一种无载体微纳米白藜芦醇药物及其制备和应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种无载体微纳米白藜芦醇药物及其制备和应用，其为下述制备方法所得产物，包括如下步骤：(1)将白藜芦醇粉末置于坩锅中，在气体保护下于管式炉中进行煅烧；(2)煅烧结束后，管式炉温度降至常温，即得无载体微纳米白藜芦醇药物。本发明具有以下优点：1）不含载体和有机溶剂，药物含量高达100%；2）改善其水溶性低，生物利用度差的缺陷；产品形貌为针状或带状，宽度为0.2～0.5μm；产品在水中的溶解度为30～50μmol/L；3）产品对人宫颈癌细胞HeLa的IC50值为0.1～0.2μmol/mL，对人肝癌细胞HepG2的IC50值为0.2～0.3μmol/mL。
【专利说明】一种无载体微纳米白藜芦醇药物及其制备和应用
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及医药【技术领域】，具体涉及一种无载体微纳米白藜芦醇药物及其制备和应用。
【背景技术】
[0002]白藜芦醇化学名为3，4’，5-三羟基二苯乙烯，是植物在遇到不利条件下自然产生的抗毒素，在葡萄、虎杖和花生等72种植物中存在。白藜芦醇具有多种药理活性，如调节脂蛋白代谢，抑制低密度脂蛋白氧化，抑制血小板聚集和减少前列腺素的产生等。白藜芦醇最引人注目的药物活性是其较强的抗肿瘤作用，对多种肿瘤具有很高的抑制活性，目前成为最有潜力的天然抗肿瘤药物，近年来人们还发现该物质对糖尿病具有潜在的治疗作用。因此白藜芦醇在医药、保健品领域具有广泛的应用前景，市场价值极高。尽管白藜芦醇的药物活性得到了广泛的认同，但其疏水性强，在水中几乎不溶解，导致其体内生物利用度低，严重影响了其在临床上的广泛使用。
[0003]当药物的尺寸降到微纳米范围时，由于具有较小的粒径和巨大的比表面积，能增加难溶药物的溶解度和溶出速率，也能增加药物与胃肠道壁的接触，从而促进药物的吸收，提高难溶药物的生物利用度。目前已报道的微纳米白藜芦醇药物非常少，且这些微纳米药物均含惰性载体。如中国专利CNlO 157929IA公布了一种白藜芦醇磷脂复合物纳米乳液，该纳米白藜芦醇采用磷脂做为载体，且制备过程添加多元醇；中国专利CN101317832A公布了一种白藜芦醇口服纳米给药体系，该体系采用小麦醇做为载体，制备过程需添加有机溶剂和表面活性剂(或稳定剂)；中国专利CN103040754A公布了一种白藜芦醇纳米脂质体，该体系需脂类膜材做载体，制备过程也需加入有机溶剂。在上述已公布的微纳米白藜芦醇中，惰性载体的加入会带来许多不利因素:1.在纳米药物体系中载体的质量通常高于药物，降低了体系中药物的有效含量；2.载体通常会有副作用或不利影响:3.载体的合成费时费力。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术而提供一种无载体微纳米白藜芦醇药物及其制备，所述的白藜芦醇药物的水溶性及抗癌活性明显提高，本发明另一目的是提供无载体微纳米白藜芦醇药物在制备抗肿瘤产品及保健品方面的应用。
[0005]本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是:一种无载体微纳米白藜芦醇药物，其形貌为针状或带状，平均宽度为0.2~0.5 μ m，水中的溶解度为30~50 μ mol/L,其为下述制备方法所得产物，包括如下步骤:
[0006](I)将白藜芦醇粉末置于坩锅中，在气体保护下于管式炉中进行煅烧；
[0007](2)煅烧结束后，管式炉温度降至常温，即得无载体微纳米白藜芦醇药物。
[0008]按上述方案，所述的保护气体为氩气、氦气、氮气和二氧化碳中的至少一种。
[0009]按上述方案，所述的保护气体的流速为60~ISOsccm (标况毫升/分钟)。
[0010]按上述方案，所述的煅烧温度为80~260°C。[0011]按上述方案，所述的煅烧时间为30~200min。
[0012]所述的无载体微纳米白藜芦醇药物的制备方法，包括如下步骤:
[0013](I)将白藜芦醇粉末置于坩锅中，在气体保护下于管式炉中进行煅烧；
[0014](2)煅烧结束后，管式炉温度降至常温，即得无载体微纳米白藜芦醇药物。
[0015]所述的无载体微纳米白藜芦醇药物作为人宫颈癌抗肿瘤药物或人肝癌抗肿瘤药物的应用。
[0016]本发明所提供的无载体微纳米白藜芦醇药物具有以下优点:
[0017]I)不含载体和有机溶剂，药物含量高达100%，避免了载体带来的不良影响；
[0018]2)通过药物形貌和尺寸的改变，从而改善其水溶性低，生物利用度差的缺陷；产品形貌为针状或带状，宽度为0.2~0.5 μ m ;产品在水中的溶解度为30~50 μ mol/L,是未煅烧白藜芦醇的4~7倍； [0019]3)产品对人宫颈癌细胞HeLa的IC5tl值(抑制率为50%所需的药物浓度)为0.1~
0.2 μ mol/mL,对人肝癌细胞IfepG2的IC5tl值为0.2~0.3 μ mol/mL,与未煅烧白藜芦醇相比，IC50值下降40~50%。
【专利附图】
【附图说明】
[0020]图1是白藜芦醇原料的扫描电镜图；
[0021]图2是实施例1微纳米白藜芦醇药物的扫描电镜图；
[0022]图3是实施例2微纳米白藜芦醇药物的扫描电镜图；
[0023]图4是实施例3微纳米白藜芦醇药物与白藜芦醇原料的红外图谱。
【具体实施方式】
[0024]以下通过实施例进一步说明本发明，但本发明并不局限于下列实施例包含的内容。
[0025]实施例1
[0026]微纳米白藜芦醇药物的制备方法，包括如下步骤:
[0027]将白藜芦醇原料粉末(购自阿拉丁，纯度为99%)平铺放在坩埚中，将坩锅置于石英管中，调节氮气流速为60SCCm，温度为150°C，于管式炉中煅烧30min，待温度降至常温时回收样品，即可得到微纳米白藜芦醇药物。
[0028]附图1是采用Hitachi S4800型扫描电子显微镜拍摄的白藜芦醇原料粉末的扫描电镜图，从图中可以看出原料形貌呈块状或棍状，杂乱，尺寸较大，最大宽度在2μπι以上。
[0029]附图2是实施例1微纳米白藜芦醇药物的扫描电镜图，从图中可知，产品形貌为带状，与原料白藜芦醇相比，形貌均一，宽度减小，平均宽度为0.5μηι。
[0030]实施例2
[0031]微纳米白藜芦醇药物的制备方法，包括如下步骤:
[0032]将白藜芦醇原料粉末平铺放在坩埚中，将坩锅置于石英管中，调节氮气流速为120sCCm，温度为180°C，于管式炉中煅烧60min，待温度降至常温时回收样品，即可得到微纳米白藜芦醇药物。
[0033]附图3是实施例2微纳米白藜芦醇药物的扫描电镜图，从图中可知，产品形貌为针状或带状，与原料相比，尺寸明显减小，平均宽度为0.3μπι。
[0034]实施例3
[0035]微纳米白藜芦醇药物的制备方法，包括如下步骤:
[0036]将白藜芦醇原料粉末平铺放在坩埚中，将坩锅置于石英管中，调节氮气流速为120sCCm，温度为180°C，于管式炉中进行煅烧90min，待温度降至常温时回收样品，即可得到微纳米白藜芦醇药物。
[0037]微纳米白藜芦醇和白藜芦醇原料的红外光谱对比 [0038]实施例3的微纳米白藜芦醇和白藜芦醇原料的红外光谱，采用ThermoNicolet520红外光谱仪测定，见附图4。由图可知经煅烧后的微纳米白藜芦醇与原料白藜芦醇相比，谱图没有发生明显变化，表明煅烧过程未破坏药物化学结构。
[0039]实施例4
[0040]微纳米白藜芦醇药物的制备方法，包括如下步骤:
[0041]将白藜芦醇原料粉末平铺放在坩埚中，将坩锅置于石英管中，调节氩气流速为ISOsccm，温度为215°C，于管式炉中进行煅烧30min，待温度降至常温时回收样品，即可得到微纳米白藜芦醇药物。
[0042]微纳米白藜芦醇和白藜芦醇原料体外水溶性对比
[0043]将实施例1~4方法制备的微纳米白藜芦醇与白藜芦醇原料在水中搅拌48小时，用0.45 μ m的滤膜过滤除掉未溶解的固体，采用Shimadzu UV-2550紫外可见光度计测定溶液中白藜芦醇的含量，结果见表1。由表可知白藜芦醇原料经煅烧后得到的微纳米白藜芦醇溶解性得到了明显地提高。
[0044]
_表1微纳米白藜芦醇在水中的溶解性_
样品_白藜芦醇原料实施例1 实施例2 实施例3 实施例4
溶解度(μιηοΙ/L)__482_44A_35.0
[0045]微纳米白藜芦醇和白藜芦醇原料体外抗肿瘤实验对比
[0046]供试样品:按照实施例1和2方法制备的微纳米白藜芦醇
[0047]方法:选择人宫颈癌细胞HeLa作为受试细胞株，应用不同浓度微纳米白藜芦醇和白藜芦醇原料作用于细胞48小时，采用MTT法观察药物对肿瘤细胞生长的抑制，实验重复三次，结果采用抑制50%细胞生长所需的微纳米白藜芦醇浓度表示，即IC5tl值，见表2。
[0048]表2微纳米白藜芦醇对HeLa细胞的IC5tl值
样品白藜芦醇原料实施例1 实施例2
[0049]-1Csdfl'lXnmol/mL)0.240.110.14
[0050]由表可知微纳米白藜芦醇对HeLa细胞的生长抑制作用显著高于白藜芦醇原料，抑制50%细胞生长所需的微纳米白藜芦醇浓度为0.11~0.14ymol/mL，而所需白藜芦醇原料浓度为0.24 μ mol/mL。
[0051 ] 微纳米白藜芦醇和白藜芦醇原料体外抗肿瘤实验对比[0052]供试样品:按照实施例1和2方法制备的微纳米白藜芦醇
[0053]方法:选择人肝癌细胞H印G2作为受试细胞株，应用不同浓度微纳米白藜芦醇和白藜芦醇作用于细胞48小时，采用MTT法观察药物对肿瘤细胞生长的抑制，实验重复三次，结果采用抑制50%细胞生长所需的微纳米白藜芦醇浓度表示，即IC5tl值，结果见表3。
[0054]表3微纳米白藜芦醇对IfepG2细胞的IC5tl值
【权利要求】
1.一种无载体微纳米白藜芦醇药物，其形貌为针状或带状，平均宽度为0.2~0.5 μ m，水中的溶解度为30~50 μ mol/L，其为下述制备方法所得产物，包括如下步骤: (1)将白藜芦醇粉末置于坩锅中，在气体保护下于管式炉中进行煅烧； (2)煅烧结束后，管式炉温度降至常温，即得无载体微纳米白藜芦醇药物。
2.根据权利要求1所述的无载体微纳米白藜芦醇药物，其特征在于所述的保护气体为氩气、氦气、氮气和二氧化碳中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的无载体微纳米白藜芦醇药物，其特征在于所述的保护气体的流速为60~180sccm (标况毫升/分钟)。
4.根据权利要求1或2或3所述的无载体微纳米白藜芦醇药物，其特征在于所述的煅烧温度为80~260°C。
5.根据权利要求4所述的无载体微纳米白藜芦醇药物，其特征在于所述的煅烧时间为30 ~200min。
6.权利要求1所述的无载体微纳米白藜芦醇药物的制备方法，包括如下步骤: (1)将白藜芦醇粉末置于坩锅中，在气体保护下于管式炉中进行煅烧； (2)煅烧结束后，管式炉温度降至常温，即得无载体微纳米白藜芦醇药物。
7.根据权利要求6所述的无载体微纳米白藜芦醇药物的制备方法，其特征在于所述的保护气体为氩气、氦气、氮气和二氧化碳中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的 无载体微纳米白藜芦醇药物的制备方法，其特征在于所述的保护气体的流速为60~180sccm (标况毫升/分钟)。
9.根据权利要求6或7或8所述的无载体微纳米白藜芦醇药物的制备方法，其特征在于所述的煅烧温度为80~260°C。
10.根据权利要求9所述的无载体微纳米白藜芦醇药物的制备方法，其特征在于所述的煅烧温度为150~215°C。
11.根据权利要求9所述的无载体微纳米白藜芦醇药物的制备方法，其特征在于所述的煅烧时间为30~200min。
12.根据权利要求11所述的无载体微纳米白藜芦醇药物的制备方法，其特征在于所述的煅烧时间为30~90min。
13.权利要求1所述的无载体微纳米白藜芦醇药物作为人宫颈癌抗肿瘤药物或人肝癌抗肿瘤药物的应用。
【文档编号】A61K31/05GK103690487SQ201310691998
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月17日 优先权日:2013年12月17日
【发明者】吕中, 杨浩, 陈嵘 申请人:武汉工程大学