专利名称：替米考星脂质体制剂与制备方法
技术领域：
本发明涉及一种脂质体制剂及制备方法，主要是一种替米考星脂质体制剂与制备方法。
背景技术：
替米考星(tilmiosin)是由泰乐菌素半合成的动物专用的大环内酯类抗生素，最初是由美国 礼来公司开发成功。由于其独特的抗菌活性和特殊的药动学特征，目前国外已经批准用于猪、 禽、牛、羊等动物由敏感菌引起的感染性疾病，特别是畜禽呼吸道感染。虽然替米考星在畜禽 呼吸道疾病方面疗效非常确切，但作为一种新合成的化学药物有其相对的毒副作用，可能产生 心脏毒性和肾脏毒性。据有关研究认为，替米考星对心血管的损伤主要是由于动物机体本身的 心血管等有损伤，或者用药量过大、投药方式为静注或滴注等原因。因此需要寻求一种有效的 方法，可以在不增加药物剂量的情况下，延长药物的半衰期，提高药物的抗菌效果，减少药物 的毒副作用，增强药物的临床应用性。
脂质体是一种定向药物载体，属于靶向给药系统的一种新剂型。药物用脂质体包裹后，能 靶向作用于病变部位，从而提高药物的治疗指数，同时还可以减少药物的治疗剂量，降低全身 不良反应，提高用药安全性。
发明内容
本发明根据脂质体载体材料的特性及替米考星产品本身的特性，而提供了一种大环内酯类 抗生素药物替米考星的脂质体制剂与制备方法。
本发明的替米考星脂质体制剂是一种口服用制剂，本发明经过筛选找到了既能使脂质体中 药物持续释放提高血药浓度、延长药物在血液中循环时间，提高药物的生物利用度，同时又可 以降低药物的毒副作用，增强畜禽的顺应性的有效的药物配方。
本发明的替米考星脂质体制剂，由替米考星的脂质体和药物可接受的载体组成，其中替米 考星脂质体含有替米考星、磷脂、胆固醇，它们的重量比为1:2 100:1 15;药物可接受的载 体包括内部缓冲系统、调节PH用碱和冻干支持剂，冻千保护剂的加入量，按磷脂重量比计算，1 份磷脂加入0.2 4份冻干支持剂；内部缓冲系统的加入量为5-15mL。
优选的重量比为替米考星1份，磷脂10 40份，胆固醇2.5 10份。其中所述磷脂为大豆磷脂、卵磷脂或合成磷脂。
所述的药物可接受的载体优选为包括内部缓冲系统、调节pH用碱、冻干支持剂、抗氧化剂 和防腐剂。
所述内部缓冲系统选自磷酸盐缓冲系统、柠檬酸盐缓冲系统或碳酸盐缓冲系统，其中的柠 檬酸盐缓冲系统为0. 05-0. 5M的柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液。
所述调节pH用碱选自氢氧化钠、磷酸氢二钠、碳酸钠，控制其pH值为5.5-8.0。
所述冻干支持剂选自右旋酐糖、单糖、双糖或多糖，其中单糖为甘露醇或葡萄糖，双糖 为乳糖或蔗糖，多糖为海藻糖。
所述的抗氧化剂是维生素E、维生素E酯、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠或硫代硫 酸钠；防腐剂是对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁 酯、苯甲酸、苯甲酸钠或山梨酸。
本发明的替米考星脂质体制剂，可采用以下方法制备
1) 按重量比磷脂2-100份，与胆固醇1-15份，溶于有机溶剂中，混合均匀；
2) 配置的内部缓冲系统，内部缓冲系统的加入量为5-15mL,内部缓冲系统为配置pH6 8 的磷酸盐缓冲液，也可以采用pH4.0的柠檬酸盐缓冲液；
3) 将步骤l)溶液与步骤2)溶液混合，乳化，再薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂；得 空白脂质体混悬液；
4) 将所得空白脂质体混悬液进行高压乳匀或超声粉碎或微射流，减小粒径，将l份替米 考星溶解在20-200份空白脂质体混悬液中，用调节pH用碱调节脂质体外水相pH至 5.5-8.0， 30 50。C水浴孵育10min-60min;
5) 将冻干支持剂溶解在脂质体中，无菌过滤，冻干保护剂的加入量，按磷脂重量比计算， 1份磷脂加入0.2~4份冻干支持剂；所述制剂在以适当比例与适合溶媒混合使用时， 其包封率为60~99%，粒径为100nm-1000nm。
6) 检验合格，装瓶，封盖，冻干或喷雾干燥，即得成品，喷雾干燥的迸口温度为100-150 。C。
优选的制备方法如下
方法一
1) 按重量比取替米考星l份、磷脂10 40份，与胆固醇2.5 10份，溶于有机溶剂，混合均与；
2) 按处方配置pH6 8的磷酸盐缓冲液；
3) 将步骤l)溶液与步骤2)溶液混合，乳化，在薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂；得脂质体混悬液；
4) 将所得脂质体混悬液进行高压乳匀或微射流，减小粒径。将适量处方量的冻干支持物溶 解在脂质体中，无菌过滤；
5) 检验合格，装瓶，封盖，冻干或喷雾干燥，即得成品。 方法二
1) 按重量比磷脂2 100份，与胆固醇1一5份，溶于有机溶剂中，混合均与；
2) 按处方配置pH4.0的柠檬酸盐缓冲液；
3) 将步骤1)溶液与步骤2)溶液混合，乳化，再薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂；得空 白脂质体混悬液；
4) 将所得空白脂质体混悬液迸行高压乳匀或微射流，减小粒径，将l份替米考星溶解在空 白脂质体中，氢氧化钠溶液或磷酸盐缓冲液调脂质体pH至6~8。 30 50'C水浴孵育 10 60min;
5) 将适量处方量的冻干支持物溶解在脂质体中，无菌过滤；
6) 检验合格，装瓶，封盖，冻干或喷雾干燥，即得成品。 所述的有机溶剂为乙醚或氯仿。
本发明的替米考星脂质体制剂，在以适当比例与适合溶媒混合使用时，其包封率为60 90%，
粒径为100nm lnm。
本发明所述脂质体中，每ml脂质体混悬液中含有卜10mg替米考星。 本发明的脂质体可用薄膜分散法、逆相蒸发法、复乳法及pH梯度法等现有技术制备。 本发明的益的效果本发明替米考星脂质体制剂，其单位体积中的替米考星含量高，包封
率高，稳定性好，又有稳定的载药量。脂质体中药物持续释放，显著提高了血药浓度，延长药
物在血液中的循环时间。本发明替米考星脂质体制剂提高了药物疗效，增强了药物的临床使用性。
具体实施例方式
以下通过实施例进一步说明本说明，但不作为对本发明的限制。 实施例1
称取10mg替米考星、200mg大豆磷脂(纯度>76%磷脂酰胆碱)和50mg胆固醇溶解于乙 醚中，混合均与，将该溶液置于磨口圆底烧瓶中，与35"C恒温水浴上用旋转蒸发仪在100rpm
6并减压的条件下蒸去有机溶剂使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成一均匀类脂膜；在上述脂膜中 加入20ml乙醚溶解，另加入10ml pH7.4磷酸盐缓冲液，水浴超声成乳在35。C用旋转蒸发仪除 去有机溶剂，直至变成乳白色脂质体混悬液，高压乳匀或微射流减小粒径即得。将100mg海藻 糖溶解在脂质体中，无菌过滤后(膜滤器孔径0.2^mi)，将最终分散物分装在西林瓶中，然后冷 冻干燥或喷雾干燥。 实施例2
称取20mg替米考星、400mg大豆磷脂(纯度>76%磷脂酰胆碱)和100mg胆固醇溶解于乙 醚中，混合均与，将该溶液置于磨口圆底烧瓶中，与35'C恒温水浴上用旋转蒸发仪在100rpm 并减压的条件下蒸去有机溶剂使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成一均匀类脂膜；在上述脂膜中 加入20ml乙醚溶解，另加入10ml pH7.4磷酸盐缓冲液，水浴超声成乳在35'C用旋转蒸发仪除 去有机溶剂，直至变成乳白色脂质体混悬液，高压乳匀或微射流减小粒径即得。将200mg海藻 糖溶解在脂质体中，无菌过滤后(膜滤器孔径0.2pm)，将最终分散物分装在西林瓶中，然后冷 冻干燥或喷雾干燥。 实施例3
称取30mg替米考星、600mg大豆磷脂(纯度>76%磷脂酰胆碱)和150mg胆固醇溶解于乙 醚中，混合均与，将该溶液置于磨口圆底烧瓶中，与35'C恒温水浴上用旋转蒸发仪在100rpm 并减压的条件下蒸去有机溶剂使磷脂等成膜材料在烧瓶底部形成一均匀类脂膜；在上述脂膜中 加入20ml乙醚溶解，另加入10ml pH7.4磷酸盐缓冲液，水浴超声成乳在35'C用旋转蒸发仪除 去有机溶剂，直至变成乳白色脂质体混悬液，高压乳匀或微射流减小粒径即得。将300mg海藻 糖溶解在脂质体中，无菌过滤后(膜滤器孔径0.2pm)，将最终分散物分装在西林瓶中，然后冷 冻干燥或喷雾干燥。 实施例4
称取200mg大豆磷脂(纯度>76%磷脂酰胆碱)和50mg胆固醇溶解于20mL乙醚中，再将 10mLpH4.0柠檬酸缓冲液加至磷脂乙醚溶液中，二者混合进行乳化，然后减压蒸去有机溶剂， 探针式超声5min或微射流减小粒径，备用，作为空白脂质体。另将10mg替米考星溶解到空白 脂质体中，用lmol/LNaOH调pH至7.4，之后在37。C水浴中孵育(20 60min)，脂质体冷却至室 温后，将100mg海藻糖溶于脂质体中，无菌过滤后(膜滤器孔径0.2nm)，将最终分散物分装在 西林瓶中，然后冷冻干燥或喷雾干燥。实施例5
称取600mg大豆磷脂(纯度>76%磷脂酰胆碱)和150mg胆固醇溶解于20mL乙醚中，再 将10mLpH4.0柠檬酸缓冲液加至磷脂乙醚溶液中，二者混合进行乳化，然后减压蒸去有机溶剂， 探针式超声5min或微射流减小粒径，备用，作为空白脂质体。另将30mg替米考星溶解到空白 脂质体中，用lmol/LNaOH调pH至7.4，之后在37t:水浴中孵育(20 60min)，脂质体冷却至室 温后，将300mg海藻糖溶于脂质体中，无菌过滤后(膜滤器孔径0.2jiim),将最终分散物分装在 西林瓶中，然后冷冻千燥或喷雾干燥。 实施例6
称取1000mg大豆磷脂(纯度>76°/。磷脂酰胆碱)和250mg胆固醇溶解于20mL乙醚中，再 将10mLpH4.0柠檬酸缓冲液加至磷脂乙醚溶液中，二者混合进行乳化，然后减压蒸去有机溶剂， 探针式超声5min或微射流减小粒径，备用，作为空白脂质体。另将50mg替米考星溶解到空白 脂质体中，用lmol/LNaOH调pH至7.4，之后在37'C水浴中孵育(20 60min)，脂质体冷却至室 温后，将500mg海藻糖溶于脂质体中，无菌过滤后(膜滤器孔径0.2nm)，将最终分散物分装在 西林瓶中，然后冷冻干燥或喷雾干燥。
当然，本发明还可以有其他多种实施例，在不背离本发明精神及实质的情况下，熟悉本领 域的技术人员当可根据本发明做出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于 本发明所附的权利要求的保护范围。
权利要求
1、一种替米考星脂质体制剂，其特征在于由替米考星的脂质体和药物可接受的载体组成，其中替米考星脂质体含有替米考星、磷脂、胆固醇，它们的重量比为1∶2～100∶1～15；药物可接受的载体包括内部缓冲系统、调节pH用碱和冻干支持剂，冻干保护剂的加入量，按磷脂重量比计算，1份磷脂加入0.2～4份冻干支持剂；内部缓冲系统的加入量为5-15mL。
2、 根据权利要求1所述的替米考星脂质体制剂，其特征在于所述替米考星脂质体含 有替米考星1份、磷脂10~40份、胆固醇2.5~10份。
3、 根据权利要求1所述的替米考星脂质体制剂，其特征在于所述的药物可接受的载 体包括内部缓冲系统、调节pH用碱、冻干支持剂、抗氧化剂和防腐剂。
4、 根据权利要求1或2所述的替米考星脂质体制剂，其特征在于所述磷脂选自大豆 磷脂、卵磷脂或合成磷脂。
5、 根据利要求1或3的替米考星脂质体制剂，其特征在于所述内部缓冲系统选自磷酸盐缓冲系统、柠檬酸盐缓冲系统或碳酸盐缓冲系统，其中的柠檬酸盐缓冲系统为0. 05-0. 5M 的柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液。
6、 根据利要求1或3的替米考星脂质体制剂，其特征在于所述调节pH用碱选自氢氧 化钠、磷酸氢二钠、碳酸钠，控制其pH值为5.5-8.0。
7、 根据利要求1或3的替米考星脂质体制剂，其特征在于所述冻干支持剂选自右旋酐糖、单糖、双糖或多糖，其中单糖为甘露醇或葡萄糖，双糖为乳糖或蔗糖，多糖为海藻 糖。
8、 根据利要求3的替米考星脂质体制剂，其特征在于所述的抗氧化剂是维生素E、维 生素E酯、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠或硫代硫酸钠；防腐剂是对羟基苯甲酸甲酯、 对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、苯甲酸、苯甲酸钠或山梨酸。
9、 一种制备如权利要求1所述的替米考星脂质体制剂的方法，其特征在于步骤如下1) 按重量比磷脂2-100份，与胆固醇1-15份，溶于有机溶剂中，混合均匀；2) 配置内部缓冲系统，内部缓冲系统的加入量为5-15mL;3) 将步骤O溶液与步骤2)溶液混合，乳化，再薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂；得空白脂质体混悬液；4) 将所得空白脂质体混悬液进行高压乳匀或超声粉碎，减小粒径，将1份替米考星 溶解在20-200份空白脂质体混悬液中，用调节PH用碱调节脂质体外水相pH至 5.5-8.0, 30 50。C水浴孵育10min-60min;5) 将冻干支持剂溶解在脂质体中，无菌过滤，冻干保护剂的加入量，按磷脂重量比 计算，1份磷脂加入0.2 4份冻干支持剂；6) 检验合格，装瓶，封盖，冻干或喷雾干燥，即得成品。
10、根据权利要求9所述的替米考星脂质体制剂的制备方法，其特征在于所述的有 机溶剂为乙醚或氯仿。
全文摘要
本发明涉及一种替米考星脂质体制剂与制备方法，由替米考星的脂质体和药物可接受的载体组成，其中替米考星脂质体含有替米考星、磷脂、胆固醇，它们的重量比为1∶2～100∶1～15；药物可接受的载体包括内部缓冲系统、调节pH用碱和冻干支持剂，冻干保护剂的加入量，按磷脂重量比计算，1份磷脂加入0.2～4份冻干支持剂；内部缓冲系统的加入量为5-15mL。本发明的益的效果本发明替米考星脂质体制剂，其单位体积中的替米考星含量高，包封率高，稳定性好，又有稳定的载药量。脂质体中药物持续释放，显著提高了血药浓度，延长药物在血液中的循环时间。本发明替米考星脂质体制剂提高了药物疗效，增强了药物的临床使用性。
文档编号A61K9/127GK101422435SQ20081016292
公开日2009年5月6日 申请日期2008年12月8日 优先权日2008年12月8日
发明者颖 朱, 李浙烽, 王成润, 一 金 申请人:杭州康德权科技有限公司