专利名称：一种聚合物包覆维生素e脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及功能性保健食品领域，特别涉及一种聚合物包覆维生素E脂质体及其 制备方法。
背景技术：
维生素E是脂溶性天然抗氧化剂，维生素E可以降低活性氧水平以及活性氧诱发 的DNA损伤且在治疗癌症方面有重要作用，能对癌细胞生长的控氧信号发生干扰，它还能 使化学疗法仅仅作用于癌细胞，使正常细胞免受损坏。 采用脂质体包埋能够增强维生素E的稳定性，防止氧化降解，改善其水溶性，提高 生物利用率，在保健食品领域有着广阔的应用前景。而包覆脂质体作为一种新型的膜修饰 脂质体，优点在于增加了脂质体双层膜的稳定性，从而提高了脂质体的在体内外的稳定性； 延缓了脂质体中的功能成分释放；延长了脂质体在体内的循环时间。将包覆脂质体制备为 包覆型前体脂质体固体粉剂，不仅使得脂质体更加稳定，而且产品在包装、贮存和运输中更 为方便。 中国专利CN101502326A "—种维生素E纳米脂质体的制备方法"公开了一种维生 素E脂质体的制备方法，该专利采用乙醇注入法制备维生素E常规脂质体主要壁材为卵
磷脂，辅助壁材为胆固醇和吐温80，该方法制备的脂质体中维生素E :卵磷脂胆固醇
吐温80的质量比为4 20 : 25 : 4 : 18，加入无水乙醇使卵磷脂的浓度为O. l-O. 2g/ ml ;于55t:水浴至所加物料溶解，边搅拌边用注射器快速将其注入无水乙醇体积10-15倍 的水化介质pH7. 4、0. 01mol/L磷酸盐缓冲液中，搅拌水化30min，旋转蒸发除去乙醇，迅速 冷却，即得维生素E脂质体；之后采用超高压均质法将维生素E脂质体纳米化，均质压力 20000-25000PSI，均质1_3次，即得液态维生素E纳米脂质体。 上述背景技术所制备的非包覆型的脂质体放置一定时间后存在絮凝、粒径逐渐变 大、药物渗漏等稳定性较差的问题，而且产品在包装、贮存和运输中存在一定的困难。
发明内容
本发明的目的在于提供一种使维生素E氧化程度降低，减少渗漏率，延长维生素E 体内循环时间，并且便于包装、贮存和运输的包覆维生素E脂质体及其制备工艺，使维生素 E在体内生物利用率增加，使用更加方便。 本发明的技术方案是以维生素E为芯材，卵磷脂、胆固醇、复合乳化剂为壁材，将 芯材、壁材与抗氧化剂混合，先采用薄膜分散法制备维生素E脂质体，再加入聚合物包覆， 即得聚合物包覆维生素E脂质体混悬液，经喷雾干燥或冷冻干燥可得聚合物包覆维生素E 前体脂质体固体粉剂。临用前根据需要，加适量蒸馏水，经振荡、超声或搅拌水合后即能回 复成包覆维生素E脂质体混悬液。
所述脂质体的制备步骤为 (1)制备维生素E脂质体混悬液，即以维生素E为芯材，卵磷脂、胆固醇、复合乳化剂为壁材，将按质量百分比的芯材、壁材与抗氧化剂混合，加入有机溶剂溶解，可用旋转蒸发仪除去有机溶剂(薄膜分散法)，待有机溶剂挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min后停止，加入p朋.8的磷酸缓冲溶液(若后续采用冻干法制备前体脂质体，则还应在此处加入冻干保护剂)，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80% ，超声时间8min)，即得维生素E脂质体混悬液； (2)制备聚合物包覆维生素E脂质体混悬液，即用恒流泵将上述混悬液泵入溶有
聚合物P朋.8的磷酸缓冲溶液中，在25t:恒温水浴条件下磁力搅拌，待混悬液完全泵入磷
酸缓冲溶液后，继续搅拌30min，即得到聚合物包覆维生素E脂质体混悬液； (3)采用喷雾干燥或冷冻干燥制备聚合物包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，即
将聚合物包覆维生素E脂质体混悬液经喷雾干燥(进风温度为140-22(TC，出风温度为
70-100°C )或冷冻干燥(预冻时间为7-10h，预冻温度为-70°C ;冷冻干燥时间为34-38h，
冷冻干燥温度为-50°C )制备为聚合物包覆维生素E前体脂质体固体粉剂； (4)将喷干或冻干后制得的包覆维生素E前体脂质体固体粉剂根据需要，加适量
蒸馏水，经振荡、超声或搅拌水合后即能回复成包覆维生素E脂质体混悬液。 本发明所述的聚合物包覆维生素E脂质体固体粉剂的组份及其质量百分比为维
生素E 8-20 % ，磷脂20-85 % 、胆固醇10-25 % 、复合乳化剂0-3 % 、抗氧化剂0-4 % 、聚合
物包覆材料10-50%、冻干保护剂0-3% ;复水后维生素E在包覆脂质体混悬液中含量为
4-10% (W/V)，聚合物包覆材料的含量为5-25% (W/V)，包封率为82-94%。 本发明所述的抗氧化剂为TBHQ(叔丁基对苯二酚)，Vc棕榈酸酯，BHA( 丁基羟基
茴香醚)、BHT( 二丁基羟基甲苯)、PG(没食子酸丙酯)中的一种或几种。本发明所述的单一或复合乳化剂为吐温60、苄泽、卖泽、司盘80、司盘60、聚氧乙
烯蓖麻油、泊洛沙姆中的一种或几种。 本发明所述的适当的有机溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷、乙醚和甲醇中的一种。
本发明所述的聚合物包覆材料为聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙烯醇、环糊精、壳聚糖、羧甲基壳聚糖中的一种。 本发明所述的冻干保护剂为甘露醇、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、乳糖、海藻糖中的一种或几种。 本发明的有益效果是聚合物包覆维生素E脂质体除具有普通脂质体的优点外，还具有以下优点(l)降低维生素E在制备过程中的氧化程度，提高其生物效价；(2)包覆材料的加入提高了维生素E脂质体的稳定性，克服了普通脂质体絮凝、沉降和渗漏等不稳定性缺陷，延缓了维生素E在体内的释放，延长了作用时间；(3)所述包覆型前体脂质体为固体粉剂，便于包装、贮存和运输，使用更方便。
具体实施方式
实施例1 : 取维生素EO. 5g，蛋黄卵磷脂2. 5g，胆固醇lg，吐温60 0. lg，司盘80 0. 25g，TBHQ0. 05g，乙醚20ml，聚乙二醇4000 3g， p朋.8磷酸缓冲溶液200ml。 将上述组方中维生素E、蛋黄卵磷脂、胆固醇、吐温60、司盘80、 TBHQ用乙醚溶解，使用旋转蒸发仪除去乙醚(30-6(TC，真空度0. 2-0. 3MPa)，待乙醚挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min后停止，加入8的磷酸缓冲溶液100ml，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80%，超声时间8min)，即得维生素E脂质体混悬液。另取溶有聚乙二醇4000ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，将上述混悬液用恒流泵以2ml/min的流速泵入磷酸缓冲溶液中，25t:恒温水浴条件下对溶液磁力搅拌，待脂质体混悬液完全泵入磷酸缓冲溶液后继续搅拌30min，得到的聚乙二醇4000包覆维生素E脂质体混悬液经喷雾干燥(进风温度为220°C，出风温度为IO(TC )，即得流动性很好的聚乙二醇4000包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，包封率为89%。临用前根据需要，加适量蒸馏水，即得聚乙二醇4000包覆维生素E脂质体混悬液。
实施例2 : 取维生素E0.8g，大豆卵磷脂5g，胆固醇1.2g，吐温60 0. 18g，聚氧乙烯蓖麻油0. lg， Vc棕榈酸酯0. 08g，二氯甲烷20ml，环糊精4. 5g， p朋.8磷酸缓冲溶液200ml。
将上述组方中维生素E、大豆卵磷脂、胆固醇、吐温60、聚氧乙烯蓖麻油、V。棕榈酸酯用二氯甲烷溶解，使用旋转蒸发仪除去二氯甲烷(30-5(TC，真空度0. 2-0. 3MPa)，待二氯甲烷挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min后停止，加入ra6. 8磷酸缓冲溶液100ml，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80%，超声时间8min)得到混悬液。另取溶有环糊精ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，将上述混悬液用恒流泵以2ml/min的流速泵入磷酸缓冲溶液中，25。C恒温水浴条件下对溶液磁力搅拌，待脂质体混悬液完全泵入磷酸缓冲溶液后继续搅拌30min，得到的环糊精包覆维生素E脂质体混悬液经喷雾干燥(进风温度为200°C，出风温度为90°C )，即得流动性很好的环糊精包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，包封率为82%。临用前根据需要，加适量蒸馏水，即得环糊精包覆维生素E脂质体混悬液。
实施例3 : 取维生素EO. 75g，大豆卵磷脂4. 5g，胆固醇1. 2g，苄泽0. 12g，聚氧乙烯蓖麻油0. lg， TBHQ 0. 05g，二氯甲烷20ml，聚乙烯醇3. 5g， p朋.8磷酸缓冲溶液200ml。
将上述组方中维生素E、大豆卵磷脂、胆固醇、苄泽、聚氧乙烯蓖麻油、TBHQ用二氯甲烷溶解，使用旋转蒸发仪除去二氯甲烷(30-5(TC，真空度0. 2-0. 3MPa)，待二氯甲烷挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min后停止，加入ra6. 8磷酸缓冲溶液100ml，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80%，超声时间8min)得到混悬液。另取溶有聚乙烯醇ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，将上述混悬液用恒流泵以2ml/min的流速泵入磷酸缓冲溶液中，25t:恒温水浴条件下对溶液磁力搅拌，待脂质体混悬液完全泵入磷酸缓冲溶液后继续搅拌30min，得到的聚乙烯醇包覆维生素E脂质体混悬液经喷雾干燥(进风温度为140°C，出风温度为70°C )，即得流动性很好的聚乙烯醇包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，包封率为87%。临用前根据需要，加适量蒸馏水，即得聚乙烯醇包覆维生素E脂质体混悬液。
实施例4 : 取维生素EO. 6g，大豆卵磷脂4g，胆固醇lg，吐温60 0. 18g，卖泽0. lg，PGO. lg，甲醇20ml，蔗糖0. 14g，甘露醇0. 13g，羧甲基壳聚糖3. 8g， p朋.8磷酸缓冲溶液200ml。
将上述组方中维生素E、大豆卵磷脂、胆固醇、吐温60、卖泽、PG用乙醇溶解，使用旋转蒸发仪除去甲醇(60-70°C，真空度0. 2-0. 3MPa)，待甲醇挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min后停止，加入溶有蔗糖和甘露醇的ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80%，超声时间8min)得到混悬液。另取溶有羧甲基壳聚糖rae. 8的磷酸缓冲溶液100ml，将上述混悬液用恒流泵以2ml/min的流速泵入磷酸缓冲溶液中，25t:恒温水浴条件下对溶液磁力搅拌，待脂质体混悬液完全泵入磷酸缓冲溶液后继续搅拌30min，得到的羧甲基壳聚糖包覆维生素E脂质体混悬液经冷冻干燥(预冻时间为7h，预冻温度为-70°C ;冷冻干燥时间为34h，冷冻干燥温度为-5(TC )，即得疏松的羧甲基壳聚糖包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，包封率为90%。临用前根据需要，加适量蒸馏水，即得羧甲基壳聚糖包覆维生素E脂质体混悬液。
实施例5 : 取维生素EO. 65g，蛋黄卵磷脂4g，胆固醇1.35g，吐温60 0. lg，司盘60 0. 2g，BHA与BHT 0. 13g，三氯甲烷20ml，海藻糖0. 28g，壳聚糖3. 5g， p朋.8磷酸缓冲溶液200ml。
将上述组方中维生素E、蛋黄卵磷脂、胆固醇、吐温60、司盘60、 BHA与BHT用三氯甲烷溶解于，使用旋转蒸发仪除去三氯甲烷(25-4(TC，真空度0. 2-0. 3MPa)，待三氯甲烷挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min后停止，加入溶有海藻糖的PH6. 8磷酸缓冲溶液100ml，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80%，超声时间8min)得到混悬液。另取溶有壳聚糖ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，将上述混悬液用恒流泵以2ml/min的流速泵入磷酸缓冲溶液中，25。C恒温水浴条件下对溶液磁力搅拌，待脂质体混悬液完全泵入磷酸缓冲溶液后继续搅拌30min，得到的壳聚糖包覆维生素E脂质体混悬液经冷冻干燥(预冻时间为8h，预冻温度为-70°C ;冷冻干燥时间为38h，冷冻干燥温度为-5(TC )，即得疏松的壳聚糖包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，包封率为94X。临用前根据需要，加适量蒸馏水，即得壳聚糖包覆维生素E脂质体混悬液。
实施例6 : 取维生素EO. 48g，蛋黄卵磷脂3. 2g，胆固醇1. 3g，吐温60 0. lg，泊洛沙姆0. 14g，PGO. lg，乙醚20ml，乳糖0. 29g，聚乙二醇2000 3. 6g， p朋.8磷酸缓冲溶液200ml。
将上述组方中维生素E、蛋黄卵磷脂、胆固醇、吐温60、泊洛沙姆、PG用乙醚溶解，使用旋转蒸发仪除去乙醚(30-6(TC，真空度0. 2-0. 3MPa)，待乙醚挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min后停止，加入溶有乳糖ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80X，超声时间8min)得到混悬液。另取溶有聚乙二醇2000ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，将上述混悬液用恒流泵以2ml/min的流速泵入磷酸缓冲溶液中，25t:恒温水浴条件下对溶液磁力搅拌，待脂质体混悬液完全泵入磷酸缓冲溶液后继续搅拌30min，得到的聚乙二醇2000包覆维生素E脂质体混悬液经冷冻干燥(预冻时间为10h，预冻温度为-70°C ;冷冻干燥时间为38h，冷冻干燥温度为-50°C )，即得疏松的聚乙二醇2000包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，包封率为92% 。临用前根据需要，加适量蒸馏水，即得聚乙二醇2000包覆维生素E脂质体混悬液。
实施例7 : 取维生素EO. 55g，蛋黄卵磷脂3. 5g，胆固醇1.4g，吐温60 0. lg，司盘60 0. 12g，TBHQ 0.08g，三氯甲烷20ml，葡萄糖0. lg，山梨醇0. 15g，羧甲基壳聚糖3. 5g，pH6.8磷酸缓冲溶液200ml。 将上述组方中维生素E、蛋黄卵磷脂、胆固醇、吐温60 、司盘60 、 TBHQ用三氯甲烷溶
7解，使用旋转蒸发仪除去三氯甲烷(25-40°C ，真空度0. 2-0. 3MPa)，待三氯甲烷挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min后停止，加入溶有葡萄糖和山梨醇的ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80%，超声时间8min)得到混悬液。另取溶有羧甲基壳聚糖ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，将上述混悬液用恒流泵以2ml/min的流速泵入磷酸缓冲溶液中，25。C恒温水浴条件下对溶液磁力搅拌，待脂质体混悬液完全泵入磷酸缓冲溶液后继续搅拌30min，得到的羧甲基壳聚糖包覆维生素E脂质体混悬液经冷冻干燥(预冻时间为7h，预冻温度为_701:;冷冻干燥时间为36h，冷冻干燥温度为-50°C )，即得疏松的羧甲基壳聚糖包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，包封率为86% 。临用前根据需要，加适量蒸馏水，即得羧甲基壳聚糖包覆维生素E脂质体混悬液。 实施例8: 取维生素EO. 6g，大豆卵磷脂3g，胆固醇1. 4g，吐温60 0. 12g，卖泽0. 2g， Vc棕榈酸酯0. lg，甲醇20ml，海藻糖0. 22g，聚乙二醇60003. 5g， p朋.8磷酸缓冲溶液200ml。
将上述组方中维生素E、大豆卵磷脂、胆固醇、吐温60、卖泽、Vc棕榈酸酯用乙醇溶解，使用旋转蒸发仪除去甲醇(60-70°C ，真空度0. 2-0. 3MPa)，待甲醇挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min后停止，加入溶有海藻糖ra6. 8的磷酸缓冲溶液100ml，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80%，超声时间8min)得到混悬液。另取溶有聚乙二醇6000的磷酸缓冲溶液100ml，将上述混悬液用恒流泵以2ml/min的流速泵入磷酸缓冲溶液中，25t:恒温水浴条件下对溶液磁力搅拌，待脂质体混悬液完全泵入磷酸缓冲溶液后继续搅拌30min，得到的聚乙二醇6000包覆维生素E脂质体混悬液经冷冻干燥(预冻时间为9h，预冻温度为_701:;冷冻干燥时间为36h，冷冻干燥温度为-50°C )，即得疏松的聚乙二醇6000包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，包封率为94% 。临用前根据需要，加适量蒸馏水，即得聚乙二醇6000包覆维生素E脂质体混悬
权利要求
一种聚合物包覆维生素E脂质体，含有维生素E、卵磷脂、胆固醇、乳化剂吐温80组份，其特征是，所述脂质体的组份还有聚合物包覆材料、抗氧化剂、冻干保护剂、除吐温80以外的多种单一或复合乳化剂；各组份的质量百分比为维生素E 8-20％、磷脂20-85％、胆固醇10-25％、复合乳化剂0-3％、抗氧化剂0-4％、聚合物包覆材料10-50％、冻干保护剂0-3％。
2. 根据权利要求1所述的聚合物包覆维生素E脂质体，其特征是所述的聚合物包覆 材料为聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙烯醇、环糊精、壳聚糖、羧甲基壳聚糖中的一种。
3. 根据权利要求1所述的聚合物包覆维生素E脂质体，其特征是抗氧化剂为TBHQ(叔 丁基对苯二酚)、VC棕榈酸酯、BHA( 丁基羟基茴香醚)、BHT( 二丁基羟基甲苯)、PG(没食子 酸丙酯)中的一种或几种。
4. 根据权利要求1所述的聚合物包覆维生素E脂质体，其特征是所述多种单一或复 合乳化剂为吐温60、苄泽、卖泽、司盘80、司盘60、聚氧乙烯蓖麻油、泊洛沙姆中的一种或几 种。
5. 根据权利要求1所述的聚合物包覆维生素E脂质体，其特征是冻干保护剂为甘露 醇、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、乳糖、海藻糖中的一种或几种。
6. 根据权利要求1所述的聚合物包覆维生素E脂质体，其特征是复水后的脂质体维 生素E在包覆脂质体混悬液中的含量为4-10% (W/V)，聚合物包覆材料的含量为5-25% (W/V)。
7. —种聚合物包覆维生素E脂质体的制备方法，其特征是，所述制备方法包括以下步骤(1) 制备维生素E脂质体混悬液，即以维生素E为芯材，卵磷脂、胆固醇、复合乳化剂为 壁材，将按质量百分比的芯材、壁材与抗氧化剂混合，加入有机溶剂溶解，可用旋转蒸发仪 除去有机溶剂(薄膜分散法)，待有机溶剂挥发完后，停止旋转而保持真空继续抽吸30min 后停止，加入P朋.8的磷酸缓冲溶液(若后续采用冻干法制备前体脂质体，则还应在此处加 入冻干保护剂)，置于摇床上振摇40min后，在冰水浴条件下超声处理(超声功率80 % ，超 声时间8min)，即得维生素E脂质体混悬液；(2) 制备聚合物包覆维生素E脂质体混悬液，即用恒流泵将上述混悬液泵入溶有聚合 物p朋.8的磷酸缓冲溶液中，在25t:恒温水浴条件下磁力搅拌，待混悬液完全泵入磷酸缓 冲溶液后，继续搅拌30min，即得到聚合物包覆维生素E脂质体混悬液；(3) 采用喷雾干燥或冷冻干燥制备聚合物包覆维生素E前体脂质体固体粉剂，即 将聚合物包覆维生素E脂质体混悬液经喷雾干燥(进风温度为140-22(TC，出风温度为 70-100°C )或冷冻干燥(预冻时间为7-10h，预冻温度为-70°C ;冷冻干燥时间为34-38h， 冷冻干燥温度为-50°C )制备为聚合物包覆维生素E前体脂质体固体粉剂；(4) 将喷干或冻干后制得的包覆维生素E前体脂质体固体粉剂根据需要，加适量蒸馏 水，经振荡、超声或搅拌水合后即能回复成包覆维生素E脂质体混悬液。
8. 根据权利要求7所述的聚合物包覆维生素E脂质体的制备方法，其特征是有机溶 剂为三氯甲烷、二氯甲烷、乙醚、甲醇中的一种。
9. 根据权利要求7所述的聚合物包覆维生素E脂质体的制备方法，其特征是所述的聚合物包覆维生素E前体脂质体固体粉剂中维生素E的含量为8-20% (W/W)，聚合物包覆材料的含量为10-50% (W/W)。
全文摘要
一种聚合物包覆维生素E的脂质体及其制备方法，通过制备维生素E脂质体混悬液，在混悬液中加入聚合物包覆，即得聚合物包覆维生素E脂质体混悬液，经喷雾干燥或冷冻干燥即可制得聚合物包覆维生素E前体脂质体固态粉剂。临用前根据需要，加适量蒸馏水，即得包封率为82-94％的聚合物包覆维生素E脂质体混悬液。本发明的聚合物包覆维生素E脂质体可以明显降低维生素E的氧化程度，减少渗漏率，延缓维生素E在体内的释放，延长体内循环时间，且制备为包覆型前体脂质体固体粉剂，更利于包装、贮存和运输，使用更加方便。
文档编号A61K47/36GK101780041SQ20101013087
公开日2010年7月21日 申请日期2010年3月23日 优先权日2010年3月23日
发明者刘玉珍, 史苏华, 彭海龙, 熊华, 白春清, 赵丽萍, 邓波 申请人:南昌大学