苯并吡喃化合物的制备方法和抗肺纤维化的用途

苯并吡喃化合物的制备方法和抗肺纤维化的用途
【专利摘要】本发明公开了一种苯并吡喃化合物的制备方法和抗肺纤维化的用途。苯并吡喃化合物结构式如下：其中，R1选自氢、C1～C4烷基、各种氨基酸去掉氨基部分后余下的基团中的一种，R2选自氢、C1～C4烷基、各种氨基酸去掉氨基部分后余下的基团中的一种，R3选自氢、C1～C4烷基中的一种，n为1～4中任一整数。该苯并吡喃化合物是由厦门链霉菌(Streptomyces?xiamenensis)CGMCC?No.5675的发酵液经提取，分离，纯化而得。本发明制得的厦门霉素衍生物具有更高的抑制正常人肺成纤维细胞的增殖和活力的性能，可用于制备抗肺纤维化药物。
【专利说明】苯并吡喃化合物的制备方法和抗肺纤维化的用途
【技术领域】
[0001]本发明属于天然药物化学领域，具体涉及一种苯并吡喃化合物的制备方法和抗肺纤维化的用途。
【背景技术】[0002]目前,关于苯并吡喃benzopyran类化合物，即厦门霉素，已有一些文献报道，如日文专利[Kawamura, N.;Tsuji,E.；ffatanabe, Y.；Tsuchihashi, K.；Takako, T.Benzopyranderivatives, their manufacture with Streptomyces species， and their use fortreatment of asthma and rheumatoid arthritis.Daiichi Seiyaku C0.，Ltd.;MercianCorp.:Kyoto, Japan, 7March2000.]和文献[Xu，M.J.;Liu，X.J.;Zhao，Y.L.;Liu，D.;Xu，Z.H.;Lang，X.M.;Ao，P.;Lin，W.H.;Yang，S.L.;Zhang，Z.G.；Xu, J., Identificationand characterization of an anti—fibrotic benzopyran compound isolated frommangrove-derived Streptomyces xiamenensis.Mar Drugs2012，10，(3)，639-54 ;Liu，X.J.;Xu，M.J.;Fan，S.T.；wu, Z.;Li，J.;Yang，X.M.;Wang，Y.H.;Xu，J.;Zhang，Z.G.，Xiamenmycin attenuates hypertrophic scars by suppressing local inflammationand the effects of mechanical stress.J Invest Dermatol2013，133， (5)，1351-60.]中，曾报道了厦门霉素的提取分离和结构鉴定，并报道了其具有抗炎、抗纤维化活性和抗增生性瘢痕活性的报道。
[0003]基因工程菌株CGMCC N0.5675为携带利福霉素和链霉素抗性的Sti^ptomycesxiamenensis,未见从该菌株中分离得到苯并批喃类化合物的文献报道。由于厦门霉素C(本发明的苯并吡喃化合物的俗称)相比厦门霉素本身，失去了氨基酸侧链，为新颖结构化合物。首次对该化合物的抗肺纤维化活性进行测定，发现优于已知化合物厦门霉素。

【发明内容】

[0004]本发明的目的在于提供一种抑制正常人肺成纤维细胞的增殖能力更强、抗肺纤维化活性更高的苯并吡喃化合物的制备方法和抗肺纤维化的用途。本发明首次发现基因工程菌株-厦门链霉菌(Streptomyces xiamenensis)CGMCC N0.5675的提取物中能够产生该苯并吡喃化合物。
[0005]所述厦门链霉菌(Streptomycesxiamenensis)已于 2011 年 12 月 29 日递交CGMCC中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所，菌种保藏编号为CGMCC N0.5675。
[0006]本发明目的是通过以下技术方案来实现的:
[0007]第一方面，本发明涉及一种苯并吡喃化合物，其结构式如下式(I)所示:
【权利要求】
1.一种苯并吡喃化合物，其结构式如下式(I )所示:

2.如权利要求1所述的苯并吡喃化合物，其特征在于，Rl选自氢或者甲基，R2选自氢或者甲基，R3选自氢或者甲基，η = I或2。
3.如权利要求2所述的苯并吡喃化合物，其特征在于，所述苯并吡喃化合物的结构式如下式(II )所示:
4.一种如权利要求1、2或3所述的苯并吡喃化合物的制备方法，其特征在于，厦门链霉菌(Streptomyces xiamenensis)CGMCC N0.5675的发酵液经提取,分离，纯化,制得所述苯并吡喃化合物。
5.如权利要求4所述的苯并吡喃化合物的制备方法，其特征在于，所述方法具体包括如下步骤: A、所述厦门链霉菌(Streptomycesxiamenensis)CGMCC N0.5675进行液体发酵培养，发酵液经提取，浓缩，得总提物； B、以氯仿-甲醇为洗脱剂，所述总提物经硅胶柱层析梯度洗脱；所述梯度洗脱采用的氯仿与甲醇的体积比依次为 100: 1、70: 1、60: 1、50: 1、30: 1、15: UlO: 1、5: 1、2: 1、1:1 ;流速为15秒/滴，每个洗脱流份分别接收200毫升； C、以甲醇为洗脱剂，将所述步骤B中氯仿与甲醇的体积比为15: I时洗脱得到的组分凝胶柱层析分离，流速为70~90秒/滴，纯化，即得所述苯并吡喃化合物。
6.如权利要求5所述的苯并吡喃化合物的制备方法，其特征在于，步骤C还包括:将所述氯仿与甲醇的体积比为15: I的洗脱组分的相邻组分进行高效液相色谱分析，以所述苯并吡喃化合物在206nm，260nm的紫外吸收为准，合并具有相同吸收的组分；合并后的组分继续纯化，即得所述苯并吡喃化合物。
7.如权利要求5或6所述的苯并吡喃化合物的制备方法，其特征在于，步骤A中，所述提取具体为:发酵液离心后上清液用乙酸乙酯萃取，残渣用等体积的混合溶剂提取，合并所述上清液的萃取液和残渣的提取液，即可；所述混合溶剂是体积比为80: 15: 5的乙酸乙酯、甲醇、甲酸的混合物。
8.如权利要求5或6所述的苯并吡喃化合物的制备方法，其特征在于，步骤C中，所述纯化具体为:将洗脱下来的组分收集，用高效液相进行纯化，以乙腈/水溶液为流动相，洗脱梯度为乙腈与水的体积比在35分钟内由45: 55变成55: 45。
9.一种如权利要求1、2或3所述的苯并吡喃化合物在制备抗肺纤维化药物中的用途。
10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述抗肺纤维化药物用于治疗急性呼吸窘迫综合征、急性间质性肺炎或特发性肺纤维化慢性型的急性恶化症。
11.一种抗肺纤维化药物组合物，其中含有如权利要求1、2或3所述的苯并吡喃化合物，或者其药学上可接受的酸 或碱的盐，或者溶剂化合物作为有效成分。
【文档编号】A61K31/353GK103508993SQ201310419778
【公开日】2014年1月15日 申请日期:2013年9月13日 优先权日:2013年9月13日
【发明者】徐岷涓, 徐俊, 张志刚, 王亚辉 申请人:上海交通大学