专利名称：包含喜树碱类抗肿瘤药物的热敏脂质体制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物制剂技术领域，特别涉及一种载抗癌药物热敏脂质体给药系统，
确切而言涉及包含喜树碱类抗肿瘤药物的热敏脂质体制剂。
背景技术：
无论是在国外还是国内，肿瘤都仍然是一类常见且严重威胁人们生命和生活质量 的主要疾病之一。正是基于这样的认识，各国政府、研究机构和制药公司长期来一直对肿瘤 研究和抗肿瘤药物开发予以高度重视和巨额投资，其结果使肿瘤治疗不断进步。药物疗法 在肿瘤治疗或综合治疗、延长肿瘤患者生命和提高他们的生活质量方法具有积极的和不可 替代的作用。抗肿瘤药物目前在临床上有着广泛应用，但其副作用较大。
喜树碱或其衍生物是DNA合成抑制剂，用于多种癌症疾病的治疗。喜树碱或其衍 生物以拓扑异构酶为作用部位，耙抑制DNA的合成而发挥抗癌作用的药物，适用于不同生 长速度的肿瘤，细胞毒性强，对于胃癌、肝癌、骨癌、白血病、膀胱癌等多种恶性肿瘤的治疗 效果明显。目前市场上喜树碱类药物的品种有喜树碱、盐酸伊立替康、盐酸拓扑替康、9_羟 基喜树碱、9-氨基喜树碱、10-羟基喜树碱、硝基喜树碱、7-(|3-三甲基甲硅烷基)乙基喜树 碱、7-(叔丁氧基)亚氨甲基喜树碱、SN-38、9-NC等，主要通过静脉、口服、喷雾等方式给药。
现有技术制备的喜树碱或其衍生物制剂，在临床使用中存在半衰期短、生物利用 度低并且毒副作用明显等缺点，特别是喜树碱、羟基喜树碱、SN-38等具有水难溶性、脂难溶 性特点，在制备过程中多选用高pH值的碱性溶剂体系，使活性成份大大降低，活性结构不 稳定，而且靶向性也差，从而导致抗癌活性受到限制，降低了治疗指数及安全指数。为解决 上述技术缺陷，人们采用了用脂质体包封喜树碱及其衍生物，提高药物的溶解度，增强药物 靶向性，提高生物利用度以及降低毒副作用。 脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，其内部为水相的闭合囊泡，又 称人工生物膜。自1965年被英国Bangham发现脂质体并首创制备后，它作为生物膜的模型 和药物载体被广泛用于实验研究，并向临床发展。据实验和临床应用的需要，可以改变脂质 体的脂质成分提高脂质体的靶向性脂质体作为抗肿瘤药物载体已试用于临床并取得了较 满意的疗效。 脂质体作为药物载体具有靶向性和淋巴定向性，可以控制药物释放，降低药物毒 性，提高药物的稳定性，改变药物体内分布等。普通脂质体虽然能够改善抗癌药物的疗效， 但由于其易被肝脏、脾脏内的巨噬细胞摄取而迅速消除，药物在体内滞留时间短。采用特殊 的磷脂等作为膜材可使脂质体膜在特定温度下仅仅释放极少量的药物，而在适宜温度以上 时发生相变，从而大量释放药物，即具有热敏性质，因此可以通过热疗的方式增加药物在肿 瘤局部的释放，从而增加了药物的靶向性，大大提高了疗效，减小了药物用量，降低了全身 毒副作用，因此对于肿瘤的治疗具有非常重要的意义。另外，普通脂质体的表面进一步用亲 水性的聚乙二醇(PEG)等进行修饰，可制成长循环脂质体，既可以降低RES对其摄取，同时 可以通过延长其在体内循环时间以增加肿瘤组织的摄取。若将脂质体的长循环特点与热敏特点结合起来，则不仅可以延长药物在体内的作用时间，同时增加药物在肿瘤部位的靶向 作用，大大降低药物的毒副作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种包含喜树碱类药物的热敏脂质体。 为实现上述目的，本发明采用的技术方案是采用类脂制备，处方中加入相变调节 剂以达到热敏的目的，另外还可以同时添加长循环材料，以使该脂质体同时具有热敏和长 循环的双重特性。
发明概述 本发明第一方面提供了一种喜树碱类抗肿瘤药物的热敏脂质体制剂，该制剂包
含喜树碱类抗肿瘤药物、普通类脂、相变调节剂和任选的长循环材料，其中相变调节剂占 脂质重量的6-100 % ，优选10-100 % ，优选20-100 % ，优选30-100 % ，优选40-100 % ，优选 50-100 % ，优选60-100 % ;长循环材料占脂质重量的0-40 % ，优选0-30 % ，优选0-20 % ， 优选1-20%，优选5-20%，优选8-18%，优选10-15% ;喜树碱类药物与脂质的重量比为
i : o. 5 i : ioo。 根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其中包含喜树碱类抗肿瘤药物、 普通类脂、相变调节剂和长循环材料。 根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其热敏温度范围为35°C 50°C， 优选为39°C 42°C。 根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其特征在于粒径分布范围是 10nm 900nm，优选是50 300nm。 根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的喜树碱类抗肿瘤药物 选自伊立替康、拓扑替康、喜树碱、9-羟基喜树碱、9-氨基喜树碱、10-羟基喜树碱、硝基喜 树碱、7-(P-三甲基甲硅烷基)乙基喜树碱、7-(叔丁氧基)亚氨甲基喜树碱、SN-38和9-NC 以及它们的药用盐。 根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的普通类脂选自卵磷 脂、豆磷脂、脑磷脂、蛋磷脂酰胆碱、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇 (PI)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)、二棕榈酰-DL-a-磷脂酰胆碱(DPPC)、二肉豆 蔻酰卵磷脂(DMPC)、氢化蛋黄磷脂、氢化大豆磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酰甘 油、磷脂酸、二鲸蜡磷酸酯(DCP)、DLPC、DSPC、DSPG以及其中两种或更多种的混合物。
根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的相变调节剂选自 DPPC、 MSPC、 DSPG、 DSPA、 DLPC、 DMPC、 MPPC、 MLPC、聚己内酯、聚乙交酯丙交酯、聚乳酸、聚氧 乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪酸醚或聚氧乙烯甲基蓖麻油醚以及其中两种或更多种的混 合物。 根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的长循环材料选自各种
分子量的聚乙二醇(PEG)、吐温、苄泽、PEG化磷脂、PEG化二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、PEG化聚
己内酯、PEG化聚乙交酯丙交酯、PEG化聚乳酸、伯洛沙姆188、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙
烯脂肪酸醚、聚氧乙烯甲基蓖麻油醚以及其中两种或更多种的混合物。 根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其还可以包含荷电材料、分散介质及冻干保护剂。 根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的荷电材料选自十八胺、磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇和它们的混合物。根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的分散介质选自磷酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液、Tris缓冲液、硫酸铵溶液、5%葡萄糖水溶液、9%蔗糖水溶液和柠檬酸缓冲液。根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的冻干保护剂选自葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖、海藻糖、山梨醇、右旋糖酐和它们的混合物。 根据本发明第一方面任一项的热敏脂质体制剂，其被制成注射液、冻干粉针剂、大输液或喷雾剂剂型。 本发明第二方面提供了一种药物组合物，其包含治疗有效量的本发明第一方面任一项所述的热敏脂质体制剂，以及药学可接受的载体或赋形剂。
发明详述 下面更进一步地描述本发明。本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。 本发明提出了一种供注射用喜树碱类药物的热敏脂质体给药系统，其特征在于该脂质体为含喜树碱类抗肿瘤药物的、具有在适宜温度以上发生相变而可以快速释放药物的热敏特点；该制剂主要由喜树碱类抗肿瘤药物、普通类脂(在本发明中亦可称为脂质)、相变调节剂、任选的长循环材料以及任选的其他添加剂组成，其中喜树碱类药物与脂质的比
例为i : o. 5 i : ioo ;优选地，其中喜树碱类药物与脂质的比例为i : 5 i : 95 ;优
选地，其中喜树碱类药物与脂质的比例为i : io i : 90;优选地，其中喜树碱类药物与
脂质的比例为i : 15 i : 85 ;更优选地，其中喜树碱类药物与脂质的比例为i : o.5
i : ioo ;更优选地，其中喜树碱类药物与脂质的比例为i : 20 i : 60。 所述的喜树碱类药物的热敏脂质体，其特征在于所述热敏脂质体包括单纯的热敏
脂质体和长循环热敏脂质体，当制剂组成中长循环材料的含量为零时即为单纯的热敏脂质
体，当其中含有长循环材料时即为长循环热敏脂质体。 所述的喜树碱类药物的热敏脂质体，其特征在于所述热敏脂质体的热敏温度范围为35。C 50°C ，优选36°C 48°C ，优选36°C 45°C ，优选37°C 42°C ，优选39°C 42°C 。粒径分布范围是10nm 900nm，优选是20 800nm，优选是30 500nm，优选为50 300nm。
所述的喜树碱类抗肿瘤药物主要指具有明显抗肿瘤活性的喜树碱及其衍生物，喜树碱的活性衍生物包括水溶性衍生物和水难溶性衍生物，水溶性衍生物如伊立替康、拓扑替康，水难溶性衍生物如喜树碱、9_羟基喜树碱、9_氨基喜树碱、10-羟基喜树碱、硝基喜树碱、7-(P-三甲基甲硅烷基)乙基喜树碱、7-(叔丁氧基)亚氨甲基喜树碱、SN-38、9-NC以及它们的药用盐。在本发明一个实施方案中，所述的喜树碱类抗肿瘤药物选自io-羟基喜树碱、伊立替康、拓扑替康、SN-38、9-NC或其药用盐。 所述的普通类脂主要包括磷脂和胆固醇，其中磷脂可以是天然、合成、半合成磷脂或其混合物，如卵磷脂、豆磷脂、脑磷脂、蛋磷脂酰胆碱、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)、二棕榈酰-DL-a-磷脂酰胆碱(DPPC)、二肉豆蔻酰卵磷脂(DMPC)、氢化蛋黄磷脂、氢化大豆磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酸、二鲸蜡磷酸酯(DCP) 、 DLPC、 DSPC、 DSPG或其两种或两种以上的混合物。在一个实施方案中，所述的普通类脂为磷脂酰胆碱。 所述的相变调节剂包括具有不同相变温度的磷脂(如DPPC、 MSPC、 DSPG、 DSPA、DLPC、DMPC、MPPC、MLPC等)、高分子材料(如聚己内酯、聚乙交酯丙交酯、聚乳酸、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪酸醚或聚氧乙烯甲基蓖麻油醚)或其中的几种。在一个实施方案中，所述的相变调节剂相变调节剂为MSPC。在一个实施方案中，所述的相变调节剂相变调节剂为DSPG。 所述的长循环材料包括聚乙二醇(PEG，其分子量可以为200-20000 ，优选400-10000，优选600-6000，例如600-2000，例如2000-4000，例如4000-6000)、吐*益、节泽、PEG化磷脂、PEG化二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(例如DSPE-PEG2000) 、 PEG化聚己内酯、PEG化聚乙交酯丙交酯、PEG化聚乳酸、伯洛沙姆188、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪酸醚和聚氧乙烯甲基蓖麻油醚其中之一或任何组合形式。在一个实施方案中，所述的长循环材料为PEG化二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(例如DSPE-PEG2000)。 所述的其他添加剂包括荷电材料、分散介质及冻干保护剂。荷电材料可以是带正电荷的材料，如十八胺，也可以是带负电荷的材料，如磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇；分散介质可以是磷酸盐缓冲液、乙酸盐缓冲液、Tris缓冲液、硫酸铵溶液、5%葡萄糖水溶液、9%蔗糖水溶液或柠檬酸缓冲液；冻干保护剂选自葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖、海藻糖、山梨醇或右旋糖酐中的一种或几种；其他添加剂还可以是氯化钠、甘油、甘氨酸、维生素E、丁基羟基甲苯中的一种或多种。 根据本发明，所述的热敏脂质体制剂包封率为60% _100%，优选为80% 100%。根据本发明，所述的热敏脂质体制剂中的药物含量为0. 2-20mg/ml，优选0. 5-10mg/ml，优选l_5mg/ml ，优选2mg/ml ，优选。 在本发明的一个实施方案中，所述的热敏脂质体制剂包含
磷脂酰胆碱 1600重量份， DSPE-PEG2000 200重量份， MSPC 200重量份， 10-羟基喜树碱 30重量份。 在本发明的一个实施方案中，所述的热敏脂质体制剂包含
磷脂酰胆碱 900重量份， MSPC 100重量份， 10-羟基喜树碱 20重量份。 在本发明的一个实施方案中，所述的热敏脂质体制剂包含 磷脂酰胆碱 1400重量份， DSPE-PEG2000 200重量份， MSPC 200重量份， EPC 200重量份， 盐酸伊立替康30重量份。
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在本发明的一个实施方案中，所述的热敏脂质体制剂包含
磷脂酰胆碱1500重量份，
DSPE-PEG2000 200重量份，
MSPC 200重量份，
DSPG 100重量份，
盐酸拓扑替康 80重量份。
在本发明的一个实施方案中，所述的热敏脂质体制剂包含
磷脂酰胆碱 600重量份，
DSPE-PEG2000 100重量份，
CH 200重量份，
DSPG 100重量份，
SN-38 50重量份。
在本发明的一个实施方案中，所述的热敏脂质体制剂包含
磷脂酰胆碱 1600重量份，
DSPE-PEG2000 200重量份，
DSPG 200重量份，
9-NC 20重量份。 根据本发明，所述的热敏脂质体的制备方法包括薄膜分散法、逆相蒸发法、空白脂 质体载药法、复乳法、乙醇注入法、载体沉积法、主动载药法(pH梯度法和硫酸铵梯度法)、 冻干水化法、喷雾干燥法、冻融循环法、超声法、高压均质法或其中的两种或两种以上的方法。 所述的热敏脂质体可以制成注射液、冻干粉针剂、大输液或喷雾剂。
本发明的优点在于，采用热敏材料制备脂质体，和肿瘤热疗相结合，可以增加药物 在靶区的释放，提高疗效，还可以减少药物在全身循环系统的分布，从而降低总的用药量， 同时降低全身毒副作用。若将热敏脂质体的表面用长循环材料修饰，可以减少血浆蛋白的 调理化作用，降低网状内皮系统对脂质体的识别，从而延长其在体内的循环时间，因此这种 长循环热敏脂质体兼具有延长在体内的存留时间同时具有被动靶向至肿瘤组织和增加在 肿瘤组织释放的特点。将所述脂质体是制成注射给药的药物制剂形式，并可进一步制备成 治疗各种疾病的靶向给药高效低毒的新剂型。 本发明提供的热敏脂质体制剂的特征是，该类脂质体具有热敏性，在肿瘤组织局 部加热时可使该脂质体被动靶向至该肿瘤部位，并在该肿瘤部位大量释放药物，提高疗效， 降低全身的毒副作用。 本申请将喜树碱类抗肿瘤药物制成以热敏脂质体为载体的剂型，不仅将更有利于 改变其传递和释放方式，还可以提高疗效，减少毒副作用。目前未见同类报道。
图1为实施例 一 的脂质体制剂的粒径分布图。图中，纵坐标"cumulative distribution"表示"累禾只分布，，，"density distribution"表示"密度分布，，，横座标 "particle size"表示" 度"；图2、3和6中也具有相同含义。
图2为实施例二的脂质体制剂的粒径分布图。
图3为实施例三的脂质体制剂的粒径分布图。 图4为实施例五的脂质体制剂的差示扫描量热分析图。图中，纵坐标"heat flow"
表示"热流"，横座标"temperature"表示"温度"。 图5为实施例五的脂质体制剂的释放度研究结果图。 图6为实施例六的脂质体制剂的粒径分布图。
具体实施例方式
下面通过具体的实施例或试验例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施 例或试验例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发 明。 本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽 然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此 作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和 操作方法是本领域公知的。 棚列一、10-羊碟雄碱皿f跡鍾月旨i1H本先ll誦燃
麵,扁去: 称取磷脂酰胆碱1. 6g、DSPE-PEG2000 0. 2g、MSPC 0. 2g、 10-羟基喜树碱30mg于茄 形瓶中，加入5ml氯仿甲醇(3 : 1)溶液溶解后，置水浴加热真空旋转蒸发除去有机溶剂， 在烧瓶壁上形成磷脂薄膜，加入预热至5(TC的磷酸缓冲液20ml水化，减压脱气，探头超声 或均质机均质，将粒径减小至纳米级，采用葡聚糖凝胶柱去除未包封药物即得。经激光粒径 扫描仪测定其粒径分布如图1。包封率为93%，药物含量为1. 5mg/ml。
实施例二、10-M某喜树碱的热敏fl旨质体制剂的制备
逆相蒸发法: 称取磷脂酰胆碱0. 9g、MSPC 0. lg于烧杯中，加入2ml氯仿溶解，再加入2mg/ml的 10-羟基喜树碱的氢氧化钠水溶液10ml探头超声成乳，旋蒸去除有机溶剂，旋蒸过程中缓 慢滴加磷酸盐缓冲液至终体积为20ml，最后减压脱气，探头超声或均质机均质，将粒径减小 至纳米级，采用葡聚糖凝胶柱去除未包封药物。经激光粒径扫描仪测定其粒径分布如图2。
实施例三、盐酸伊立替康的长循环热敏fl旨质体的制备
主动载药法 硫酸铵梯度法称取磷脂酰胆碱1. 4g、 DSPE-PEG2000 :0. 2g、 MSPC :0. 2g、 EPC : 0. 2g于茄形瓶，加5ml氯仿微热至完全溶解，蒸成薄膜，用20ml硫酸铵溶液水化，探头超 声至有乳光，制备空白脂质体溶液，将空白脂质溶液均质后过滤膜，整粒后除去外相水中的 盐，除盐后的空白脂质体加入30mg盐酸伊立替康，水浴孵化既得，微柱离心法去除未包封 的药物。经激光粒径扫描仪测定其粒径分布如图3。包封率为95%，药物含量为1. 5mg/ml。
实施例四、盐酸fc扑替康的长循环热敏fl旨质体的制备
冻融循环法 称取磷脂酰胆碱1. 5g、DSPE-PEG2000 :0. 2g、MSPC :0. 2g、DSPG :0. lg，溶于5ml氯 仿后旋蒸成薄膜，加入20ml含4mg/ml盐酸拓扑替康的9%蔗糖水溶液水化，并经探头超声或均质机均质，将粒径减小至纳米级，置于-2(TC冷冻，室温或5(TC融化，为一个冻融循环， 一般为3-4个循环，最后一次冷冻后，4t:融化，透析去除未包封药物。 实施例五、SN-38的长循环热敏脂质体的制备
主动载药法: pH梯度法称取磷脂酰胆碱0. 6g、 DSPE-PEG2000 :0. lg、 CH :0. 2g、 DSPG :0. lg于 茄形瓶，加5ml氯仿微热至完全溶解，蒸成薄膜，用pH4. 0磷酸盐缓冲液10ml水化，探头超 声至有乳光，称取50mg药物溶于10ml 0. lmol/L氢氧化钠溶液，和上述脂质体混匀，并将 外相用氢氧化钠调节pH为7. O，此为内酸外碱型；外酸内碱型则反之，用pH7. 0的缓冲液水 化，外相调节pH为4. 0。将制备的脂质体进行差示扫描量热分析，以测定脂质体膜的相变温 度，结果如图4 ;将样品分别在不同温度下进行释放度研究，采用超滤法测定不同时间点的 累积释放度，研究结果如图5。 輔齢、9-NC白術跡雄月旨制本白勺燃
乙醇沣入法称取磷脂酰胆碱1. 6g、DSPE-PEG2000 :0. 2g、DSPG :0. 2g处方量磷脂、9-NC 20mg，
加入乙醇5ml，稍加热并超声使溶解，将其以50uL/次注入20ml预热至5(TC的磷酸盐缓冲
溶液中，旋转蒸发去处大部分的乙醇，最后减压脱气，过均质机减小粒径，采用葡聚糖凝胶
柱去除未包封药物。经激光粒径扫描仪测定其粒径分布如图6。 棚列七'、雄碱孝靴勿,跡雄月旨細奸謝齐l隨 将实施例一制备的喜树碱类药物的长循环热敏脂质体悬液20ml，加入3g乳糖，溶
解后用O. 22ym微孔滤膜过滤除菌后置于安瓶瓶中，预冻12h后经冷冻干燥，充氮气封口后
得到脂质体的冻干粉针剂。 实施例八、喜树碱长循环热敏fl旨质体体内热敏释药件能比较 取9只雌性小鼠(20±2g)，随机分为3组，每组3只(喜树碱注射液组、喜树碱长 循环脂质体组(参考实施例一制备，但不加入相变调节剂)、实施例一制备的喜树碱长循环 热敏脂质体组，各组主成分均为io-羟基喜树碱)，编号，称重。小鼠麻醉后置于42士0.5t: 水浴装置上， 一条腿伸入水浴中，其余部分在隔板上，水浴加热15min后，3组分别尾静脉注 射喜树碱注射液、喜树碱长循环脂质体和喜树碱长循环热敏脂质体，给药剂量为2. 0mg/kg。 保持水浴30min后，颈椎脱臼处死，每只小鼠取两条后腿肌肉，称重，未加热腿作为自身对 照。样品处理后HPLC测定，结果概述于下表。
组别注射液长循环脂质体长循环热敏脂质体
Adrug/Aref%Adrug/Aref%Adrug/Aref%A<jrug/Aref%A(jrug/Aref >^
(加热腿)(未加热腿)(加热腿)(未加热腿)(力口热腿)(未加热腿)
14.94.55.95.511.54.6
24.54.44.84.912.35.2
34.65.05.24.811.24.9
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由上述结果可以看出，相对注射液和长循环脂质体而言，热敏长循环脂质体递送 至加热腿的药物量显著增加。 輔纖雄碱长f跡雄月旨i1H本,，輔 在雌性昆明小鼠(体重18 22g)小鼠右前肢背部皮下注射Lewis肺癌细胞悬液， 建立移植瘤模型。将荷瘤小鼠随机分组成4组(生理盐水组、喜树碱注射液组、喜树碱长循 环脂质体组(参考实施例一制备，但不加入相变调节剂)、实施例一制备的喜树碱长循环热 敏脂质体组，各组主成分均为10-羟基喜树碱)，10只/组，每三天尾静脉给药一次，治疗3 次，给药剂量为2. 5mg/kg。给药前小鼠腹腔注射1%戊巴比妥钠麻醉，给药后将小鼠的肿瘤 部位置于42±0. 5t:水浴上加热30min。第3次治疗2天后处死小鼠，剥取肿瘤组织，称重， 计算抑瘤率，结果如下表所示。
组别瘤重(g)抑瘤率(％ )
对照(生理盐水)1. 0380
注射液0. 59242. 95
长循环脂质体组0. 48753. 05
长循环热敏脂质体组0. 26974. 07 由结果可见，热敏长循环脂质体治疗组比普通注射液组和长循环脂质体组具有更 高的抑瘤率。
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权利要求
一种喜树碱类抗肿瘤药物的热敏脂质体制剂，该制剂包含喜树碱类抗肿瘤药物、普通类脂、相变调节剂和任选的长循环材料，其中相变调节剂占脂质重量的6-100％，优选10-100％，优选20-100％，优选30-100％，优选40-100％，优选50-100％，优选60-100％；长循环材料占脂质重量的0-40％，优选0-30％，优选0-20％，优选5-20％，优选8-18％，优选10-15％；喜树碱类药物与脂质的重量比为1∶0.5～1∶100。
2. 根据权利要求1的热敏脂质体制剂，其热敏温度范围为35°C 5(TC，优选为39°C 42°C。
3. 根据权利要求1-2任一项的热敏脂质体制剂，其特征在于粒径分布范围是10nm 900nm，优选是50 300nm。
4. 根据权利要求l-3任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的喜树碱类抗肿瘤药物选自 伊立替康、拓扑替康、喜树碱、9-羟基喜树碱、9-氨基喜树碱、10-羟基喜树碱、硝基喜树碱、 7-(p-三甲基甲硅烷基)乙基喜树碱、7-(叔丁氧基)亚氨甲基喜树碱、SN-38和9-NC以 及它们的药用盐。
5. 根据权利要求l-4任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的普通类脂选自卵磷脂、豆 磷脂、脑磷脂、蛋磷脂酰胆碱、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂 酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS) 、二棕榈酰-DL-a -磷脂酰胆碱(DPPC) 、二肉豆蔻酰卵磷脂 (DMPC)、氢化蛋黄磷脂、氢化大豆磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酸、二 鲸蜡磷酸酯(DCP) 、 DLPC、 DSPC、 DSPG以及其中两种或更多种的混合物。
6. 根据权利要求l-5任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的相变调节剂选自DPPC、 MSPC、 DSPG、 DSPA、 DLPC、 DMPC、 MPPC、 MLPC、聚己内酯、聚乙交酯丙交酯、聚乳酸、聚氧乙烯脂 肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪酸醚或聚氧乙烯甲基蓖麻油醚以及其中两种或更多种的混合物。
7. 根据权利要求l-6任一项的热敏脂质体制剂，其中所述的长循环材料选自聚乙二醇 (PEG)、吐温、苄泽、PEG化磷脂、PEG化二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、PEG化聚己内酯、PEG化聚乙 交酯丙交酯、PEG化聚乳酸、伯洛沙姆188、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪酸醚、聚氧 乙烯甲基蓖麻油醚以及其中两种或更多种的混合物。
8. 根据权利要求l-7任一项的热敏脂质体制剂，其还可以包含荷电材料、分散介质及 冻干保护剂。
9. 根据权利要求8的热敏脂质体制剂，其中所述的荷电材料选自十八胺、磷脂酸、磷脂 酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇和它们的混合物；所述的分散介质选自磷酸盐缓冲液、 乙酸盐缓冲液、Tris缓冲液、硫酸铵溶液、5%葡萄糖水溶液、9%蔗糖水溶液和柠檬酸缓冲 液；和/或所述的冻干保护剂选自葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖、海藻糖、山梨醇、右旋糖酐和 它们的混合物。
10. —种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1-9任一项的热敏脂质体制剂，以 及药学可接受的载体或赋形剂。
全文摘要
本发明涉及包含喜树碱类抗肿瘤药物的热敏脂质体制剂。其中包含喜树碱类抗肿瘤药物、普通类脂、相变调节剂和任选的长循环材料，其中相变调节剂占脂质重量的6-100％，长循环材料占脂质重量的0-40％，喜树碱类药物与脂质的重量比为1∶0.5～1∶100。该脂质体制剂的特征是该类脂质体具有热敏性，在肿瘤组织局部加热时可使该脂质体被动靶向至该肿瘤部位，并在该肿瘤部位大量释放药物，提高疗效，降低全身的毒副作用。本发明中的喜树碱类抗肿瘤药物可包括水溶性衍生物如伊立替康、拓扑替康和水不溶性衍生如羟基喜树碱、SN-38、9-NC等。
文档编号A61K9/127GK101744767SQ200910252138
公开日2010年6月23日 申请日期2009年12月3日 优先权日2008年12月5日
发明者梅兴国 申请人:中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所