基因重组人溶菌酶面膜及其制备方法与流程

文档序号:11895491阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基因重组人溶菌酶面膜,其特征在于,包含:

(1)溶菌酶冻干粉,包括基因重组人溶菌酶和甘露醇磷酸盐缓冲液,二者的比例是0.5-0.8g基因重组人溶菌酶:1ml甘露醇磷酸盐缓冲液;

(2)溶媒,其中,每1000ml溶媒包括透明质酸钠0.35g-0.5g、低分子透明质酸钠0.2g-0.6g、三甲基甘氨酸3g-7g、乳酸钠40ml-80ml、山梨醇30ml-50ml、羟乙基纤维素1.5g-3g、甘草酸二钾1.5g-3g、EDTA-2Na 0.4g-0.7g和余量的磷酸钠缓冲液。

2.根据权利要求1所述的基因重组人溶菌酶面膜,其特征在于,在溶菌酶冻干粉中,基因重组人溶菌酶和甘露醇磷酸盐缓冲液的配比是0.68g基因重组人溶菌酶:1ml甘露醇磷酸盐缓冲液。

3.根据权利要求1所述的基因重组人溶菌酶面膜,其特征在于,每1000ml溶媒包括透明质酸钠0.45g、低分子透明质酸钠0.5g、三甲基甘氨酸5g、乳酸钠60ml、山梨醇40ml、羟乙基纤维素2g、甘草酸二钾2g、EDTA-2Na 0.5g和余量的磷酸钠缓冲液。

4.根据权利要求1-3任一项所述的基因重组人溶菌酶面膜,其特征在于,所述基因重组人溶菌酶由130个氨基酸组成,其氨基酸序列为:KVFERCELARTLKRLGMDGYRGISLANWMCLAKWESGYNTRATNYNAGDRSTDYGIFQINSRYWCNDGKTPGAVNACHLSCSALLQDNIADAVACAKRVVRDPQGIRAWVAWRNRCQNRDVRQYVQGCGV。

5.根据权利要求1-3任一项所述的基因重组人溶菌酶面膜,其特征在于,所述甘露醇磷酸盐缓冲液的pH值是6.5-7.2(优选是7.0),浓度是4.5-6.0mmol/L(优选是5mmol/L);所述甘露醇磷酸盐缓冲液中甘露醇的质量百分含量是2%-5%(优选3%)。

6.根据权利要求1-3任一项所述的基因重组人溶菌酶面膜,其特征在于,所述透明质酸钠的分子量为120-150万道尔顿;所述低分子透明质酸钠的分子量为20-40万道尔顿。

7.根据权利要求1-3任一项所述的基因重组人溶菌酶面膜,其特征在于,所述磷酸钠缓冲液的pH值是6.5-7.2(优选是7.0),浓度是4.5-6.0mmol/L(优选是5mmol/L)。

8.根据权利要求1-3任一项所述的基因重组人溶菌酶面膜,其特征在于,在使用时,先将1ml溶媒加入溶菌酶冻干粉中溶解均匀后吸出、回输至溶媒中混合均匀,然后注射至面膜纸上浸湿。

9.权利要求1-8任一项所述的基因重组人溶菌酶面膜的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)制备溶菌酶冻干粉

(1.1)将0.5g-0.8g基因重组人溶菌酶溶解于无菌的甘露醇磷酸盐缓冲液中,随后过滤除菌,得到滤液;

(1.2)向滤液中加入无菌的甘露醇磷酸盐缓冲液定容至100ml,混合均匀得到溶菌酶溶液;

(1.3)将溶菌酶溶液分装、冻干,得到溶菌酶冻干粉;

其中,上述步骤(1.1)至(1.3)在无菌条件下进行;

(2)制备溶媒

(2.1)将0.35g-0.5g(优选0.45g)透明质酸钠和0.2g-0.6g(优选0.5g)低分子透明质酸钠溶于磷酸钠缓冲液中得到透明质酸钠溶液;

(2.2)将1.5g-3g(优选2g)羟乙基纤维素溶于磷酸钠缓冲液中得到羟乙基纤维素溶液;

(2.3)将透明质酸钠溶液加入羟乙基纤维素溶液中,混合均匀得到混合溶液;

(2.4)依次向混合溶液中加入3g-7g(优选5g)三甲基甘氨酸、1.5g-3g(优选2g)甘草酸二钾、0.4g-0.7g(优选0.5g)EDTA-2Na、40ml-80ml(优选60ml)乳酸钠和30ml-50ml(优选40ml)山梨醇,随后加入磷酸钠缓冲液定容至1000ml,混合均匀得到溶媒溶液;

(2.5)将溶媒溶液分装、灭菌,得到溶媒。

10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,在步骤(1.1)中,采用孔径为0.22μm的水相滤器进行过滤除菌。

11.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,步骤(2.1)和(2.2)在50-70℃(优选60℃)进行。

12.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,在步骤(2.5)中,所述灭菌是在121℃灭菌30分钟。

13.根据权利要求9-12所述的制备方法,其特征在于,所述基因重组人溶菌酶由130个氨基酸组成,其氨基酸序列为:KVFERCELARTLKRLGMDGYRGISLANWMCLAKWESGYNTRATNYNAGDRSTDYGIFQINSRYWCNDGKTPGAVNACHLSCSALLQDNIADAVACAKRVVRDPQGIRAWVAWRNRCQNRDVRQYVQGCGV。

14.根据权利要求9-12所述的制备方法,其特征在于,所述甘露醇磷酸盐缓冲液的pH值是6.5-7.2(优选是7.0),浓度是4.5-6.0mmol/L(优选是5mmol/L);所述甘露醇磷酸盐缓冲液中甘露醇的质量百分含量是2%-5%(优选3%)。

15.根据权利要求9-12所述的制备方法,其特征在于,所述磷酸钠缓冲液的pH值是6.5-7.2(优选是7.0),浓度是4.5-6.0mmol/L(优选是5mmol/L)。

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