专利名称：一种维生素c冻干粉的制备方法
技术领域：
本发明属于生物医药技术领域，涉及维生素冻干粉，具体涉及一种维生素C冻干粉的制备方法。
背景技术：
维生素C又名L-抗坏血酸，为人体必须的水溶性维生素之一，其参与氨基酸代谢、神经递质合成、胶原蛋白和组织细胞间质的合成，可降低毛细血管的通透性，加速血液的凝固，刺激凝血功能，促进铁在肠内吸收，促使血脂下降，增加对感染的抵抗力，参与解毒功能，且有抗组胺的作用及阻止致癌物质生成的作用。目前临床常用的维生素C多为注射液的形式，广泛用于防治坏血病、慢性铁中毒、特发性高铁血红蛋白血症、各种急慢性传染性疾病和紫癜等的辅助治疗，以及心源性休克的抢救等，疗效确切，且无明显不良反应。但是注射液容易受到光照和温度的影响，高温时易氧化变色，低温时易结晶需使用前进行加热处理，疗效不稳定，操作不方便。冻干粉是经由在无菌环境下将药液冷冻成固态、然后抽真空将水分由固体状态直接升华为水蒸气并从制品中排除的过程而得到的干燥制品，相比于注射液，其具有如下显著优点①干燥是在真空条件下进行，对于一些易氧化的物质具有很好的保护作用；②可使蛋白、微生物类成分快速进入休眠状态而不发生变性或丢失活性，对生物组织和细胞结构基本没有损伤，可有效保护热敏性成份的稳定性；③冻干制品在干燥后形态疏松、颜色基本不发生改变，加水后能够快速溶解并恢复原有水溶液的理化特性和生物活性；④制品经过冻干后水份含量极低，不仅稳定性提高，且受污染的机会大大减小；⑤储存和运输方便，保质期延长。市面上现有的维生素C冻干粉由于制备工艺的限制，普遍存在着稳定性差、刺激性强、溶解度差、澄明度不合格率高、疗效不稳定等缺点。CN 1830438A公开了一种维生素类药物注射用维生素C冻干粉针剂的制备方法，该法工艺过程主要是将维生素C与抗氧剂亚硫酸氢钠、金属络合剂依地酸二钠共同配制，经过超声处理，使用二氧化碳饱和的注射用水和避光充氮保护，并严格控制PH值和温度。
发明内容
本发明目的在于针对现有技术的不足，提供一种维生素C冻干粉的制备方法。为达到上述目的，本发明采用如下技术方案一种维生素C冻干粉的制备方法，包括如下步骤(I)取注射用水(WFI)，通入CO2至饱和，取维生素C原料药5-10倍质量的CO2饱和的注射用水备用。所述5-10 倍，例如可以是 5-7. 5 倍、6. 1-8. I 倍、9-10 倍、5 倍、5. 4 倍、5. 5 倍、5. 9倍、6 倍、6. 2 倍、6. 5 倍、6. 7 倍、7 倍、7. 3 倍、7. 6 倍、8 倍、8. 5 倍、8. 8 倍、9 倍、9. I 倍、9. 5倍、10倍；优选为7-9倍；最优选为8倍。(2 )将维生素C原料药溶解于60wt%-90wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入维生素C原料药O. 3-0. 5倍质量的NaHCO3(碳酸氢钠)，再加入维生素C原料药O. 0003-0. 0005倍质量的EDTA(乙二胺四乙酸)和维生素C原料药O. 01-0. 02倍质量的NaHSO3 (亚硫酸氢钠)，搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得PH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤。所述60wt%_90wt%,例如可以是 60wt%_73wt%、69. 4wt%-82. 7wt%、85wt%_90wt%、60wt%、62. 5wt%、65wt%、68. lwt%、70wt%、74. 6wt%、75wt%、77. 9wt%、80wt%、81. 2wt%、84wt%、86. 3wt%、90wt% ;优选为 75wt%-85wt% ;最优选为 80wt%。优选地，所述分次为2-5次，例如可以是2次、3次、4次、5次；进一步优选为2_4次；最优选为3次。所述O. 3-0. 5 倍，例如可以是 O. 3-0. 37 倍、O. 35-0. 44 倍、O. 42-0. 5 倍、O. 3 倍、O. 33 倍、O. 36 倍、O. 38 倍、O. 4 倍、O. 41 倍、O. 45 倍、O. 47 倍、O. 49 倍、O. 5 倍；优选为O. 35-0. 45倍；最优选为O. 4倍。所述NaHCO3 (碳酸氢钠)在本发明中作为pH调节剂。所述O. 0003-0. 0005 倍，例如可以是 O. 0003 倍、O. 00033 倍、O. 00035 倍、O. 00038倍、O. 0004 倍、O. 00041 倍、O. 00045 倍、O. 00047 倍、O. 0005 倍;优选为 O. 00035-0. 00045 倍；最优选为O. 0004倍。所述EDTA (乙二胺四乙酸)在本发明中作为络合剂。所述O. 01-0. 02 倍，例如可以是 O. 01,0. 011 倍、O. 012 倍、O. 013 倍、O. 014 倍、O. 015 倍、O. 016 倍、O. 017 倍、O. 018 倍、O. 019 倍、O. 02 倍；优选为 O. 015-0. 018 倍；最优选为O. 016倍。所述NaHSO3 (亚硫酸氢钠)在本发明中作为抗氧剂。(3)用O. 22 μ m的微孔除菌过滤器过滤，然后100°C流通蒸汽灭菌10_30min，无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内。所述10_30min,例如可以是 10-16. 9min、13. 5-18. 5min、17_20min、lOmin、llmin、12. 5min、15min、18. 7min、20min、20. 6min、22min、24. 5min、25min、26. lmin、28min、30min ；优选为10_20min ;最优选为15min。所述压半塞，既可以防止容器内物质的流失以及异物的进入，还可以保持空气的相对流通。(4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m。优选地，所述缓慢升温是指以O. 2-2 V /min的速率进行升温，例如可以是O. 2-0. 5 0C /min,O. 4-1. 6 °C /min、I. 1-2 °C /min,O. 2 °C /min,O. 35 °C /min,O. 5 °C /min、
0.62 °C /min、0. 8 °C /min、0. 97 °C /min、I °C /min、I. 25 °C /min、I. 4 °C /min、I. 5 °C /min、
1.7°C /min、I. 83°C /min、I. 9°C /min、2°C /min ;进一步优选为 O. 5-1. 5°C /min ;最优选为I°C /min。优选地，所述惠斯顿电桥用交流电供电，可避免直流电引起的电解作用。本步骤整个过程用仪表记录。(5)调节冻干机干燥箱内的温度至2_8°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保温，再降温至(m-20) °C (m-10) °C之间，保温。所述2-8 °C，例如可以 2-4°C、3. 7-6. 1°C、5. 5-8 °C、2 °C、2. 2 °C、2. 5 °C、3 °C、3. 4°C、3. 5°C>4°C>4. 1。。、4· 5°C>5°C>5. 3°C>5. 9°C>6°C>6. 5°C>7°C>7. 2V、7. 5°C>7. 7V、8V ;优选为4-6 °C ;最优选为5°C。所述(m_20)°C (m_10) °C ,例如可以(m_20) °C (m_17) °C、(m_19) °C (m-14) °C、(m-16) °C (m_10) °C> (m-20) °C、(m_19.5) °C、(m_18) °C、(m_17.6) V、(m-16.4) °C>(m-15) °C> (m-14. I) °C> (m-13) °C>(m-12) °C>(m-ll) °C>(m-10. 3) V、(m-10) V ;优选为(m-18) °C (m_12) V ;最优选为(m_15) °C。优选地，所述保温的时间为O. 5_3h，例如可以是O. 5-0. 9h、0. 75-2. IhU. 64_3h、O. 5h、0. 6h、0. 8h、lh、l. lh、l. 35h、l. 5h、l. 7h、l. 96h、2h、2. 07h、2. 2h、2. 4h、2. 5h、2. 68h、
2.8h、2. 95h、3h ;进一步优选为0. 8-1. 5h ;最优选位Ih0本步骤为预冻阶段，先在2_8°C的温度下保持一段时间可以兼顾冻干效率与产品质量；再降温至共晶点以下并保持一段时间，可以克服温度虽已达到共晶点但溶质仍不结晶的过冷现象的发生。从而保证了滤液冷冻后能够获得均匀一致的结构。(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在m_5°C、干燥箱内的真空度控制在O. 1-0. 3mbar之间，保持一段时间直至冻干制品无肉眼可见冰晶。所述真空度控制在O. 1-0. 3mbar之间，例如可以是O. 1-0. 17mbar、O. 12-0.24mbar、0. 19-0.3mbar、0. Imbar>O. 13mbar、0. 15mbar、0. 16mbar、0. 18mbar>0. 2mbar>0. 21mbar、0. 22mbar、0. 25mbar>0. 27mbar、0. 29mbar>0. 3mbar ;优选为0. 12-0. 22mbar ;最优选为 0. 15mbar。优选地，所述保持一段时间为保持10_20h，例如可以是10-13. 5h、12-17. 8h、16-20h、10h、10. 4h、llh、ll. 8h、12. 5h、13h、14h、14. 6h、15h、16. 2h、17h、18h、18. lh、19h、19. 9h、20h ;优选为12-18h ;最优选为15h。本步骤可称为升华阶段，能够将90%以上的水分除去。(7)控制干燥箱内的真空度在O. 15-0. 3mbar之间，将步骤(5)的冻干制品迅速升温至25-35°C，温度稳定后恢复高真空，保温3-10h后结束冻干。所述真空度在O. 15-0. 3mbar 之间，例如可以是 O. 15-0. 18mbar、0. 21-0. 25mbar>O. 17-0. 3mbar、0. 15mbar、0. 16mbar、0. 17mbar、0. 18mbar、0. 19mbar、0. 2mbar、0. 2lmbar>0. 22mbar、0. 23mbar、0. 24mbar、0.25mbar、0. 26mbar、0.27mbar、0. 28mbar、0. 29mbar>
0.3mbar ;优选为 0. 18-0. 28mbar ;最优选为 0. 25mbar。将干燥箱内的真空度控制在O. 15-0. 3mbar之间，可以改进干燥箱的传热效果，使干燥箱内冻干制品的温度较快地达到所需温度，缩短解吸干燥这一阶段的时间。优选地，采用校正漏孔法对干燥箱内的压强进行控制。所述迅速升温是指以10-30°C /min的速率进行升温，例如可以是10-16. 5°C /min、18. 4-21. 6°C /min,25. 1-30°C /min、10。。/min、10. 5°C /min、11。。/minU2°C /min、13. 8°C /min、14 °C /min、15 °C /min、16 °C /min、17. 4 °C /min、18 °C /min、19. 7 °C /min、20 °C /min、21 °C /min,22 °C /min,23 °C /min,24. 4°C /min,25°C /min,26. 7°C /min,28 °C /min,29 °C /min>30°C /min ;进一步优选为 15_25°C /min ;最优选为 20°C /min。所述25-35 V，例如可以是 25-29 V、27. 8-32 V、30-35 V ,25 V, 25. 5 °C、26 °C、26. I 0C>26. 7 0C>27 °C>28 °C>28. 4 °C>29 °C>29. 6 °C>30 °C>30. 7 °C>31 °C>32. 3 °C>33 °C>
33. I0C >33. 5°C、34°C、34· 8°C、35°C;优选为28-32°C ;最优选为30°C。此温度范围为甘露醇冻干制品可以达到的最闻允许温度。所述高真空是指真空度低于I. 333 X KT1-L 333 X 10_6Pa。所述保温3-10h,例如可以是 3-6h、4. 2-7. 8h、8. 5_10h、3h、3. 5h、4h、4. 2h、4. 9h、5h、5. 4h、5. 5h、5. 7h、6h、6. lh、6. 5h、6. 8h、7h、7. 3h、7. 5h、8h、8. lh、8. 6h、9h、9. 2h、9. 5h、9. 7h、10h ;优选为4-7h ;最优选为5h。优选地，所述结束冻干的时机按照如下方法进行确定关闭冻干机的干燥箱和冷凝器之间的阀门30-60S，观察干燥箱内的压力变化情况。如果干燥箱内的压力没有明显的升高，则说明干燥已经基本完成，可以结束冻干。如果干燥箱内的压力有明显升高，则说明还有水份逸出，要延长时间继续进行干燥，直到关闭干燥箱和冷凝器之间的阀门之后干燥箱内的压力无明显上升为止。(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。综上所述，本发明优化后的技术方案为一种维生素C冻干粉的制备方法，包括如下步骤(I)取注射用水(WFI)，通入CO2至饱和，取维生素C原料药5_10倍质量的CO2饱和的注射用水备用；(2 )将维生素C原料药溶解于60wt%-90wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入维生素C原料药O. 3-0. 5倍质量的NaHCO3(碳酸氢钠)，再加入维生素C原料药O. 0003-0. 0005倍质量的EDTA(乙二胺四乙酸)和维生素C原料药O. 01-0. 02倍质量的NaHSO3 (亚硫酸氢钠)，搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得PH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤；(3)用O. 22 μ m的微孔除菌过滤器过滤，然后100°C流通蒸汽灭菌10_30min，无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内；(4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后以O. 2-20C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m ；(5)调节冻干机干燥箱内的温度至2_8°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持2-8°C的温度O. 5-3h，再降温至(m-20) V (m_10) °C之间，保持
0.5-3h ；(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在m_5°C、干燥箱内的真空度控制在O. 1-0. 3mbar之间，保持10_20h直至冻干制品无肉眼可见冰晶；(7)控制干燥箱内的真空度在O. 15-0. 3mbar之间，将步骤(5)的冻干制品以10-30 V /min的速率进行迅速升温至25-35 °C，温度稳定后恢复高真空
1.333 X KT1-L 333 X 10’a，保温 3-10h 后结束冻干；(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。本发明进一步优化后的技术方案为一种维生素C冻干粉的制备方法，包括如下步骤
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(I)取注射用水(WFI )，通入CO2至饱和，取维生素C原料药7_9倍质量的CO2饱和的注射用水备用；(2)将维生素C原料药溶解于75wt%-85wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入维生素C原料药O. 35-0. 45倍质量的NaHCO3 (碳酸氢钠)，再加入维生素C原料药O. 00035-0. 00045倍质量的EDTA (乙二胺四乙酸)和维生素C原料药O. 015-0. 018倍质量的NaHSO3 (亚硫酸氢钠)，搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤；(3)用O. 22 μ m的微孔除菌过滤器过滤，然后100°C流通蒸汽灭菌10_20min，无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内；(4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到_40°C以下的低温，然后以O. 5-1. 5°C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m ；(5)调节冻干机干燥箱内的温度至4_6°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持4-6°C的温度O. 8-1. 5h，再降温至(m-18) V (m_12) °C之间，保持
0.8-1. 5h ；(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在m_5°C、干燥箱内的真空度控制在O. 12-0. 22mbar之间，保持12_18h直至冻干制品无肉眼可见冰晶；(7)控制干燥箱内的真空度在O. 18-0. 28mbar之间，将步骤(5)的冻干制品以15-25 V /min的速率进行迅速升温至28-32 °C，温度稳定后恢复高真空
1.333 X KT1-L 333 X 10’a，保温 4_7h 后结束冻干；(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。本发明最优化的技术方案为一种维生素C冻干粉的制备方法，包括如下步骤(I)取注射用水(WFI )，通入CO2至饱和，取维生素C原料药8倍质量的CO2饱和的注射用水备用；(2)将维生素C原料药溶解于80wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入维生素C原料药O. 4倍质量的NaHCO3(碳酸氢钠)，再加入维生素C原料药O. 0004倍质量的EDTA (乙二胺四乙酸)和维生素C原料药O. 016倍质量的NaHSO3 (亚硫酸氢钠)，搅拌均匀，调节PH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤；(3)用O. 22 μ m的微孔除菌过滤器过滤,然后100°C流通蒸汽灭菌15min,无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内；(4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后以1°C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m ；(5)调节冻干机干燥箱内的温度至5°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持5°C的温度lh，再降温至(m-15) °C，保持Ih;(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在m_5°C、干燥箱内的
1真空度控制在O. 15mbar之间，保持15h直至冻干制品无肉眼可见冰晶；(7)控制干燥箱内的真空度在O. 25mbar，将步骤(5)的冻干制品以20°C /min的速率进行迅速升温至30°C，温度稳定后恢复高真空I. 333X KT1-L 333X 10_6Pa，保温5h后结束冻干；(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。与现有技术相比，本发明提供的维生素C冻干粉的制备方法，在冻结的状态下进行干燥，水分升华后所需的维生素C成分剩留在冻结时的冰架中，形成类似海绵状的疏松多孔架构，因此制备出的冻干粉外观无缺损，表面平整，体积与冻结时的体积基本相等，颜色均匀一致，加水后能够快速溶解并恢复原有水溶液的理化特性和生物活性，溶解度好，澄明度好，同时经冻干后水份含量极低，稳定性好，不易受到污染，保质期显著延长，储存和运输方便。下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。但下述的实施例仅仅是本发明的简易例子，并不代表或限制本发明的权利保护范围，本发明的权利范围以权利要求书为准。
具体实施例方式为更好地说明本发明，便于理解本发明的技术方案，本发明的典型但非限制性的实施例如下实施例I :按照如下方法制备维生素C冻干粉(I)取新鲜注射用水，通入足量CO2至饱和，取CO2饱和的注射用水IOOOml备用；(2)将125g维生素C原料药溶解于800ml步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入49g NaHCO3,再加入O. 05g EDTA和2. OgNaHSO3,搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤；(3)用O. 22 μ m的微孔除菌过滤器过滤,然后100°C流通蒸汽灭菌15min,无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内；(4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后以1°C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m，测得共熔点m为-15°C ；(5)调节冻干机干燥箱内的温度至5°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持5°C的温度lh，再降温至_30°C，保持Ih ；(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在_20°C、干燥箱内的真空度控制在O. 15mbar之间，保持15h直至冻干制品无肉眼可见冰晶；(7)控制干燥箱内的真空度在O. 25mbar，将步骤(5)的冻干制品以20°C /min的速率进行迅速升温至30°C，温度稳定后恢复高真空I. 333X KT1-L 333X 10_6Pa，保温5h后结束冻干；(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。实施例2
按照如下方法制备维生素C冻干粉(I)取新鲜注射用水，通入足量CO2至饱和，取CO2饱和的注射用水1125ml备用；(2)将125g维生素C原料药溶解于844ml步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入56. 25g NaHCO3,再加入O. 05625g EDTA和2. 25g NaHSO3,搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为
含量合格，进入下一步骤；(3)用O. 22 μ m的微孔除菌过滤器过滤，然后100°C流通蒸汽灭菌20min，无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内；(4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后以O. 5°C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m，测得共熔点m为-17°C ；(5)调节冻干机干燥箱内的温度至4°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持4°C的温度I. 5h，再降温至_35°C之间，保持I. 5h ；(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在_22°C、干燥箱内的真空度控制在O. 22mbar之间，保持12h直至冻干制品无肉眼可见冰晶；(7)控制干燥箱内的真空度在O. 28mbar之间，将步骤(5)的冻干制品以15°C /min的速率进行迅速升温至28°C，温度稳定后恢复高真空I. 333 X KT1-L 333 X 10_6Pa，保温4h后结束冻干；(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。实施例3 按照如下方法制备维生素C冻干粉(I)取新鲜注射用水，通入足量CO2至饱和，取CO2饱和的注射用水875ml备用；(2)将125g维生素C原料药溶解于744ml步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入43. 75g NaHCO3,再加入O. 04375g EDTA和I. 875g NaHSO3,搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为
含量合格，进入下一步骤；(3)用O. 22 μ m的微孔除菌过滤器过滤,然后100°C流通蒸汽灭菌IOmin,无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内；(4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后以I. 5°C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m，测得共熔点m为-19°C ；(5)调节冻干机干燥箱内的温度至6°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持6°C的温度O. 8h，再降温至-31 °C之间，保持O. Sh ；(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在_24°C、干燥箱内的真空度控制在O. 12mbar之间，保持18h直至冻干制品无肉眼可见冰晶；(7)控制干燥箱内的真空度在O. 18mbar之间，将步骤(5)的冻干制品以25°C /min的速率进行迅速升温至32°C，温度稳定后恢复高真空I. 333 X KT1-L 333 X 10_6Pa，保温7h后结束冻干；(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。实施例4:按照如下方法制备维生素C冻干粉(I)取新鲜注射用水，通入足量CO2至饱和，取CO2饱和的注射用水1250ml备用；(2)将125g维生素C原料药溶解于750ml步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入62. 5g NaHCO3，再加入O. 0625g EDTA和2. 5g NaHSO3，搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤；(3)用O. 22 μ m的微孔除菌过滤器过滤,然后100°C流通蒸汽灭菌IOmin,无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内；(4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后以O. 2-20C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m，测得共熔点m为-18°C ；(5)调节冻干机干燥箱内的温度至2°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持2°C的温度3h，再降温至_28°C之间，保持3h ；(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在_23°C、干燥箱内的真空度控制在O. lmbar，保持20h直至冻干制品无肉眼可见冰晶；(7)控制干燥箱内的真空度在O. 15mbar之间，将步骤(5)的冻干制品以30°C /min的速率进行迅速升温至35°C，温度稳定后恢复高真空I. 333 X KT1-L 333 X 10_6Pa，保温3h后结束冻干；(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。实施例5:按照如下方法制备维生素C冻干粉(I)取新鲜注射用水，通入足量CO2至饱和，取CO2饱和的注射用水625ml备用；(2)将125g维生素C原料药溶解于562. 5ml步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入37. 5g NaHCO3,再加入O. 0375g EDTA和I. 25g NaHSO3,搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为
含量合格，进入下一步骤；(3)用O. 22 μ m的微孔除菌过滤器过滤，然后100°C流通蒸汽灭菌30min，无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内；(4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后以O. 2-20C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m，测得共熔点m为-16°C ；(5)调节冻干机干燥箱内的温度至8°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持8°C的温度O. 5h，再降温至_36°C之间，保持O. 5h ；(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在_21°C、干燥箱内的真空度控制在O. 3mbar之间，保持IOh直至冻干制品无肉眼可见冰晶；(7)控制干燥箱内的真空度在O. 3mbar之间，将步骤(5)的冻干制品以10°C /min的速率进行迅速升温至25°C，温度稳定后恢复高真空I. 333 X KT1-L 333 X 10_6Pa，保温IOh后结束冻干；(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。应该注意到并理解，在不脱离后附的权利要求所要求的本发明的精神和范围的情况下，能够对上述详细描述的本发明做出各种修改和改进。因此，要求保护的技术方案的范围不受所给出的任何特定示范教导的限制。申请人:声明，以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。
权利要求
1.一种维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤 (1)取注射用水，通入CO2至饱和，取维生素C原料药5-10倍质量的CO2饱和的注射用水备用； (2)将维生素C原料药溶解于60wt%-90wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入维生素C原料药O. 3-0. 5倍质量的NaHCO3,再加入维生素C原料药O.0003-0. 0005倍质量的EDTA和维生素C原料药O. 01-0. 02倍质量的NaHSO3，搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤； (3)用O.22 μ m的微孔除菌过滤器过滤，然后100°C流通蒸汽灭菌10_30min，无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内； (4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到_40°C以下的低温，然后缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m ； (5)调节冻干机干燥箱内的温度至2-8°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保温，再降温至(m-20) °C (m-10) °C之间，保温； (6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在m-5°C、干燥箱内的真空度控制在O. 1-0. 3mbar之间，保持一段时间直至冻干制品无肉眼可见冰晶； (7)控制干燥箱内的真空度在O.15-0. 3mbar之间，将步骤(5)的冻干制品迅速升温至25-35°C，温度稳定后恢复高真空，保温3-10h后结束冻干； (8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。
2.根据权利要求I所述的维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，所述步骤(I)中所述CO2饱和的注射用水的量为维生素C原料药质量的7-9倍；优选为8倍。
3.根据权利要求I或2所述的维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述维生素C原料药溶解于75wt%-85wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中；优选为溶解于80wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中； 优选地，所述分次为2-5次；最优选为3次； 优选地，所述NaHCO3的加入量为维生素C原料药质量的O. 35-0. 45倍；最优选为O. 4倍; 优选地，所述EDTA的加入量为维生素C原料药质量的O. 00035-0. 00045倍；最优选为O.0004 倍； 优选地，所述NaHSO3的加入量为维生素C原料药质量的O. 015-0. 018倍；最优选为O.016 倍。
4.根据权利要求1-3之一所述的维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中所述灭菌时间为10_20min;优选为15min。
5.根据权利要求1-4之一所述的维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中所述缓慢升温是指以O.2-2V /min的速率进行升温；优选为以O. 5-1. 5°C /min的速率进行升温；最优选为以1°C /min的速率进行升温； 优选地，所述惠斯顿电桥用交流电供电。
6.根据权利要求1-5之一所述的维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中所述干燥箱内的温度为4-6°C;优选为5°C ； 优选地，所述保温的时间为O. 5-3h ;优选为O. 8-1. 5h ;最优选为lh。
7.根据权利要求1-6之一所述的维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)中所述真空度控制在O.12-0. 22mbar之间；优选为O. 15mbar ； 优选地，所述保持一段时间为保持10-20h ;进一步优选为保持12-18h ;最优选为保持15h。
8.根据权利要求1-7之一所述的维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，所述步骤(7)中所述真空度在O.18-0. 28mbar之间；优选为O. 25mbar ； 优选地，所述迅速升温是指以10-30°C /min的速率进行升温；进一步优选为以15-250C /min的速率进行升温；最优选为以20°C /min的速率进行升温； 优选地，所述升温为升至28-32°C ;最优选为升温至30°C ； 优选地，所述高真空是指真空度低于I. 333X 10^-1. 333 X KT6Pa ； 优选地，所述保温的时间为4-7h ;最优选为5h ； 优选地，所述结束冻干的时机按照如下方法进行确定关闭冻干机的干燥箱和冷凝器之间的阀门30-60S，观察干燥箱内的压力变化情况。如果干燥箱内的压力没有明显的升高，则说明干燥已经基本完成，可以结束冻干。如果干燥箱内的压力有明显升高，则说明还有水份逸出，要延长时间继续进行干燥，直到关闭干燥箱和冷凝器之间的阀门之后干燥箱内的压力无明显上升为止。
9.根据权利要求1-8之一所述的维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤 (1)取注射用水，通入CO2至饱和，取维生素C原料药5-10倍质量的CO2饱和的注射用水备用； (2)将维生素C原料药溶解于60wt%-90wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入维生素C原料药O. 3-0. 5倍质量的NaHCO3,再加入维生素C原料药O.0003-0. 0005倍质量的EDTA和维生素C原料药O. 01-0. 02倍质量的NaHSO3，搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤； (3)用O.22 μ m的微孔除菌过滤器过滤，然后100°C流通蒸汽灭菌10_30min，无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内； (4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后以O. 2-20C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m ； (5)调节冻干机干燥箱内的温度至2-8°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持2-8°C的温度O. 5-3h，再降温至(m-20) V (m_10) °C之间，保持O. 5_3h ； (6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在m-5°C、干燥箱内的真空度控制在O. 1-0. 3mbar之间，保持10_20h直至冻干制品无肉眼可见冰晶； (7)控制干燥箱内的真空度在O.15-0. 3mbar之间，将步骤(5)的冻干制品以10_30°C /min的速率进行迅速升温至25-35°C，温度稳定后恢复高真空I. 333 X KT1-L 333 X IO^6Pa,保温3_10h后结束冻干；(8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存； 优选地，所述制备方法包括如下步骤 (1)取注射用水，通入CO2至饱和，取维生素C原料药7-9倍质量的CO2饱和的注射用水备用； (2) 将维 生素C原料药溶解于75wt%-85wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入维生素C原料药O. 35-0. 45倍质量的NaHCO3,再加入维生素C原料药O. 00035-0. 00045倍质量的EDTA和维生素C原料药O. 015-0. 018倍质量的NaHSO3,搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤； (3)用O.22 μ m的微孔除菌过滤器过滤，然后100°C流通蒸汽灭菌10_20min，无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内； (4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到-40°C以下的低温，然后以O. 5-1. 5°C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m ； (5)调节冻干机干燥箱内的温度至4-6°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持4-6°C的温度O. 8-1. 5h，再降温至(m-18) V (m_12) °C之间，保持O.8-1. 5h ； (6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在m-5°C、干燥箱内的真空度控制在O. 12-0. 22mbar之间，保持12_18h直至冻干制品无肉眼可见冰晶； (7)控制干燥箱内的真空度在O.18-0. 28mbar之间，将步骤(5)的冻干制品以15-25°C/min的速率进行迅速升温至28-32°C，温度稳定后恢复高真空I. 333 X KT1-L 333 X IO^6Pa,保温4-7h后结束冻干； (8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。
10.根据权利要求1-9之一所述的维生素C冻干粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤 (1)取注射用水，通入CO2至饱和，取维生素C原料药8倍质量的CO2饱和的注射用水备用; (2)将维生素C原料药溶解于80wt%的步骤(I)获得的CO2饱和的注射用水中搅拌溶解，分次缓缓加入维生素C原料药O. 4倍质量的NaHCO3,再加入维生素C原料药O. 0004倍质量的EDTA和维生素C原料药O. 016倍质量的NaHSO3,搅拌均匀，调节pH值至6. 0-6. 2，加入剩余的CO2饱和的注射用水，测得pH值为5. 85-5. 95，则为含量合格，进入下一步骤； (3)用O.22 μ m的微孔除菌过滤器过滤，然后100°C流通蒸汽灭菌15min，无菌条件下灌装到已灭菌容器中，压半塞将容器封口，准备转移至冻干机内； (4)测量共熔点从步骤(2)的滤液中取出一部分作为样品，将一对白金电极浸入其中，将样品冷却到_40°C以下的低温，然后以1°C /min的速率进行缓慢升温，在升温的过程中用惠斯顿电桥来测量其电阻，在电阻发生突然降低时的温度即为测得的共熔点m ； (5)调节冻干机干燥箱内的温度至5°C，将步骤(2)已灌装了滤液的灭菌容器转移至干燥箱内，保持5°C的温度lh，再降温至(m-15) °C，保持Ih ；(6)控制干燥箱内搁板的温度在10°C、冻干制品的温度维持在m-5°C、干燥箱内的真空度控制在O. 15mbar之间，保持15h直至冻干制品无肉眼可见冰晶； (7)控制干燥箱内的真空度在O.25mbar，将步骤(5)的冻干制品以20°C /min的速率进行迅速升温至30°C，温度稳定后恢复高真空I. 333 X KT1-L 333 X 10_6Pa，保温5h后结束冻干; (8)将结束冻干的制品在真空条件下密封保存。
全文摘要
本发明涉及一种维生素C冻干粉的制备方法，其在冻结的状态下进行干燥，水分升华后所需的维生素C成分剩留在冻结时的冰架中，形成类似海绵状的疏松多孔架构，因此制备出的冻干粉外观无缺损，表面平整，体积与冻结时的体积基本相等，颜色均匀一致，加水后能够快速溶解并恢复原有水溶液的理化特性和生物活性，溶解度好，澄明度好，稳定性好，不易受到污染，保质期长，储存和运输方便。
文档编号A61K31/375GK102920670SQ20121044563
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月9日 优先权日2012年11月9日
发明者程雪翔 申请人:湖北凤凰白云山药业有限公司