H和甲基，R8d选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基，R9d选自H和甲氧基，LL选自
qq的范围为1至约20，rr和rr′分别独立地为1至约4，Ab是抗体或其片段或衍生物。
在另一个实施方案中，式(III)的化合物由下式表示
在还一个实施方案中，式(III)的化合物由下式表示 v1——z(IIId)。
在一个实施方案中，式(IIId)的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
其中R1a为氯(Cl)或溴(Br)，(AA)aa选自缬氨酰瓜氨酸、缬氨酰赖氨酸、苯丙氨酰赖氨酸、丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、和D-丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸，ss为1或2，R2a和R5b分别为甲基和H，或分别为H和甲基，R8e选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、和(哌啶-4-基)甲氧基，其中与R8e相连的羰基连接到R8e的氮原子上，R9d选自H和甲氧基，LL选自
qq′的范围为1至约20，rr和rr′分别独立地为1至约4，Ab是抗体或其片段或衍生物。
在一个实施方案中，本发明涉及式(IIId1)或(IIId2)的化合物
其中V1为己糖或戊糖或庚糖的单糖、二糖、或低聚糖，己糖、戊糖或庚糖也可以包括在脱氧糖或氨基糖的组中，属于D-系列或L-系列，在二糖或低聚糖中可以相同或不同，或其中V1具有式-C(ORa′)Rb′CHRc′Rd′，其中Ra′、Rb′、Rc′、和Rd′具有上面定义相同的意义。
在一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
其中R8c选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、和2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基，R9c选自H和OCH3。
在更具体的实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个更具体的实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个更具体的实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个更具体的实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个更具体的实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或由两种或更多种所述异构体的混合物表示
在另一个实施方案中，本发明的化合物由下式、或其(1R)异构体或两种异构体的混合物表示
本发明化合物的合成、体外细胞毒性、和生物学评价 如下面的详述，按照某些部分类似于例如WO 01/83448、DE 4415463、WO 2004/043493、和WO 02/083180中报告的化合物的方法，可以方便地制备式(I)、(II)、和(III)的化合物、以及式(IV)的化合物。
在一个实施方案中，使用式(I)或(II)的化合物制备式(III)的化合物。在另一个实施方案中，使用式(I)或(II)的化合物制备式(IV)的化合物。在另一个实施方案中，使用式(IV)的化合物制备式(III)的化合物。在另一个实施方案中，使用其中V1为保护基团的式(III)化合物制备其中V1为体内可除去部分的另一种式(III)化合物。
以良好的收率制备了包含水溶性基团的几种DNA结合单元。
图4描述了携带5-(2-(吗啉-4-基)乙氧基)基团的DNA结合剂13的合成。用4-(2-氯乙基)吗啉将4-硝基苯酚9烷基化，以得到10。还原硝基，以得到11，随后费歇尔吲哚合成法得到吲哚12。最终皂化得到化合物13，总收率为37％。
图5描述了DNA结合剂19的合成。从醛14开始，烷基化得到15，然后醇醛缩合，得到叠氮化物16。闭环得到吲哚17，将它皂化以得到18。用二甲胺取代氯，最终得到19，总收率为50％。
图6描述了从异哌啶甲酸乙酯(20)开始，合成DNA结合剂27。甲基化以得到21，然后还原酯基以得到22。将它与1-氯-4-硝基苯(23)偶联，以得到24。还原硝基，得到25。费歇尔吲哚合成法得到26；皂化最终得到27，总收率为40％。
图7示意了DNA结合剂30的制备。从酯28开始，还原硝基，然后与N，N-二甲基甘氨酸偶联，得到29。皂化酯基，最终得到30，收率为68％。
图8示意了DNA结合剂41及其用于制备Boc-保护的DNA结合剂37、DNA结合剂38、和叔丁基保护的DNA结合剂39的用途。
图2示意了将双重保护的DNA烷化剂1部分脱保护，然后使氨基分别与DNA结合剂2、13、19、27、30、37、38、和39偶联。这提供了受保护的化合物3a-h，将它脱保护以提供药物4a-h。
图9示意了根据与制备药物4a-h相似的方法，由化合物44和DNA结合剂2合成药物45。与制备化合物1x类似地制备化合物44，用o-甲苯甲醛代替苯甲醛作为原料。
同样，图10示意了药物33的合成。从31开始，部分脱保护，然后与DNA结合剂2偶联，得到32。最终脱保护，得到药物33。
图3示意了几种半乳糖缀合物的合成。从部分受保护的烷化单元5开始，偶联O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃半乳糖酰基)三氯乙酰亚胺盐(6)，然后脱保护，与DNA结合剂部分偶联，得到受保护的缀合物7a-e。缀合物7b和7d的合成需要使用PtO2·H2O/H2的额外还原步骤。最后脱保护，提供半乳糖缀合物(1S，10R)-8a-e/(1R，10S)-8a′。
同样，图11示意了缀合物36的合成。从34开始，与6偶联，脱保护，与DNA结合剂2偶联，得到(1S，10R)-35/(1R，10S)-35′，通过甲醇分解将其转化为36/36′。
图12示意了连接基-药物缀合物47a-47f的合成。从药物4a开始，活化酚羟基，与Boc-保护的N，N′-二甲基乙二胺或哌嗪偶联，将氨基脱保护，提供化合物46a和46b。与碳酸对硝基苯酯活化的连接基结构57a、57b、和58偶联，提供化合物47a-47d和受保护的47e-47f。在后续的钯催化脱保护后，得到化合物47e-47f。根据图15的流程制备活化的连接基结构。简言之，51a与瓜氨酸之间或51b与Boc-保护的赖氨酸之间偶联，分别得到52a或52b。对氨基苄醇与52a偶联，得到53，通过用哌啶脱保护，然后分别与55和56偶联，并用双(对硝基苯基)碳酸酯活化羟基，将其转化为57a和57b。将52b的Boc基团替换为Aloc基团，然后与对氨基苄醇偶联，得到54，与53至57b的转化过程相似，将其转化为58。通过偶联对氨基苄醇并活化羟基，由57b和58制备化合物59b和60。分5步由53制备化合物59a。
图13描述了通过与包含马来酰亚胺的乙炔发生Cu(I)催化的反应，分别由47c和47d合成连接基-药物缀合物48c和48d。
图14描述了从49开始合成连接基-药物缀合物50a-50c。通过与图12所示类似的途径首先引入甲基哌嗪部分，然后根据图2所示的流程与DNA结合剂37偶联，由5制备化合物49。将49脱保护，然后与碳酸对硝基苯酯活化的连接基结构59a、59b、和60偶联，提供化合物50a-50b和受保护的50c。在后续的钯催化脱保护后，得到化合物50c。通过与乙炔40的Cu(I)催化环加成，可以将化合物47e、47f、50b、和50c转化成与48c类似的化合物。
在体外细胞毒性测试中，检测缀合物(1S，10R)-8a和(1R，10S)-8a′对抗人肺癌细胞系A549的效果(图16)。在缺少酶β-D-半乳糖苷酶时，(1S，10R)-8a和1R，10S)-8a′的非对映异构混合物显示出对抗A549细胞的IC50为7900nM，而存在所述酶时，证实IC50为1.2nM。这意味着细胞毒性商，即缺少酶时的IC50除以存在酶时的IC50，为6583。在缺少酶时，缀合物(1S，10R)-8a显示IC50为3600nM，而在存在酶β-D-半乳糖苷酶时，IC50降至0.75nM，细胞毒性商等于4800。在相同的细胞系中检测缀合物8b-e，显示细胞毒性商类似于或稍大于先前的报告值(cf.ref.x)，药物4b-e显示出纳摩尔或低于纳摩尔的活性。
在原位乳腺癌SCID小鼠模型中，使用ADEPT概念评价化合物(+)-8a。给雌性SCID小鼠接种1×106 MDA-MB-231细胞(雌激素非依赖性人乳腺癌细胞系)，所述细胞悬浮于25μl无菌PBS中，接种于第4乳房体的乳房脂肪垫中。允许肿瘤生长，在肿瘤体积达到可检测的大小后，开始ADEPT疗法。根据图17的治疗表治疗小鼠，小鼠接受单克隆抗人尿激酶纤溶酶原活化剂受体(uPAR)抗体缀合β-半乳糖苷酶(uPAR*β-Gal，在PBS中)的两个治疗周期，然后注射三次缀合物(+)-8a的1％ DMSO/NaCl溶液。对照组接受抗体-酶和1％ DMSO/NaCl溶液(只有抗体-酶的组)、PBS和缀合物(只有缀合物的组)、或PBS和1％ DMSO/NaCl溶液(对照组)。在一个治疗周期后，ADEPT治疗小鼠的原发性肿瘤达到0.23±0.07cm3的平均体积，而载体治疗小鼠的平均原发性肿瘤体积为0.27±0.10cm3。在两个治疗周期后，发现ADEPT治疗组和对照组的平均肿瘤体积分别为0.33±0.13cm3和0.52±0.29cm3(图18)。因此，在第二个治疗周期后，ADEPT概念对肿瘤生长速度的抑制效果似乎稍稍更突出。在开始治疗时具有相对小肿瘤的小鼠中，看到了对肿瘤生长的提高抑制效果(数据未显示)。此外，与来自载体治疗小鼠的肿瘤相比，用ADEPT疗法治疗的肿瘤显示在肿瘤内具有更多的坏死组织。相对于载体对照，用uPAR*β-Gal或缀合物单独治疗没有显示出对肿瘤生长的抑制效果。ADEPT疗法在所有动物体内都具有良好的耐受性。在处死的那天，动物的整体状况与只接受载体的小鼠类似。相对于对照，受治小鼠的血液参数没有变化。
在同源小鼠模型中，使用A20淋巴细胞和抗-CD19单克隆抗体进行等价的体内实验。在与上述相同的治疗程序后，用ADEPT疗法治疗的淋巴瘤显示出肿瘤生长的抑制。
用途、方法、和组合物 在一方面，本发明涉及式(I)或(II)化合物在用于制备式(III)化合物中的应用。
在另一方面，本发明涉及式(IV)化合物在用于制备式(III)化合物中的应用。
在还一方面，本发明涉及式(I)或(II)化合物在用于制备式(IV)化合物中的应用。
在还一方面，本发明涉及其中V1为保护基团的式(III)化合物在用于制备其中V1为体内可除去部分的另一种式(III)化合物中的应用。
在还一方面，本发明涉及上面定义的任何化合物在制备用于治疗有此需要的哺乳动物的药物组合物中的应用。在一个实施方案中，本发明涉及上面定义的任何化合物在制备用于治疗哺乳动物体内的肿瘤的药物组合物中的应用。
本发明还涉及上面定义的任何化合物作为药物或药物的活性组分或活性物质。
在另一方面，本发明涉及制备包含上面定义的化合物的药物组合物，以提供用于口服、局部或注射施用的固体或液体剂型的方法。这种方法或过程至少包括将化合物与药学上可接受的载体混合的步骤。
在一个实施方案中，本发明的化合物用于治疗以不期望的增殖为特征的疾病。在另一个实施方案中，本发明的化合物用于治疗以不期望的细胞增殖为特征的疾病。在另一个实施方案中，本发明的化合物用于治疗肿瘤。在还一个实施方案中，本发明的化合物用于治疗炎性疾病。在还一个实施方案中，本发明的化合物用于治疗自身免疫疾病。在还一个实施方案中，本发明的化合物用于治疗细菌或微生物感染。
在另一个实施方案中，本发明涉及用本发明的化合物治疗哺乳动物的方法，所述哺乳动物患有以不期望的(细胞)增殖为特征的疾病。在另一个实施方案中，本发明涉及用本发明的化合物治疗携带肿瘤的哺乳动物的方法。在还一个实施方案中，本发明涉及用本发明的化合物治疗患有炎性疾病的哺乳动物的方法。在还一个实施方案中，本发明涉及用本发明的化合物治疗患有自身免疫疾病的哺乳动物的方法。在还一个实施方案中，本发明涉及用本发明的化合物治疗患有细菌或微生物感染的哺乳动物的方法。
在另一个实施方案中，本发明涉及治疗有需要的哺乳动物的方法，从而所述方法包括以治疗有效的剂量，将包括本发明化合物的药物组合物给予哺乳动物。
在一个实施方案中，本发明涉及治疗或预防哺乳动物体内的肿瘤的方法，从而所述方法包括以治疗有效的剂量，将包括本发明化合物的药物组合物给予哺乳动物。
在另一个实施方案中，本发明涉及治疗或预防哺乳动物体内的炎性疾病的方法，从而所述方法包括以治疗有效的剂量，将包括本发明化合物的药物组合物给予哺乳动物。
在另一个实施方案中，本发明涉及治疗或预防哺乳动物体内的自身免疫疾病的方法，从而所述方法包括以治疗有效的剂量，将包括本发明化合物的药物组合物给予哺乳动物。
在另一个实施方案中，本发明涉及治疗或预防哺乳动物体内的细菌或微生物感染的方法，从而所述方法包括以治疗有效的剂量，将包括本发明化合物的药物组合物给予哺乳动物。
本发明还涉及包括上面定义的本发明化合物的药物组合物。本发明的化合物可以以纯化的形式与药用载体一起作为药物组合物施用。优选形式取决于预期的施用模式和治疗应用。药用载体可以是适合将本发明的化合物递送至患者的任何相容、无毒的物质。药学上可接受的载体是本领域公知的，包括例如水溶液如(无菌)水或缓冲生理盐水或其它溶剂或载体如二醇、甘油、油如橄榄油或可注射的有机酯、醇、脂肪、蜡、和惰性固体。药学上可接受的载体还可以包含用于例如稳定或提高本发明化合物的吸收的生理上可接受的化合物。这些生理上可接受的化合物包括例如碳水化合物如葡萄糖、蔗糖或右旋糖、抗氧化剂如抗坏血酸或谷胱苷肽、螯合剂、低分子量蛋白质、或其它稳定剂或赋形剂。本领域技术人员将知道，药学上可接受的载体、包括生理上可接受的化合物的选择取决于例如组合物的施用途径。药学上可接受的佐剂、缓冲剂、分散剂等也可以结合到药物组合物中。
对于口服施用，活性成分可以以固体剂量形式如胶囊、片剂、和粉剂，或液体剂量形式如酏剂、糖浆、和混悬剂施用。活性成分可以与无活性的成分和粉末化载体如葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、淀粉、纤维素或纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸、糖精钠、滑石、碳酸镁等一起包封到明胶胶囊中。可以添加以提供合意的颜色、味道、稳定性、缓冲容量、分散性、或其它已知合意特征的其它无活性成分的实例是氧化铁红、硅胶、十二烷基硫酸钠、二氧化钛、可食用的白墨等。类似的稀释剂可以用于制备压制片。片剂和胶囊两者都可以制备成缓释产品，以在几小时内提供持续的药物释放。压制片可以包糖衣或包薄膜衣，以掩盖任何令人不快的味道并将片剂与空气隔离，或者包肠溶衣，以在胃肠道内选择性崩解。用于口服施用的液体剂量形式可以包含着色剂和调味剂以提高患者接受性。
然而，本发明的化合物优选经胃肠外施用。本发明化合物的胃肠外施用制剂必须是无菌的。任选在冻干和重组之前或之后，通过无菌滤膜过滤，方便地实现灭菌。本发明化合物的胃肠外施用途径符合已知的方法，例如通过静脉内、腹膜内、肌内、动脉内、或损伤内途径注射或输注。本发明的化合物可以通过输注或通过推注持续施用。用于静脉内输注的典型组合物可以包含100-500ml无菌0.9％ NaCl或5％葡萄糖，任选地补充20％白蛋白溶液和1mg-10g本发明的化合物，这取决于本发明化合物的具体类型及其所需的给药方案。制备胃肠外可施用组合物的方法是本领域公知的，详述于不同的资料，包括例如Remington′s Pharmaceutical Sciencexix。
通过下列实施例进一步例示本发明。这些实施例仅用于例示，并非用于限制本发明的范围。
实施例 实施例1 rac-{(1，10)-抗-5-苄氧基-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)-吲哚-2-基)羰基]-1-(10-氯乙基)-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚}(rac-3a)将外消旋物1(100mg，228μmol)悬浮于4M HCl/EtOAc中，并在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩并真空干燥1h。将残余物溶于DMF(10mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(131mg，684μmol，3.0equiv.)和2(82.0mg，288μmol，1.3equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌2d，用乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)、和饱和NaHCO3水溶液稀释，并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(4 x 100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)得到外消旋物3，为浅棕色固体(81mg，143μmol，63％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.65(d，J＝6.8Hz，3H，11-CH3)，2.37(s，6H，NMe2)，2.78(t，J＝5.8Hz，2H，2″-H2)，3.96-4.03(m，1H，1-H)，4.12(t，J＝5.8Hz，2H，1″-H2)，4.51-4.66(m，2H，2-Ha，10-H)，4.88(mc，1H，2-Hb)，5.29(mc，2H，OCH2Ph)，7.06(d，J＝2.3 Hz，1H，3′-H)，7.07(dd，J＝8.5，2.4Hz，1H，6′-H)，7.15(d，J＝2.4Hz，1H，4′-H)，7.31-7.46，7.50-7.57(m，8H，7-H，7′-H，8-H，5×Ph-H)，7.71(d，J＝8.3Hz，1H，9-H)，8.17(sbr，1H，4-H)，8.36(d，J＝8.5Hz，1H，6-H)，9.51(sbr，1H，NH)；13C-NMR(75MHz，CDCl3)δ＝24.0(11-CH3)，46.0(NMe2)，47.6(C-1)，53.7(C-2)，58.5(C-2″)，59.9(C-10)，66.6(C-1″)，70.3(OCH2Ph)，98.2(C-4)，103.5(C-4′)，105.9(C-3′)，112.7(C-7′)，117.2(C-6′，C-5a)，122.6，123.7，123.7，123.9(C-6，C-7，C-9，C-9b)，127.5，127.6，128.0，128.2，128.6(C-3a′，C-8，5×Bn-CH)，130.0，130.8，131.3(C-2′，C-7a′，C-9a)，136.8(Bn-C)，142.4(C-3a)，153.9(C-5′)，155.6(C-5)，160.4(C＝O)；MS(EI，70eV)m/z(％)＝567.4(1)[M]+，531.5(5)[M-Cl]+；C34H34ClN3O3(568.11)计算值567.2289，测得值567.2289(EI-HRMS). 实施例2 rac-{(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-5-羟基-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸}(rac-4a)将外消旋物3a(200mg，352μmol)溶于4M HCl/乙酸乙酯(15mL)中并在室温下搅拌2h。将溶液浓缩。将残余物真空干燥1h，然后悬浮于THF(15mL)中。然后在室温下添加活性炭负载的10％钯(75mg)和甲酸铵(25％水溶液，0.75mL)。将反应混合物在40℃搅拌2h，并用Celite过滤，用甲醇(200mL)仔细漂洗Celite。将滤液真空浓缩，残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝5:1，1％浓HCl)纯化，得到rac-4a，为黄绿色粉末(146mg，284μmol，81％)。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.62(d，J＝6.7Hz，3H，11-CH3)，2.84(s，6H，NMe2)，3.51(t，J＝5.0Hz，2H，2″-H2)，4.16(mc，1H，1-H)，4.39(t，J＝5.0Hz，2H，1″-H2)，4.57(mc，1H，2-Ha)，4.66-4.80(m，2H，2-Hb，10-H)，6.99(dd，J＝8.9，2.4Hz，1H，6′-H)，7.16(d，J＝1.6Hz，1H，3′-H)，7.25(d，J＝2.4Hz，1H，4′-H)，7.35(t，J＝7.6Hz，1H，7-H)，7.44(d，J＝8.9Hz，1H，7′-H)，7.50(t，J＝7.6Hz，1H，8-H)，7.88(d，J＝8.4Hz，1H，9-H)，7.96(sbr，1H，4-H)，8.13(d，J＝8.4Hz，1H，6-H)，10.39(s，1H，OH)，10.87(sbr，1H，NH+)，11.64(sbr，1H，NH)；13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ＝23.4(11-CH3)，42.7(NMe2)，45.8(C-1)，52.1(C-2)，55.4(C-2″)，61.5(C-10)，63.0(C-1″)，100.3(C-4)，104.0(C-4′)，105.2(C-3′)，113.2(C-7′)，115.5，115.8(C-6′，C-5a)，122.1，122.8，122.9，123.1(C-6，C-7，C-9，C-9b)，126.9，127.4(C-3a′，C-8)，129.8，131.3，131.9(C-2′，C-7a′，C-9a)，142.1(C-3a)，152.0(C-5′)，153.8(C-5)，159.8(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝478.4(100)[M-Cl+H]+；C27H29Cl2N3O3(514.44)计算值478.1892，测得值478.1892，[M-Cl]+(ESI-HRMS). 实施例3 [(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-7a/(-)-7a′)将rac-5(381mg，1.10mmol)的干CH2Cl2(50mL)溶液和分子筛4

(1.5g)在室温下搅拌30min。在添加O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃半乳糖酰)-三氯乙酰亚胺盐(6)(564mg，1.15mmol，1.05equiv.)后，将混合物冷却到-10℃，并缓慢添加BF3·OEt2(69.0μL，548μmol，0.5equiv.)的干CH2Cl2(5.5mL)溶液。在-10℃ 3h后，再添加BF3·OEt2(0.42mL，3.29mmol，3.0equiv.)的干CH2Cl2(5.0mL)溶液，将混合物温热到室温。在5h后，将溶液与分子筛分离，分子筛用CH2Cl2(2×20mL)仔细漂洗，并将合并的有机物真空浓缩。将残余物真空干燥1h，然后溶于干DMF(60mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(630mg，3.29mmol，3.0equiv.)和2(468mg，1.64mmol，1.5equiv.)。在室温下20h后，用乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)、和饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释反应混合物，然后用乙酸乙酯(4×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(4×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)得到非对映异构体7a和7a′的混合物，为黄色固体(475mg，588μmol，54％)。MS(ESI)m/z(％)＝1637(52)[2M+Na]+，830.3(66)[M+Na]+，808.3(100)[M+H]+. 实施例4 [(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)-吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-8a/(-)-8a′)向7a/7a′(473mg，585μmol)的干MeOH(20mL)溶液中添加NaOMe的甲醇溶液(0.22mL ca.5.4M溶液，1.17mmol，2.0equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并用水(5mL)稀释。添加离子交换树脂(Amberlite-IR 120)，直到溶液达到中性pH为止。将溶液真空浓缩，残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝1:1)纯化，得到8a和8a′的混合物，为浅黄色固体(307mg，480μmol，82％)。1H-NMR(600MHz，DMSO-d6)δ＝1.65(d，J＝6.7Hz，3H，11-CH3)，2.24(s，6H，NMe2)，2.66(t，J＝5.7Hz，2H，2″-H2)，3.41-3.73(m，4H，2″′-H*，4″′-H*，6″′-H2)，3.75-3.86(m，2H，3″′-H*，5″′-H*)，4.07(t，J＝5.7Hz，2H，1″-H2)，4.21-4.28(m，1H，1-H)，4.49-4.67(m，3H，2×OH，2-Ha)，4.68-5.00(m，4H，1″′-H，2-Hb，10-H，OH)，5.30(sbr，1H，OH)，6.92(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H，6′-H)，7.13-7.20(m，2H，3′-H，4′-H)，7.38-7.45(m，2H，7-H，7′-H)，7.57(mc，1H，8-H)，7.96(mc，1H，9-H)，8.23(sbr，1H，4-H)，8.32-8.38(m，1H，6-H)，11.62(sbr，1H，NH)；13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ＝23.4(11-CH3)，45.5(NMe2)，45.9/46.0(C-1)，52.1(2个信号)(C-2)，57.8(C-2″)，59.7/59.8(C-6″′)，61.3(2个信号)(C-10)，66.3(C-1″)，67.6/67.7，70.5/70.6，73.2(2个信号)，75.2(2个信号)(C-2″′，C-3″′，C-4″′，C-5″′)，101.9(C-4)，102.1/102.3(C-1″′)，103.3(2个信号)(C-4′)，105.4(C-3′)，113.2(C-7′)，115.9(2个信号)(C-6′)，118.9(2个信号)(C-5a)，122.90，123.0，123.3/123.4，123.6/123.6(C-6，C-7，C-9，C-9b)，127.3(C-8)，127.5(C-3a′)，129.5(2个信号)，130.9，131.7(2个信号)(C-2′，C-7a′，C-9a)，141.9/142.0(C-3a)，153.0(2个信号)(C-5′)，153.6(2个信号)(C-5)，160.1/160.2(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝1301.0(100)[2M+2H]+，662.3(82)[M+Na]+，640.3(76)[M+H]+；C33H38ClN3O8(640.12)计算值640.2420，测得值640.2420，[M+H]+(ESI-HRMS). 根据类似的方法，分别由(+)-5和(-)-5开始，独立获得两种对映异构体。
实施例5 4-[2-(4-硝基苯氧基)乙基]吗啉(10)将KOH(3.3g，58mmol)的EtOH(15mL)溶液滴加到4-硝基苯酚(9)(7.0g，50mmol)的EtOH(10mL)溶液中。在室温下搅拌30min后，通过过滤收集盐，用冷EtOH洗涤并真空干燥，以得到钾盐9，为黄色固体(7.1g，40mmol)。
将盐(7.1g，40mmol)溶于甲苯(100mL)中，添加4-(2-氯乙基)-吗啉(6.5g，43mmol)的甲苯(100mL)溶液，并将混合物加热回流24h。在冷却到室温后，通过过滤分离沉淀物，用甲苯仔细洗涤，将滤液真空浓缩，以得到10，为浅黄色固体(7.2g，57％总收率)，将其不经进一步纯化用于下一步。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ＝2.54-2.64(m，4H，3-H2，5-H2)，2.84(t，J＝5.5Hz，2H，1′-H2)，3.69-3.78(m，4H，2-H2，6-H2)，4.20(t，J＝5.5Hz，2H，2′-H2)，6.92-7.01(m，2H，2″-H，6″-H)，8.16-8.25(m，2H，3″-H，5″-H)ppm；13CNMR(50.3MHz，CDCl3)δ＝54.1(C-3，C-5)，57.3(C-1′)，66.7(C-2′)，66.9(C-2，C-6)，114.5(C-2″，C-6″)，125.9(C-3″，C-5″)，141.6(C-4″)，163.7(C-1″)ppm；MS(70eV，EI)m/z(％)＝252(8)[M]+，100(100)[M-CH2OC6H4-NO2]+. 实施例6 4-(2-(吗啉-4-基)乙氧基)苯胺(11)在58psi H2，在室温下，将10(6.00g，23.8mmol)的95％ EtOH(40mL)溶液在Pd/C(10％，350mg)上氢化1h。通过Celite过滤除去形成的固体，用EtOH(100mL)和MeOH(50mL)仔细洗涤Celite；将滤液真空浓缩，以得到11(5.29g，quant.)，为红棕色的油，将其不经进一步纯化用于下一步。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝2.57(mc，4H，3″-H2，5″-H2)，2.76(t，J＝5.8Hz，2H，2′-H2)，3.40(sbr，2H，NH2)，3.73(mc，4H，2″-H2，6″-H2)，4.03(t，J＝5.8Hz，2H，1′-H2)，6.59-6.66(m，2H，2-H，6-H)，6.71-6.78(m，2H，3-H，5-H)ppm；13C NMR(50.3MHz，CDCl3)δ＝54.0(C-3″，C-5″)，57.7(C-2′)，66.3(C-1′)，66.8(C-2″，C-6″)，115.7(C-3，C-5)，116.2(C-2，C-6)，140.2(C-1)，151.7(C-4)ppm；MS(70eV，EI)m/z(％)＝222(17)[M]+，100(100)[M-CH2OC6H4-NH2]+. 实施例7 5-(2-(吗啉-4-基)乙氧基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(12)在0℃，滴加NaNO2(1.36g，19.8mmol)的水(3.8mL)溶液处理4-(2-(吗啉-4-基)乙氧基)苯胺(11)(4.00g，18.0mmol)在水(38mL)和浓HCl(12mL)中的搅拌溶液，并将所得混合物在0℃搅拌30min(溶液A)。在0℃，将2-甲基乙酰乙酸乙酯(2.75mL，18.9mmol)滴加到NaOAc(15.3g)的EtOH(29mL)混悬液中。在该温度下搅拌30min后，添加冰(18g)(溶液B)。然后，在0℃，通过转移套管将溶液A添加到溶液B中，使混合物温热到室温，再搅拌2.5h。然后，通过在0℃缓慢添加饱和Na2CO3水溶液，使反应混合物碱化，并用CH2Cl2(3×200mL)萃取。合并的有机层用水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中除去溶剂。然后将残余物溶于无水EtOH(15mL)中，用新鲜制备的HCl的无水EtOH(15mL)饱和溶液处理，并加热回流40min。在冷却到室温后，减压除去溶剂，并残余物在水(50mL)和CH2Cl2(100mL)之间分配。用饱和Na2CO3水溶液将水层碱化并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。在蒸发母液后，通过从iPr2O中结晶和柱色谱法(CH2Cl2/MeOH，20:1)纯化残余物，提供12(4.07g，71％总收率)，为黄色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.41(t，J＝7.1Hz，3H，OCH2CH3)，2.61(mc，4H，3″-H2，5″-H2)，2.84(t，J＝5.7Hz，2H，2′-H2)，3.76(mc，4H，2″-H2，6″-H2)，4.15(t，J＝5.7Hz，2H，1′-H2)，4.40(q，J＝7.1Hz，2H，OCH2CH3)，6.99(dd，J＝9.0，2.4Hz，1H，6-H)，7.08(d，J＝2.4Hz，1H，4-H)，7.13(d，J＝1.3Hz，1H，3-H)，7.30(d，J＝9.0Hz，1H，7-H)，9.13(sbr，1H，NH)ppm；13C NMR(50.3MHz，CDCl3)δ＝14.4(OCH2CH3)，54.1(C-3″，C-5″)，57.7(C-2′)，60.9(OCH2CH3)66.2(C-1′)，66.9(C-2″，C-6″)，103.7(C-4)，108.1(C-3)，112.7(C-7)，117.3(C-6)，127.7，127.9(C-2，C-3a)，132.3(C-7a)，153.7(C-5)，162.0(C＝O)ppm；MS(70eV，EI)m/z(％)＝318(14)[M]+，100(100)[CH2N(CH2)4O]+；C17H22N2O4(318.37)计算值C 64.13，H 6.97；测得值C 63.85，H 7.12. 实施例8 5-(2-(吗啉-4-基)乙氧基)-1H-吲哚-2-羧酸盐酸(13)用NaOH(150mg，3.75mmol)的水(4mL)溶液处理酯12(1.02g，3.20mmol)的MeOH(8mL)混悬液，并加热回流3h。在冷却到室温后，用1M HCl将溶液调整到pH6，并减压除去溶剂。将残余物溶于MeOH，滴加1M HCl，并通过过滤收集形成的沉淀物，以得到13(727mg，70％)，为棕色固体。使用硅胶柱色谱法(MeOH，1％浓HCl)纯化在蒸发母液后获得的残余物，提供第二批13(232mg，22％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝3.07-3.61(m，6H，2′-H2，3″-H2，5″-H2)，3.76-4.06(m，4H，2″-H2，6″-H2)，4.43(t，J＝5.0Hz，2H，1′-H2)，6.98(dd，J＝8.9，2.3Hz，1H，6-H)，7.01(d，J＝1.8Hz，1H，3-H)，7.20(d，J＝2.3Hz，1H，4-H)，7.37(d，J＝8.9Hz，1H，7-H)，11.39(sbr，1H，NH+)，11.65(s，1H，NH)，12.85(sbr，1H，CO2H)ppm；13C NMR(50.3MHz，DMSO-d6)δ＝51.6(C-3″，C-5″)，54.9(C-2′)，62.8(C-1′)，63.1(C-2″，C-6″)，103.9(C-4)，106.9(C-3)，113.5(C-7)，115.9(C-6)，127.0(C-2)，129.0(C-3a)，133.0(C-7a)，152.0(C-5)，162.6(C＝O)ppm；MS(70eV，EI)m/z(％)＝290(6)[M-Cl]+，100(100)[CH2N(CH2)4O]+；C15H19ClN2O4(326.78)计算值C 55.13，H 5.86；测得值C 54.96，H 5.81. 实施例9 (+)-{(1，10)-抗-5-苄氧基-3-[(5-(2-(吗啉-4-基)乙氧基)吲哚-2-基)羰基]-1-(10-氯乙基)-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚}((+)-3b)将(+)-1(150mg，342μmol)悬浮于4M HCl/乙酸乙酯(14mL)中，并在室温下搅拌3h。然后将混合物浓缩并真空干燥1h。将残余物溶于DMF(10mL)中，将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(197mg，1.03mmol，3.0equiv.)和13(146mg，445μmol，1.3equiv.)。在室温下21h后，添加乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)、和饱和NaHCO3水溶液(50mL)，混合物用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(4×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝30:1)得到(+)-3b，为浅棕色固体(156mg，256μmol，75％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.62(d，J＝6.7Hz，3H，11-CH3)，2.61(mc，4H，3″′-H2，5″′-H2)，2.83(t，J＝5.8Hz，2H，2″-H2)，3.76(mc，4H，2″′-H2，6″′-H2)，3.89-3.98(m，1H，1-H)，4.15(t，J＝5.8Hz，2H，1″-H2)，4.47-4.61(m，2H，2-Ha，10-H)，4.85(mc，1H，2-Hb)，5.25(mc，2H，OCH2Ph)，6.94-7.02(m，2H，3′-H，6′-H)，7.12(d，J＝2.3Hz，1H，4′-H)，7.29-7.57(m，8H，7-H，7′-H，8-H，5×Ph-H)，7.68(d，J＝8.2Hz，1H，9-H)，8.19(sbr，1H，4-H)，8.34(d，J＝8.2Hz，1H，6-H)，9.88(sbr，1H，NH)；13C-NMR(75MHz，CDCl3)δ＝24.0(11-CH3)，47.5(C-1)，53.6(C-2)，54.1(C-3″′，C-5″′)，57.8(C-2″)，59.9(C-10)，66.3(C-1″)，66.9(C-2″′，C-6″′)，70.3(OCH2Ph)，98.2(C-4)，103.7(C-4′)，105.8(C-3′)，112.8(C-7′)，117.0，117.2(C-6′，C-5a)，122.6(C-9)，123.7，123.7，123.9(C-6，C-7，C-9b)，127.4，127.6，127.9，128.1，128.5(C-3a′，C-8，5×Bn-CH)，130.0，130.8，131.5(C-2′，C-7a′，C-9a)，136.7(Bn-C)，142.4(C-3a)，153.7(C-5′)，155.6(C-5)，160.5(C＝O)；MS(EI，70eV)m/z(％)＝609.2(1)[M]+，573.1(3)[M-Cl-H]+，100.0(100)[CH2(CH2)4O]+.C36H36ClN3O4(610.14)计算值609.2394，测得值609.2394(EI-HRMS). 实施例10 (+)-{(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-5-羟基-3-[(5-(2-(吗啉-4-基)乙氧基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸}((+)-4b)将(+)-3b(80mg，131μmol)的4M HCl/乙酸乙酯(10mL)溶液在室温下搅拌2h。然后将混合物浓缩并真空干燥1h。将残余物悬浮于THF(8mL)中，添加活性炭负载的10％钯(28mg)和甲酸铵(25％水溶液，0.28mL)，反应混合物在40℃搅拌1h，然后通过Celite过滤，用甲醇(150mL)漂洗Celite。将滤液浓缩，残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝5:1，0.1％浓HCl)纯化，以得到(+)-4b，为黄色固体(67mg，120μmol，92％)。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.62(d，J＝6.5Hz，3H，11-CH3)，3.14-3.63(m，6H，2″-H2，3″′-H2，5″′-H2)，3.83-4.03(m，4H，2″′-H2，6″′-H2)，4.12-4.21(m，1H，1-H)，4.41-4.64(m，3H，1″-H2，2-Ha)，4.64-4.82(m，2H，2-Hb，10-H)，7.00(dd，J＝9.0，1.8Hz，1H，6′-H)，7.16(sbr，1H，3′-H)，7.25(mc，1H，4′-H)，7.35(mc，1H，7-H)，7.41-7.55(m，2H，7′-H，8-H)，7.88(d，J＝8.4Hz，1H，9-H)，7.98(sbr，1H，4-H)，8.14(d，J＝8.3Hz，1H，6-H)，10.42(s，1H，OH)，11.65(s，1H，NH)，11.93(sbr，1H，NH+)；13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ＝23.4(11-CH3)，45.9(C-1)，51.6(C-3″′，C-5″′)，52.1(C-2)，54.9(C-2″)，61.5(C-10)，62.8(C-1″)，63.0(C-2″′，C-6″′)，100.4(C-4)，104.0(C-4′)，105.2(C-3′)，113.2(C-7′)，115.6，115.9(C-6′，C-5a)，122.2(C-9b)，122.8，122.9，123.1(C-6，C-7，C-9)，126.9(C-8)，127.4(C-3a′)，129.8，131.3，131.9(C-2′，C-7a′，C-9a)，142.1(C-3a)，151.9(C-5′)，153.9(C-5)，159.8(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝520.1(100)[M-Cl]+；C29H31Cl2N3O4(556.48)计算值520.2003，测得值520.1998，[M-Cl]+(ESI-HRMS). 实施例11 [(+)-(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-3-[(5-(2-(吗啉-4-基)乙氧基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-7b)将(+)-5(142mg，408μmol)的干CH2Cl2(18mL)溶液和分子筛

(0.8g)在室温下搅拌30min。在添加O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃半乳糖酰)-三氯乙酰亚胺盐(6)(207mg，0.420mmol，1.03equiv.)后，将混合物冷却到-10℃，并缓慢添加BF3·OEt2(26μL，205μmol，0.5equiv.)的干CH2Cl2(2.0mL)溶液。在-10℃ 4h后，再添加BF3·OEt2(0.155mL，1.22mmol，3.0equiv.)的干CH2Cl2(1.9mL)溶液，并将混合物温热到室温。在5h后，将溶液与分子筛分离，分子筛用CH2Cl2(2×10mL)仔细漂洗，将合并的有机物真空浓缩。将残余物真空干燥1h，然后溶于干DMF(19mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(235mg，1.23mmol，3.0equiv.)和13(200mg，0.612mmol，1.5equiv.)。在室温下20h后，用乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)、和饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释反应混合物，然后用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(4×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)得到(+)-7b的N-氧化物，为浅棕色固体(142mg，164μmol，40％)。
向N-氧化物(67mg，77μmol)的干乙醇(15mL)溶液中添加PtO2·H2O(6mg，21μmol，0.3equiv.)。然后使氢鼓泡通过反应混合物5h。反应混合物用Celite过滤，并用甲醇(50mL)仔细漂洗Celite。将滤液真空浓缩，残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)纯化，以得到(+)-7b，为黄色固体(53mg，62μmol，81％)。C43H48ClN3O13(850.31)计算值850.2954，测得值850.2948，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例12 [(+)-(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-3-[(5-(2-(吗啉-4-基)乙氧基)-吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-8b)向7a(51mg，60μmol)的干MeOH(6mL)溶液中添加NaOMe的甲醇溶液(22μLca.5.4M溶液，120μmol，2.0equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌20min，并用水(2mL)和甲醇(2mL)稀释。添加离子交换树脂(Amberlite-IR 120)，直到溶液达到中性pH为止。除去树脂并用甲醇(10mL)漂洗。将合并的有机物真空浓缩，残余物通过柱色谱法(梯度CH2Cl2/MeOH＝10:1//CH2Cl2/MeOH＝4:1)纯化。获得的固体用戊烷(4 x 15mL)洗涤，得到8b，为黄色固体(37mg，54μmol，90％)。
1H-NMR(600MHz，DMSO-d6)δ＝1.65(d，J＝6.6Hz，3H，11-CH3)，2.48-2.52(m，4H，3″′-H2，5″′-H2)，2.73(t，J＝5.8Hz，2H，2″-H2)，3.45-3.70(m，8H，2″′-H2，6″′-H2，3″″-H，5″″-H，6″″-H2)，3.76-3.85(m，2H，2″″-H，4″″-H)，4.11(t，J＝5.8Hz，2H，1″-H2)，4.25(mc，1H，1-H)，4.52-4.65(m，3H，2-Ha，2×OH)，4.72-.4.79(m，1H，2-Hb)，4.79-4.88(m，2H，10-H，OH)，4.92(mc，1H，1″′-H)，5.30(sbr，1H，OH)，6.92(dd，J＝8.9，2.4Hz，1H，6′-H)，7.14-7.20(m，2H，3′-H，4′-H)，7.40(d，J＝8.8Hz，1H，7′-H)，7.43(mc，1H，7-H)，7.57(mc，1H，8-H)，7.96(d，J＝8.4Hz，1H，9-H)，8.22(sbr，1H，4-H)，8.36(d，J＝8.5Hz，1H，6-H)，11.63(s，1H，NH)；13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ＝23.4(11-CH3)，46.0(C-1)，52.1(C-2)，53.6(C-3″′，C-5″′)，57.1(C-2″)，59.5(C-6″″)，61.3(C-10)，65.9(C-1″)，66.2(C-2″′，C-6″′)，67.5(C-4″″)，70.6(C-2″″)，73.2(C-3″″)，75.1(C-5″″)，101.9(C-4)，102.3(C-1″″)，103.4(C-4′)，105.4(C-3′)，113.2(C-7′)，115.9(C-6′)，118.9(C-5a)，122.9，123.0，123.4，123.7(C-6，C-7，C-9，C-9b)，127.3，127.5(C-3a′，C-8)，129.5，130.9，131.7(C-2′，C-7a′，C-9a)，142.0(C-3a)，152.9(C-5′)，153.6(C-5)，160.1(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝1385.1(13)[2M+Na]+，704.3(100)[M+Na]+，682.3(32)[M+H]+；C35H40ClN3O9(682.16)计算值 682.2531，测得值 682.2526，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例13 3-(2-氯乙氧基)-4-甲氧基苯甲醛(15)将3-羟基-4-甲氧基-苯甲醛(14)(10.0g，65.7mmol)、K2CO3(45.4g，329mmol)、1，2-二氯乙烷(104mL，1.31mol)、和DMF(300mL)的混合物在65-70℃搅拌16h。在冷却后，减压除去1，2-二氯乙烷，将剩余的浆倒在冰上，并用Et2O(3×250mL)和EtOAc(4×250mL)萃取混合物。合并的有机层用水(4×400mL)和盐水(2×400mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中除去溶剂。从EtOAc/己烷中结晶，提供15(11.9g，84％)，为无色的针。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ＝3.88(t，J＝6.1Hz，2H，2′-H2)，3.97(s，3H，OMe)，4.35(t，J＝6.1Hz，2H，1′-H2)，7.01(d，J＝8.1Hz，1H，5-H)，7.43(d，J＝1.8Hz，1H，2-H)，7.51(dd，J＝8.1，1.8Hz，1H，6-H)，9.86(s，1H，CHO)ppm；13C NMR(50.3MHz，CDCl3)δ＝41.5(C-2′)，56.2(OMe)，68.9(C-1′)，111.0，111.3(C-2，C-5)，127.4(C-6)，129.9(C-1)，148.1(C-3)，154.9(C-4)，190.7(CHO)ppm；MS(70eV，EI)m/z(％)＝214(100)[M]+，151(57)[M-(CH2)2Cl]+；C10H11ClO3(214.65)计算值C55.96，H 5.17；测得值C 56.04，H 4.97. 实施例14 2-叠氮基-3-[3-(2-氯乙氧基)-4-甲氧基苯基]丙烯酸甲酯(16)将NaN3(22.2g，341mmol)缓慢添加到氯乙酸甲酯(20.0mL，227mmol)的DMSO(100mL)溶液中。在室温下搅拌24h后，添加水(150mL)，并用Et2O(3×100mL)萃取混合物。将合并的有机部分干燥(MgSO4)并真空浓缩到50ml。然后，添加醛15(5.37g，25.0mmol)的MeOH(50mL)溶液，并将混合物冷却到-30℃。然后，在-30℃，在30min内，用5.4M NaOMe/MeOH(35.0mL，189mmol)处理反应混合物，温热到0℃，并用MeOH(50mL)稀释。在0℃搅拌16h后，添加水(200mL)，并用CH2Cl2(3×200mL)萃取混合物。合并的有机部分用盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中除去溶剂，以得到16(6.84g，从15的收率为88％)，为浅黄色固体，将其不经进一步纯化用于下一步。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝3.84(t，J＝6.1Hz，2H，2″-H2)，3.87，3.88(2×s，6H，OMe，CO2Me)，4.29(t，J＝6.1Hz，2H，1″-H2)，6.83(s，1H，1′-H)，6.87(d，J＝8.5Hz，1H，5-H)，7.36(dd，J＝8.5，2.1Hz，1H，6-H)，7.53(d，J＝2.1Hz，1H，2-H)ppm；13C NMR(50.3MHz，CDCl3)δ＝41.6(C-2″)，52.8(CO2Me)，56.0(OMe)，69.3(C-1″)，111.5(C-2)，116.2(C-5)，123.4(C-2′)，125.4，126.0，126.2(C-1，C-1′，C-6)，147.1，150.9(C-3，C-4)，164.1(C＝O)ppm. 实施例15 5-(2-氯乙氧基)-6-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸甲酯(17)将16(6.81g，21.8mmol)的甲苯(200mL)溶液加热回流4h。在冷却到室温后，将反应混合物真空浓缩。通过过滤分离形成的沉淀物并真空干燥，以得到17(4.48g，72％)，为浅黄色固体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝3.82，3.84(2×s，6H，OMe，CO2Me)，3.93(t，J＝5.3Hz，2H，2′-H2)，4.21(t，J＝5.3Hz，2H，1′-H2)，6.92(s，1H，7-H)，7.02(d，J＝1.5Hz，1H，3-H)，7.15(s，1H，4-H)，11.62(sbr，1H，NH)ppm.-13C NMR(50.3MHz，DMSO-d6)δ＝42.9(C-2′)，51.3(CO2Me)，55.5(OMe)，69.4(C-1′)，94.8(C-7)，105.6(C-4)，107.9(C-3)，119.7(C-3a)，125.4(C-2)，133.2(C-7a)，144.1(C-5)，149.8(C-6)，161.4(C＝O)ppm.-MS(70eV，EI)m/z(％)＝283(100)[M]+，220(50)[M-(CH2)2Cl]+.-C13H14ClNO4(283.71)计算值C 55.04，H 4.97，测得值C 54.86，H 5.06. 实施例16 5-(2-氯乙氧基)-6-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸(18)将酯17(2.00g，7.05mmol)、Cs2CO3(3.45g，10.6mmol)、95％ EtOH(40mL)、和水(20mL)的混悬液加热回流8h。在冷却到室温后，在真空中除去溶剂，残余物用水(50mL)处理，所得溶液用2M HCl酸化。通过过滤分离形成的沉淀物，用水(100mL)洗涤，并真空干燥，以得到18(1.80g，95％)，为米色固体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝3.81(s，3H，OMe)，3.93(t，J＝5.3Hz，2H，2′-H2)，4.21(t，J＝5.3Hz，2H，1′-H2)，6.91(s，1H，7-H)，6.96(d，J＝2.1Hz，1H，3-H)，7.15(s，1H，4-H)，11.44(sbr，1H，NH)，12.57(sbr，1H，CO2H)ppm；13C NMR(50.3MHz，DMSO-d6)δ＝43.0(C-2′)，55.6(OMe)，69.5(C-1′)，94.9(C-7)，105.8(C-4)，107.5(C-3)，119.8(C-3a)，126.8(C-2)，133.0(C-7a)，143.9(C-5)，149.5(C-6)，162.4(C＝O)ppm；MS(70eV，EI)m/z(％)＝269(100)[M]+，206(58)[M-(CH2)2Cl]+；C12H12ClNO4(269.68)计算值C 53.44，H 4.49，测得值C 53.54，H 4.29. 实施例17 5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)-6-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸盐酸(19)将酸18(300mg，1.11mmol)、40％ Me2NH水溶液(2.81mL，22.2mmol)、Na2CO3(295mg，2.78mmol)、和水(20mL)的混合物在100℃搅拌1.5h。在冷却到室温后，在真空中除去溶剂，将残余物溶于水(15mL)，所得溶液用2M HCl酸化。然后，将溶液蒸发至干，所得粗产物通过硅胶柱色谱法(MeOH/CH2Cl2，10:1，1％浓HCl)纯化，以提供绿色固体，将其溶于水中。通过过滤除去不溶的硅胶，减压除去水，并将残余物真空干燥，以得到19(343mg，98％)，为灰绿色固体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.87(s，6H，NMe2)，3.49(t，J＝5.0Hz，2H，2′-H2)，3.82(s，3H，OMe)，4.34(t，J＝5.0Hz，2H，1′-H2)，6.94(s，1H，7-H)，6.97(d，J＝1.8Hz，1H，3-H)，7.23(s，1H，4-H)，10.99(sbr，1H，NH+)，11.50(sbr，1H，NH)，12.60(sbr，1H，CO2H)ppm；13C NMR(50.3MHz，DMSO-d6)δ＝42.7(NMe2)，55.2(C-2′)，55.6(OMe)，64.5(C-1′)，94.8(C-7)，106.2(C-4)，107.5(C-3)，119.7(C-3a)，127.0(C-2)，133.2(C-7a)，143.4(C-5)，149.4(C-6)，162.4(C＝O)ppm；MS(70eV，EI)m/z(％)＝278(7)[M-HCl]+，58(100)[CH2NMe2]+；C14H19ClN2O4(314.76)计算值278.1267[M-HCl]+，测得值278.1267. 实施例18 (+)-{(1，10)-抗-5-苄氧基-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)-6-甲氧基-吲哚-2-基)羰基]-1-(10-氯乙基)-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚}((+)-3c)将(+)-1(150mg，342μmol)悬浮于4M HCl/EtOAc中并在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩并真空干燥1.5h。将残余物溶于DMF(10mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(197mg，1.03mmol，3.0equiv.)和19(140mg，445μmol，1.3equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌20h，用乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)和饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(4 x 100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)得到(+)-3c，为浅棕色固体(134mg，224μmol，66％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.60(d，J＝6.7Hz，3H，11-CH3)，2.35(s，6H，NMe2)，2.80(t，J＝6.1Hz，2H，2″-H2)，3.28(s，3H，OCH3)，3.89-3.98(m，1H，1-H)，4.09(t，J＝6.1Hz，2H，1″-H2)，4.48-4.65(m，2H，2-Ha，10-H)，4.78-4.88(m，1H，2-Hb)，5.26(mc，2H，OCH2Ph)，6.71(s，1H，7′-H)，6.98(d，J＝1.5Hz，1H，3′-H)，7.07(s，1H，4′-H)，7.22-7.43，7.45-7.56(2×m，7H，7-H，8-H，5×Ph-H)，7.67(d，J＝8.2Hz，1H，9-H)，8.35(d，J＝8.3Hz，1H，6-H)，8.39(sbr，1H，4-H)，10.68(sbr，1H，NH)；13C-NMR(75MHz，CDCl3)δ＝23.8(11-CH3)，45.8(NMe2)，47.4(C-1)，53.5(C-2)，55.2(OCH3)，58.0(C-2″)，59.7(C-10)，67.4(C-1″)，70.4(OCH2Ph)，93.9(C-7′)，98.5(C-4)，104.8(C-4′)，106.5(C-3′)，117.3(C-5a)，120.5(C-3a′)，122.4(C-9)，123.5，123.6，123.9(C-6，C-7，C-9b)，127.5(2个信号)，127.9，128.5，(C-8，5×Bn-CH)，128.7，129.9，132.3(C-2′，C-7a′，C-9a)，136.6(Bn-C)，142.7(C-3a)，145.0(C-5′)，150.4(C-6′)，155.5(C-5)，160.5(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝1217.0(19)[2M+Na]+，598.2(100)[M+H]+；C35H36ClN3O4(598.13)计算值598.2473，测得值598.2467，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例19 (+)-{(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-5-羟基-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)-6-甲氧基-吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸}((+)-4c)将化合物(+)-3c(80mg，134μmol)溶于4M HCl/乙酸乙酯(15mL)中并在室温下搅拌2h。将溶液浓缩。将残余物真空干燥1h，然后悬浮于THF(8mL)中。然后在室温下添加活性炭负载的10％钯(29mg)和甲酸铵(25％水溶液，0.29mL)。将反应混合物在40℃搅拌20min，并用Celite过滤，用甲醇(150mL)仔细漂洗Celite。将滤液真空浓缩，残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝5:1，0.1％浓HCl)纯化，以得到(+)-4c，为黄绿色粉末(63mg，116μmol，86％)。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.63(d，J＝6.6Hz，3H，11-CH3)，2.89(s，6H，NMe2)，3.51(mc，2H，2¨-H2)，3.84(s，3H，OCH3)，4.11-4.20(mc，1H，1-H)，4.39(mc，2H，1″-H2)，4.50-4.82(m，3H，2-H2，10-H)，7.04(s，1H，7′-H)，7.14(d，J＝1.5Hz，1H，3′-H)，7.30(s，1H，4′-H)，7.34(mc，1H，7-H)，7.50(mc，1H，8-H)，7.87(d，J＝8.2Hz，1H，9-H)，7.99(s，1H，4-H)，8.13(d，J＝8.2Hz，1H，6-H)，10.40(s，1H，OH)，11.18(sbr，1H，NH+)，11.51(sbr，1H，NH)；13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ＝23.4(11-CH3)，42.8(NMe2)，45.9(C-1)，52.1(C-2)，55.3(C-2″)，55.6(OCH3)，61.5(C-10)，64.6(C-1″)，94.7(C-7′)，100.4(C-4)，105.9(C-3′)，106.6(C-4′)，115.6(C-5a)，120.1(C-3a′)，122.1(C-9b)，122.7，122.8(C-7，C-9)，123.1(C-6)，126.9(C-8)，129.4，129.8(C-2′，C-9a)，132.3(C-7a′)，142.3(C-3a)，143.4(C-5′)，149.3(C-6′)，153.8(C-5)，159.7(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝508.2(100)[M-Cl]+；C28H31Cl2N3O4(544.47)计算值508.2003，测得值508.1998，[M-Cl]+(ESI-HRMS). 实施例20 [(+)-(1S，10R)-1-(10-氯乙基)-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)-6-甲氧基-吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-7c)将(+)-5(106mg，305μmol)的干CH2Cl2(14mL)溶液和分子筛4

(0.8g)在室温下搅拌30min。在添加O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃半乳糖酰)-三氯乙酰亚胺盐(6)(155mg，314μmol，1.03equiv.)后，将混合物冷却到-10℃，并缓慢添加BF3·OEt2(19μL，152μmol，0.5equiv.)的干CH2Cl2(1.5mL)溶液。在-10℃ 4h后，再添加BF3·OEt2(116μL，914μmol，3.0equiv.)的干CH2Cl2(1.4mL)溶液，并将混合物温热到室温。在5h后，将溶液与分子筛分离，分子筛用CH2Cl2(2×10mL)仔细漂洗，并将合并的有机物真空浓缩。将残余物真空干燥1h，然后溶于干DMF(14mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(175mg，914μmol，3.0equiv.)和19(144mg，457μmol，1.5equiv.)。在室温下22h后，用乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)、和饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释反应混合物，然后用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(4×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)得到(+)-7c，为浅棕色固体(128mg，153μmol，50％)。C42H48ClN3O13(838.30)计算值838.2957，测得值838.2948，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例21 [(+)-(1S，10R)-1-(10-氯乙基)-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)-6-甲氧基-吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-8c)向化合物(+)-7c(125mg，149μmol)的干MeOH(7mL)溶液添加NaOMe的甲醇溶液(55μL ca.5.4M溶液，298μmol，2.0equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌30min，并用甲醇(9mL)和水(5mL)稀释。添加离子交换树脂(Amberlite-IR 120)，直到溶液达到中性pH为止。将溶液真空浓缩，残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝1:1)纯化，得到(+)-8c，为浅黄色固体(86mg，128μmol，86％)。1H-NMR(600MHz，DMSO-d6)δ＝1.66(d，J＝6.7Hz，3H，11-CH3)，2.25(s，6H，NMe2)，2.66(t，J＝6.0Hz，2H，2″-H2)，3.47(mc，1H，3″′-H)，3.53-3.59(m，2H，5″′-H，6″′-Ha)，3.67(mc，1-H，6″′-Hb)，3.77-3.83(m，5H，2″′-H，4″′-H，OCH3)，4.05(t，J＝6.0Hz，2H，1″-H2)，4.24(mc，1H，1-H)，4.54-4.77(m，4H，2×OH，2-H2)，4.82(mc，1H，10-H)，4.85-4.99(m，2H，1″′-H，OH)，5.32(sbr，1H，OH)，6.98(s，1H，7′-H)，7.14(sbr，1H，3′-H)，7.18(s，1H，4′-H)，7.42(t，J＝7.7Hz，1H，7-H)，7.56(t，J＝7.6Hz，1H，8-H)，7.95(d，J＝8.6Hz，1H，9-H)，8.23(sbr，1H，4-H)，8.35(d，J＝8.6Hz，1H，6-H)，11.48(s，1H，NH)；13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ＝23.4(11-CH3)，45.6(NMe2)，46.0(C-1)，52.0(C-2)，55.6(OCH3)，57.8(C-2″)，59.6(C-6″′)，61.3(C-10)，67.2(C-1″)，67.5(C-4″′)，70.6(C-2″′)，73.3(C-3″′)，75.2(C-5″′)，94.7(C-7′)，101.9(C-4)，102.3(C-1″′)，104.7(C-4′)，106.1(C-3′)，118.6(C-5a)，120.3(C-3a′)，122.8(C-9)，122.9(C-9b)，123.4(C-6)，123.5(C-7)，127.2(C-8)，128.9，129.5(C-2′，C-9a)，131.8(C-7a′)，142.2(C-3a)，144.6(C-5′)，149.4(C-6′)，153.6(C-5)，160.1(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝670.3(100)[M+H]+；C34H40ClN3O9(670.15)计算值 670.2531.测得值 670.2526，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例22 1-甲基哌啶-4-羧酸乙酯(21)将异哌啶甲酸乙酯(20)(5.00g，31.8mmol)溶于冰乙酸(3.80g，63.6mmol)和水(11mL)的冰冷混合物中。然后，添加37％甲醛水溶液(2.85mL，38.2mmol)，在58psi H2，在室温下，将反应混合物在Pd/C(10％，338mg)上氢化3.5h。通过Celite过滤除去固体，用水(50mL)仔细洗涤Celite，在冷却下，用1M NaOH将滤液调整到pH11。用Et2O(5×100mL)萃取所得溶液，将合并的有机部分干燥(MgSO4)，并在减压下除去溶剂，以提供21(5.44g，quant.)，为无色的液体，将其不经进一步纯化用于下一步。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.25(t，J＝7.1Hz，3H，OCH2CH3)，1.69-2.06(m，6H，2-Hax，3-H2，5-H2，6-Hax)，2.18-2.32(m，1H，4-H)，2.27(s，3H，NMe)，2.75-2.87(m，2H，2-Heq，6-Heq)，4.13(q，J＝7.1Hz，2H，OCH2CH3)ppm.-13C NMR(75.5MHz，CDCl3)δ＝14.1(OCH2CH3)，28.2(C-3，C-5)，40.5(C-4)，46.3(NMe)，54.9(C-2，C-6)，60.2(OCH2CH3)，175.0(C＝O)ppm.-MS(70eV，EI)m/z(％)＝171(31)[M]+，142(59)[M-CH2CH3]+，126(40)[M-OCH2CH3]+，98(56)[M-CO2Et]+.-C9H17NO2(171.24). 实施例23 (1-甲基哌啶-4-基)甲醇(22)在0℃，将酯21(10.1g，59.0mmol)的Et2O(40mL)溶液滴加到LiAlH4(2.46g，64.9mmol)的Et2O(200mL)混悬液中。然后，使反应混合物温热到室温，然后在该温度下搅拌4h。缓慢添加水(10mL)，再继续搅拌30min。通过过滤分离形成的白色沉淀物并用Et2O(250mL)仔细洗涤。在减压除去溶剂后，通过蒸馏纯化所得的油(bp.108℃，14mbar)，以得到醇22(6.40g，84％)，为无色的油。-Rf＝0.53(CH2Cl2/MeOH，5:1，5％ NEt3，PMA深蓝色).1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.28(dq，J＝12.2，3.7Hz，2H，3-Hax，5-Hax)，1.38-1.55(m，1H，4-H)，1.68-1.79(m，2H，3-Heq，5-Heq)，1.93(dt，J＝11.8，2.3Hz，2H，2-Hax，6-Hax)，2.26(s，3H，NMe)，2.82-2.92(m，2H，2-Heq，6-Heq)，3.12(sbr，1H，OH)，3.46(d，J＝6.4Hz，2H，CH2OH)ppm.-13C NMR(75.5MHz，CDCl3)δ＝28.8(C-3，C-5)，37.9(C-4)，46.3(NMe)，55.5(C-2，C-6)，67.4(CH2OH)ppm.-MS(70eV，EI)m/z(％)＝129(55)[M]+，128(100)[M-H]+，112(10)[M-OH]+，98(21)[M-CH2OH]+.-C7H15NO(129.20). 实施例24 1-甲基-4-(4-硝基苯氧基甲基)哌啶(24)在40℃，用NaH(60％矿物油溶液，660mg，16.5mmol)分次处理1-氯-4-硝基苯(23)(2.37g，15.0mmol)、醇22(1.94g，15.0mmol)、和DMSO(25mL)的混合物。将混合物在70℃搅拌3h，倒入水(150mL)中，并用Et2O(5×100mL)萃取。合并的有机部分用水(250mL)和盐水(250mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中除去溶剂。所得固体从Et2O中重结晶，以得到24(3.12g，83％)，为黄色的针。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.36-1.56(m，2H，3-Hax，5-Hax)，1.75-1.91(m，3H，3-Heq，4-H，5-Heq)，1.98(dt，J＝11.9，1.9Hz，2H，2-Hax，6-Hax)，2.30(s，3H，NMe)，2.85-2.98(m，2H，2-Heq，6-Heq)，3.90(d，J＝5.8Hz，2H，OCH2)，6.94(mc，2H，2′-H，6′-H)，8.19(mc，2H，3′-H，5′-H)ppm.-13C NMR(50.3MHz，CDCl3)δ＝28.9(C-3，C-5)，35.1(C-4)，46.4(NMe)，55.3(C-2，C-6)，73.3(OCH2)，114.3(C-2′，C-6′)，125.8(C-3′，C-5′)，141.3(C-4′)，164.1(C-1′)ppm.-MS(70eV，EI)m/z(％)＝250(79)[M]+，249(100)[M-H]+.-C13H18N2O3(250.29)计算值C 62.38，H 7.25；测得值C 62.25，H 7.40. 实施例25 4-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)苯胺(25)在58psi H2，在室温下，将1-甲基-4-(4-硝基-苯氧基甲基)哌啶(24)(1.0g，4.0mmol)、MeOH(20mL)、和浓HCl(1mL)的溶液在Pd/C(10％，100mg)上氢化1h。然后，通过Celite过滤除去固体，用MeOH(200mL)仔细洗涤Celite，并将滤液真空浓缩。将残余物溶于水(50mL)中，并用NaHCO3和2M NaOH的饱和水溶液将所得溶液调整到pH10。混合物用CH2Cl2(3×100mL)萃取，干燥(MgSO4)，并在真空中除去溶剂。通过柱色谱法CH2Cl2/MeOH，10:1，2％ NEt3)纯化，得到25(0.72g，82％)，为红棕色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.31-1.48(m，2H，3′-Hax，5′-Hax)，1.66-1.89(m，3H，3′-Heq，4′-H，5′-Heq)，1.96(dt，J＝11.9，2.3Hz，2H，2′-Hax，6′-Hax)，2.28(s，3H，NMe)，2.84-2.93(m，2H，2′-Heq，6′-Heq)，3.41(sbr，2H，NH2)，3.73(d，J＝6.4Hz，2H，OCH2)，6.60-6.67(m，2H，3-H，5-H)，6.70-6.76(m，2H，2-H，6-H)ppm.-13C NMR(75.5MHz，CDCl3)δ＝29.1(C-3′，C-5′)，35.3(C-4′)，46.4(NMe)，55.4(C-2′，C-6′)，73.2(OCH2)，115.4(C-3，C-5)，116.3(C-2，C-6)，139.8(C-1)，152.2(C-4)ppm.-MS(70eV，EI)m/z(％)＝220(3)[M]+，112(100)[C7H14N]+.-C13H20N2O(220.31)计算值C 70.87，H 9.15；测得值C 70.50，H 8.94. 实施例26 5-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(26)在0℃，向4-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)苯胺(25)(2.00g，9.08mmol)在水(19mL)和浓HCl(6mL)中的搅拌溶液中滴加NaNO2(689mg，9.99mmol)的水(6mL)溶液，在0℃继续搅拌50min(溶液A)。在0℃，将2-甲基乙酰乙酸乙酯(1.39mL，9.53mmol)滴加到NaOAc(7.8g)的EtOH(15mL)搅拌混悬液中，并在该温度下继续搅拌30min；然后添加冰(9g)(溶液B)。在0℃，通过转移套管将溶液A添加到溶液B中，并使混合物温热到室温。在2.5h后，通过在0℃缓慢添加饱和Na2CO3水溶液，使反应混合物碱化，并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并的有机层用水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中除去溶剂。然后将残余物溶于无水EtOH(10mL)中，用新鲜制备的HCl的无水EtOH(10mL)饱和溶液处理，并加热回流50min。在冷却后室温后，减压除去溶剂，并将残余物在水(50mL)和CH2Cl2(100mL)之间分配。用饱和Na2CO3水溶液将水层碱化并用CH2Cl2(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。在蒸发母液后，通过从iPr2O中结晶和柱色谱法(CH2Cl2/MeOH，30:1，2％ NEt3)纯化获得的残余物，提供26(2.06g，72％总收率)，为黄色固体。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.36-1.54(m，5H，OCH2CH3，3′-Hax，5′-Hax)，1.73-2.06(m，5H，2′-Hax，3′-Heq，4′-H，5′-Heq，6′-Hax)，2.30(s，3H，NMe)，2.87-2.97(m，2H，2′-Heq，6′-Heq)，3.83(d，J＝6.2Hz，2H，ArOCH2)，4.40(q，J＝7.2Hz，2H，OCH2CH3)，6.98(dd，J＝8.9，2.4Hz，1H，6-H)，7.05(d，J＝2.0Hz，1H，3-H)，7.12(mc，1H，4-H)，7.30(d，J＝8.9Hz，1H，7-H)，9.11(sbr，1H，NH)ppm.-13C NMR(50.3MHz，CDCl3)δ＝14.4(OCH2CH3)，29.2(C-3′，C-5′)，35.3(C-4′)，46.4(NMe)，55.5(C-2′，C-6′)，60.9(OCH2CH3)，73.2(ArOCH2)，103.4(C-4)，108.1(C-3)，112.7(C-7)，117.2(C-6)，127.8(C-2，C-3a)，132.2(C-7a)，154.1(C-5)，162.0(C＝O)ppm.-MS(70eV，EI)m/z(％)＝316(6)[M]+，112(100)[C7H14N]+.-C18H24N2O3(316.39)计算值C 68.33，H 7.65；测得值C 68.03，H 7.84. 实施例27 5-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)-1H-吲哚-2-羧酸盐酸(27)用NaOH(155mg，3.88mmol)的水(4mL)溶液处理酯26(1.00g，3.16mmol)的MeOH(8mL)混悬液，并加热回流3.5h。在冷却到室温后，用2M HCl将溶液调整到pH6，并减压除去溶剂。将残余物溶于MeOH中，滴加2M HCl，并通过过滤收集形成的沉淀物，以得到27(712mg，69％)，为棕色固体。通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH，6:1，1％浓HCl)纯化在蒸发母液后获得的残余物，以提供第二批27(226mg，22％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.56-1.77(m，2H，3′-Hax，5′-Hax)，1.89-2.09(m，3H，3′-Heq，4′-H，5′-Heq)，2.69(s，3H，NMe)，2.87-3.05(m，2H，2′-Hax，6′-Hax)3.24-3.48(m，2H，2′-Heq，6′-Heq)，3.79-3.92(m，2H，ArOCH2)，6.90(dd，J＝9.0，2.2Hz，1H，6-H)，6.98(d，J＝1.7Hz，1H，3-H)，7.12(d，J＝2.2Hz，1H，4-H)，7.34(d，J＝9.0Hz，1H，7-H)，10.84(sbr，1H，NH+)，11.59(s，1H，NH)，12.74(sbr，1H，CO2H)ppm.-13CNMR(75.5MHz，DMSO-d6)δ＝25.8(C-3′，C-5′)，32.8(C-4′)，42.5(NMe)，52.8(C-2′，C-6′)，71.6(OCH2)，103.4(C-4)，106.8(C-3)，113.3(C-7)，116.0(C-6)，127.1(C-2)，128.7(C-3a)，132.6(C-7a)，152.9(C-5)，162.5(C＝O)ppm.-MS(70eV，EI)m/z(％)＝288(14)[M-HCl]+，112(100)[C7H14N]+.-C16H21ClN2O3(324.80)计算值288.1474[M-HCl]+；测得值288.1474. 实施例28 (+)-{(1，10)-抗-5-苄氧基-3-[(5-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)吲哚-2-基)羰基]-1-(10-氯乙基)-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚}((+)-3d) 将化合物(+)-1(150mg，342μmol)悬浮于4M HCl/乙酸乙酯中，并在室温下搅拌3.5h。将反应混合物浓缩，并真空干燥1h。将残余物溶于DMF(10mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(197mg，1.03mmol，3.0equiv.)和27(144mg，445μmol，1.3equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌23h，用乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)、和饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(4×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)得到(+)-3d，为乳白色固体(158mg，260μmol，76％)。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.32-1.51(m，2H，3″′-Hax，5″′-Hax)，1.63(d，J＝6.7Hz，3H，11-CH3)，1.71-1.88(m，3H，3″′-Heq，4″′-H，5″′-Heq)，2.07-2.22(m，2H，2″′-Hax，6″′-Hax)，2.30(s，3H，NCH3)，2.85-3.01(m，2H，2″′-Heq，6″′-Heq)，3.85(d，J＝5.7Hz，2H，1″-H2)，4.16-4.27(m，1H，1-H)，4.56-4.86(m，3H，2-H2，10-H)，5.30(mc，2H，OCH2Ph)，6.93(d，J＝8.9，2.3Hz，1H，6′-H)，7.13-7.20(m，2H，3′-H，4′-H)，7.32-7.49，7.51-7.62(2×m，8H，7-H，7′-H，8-H，5×Ph-H)，7.96(d，J＝8.3Hz，1H，9-H)，8.12(sbr，1H，4-H)，8.23(d，J＝8.4Hz，1H，6-H)，11.62(sbr，1H，NH)；13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ＝23.3(11-CH3)，27.8(C-3″′，C-5″′)，34.2(C-4″′)，45.1(NCH3)，45.9(C-1)，52.0(C-2)，54.3(C-2″′，C-6″′)，61.3(C-10)，69.6(OCH2Ph)，72.3(C-1″)，98.4(C-4)，103.4(C-4′)，105.3(C-3′)，113.1(C-7′)，115.8(C-6′)，117.5(C-5a)，122.6(2个信号)123.0，123.7(C-6，C-7，C-9，C-9b)，127.3，127.4，127.5，127.8，128.4(C-3a′，C-8，5×Bn-CH)，129.6，130.9，131.6(C-2′，C-7a′，C-9a)，136.8(Bn-C)，142.1(C-3a)，153.1(C-5′)，154.2(C-5)，160.1(C＝O)；MS(EI，70eV)m/z(％)＝607.0(4)[M]+，571.0(23)[M-Cl-H]+；C37H38ClN3O3(608.17)计算值608.2680，测得值608.2675，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例29 (+)-{(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-5-羟基-3-[(5-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸}((+)-4d)将化合物(+)-3d(90mg，148μmol)溶于4M HCl/乙酸乙酯(15mL)中并在室温下搅拌2h。将溶液浓缩。将残余物真空干燥1h，然后悬浮于THF(9mL)中。然后在室温下添加活性炭负载的10％钯(32mg)和甲酸铵(25％水溶液，0.32mL)。将反应混合物在40℃搅拌75min，并用Celite过滤，用甲醇(150mL)仔细漂洗Celite。将滤液真空浓缩，残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝5:1，0.1％浓HCl)纯化，以得到(+)-4d，为黄色固体(67mg，121μmol，82％)。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.60(d，J＝6.5Hz，3H，11-CH3)，1.64-1.82(m，2H，3″′-Hax，5″′-Hax)，1.87-2.09(m，3H，3″′-Heq，4″′-H，5″′-Heq)，2.67(s，3H，NCH3)，2.85-3.04(m，2H，2″′-Hax，6″′-Hax)，3.26-3.45(m，2H，2″′-Heq，6″′-Heq)，3.85(mc，2H，1″-H2)，4.14(mc，1H，1-H)，4.47-4.79(m，3H，2-H2，10-H)，6.91(mc，1H，6′-H)，7.11，7.16(2×sbr，2H，3′-H，4′-H)，7.28-7.44(m，2H，7-H，7′-H)，7.48(mc，1H，8-H)，7.86(d，J＝8.3Hz，1H，9-H)，7.96(sbr，1H，4-H)，8.12(d，J＝8.3Hz，1H，6-H)，10.43(s，1H，OH)，10.97(sbr，1H，NH+)，11.59(s，1H，NH)；13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ＝23.4(11-CH3)，25.8(C-3″′，C-5″′)，32.8(C-4″′)，42.5(NCH3)，45.8(C-1)，52.1(C-2)，52.8(C-2″′，C-6″′)，61.5(C-10)，71.7(C-1″)，100.4(C-4)，103.6，105.2(C-3′，C-4′)，113.1(C-7′)，115.6，115.8(C-6′，C-5a)，122.2，122.8，122.9，123.1(C-6，C-7，C-9，C-9b)，126.9(C-8)，127.5(C-3a′)，129.8，131.1，131.7(C-2′，C-7a′，C-9a)，142.1(C-3a)，152.9(C-5′)，153.9(C-5)，159.8(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝518.0(100)[M-Cl]+；C30H33Cl2N3O3(554.51)计算值518.2210，测得值518.2205，[M-Cl]+(ESI-HRMS). 实施例30 [(+)-(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-3-[(5-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-7d)将(+)-5(134mg，385μmol)的干CH2Cl2(17mL)溶液和分子筛4

(0.8g)在室温下搅拌30min。在添加O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃半乳糖酰)-三氯乙酰亚胺盐(6)(196mg，398μmol，1.03equiv.)后，将混合物冷却到-10℃，并缓慢添加BF3·OEt2(25μL，197μmol，0.5equiv.)的干CH2Cl2(1.9mL)溶液。在-10℃ 4h后，再添加BF3·OEt2(0.146mL，1.15mmol，3.0equiv.)的干CH2Cl2(1.8mL)溶液，并将混合物温热到室温。在5h后，将溶液与分子筛分离，分子筛用CH2Cl2(2×10mL)仔细漂洗，并将合并的有机物真空浓缩。将残余物真空干燥1h，然后溶于干DMF(18mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(222mg，1.16mmol，3.0equiv.)和27(188mg，0.579mmol，1.5equiv.)。在室温下22h后，用乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)、和饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释反应混合物，然后用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(4×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(梯度CH2Cl2/MeOH＝10:1//CH2Cl2/MeOH＝5:1)得到(+)-7d(65mg，77μmol，20％)及其N-氧化物(110mg，127μmol，33％)，两者均为浅棕色固体。
向N-氧化物(40mg，46μmol)的干乙醇(6mL)溶液中添加PtO2·H2O(6mg，21μmol，0.5equiv.)。然后使氢鼓泡通过反应混合物16h。将反应混合物用Celite过滤，用甲醇(50mL)和乙醇(100mL)仔细漂洗Celite。将滤液真空浓缩，使残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)纯化，以得到(+)-7d，为黄色固体(24mg，28μmol，61％)。C44H50ClN3O12(848.33)计算值848.3161，测得值848.3156，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例31 [(+)-(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-3-[(5-((1-甲基哌啶-4-基)甲氧基)-吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-8d)向7d(74mg，87μmol)的干MeOH(6mL)溶液中添加NaOMe的甲醇溶液(32μLca.5.4M溶液，173μmol，2.0equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌30min，并用水(2mL)和甲醇(2mL)稀释。添加离子交换树脂(Amberlite-IR 120)，直到溶液达到中性pH为止。除去树脂并用甲醇(10mL)漂洗。将合并的有机物真空浓缩，残余物通过柱色谱法(梯度CH2Cl2/MeOH＝5:1//CH2Cl2/MeOH＝7:1，0.5％ NEt3//CH2Cl2/MeOH＝5:1，0.5％ NEt3)纯化。获得的固体用戊烷(5 x 15mL)洗涤，得到8d，为浅黄色固体(53mg，78μmol，90％)。
1H-NMR(600MHz，DMSO-d6，100℃)δ＝1.40-1.50(m，2H，3″′-Hax，5″′-Hax)，1.65(d，J＝6.7Hz，3H，11-CH3)，1.77-1.86(m，3H，3″′-Heq，4″′-H，5″′-Heq)，2.14(mc，2H，2″′-Hax，6″′-Hax)，2.29(s，3H，NCH3)，2.87-2.93(m，2H，2″′-Heq，6″′-Heq)，3.15(sbr，H2O，4×OH)，3.47-3.51，3.52-3.56，3.60-3.64，3.68-3.73(4×m，4H，3″″-H，5″″-H，6″″-H2)，3.81-3.92(m，4H，1″-H2，2″″-H，4″″-H)，4.22(mc，1H，1-H)，4.63-4.73(m，2H，2-H2)，4.81(mc，1H，10-H)，4.92(d，J＝7.6Hz，1H，1″″-H)，6.93(mc，1H，6′-H)，7.09，7.18(2×sbr，2H，3′-H，4′-H)，7.40-7.45(m，2H，7-H，7′-H)，7.56(mc，1H，8-H)，7.93(d，J＝8.4Hz，1H，9-H)，8.17(sbr，1H，4-H)，8.37(d，J＝8.6Hz，1H，6-H)，11.31(s，1H，NH)；13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ＝23.4(11-CH3)，28.1(C-3″′，C-5″′)，34.5(C-4″′)，45.5(NCH3)，46.0(C-1)，52.1(C-2)，54.5(C-2″′，C-6″′)，59.6(C-6″″)，61.3(C-10)，67.5(C-4″″)，70.6(C-2″″)，72.5(C-1″″)，73.3(C-3″″)，75.2(C-5″″)，101.9(C-4)，102.3(C-1″″)，103.4(C-4′)，105.4(C-3′)，113.2(C-7′)，115.8(C-6′)，118.9(C-5a)，122.9，123.0，123.4，123.7(C-6，C-7，C-9，C-9b)，127.3，127.5(C-3a′，C-8)，129.5，130.9，131.7(C-2′，C-7a′，C-9a)，142.0(C-3a)，153.2(C-5′)，153.6(C-5)，160.2(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝702.3(12)[M+Na]+，680.3(100)[M+H]+；C36H42ClN3O8(680.19)计算值680.2739，测得值680.2733，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例32 5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(29)在60psiH2，在室温下，将5-硝基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(28)(750mg，3.20mmol)的EtOAc(125mL)溶液在Pd/C(10％，300mg)上氢化5h。然后，通过Celite过滤除去固体，用CH2Cl2(400mL)和MeOH(400mL)仔细洗涤Celite，并将滤液真空浓缩。将残余物溶于DMF(30mL)中，并将溶液冷却到0℃。添加EDC·HCl(1.84g，9.60mmol)和N，N-二甲基甘氨酸盐酸(670mg，4.80mmol)，并使反应混合物温热到室温。在该温度下搅拌21h后，用EtOAc(100mL)和水(100mL)稀释溶液。用NaHCO3的饱和水溶液将混合物调整到pH9并用EtOAc(4×150mL)萃取。合并的有机部分用水(4×200mL)和盐水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中除去溶剂。通过柱色谱法CH2Cl2/MeOH，10:1)纯化，得到29(626mg，68％总收率)，为浅棕色固体。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ＝1.42(t，J＝7.1Hz，3H，OCH2CH3)，2.40(s，6H，NMe2)，3.11(s，2H，1′-H2)，4.41(q，J＝7.1Hz，2H，OCH2CH3)，7.18(d，J＝1.8Hz，1H，3-H)，7.36(d，J＝8.8Hz，1H，7-H)，7.43(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H，6-H)，8.04(sbr，1H，4-H)，9.04(sbr，1H，NH)，9.13(sbr，1H，NH)ppm；13CNMR(50.3MHz，CDCl3)δ＝14.3(OCH2CH3)，46.0(NMe2)，61.0(OCH2CH3)，63.6(C-1′)，108.5(C-3)，112.2，112.8(C-4，C-7)，119.2(C-6)，127.5，128.2(C-2，C-3a)，131.1(C-5)，134.1(C-7a)，162.0(NHCO)，168.6(CO2Et)ppm；MS(70eV，EI)m/z(％)＝289(25)[M]+，58(100)[CH2NMe2]+；C15H19N3O3(289.33)计算值289.1426，测得值289.1426. 实施例33 5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸盐酸(30)用LiOH·H2O(0.035g，0.830mmol)处理酯29(0.200g，0.691mmol)、THF(6mL)、MeOH(2mL)、和水(2mL)的混合物并在60℃搅拌4h。然后，在真空中除去溶剂，并将残余物溶于水。用2M HCl将所得溶液酸化，然后减压蒸发水，并残余物吸收到丙酮/EtOH(1:1)中。通过过滤分离剩余的沉淀物(LiCl)，并将滤液真空浓缩。通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH，5:1，0.5％浓HCl)纯化粗产物，提供酸30(0.205g，quant.)，为浅黄色固体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝2.89(s，6H，NMe2)，4.16(s，2H，1′-H2)，7.07(d，J＝2.1Hz，1H，3-H)，7.38-7.46(m，2H，6-H，7-H)，8.01(sbr，1H，4-H)，10.11(sbr，1H，NH+)，10.80(sbr，1H，NH)，11.74(sbr，1H，NH)，12.90(sbr，1H，CO2H)ppm；13C NMR(50.3MHz，DMSO-d6)δ＝43.1(NMe2)，57.8(C-1′)，107.3(C-3)，112.1，112.6(C-4，C-7)，118.4(C-6)，126.6，129.2(C-2，C-3a)，130.9(C-5)，134.4(C-7a)，162.4，162.5(2×C＝O)ppm.-MS(70eV，EI)m/z(％)＝261(7)[M-HCl]+，58(100)[C3H8N]+；C13H16ClN3O3(297.74)计算值261.1113[M-HCl]+，测得值261.1113. 实施例34 (+)-{(1，10)-抗-5-苄氧基-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)吲哚-2-基)羰基]-1-(10-氯乙基)-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚}((+)-3e)将化合物(+)-1(150mg，342μmol)悬浮于4M HCl/EtOAc(14mL)中，并在室温下搅拌3.5h。将反应混合物浓缩并真空干燥1h。将残余物溶于DMF(10mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(197mg，1.03mmol，3.0equiv.)和30(133mg，445μmol，1.3equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌24h，用乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)、和饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(4 x 100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝30:1)得到(+)-3e，为浅绿色泡沫(155mg，267μmol，78％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝1.63(d，J＝6.8Hz，3H，11-CH3)，2.39(s，6H，NMe2)，3.11(s，2H，1″-H2)，3.88-4.02(m，1H，1-H)，4.47-4.63(m，2H，2-Ha，10-H)，4.84(dd，J＝10.8，1.5Hz，1H，2-Hb)，5.24(mc，2H，OCH2Ph)，7.06(d，J＝1.4Hz，1H，3′-H)，7.20(dd，J＝8.8，1.9Hz，1H，6′-H)，7.28-7.56(m，8H，7-H，7′-H，8-H，5×Ph-H)，7.68(d，J＝8.2Hz，1H，9-H)，8.13-8.28(m，2H，4-H，4′-H)，8.35(d，J＝8.3Hz，1H，6-H)，9.11(s，1H，NH)，10.03(s，1H，NH)；13C-NMR(75MHz，CDCl3)δ＝23.9(11-CH3)，46.0(NMe2)，47.4(C-1)，53.5(C-2)，59.9(C-10)，63.6(C-1″)，70.3(OCH2Ph)，98.2(C-4)，106.4(C-3′)，112.1(C-7′)，112.6(C-4′)，117.3(C-5a)，118.8(C-6′)，122.5(C-9)，123.7，123.8，123.9(C-6，C-7，C-9b)，127.4，127.6，127.9，128.0，128.5(C-3a′，C-8，5×Bn-CH)，129.9(C-5′)，131.1，131.2，133.2(C-2′，C-7a′，C-9a)，136.7(Bn-C)，142.3(C-3a)，155.5(C-5)，160.4(C＝O)，168.6(C＝O)；MS(EI，70eV)m/z(％)＝580.0(10)[M]+，544.0(7)[M-Cl-H]+；C34H33ClN4O3(581.10)计算值580.2319，测得值581.2314，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例35 (+)-{(1，10)-抗-1-(10-氯乙基)-5-羟基-3-[(5-(2-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)-吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸}((+)-4e)将化合物(+)-3e(80mg，138μmol)溶于4M HCl/乙酸乙酯(10mL)中并在室温下搅拌2h。将溶液浓缩。将残余物真空干燥1h，然后悬浮于THF(8mL)中。然后在室温下添加活性炭负载的10％钯(30mg)和甲酸铵(25％水溶液，0.30mL)。将反应混合物在40℃搅拌40min，并用Celite过滤，用甲醇(150mL)仔细漂洗Celite。将滤液真空浓缩，残余物通过柱色谱法(MeOH，0.1％浓HCl)纯化。然后将产物溶于少量CH2Cl2/MeOH，0.1％浓HCl中。将溶液过滤，并将滤液浓缩，以得到(+)-4e，为绿色固体(78mg，152μmol，86％)。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ＝1.63(d，J＝6.3Hz，3H，11-CH3)，2.90(s，6H，NMe2)，4.11-4-25(m，3H，1-H，1″-H2)，4.53-4.64(m，1H，2-Ha)，4.65-4.81(m，2H，2-Hb，10-H)，7.21-7.55(m，5H，3′-H，6′-H，7-H，7′-H，8-H)，7.88(d，J＝8.3Hz，1H，9-H)，7.99(sbr，1H，4-H)，8.07-8.19(m，2H，4′-H，6-H)，10.30(sbr，1H，OH)，10.43，11.03，11.73(3×s，3H，2×NH，NH+)；13C-NMR(75MHz，DMSO-d6)δ＝23.3(11-CH3)，43.1(NMe2)，45.8(C-1)，52.1(C-2)，57.9(C-1″)，61.5(C-10)，100.3(C-4)，105.6(C-3′)，112.1，112.3(C-4′，C-7′)，115.9(C-5a)，118.0(C-6′)，122.2，122.9(2个信号)，123.1(C-6，C-7，C-9，C-9b)，126.9，127.0(C-3a′，C-8)，129.7，130.8，131.4，133.3(C-2′，C-5′，C-7a′，C-9a)，142.1(C-3a)，153.8(C-5)，159.7(C＝O)，162.4(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝981.0(11)[2M+H]+，491.1(100)[M-Cl]+；C27H28Cl2N4O3(527.44)计算值491.1850，测得值491.1844，[M-Cl]+(ESI-HRMS). 实施例36 [(+)-(1S，10R)-1-(10-氯乙基)-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-7e)将(+)-5(137mg，394μmol)的干CH2Cl2(17mL)溶液和分子筛4

(0.8g)在室温下搅拌30min。在添加O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃半乳糖酰)-三氯乙酰亚胺盐(6)(200mg，406μmol，1.03equiv.)后，将混合物冷却到-10℃，并缓慢添加BF3·OEt2(25μL，197μmol，0.5equiv.)的干CH2Cl2(1.9mL)溶液。在-10℃4h后，再添加BF3·OEt2(150μL，1.18mmol，3.0equiv.)的干CH2Cl2(1.8mL)溶液，并将混合物温热到室温。在5h后，将溶液与分子筛分离，分子筛用CH2Cl2(2×10mL)仔细漂洗，将合并的有机物真空浓缩。将残余物真空干燥1h，然后溶于干DMF(18mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(227mg，1.18mmol，3.0equiv.)和30(176mg，591μmol，1.5equiv.)。在室温下21h后，用乙酸乙酯(50mL)、水(50mL)、和饱和NaHCO3水溶液(50mL)稀释反应混合物，然后用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(4×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝25:1)得到(+)-7e，为浅棕色固体(155mg，189μmol，48％)。
C41H45ClN4O12(821.27)计算值821.2801，测得值821.2795，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例37 [(+)-(1S，10R)-1-(10-氯乙基)-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-β-D-吡喃半乳糖苷((+)-8e)向(+)-7e(142mg，173μmol)的干MeOH(6mL)溶液中添加NaOMe的甲醇溶液(64μLca.5.4M溶液，346μmol，2.0equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌30min，并用甲醇(2mL)和水(2mL)稀释。添加离子交换树脂(Amberlite-IR 120)，直到溶液达到中性pH为止。从溶液中分离树脂并用甲醇(10mL)漂洗。将合并的有机部分真空浓缩，残余物通过柱色谱法(梯度CH2Cl2/MeOH＝7:1//CH2Cl2/MeOH＝3:1)纯化。粗产物用戊烷(5×15mL)洗涤，得到(+)-8e，为黄色固体(93mg，142μmol，82％)。1H-NMR(600MHz，DMSO-d6)δ＝1.65(d，J＝6.7Hz，3H，11-CH3)，2.31(s，6H，NMe2)，3.08(s，2H，1″-H2)，3.45-3.52(m，1H，3″′-H)，3.53-3.61(m，2H，5″′-H，6″′-Ha)，3.64-3.71(m，1H，6″′-Hb)，3.77-3.85(m，2H，2″′-H，4″′-H)，4.25(mc，1H，1-H)，4.55-4.66(m，3H，2-Ha，2×OH)，4.72-.4.90(m，3H，2-Hb，10-H，OH)，4.93(mc，1H，1″′-H)，5.31(sbr，1H，OH)，7.25(sbr，1H，3′-H)，7.37-7.46(m，3H，6′-H，7′-H，7-H)，7.57(mc，1H，8-H)，7.96(d，J＝8.4Hz，1H，9-H)，8.13(sbr，1H，4′-H)，8.24(sbr，1H，4-H)，8.36(d，J＝8.6Hz，1H，6-H)，9.60(s，1H，NH)，11.70(s，1H，NH)；13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ＝23.4(11-CH3)，45.3(NMe2)，46.0(C-1)，52.1(C-2)，59.6(C-6″′)，61.4(C-10)，63.2(C-1″)，67.5(C-4″′)，70.6(C-2″′)，73.3(C-3″′)，75.2(C-5″′)，101.9(C-4)，102.3(C-1″′)，105.8(C-3′)，112.1(C-4′)，112.2(C-7′)，118.6(C-6′)，119.0(C-5a)，122.9，123.1，123.4，123.7(C-6，C-7，C-9，C-9b)，127.1(C-3a′)，127.3(C-8)，129.5，131.1，131.5，133.3(C-2′，C-5′，C-7a′，C-9a)，142.0(C-3a)，153.6(C-5)，160.1(C＝O)，168.2(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝653.2(100)[M+H]+；C33H37ClN4O8(653.12)计算值653.2378，测得值653.2373，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例38 5-苄氧基-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)吲哚-2-基)羰基]-1-(10-氯甲基)-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚}(rac-32)将化合物rac-31(300mg，708μmol)悬浮于4M HCl/EtOAc(30mL)中，并在室温下搅拌3h。将混合物浓缩并真空干燥2h。将残余物溶于DMF(25mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(407mg，2.12mmol，3.0equiv.)和2(302mg，1.06mmol，1.5equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌2.5d，用乙酸乙酯(100mL)、水(100mL)、和饱和NaHCO3水溶液(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。合并的有机层用盐水(4×200mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)得到rac-32，为黄棕色固体(229mg，413μmol，58％)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ＝2.37(s，6H，NMe2)，2.78(t，J＝5.7Hz，2H，2″-H2)，3.44(t，J＝10.9Hz，1H，10-Ha)，3.95(dd，J＝11.2，2.9Hz，1H，10-Hb)，4.04-4.15(m，3H，1-H，1″-H2)，4.58-4.67(m，1H，2-Ha)，4.78(dd，J＝11.0，1.6Hz，1H，2-Hb)5.25(mc，2H，OCH2Ph)，6.97-7.03(m，2H，3′-H，6′-H)，7.11(d，J＝2.3Hz，1H，4′-H)，7.28-7.43，7.46-7.57(2×m，8H，7-H，7′-H，8-H，5×Ph-H)，7.69(d，J＝8.3Hz，1H，9-H)，8.19(sbr，1H，4-H)，8.34(d，J＝8.3Hz，1H，6-H)，9.75(sbr，1H，NH)；13C-NMR(50MHz，CDCl3)δ＝43.1(C-1)，45.8(NMe2)，46.0(C-10)，55.2(C-2)，58.3(C-2″)，66.4(C-1″)，70.3(OCH2Ph)，98.3(C-4)，103.5(C-4′)，106.1(C-3′)，112.7(C-7′*)，116.4(C-5a)，117.3(C-6′*)，122.1，123.6，123.7，124.1(C-6，C-7，C-9，C-9b)，127.6，127.8，128.0，128.2，128.5(C-3a′，C-8，5×Bn-CH)，129.7，130.5，131.4(C-2′，C-7a′，C-9a)，136.7(Bn-C)，142.1(C-3a)，153.8(C-5′)，155.8(C-5)，160.7(C＝O)；MS(EI，70eV)m/z(％)＝553.3(33)[M]+，517.3(7)[M-Cl]+；C33H32ClN3O3(554.08)计算值553.2132，测得值553.2132(EI-HRMS). 实施例39 1-(10-氯甲基)-5-羟基-3-[(5-(2-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸}(rac-33)将化合物rac-32(100mg，180μmol)溶于4M HCl/乙酸乙酯(10mL)中并在室温下搅拌2h。将溶液浓缩。将残余物真空干燥1h，然后悬浮于THF(15mL)中，然后在室温下添加活性炭负载的10％钯(38mg)和甲酸铵(25％水溶液，0.38mL)。将反应混合物在40℃搅拌4h，并通过Celite过滤，用甲醇(300mL)仔细漂洗Celite。将滤液真空浓缩，残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝5:1，0.1％浓HCl)纯化，以得到rac-33，为黄色固体(73mg，146μmol，81％)。1H-NMR(300MHz，MeOH-d4)δ＝2.98(s，6H，NMe2)，3.51-3.65(m，3H，2″-H2，10-Ha)，3.93(dd，J＝11.2，3.0Hz，1H，10-Hb)，4.03-4.13(m，1H，1-H)，4.32(t，J＝4.8Hz，2H，1″-H2)，4.52-4.66(m，2H，2-H2)，6.99-7.06(m，2H，3′-H，6′-H)，7.24(d，J＝2.4Hz，1H，4′-H)，7.33(t，J＝7.6Hz，1H，7-H)，7.43(d，J＝8.9Hz，1H，7′-H)，7.49(t，J＝7.6Hz，1H，8-H)，7.72(d，J＝8.4Hz，1H，9-H)，7.81(sbr，1H，4-H)，8.18(d，J＝8.4Hz，1H，6-H)；13C-NMR(75MHz，MeOH-d4)δ＝43.5(C-1)，43.9(NMe2)，47.5(C-10)，56.8(C-2)，57.8(C-2″)，63.7(C-1″)，101.4(C-4)，105.2(C-4′)，107.2(C-3′)，114.2(C-7′)，117.1，117.2(C-5a，C-6)，123.5(C-9)，124.3，124.5，124.6(C-6，C-7，C-9a)，128.6(C-8)，129.2，131.5，132.5，133.9(C-2，C-3a′，C-7a，C-9b)，143.1(C-3a)，153.8(C-5′)，155.8(C-5)，162.6(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝928.9(35)[2M-2Cl]+，464.2(100)[M-Cl]+；C26H27Cl2N3O3(500.42)计算值464.1741，测得值464.1736，[M-Cl]+(ESI-HRMS). 实施例40 [1-(10-氯甲基)-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖苷(35/35′)将rac--34(136mg，407μmol)的干CH2Cl2(18mL)溶液和分子筛4

(0.8g)在室温下搅拌30min。在添加O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃半乳糖酰)-三氯乙酰亚胺盐(6)(211mg，428μmol，1.05equiv.)后，将混合物冷却到-10℃，并缓慢添加BF3·OEt2(26μL，205μmol，0.5equiv.)的干CH2Cl2(2.1mL)溶液。在-10℃4h后，再添加BF3·OEt2(155μL，1.22mmol，3.0equiv.)的干CH2Cl2(1.8mL)溶液，并将混合物温热到室温。在5h后，将溶液与分子筛分离，分子筛用CH2Cl2(2×10mL)仔细漂洗，并将合并的有机物真空浓缩。将残余物真空干燥1h，然后溶于干DMF(19mL)中。将溶液冷却到0℃，并添加EDC·HCl(234mg，1.22mmol，3.0equiv.)和2(174mg，611μmol，1.5equiv.)。在室温下20h后，用乙酸乙酯(25mL)、水(25mL)、和饱和NaHCO3水溶液(25mL)稀释反应混合物，然后用乙酸乙酯(4×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(4×100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝10:1)得到两种对映异构体35和35′的混合物，为黄色固体(173mg，218μmol，54％)。(-)-35C40H44ClN3O12(794.24)计算值794.2692，测得值794.2686，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例41 [1-(10-氯甲基)-3-[(5-(2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-5-基]-β-D-吡喃半乳糖苷(36/36′)向35/35′(170mg，214μmol)的干MeOH(9mL)溶液中添加NaOMe的甲醇溶液(79μL ca.5.4M溶液，428μmol，2.0equiv.)。将反应混合物在室温下搅拌2h，并用甲醇(2mL)和水(2mL)稀释。添加离子交换树脂(Amberlite-IR 120)，直到溶液达到中性pH为止。将树脂与溶液分离并用甲醇(10mL)漂洗。将合并的有机部分真空浓缩，残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝1:1)纯化，以得到对映异构体36/36′，为浅黄色固体(94mg，150μmol，70％)。1H-NMR(600MHz，DMSO-d6)δ＝2.24(s，6H，NMe2)，2.66(t，J＝5.9Hz，2H，2″-H2)，3.35-3.86(m，6H，2″′-H，3″′-H，4″′-H，5″′-H，6″′-H2，)，3.89-3.95(m，1H，10-Ha)，4.02-4.09(m，3H，1″-H2，10-Hb)，4.25-4.32(m，1H，1-H)，4.53-4.63(m，3H，2-H2，OH)，4.71-4.97(m，3H，1″′-H，2×OH)，5.27-5.36(m，1H，OH)，6.91(dd，J＝8.9，2.3Hz，1H，6′-H)，7.06-7.11(m，1H，3′-H)，7.17-7.19(m，1H，4′-H)，7.38-7.45(m，2H，7-H，7′-H)，7.57(mc，1H，8-H)，7.91(d，J＝8.6Hz，1H，9-H)，7.98-8.28(m，1H，4-H)，8.33，8.35(2×d，J＝8.6Hz，1H，6-H)，11.62，11.64(2×sbr，1H，NH)；13C-NMR(150MHz，DMSO-d6)δ＝41.0/41.2(C-1)，45.5(NMe2)，47.5(C-10)，54.9/55.0(C-2)，57.8(C-2″)，59.6/59.7(C-6″′)，66.3(C-1″)，67.5/67.7，70.4/70.5，73.2(2个信号)，75.2(C-2″′，C-3″′，C-4″′，C-5″′)，101.8(C-4)， 102.1/102.3 (C-1″′)， 103.2/103.3 (C-4′)， 105.2/105.3 (C-3′)，113.1/113.2(C-7′)， 115.8/115.9(C-6′)，117.9/118.0(C-5a)， 122.70(C-9)，122.9/123.0(C-9b)，123.3/123.4(C-6)，123.7/123.8(C-7)，127.5(C-3a′，C-8)，129.5(2个信号)(C-9a)，130.9(2个信号)，131.6/131.7(C-2′，C-7a′)，142.1(C-3a)，153.0(2个信号)(C-5′)，153.7(2个信号)(C-5)，160.3(2个信号)(C＝O)；MS(ESI)m/z(％)＝1252.0(11)[2M+2H]+，626.4(100)[M+H]+；C32H36ClN3O8(626.10)计算值 626.2269，测得值626.2264，[M+H]+(ESI-HRMS). 实施例42 (1S，10R)-1-(10-氯乙基)-5-羟基-3-[(5-(2-(N-甲基氨基)乙氧基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸(4f)将化合物3f(12mg，18.3μmol)溶于THF(2mL)中。然后在室温下添加活性炭负载的10％钯(4mg)和甲酸铵(25％水溶液，40μL)。将反应混合物在45℃搅拌2h，并用Celite过滤，用甲醇(3 x 5mL)仔细漂洗Celite。将滤液真空浓缩。将残余物溶于4N HCl的乙酸乙酯溶液(10mL)中。将反应混合物在室温下搅拌1h，然后将反应混合物浓缩。向残余物中添加乙酸乙酯，并将混悬液浓缩。残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝5:1，0.1％浓HCl)纯化，以得到4f(5.6mg，11.2μmol，61％)，为浅绿色固体。
1H-NMR(400MHz，CDCl3/CD3OD)δ＝1.65(d，3H，10-CH3)，2.81(s，3H，N-CH3)，3.45(t，2H，2″-H)，4.03(m，1H，1-H)，4.38(t，2H，1″-H)，4.59-4.65(m，2H，10-H，2-H)，4.79(d，1H，2-H)，7.07(d，1H，6′-H)，7.09(s，1H，3′-H)，7.24(s，1H，4′-H)，7.38(t，1H，7-H)，7.47(d，1H，7′-H)，7.52(t，1H，8-H)，7.75(d，1H，9-H)，7.79(br.s，1H，4-H)，8.23(d，1H，6-H). 实施例43 (1S，10R)-1-(10-氯乙基)-5-羟基-3-[(5-(2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸(4g)根据将3f转化为4f的程序，由3g制备化合物4g。以50％的收率获得作为浅绿色固体的化合物4g。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝1.61(m，3H，10-CH3)，2.93(s，3H，NCH3)，3.14-3.18(m，2H，OCH2CH2N)，3.61(s，2H，CH2CO2H)，3.82(m，1H，1-H)，4.17-4.74(m，5H，OCH2CH2N，2 x 2-H，10-H)，6.93-8.12(m，9H，6′-H，3′-H，4′-H，7′-H，7-H，8-H，9-H，4-H，6-H)，10.42(s，1H，NH)，11.67(s，1H，OH)；MS(ESI)m/z＝522[M+H]+，1043[2M+H]+. 实施例44 (1S，10R)-1-(10-氯乙基)-5-羟基-3-[(5-(2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基)吲哚-2-基)羰基]-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸(4h)根据将3a转化为4a的程序，由3h制备化合物4h，除了省略了用HCl的乙酸乙酯溶液酸化的步骤。以87％的收率获得作为浅绿色固体的化合物4h。1H-NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ＝1.57(d，3H，10-CH3)，2.67(s，3H，NCH3)，3.21(t，2H，OCH2CH2N)，3.65(s，2H，CH2CO2Me)，3.70(s，3H，OCH3)，3.82(m，1H，1-H)，4.15(t，2H，OCH2CH2N)，4.38(m，1H，2-H)，4.48(m，1H，10-H)，4.70(m，1H，2-H)，6.85-6.90(m，2H，6′-H，3′-H)，7.06(d，1H，4′-H)，7.27-7.38(m，2H，7′-H，7-H)，7.46(m，1H，8-H)，7.60(d，1H，9-H)，7.89(br.s，1H，4-H)，8.28(d，1H，6-H)，10.21(s，1H，NH)；MS(ESI)m/z＝536[M+H]+，1093[2M+Na]+. 实施例45 (1S)-1-氯甲基-5-羟基-3-[(5-(2-(2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基)吲哚-2-基)羰基]-9-甲基-1，2-二氢-3H-苯并[e]吲哚-盐酸(45)根据用于由1合成4a所述的程序，以4个连续步骤，由44制备化合物45。以4步收率为20％获得作为浅绿色固体的化合物45。1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ＝2.78(s，3H，9-CH3)，2.98(s，6H，N(CH3)2)，3.25(t，1H，2-H)，3.58(t，2H，2″-H)，3.68(d，1H，2-H)，4.25(dd，1H，1-H)，4.33(t，2H，1″-H)，4.50(t，1H，10-H)，4.64(d，1H，10-H)，7.00-7.08 & 7.18-7.31(2 x m，5H，7-H，3′-H，4′-H，6′-H，7′-H)，7.43(d，1H，8-H)，7.85(s，1H，4-H)，8.11(d，1H，6-H)；MS(ESI)m/z＝478[M+H]+. 实施例46 化合物46a将化合物(+)-4a(36mg，71μmol)悬浮于乙腈(10mL)中并将混合物冷却到0℃。添加氯甲酸对硝基苯酯(28.4mg，0.141mmol)和DIPEA(58.3μL，0.353mmol)，并将反应混合物温热到室温。在1h后，将反应混合物浓缩至干。残余物用甲苯(2 x 5mL)洗涤并真空干燥。将残余物溶于乙腈(10mL)中，并添加N-Boc-N，N′-二甲基乙二胺(133mg，0.706mmol)。在1h后，将反应混合物真空浓缩。将残余物溶于二氯甲烷中；溶液用水洗涤；用Na2SO4干燥，过滤，并浓缩。将粗残余物溶于TFA中。在30分钟后，将反应混合物真空浓缩，以定量得到粗46a，为灰白色固体。
化合物46b根据用于46a的程序，由(+)-4a制备化合物46b，除了使用N-Boc-哌嗪代替N-Boc-N，N′-二甲基乙二胺。定量获得作为灰白色固体的化合物46b。
实施例47 由46a/46b制备47a-47f的一般程序将粗46a或46b(71μmol)的DMF(1mL)溶液冷却到0℃。添加碳酸对硝基苯酯活化的连接基57a、57b、或58(0.142mmol)和DIPEA(29μL，0.177mmol)，然后将反应温度升高到室温。在1h后，将反应混合物浓缩至干。残余物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝5:1)纯化，以得到作为灰白色固体的产物。通过溶于二氯甲烷并添加Pd(PPh3)4(0.1equiv.)和吗啉(10equiv.)，由其Aloc-保护的类似物制备化合物47e和47f。在1h后，将反应混合物浓缩，将残余物再溶于二氯甲烷中，并用三氟乙酸将溶液酸化(pH 3)。将溶液浓缩，残余物通过制备HPLC(乙腈/甲酸铵水溶液)纯化，以得到作为白色固体的产物。
化合物47a38％收率；1H-NMR(400MHz，CDCl3/CD3OD)δ＝0.94(d，J＝6.4Hz，6H，Hval)，1.26-135(m，2H，2 x Hcapr)，1.49-1.74(m，10H，10-CH3，7 x Hcit/Hcapr)，1.87(m，1H，Hcit)，2.06(m，1H，Hval)，2.26(t，J＝7.6Hz，2H，CH2C(O))，2.49(s，6H，N(CH3)2)，2.90-3.22(m，10H，NCH2，cit，2 xNCH3，OCH2CH2N)，3.46-3.83(m，6H，NCH2CH2N，CH2，capr)，4.09(m，1H，1-H)，4.15-4.21(m，3H，OCH2CH2N，α-Hval)，4.53-4.69(m，3H，2a-H，10-H，α-Hcit)，4.86(m，1H，2b-H)，5.06-5.14(m，2H，CH2OC(O))，6.72(s，2H，CH＝CH)，7.00-7.06(m，2H，6′-H，3′-H)，7.17(m，1H，4′-H)，7.23-7.61 &7.79-7.93(m，9H，7′-H，7-H，8-H，6-H，9-H，4 x HAr，PABA)，8.22(br.s，1H，4-H). 化合物47b72％收率；1H-NMR(400MHz，CDCl3/CD3OD，TFA盐)δ＝0.94(d，J＝6.8Hz，3H，CH3，val)，0.95(d，J＝6.8Hz，3H，CH3，val)，1.28-1.34(m，2H，2 x Hcapr)，1.50-1.77(m，10H，10-CH3，7 x Hcit/Hcapr)，1.89(m，1H，Hcit)，2.05(m，1H，Hval)，2.25(t，J＝7.6Hz，2H，CH2C(O))，2.98(s，6H，N(CH3)2)，3.09-3.25(m，2H，NCH2，cit)，3.50(t，J＝7.6Hz，2H，CH2，capr)，3.54(m，2H，OCH2CH2N)，3.57-3.71(m，6H，H哌嗪)，3.78-3.91(m，2H，H哌嗪)，4.05(m，1H，1-H)，4.16(d，J＝7.6Hz，1H，α-Hval)，4.40(m，2H，OCH2CH2N)，4.54-4.65(m，3H，2a-H，10-H，α-Hcit)，4.85(dd，1H，2b-H)，5.13(s，2H，CH2OC(O))，6.70(s，2H，CH＝CH)，6.98(dd，J＝2.4Hz，J＝9.2Hz，1H，6′-H)，7.03(s，1H，3′-H)，7.17(d，J＝2.4Hz，1H，4′-H)，7.34(d，2H，HAr，PABA)，7.41(d，J＝9.2Hz，1H，7′-H)，7.45(t，J＝7.2Hz，1H，7-H)，7.52(t，J＝7.2Hz，1H，8-H)，7.61(d，J＝8.4Hz，2H，HAr，PABA)，7.77(d，J＝8.4Hz，1H，9-H)，7.87(d，J＝8.0Hz，1H，6-H)，8.25(br.s，1H，4-H). 化合物47c64％收率；1H-NMR(400MHz，CDCl3/CD3OD)δ＝0.94(d，J＝6.7Hz，3H，CH3，val)，0.98(d，J＝6.7Hz，3H，CH3，val)，1.48-1.60(m，2H，Hcit)，1.65-1.78(m，3H，10-CH3，Hcit)，1.89(m，1H，Hcit)，2.10(m，1H，Hval)，2.65(s，6H，N(CH3)2)，2.95-3.40(m，12H，2 x H3CNC(O)，2 x Hcit，CH2N3，CH2NMe2)，3.50-4.10(m，10H，CH2OCH2，NCH2CH2N，α-Hval，1-H)，4.18-4.30(m，4H，OCH2CH2N，CH2CH2OC(O))，4.53-4.68(m，3H，2a-H，10-H，α-Hcit)，4.80(m，1H，2b-H)，5.05-5.18(m，2H，CH2OC(O))，6.94-7.04(m，2H，6′-H，3′-H)，7.16(br.s，1H，4′-H)，7.20-7.95(m，9H，4 x HAr，PABA，7′-H，7-H，8-H，9-H，6-H)，8.23(br.s，1H，4-H). 化合物47d85％收率；1H-NMR(400MHz，CDCl3/CD3OD，TFA盐)δ＝0.95(d，J＝6.8Hz，3H，CH3，val)，0.99(d，J＝6.8Hz，3H，CH3，val)，1.50-1.67(m，2H，Hcit)，1.69(d，J＝6.9Hz，3H，10-CH3)，1.73(m，1H，Hcit)，1.92(m，1H，Hcit)，2.12(m，1H，Hval)，2.94(s，6H，N(CH3)2)，3.10-3.28(m，2H，Hcit)，3.40(t，J＝5.0Hz，2H，CH2N3)，3.50(br.t，2H，OCH2CH2N)，3.56-3.74(m，10H，6 x H哌嗪，CH2OCH2)，3.80-3.94(m，2H，H哌嗪)，4.01(m，1H，1-H)，4.11(m，1H，α-Hval)，4.24(m，2H，CH2CH2OC(O))，4.36(t，J＝4.9Hz，2H，OCH2CH2N)，4.54-4.72(m，3H，2a-H，10-H，α-Hcit)，4.86(d，1H，2b-H)，5.15(s，2H，CH2OC(O))，7.03(dd，J＝2.4Hz，J＝8.9Hz，1H，6′-H)，7.07(d，J＝0.7Hz，1H，3′-H)，7.21(d，J＝2.2Hz，1H，4′-H)，7.36(d，J＝8.6Hz，2H，HAr，PABA)，7.46(d，J＝8.9Hz，1H，7′-H)，7.48(t，1H，7-H)，7.58(t，J＝6.8Hz，1H，8-H)，7.62(d，J＝8.7Hz，2H，HAr，PABA)，7.83(d，J＝8.4Hz，1H，9-H)，7.88(d，J＝8.7Hz，1H，6-H)，8.23(br.s，1H，4-H). 化合物47e63％收率；MS(ESI)m/z＝587[M+H]2+，1173[M+H]+，1195[M+Na]+. 化合物47f84％收率；1H-NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ＝1.33-1.48(m，2H，Hlys)，1.60-1.79(m，6H，3 x Hlys，10-CH3)，1.87(m，1H，Hlys)，2.53(s，6H，N(CH3)2)，2.83-3.05(m，5H，CH2NH2，OCH2CH2N，Hphe)，3.13(dd，J＝6.0Hz，J＝14.1Hz，1H，Hphe)，3.35(m，1H，CH2N3)，3.52-3.75(m，10H，6 x H哌嗪，CH2OCH2)，3.75-3.98(br.s，2H，H哌嗪)，4.02(br.d，1H，1-H)，4.09-4.23(m，4H，CH2CH2OC(O)，OCH2CH2N)，4.41(t，1H，α-Hphe)，4.47(dd，1H，α-Hlys)，4.52-4.68(m，2H，2a-H，10-H)，4.82(d，J＝10.5Hz，1H，2b-H)，5.15(s，2H，CH2OC(O))，6.99(dd，1H，6′-H)，7.01(br.s，1H，3′-H)，7.15(m，1H，4′-H)，7.20(br.s，1H，H苯基)，7.36(d，2H，HAr，PABA)，7.44(t，J＝7.7Hz，1H，7-H)，7.52(t，J＝7.5Hz，1H，8-H)，7.60(d，J＝8.5Hz，2H，HAr，PABA)，7.75(d，J＝8.0Hz，1H，9-H)，7.86(d，J＝7.9Hz，1H，6-H)，8.28(br.s，1H，4-H). 实施例48 由47c-47d制备48c-48d的一般程序将47c或47d(25μmol)、抗坏血酸钠(3.0mg，15μmol)、40(10.1mg，38μmol)、和CuSO4(1.9mg，7.5μmol)的THF/水溶液在室温下搅拌。通过HPLC追踪反应。在反应完成后，用THF/水稀释反应混合物，并通过制备HPLC(乙腈/甲酸铵水溶液)纯化产物，在冻干后，得到作为灰白色固体的产物。
化合物48c31％收率；1H-NMR(400MHz，CDCl3/CD3OD，TFA盐)δ＝0.98(m，6H，Hval)，1.26-135(m，2H，2 x Hcapr)，1.49-1.61(m，2H，Hcit)，1.62-1.75(m，4H，10-CH3，Hcit)，1.89(m，1H，Hcit)，2.13(m，1H，Hval)，2.93-3.25(m，13H，N(CH3)2，2 x NCH3，CH2，cit)，3.50-4.88(m，30H，2 xOCH2CH2O，3 x OCH2CH2N，NCH2CH2N，HNCH2，α-Hval，α-Hcit，2a-H，2b-H，1-H，10-H)，5.02-5.20(m，2H，C6H4CH2OC(O))，6.74(s，2H，HC＝CH)，6.94-8.25(m，14H，6′-H，3′-H，4′-H，7-H，8-H，7′-H，4 x HAr，PABA，9-H，6-H，H三唑，4-H). 化合物48d48％收率；1H-NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ＝0.92(d，J＝6.9Hz，3H，Hval)，0.95(d，J＝6.8Hz，3H，Hval)，1.46-1.58(m，2H，Hcit)，1.64(d，J＝6.8Hz，3H，10-CH3)，1.70(m，1H，Hcit)，1.87(m，1H，Hcit)，2.09(m，1H，Hval)，2.50(br.s，6H，N(CH3)2)，2.97(br.s，2H，CH2NMe2)，3.09(m，1H，Hcit)，3.18(m，1H，Hcit)，3.52-3.72 & 3.78-3.90 & 3.95 & 4.04-4.24 &4.35 & 4.48-4.70(m，33H，2 x OCH2CH2O，2 x NCH2CH2O，OCH2CH2NMe2，8 x H哌嗪，α-Hval，α-Hcit，2a-H，1-H，10-H，HNCH2)，4.82(d，1H，2b-H)，5.11(s，2H，C6H4CH2OC(O))，6.69(s，2H，HC＝CH)，6.96-7.04(m，2H，6′-H，3′-H)，7.15(br.s，1H，4′-H)，7.32(d，J＝8.5Hz，2H，HAr，PABA)，7.37-7.45(m，2H，7′-H，7-H)，7.53(t，1H，8-H)，7.57(d，J＝8.4Hz，2H，HAr，PABA)，7.78-7.85(m，3H，6-H，9-H，H三唑)，8.21(br.s，1H，4-H). 实施例49 由49制备50a-50c的一般程序将化合物49(78mg，0.11mmol)在4NHCl的乙酸乙酯溶液(15mL)中的溶液在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩，并残余物悬浮于乙酸乙酯(15mL)中。将所得混合物浓缩，并将残余物真空干燥1h。将残余物溶于DMF(2mL)，并将溶液冷却到0℃。添加碳酸对硝基苯酯活化的连接基59a、59b、或60(0.12mmol)和三乙胺(38μL，0.272mmol)，然后将反应混合物温热到室温。在1.5h后，将反应混合物真空浓缩，粗产物通过柱色谱法(CH2Cl2/MeOH＝9:1)纯化，以得到作为灰白色固体的产物。根据用于制备47e和47f的程序，由其Aloc-保护的类似物制备化合物50c。
化合物50a44％收率；1H-NMR(400MHz，CDCl3/CD3OD，TFA盐)δ＝0.92(d，J＝6.7Hz，3H，Hval)，0.93(d，J＝6.7Hz，3H，Hval)，1.24-134(m，2H，2 x Hcapr)，1.48-1.75(m，10H，10-CH3，7 x Hcit/Hcapr)，1.86(m，1H，Hcit)，2.06(m，1H，Hval)，2.23(t，J＝7.4Hz，2H，CH2C(O))，2.91(s，1H，NCH3)，3.06(s，3H，H3CNC(O))，3.08-3.20(m，2H，NCH2，cit)，3.24-3.42(m，4H，H哌嗪)，3.47(t，2H，CH2，capr)，3.60-4.25(m，10H，1-H，OCH2CH2N，OCH2CH2N，α-Hval，4xH哌嗪)，4.49-4.67(m，3H，2a-H，10-H，α-Hcit)，4.83(m，1H，2b-H)，5.05-5.13(m，4H，2 x CH2OC(O))，6.68(s，2H，CH＝CH)，6.88-7.59(m，14H，6′-H，3′-H，4′-H，7′-H，7-H，8-H，8 x HAr，PABA)，7.79(d，J＝8.2Hz，1H，9-H)，7.85(d，J＝8.0Hz，1H，6-H)，8.25(br.s，1H，4-H). 化合物50b74％收率；1H-NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)δ＝0.93(d，J＝6.8Hz，3H，Hval)，0.97(d，J＝6.8Hz，3H，Hval)，1.49-1.61(m，2H，Hcit)，1.63(d，J＝6.7Hz，3H，10-CH3)，1.72(m，1H，Hcit)，1.90(m，1H，Hcit)，2.11(m，1H，Hval)，2.41(s，3H，N(CH3))，2.53-2.67(m，4H，H哌嗪)，3.07(s，3H，H3CNC(O))，3.09(m，1H，Hcit)，3.21(m，1H，Hcit)，3.36(m，2H，CH2N3)，3.59-3.72(m，8H，CH2OCH2，OCH2CH2N，2xH哌嗪)，3.90(m，2H，H哌嗪)，3.97(m，1H，1-H)，4.02(d，J＝6.2Hz，1H，α-Hval)，4.08-4.27(m，4H，CH2CH2OC(O)，OCH2CH2N)，4.50-4.62(m，3H，2a-H，10-H，α-Hcit)，4.75(dd，1H，2b-H)，5.07-5.13(m，4H，2 x CH2OC(O))，6.88(m，1H，6′-H)，6.97(m，1H，3′-H)，7.06 & 7.11(2 x br.s，1H，4′-H)，7.25-7.38 & 7.40-7.61(2 x m，11H，7-H，8-H，7′-H，8 x HAr，PABA)，7.73(d，J＝8.3Hz，1-H，9-H)，7.86(d，J＝8.1Hz，1H，6-H)，8.28(br.s，1H，4-H). 实施例50 将连接基-药物缀合物47a缀合到Herceptin抗体上在37℃，用1.5摩尔当量二硫苏糖醇(DTT)的0.025M硼酸钠pH8，0.025M NaCl，1mMDTPA溶液，将Herceptin抗体(40mg)处理2h。使用Sephadex G-25柱(0.025M硼酸钠pH8，0.025M NaCl，1mM DTPA)除去过量的DTT。用Ellman′s试剂确定硫醇，暗示每个Herceptin上有大约三个硫醇基团。将化合物47a(1.13mg，1.1equiv./SH基团)溶于大约100μl DMSO中，并滴加到还原Herceptin在反应缓冲液(0.025M硼酸钠pH8，0.025MNaCl，1mM DTPA)中的溶液内。将混合物在4℃温育30分钟。使用凝胶过滤(G-25，PBS)除去过量的47a。通过分别在280nm和320nm进行光谱分析，确定蛋白质浓度和药物载量。发现每个Herceptin上缀合了平均2.5个药物。尺寸排阻FPLC显示，没有抗体-药物缀合物聚集的信号。
实施例51 化合物(+)-8a-e和(+)-4a-e的体外细胞毒性以每孔102、103、104、和105个细胞的浓度，将A549系的粘附细胞三次播种到6个多孔碟中。在24h后除去培养介质，并在温育介质Ultraculture(UC，无血清的特殊培养基，购自BioWhittaker Europe，Verviers，Belgium)中洗涤细胞。然后在Ultraculture培养基上，以各种浓度用化合物(+)-8a-e和(+)-4a-e温育24h。所有物质均作为新鲜制备的DMSO(Merck，Darmstadt，Germany)溶液使用，并用温育介质稀释到孔内最终为1％ DMSO的浓度。在暴露24h后，除去试验物质，并用新鲜介质洗涤细胞。培育在37℃和7.5％ CO2中进行12天。除去介质，将克隆物干燥并用

亚甲蓝(Merck，Darmstadt，Germany)染色。然后用放大镜将它们计数。
IC50值是基于相对克隆形成的速度，根据下式确定相对克隆形成速度[％]＝100×(暴露后数出的克隆数)/(对照中数出的克隆数)。
在用化合物温育的过程中，通过向细胞中添加4.0U·mL-1β-D-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.23，Grade X，购自Sigma Germany，Deisenhofen，Germany)，使药物从其糖苷前药中释放出来。
下表给出IC50值。

实施例52 在原位乳腺瘤SCID小鼠模型中使用ADEPT概念体内评价化合物(+)-8a在植入肿瘤细胞前，通过腹膜注射75mg/kg盐酸氯胺酮和15mg/kg赛拉嗪麻醉雌性SCID小鼠。然后，将悬浮于25μl无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS)中的1×106 MDA-MB-231细胞(雌激素非依赖性人乳腺癌细胞系)植入第4乳房体的乳房脂肪垫内。在植入后，每天观察小鼠的体重损失、整体状况、和肿瘤形成。在第21天，将动物随机分成每组5-12只小鼠(对照、只有抗体-酶、只有前药、和ADETP治疗)。在第22天和30天，给小鼠静脉内注射PBS(对照，只有前药组)或50μg单克隆抗人尿激酶纤溶酶原活化剂受体(uPAR)抗体缀合β-半乳糖苷酶(uPAR*β-Gal，在PBS中)(只有抗体-酶，ADEPT治疗组)。在第24、26、28、32、34、和36天，给小鼠静脉内注射1％ DMSO/NaCl溶液(对照，只有抗体-酶组)或104μg(+)-8a的1％DMSO/NaCl溶液(只有前药，ADEPT治疗组)。在第38天处死小鼠，切除肿瘤，称重，在室温下，在磷酸盐缓冲的4％福尔马林中放置16小时，并包埋于石蜡中。获得组织切片(2.5μm)，用苏木精和曙红(H & E)染色，并通过常规显微镜检查观察。对于免疫组织化学，将来自福尔马林固定和石蜡包埋组织的2.5μm切片安装到载玻片上，在二甲苯中脱石蜡，并在乙醇/水稀释液中脱水。通过在柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)中，在微波炉内煮沸(5 x 5min)，对用于Ki67染色的载玻片进行预处理，以使抗原恢复。通过用3％过氧化氢处理10min，将内生过氧化物酶灭活。然后添加Tris-缓冲的10％兔血清溶液(Dako，Hamburg，Germany，No.X 0902)，以阻断非特异性蛋白质结合，并将载玻片用鼠抗人Ki67(Dianova，Hamburg，Germany，No.dia 505)温育60min(2μg/ml)，然后在生物素酰化的兔抗鼠F(ab′)2-片段(Dako，No.E0413，16.8μg/ml)中暴露30min。然后用抗生物素蛋白-过氧化物酶溶液(Dako，No.P 364)温育切片，用氨乙基咔唑(AEC底物溶液，Sigma)染色，用水漂洗，最终用苏木精复染。在主观包含最高密度的有丝分裂图形的肿瘤中，在三个最多细胞的区域内，数出Ki67阳性核的平均数目，将其定义为在同一区域内用H & E染色的核总数的比例。
在治疗实验过程中的不同时间点(第21、29、和38天)，用平板体积计算机断层显象原型(fpVCT GE Global Research，Niskayuna NY，US)确定肿瘤尺寸。在整个成像过程中，小鼠用0.8-1％浓度的蒸发异氟烷麻醉，集中在fpVCT旋转构轴上，并垂直于系统的z-轴，从而一次旋转就能够扫描整个小鼠。在扫描前20秒，静脉内应用显影介质150μl

300(Schering，Berlin，Germany)。所有数据均以相同的方案获得1000个图片/旋转，8秒旋转时间，使用360个检测排，80kVp，100mA。使用改良的Feldkamp运算法则重建图像，得到各向同性高分辨率体积数据(512 x 512矩阵，分辨率约200μm)。
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权利要求
1.一种式(I)或(II)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物
其中
R1选自卤素和OSO2Ru，其中Ru选自任选取代的C1-6烷基、C1-6全卤代烷基、苄基、和苯基；
R2选自H和任选取代的C1-8烷基；
R3、R3′、R4、和R4′独立地选自H和任选取代的C1-8烷基，其中R2、R3、R3′、R4、和R4′中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的碳环或杂环；
X2选自O、C(R14)(R14′)和NR14′，其中R14选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基，而R14′可以不存在或选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基；
每个R5、R5′、R6、R6′、R7、和R7′独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rk、SRk、S(O)Rk、S(O)2Rk、S(O)ORk、S(O)2ORk、OS(O)Rk、OS(O)2Rk、OS(O)ORk、OS(O)2ORk、ORk、NHRk、N(Rk)RL、+N(Rk)(RL)Rm、P(O)(ORk)(ORL)、OP(O)(ORk)(ORL)、SiRkRLRm、C(O)Rk、C(O)ORk、C(O)N(RL)Rk、OC(O)Rk、OC(O)ORk、OC(O)N(Rk)RL、N(RL)C(O)Rk、N(RL)C(O)ORk、和N(RL)C(O)N(Rm)Rk，其中Rk、RL、和Rm独立地选自H和任选取代的C1-4烷基、C1-4杂烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、C4-12芳基、或C4-12杂芳基，Rk、RL和Rm中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环，
和/或R5+R5′、和/或R6+R6′、和/或R7+R7′独立地为＝O、＝S、或＝NR12，其中R12选自H和任选取代的C1-6烷基，
和/或R5′和R6′、和/或R6′和R7′、和/或R7′和R14′不存在，这意味着携带R5′和R6′、和/或R6′和R7′、和/或R7′和R14′的原子之间分别存在双键，
R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、R14、和R14′中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环；
X1选自O、S和NR13，其中R13选自H和任选取代的C1-8烷基；
X3选自O、S和NR15，其中R15选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基，
或者-X3-代表-X3a和X3b-，其中X3a与X4所连接的碳相连，X3b在R10的邻位与苯环相连，其中X3a独立地选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基，而X3b选自与R8相同的取代基组；
X4选自N和CR16，其中R16选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基；
X5选自O、S和NR17，其中R17选自H和任选取代的C1-8烷基或酰基；
R8、R9、R10、和R11分别独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rx、SRx、S(O)Rx、S(O)2Rx、S(O)ORx、S(O)2ORx、OS(O)Rx、OS(O)2Rx、OS(O)ORx、OS(O)2ORx、ORx、NHRx、N(Rx)Ry、+N(Rx)(Ry)Rz、P(O)(ORx)(ORy)、OP(O)(ORx)(ORy)、SiRxRyRz、C(O)Rx、C(O)ORx、C(O)N(Ry)Rx、OC(O)Rx、OC(O)ORx、OC(O)N(Rx)Ry、N(Ry)C(O)Rx、N(Ry)C(O)ORx、N(Ry)C(O)N(Rz)Rx、和水溶性基团，其中Rx、Ry、和Rz独立地选自H和任选取代的C1-15烷基、C1-15杂烷基、C3-15环烷基、C3-15杂环烷基、C4-15芳基、或C4-15杂芳基，Rx、Ry、和Rz中的一个或多个任选的取代基任选为水溶性基团，Rx、Ry、和Rz中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环，且R8、R9、R10、和R11中的至少一个包括至少一个水溶性基团，R8、R9、R10、R11、或X3b中的两个或更多个任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环；
a和b独立地选自0和1；
c选自0、1、和2；
条件是在式(I)的化合物中，存在的R2、R3、R3′、R4、R4′、R5、和R5′中的至少一个不是氢。
2.权利要求1的化合物，其中R2是任选取代的C1-8烷基。
3.前面任一项权利要求的化合物，其中R2是甲基。
4.前面任一项权利要求的化合物，其中R5不是氢。
5.前面任一项权利要求的化合物，其中R5选自硝基、卤素、氨基、羟基、和任选取代的烷基氨基、烷基羰基氨基、烷氧基羰基氨基、烷基氧基、烷基羰基氧基、烷基氨基羰基氧基、或C1-4烷基。
6.前面任一项权利要求的化合物，其中R8、R9、R10、或R11选自-O-C1-6亚烷基-N(R100)2、-NC(O)-C1-5亚烷基-N(R100)2、(1-(R100)哌啶-4-基)-C1-5亚烷基-O-、和(吗啉-4-基)-C1-8亚烷基-O-，其中每个R100独立地选自H和C1-3烷基，后者任选地被COOH或COOR300取代，R300为C1-4烷基。
7.前面任一项权利要求的化合物，其中R8、R9、R10、或R11选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
8.前面任一项权利要求的化合物，其中R8选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基。
9.前面任一项权利要求的化合物，其中R9、R10、和R11分别为氢。
10.权利要求1至8中任一项的化合物，其中R9是甲氧基，而R10和R11分别为氢。
11.权利要求1至5中任一项的化合物，其中R8为
其中X3′、X4′、X5′、R8′、R9′、R10′、和R11′分别具有与权利要求1中X3、X4、X5、R8、R9、R10、和R11定义相同的意义，除了当R8、R9、R10、或R11中已经存在另一个水溶性基团时，R8′、R9′、R10′、和R11′不必包含水溶性基团，且其中R8＂可以选自H和任选取代的C1-5烷基或C1-5杂烷基，并任选与R9或R11结合形成任选取代的脂族或芳族杂环。
12.前面任一项权利要求的化合物，其中X3是NH。
13.前面任一项权利要求的化合物，其中X1是O。
14.权利要求1的化合物，其为下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物
其中R1a为氯(Cl)或溴(Br)，R2a和R5b分别为甲基和H，或分别为H和甲基，R8d选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基，以及R9d选自H和甲氧基。
15.权利要求1的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
16.权利要求1的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
17.权利要求1的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
18.权利要求1的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
19.权利要求1的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
20.权利要求1的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
21.权利要求1的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
22.权利要求1的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
23.权利要求1的化合物，其为下式
或其1R异构体或两种异构体的混合物。
24.权利要求1的化合物，所述化合物包含环丙基，其通过式(I)或(II)化合物的重排并同时从中消除H-R1而得到。
25.一种式(III)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物
其中
V2不存在或者是功能部分；
每个L2独立地不存在或者是将V2连接到L或当L不存在时连接到V1或Y的连接基团；
每个L独立地不存在或者是将L2或当L2不存在时将V2连接到一个或多个V1和/或Y的连接基团；
每个V1独立地为H或条件可裂解或条件可转化的部分，它们可以通过化学、光化学、物理、生物学、或酶过程裂解或转化；
每个Y独立地不存在或者是自消除间隔基体系，它包括1个或多个自消除间隔基并连接至V1、任选的L、和一个或多个Z；
每个p和q是表示支化程度的数字，并且分别独立地为正整数；
z是等于或小于所述一个或多个V1-Y部分内的Z连接位置总数的正整数；
每个Z独立地为权利要求1-24中定义的式(I)或(II)的化合物，其中X1、R6、R7、R8、R9、R10、和R11中的一个或多个还可以任选地被式(V)的取代基取代
其中每个V2′、L2′、L′、V1′、Y′、Z′、p′、q′、和z′具有与V2、L2、L、V1、Y、Z、p、q和z定义相同的意义，式(V)的一个或多个取代基通过Y′或当Y′不存在时通过V1’独立地连接至X1、R6、R7、R8、R9、R10、和R11中的一个或多个，
每个Z通过X1或R6、R7、R8、R9、R10、或R11中的原子连接到Y或当Y不存在时连接到V1；
条件是所述一个或多个V1和一个或多个V1′中的至少一个不为H。
26.权利要求25的化合物，其中X1为O，Y通过作为Y的一部分的ω-氨基氨基羰基环化间隔基连接到X1。
27.权利要求25至26中任一项的化合物，其中Y是选自下列的自消除间隔基体系
其中R37、R38、R39、和R40独立地选自H、OH、SH、NH2、N3、NO2、NO、CF3、CN、C(O)NH2、C(O)H、C(O)OH、卤素、Rx、SRx、S(O)Rx、S(O)2Rx、S(O)ORx、S(O)2ORx、OS(O)Rx、OS(O)2Rx、OS(O)ORx、OS(O)2ORx、ORx、NHRx、N(Rx)Rx1、+N(Rx)(Rx1)Rx2、P(O)(ORx)(ORx1)、OP(O)(ORx)(ORx1)、C(O)Rx、C(O)ORx、C(O)N(Rx1)Rx、OC(O)Rx、OC(O)ORx、OC(O)N(Rx)Rx1、N(Rx1)C(O)Rx、N(Rx1)C(O)ORx、和N(Rx1)C(O)N(Rx2)Rx，其中Rx、Rx1和Rx2独立地选自H和任选取代的C1-6烷基、C1-6杂烷基、C3-20环烷基、C3-20杂环烷基、C4-20芳基、或C4-20杂芳基，Rx、Rx1和Rx2任选地结合形成一个或多个任选取代的脂族或芳族碳环或杂环，且R37、R38、R39和R40任选作为一个或多个任选取代的脂族或芳族环状结构的一部分，取代基R37、R38、R39和R40中的两个或更多个任选相互连接形成一个或多个脂族或芳族碳环或杂环。
28.权利要求25至27中任一项的化合物，其中V1包含底物，所述底物可被蛋白水解酶、纤溶酶、组织蛋白酶、组织蛋白酶B、β-葡糖醛酸糖苷酶、半乳糖苷酶、前列腺特异性抗原(PSA)、尿激酶型纤溶酶原活化剂(u-PA)、基质金属蛋白酶家族的成员裂解，或被通过定向酶前药疗法如ADEPT、VDEPT、MDEPT、GDEPT、或PDEPT定位的酶裂解，或者其中V1包含可以通过在缺氧条件下还原或通过硝基还原酶还原而被裂解或转化的部分。
29.权利要求25至28中任一项的化合物，其中V1是己糖或戊糖或庚糖的单糖、二糖、或低聚糖，这些己糖或戊糖或庚糖也可以包括在脱氧糖或氨基糖的组中，属于D-系列或L-系列，在二糖或低聚糖中可以相同或不同，或者其中V1具有式C(ORa′)Rb′CHRc′Rd′，其中Ra′为羟基保护基团、任选与R5、R5′、R6、R6′、R7、R7′、R14、或R14′形成环的任选取代的C1-8烷基、或任选地被甲基、羟甲基、和/或式-NRe′Rf′的基团取代的单糖、二糖或低聚糖残基，其中Re′和Rf′相同或不同，选自氢、C1-6烷基、或氨基保护基团，其中糖残基的羟基任选受到保护；Rb′、Rc′、和Rd′独立地选自氢、任选取代的C1-8烷基或C1-8环烷基、或式-NRe′Rf′的基团，其中Re′和Rf′具有与上面相同的意义。
30.权利要求25至28中任一项的化合物，其中V1是包含天然L-氨基酸、非天然D-氨基酸、或合成氨基酸、或肽模拟物、或其任何组合的二肽、三肽、四肽、或寡肽部分。
31.权利要求25至30中任一项的化合物，其中L是直链、支化、或枝状部分。
32.权利要求31的化合物，其中L选自
33.权利要求25至32中任一项的化合物，其中L2是但不限于
或
或
或
或
或
或
或
或
或
或
或
34.权利要求25至33中任一项的化合物，其中V2部分是靶向部分，且选自蛋白质或蛋白质片段、抗体或抗体片段、受体结合部分或肽载体部分、和聚合或枝状部分、或其任何组合。
35.权利要求34的化合物，其中V2部分是抗体或抗体片段。
36.权利要求34的化合物，其中V2部分是受体结合部分。
37.权利要求34的化合物，其中V2部分是聚合物。
38.权利要求37的化合物，其中V2部分是低聚乙二醇或聚乙二醇或其衍生物。
39.权利要求25至38中任一项的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
40.权利要求25至38中任一项的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
41.权利要求25至38中任一项的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
42.权利要求25至38中任一项的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
43.权利要求25至38中任一项的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
44.权利要求25至38中任一项的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
45.权利要求25至38中任一项的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
46.权利要求25至38中任一项的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
47.权利要求25至38中任一项的化合物，其为下式
或其(1R)异构体或两种异构体的混合物。
48.权利要求25的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
49.权利要求25的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
50.权利要求25的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
51.权利要求25的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
52.权利要求25的化合物，其为下式
或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物。
53.权利要求25的化合物，其为下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物
其中R1a为氯(Cl)或溴(Br)，(AA)aa选自缬氨酰瓜氨酸、缬氨酰赖氨酸、苯丙氨酰赖氨酸、丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、和D-丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸，ss为1或2，R2a和R5b分别为甲基和H，或分别为H和甲基，R8d选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基，R9d选自H和甲氧基，LL选自
qq的范围为1至约20，rr和rr′分别独立地为1至约4，以及Ab是抗体或其片段或衍生物。
54.权利要求25的化合物，其为下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物
其中R1a为氯(Cl)或溴(Br)，(AA)aa选自缬氨酰瓜氨酸、缬氨酰赖氨酸、苯丙氨酰赖氨酸、丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、和D-丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸，ss为1或2，R2a和R5b分别为甲基和H，或分别为H和甲基，R8d选自2-(吗啉-4-基)乙氧基、(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基、2-(N，N-二甲基氨基)乙酰基氨基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、(哌啶-4-基)甲氧基、2-(N-甲基-N-(羧甲基)氨基)乙氧基、和2-(N-甲基-N-(2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)乙氧基，R9d选自H和甲氧基，LL选自
qq的范围为1至约20，rr和rr′分别独立地为1至约4，以及Ab是抗体或其片段或衍生物。
55.权利要求25的化合物，其为下式、或其(1R，10S)异构体、其(1R，10R)异构体、其(1S，10S)异构体、或两种或更多种所述异构体的混合物
其中R1a为氯(Cl)或溴(Br)，(AA)aa选自缬氨酰瓜氨酸、缬氨酰赖氨酸、苯丙氨酰赖氨酸、丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸、和D-丙氨酰苯丙氨酰赖氨酸，ss为1或2，R2a和R5b分别为甲基和H，或分别为H和甲基，R8e选自2-(甲基氨基)乙氧基、2-(甲基氨基)乙酰基氨基、2-氨基乙氧基、2-氨基乙酰基氨基、和(哌啶-4-基)甲氧基，其中与R8e相连的羰基连接到R8e的氮原子上，R9d选自H和甲氧基，LL选自
qq′的范围为1至约20，rr和rr′分别独立地为1至约4，以及Ab是抗体或其片段或衍生物。
56.权利要求25的化合物，其中V2、L2、L和Y不存在，而p、q和z全为1。
57.权利要求56的化合物，其中V1是通过X1连接到Z的化学可除去基团。
58.权利要求57的化合物，其中V1是通过X1连接到Z的苄基。
59.一种式(IV)的化合物或其学上可接受的盐或溶剂化物
其中
RM是反应性部分，而L、V1、Y、Z、p和z如权利要求25中所定义，除了L现在将RM连接至一个或多个V1和/或Y，且V1、Y和Z可以包含保护基团，上面定义的Z中任选存在的一个或多个V2′-L2′部分可以任选和独立地被反应性部分RM′代替，其中，如果(IV)中存在多于1个反应性部分，则所述反应性部分是相同或不同的。
60.权利要求59的化合物，其中RM为但不限于
或
或
或
或
或
或
或
或
或
或
或
或
或
或
其中
X8选自-Cl、-Br、-I、-F、-OH、-O-N-琥珀酰亚胺、-O-(4-硝基苯基)、-O-五氟苯基、-O-四氟苯基、-O-C(O)-R50、和-O-C(O)-OR50；
X9选自-Cl、-Br、-I、-O-甲磺酰基、-O-三氟甲磺酰基、和-O-甲苯磺酰基；
R50为C1-C10烷基或芳基。
61.一种缀合物，其包括与至少一个前部分缀合的权利1至24中任一项的化合物。
62.权利要求59至60中任一项的化合物在制备权利要求25的化合物中的应用。
63.权利要求1至61中任一项的化合物在制备用于治疗有此需要的哺乳动物的药物组合物中的应用。
64.权利要求1至61中任一项的化合物在制备用于治疗哺乳动物体内的肿瘤的药物组合物中的应用。
65.一种药物组合物，其包含权利要求1至61中任一项的化合物。
66.一种制备药物组合物的方法，其包括将权利要求1至61中任一项的化合物与药学上可接受的载体混合的步骤。
67.一种治疗有此需要的哺乳动物的方法，其中所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效剂量的权利要求63至65的药物组合物或通过权利要求66的方法获得的药物组合物。
68.一种治疗或预防哺乳动物体内的肿瘤的方法，其中所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效剂量的权利要求63至65的药物组合物或通过权利要求66的方法获得的药物组合物。
全文摘要
本发明涉及DNA结合型烷化剂CC-1065的新类似物及其缀合物。此外，本发明涉及用于制备所述药物及其缀合物的中间体。所述缀合物设计成在由缀合物控制的一个或多个活化步骤后和/或以一定的速度和时间跨度释放其(多重)有效负载物，从而选择性地递送和/或可控地释放一个或多个所述DNA烷化剂。所述药物、缀合物、和中间体可以用于治疗以不期望的(细胞)增殖为特征的疾病。作为实例，本发明的药物和缀合物可以用于治疗肿瘤。
文档编号A61K31/403GK101415679SQ200780012007
公开日2009年4月22日 申请日期2007年2月2日 优先权日2006年2月2日
发明者P·H·伯斯凯尔, F·M·H·德赫罗特, L·F.·蒂策, F·马约尔, J·A·F·约斯滕, H·J·施皮杰克尔 申请人:辛塔佳有限公司, 格奥尔格-奥古斯特大学哥廷根公法基金会(不含医学)