专利名称：一种氟碳化合物脂质体的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种脂质体的制备方法，特别是涉及一种氟碳化合物脂质体脂质体的制备方法。
背景技术：
含氟化合物是包含氟原子的分子。含氟化合物或氟碳化合物是和全氟碳化合物(“PFC”)相对比的，全氟碳化合物是化学上惰性的合成分子，主要由碳原子和氟原子组成。液态的PFC和氟碳化合物通常是澄清、无色、无味的，密度高，表面张力低，在体内不易发生分解。PFC携带气体的能力强，这里所指的气体包括氧气，二氧化碳和氮气。PFC溶液氧气的原理不同于血红蛋白。血红蛋白通过铁和氧之间的化学作用力进行结合，结合较强；而卩 〇 与气体都具有低的内聚能密度，两者的结合是通过较弱的范德华力进行的。因此，携带O2的PFC能够将O2迅速地释放到人体组织，并且能够将CO2携带走。采用氟碳化合物对呼吸衰竭的患者进行液体通气治疗，氧合指数、肺的顺应性能得到改善，值得临床进一步研究。由于氟碳化合物是疏水性的，不易与水混合，必须使用表面活性剂进行修饰来实现其在水溶液中的分散。采用磷脂类物质在水溶液中形成脂质体，脂质体内部包裹疏水性的氟碳化合物液滴，增加了氟碳化合物的稳定性。目前，脂质体包裹的全氟碳化合物得到了一定的研究，但仍不能提供一种快速简单的制备较小粒径脂质体的方法。制备脂质体的方法较多，包括薄膜分散法、注入法、逆向蒸发法、熔融法、冷冻干燥法等。氟碳化合物种类众多，其中包括多种低沸点、易挥发的氟碳化合物，因此选择低沸点的有机溶剂，采用注入法制备氟碳脂质体是一种非常有效的方法。通过对条件的控制，可以将脂质体制备成较小粒径(〈200 nm)，可以大大增加氟碳化合物液滴的比表面积，使气体交换的面积大大增加，提高气体交换的效率。同时采用生物相容性好的磷脂化合物，增加了材料的生物相容性，降低了毒性，拓宽了其应用。
发明内容
为了克服现有技术的缺点，本发明提供一种氟碳化合物脂质体的制备方法。一种氟碳化合物脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤
a.按重量份数计，将I 50份磷脂和0 50份胆固醇溶解于200份的有机溶剂中，超声混合均匀；
b.在溶有磷脂的有机溶剂中加入氟碳化合物10 50份，继续超声混合均匀；
c.将步骤b所得到的溶液慢慢滴加至100 500份的盐溶液中，搅拌溶液，搅拌速度为500 2500转/分钟，搅拌至有机溶剂挥发完全，时间为2小时，即得到氟碳化合物脂质体。所述的磷脂为大豆卵磷脂，蛋黄卵磷脂，氢化卵磷脂，氢化大豆磷脂，二棕榈酰磷脂酰胆碱中的一种或其组合。所述的有机溶剂为沸点较低的易挥发的液体，具体为石油醚，氯仿，二氯甲烷，乙醚，正己烷，乙酸乙酯，乙醇中的一种。
所述的盐溶液为0. 5 5%的氯化钠溶液，0. 01 0. 5%的磷酸盐缓冲溶液中的一种，其中磷酸盐缓冲溶液的pH为6 8。所述的氟碳化合物为二(F-烷基)乙烯，环状氟碳化合物，F-金刚胺(FA)，F-甲基金刚胺(FMA)，F-l，3-二甲基金刚胺(FDMA)，全氟代-2，2,4, 4-四甲基戊烷，F-二或F-三甲基二环[3，3，I]壬烷，C7-12全氟化的胺类，溴化全氟碳化合物中的一种或其组合。所述的二(F-烷基)乙烯为二(F-丁基)乙烯，二(F-己基)乙烯中的一种或其组合；所述环状氟碳化合物为氟苯，全氟萘烷中的一种或其组合；所述C7-12全氟化的胺类为F-三丙胺、F-4-甲基八氢喹嗪(FMOQ)，F-n-甲基-十氢异喹啉(FMIQ)、F_n-甲基十氢喹啉(FHQ)、F-n-环己基吡咯烷(FCHP)中的一种或其组合；所述溴化全氟碳化合物为全氟溴辛烷(C8F17Br)1-溴十五氟庚烷(C7F15Br)U-溴十三氟己烷(C6F13Br)中的一种或其组合。本发明的优点在于
本发明制备方法简单，制备周期短，操作性强，符合进一步生产和应用的需求。所制备 的这种氟碳化合物脂质体稳定性好，粒径小，方法简便，便于大规模生产。本发明制备的氟碳化合物脂质体有着良好的物理化学稳定性，适合长期保存。采用乙醚为溶剂，可在室温下操作，更加适合于低沸点的易挥发氟碳化合物。本发明制备的氟碳化合物脂质体可以在紧急供氧药物，急性供血，造影剂等方面有好的应用。
图1为本发明实施例1所得的氟碳化合物脂质体的投射电镜照片；
图2为本发明实施例1所得的氟碳化合物脂质体的动态光散射粒径分布图。
具体实施例方式一下通过具体的实施例对本发明的技术方案作进一步描述。以下的实施例是对本发明的进一步说明，而不限于本发明的范围。实施例1:
按重量份计，配方如下
磷酸盐缓冲溶液(0.01 M) 200份 大豆卵磷脂20份 FC-77 20 份 乙醚200份 制备工艺
①按重量份数计，将20份大豆卵磷脂溶解于200份的乙醚中，超声混合均匀；
②在磷脂的乙醚溶液中加入FC-77(全氟辛烷和全氟环辛醚的混合物)20份，继续超声混合均勻；
将步骤①所得到的溶液慢慢滴加至200份的磷酸盐缓冲溶液中，搅拌溶液(搅拌速度为1000转/分钟)，搅拌至乙醚挥发完全，时间约2. 5小时。即可以得到FC-77脂质体。制剂外观乳白色溶液；稀释10倍可得到淡淡的白色带蓝色乳光的透明溶液。
粒度检测方法动态光散射。包封率检测方法离子色谱。检测结果平均粒径89.45 nm，包封率80 %。实施例2:
按重量份计，配方如下
磷酸盐缓冲溶液(0.01 M) 200份
蛋黄卵磷脂19份
胆固醇I份 全氟溴辛烷10份
氯仿200份
制备工艺
①按重量份数计，将19份蛋黄卵磷脂和I份胆固醇溶解于200份的氯仿中，超声混合均匀；
②在磷脂的氯仿溶液中加入全氟溴辛烷25份，继续超声混合均匀；
③将步骤(I)所得到的溶液慢慢滴加至200份的磷酸盐缓冲溶液中，搅拌溶液(搅拌速度为2000转/分钟)，搅拌至氯仿挥发完全，时间约1. 5小时。即可以得到全氟溴辛烷脂质体。制剂外观乳白色溶液，稀释10倍可得到淡淡的白色带蓝色乳光的透明溶液 粒度检测方法动态光散射。包封率检测方法离子色谱。检测结果平均粒径103.2 nm，包封率84 %。实施例3:
按重量份计，配方如下
氯化钠溶液(0.9%) 200份 氢化大豆磷脂20份 胆固醇10份1-溴十三氟己烷25份 乙醚200份 制备工艺
①按重量份数计，将20份氢化大豆磷脂和10份胆固醇溶解于200份的乙醚中，超声混合均匀；
@在磷脂的乙醚溶液中加入1-溴十三氟己烷25份，继续超声混合均匀；
③将步骤①所得到的溶液慢慢滴加至200份的氯化钠溶液(0.9 %)中，搅拌溶液(搅拌速度为1500转/分钟)，搅拌至乙醚挥发完全，时间约2小时。即可以得到1-溴十三氟己烧脂质体。制剂外观乳白色溶液，稀稀释10倍可得到淡淡的白色带蓝色乳光的透明溶液 粒度检测方法动态光散射。包封率检测方法离子色谱。检测结果平均粒径96.45 nm，包封率81 %。实施例4
按重量份计，配方如下磷酸盐缓冲溶液(0.01 M) 250份
蛋黄卵磷脂10份
二棕榈酰磷脂酰胆碱4份
胆固醇I份
1_氯十七氟辛烧20份
氯仿200份·
制备工艺
①按重量份数计，将10份蛋黄卵磷脂，4份二棕榈酰磷脂酰胆碱，I份胆固醇溶解于200份的氯仿中，超声混合均匀；
②在磷脂的氯仿溶液中加入1-氯十七氟辛烷20份，继续超声混合均匀；
③将步骤①所得到的溶液慢慢滴加至250份的磷酸盐缓冲溶液中，搅拌溶液(搅拌速度为500转/分钟)，搅拌至氯仿挥发完全，时间约3小时。即可以得到1-溴十三氟己烷脂质体。制剂外观乳白色溶液，稀释10倍可得到淡淡的白色带蓝色乳光的透明溶液 粒度检测方法动态光散射。包封率检测方法离子色谱。检测结果平均粒径130.8 nm，包封率82 %。实施例5
按重量份计，配方如下
磷酸盐缓冲溶液(0.01 M) 400份 蛋黄卵磷脂30份 二棕榈酰磷脂酰胆碱5份 全氟萘烷25份 乙醚200份 制备工艺
①按重量份数计，将30份蛋黄卵磷脂和5份二棕榈酰磷脂酰胆碱溶解于200份的乙醚中，超声混合均匀；
②在磷脂的乙醚溶液中加入全氟萘烷25份，继续超声混合均匀；
③将步骤①所得到的溶液慢慢滴加至400份的磷酸盐缓冲溶液中，搅拌溶液(搅拌速度为2000转/分钟)，搅拌至乙醚挥发完全，时间约1. 5小时。即可以得到全氟萘烷脂质体。制剂外观乳白色溶液，稀释10倍可得到淡淡的白色带蓝色乳光的透明溶液 粒度检测方法动态光散射。包封率检测方法离子色谱。检测结果平均粒径109.1 nm，包封率78 %。
权利要求
1.一种氟碳化合物脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤 a.按重量份数计，将I 50份磷脂和0 50份胆固醇溶解于200份的有机溶剂中，超声混合均匀； b.在溶有磷脂的有机溶剂中加入氟碳化合物10 50份，继续超声混合均匀； c.将步骤b所得到的溶液慢慢滴加至100 500份的盐溶液中，搅拌溶液，搅拌速度为500 2500转/分钟，搅拌至有机溶剂挥发完全，时间为2小时，即得到氟碳化合物脂质体。
2.根据权利要求1所述的一种氟碳化合物脂质体的制备方法，其特征在于，所述的磷脂为大豆卵磷脂，蛋黄卵磷脂，氢化卵磷脂，氢化大豆磷脂，二棕榈酰磷脂酰胆碱中的一种或其组合。
3.根据权利要求1所述的一种氟碳化合物脂质体的制备方法，其特征在于，所述的有机溶剂为沸点较低的易挥发的液体，具体为石油醚，氯仿，二氯甲烷，乙醚，正己烷，乙酸乙酯，乙醇中的一种。
4.根据权利要求1所述的一种氟碳化合物脂质体的制备方法，其特征在于，所述的盐溶液为0. 5 5%的氯化钠溶液，0. 01 0. 5%的磷酸盐缓冲溶液中的一种，其中磷酸盐缓冲溶液的pH为6 8。
5.根据权利要求1所述的一种氟碳化合物脂质体的制备方法，其特征在于，所述的氟碳化合物为二(F-烷基)乙烯，环状氟碳化合物，F-金刚胺(FA)，F-甲基金刚胺(FMA)，F-l，3-二甲基金刚胺(FDMA)，全氟代-2，2,4, 4-四甲基戊烷，F-二或F-三甲基二环[3，3，I]壬烷，C7-12全氟化的胺类，溴化全氟碳化合物中的一种或其组合。
6.根据权利要求5所述的一种氟碳化合物脂质体的制备方法，其特征在于，所述的二(F-烷基)乙烯为二(F- 丁基)乙烯，二(F-己基)乙烯中的一种或其组合；所述环状氟碳化合物为氟苯，全氟萘烷中的一种或其组合；所述C7-12全氟化的胺类为F-三丙胺、F-4-甲基八氢喹嗪(FMOQ)，F-n-甲基-十氢异喹啉(FMIQ)、F_n-甲基十氢喹啉(FHQ)、F_n_环己基吡咯烷(FCHP)中的一种或其组合；所述溴化全氟碳化合物为全氟溴辛烷(C8F17Br)1-溴十五氟庚烷(C7F15Br )、1-溴十三氟己烷(C6F13Br )中的一种或其组合。
全文摘要
本发明涉及一种氟碳化合物脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤a.按重量份数计，将1～50份磷脂和0～50份胆固醇溶解于200份的有机溶剂中，超声混合均匀；b.在溶有磷脂的有机溶剂中加入氟碳化合物10～50份，继续超声混合均匀；c.将步骤b所得到的溶液慢慢滴加至100～500份的盐溶液中，搅拌溶液，搅拌速度为500～2500转/分钟，搅拌至有机溶剂挥发完全，时间为2小时，即得到氟碳化合物脂质体。本发明所制备的氟碳化合物脂质体稳定性好，粒径小，方法简便，便于大规模生产。制备的氟碳化合物脂质体可以在紧急供氧药物，急性供血，造影剂等方面有好的应用。
文档编号A61P7/06GK102988294SQ20121053610
公开日2013年3月27日 申请日期2012年12月13日 优先权日2012年12月13日
发明者刘璐, 朱君, 何丹农 申请人:上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司