专利名称：一种银杏内酯脂质体注射剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种脂质体注射剂及其制法，具体涉及一种银杏内酯脂质体注射剂及其制法，属于医药技术领域。
背景技术：
心脑血管疾病是当今世界上威胁人类最严重的疾病之一，其发病率和死亡率已超过肿瘤性疾病而跃居世界第一。随着人民生活水平的提高、人口老龄化的加速、生活节奏的加快、饮食习惯向高热、高脂化发展，诸多因素导致冠心病、高血压、高血脂等疾病成为威胁人体健康最严重的疾病，而且其发病率和死亡率还有逐年上升的趋势。银杏叶·提取物及其制剂现已成为广泛用于心脑协管疾病的治疗，在欧美草药销售中排行首位，其对心脑血管的疗效得到世界的公认，仅德国许瓦兹药厂和法国益普生药厂的银杏制剂每年的销售量就超过10亿美元。银杏内酯是银杏叶的主要活性成分之一。银杏内酯包括银杏内酯(Ginkgolides)A、B、C、M、J等和白果内酯(Bilobalid)。1932年，银杏内酯化合物被Furukawa首次从银杏苦味成分中分离出来；1960年,Fujise成功分离出几个结晶；而后1967年，由Marayama等用化学方法推导出其结构，并确定其结构为银杏内酯A、B、C、M。按IHB命名法，上述银杏内酯分别取名为BN52020，BN52021, BN52022, BN52023,BN52024。银杏内酯为血小板活化因子(PAF)受体拮抗剂，对心脑血管疾病具有独特的药理作用，广泛用于治疗和预防心脑血管疾病。银杏内酯属于萜类内酯类成分，极性小，水溶性差，将其做成传统的注射液过程中发现该注射液澄明度较差，放置一段时间后易析出晶体，稳定性不易达到注射剂的要求。目前银杏内酯注射剂的制备工艺，以葡钾胺为助溶剂，则银杏内酯不稳定，内酯环容易开环，导致活性减弱。目前上市的银杏内酯剂型主要为注射剂，普通工艺所制备的银杏内酯注射剂，物理和化学性质稳定性差，长期存放药品质量会下降而且还会生成一些杂质，带来毒副作用，给临床使用留下了隐患，由于制备技术等原因中药注射液的配伍研究远不如西药，而且容易导致过敏。银杏内酯在碱性条件下成盐，会导致部分开环，开环后内酯溶解性增加，然而闭环的结构形式才是主要活性形式，例如参见US5798342。法国Beaufour-1psen公司开发的银杏内酯B针剂，代号BN52021，就是部分开环形式的冻干粉针，临床疗效就没有达到预期效果[Brochet B, etal J Neurology, Neurosurgery and Psychiatry. 1995,58 360-362]。CN1594319A公开了一种银杏内酯提取工艺和银杏内酯注射液及其制备方法，该注射液是采用羟丙基-3 -环糊精增容制得的灭菌水溶液，再在药液中加入一定量的等渗调节剂和螯合剂，虽然采用的包合技术来增加溶解，然而由于包和剂用量比较少，包和率不高，稳定性不够好。CN1813825A和CN1830981A公开了一种供注射用的银杏内酯乳剂及其制备方法，其采用常规的乳化剂制备方法制备而成，包括银杏内酯，注射用油，乳化剂和等渗调节剂组成，然而乳剂的稳定性不够好，植物油的用量偏多，生物利用度低。CN1709239A公开了一种注射用银杏内酯冻干粉针及其制备方法。该冻干粉针由甘露醇乙二胺四乙酸二钠(钙)，偏重亚硫酸钠，氢氧化钠，枸橼酸制备而来，由于银杏内酯是不溶性的，冻干粉针剂的复溶不够好，药物的生物利用度不高。CN1686111A公开一种注射用银杏内酯针剂及其制备方法，该针剂也是通过加入一定的助溶剂和赋形剂制备的冻干粉针剂，也没有很好的解决药物的复溶问题，生物利用度低下。CN101084889A公开一种银杏内酯冻干粉针剂及其制备方法，该粉针剂主要由银杏内酯、金属碱或葡甲胺、聚维酮组成。虽然加入了碱性物质增加溶解度，然而该制剂的稳定性不好，容易产生杂质，生物利用度也不高。脂质体在体内具有良好的祀向性和生物相容性。B.C. Keller等于[J]. Trends inFood science and Technology, 2001,12:25-31.中综述了天然有效成分的脂质体研究概况，认为脂质体可以提高银杏叶提取物的生物利用度，协助药物通过血脑屏障。随着生物技术的不断进展，脂质体制备工艺逐步完善，脂质体作用机制进一步阐明，加之脂质体适合体内降解、无毒性和无免疫原性，特别是大量试验数据证明脂质体作为药物载体具有对活性药物成分的保护作用，可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用，并减少药物剂量等优点。国外已经有口服银杏叶提取物脂质体上市，用于保护老年人的心脑血管，例如Shinjiro Yamamoto 等[J. Biochemical Engineering Journal, 2002,12:125-301]将不同溶剂和温度提取的银杏叶成分用二肉豆蘧酰磷脂酰胆碱和聚山梨酯-20以超声法包裹制成混合脂质体，发现其具有较强抗黑素瘤的活性，而未包裹的提取物抗肿瘤活性很低。金叶，银杏叶提取物类脂质体的制备工艺研究，《吉林大学硕士学位论文》2009，取处方量的Tween80、Span80、胆固醇，加入二氯甲烷甲醇(I 3)的混合有机溶剂，使溶解，37°C旋转蒸发形成薄膜。将干燥的薄膜溶于60mL乙醚中，加入IOmL药物的溶液(用乙醇溶解药物)和PBS溶液中，超声lOmin，将超声后的溶液中再加入20mL PBS溶液，水合lOmin，置于30°C恒温水浴振荡器中振荡过夜，制成类脂质体混悬液，其中表面活性剂与胆固醇摩尔比值为1:1，HLB值为11，GbE与载体为15:100，水合温度为60°C。
刘婷，银杏内酯B柔性纳米脂质体的制备及体外透皮研究，《中国中药杂志》第34卷第17期和刘婷，银杏内酯B柔性脂质体的透皮给药研究，《西北大学硕士学位论文》2010年度，按薄膜分散法制备柔性脂质体，公开了 称取500mg大豆卵磷脂，IOOmg胆固醇，50mgGB，20mgVitE,加入IOOmL无水乙醇使之溶解，转运至500mL圆底烧瓶中，将装有上述溶液的圆底烧瓶与旋转减压蒸发仪连接，在圆底烧瓶上形成均匀的薄膜。同时称取IOOmg胆酸钠，加入介质溶剂使之溶解，将其溶液滴加至圆底烧瓶中洗脱膜材，并继续水化lh。将得到的脂质体混悬液以水浴式超声仪超声lOmin，再以0. 22 y m的微孔滤膜过滤，即得到GB柔性纳米脂质体。制备过程中不加入胆酸钠，即得普通GB纳米脂质体。制备的GB柔性脂质体外观呈圆球形状，平均粒径在200nm左右，粒径分布良好；测得平均包封率为75. 91%。如何开发一种既能保持银杏内酯结构的完整性，又不使用有机溶媒作为其溶剂，制成的注射剂又稳定，已成为当务之急。由于银杏内酯注射剂的不足，目前对于银杏内酯脂质体注射剂存在需求。口服脂质体与银杏内酯脂质体注射剂所要解决的技术问题及其标准是不可比拟的，本发明旨在克服上述注射剂的银杏内酯在水中溶解度小和在体内过氧化的问题以及内酯结构易水解开环而失效的问题，提供一种银杏内酯脂质体注射剂，其银杏内酯既不开环，毒性反应及刺激性小，药效时间长。
发明内容
脂质体的稳定性是长期以来限制脂质体广泛应用的重要问题，脂质体普遍存在容易聚集、融合，导致包封药物泄漏，因此在工业上制备符合稳定性要求的药物脂质体实非易事，制药领域具有一般经验的技术人员清楚地知道在制备药物脂质体方面面临各种技术困难，所有这些绝非现有的理论可以预期解决的，需要克服许多技术难题。因此获得稳定性优良的银杏内酯脂质体需要付出创造性实践。一般而言，对于大多数的脂质体药物制剂而言，被包裹的药物的药学性质是由脂类组成和浓度所控制的。本发明人经过锐意研究意外发现，通过选用特定重量配比的银杏内酯、胆固醇琥珀酸酯、大豆磷脂酰肌醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、海藻糖和泊洛沙姆188，可以形成品质优异的银杏内酯脂质体注射剂，从而完成本发明。本发明的目的是提供一种银杏内酯脂质体注射剂，其由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成
权利要求
1.一种银杏内酯脂质体注射剂，其由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成
2.根据权利要求1所述的银杏内酯脂质体注射剂，其由包括以下重量配比的药物和赋形剂成分制成
3.根据权利要求1或2所述的银杏内酯脂质体注射剂，其特征在于所述二硬脂酰磷脂酰乙醇胺的重量与大豆磷脂酰肌醇和胆固醇琥珀酸酯的重量和之间的比为2:1-6:1，优选为 4:1。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的银杏内酯脂质体注射剂，其中银杏内酯的规格为 IOmg0
5.一种制备权利要求1-4任一项所述的银杏内酯脂质体注射剂的方法，其特征在于包括如下步骤(1)在氮气保护下，将胆固醇琥珀酸酯、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、大豆磷脂酰肌醇、泊洛沙姆188和银杏内酯溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；将上述溶液置于茄形瓶中，45°C水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；(2)在氮气保护下，向瓶中加入缓冲盐溶液，搅拌，使磷脂膜洗脱并充分溶胀水合，水化完全后在600bar到800bar做梯度均质4 6遍优选5遍,O. 22 μ m微孔滤膜过滤,制得银杏内酯脂质体；(3)无菌条件下，向溶液状态的脂质体中，不断搅拌下加入海藻糖，400W-600W超声处理两次，每次15 30分钟，加注射用水定容，然后经O. 22 μ m微孔滤膜过滤，灌装，即得银杏内酯脂质体注射剂。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述的缓冲盐溶液是选自磷酸盐缓冲溶液、枸橼酸盐缓冲溶液、碳酸盐缓冲溶液、硼酸盐缓冲溶液中的一种，所述的缓冲盐溶液优选为pH为6. 8的磷酸盐缓冲溶液。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于步骤(I)中所述的溶剂选自乙醇、甲醇、异丙醇、叔丁醇、正丁醇、苯甲醇、二氯甲烷、氯仿、三氯甲烷中的一种或几种，优选为体积比为1:1的乙醇和叔丁醇的混合有机溶剂。
8.根据权利要求1-4任一项所述的银杏内酯脂质体注射剂在制备心脑血管药物中的用途。
9.根据权利要求1-4任一所述的银杏内酯，其为银杏总内酯混合物，即包括银杏内酯A、B、C、M、和 J 等。
全文摘要
本发明公开了一种银杏内酯脂质体注射剂及其制法，该脂质体注射剂银杏内酯、胆固醇琥珀酸酯、大豆磷脂酰肌醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、海藻糖和泊洛沙姆188制成。本发明的脂质体注射剂具有良好的制剂稳定性，良好的包封率和较低的渗漏率；本发明提供了一种粒径小而均匀银杏内酯脂质体注射剂，其银杏内酯不会开环，降低了毒性反应及刺激性小，延长了药效时间。
文档编号A61K36/16GK103040753SQ20121055827
公开日2013年4月17日 申请日期2012年12月20日 优先权日2012年12月20日
发明者王平 申请人:海南百思特医药科技有限公司