金黄色葡萄球菌特异性抗体制剂的制作方法

专利名称：金黄色葡萄球菌特异性抗体制剂的制作方法
技术领域：
本发明大体上涉及抗体(Ab)、免疫学、传染病和医药领域。更具体地，本发明涉及 富集对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus, SA)荚膜抗原特异性的IgM型的免疫球 蛋白(Ig)的Ab制剂。背景SA在人和动物两者中是疾病和死亡的主要原因。这些革兰氏阳性球菌的感染经常 导致浅脓肿的形成。SA感染的其它情况可能更为严重。例如，SA侵入到淋巴系统和血液中 可能导致全身性感染，全身性感染继而可能引起并发症诸如心内膜炎、关节炎、骨髓炎、肺 炎、败血性休克、甚至死亡。医院获得性SA感染是常见的并且特别疑难的，因为SA是医院 获得性外科手术部位感染和肺炎的最常见原因，并且是心血管感染和血流感染的第二最常 见原因。SA 感染的经济影响是可观的。Noskin 等人(Arch Intern Med 165:1756-1761， 2005)的回顾性分析发现，对于全部美国住院病人的0.8%，SA感染作为出院诊断被报道， 并且与无SA感染的住院病人相比，患有SA感染的那些住院病人具有3倍的住院时间长度、 3倍的总花费($48，824比$14，141)、和5倍的住院死亡风险。外推这些数据，Noskin等人 评估认为美国医院病人的SA感染导致了每年约12，000位住院病人的死亡和$95亿的超额 费用。抗生素施用一直且仍然是SA感染的标准治疗。不幸的是，抗生素的使用也已推动 了 SA中抗生素抗性的发展。特别是，甲氧西林抗性SA(MRSA)已经进化出抗诸如青霉素和 头孢菌素的内酰胺抗生素的能力。更令人担忧的是，最近已出现对诸如万古霉素和利 奈唑胺的终极手段抗生素抗性的SA。因此需要预防和治疗SA感染的新方法。概述本发明涉及治疗或预防SA感染的新型的基于Ab的策略的开发。该策略利用了对 一种或多种SA荚膜抗原特异性的IgM Ab。这些Ab的例子包括(i)从收集的供体血浆中分 离且富集与SA荚膜抗原特异性结合的那些IgM的多克隆IgM Ab组合物，或(ii)与SA荚 膜抗原特异性结合的一种或多种IgM单克隆Ab (mAb)。先前的治疗或预防SA感染的基于Ab的策略在临床前和早期临床试验中表现乐 观，但是未能达到三期试验终点。可能解释这些结果的是，以前的策略未解决协同作用以逃 避Ab应答的两种主要的SA毒力因子，即(i)多糖荚膜产生和(ii)葡萄球菌蛋白A(Spa)表达。通过包被细菌细胞壁的外 表面，多糖荚膜“掩护”其它细胞壁相关SA抗原不被Ab和免疫效应细胞所识别，否则Ab和 免疫效应细胞将会攻击细菌。因此对非荚膜SA抗原特异性的Ab制剂并不能很有效地杀伤细菌，因为在Ab制剂中的Ig需要首先穿透荚膜以便到达非荚膜抗原。并且即使穿透了荚 膜，与非荚膜抗原相结合的Ig位于荚膜的下面，且是其它免疫效应子如噬菌细胞所无法触 及的。更为严重的，Spa，一种通过其Fc (效应子)区与Ig结合的细胞壁相关蛋白，充当(i) 海绵，其吸收与荚膜抗原结合或偶然非特异性穿透荚膜的那些Ig和(ii)Fc区的锚，其将Ig 的效应子部分定位在远离与Fc相互作用的免疫效应子，如补体和具有Fc受体的吞噬细胞。 因此，以这种方式甚至大多数对SA荚膜抗原特异性的Ab被与免疫效应子“隔离”。凸显掩 护和隔离的协同效应的重要性的是，几乎所有SA的临床分离株都表达这两种毒力因子。本发明的Ab通过利用未被(或仅少量被)Spa隔离的Ig(例如，IgM)靶向未被掩 护的抗原(即，多糖荚膜自身)而克服了这种协同的掩护和隔离防御。IgM Ab目前是优选 的，因为它们具有使其十分有效清除荚膜细菌的其它特征(如，有效的补体激活)。事实上， 比如在无脾症中出现的IgM记忆B细胞的缺陷，与对荚膜细菌的免疫应答削弱相关。因此，在一个方面，本发明的特征是一种组合物，其包含从由至少10个不同供体 收集的血浆中(例如，至少5、10、20、100、500、1000或更多升的收集的血浆)纯化的多克隆 的Ab混合物，其中所述Ab混合物富集与至少一种SA荚膜抗原特异性结合的非Spa结合 Ig。Ab混合物可以富集与至少一种SA荚膜抗原特异性结合的IgM(例如，Ab混合物的至少 约1%、2%、3%、4%、5%、10%、30%或更多重量百分比)。所述至少一种SA荚膜抗原可以 是血清型5荚膜抗原、血清型8荚膜抗原或前述两者的混合物。在某些实施方式中，组合物 的Ab是人的。在其他实施方式中，Ab是牛的(用于治疗SA相关牛乳腺炎)。血浆供体可 以是已经或还未被包含诱导针对SA (例如，至少一种SA荚膜抗原)的免疫应答的物质的疫 苗免疫的那些。Ab混合物可以是冻干的；溶解在包含钠离子和氯离子的溶液中；溶解在包含一种 或多种稳定剂如清蛋白、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、山梨糖醇、聚乙二醇和甘氨酸的溶液中；和 /或溶解在包含杀微生物剂(例如，去污剂、有机溶剂和去污剂与有机溶剂的混合物)的溶 液中。在另一方面，Ab混合物还可以富集与一种或多种(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、 10种或更多种)除荚膜抗原之外的SA抗原特异性结合的Ig。这些其它抗原的例子包 括Spa、血清型336多糖抗原、凝固酶、聚集因子A、聚集因子B、纤连蛋白结合蛋白、血纤蛋 白原结合蛋白、胶原蛋白结合蛋白、弹性蛋白结合蛋白、MHC类似蛋白、多糖胞内黏附分子 (polysaccharide intercellular adhesin)、α 溶血素、β 溶血素、δ 溶血素、y 溶血素、 Panton-Valentine杀白细胞素、剥脱性毒素A、剥脱性毒素B、V8蛋白酶、透明质酸裂合酶、 脂肪酶、葡萄球菌激酶、LukDE杀白细胞素、肠毒素、中毒性休克综合征毒素-1、多聚-N-琥 珀酰β-1 — 6葡糖胺、过氧化氢酶、β-内酰胺酶、磷壁酸、肽聚糖、青霉素结合蛋白、趋化 性抑制蛋白、补体抑制剂和Sbi。还在本发明中的是包括如下步骤的方法从收集的血浆中分离多克隆的Ab混合 物，所述多克隆的Ab混合物富集与至少一种SA荚膜抗原特异性结合的非葡萄球菌蛋白A 结合Ig。这种方法可进一步包括如下步骤将所分离的多克隆的Ab混合物溶解在药学上 可接受的载体中、过滤所分离的多克隆的Ab混合物、使所分离的多克隆的Ab混合物与去污 剂相接触、使所分离的多克隆的Ab混合物与有机溶剂相接触、使所分离的多克隆的Ab混合 物与β -丙内酯相接触，和/或将所分离的多克隆的Ab混合物进行透析。
本发明中的另一种方法包括如下步骤(a)获得由至少10个供体收集的血浆； (b)将收集的血浆分成至少第一部分和第二部分，所述第二部分与所述第一部分相比，富集 非Spa结合Ig ； (c)将所述第二部分分成至少第三部分和第四部分，所述第四部分与所述 第三部分相比，富集与至少一种SA荚膜抗原特异性结合的Ig ； (d)收集所述第四部分；和 (e)将包含于所述第四部分中的Ig溶解在药学上可接受的载体中。将收集的血浆分成至 少第一部分和第二部分的步骤(b)可以包括如下步骤(bl)从收集的血浆中除去脂质以生 产脂质清除的收集的血浆；( )通过对选自由水和低离子强度缓冲液组成的组中的液体 对脂质清除的收集的血浆进行透析来沉淀包含于脂质清除的收集的血浆中的优球蛋白；和 (b3)收集所沉淀的优球蛋白，其中所述第二部分包含所收集的优球蛋白。步骤(b)还可以 进一步包括从所收集的优球蛋白中纯化IgM的步骤(b4)。在这种方法的一种形式中，将收 集的血浆分成至少第一部分和第二部分的步骤(b)包括在0°C以下使收集的血浆与乙醇相 接触的步骤。第二部分可以包括Cohn级分III沉淀(Cohn fraction III paste)和/或 Kistler-Nitschmarm沉淀物B。将第二部分分成至少第三部分和第四部分的步骤(c)包括 利用与所述至少一种SA荚膜抗原结合的色谱介质对所述第二部分进行免疫亲和色谱的步 马聚ο本发明中的又一种方法包括如下步骤(a)将收集的血浆分成第一级分和第二级 分，其中所述第一级分包括大于90% IgG的多克隆的Ab混合物，和至少部分消除IgG的至 少第二级分；和(b)从至少第二级分中分离Ig，其中所分离的Ig富集与至少一种SA荚膜 抗原特异性结合的IgM。在另一方面，本发明的特征是包括使包含Ig的样品与如下物质接触的步骤的方 法(a)与SA血清型5荚膜抗原结合的色谱介质，(b)与SA血清型8荚膜抗原结合的色谱 介质，和任选地，(c)与如下的非荚膜SA抗原结合的色谱介质诸如Spa、血清型336多糖抗 原、凝固酶、聚集因子A、聚集因子B、纤连蛋白结合蛋白、血纤蛋白原结合蛋白、胶原蛋白结 合蛋白、弹性蛋白结合蛋白、MHC类似蛋白、多糖胞内黏附分子、α溶血素、β溶血素、δ溶 血素、Y溶血素、Panton-Valentine杀白细胞素、剥脱性毒素Α、剥脱性毒素B、V8蛋白酶、 透明质酸裂合酶、脂肪酶、葡萄球菌激酶、LukDE杀白细胞素、肠毒素、中毒性休克综合征毒 素-1、多聚-N-琥珀酰β-1— 6葡糖胺、过氧化氢酶、β-内酰胺酶、磷壁酸、肽聚糖、青霉 素结合蛋白、趋化性抑制蛋白、补体抑制剂和Sbi。与SA血清型5、SA血清型8荚膜抗原和任选的非荚膜SA抗原如SA血清型336抗 原结合的色谱介质也是本发明所含的特征。本发明进一步包括与SA荚膜抗原(例如，血清型5或血清型8抗原)特异性结合 但不与Spa特异性结合的mAb (例如，哺乳动物的、人的、人源化的或牛的)。这种mAb的混 合物也包含在本发明中，例如，(i)血清型5和血清型8特异性IgM mAb的混合物和(ii)血 清型5、血清型8和血清型336特异性IgM mAb的混合物。如本文所使用的，“抗体”或“Ab”是Ig、相同的或异质的Ig的溶液，或Ig的混合 物。“单克隆抗体”或“mAb”是一种克隆的B细胞系所表达的Ab。如本文所使用的，该术语 是指仅包含能够与特定抗原的特定表位进行免疫反应的一个种类的抗原结合位点的Ab分 子的群体。“多克隆抗体”或“多克隆Ab”是异质的Ab的混合物。典型地，多克隆Ab将包 含与特定抗原或特定有机体结合的大量不同Ab分子，其中不同Ab中的至少一些与抗原或有机体的不同表位进行免疫反应。如本文中所使用的，多克隆Ab可以是两种或更多种mAb 的混合物。Ab的“抗原结合部分”包含于Ab的Fab部分的可变区内，并且是Ab中赋予Ab抗 原特异性的部分(即，通常由Ab的重链和轻链的互补决定区形成的三维口袋)。“Fab部 分”或“Fab区”是含有该Ig的抗原结合部分的木瓜蛋白酶消化的Ig的蛋白水解片段。“非 Fab部分”是不在Fab部分内的那部分Ab，例如“Fe部分”或“Fe区”。Ab的“恒定区”是可 变区之外的那部分Ab。恒定区内通常包括Ab的“效应部分”，其为Ab中负责与协助进行免 疫应答的其它免疫系统组分结合的部分。因此，例如，Ab上与补体组分或Fc受体结合的位 点(并非通过其抗原结合部分)是Ab的效应部分。当提到蛋白分子例如Ab时，“纯化的”意思是与天然伴随这些分子的组分分离。典 型地，当Ab或蛋白为以重量计至少约10% (例如，9%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、 70%,80%,90%,95%,98%,99%,99.100% )，不含非Ab蛋白或与之天然缔合的其 它天然存在的有机分子时，Ab或蛋白是纯化的。纯度可以用任何适合的方法来测量，例如， 柱色谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳、或HPLC分析。在除其天然存在的细胞类型以外的细胞类型 中产生的化学合成的蛋白或其它重组体蛋白为“纯化的”。当Ab的处理导致处理后与处理 前相比所需Ig与非所需Ig的比率更高时，含有所需Ig类型和非所需Ig类型的Ab“富集” 所需Ig类型。例如，含有SA荚膜结合Ig和非SA荚膜结合Ig的Ab的溶液在全部SA荚膜 结合Ab中的一些被从溶液中去除时富集非SA荚膜结合Ig ；并且含有Spa结合Ig和非Spa 结合Ig的Ab的溶液在全部Spa结合Ab中的一些被从溶液中去除时富集非Spa结合Ig。所谓“结合”(“bind”、“bindS”)或“与……反应”意思是一种分子识别和附着于 样品中特定的第二种分子，但基本上不识别或附着样品中的其他分子。通常，“特异性结合” 另一种分子的Ab对于此另一种分子具有大于约105、106、107、IO8、109、1010、IOllUO12升/摩 尔的Kd。“治疗有效量”是能够在被治疗的动物或人中产生医学上所需效应(例如，疾病的 改善或预防)的量。除非另外限定，本文中所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通 技术人员所普遍理解的含义相同的含义。虽然与本文所描述的相似或等同的方法和材料可 以被用于实践或试验本发明，但适宜的方法和材料在下面描述。本文中所提到的所有出版 物、专利申请、专利和其它参考文献在此以其整体通过引用并入。如有冲突发生，将以本发 明说明书(包括定义)为准。另外，材料、方法和实施例仅作说明性而非局限性。本发明的其它特征和优点从以下的详述和权利要求书中将变得明显。详述本发明包括SA荚膜特异性多克隆和单克隆IgM Ab制剂，以及制备这种Ab组合物 的方法和组合物。以下所描述的优选的实施方式阐明了这些组合物和方法的适应性改变。 但是，从这些实施方式的描述，可根据以下所提供的描述来制备和/或实践本发明的其它 方面。生物方法本文描述了涉及传统免疫学和分子生物学技术的方法。免疫学方法(例如，用于 抗原-Ab复合体的检测和定位的测定、免疫沉淀法、免疫印迹法及类似方法)是本领域普遍已知的，并且在方法学专著如Current Protocols in Immunology (现代免疫学实验方 案)，Coligan等人，编辑，John ffiley&Sons, New York中被描述。分子生物学的技术在如 下的专著中被详细描述诸如Molecular Cloning =A Laboratory Manual (分子克隆实验 室手册)，第二版，第 1-3 卷，Sambrook 等人，编辑，Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N. Y. , 2001 ；禾口 Current Protocols in Molecular Biology (现代分子生 物学实验方案)，Ausubel 等人，编辑，Greene Publishing and ffiley-Interscience, New York。胃^^ ^+:Methods of Plasma Protein Fractionation (S
分部分离方法)，Cursling, J. M 编辑，Academic Press, San Diego, Calif.，1980 ；和 Blood Separation and Plasma Fractionation(!￠1 ^ %^ ^ !^ ) ,Harris, J. R. ffiley-Liss,New York 1991 中。Ab 方法描述于 handbook of Therapeutic Ab (治疗性抗 体手册)，Dubel，S.，编辑，Wiley-VCH，2007 以及 Harlow E 和 Lane，D. Using Antibodies :A Laboratory Manual ( Μδ ' Φ : ^ ^ ) Cold Springs Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.，1999中。细胞培养技术为本领域普遍已知的，并且在以下的 方法学专论中被详细描述如 R Ian Freshney, ffiley-Liss, Hoboken NJ.的 Culture of Animal Cells =A Manual of Basic ^Technique (动物细胞培养基本技术手册)，第四版， 2000 禾口 Maureen A Harrison 禾口 Ian F Rae 的 General Techniques of Cell Culture (细 胞培养通用技术)，Cambridge University Press，Cambridge，UK，1994。蛋白纯化的方法 在Guide to Protein Purification =Methods in Enzymology (蛋白纯化指南酶学方法)， 第 182 卷，Deutscher M P,编辑，Academic Press, San Diego, Calif, 1990 中被讨论。对SA荚膜抗原特异性的多克隆IgM Ab传统上，多克隆Ab是通过利用抗原免疫宿主动物，且然后从动物中收集含Ab的 血清而制备的。为产生对SA多糖荚膜特异性的Ab，通常所用的抗原可以是从细菌中纯化 的一种或多种(1、2、3或更多种)SA荚膜多糖抗原。参见，例如，Ausebel等人，Current Protocols in Molecular Biology (现代分子生物学实验方案)，John Wiley & Sons, Inc.， NY, 19890为诱导T细胞依赖(IgG)的Ab应答，可以将抗原结合到载体蛋白如匙孔血蓝蛋 白或假单胞菌外毒素A上。为了诱导显著的T细胞依赖(IgM)的Ab应答，可将荚膜多糖抗 原结合在一起以提高抗原的平均分子量。可以使用辅剂以增强Ab应答。当利用抗原进行 一种或多种免疫后，从宿主动物中收集血液，并利用已知技术收集抗血清。可利用已知技术 如盐析(salt cult)、离子交换色谱、尺寸排阻色谱和亲和色谱富集或纯化抗血清中所包含 的抗原特异性Ab。虽然前述方法可在本发明中使用，由于对SA荚膜抗原特异性的IgM在动物受治疗 者(例如，人和牛)的血液中天然存在，目前制备这些IgM的优选的方法是从未按照前面段 落中所描述的被免疫的多个供体(例如，5、10、50、100、500、1000、5000、10000或更多单个 供体)的收集的血浆(例如，从100、500、1000、5000或更多升的收集的血浆)中对其进行 极为简单地纯化。这种方法是优选的，因为其不需要供体免疫，并且可容易地改造目前大规 模的血浆分部操作来制备大量对SA荚膜抗原特异性的IgM。供体优选地为将多克隆IgM Ab组合物施用给的物种相同的物种。例如，对于向人 类施用，为了避免非期望的反应，供体优选地为人。相似地，对于向牛施用，供体优选地为 牛。在其它情况下，供体可以是除了人或牛以外的物种，例如，哺乳动物物种如马、绵羊、狗、猫、小鼠、大鼠、兔、猴、黑猩猩、山羊等。为了提高回收率，供体可以特别地选自具有相对较 高效价的IgM抗SA荚膜Ab的那些供体的一般群体之中[例如，具有比IgM抗SA荚膜Ab的 平均(一般群体的)效价高50、100、200、500、1000或更高的百分比的那些供体；以及先前 患有SA感染的那些供体]。可利用改编的传统免疫学技术如RIA和ELISA测试供体的IgM 抗SA荚膜Ab的效价。例如，纯化的SA荚膜抗原可以用来进行ELISA测定。SA荚膜抗原特异性IgM可以通过任何适宜方法从收集的供体血浆中分离。通常， 这些方法包括先从血浆样品中纯化IgM，且然后使纯化的IgM产物富集与一种或多种SA荚 膜抗原特异性结合的那些IgM。可选择地，这些方法可以包括先从血浆样品中纯化与一种 或多种SA荚膜抗原特异性结合的Ig，且然后从第一步的产物中分离非Spa结合Ig(例如， IgM) ο从血浆或另一种样品中分离IgM的大量技术是已知的。例如，可通过优球蛋白 的沉淀(例如，通过对水或低离子强度缓冲液的透析)，然后用尺寸排阻或离子交换方法， 将IgM从血浆中分离。可选择地，可利用修改的Deutsch-Kistler-Nitschmann乙醇分部 分离工序，然后是辛酸沉淀和两个离子交换色谱步骤。参见Hurez等人Blood. 1997 ；90 4004-13。另外，可以使用采用固定的抗IgM Ab或固定的Clq的亲和色谱。用于IgM纯化的 其它技术包括 Arnold 等人，J. Biol. Chem. 280 :29080-29087, 2005 ；美国专利第 5，077，391 号；第5，112，952号；第5，308，753号；第5，612，033号和第6，136，312号中所描述的那些 技术。可在本发明中使用分离与一种或多种SA荚膜抗原特异性结合的Ig(例如IgM)的 任何适宜技术。例如，可以使用利用一种或多种纯化的SA荚膜抗原作为配体进行的亲和纯 化工序° 参见例如，Antibodies VoIume 1 production and Purification(抗体第一卷 制备禾口纯化)，G. Subramanian,编辑，Springer 2004) ；Protein Purification-Principles and Practice (蛋白纯化原理和实践)，R. K. Scopes, Springer，1993 ；以及 Handbook of Affinity Chromatography (亲和色谱手册)，Τ. Kline，编辑，Marcel Dekker，1993)。可以 使用抗原亲和柱色谱将与一种或多种SA荚膜抗原特异性结合的Ig与不与一种或多种SA 荚膜抗原特异性结合的Ig分离。可利用连接试剂如己二酸二酰胼(ADH)或N-琥珀酰亚 胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯(SPDP)，或Carbolink试剂盒(Pierce，产品号44900)使纯化 的SA荚膜抗原(例如，血清型5、血清型8或前述的混合物)固定于色谱基质(例如，琼脂 糖或琼脂糖凝胶珠子)上。在一个可选择的实施方式中，不是以供体血浆作为起始，而是可以筛选商 业上可获得的含有IgM的Ig制剂(IVIG)中的特异性结合一种或多种SA荚膜抗原 的IgM。含这种抗体的批次可以被用作可以从其中纯化这种SA荚膜特异性IgM的来 源。目前在商业市场上可获得的大量IVIG产品包括，例如，Flebogamma (Grifols)、 Gamunex (Talecris Bi other apeutics)、Octagam (Octapharma)、Gammagard .⑧ (Baxter Healthcare)、Carimune NF(CSL Behring)、Gammar⑨ P (CSL Behring)、Iveegam EN(Baxter Healthcare)、Panglobulin .⑧ NF(Baxter Healthcare)>PolygamS/D(Baxter Healthcare) > Sandoglobul in (CSL Behring)、禾口 Pentaglobin (Biotest AG)。具有较 高浓度IgM的那些是优选的(例如，Pentaglobin IVIG)。因为大多数商业IVIG生产操 作主要涉及纯化血浆的IgG级分，这种操作的含有IgM的IgG消除的废弃物产物可以被用作本文所描述的纯化方法的起始材料。本发明的纯化的Ab组合物可以包含除SA荚膜抗原特异性IgM Ab以外的血浆 组分。例如，该组合物可以包含IgG、IgA、IgE、清蛋白等。优选地，为保证高效价的SA荚 膜抗原特异性IgM可以最小的副作用施用给受治疗者，本发明的Ab组合物优选地包含至
0. 5%%,1%>2%,3%,4%,5%,6%,7%,8%,9%,10%,11%>12%,13%,14%,15%, 20%,25%,30%,35%,40%,45%,50%,60%,70%,80%,90%,95%,96%,97%,98%, 99%、99. 9%或更高重量百分比的SA荚膜抗原特异性IgM。除SA荚膜抗原特异性IgM以 外，本发明的抗体组合物还可以包含与除荚膜抗原外的一种或多种SA抗原特异性结合的 Ig(可能是Spa-结合或非-Spa结合Ig比如IgM)。这种其它抗原的例子包括Spa、血清型 336多糖抗原、凝固酶、聚集因子A、聚集因子B、纤连蛋白结合蛋白、血纤蛋白原结合蛋白、 胶原蛋白结合蛋白、弹性蛋白结合蛋白、MHC类似蛋白、多糖胞内黏附分子、α溶血素、β溶 血素、S溶血素、γ溶血素、Panton-Valentine杀白细胞素，剥脱性毒素Α、剥脱性毒素B、 V8蛋白酶、透明质酸裂合酶、脂肪酶、葡萄球菌激酶、LukDE杀白细胞素、肠毒素、中毒性休 克综合征毒素-1、多聚N-琥珀酰β-1 — 6葡糖胺、过氧化氢酶、β-内酰胺酶、磷壁酸、肽 聚糖、青霉素结合蛋白、趋化性抑制蛋白、补体抑制剂和Sbi。对SA荚膜抗原特异性的单克隆IgM Ab除多克隆Ab外，本发明的特征还包括与一种或多种SA荚膜抗原特异性结合的单 克隆IgM Ab。因为表达对SA荚膜抗原特异性的IgM的B淋巴细胞在人和其它动物比如牛 中天然存在，目前产生mAb的优选方法是首先从受治疗者中分离这种B淋巴细胞，然后将其 永生化以便其在培养中可以连续地复制。缺乏大量天然存在的表达对SA荚膜抗原具有特 异性的IgM的B淋巴细胞的受试者可以被一种或多种多糖SA荚膜抗原免疫，或可被表达一 种或多种多糖SA荚膜抗原的亚致死量的SA感染，以提高这种B淋巴细胞的数量。通过使人 抗体分泌细胞(例如，人血浆细胞)永生化制备人mAb。参见，例如美国专利第4，634，664 号。牛mAb可通过修改如美国专利第5，087，693号中所描述的那些方法的已知方法来制备。在一个示例性方法中，筛选一个或多个(例如，5、10、25、50、100、1000或更多)人 受治疗者(例如，以前未被施用SA疫苗的受治疗者)其血液中这种IgM的存在。那些表 达所需IgM Ab的受治疗者可以进而作为B淋巴细胞供体。在一个可能的方法中，外周血 取自具有表达对一种或多种SA荚膜抗原特异性的IgM的B淋巴细胞的人供体。然后将这 种B淋巴细胞从血液样品中分离，例如，通过细胞分选(例如，荧光激活细胞分选，“FACS” ； 或磁珠细胞分选)以挑选IgM+ B淋巴细胞(或IgM+ CD27+记忆B淋巴细胞)。然后可以 按照已知技术通过病毒转化(例如，利用EBV)或与其它永生化细胞比如人骨髓瘤细胞融 合而将这些细胞永生化。随后可以通过有限稀释法分离该群体中表达对SA荚膜抗原特 异性的IgM的B淋巴细胞(例如，选出对SA荚膜抗原特异性的IgM的阳性微量滴定板孔 内的细胞和进行传代培养，并且重复该过程直到分离出来所需的克隆系)。参见，例如， Goding，Monoclonal Antibodies principles and Practice (单克隆抗体原理和实践)， 第59-103页，Academic Press, 1986)。表达对SA荚膜抗原具有至少纳摩尔或皮摩尔结合 亲和力的IgM的那些克隆细胞系是优选的。这些克隆细胞系分泌的MAb可以利用如盐析、 尺寸排阻、离子交换分离和亲和色谱的传统免疫球蛋白纯化工艺从培养基、腹水或血清中 纯化。
因为相信在某些受治疗者中表达对一种或多种SA荚膜抗原特异性的IgM的B淋 巴细胞以相对较高的量存在，所以可以用与可检测的标记结合的SA荚膜抗原从普通B淋巴 细胞群体中鉴定和选出那些特定的B淋巴细胞。例如，可以利用第一种荧光团标记的抗IgM Ab和第二种荧光团标记的SA荚膜抗原、以及可选择地第三种荧光团标记的抗-CD27+ Ab使 用FACS，将表达SA荚膜抗原结合IgM的B淋巴细胞从外周血样品中分离。随后可以将按照 这种方法分离的B淋巴细胞永生化并如上所述进一步挑选。虽然永生化的B淋巴细胞可在体外培养中用于直接产生mAb，但在某些情况下可 能需要使用异源表达系统来产生mAb。参见，例如，美国专利申请第11/7M，899中所描述的 方法。例如，可以将编码对一种或多种SA荚膜抗原特异性的IgM mAb的基因克隆并导入到 表达载体(例如，基于质粒的表达载体)中以在异源宿主细胞(例如，CHO细胞、COS细胞、 骨髓瘤细胞和大肠杆菌细胞)中表达。因为Ig包含H2L2构型的重链(H)和轻链(L)，所以 编码每条链的基因可以被独立分离并在不同载体中表达。此外，可以将编码IgM J( “连接 (joining) ”)链的基因与重链和轻链基因共表达以模拟天然B淋巴细胞中的情形，并且主 要产生五聚体IgM。在另一方面，在某些情况下可以优选地不共表达J链，例如，需要主要 生产六聚体IgM(在激活补体时可能更有效)时。参见，Randall等人，J. Biol. Chem. 267 18002-18007，1992 ；Davis 等人，EMBO J. 8 :2519-2526,1998。嵌合mAb (例如，“人源化” mAb)虽然一般较为不优选，但也可以用于本发明中，所 述嵌合mAb是具有来源于不同的动物物种的不同部分的抗原结合分子(例如，小鼠免疫球 蛋白的可变区与人免疫球蛋白的恒定区融合)。这种嵌合抗体可以通过本领域中的已知方 法进行制备。例如，Morrison等人，Proc. Nat' 1. Acad. Sci. USA,81 :6851,1984 ；Neuberger 等人，Nature，312 :604，1984 ；Takeda 等人，Nature，314 :452，1984。相似地，可利用本领域 的已知方法对抗体进行人源化。例如，具有所需结合特异性的单克隆抗体可以是商业上人 源化的或如美国专利第5，693，762号；第5，530，101号；或第5，585，089号中所描述的。本文中所描述的mAb可以通过以下的已知方法进行亲和力成熟以提高或以其 他方式改变其结合特异性例如VH和VL结构域改组(Marks等人Bio/technology 10 779-783，1992)、高可变区(HVR)和/或构架残基的随机诱变(Barbas等人，Proc Nat. Acad. Sci. USA 91 :3809-3813,1994 ；Schier 等人，Gene 169 147-155，1995 ；Yelton 等 人，J. Immunol. 155 :1994-2004,1995 Jackson 等人，J. Immunol. 154(7) :3310-9,1995 ；禾口 Hawkins等人，J. MoI. Biol. 226 =889-896,1992)。Ab的氨基酸序列变体可通过向编码Ab的 核苷酸序列中引入合适的改变来制备。此外，可以改变编码mAb的核酸序列的修饰(例如， 不改变mAb的氨基酸序列)以提高某些表达系统中mAb的产生(例如，给定表达系统中的 内含子删除和/或密码子优化)。本文所描述的mAb还可以通过与另一蛋白(例如，另一 mAb)或非蛋白分子结合而被修饰。例如，可以将mAb与水溶性多聚物如聚乙二醇或碳纳米 管结合(参见，例如，Kam 等人，Proc. Natl. Acad. ki. USA 102 :11600-11605,2005) 参见， 美国专利申请第11/754，899号。优选地，为保证高效价的SA荚膜抗原特异性IgM可以最小的副作用施用给受治 疗者，本发明的 mAb 组合物至少为 0. 5%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、 11 %> 12% ,13% ,14% ,15%,20%,25%,30%,35%,40%,45%,50%,60%,70%,80%, 90%、95%、96%、97%、98%、99%、99. 9或更高重量百分比纯度的(除去任何赋形剂)。本发明的mAb组合物可能仅包含单一类型的mAb ( S卩，由单一克隆的B淋巴细胞系所产生的一 种)或可能包含两种或更多种(例如，2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多)不同类型的mAb (例 如，包含对5型荚膜抗原特异性的第一种mAb、对8型荚膜抗原特异性的第二种mAb、和/或 对336型抗原特异性的第三种mAb的组合物；或包含对5型荚膜抗原的第一个表位特异性 的第一种mAb、对5型荚膜抗原的第二个表位具有特异性的第二种mAb、和/或对5型荚膜抗 原的第三个表位具有特异性的第三种mAb的组合物，其中所述第一个表位、第二个表位和 第三个表位彼此互相不同)的混合物。除SA荚膜抗原特异性IgM mAb外，本发明的抗体组 合物还可以包含与除荚膜抗原外的一种或多种SA抗原特异性结合的其它mAb (可能为Spa 结合Ig或优选为非Spa结合Ig，比如IgM)。这种其它抗原的例子包括Spa、血清型336抗 原、凝固酶、聚集因子A、聚集因子B、纤连蛋白结合蛋白、血纤蛋白原结合蛋白、胶原蛋白结 合蛋白、弹性蛋白结合蛋白、MHC类似蛋白、多糖胞内黏附分子、α溶血素、β溶血素、δ溶 血素、Y溶血素、Panton-Valentine杀白细胞素、剥脱性毒素Α、剥脱性毒素B、V8蛋白酶、 透明质酸裂合酶、脂肪酶、葡萄球菌激酶、LukDE杀白细胞素、肠毒素、中毒性休克综合征毒 素-1、多聚-N-琥珀酰β-1— 6葡糖胺、过氧化氢酶、β-内酰胺酶、磷壁酸、肽聚糖、青霉 素结合蛋白、趋化性抑制蛋白、补体抑制剂和Sbi。药物和诊断组合物以及方法本发明的Ab组合物可以在药学上可接受的载体(例如，无菌盐水)中施用给 动物或人，所述药学上可接受的载体是以施用的模式和途径以及标准药学实践为基础 选择的。药学上可接受的载体以及药物制剂的列表可在本领域标准文本Remington’ s Pharmaceutical kience (雷明顿药物科学)中和USP/NF中查到。可以添加其它的物质到 组合物中，并且可采取其它步骤来稳定和/或保存组合物，和/或协助将组合物施用给受治 疗者。例如，可以将Ab组合物冻干(参见Draber等人，J. Immunol. Methods, 181 :37， 1995 ；和PCT/US90/01383)；溶解于包含钠离子和氯离子的溶液中；溶解于包含一种或多种 稳定剂如清蛋白、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、山梨糖醇、聚乙二醇和甘氨酸的溶液中；过滤(例 如，使用0. 45和/或0. 2微米过滤器)；与β -丙内酯相接触；和/或溶解于包含杀微生物剂 的溶液中(例如，去污剂、有机溶剂和去污剂和有机溶剂的混合物)。此外，本发明的SA荚膜 特异性IgM可以是单体、二聚体、五聚体、六聚体，可与抗生素(参见美国专利第5，545, 721 号)、聚乙二醇或可检测的标记如生物素、荧光团或放射性同位素结合。本发明的组合物可以以任意适宜的技术施用给动物或人。通常，这种施用将是胃 肠外的(例如，静脉内的、皮下的、肌内的或腹膜内的引入)。组合物还可以通过，例如外科 递送至内部或外部靶位置，或通过血管可到达的位置的导管的方式直接向靶位置施用。其 它递送方法，例如脂质体递送或从充满该组合物的装置中扩散，是本领域中已知的。组合物 可以以单次推注、多次注射或持续输注(例如静脉内注射或通过腹膜透析)施用。治疗有效量是能够在被治疗的动物或人中产生医学上所需结果的的量。如医药 领域熟知的，对于任何一个动物或人的剂量取决于多种因素，包括受治疗者的体积、体表面 积、年龄、施用的特定组合物、性别、施用的时间和途径、总体健康状况和同时施用的其它药 物。据认为抗体的静脉内施用的合适剂量将在约0. 01至100mg/kg体重的范围内。本发明的Ab组合物可以用来预防受治疗者发生SA感染(例如，抗生素抗性的SA感染，比如由甲氧西林抗性或万古霉素抗性菌株引起的)。具有发生SA感染的高风险的受 治疗者的例子包括那些容许住院的受治疗者、那些将要或已经经受侵入性医疗流程如外科 手术或导管插入的受治疗者以及那些受免疫抑制的受治疗者。虽然仅对单一类型的SA荚 膜(例如，5型或8型)特异性的Ab可以用于预防SA感染，但因为难以预计受治疗者可能 感染的确切SA血清型，因此对于预防而言优选地使用含有对感染给定物种的大多数普遍 的SA血清型具有特异性的Ab的Ab组合物。例如，对于人受治疗者，预防性Ab组合物可以 包含对至少血清型5和血清型8特异性的Ab (例如，含有对血清型5、血清型8和血清型336 以及任何其它临床相关的血清型特异性的Ab的Ab组合物)。本发明的Ab组合物还可以用 于治疗存在SA感染(例如，抗生素抗性的SA感染，比如由甲氧西林抗性或万古霉素抗性菌 株引起的SA感染)的受治疗者。虽然对多种类型的SA荚膜特异性的Ab可以用于治疗SA 感染，通常优选地先鉴定引起感染的特定SA的血清型，且然后将仅与那种血清型结合的仅 那些Ab施用给受治疗者。例如，如果患者仅被5型SA所感染，则仅需要施用对5型特异性 的Ab。本文所描述的SA特异性Ab还可用于检测SA感染的设备和方法中，其中使怀疑含 有SA的样品与对一种或多种SA荚膜抗原特异性的Ab相接触，并检测任何SA-Ab反应以诊 断SA的存在。IgM Ab的Spa结合的缺乏允许了特异性抗原结合和非特异性Spa结合之间 的辨别。因此，Ab可用于特异性地检测样品中存在的SA血清型。在某些实施方式中，Ab与 可检测的标记比如酶、金属颗粒、荧光团、染料、纳米颗粒和/或放射性同位素结合。在一些 情况中，可以使用对抗SA抗体特异性的二抗来检测抗-SA抗体，例如，在ELISA、RIA或免疫 沉淀测定中。其它实施方式应该理解尽管结合其详细描述而阐述了本发明，但前述说明意在阐释而非限制本 发明的范围，本发明的范围由所附权利要求书的范围限定。例如，除IgM外可使用非葡萄球 菌蛋白A(Spa)结合Ig(例如，在氨基酸位置435处含有精氨酸的人IgG3)；可配制基于SA 荚膜抗原的疫苗以优先激发占主导的IgM(相对于IgG)应答；本发明的Ab可能对表达除SA 外的Fc结合蛋白(例如，蛋白G)的荚膜细菌物种的荚膜抗原具有特异性；并且本文所描述 的组合物还可以与其它药剂比如传统抗生素和/或其它SA毒力因子的抑制剂(例如，过氧 化氢酶或其它SA抗氧化剂的抑制剂)结合使用。其它方面、优点和修改将包含在下面的权 利要求书的范围之内。
权利要求
1.一种组合物，所述组合物包含从由至少十个不同供体收集的血浆中纯化的多克隆的 抗体混合物和药学上可接受的载体，所述抗体混合物富集与至少一种金黄色葡萄球菌荚膜 抗原特异性结合的IgM。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所述IgM构成以重量计至少约5%的所述抗体混 合物。
3.如权利要求2所述的组合物，其中所述IgM构成以重量计至少约10%的所述抗体混 合物。
4.如权利要求2所述的组合物，其中所述IgM构成以重量计至少约25%的所述抗体混 合物。
5.如权利要求2所述的组合物，其中所述IgM构成以重量计至少约50%的所述抗体混 合物。
6.如权利要求1所述的组合物，其中所述至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原包括血清 型5荚膜抗原。
7.如权利要求1所述的组合物，其中所述至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原包括血清 型8荚膜抗原。
8.如权利要求1所述的组合物，其中所述至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原包括血清 型5荚膜抗原和血清型8荚膜抗原。
9.如权利要求1所述的组合物，其中所述抗体混合物还富集与除荚膜抗原之外的葡萄 球菌抗原特异性结合的IgM。
10.如权利要求9所述的组合物，其中除荚膜抗原之外的所述葡萄球菌抗原是选自由 以下组成的组中的一种蛋白A、血清型336多糖抗原、凝固酶、聚集因子A、聚集因子B、纤 连蛋白结合蛋白、血纤蛋白原结合蛋白、胶原蛋白结合蛋白、弹性蛋白结合蛋白、MHC类似蛋 白、多糖胞内黏附分子、α溶血素、β溶血素、δ溶血素、γ溶血素、Panton-Valentine杀 白细胞素、剥脱性毒素A、剥脱性毒素B、V8蛋白酶、透明质酸裂合酶、脂肪酶、葡萄球菌激 酶、LukDE杀白细胞素、肠毒素、中毒性休克综合征毒素-1、多聚-N-琥珀酰β -1 — 6葡糖 胺、过氧化氢酶、β -内酰胺酶、磷壁酸、肽聚糖、青霉素结合蛋白、趋化性抑制蛋白、补体抑 制剂和Sbi0
11.如权利要求1所述的组合物，其中所述抗体是人的。
12.如权利要求1所述的组合物，其中所述抗体是牛的。
13.如权利要求1所述的组合物，其中所述供体没有被施用包含诱导针对金黄色葡萄 球菌的免疫应答的物质的疫苗。
14.如权利要求1所述的组合物，其中所述供体的至少一个被施用了包含诱导针对金 黄色葡萄球菌的免疫应答的物质的疫苗。
15.如权利要求13或14所述的组合物，其中所述物质包含所述至少一种金黄色葡萄球 菌荚膜抗原。
16.如权利要求1所述的组合物，其中所述抗体混合物是冻干的。
17.如权利要求1所述的组合物，其中所述抗体混合物溶解于包含钠离子和氯离子的 溶液中。
18.如权利要求1所述的组合物，其中所述抗体混合物溶解于包含至少一种稳定剂的溶液中，所述稳定剂选自由清蛋白、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、山梨糖醇、聚乙二醇和甘氨酸所 组成的组。
19.如权利要求1所述的组合物，其中所述抗体混合物溶解于包含杀微生物剂的溶液中。
20.如权利要求19所述的组合物，其中所述杀微生物剂选自由去污剂、有机溶剂和去 污剂与有机溶剂的混合物所组成的组。
21.一种方法，所述方法包括以下步骤从收集的血浆中分离富集与至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原特异性结合的IgM的 多克隆的抗体混合物；和将分离的多克隆的抗体混合物溶解于药学上可接受的载体中。
22.如权利要求21所述的方法，所述方法进一步包括过滤所述分离的多克隆的抗体混 合物的步骤。
23.如权利要求21所述的方法，所述方法进一步包括使所述分离的多克隆的抗体混合 物与去污剂相接触的步骤。
24.如权利要求21所述的方法，所述方法进一步包括使所述分离的多克隆的抗体混合 物与有机溶剂相接触的步骤。
25.如权利要求21所述的方法，所述方法进一步包括使所述分离的多克隆的抗体混合 物与β-丙内酯相接触的步骤。
26.如权利要求21所述的方法，所述方法进一步包括将所述分离的多克隆的抗体混合 物进行透析的步骤。
27.一种方法，所述方法包括以下步骤(a)取得至少10升由至少十个供体收集的血浆；(b)将收集的血浆分成至少第一部分和第二部分，所述第二部分与所述第一部分相比 富集IgM ；(c)将所述第二部分分成至少第三部分和第四部分，所述第四部分与所述第三部分相 比富集与至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原特异性结合的IgM ；(d)收集所述第四部分；和(e)将包含于所述第四部分中的所述IgM溶解于药学上可接受的载体中。
28.如权利要求27所述的方法，其中所述至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原包括血清 型5荚膜抗原。
29.如权利要求27所述的方法，其中所述至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原包括血清 型8荚膜抗原。
30.如权利要求27所述的方法，其中所述至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原包括血清 型5荚膜抗原和血清型8荚膜抗原。
31.如权利要求27所述的方法，其中，与所述第三部分相比，所述第四部分富集与至少 一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原特异性结合的IgM和与除荚膜抗原之外的葡萄球菌抗原特 异性结合的IgM。
32.如权利要求31所述的方法，其中除荚膜抗原之外的所述葡萄球菌抗原是选自由以 下组成的组中的一种蛋白A、血清型336多糖抗原、凝固酶、聚集因子A、聚集因子B、纤连蛋白结合蛋白、血纤蛋白原结合蛋白、胶原蛋白结合蛋白、弹性蛋白结合蛋白、MHC类似蛋 白、多糖胞内黏附分子、α溶血素、β溶血素、δ溶血素、γ溶血素、Panton-Valentine杀白 细胞素、剥脱性毒素A、剥脱性毒素B、V8蛋白酶、透明质酸裂合酶、脂肪酶、葡萄球菌激酶、 LukDE杀白细胞素、肠毒素、中毒性休克综合征毒素-1、多聚N-琥珀酰β -1 — 6葡糖胺、过 氧化氢酶、β -内酰胺酶、磷壁酸、肽聚糖、青霉素结合蛋白、趋化性抑制蛋白、补体抑制剂和 Sbi0
33.如权利要求27所述的方法，其中将所述收集的血浆分成至少第一部分和第二部分 的步骤(b)包括以下步骤(bl)从所述收集的血浆中除去脂质以产生脂质清除的收集的血浆；(b2)通过对选自由水和低离子强度缓冲液组成的组中的液体对所述脂质清除的收集 的血浆进行透析沉淀包含于所述脂质清除的收集的血浆中的优球蛋白；和(b3)收集沉淀的优球蛋白，其中所述第二部分包含收集的优球蛋白。
34.如权利要求33所述的方法，其中步骤(b)进一步包括从所述收集的优球蛋白中纯 化IgM的步骤(b4)。
35.如权利要求27所述的方法，其中将所述收集的血浆分成至少第一部分和第二部分 的步骤(b)包括在0°C以下使所述收集的血浆与乙醇相接触的步骤。
36.如权利要求35所述的方法，其中所述第二部分包含Cohn级分III沉淀。
37.如权利要求35所述的方法，其中所述第二部分包含Kistler-Nitschmarm沉淀物B0
38.如权利要求27所述的方法，其中将所述第二部分分成至少第三部分和第四部分的 步骤(c)包括利用与所述至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原结合的色谱介质对所述第二 部分进行免疫亲和色谱的步骤。
39.如权利要求27所述的方法，其中所述供体是以具有阈浓度的与至少一种金黄色葡 萄球菌荚膜抗原特异性结合的血浆IgM为基础挑选的。
40.如权利要求39所述的方法，其中所述阈浓度比供体所属物种的一般群体中与至少 一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原特异性结合的血浆IgM的平均浓度高至少50%。
41.如权利要求39所述的方法，其中所述阈浓度为至少10微克每毫升血浆。
42.如权利要求39所述的方法，其中所述阈浓度为至少50微克每毫升血浆。
43.一种方法，所述方法包括以下步骤(a)将收集的血浆分成第一级分和第二级分，其中所述第一级分包括大于90%IgG的 多克隆的抗体混合物，和至少部分消除IgG的至少第二级分；和(b)从所述至少第二级分中分离Ig，其中分离的Ig富集与至少一种金黄色葡萄球菌荚 膜抗原特异性结合的IgM。
44.一种组合物，所述组合物包含与至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原特异性结合但 不与葡萄球菌蛋白A特异性结合的人的或人源化的IgM mAb,以及药学上可接受的载体。
45.如权利要求46所述的组合物，其中所述金黄色葡萄球菌荚膜抗原包括血清型5荚 膜抗原。
46.如权利要求46所述的组合物，其中所述金黄色葡萄球菌荚膜抗原包括血清型8荚 膜抗原。
47.一种混合物，所述混合物包含与至少一种金黄色葡萄球菌荚膜抗原特异性结合但 不与葡萄球菌蛋白A特异性结合的至少第一种和第二种人的或人源化的IgM mAb，其中所 述第一种mAb不同于所述第二种mAb。
48.如权利要求47所述的混合物，其中所述第一种mAb与金黄色葡萄球菌血清型5荚 膜抗原特异性结合并且所述第二种mAb与金黄色葡萄球菌血清型8荚膜抗原特异性结合。
49.如权利要求48所述的混合物，其中所述混合物还包含与除荚膜抗原之外的葡萄球 菌抗原特异性结合的第三种mAb。
50.如权利要求49所述的混合物，其中除荚膜抗原之外的所述葡萄球菌抗原是选自由 以下组成的组中的一种蛋白A、血清型336多糖抗原、凝固酶、聚集因子A、聚集因子B、纤 连蛋白结合蛋白、血纤蛋白原结合蛋白、胶原蛋白结合蛋白、弹性蛋白结合蛋白、MHC类似蛋 白、多糖胞内黏附分子、α溶血素、β溶血素、δ溶血素、γ溶血素、Panton-Valentine杀 白细胞素、剥脱性毒素A、剥脱性毒素B、V8蛋白酶、透明质酸裂合酶、脂肪酶、葡萄球菌激 酶、LukDE杀白细胞素、肠毒素、中毒性休克综合征毒素-1、多聚-N-琥珀酰β -1 — 6葡糖 胺、过氧化氢酶、β -内酰胺酶、磷壁酸、肽聚糖、青霉素结合蛋白、趋化性抑制蛋白、补体抑 制剂和Sbi0
全文摘要
一种治疗或预防金黄色葡萄球菌感染的新型的基于抗体的策略利用对一种或多种金黄色葡萄球菌荚膜抗原特异性的IgM抗体。这些抗体的例子包括(i)从收集的供体血浆中分离的且富集与金黄色葡萄球菌荚膜抗原特异性结合的那些IgM的多克隆IgM抗体组合物，或(ii)与金黄色葡萄球菌荚膜抗原特异性结合的一种或多种IgM单克隆抗体。
文档编号A61P37/00GK102089005SQ200980127163
公开日2011年6月8日 申请日期2009年5月12日 优先权日2008年5月12日
发明者斯坦利·A·吉姆 申请人:斯特罗克斯生物制药有限责任公司