专利名称：：壳聚糖在制备防治家蚕细菌性败血病药物中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种防治家蚕病害药物
技术领域：
，尤其涉及壳聚糖在制备防治家蚕细菌性败血病药物中的应用。
背景技术：
：蚕丝业是中国一项颇具资源优势的传统产业，已具有5000多年历史，作为农民的一项传统副业，是农民增收的重要途径之一。家蚕是当今饲养规模最大、技术最成熟的经济昆虫；由于其自身的特点，对病原细菌的抵御能力有限，极易感染细菌导致死亡。由灵菌(Sem^/awarcascms)引起的细菌性败血病是蚕业生产上的常见病，对蚕茧的高产和稳产影响极大。目前的防治方法主要有在蚕体撒上体外消毒粉剂与通过添食抗菌药杀死侵入体内的细菌两种，但前者费时费力且对侵入体内的病菌防效不明显，后者防效不错但易诱发家蚕的抗药性，且成本较高。另外，由于蚕蛹已成为餐桌上的美味佳肴，由这些化学药剂处理过的家蚕得到的蚕蛹供人们食用后，残留药剂将对人的身体健康产生不良影响。壳聚糖是由甲壳素经脱乙酰化处理后的产物，通常将脱乙酰度大于55%的甲壳素称作壳聚糖，其学名为聚氨基葡萄糖，化学名(1,4)-2-氨基-2-脱氧-13-D-葡萄糖，广泛存在于虾、蟹等动物外壳和藻类、真菌的细胞壁中。壳聚糖是一种抗菌谱较广的天然物质，对细菌、酵母菌和真菌等均有不同程度的抑制作用。壳聚糖具有良好的生物相溶性，可生物降解性以及无毒副作用，其分子内含有-OH和-NHr活性基团，易与多种有机物发生反应，目前广泛应用在工业、农业、医药、化工、环境保护和水处理等领域。
发明内容本发明提供了一种壳聚糖在制备防治家蚕细菌性败血病药物中的应3用，该药物防治效果好，而且在蚕体无毒性和副作用,食用不影响人身体健康。本发明防治家蚕细菌性败血病药物以壳聚糖为主要成份，添加常规的药用赋形剂，如水等，制成水剂、粉剂等剂型。所述的壳聚糖的脱乙酰度优选大于85%,易获得，成本低。本发明还提供了一种上述药物的制备方法，包括以下步骤:将壳聚糖粉末溶于体积百分比为1%的冰醋酸溶液中，然后添加水配制成浓度为0.01~0.1mg/mL的壳聚糖溶液。冰醋酸主要是用于调节pH值，使得壳聚糖溶解，其用量和浓度可以根据需要进行调整。采用上述制备的浓度为0,10mg/mL的壳聚糖溶液浸泡过的桑叶喂食家蚕，接种了灵菌的家蚕死亡率从95.0%下降到48.3%。该药物能显著降^u家蚕细菌性败血病菌的感染风险，治疗效果显著。采用该药物防治家蚕细菌性败血病简单易行，成本较低；更重要的是防治环节不会对防治人员的健康产生任何威胁。具体实施例方式实施例1将脱乙酰度大于85%的壳聚糖粉末溶解于体积百分比为1%的冰醋酸中，添加蒸馏水配制成浓度分别为O.(H、0.05和0.10mg/mL的壳聚糖溶液，取各种浓度的壳聚糖溶液5mL，每份里面加入相同浓度的灵菌败血病菌悬浮液，使混合溶液中的病菌浓度一致(l.Oxio7CFU/mL);以蒸馏水代替壳聚糖粉作为对照，室温下振荡2小时后查验病菌数量，结果如下表l不同浓度壳聚糖溶液对灵菌病原生长的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>从表i可以看出，在离体条件下，0.01mg/mL与0.05mg/mL的壳聚糖溶液能完全抑制病原菌的增殖，0,10mg/mL的壳聚糖溶液甚至能杀死已有的病原菌。实施例2取浓度为0.1Qmg/mL的壳聚糖溶液，加入一定浓度的灵菌败血病菌悬浮液，使病菌在溶液中浓度约为107CFU/mL(7.00log10CFU/mL)，对混合后0.5、1.0、2.0和4.0小时的混合溶液取样记数，记录其中的灵菌败血病菌数量。以蒸馏水代替壳聚糖作为对照。结果显示，在病菌悬浮液中加入壳聚糖后，病菌数量急剧减少，显示出较好的杀菌作用。表2不同培养时间对壳聚糖溶液((UOmg/mL)抑菌活性的影响培养时间(小时)病原菌数量(bg1QCFU/mL)对照壳聚糖0.07.777.770.57.185.991.07.405.972.07,325.654.07,295.00实施例3用浓度为0.10mg/mL的壳聚糖溶液浸泡桑叶，喂食家蚕24小时后，对蚕体接种灵菌败血病菌，以下五个处理作为对照(D以没有经过壳聚糖溶液处理的普通桑叶喂食家蚕，对家蚕接种病菌；②以没有经过壳聚糖处理的桑叶喂食家蚕，对家蚕接种蒸馏水；③以经过壳聚糖处理的桑叶喂食家蚕，对家蚕接种蒸馏水；④以没有经过壳聚糖处理的桑叶喂食家蚕，对家蚕不接种；⑤以经过壳聚糖处理的桑叶喂食家蚕，对家蚕不接种。分别于接种后24、48和72小时统计家蚕死亡率。表3壳聚糖溶液处理桑叶防治家蚕灵菌败血病的效果处理家蚕死亡率<24小时48小时:%)72小时普通桑叶喂食+接种病原菌83.391.795.0壳聚糖处理桑叶喂食+接种病原菌43.348.348.3普通桑叶喂食+接种蒸馏水0.00.00.0壳聚糖处理桑叶喂食+接种蒸馏水0.00.00.0普通桑叶喂食+不接种0,00.00.0壳聚糖处理桑叶喂食+不接种0.00.00.0从表3可以看出，以壳聚糖溶液浸泡过的桑叶喂食不会影响家蚕的生长；接种病原菌后,家蚕在72小时内的死亡率分别达到83.3%、91.7%和95.0%,但是以本发明所述方法处理后，死亡率迅速下降到43.3%、48.3%和48.3%，防病效果明显。权利要求1、壳聚糖在制备防治家蚕细菌性败血病药物中的应用。2、根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的壳聚糖脱乙酰度大于85%。3、根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述的药物为浓度为0.01~0.1mg/ml的壳聚糖水溶液。全文摘要本发明公开了一种壳聚糖在制备防治家蚕细菌性败血病中的应用。本发明药物能显著降低家蚕细菌性败血病菌的感染风险，治疗效果显著。采用本发明药物防治家蚕细菌性败血病简单易行，成本较低；更重要的是防治环节不会对防治人员的健康产生任何威胁。文档编号A61K31/722GK101579354SQ20091009904公开日2009年11月18日申请日期2009年6月4日优先权日2009年6月4日发明者余山红,斌李,婷苏,谢关林申请人:浙江大学