本发明涉及保健品领域，具体而言，涉及一种组合物、保健品或药物、其制备方法和应用。
背景技术：
：运动性疲劳是由过量负荷的运动量造成肌肉损伤和体液损失，或由于神经紧张影响神经递质和激素的释放等神经内分泌活动引起的，进而影响心肝脾肾等脏腑功能，引起全身功能性失调现象，严重者还可导致免疫力下降。中长跑运动员作为长期从事高强度运动的特殊群体，会因训练中运动量过高而得不到恢复，导致在特定运动强度下运动能力下降，从而不能持续运动而产生运动性疲劳，该问题已得到运动训练行业广泛重视。寻求增强体能、延缓疲劳产生和加快疲劳消除，又不含违禁成份和不具毒副作用的药物/食物，是当今运动医学界的热点。传统中药大都为天然药物，对人体安全有效，通过调节体内的代谢环境和补充缺乏的微量元素，促进机体达到新的平衡而消除和延缓疲劳、提高运动能力。虫草是我国传统的名贵中药材，具有补肺益肾，止血化痰的作用。其含有的腺苷、虫草多糖、虫草素、虫草酸、麦角甾醇、氨基苯酚等多种生理活性物质，具有免疫调节、抗疲劳、抗惊厥、抗癌、抗菌、抗糖尿病、抗炎等药理作用。红景天为景天科多年生植物，一般生长于海拔较高的地区，其中富含红景天苷、甾醇酚性化合物和黄酮类等生物活性成分，具有抗缺氧、抗疲劳、抗毒、抗辐射等作用，而且毒性很小。已有研究表明使用红景天能延长肌肉负荷时间，促进蛋白质水解，提高肌肉总蛋白含量和RNA的水平，促使负荷肌肉氮代谢指数正常化，对运动性疲劳有改善作用。石斛是我国传统的贵重药材，具有滋阴清热、生津益胃等功效，现代药理学研究表明，石斛富含生物碱、香豆素和多糖等多种生物活性物质，具有抗肿瘤、抗疲劳、增强人体免疫力等作用。目前，已有研究证明，霍山石斛多糖能够显著延长小鼠游泳时间，降低运动后小鼠的乳酸累积，增加运动后小鼠的肝糖原储备值，具有抗疲劳的作用(参见“霍山石斛多糖抗运动性疲劳实验研究，余刚等，运动，总第58期，第46-48页，2013年1月”)。目前，已有多种含有虫草、红景天或石斛的制剂，用于达到消除机体疲劳、增强免疫力等保健效果。例如，中国专利申请CN1429622(申请号03101266.3)公开了一种以红景天为主要原料制成的双抗含片，其中包含红景天提取物或超微粉碎物、虫草菌超微粉、西洋参超微粉和其它添加物，该含片具有抗缺氧、抗辐射等多种保健效果。又如，中国专利申请CN101438744(申请号200710187620.0)公开了一种抗疲劳、抗微波辐射、抗缺氧、抗毒的景天虫草藏茶，采用直接粉碎的方式将红景天和虫草分别粉碎成粗颗粒和细颗粒，与茶充分混合制得。再如，中国专利申请CN103211222A(申请号201310158481.4)公开了一种以番茄红素、虫草提取物和/或石斛提取物和/或人参提取物为主要原料的组合物，具有缓解体力疲劳的作用。但现有的抗疲劳产品功效不足，效果有待进一步提高。有鉴于此，特提出本发明。技术实现要素：为解决现有技术中的不足，本发明提供了一种恢复中长跑运动员运动疲劳、调节其机体免疫功能的组合物、保健品或药物(例如微粉胶囊)及其制备方法和用途。本发明一方面涉及一种组合物，包括：虫草，红景天提取物，以及石斛提取物。本发明另一方面涉及保健品或药物，包括本发明的组合物。本发明还涉及组合物、保健品或药物的制备方法，包括以下步骤：(a)提供虫草、红景天提取物以及石斛提取物；(b)将虫草、红景天提取物以及石斛提取物与任选的辅料混合。与现有技术相比，本发明的有益效果为：(1)本发明的组合物、保健品或药物恢复运动疲劳效果更显著。(2)口服安全，无明显毒副作用。具体实施方式从目前的现有技术可以看出，尚且没有涉及虫草、红景天和石斛组合用于缓解恢复中长跑运动员运动疲劳、调节其机体免疫功能的报道。本发明结合受试者体成分、运动能力、运动心理疲劳评价、血液生化等多方面的测试，深入研究了虫草超微粉胶囊对抗疲劳和免疫调节的作用机制，为中长跑运动员提供了抗运动疲劳效果显著、无毒副作用的保健品。本发明一方面涉及一种组合物，特别是抗运动疲劳组合物，包括：虫草，红景天提取物，石斛提取物。本发明一方面涉及一种保健品或药物，特别是抗运动疲劳保健品或药物，包括本发明的组合物。为解决现有技术中的不足，本发明提供了一种恢复中长跑运动员运动疲劳、调节其机体免疫功能的保健品或药物(例如微粉胶囊)及其制备方法和用途。为实现上述目的，一方面，本发明提供了一种恢复中长跑运动员运动疲劳、调节其机体免疫功能的保健品或药物，特别是超微粉胶囊。优选地，组合物有效成分为：虫草，红景天提取物，石斛提取物。优选地，组合物有效成分由以下组分组成：虫草，红景天提取物，以及石斛提取物。优选地，本发明的组合物包括：虫草200-600重量份，优选300-500重量份，更优选350-450重量份，最优选450重量份；红景天提取物100-200重量份，优选110-160重量份，进一步优选120-140重量份，最优选127重量份；以及石斛提取物50-150重量份，优选60-140重量份，更优选75-125重量份，进一步优选75-100重量份，最优选95重量份。在一种优选的实施方式中，各成分配比为：虫草200-600重量份，红景天提取物100-200重量份，石斛提取物50-150重量份。在一种优选的实施方式中，各成分配比为：虫草优选300-500重量份，红景天提取物110-160重量份，石斛提取物60-140重量份。在一种优选的实施方式中，各成分配比为：虫草350-450重量份，红景天提取物120-140重量份，石斛提取物75-100重量份。在一种优选的实施方式中，各成分配比为：虫草450重量份，红景天提取物127重量份，石斛提取物95重量份。一、组分(1)虫草虫草，又称冬虫夏草，冬虫草，中华虫草，拉丁学名Cordycepssinensis(Berk.)Sacc。虫草是麦角菌科真菌虫草寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。虫草可以增强机体的免疫力，滋补肺肾，对肺癌、肝癌等有明显的抑制作用。在临床上对肺虚久咳，气喘，肺结核咯血，盗汗，肾虚腰膝酸痛，阳痿遗精，神经衰弱及化疗、放疗后的红细胞下降都有疗效。在本发明的一种优选的实施方案中，虫草为麦角菌科真菌虫草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。优选地，虫草为粉末形式，即虫草粉。优选地，虫草为虫草超微粉。优选地，虫草粉的最大颗粒直径Dmax为10～500微米，优选20～300微米，更优选30～100微米，最优选38～50微米(300～400目)。优选地，虫草粉的中位直径D50为5～100微米，优选10～50微米，更优选15～40微米，最优选20～30微米。优选地，虫草粉的制备方法为：干燥的虫草于超微粉碎机中粉碎，过筛，即得。优选地，干燥的虫草可以通过干燥至恒重而获得。例如，40～50℃烘干至恒重。优选地，筛的目数为300-400目。在本发明的一个优选的实施方案中，虫草超微粉的制备方法为：取干燥后的虫草样品，40～50℃烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20-30分钟，过300～400目筛，即得。优选地，虫草的量可以为200-600重量份，优选300-500重量份，更优选350-450重量份，最优选450重量份。优选地，在单位剂型中，虫草的量为200-500mg，优选350-450mg，最优选450mg。(2)红景天提取物在本发明的一个优选的实施方案中，红景天提取物是红景天的醇提物、水提物或醇/水提取物中的一种或几种。优选地，红景天提取物是红景天的醇水溶液提物，优选乙醇水溶液提物。以体积计，醇水溶液优选乙醇水溶液浓度为30～99％，优选40～98％，更优选50～95％，进一步优选60～90％，最优选75～90％，例如85％。在本发明的一种优选的实施方案中，红景天提取物通过如下方法制备：取红景天药材，用醇水溶液(优选乙醇水溶液)进行回流热提取。优选地，提取后过滤，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏。优选地，可以提取多次，例如提取2～5次，优选2～3次。每次20分钟～3小时，优选30分钟～2.5小时，更优选45分钟～2小时，例如1.5小时。优选地，红景天提取物为粉末形式，即红景天提取物粉。优选地，红景天提取物为红景天提取物超微粉。优选地，红景天提取物粉的最大颗粒直径Dmax为10～500微米，优选20～300微米，更优选30～100微米，最优选38～50微米(300～400目)。优选地，红景天提取物粉的中位直径D50为5～100微米，优选10～50微米，更优选15～40微米，最优选20～30微米。优选地，红景天提取物粉的制备方法包括：取红景天提取物，干燥，于超微粉碎机中粉碎，过筛，得红景天提取物粉。优选地，干燥温度为40-85℃，优选50-80℃，更优选55-75℃，最优选60-70℃。优选地，筛的目数为300-400目。在本发明的另一个优选的实施方案中，红景天提取物超微粉的制备方法为，取红景天提取物，60-70℃烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎15-25分钟，过300-400目筛，即得。优选地，红景天提取物的量为100-200重量份，优选110-160重量份，进一步优选120-140重量份，最优选127重量份。优选地，在单位剂型中，红景天提取物为100-200mg，优选110-160mg，进一步优选，120-140mg，最优选127mg。(3)石斛提取物在本发明的一种优选的实施方案中，石斛提取物是石斛的醇提物、水提物或醇/水提取物种的一种或几种。优选地，石斛提取物是石斛的醇水溶液提物，优选乙醇水溶液提物。以体积计，乙醇水溶液浓度为30～99％，优选40～98％，更优选50～95％，进一步优选60～90％，最优选75～90％，例如85％。在本发明的一种优选的实施方案中，石斛提取物通过如下方法制备：取石斛药材，用醇水溶液(优选乙醇水溶液)进行回流热提取。优选地，提取后过滤，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏。优选地，可以提取多次，例如提取2～5次，优选2～3次。每次20分钟～3小时，优选30分钟～2.5小时，更优选45分钟～2小时，例如1.5小时。优选地，石斛提取物为粉末形式，即石斛提取物粉。优选地，石斛提取物为石斛提取物超微粉。优选地，石斛提取物粉的最大颗粒直径Dmax为10～500微米，优选20～300微米，更优选30～100微米，最优选38～50微米(300～400目)。优选地，石斛提取物粉的中位直径D50为5～100微米，优选10～50微米，更优选15～40微米，最优选20～30微米。优选地，石斛提取物粉的制备方法包括：取石斛提取物，干燥，于超微粉碎机中粉碎，过筛，得石斛提取物粉。优选地，干燥温度为40-85℃，优选50-80℃，更优选55-75℃，最优选60-70℃。优选地，筛的目数为300-400目。在本发明的另一个优选的实施方案中，石斛提取物超微粉的制备方法为，取石斛提取物，60-70℃烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎15-25分钟，过300-400目筛，即得。优选地，石斛提取物的量为50-150重量份，优选60-140重量份，更优选75-125重量份，进一步优选75-100重量份，最优选95重量份。优选地，在单位剂型中，石斛提取物50-150mg，优选60-140mg，更优选75-125mg，进一步优选75-100mg，最优选95mg。二、剂型二、形式和剂型本发明的组合物、保健品或药物可以做成各种剂型或中成药。剂型包括但不限于丸剂、散剂、膏剂、片剂、颗粒剂(冲剂)、锭剂、胶囊剂、水剂、酊剂。(1)丸剂丸剂是药材细粉或药材提取物加适宜粘合剂或辅料，制成的球形或类球形的固体制剂，是中成药最古老的剂型之一。根据粘合剂的不同丸剂又分为蜜丸、水蜜丸、水丸、糊丸、浓缩丸、微丸等类型。优选使用浓缩丸。浓缩丸是全部药材或部分药材的煎液或提取液，与适宜的辅料或药物细粉加适宜的粘合剂制成。根据粘合剂的不同，又分为浓缩蜜丸、浓缩水丸、浓缩水蜜丸。浓缩丸体积小，药物有效成分含量高，易于服用，在体内溶化吸收比较缓慢。在一种优选的实施方式中，将全部药材或部分药材的煎液或提取液，与辅料或药物细粉加粘合剂制成浓缩丸。优选地，将全部药材煎液或提取液与粘合剂和可选的辅料制成浓缩丸。在一种优选的实施方式中，将虫草粉、红景天提取物和/或红景天提取液、石斛提取物和/石斛提取液，与粘合剂制成丸剂。在一种优选的实施方式中，将虫草粉、红景天提取物、石斛提取物与粘合剂制成丸剂。在一种优选的实施方式中，将虫草粉、红景天提取液、石斛提取液与粘合剂制成丸剂。(2)散剂散剂是一种或多种药材混合制成的粉末状制剂，分内服散剂和外用散剂，是我国古代剂型之一。散剂治疗范围广，服用后分散快，奏效迅速，且具有制作方便、携带方便、节省药材等优点。在一种优选的实施方式中，散剂包括虫草粉、红景天提取物粉、石斛提取物粉。(3)膏剂膏剂系药物剂型之一，有内服和外用两种。内服膏通常又分流浸膏、浸膏、煎膏三种；外用膏有软膏、硬膏两种。其中内服煎膏和外用软膏是膏剂中常见的剂型。内服的煎膏又叫膏滋，是把药物加水煎熬，滤滓，加入冰糖、蜂蜜等，熬成稠厚的膏，可长期服用。常用于慢性疾病或身体虚弱者。外用的软膏称油膏，一般药膏，是把蜂蜡加入棉子油或花生油中，加热熔化，乘热加入应用的药物细粉，不断搅拌，待冷凝即成。冰片、樟脑等容易挥发的药，可在油膏冷后加入搅匀。外用药膏一般用于外涂皮肤疮疡疥癣等。对于糖尿病人的膏方在浓缩收膏时，最好用龟板胶、鳖甲胶、阿胶，用木糖醇等甜味剂替代蔗糖。本发明优选使用煎膏剂，煎膏剂(膏滋)是药材用水煎煮、去渣浓缩后，加甜味剂制成的半固体制剂，又称膏滋。甜味剂可以为炼蜜或糖、木糖醇，优选木糖醇。煎膏剂具有吸收快，浓度高，体积小，便于保存，可备较长时间服用的特点。有滋补调理的作用，用于治疗慢性病和久病体虚者。优选地，膏剂可以包括虫草、红景天提取物、石斛提取物以及甜味剂。在一种优选的实施方式中，膏剂通过以下方式制备：将虫草粉、红景天提取物、石斛提取物，加甜味剂制成的半固体制剂。在一种优选的实施方式中，膏剂通过以下方式制备：将虫草粉用水煎煮、去渣浓缩后，与红景天提取物、石斛提取物混合，加甜味剂制成的半固体制剂。(4)片剂片剂是药材细粉或提取物与适宜的辅料或药材细粉压制而成的片状制剂，分浸膏片、半浸膏片和全粉片等，是常用的现代剂型之一。片剂体积小，用量准确，易崩解生效快，且具有生产效率高、成本低、服用及储运方便的优点。片剂适用于各种疾病。本发明优选使用浸膏片。在优选的实施方式中，片剂是虫草粉、红景天提取物、石斛提取物与可选的辅料压制而成的片状制剂。(5)颗粒剂颗粒剂(冲剂)是药材提取物与适宜的辅料或与药材细粉制成的颗粒状制剂，是在汤剂、散剂和糖浆剂的基础上发展起来的新剂型。有颗粒状和块状两种，分为可溶性、混悬性、泡腾性及含糖型、无糖型等不同类型。颗粒剂体积小，重量轻，服用简单，口感好，作用迅速，多用于补益、止咳、清热等作用的药物。优选地，颗粒剂是虫草粉、红景天提取物、石斛提取物与可选的辅料制成的剂型。(6)锭剂锭剂是药材细粉与适量粘合剂如蜂蜜、糯米粉或利用药材本身的粘性制成规定形状的固体制剂。可供内服或外用，内服作用与糊丸接近，外用多用水或醋磨汁后涂敷患处。锭剂型大多作噙化之用。优选地，本发明的锭剂为内服锭剂。(7)胶囊剂胶囊剂包括硬胶囊剂和软胶囊剂。硬胶囊剂是将适量的药材提取物、药材提取物加药粉或辅料制成均匀的粉末或颗粒，填充于硬胶囊中而制成的剂型。主要是口服。硬胶囊外观整洁美观，易于吞服，可掩盖药物的不良嗅味，崩解快，吸收好。适用于对光敏感、不稳定或遇湿、热不稳定的药物，或有特异气味的药物，或需要定时定位释放的药物。儿童用药、对胃粘膜刺激性强的药物不宜制成胶囊剂。软胶囊剂是将油类或对明胶等囊材无溶解作用的液体药物或混悬液封闭于囊材内制成的剂型。特点与硬胶囊相似。硬胶囊和软胶囊经过适宜方法处理或用其他药用高分子材料加工，使囊壳不溶于胃液，但在肠液中崩解释放活性成分，为肠溶胶囊。优选地，本发明的胶囊为将煎液或提取液获得的药材提取物加辅料制成均匀的粉末或颗粒，填充于硬胶囊中而制成的剂型。优选地，本发明的胶囊为虫草粉、红景天提取物、石斛提取物加辅料制成均匀的粉末或颗粒，填充于硬胶囊中而制成的剂型。辅料例如为微晶纤维素。(8)酊剂酊剂是药物用规定浓度的乙醇浸出或溶解制成的澄清液体制剂，也可以用流浸膏稀释制成。分内服和外用两种。酊剂成分较纯净，有效成分含量高，剂量准确，吸收迅速，适宜于制备含有挥发性成分或不耐热成分的制剂。优选地，本发明的酊剂为内服酊剂。优选地，本发明的酊剂是用乙醇溶液浸出红景天提取物、石斛提取物，加入虫草制成。优选地，本发明的剂型为胶囊，特别是超微粉胶囊。超微粉胶囊的有效成分为：虫草超微粉200-500mg，红景天提取物超微粉100-200mg，石斛提取物超微粉50-150mg。在本发明的一个优选的实施方案中，虫草超微粉胶囊的有效成分为：虫草超微粉350-450mg，红景天提取物超微粉120-160mg，石斛提取物超微粉75-100mg。在本发明的另一个优选的实施方案中，虫草超微粉胶囊的有效成分为：虫草超微粉450mg，红景天提取物超微粉127mg，石斛提取物超微粉95mg。三、制备方法另一方面，本发明提供了组合物、保健品或药物的制备方法，包括：(a)提供虫草、红景天提取物以及石斛提取物；(b)将虫草、红景天提取物以及石斛提取物与任选的辅料混合。辅料(药用辅料)系指生产药品和调配处方时使用的赋形剂和附加剂。辅料是除活性成分以外，在安全性方面已进行了合理的评估，且包含在药物制剂中的物质。优选地，辅料选自以下一种或多种：溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂。辅料优选为赋形剂，例如微晶纤维素。另一方面，本发明提供了超微粉胶囊的制备方法。胶囊是由以下步骤制备而成：(1)取干燥后的虫草样品，40-50℃烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20-30分钟，过300-400目筛，备用；(2)取红景天和石斛药材，分别加入醇、水或者醇水溶液中的任一种进行提取，提取后过滤，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于60-70℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎15-25分钟，过300-400目筛，即得；(3)按配方量取上述虫草超微粉、红景天超微粉和石斛超微粉充分混合，任选地，加入辅料，制成胶囊剂。三、应用另一方面，本发明还涉及本发明的组合物、保健品或药物在制备用于恢复运动疲劳的保健品或药物中的应用，尤其是用于恢复运动员例如中长跑运动员运动疲劳。另一方面，本发明还涉及本发明的组合物、保健品或药物在制备用于调节机体免疫功能的保健品或药物中的应用，尤其是用于调节运动员例如中长跑运动员机体免疫功能。另一方面，本发明提供了本发明的组合物、保健品或药物在制备用于恢复中长跑运动员运动疲劳、调节其机体免疫功能的保健品或药物中的应用。本发明的组合物、保健品或药物特别是超微粉胶囊可以改善运动应激对免疫细胞造成的过度激活，促进淋巴细胞增殖，能够明显提高训练和疲劳恢复过程中淋巴细胞的增殖能力，而且药物口服安全，对心肌和肝肾无明显毒副作用。训练期间给予中长跑运动员补充本发明的组合物、保健品或药物特别是超微粉胶囊，可以一定程度上加速疲劳恢复、提高运动员机体免疫能力，同时能够保持运动员员身心状态良好，避免过度疲劳情况的发生。本发明提供了一种恢复中长跑运动员运动疲劳、调节其机体免疫功能的组合物、保健品或药物特别是超微粉胶囊及其制备方法和应用，虫草超微粉胶囊的有效成分是虫草超微粉、红景天提取物超微粉和石斛提取物超微粉。本发明的组合物、保健品或药物特别是超微粉胶囊可以改善运动应激对免疫细胞造成的过度激活，促进淋巴细胞增殖，能够明显提高训练和疲劳恢复过程中淋巴细胞的增殖能力，而且药物口服安全，对心肌和肝肾无明显毒副作用。下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购买获得的常规产品。实施例实施例1：虫草超微粉胶囊的有效成分为：虫草超微粉450mg，红景天提取物超微粉127mg，石斛提取物超微粉95mg。制备方法为：(1)取干燥后的虫草样品，50℃烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，备用；(2)取红景天药材，加入75％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1.5小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于60℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，即得；(3)取石斛药材，加入50％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于65℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎25分钟，过300目筛，即得；(4)按配方量取上述虫草超微粉、红景天超微粉和石斛超微粉充分混合，加入适量微晶纤维素混合均匀，用75％乙醇制软材，过16目筛制粒，将湿颗粒于50℃干燥，整粒，装入胶囊壳中，即得胶囊剂。实施例2：虫草超微粉胶囊的有效成分为：虫草超微粉350mg，红景天提取物超微粉110mg，石斛提取物超微粉75mg。制备方法为：(1)取干燥后的虫草样品，60℃烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，备用；(2)取红景天药材，加入85％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1.5小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于65℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，即得；(3)取石斛药材，加入40％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于65℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎30分钟，过300目筛，即得；(4)按配方量取上述虫草超微粉、红景天超微粉和石斛超微粉充分混合，加入适量微晶纤维素混合均匀，用75％乙醇制软材，过16目筛制粒，将湿颗粒于50℃干燥，整粒，装入胶囊壳中，即得胶囊剂。实施例3：虫草超微粉胶囊的有效成分为：虫草超微粉270mg，红景天提取物超微粉140mg，石斛提取物超微粉125mg。制备方法为：(1)取干燥后的虫草样品，50℃烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，备用；(2)取红景天药材，加入80％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1.5小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于60℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，即得；(3)取石斛药材，加入45％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于60℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎30分钟，过300目筛，即得；(4)按配方量取上述虫草超微粉、红景天超微粉和石斛超微粉充分混合，加入适量微晶纤维素混合均匀，用75％乙醇制软材，过16目筛制粒，将湿颗粒于50℃干燥，整粒，装入胶囊壳中，即得胶囊剂。对比例1虫草超微粉胶囊的有效成分为：虫草超微粉800mg，红景天提取物超微粉127mg，石斛提取物超微粉95mg。制备方法为：(1)取干燥后的虫草样品，50℃烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，备用；(2)取红景天药材，加入75％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1.5小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于60℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，即得；(3)取石斛药材，加入50％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于65℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎25分钟，过300目筛，即得；(4)按配方量取上述虫草超微粉、红景天超微粉和石斛超微粉充分混合，加入适量微晶纤维素混合均匀，用75％乙醇制软材，过16目筛制粒，将湿颗粒于50℃干燥，整粒，装入胶囊壳中，即得胶囊剂。对比例2景天石斛胶囊：红景天提取物超微粉500mg，石斛提取物超微粉200mg。制备方法为：(1)取红景天药材，加入75％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1.5小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于60℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，即得；(2)取石斛药材，加入50％的乙醇水溶液进行回流热提取，提取3次，每次1小时，提取后过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩得浸膏，干燥浸膏，粉碎，置于65℃下烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎25分钟，过300目筛，即得；(3)按配方量取上述红景天超微粉和石斛超微粉充分混合，加入适量微晶纤维素混合均匀，用75％乙醇制软材，过16目筛制粒，将湿颗粒于50℃干燥，整粒，装入胶囊壳中，即得胶囊剂。对比例3虫草超微粉胶囊的有效成分为：虫草超微粉1000mg。制备方法为：(1)取干燥后的虫草样品，50℃烘干至恒重，于超微粉碎机中粉碎20分钟，过300目筛，备用；(4)按配方量取上述虫草超微粉，加入适量微晶纤维素混合均匀，用75％乙醇制软材，过16目筛制粒，将湿颗粒于50℃干燥，整粒，装入胶囊壳中，即得胶囊剂。表1a.实施例和对比例的有效组分及配比虫草红景天提取物石斛提取物实施例1450mg127mg95mg实施例2350mg110mg75mg实施例3270mg140mg125mg对比例1800mg127mg95mg对比例2-500mg200mg对比例31000mg--临床试验研究1.实验药物试验药物：实施例1制得的胶囊剂。对照药物：淀粉胶囊。对比药物1：对比例1制得的胶囊剂。对比药物2：对比例2制得的胶囊剂。对比药物3：对比例3制得的胶囊剂。2.分组和给药实验选择在春季进行，实验地点为河北省体育学院，20名志愿者采用单盲，随机，交叉的试验方法分为对照组、试验药物组、对比药物1组、对比药物2组和对比药物3组，共5组，每组4人，对照组给予安慰剂(淀粉胶囊)10粒/天；试验药物组给予实施例1制得的虫草超微粉胶囊10粒/天；对比药物1组给予对比例1制得的景天石斛胶囊10粒/天；对比药物2组给予对比例2制得的胶囊10粒/天；对比药物3组给予对比例3制得的景天石斛胶囊10粒/天；五组服用方法均为早晚各一次，每次服用日剂量的一半。清洗期两周过后，受试者开始进行为期4周的服药实验。实验期间，五组受试者一起训练，并完成相同的训练计划，服药前后均进行体成分、运动能力、心理疲劳评价、血液生化等测试。3.检测项目3.1体成分分析采用BioSpaceInbody720体成分仪测定受试者清晨空腹安静状态的体成分，包括体重、腰臀比(WHR)、骨骼肌、脂肪重量、体脂肪比(PBF)、体重指数(BMI)，并记录受试者的身高、年龄等常规指标。3.2运动能力测试Wingate实验：采用MONARK-894E功率自行车，以受试者体重的7.5％作为运动负荷，受试者瞬间骑至最大速度后放下负荷砝码，并尽最大能力完成30s骑行，测定无氧功率。最大摄氧量实验：采用MAXI方法进行测试，正式开始后男子90瓦(女子80瓦)，递增负荷男子为30瓦每2分钟(女子20瓦每分钟)，蹬车频率设定为60转/分。当男子完成210瓦后，每分钟递增30瓦，女子达到160瓦后，每分钟递增20瓦，直到随功率增加耗氧量不再上升时为最大摄氧量，记录功率和心率。3.3运动心理疲劳测试采用运动员心理疲劳问卷测试(ABQ)，对运动员服药前后心理疲劳程度作出评价。3.4血液生化指标测试受试者于服药期前后清晨抽取安静空腹状态静脉血，分离血清，置-20°C保存待测。红细胞参数(红细胞数、红细胞压积、血红蛋白)：采全血直接上机检测。实验仪器为BeckmanCoulterLH-750血细胞分析仪；血清激素水平(血清总睾酮、血清皮质醇)：在RV管中加入包被单克隆抗体的磁性微粒、血清样品、碱性磷酸酶(ALP)标记的抗原,经37℃孵育后,形成竞争法抗原抗体结合成的复合物,在电磁场中进行3次洗涤,将未结合的多余抗原洗去。再加入底物AMPDD发光剂。通过测定相对发光单位RLU定量检测血清中物质的浓度。测试仪器为BeckmanAccess2全自动免疫发光分析系统；血尿素氮、肌酸激酶、谷丙转氨酶，天门冬氨酸氨基转移酶：20微升血清经冷冻离心后加入1000微升试剂中上机检测。实验仪器为RaytoRT9600半自动生化分析仪、迈瑞BS-200全自动生化分析仪。免疫球蛋白(免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M)：采用酶联免疫法检测，加入2x50微升阴性质控，1x50微升阳性质控和稀释样本到相应的肺炎衣原体抗原包被微孔中，盖上板盖在37℃孵育1小时，用冲洗液冲洗微孔3次(300-350微升)，加入50微升的1/300稀释的HRP结合物盖上板盖在37℃孵育1小时，用冲洗液冲洗微孔3次(300-350微升)，加100微升的TMB-底物，盖上板盖在室温下孵育15分钟，加入100微升终止液在450nm波长读取吸光度计算结果。T淋巴细胞亚群(CD3，CD4，CD8)：取流式上样管，加入CD45-FITC/CD4-PE/CD8-ECD/CD3/PC5四色荧光抗体20ul，每管加入外周全血100ul,在漩涡混匀器上震荡充分混匀，室温放置15分钟，每管加入LysingsolutionOptilyseC溶血液500ul，在漩涡混匀器上震荡充分混匀，室温放置10分钟，每管加入等量PBS，室温放置10分钟，混匀后，1500g离心5min。洗去未结合的抗体，每管加入PBS1000ul，上流式细胞仪检测。流式细胞仪Exp32软件获取细胞，每个检测获取10000个细胞。分析软件CXP分析结果。采用CD45和侧向角(SSC)散射光散点图设门区分淋巴细胞，散点图上CD3+/CD45+细胞(右上象限)为CD3阳性，CD3+/CD4+(右上象限)为CD45阳性细胞，CD3+/CD8+细胞(右上象限)为CD8阳性细胞。测试仪器为BeckmanCoulterEpicsXL流式细胞仪。3.5统计学分析统计学分析均采用SPSS16.0软件进行双向方差分析，实验重复测量三次，(分组*时间)用来评估各组间一段时间内的数值变化，当样本取得显著效果时，再采用单向方差分析与多重比较检验，以鉴定时间变化同时组内和组间的差异，P<0.05为差异具有显著统计学意义，P<0.01为差异具有非常显著统计学意义。4结果4.1体成分分析对五组参与实验的志愿者进行体重和体成分测试，个体特征统计结果显示，在五组之间年龄、身高、体重及体成分指标无显著性差异。4.2运动能力表1反映了服药前后五组受试者无氧功率和最大摄氧量的变化趋势，服药前后试验药物组、对比药物1组、对比药物2组和对比药物3组与对照组相比，无氧功率、最大摄氧量数值上升，但无显著性差异。4.3运动心理疲劳表1反映了服药前后五组受试者心理疲劳数值的变化趋势，五组受试者心理疲劳数值在服药前后均未发生明显变化，因此可以排除心理因素对服药前后组内、组间样本的影响。表1服药前后各组受试者运动能力和运动心理疲劳的比较4.4血液生化红细胞参数表2反映了服药前后五组受试者红细胞数、红细胞压积、血红蛋白值的变化趋势，服药前后五组受试者的红细胞数、红细胞压积、血红蛋白值均未出现显著性变化。表2服药前后各组受试者红细胞数、红细胞压积、血红蛋白值的比较4.4.2血清激素水平表3反映了服药前后五组受试者血清游离睾酮和血清皮质醇的变化趋势，服药前后五组血清游离睾酮值均出现上升，但试验药物组和对比药物1组相对于对照组变化无统计学差异。对照组、对比药物1组在服药前后皮质醇上升(P<0.05)，而试验药物组相对保持稳定。表3服药前后各组受试者血清游离睾酮和血清皮质醇的比较*与服药前相比，有显著性差异(P<0.05)。4.4.3血清代谢水平表4反映了服药前后五组受试者血尿素氮和肌酸激酶的变化趋势，服药后试验药物组和对比药物1组相对于对照组的尿素氮和肌酸激酶值均出现明显下降(P<0.05)，但同试验药物组相比，对比药物1组下降无显著性差异。表4服药前后各组受试者血尿素氮和肌酸激酶的比较**与对照组相比，服药后有显著性差异(P<0.05)免疫球蛋白和T-淋巴细胞表5-6反映了服药前后五组受试者免疫球蛋白和T-淋巴细胞亚群变化趋势，服药后对比药物1组免疫球蛋白M相对其他组有显著性升高(P<0.05)，试验药物组、对比药物1组相对于对照组CD3+，CD4+/CD8+显著性升高，CD8+显著性降低(P<0.05)，同对比药物1组相比，试验药物组的服药前后的变化有显著性差异。表5服药前后各组受试者免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M的比较表6服药前后各组受试者CD3+T细胞，CD4+T细胞，CD8+T细胞和CD4+/CD8+的比较通过本项实验结果分析表明，补充本发明的超微粉胶囊可以改善代谢物质堆积导致的体内环境变化和内分泌失调，由自由基引起的机体损伤，促进体内的抗氧化酶合成，减少蛋白质的分解，使机体对运动负荷的适应性增强。服药后试验药物组血清皮质醇、血清中肌酸激酶、尿素氮明显下降(P<0.05)。在免疫功能调节方面，运动中补充本发明的超微粉胶囊可以改善运动应激对免疫细胞造成的过度激活，促进淋巴细胞增殖。试验药物组和对比药物1组受试者通过定量服用虫草超微粉胶囊，在训练和疲劳恢复过程中淋巴细胞增殖能力明显提高，大约提高了20-30％。在本项实验中，设定了试验药物组和对比试验1组，两组的差别主要在于胶囊中虫草超微粉的含量，低剂量的试验药物组受试者的疲劳恢复功能和免疫功能提高更显著，高剂量的对比试验1组的各项指标提高并不明显，认为是服用虫草超微粉过多造成对药物成分吸收存在差异，产生一定负面效果，所以建议运动员服用按照低剂量的试验药物组用量服用虫夏草超微粉胶囊。整个实验期间受试者ALT和AST均处于正常范围，证明药物口服安全，对心肌和肝肾无明显毒副作用。由以上数据可以看出，本发明的含虫草、红景天提取物以及石斛提取物组合物胶囊，与含红景天提取物和石斛提取物组合物胶囊的对比例2、仅含虫草的胶囊的对比例3相比，在缓解恢复运动员运动疲劳、调节其机体免疫功能方面，具有更好的效果。尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。当前第1页1 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