本发明属于化妆品天然防腐技术领域，具体涉及一种具有强效、广谱抑菌活性的天然防腐组合物的制备及复配。
背景技术：
化妆品在生产、储藏以及使用过程中很容易受微生物的污染而变质，而且随着化妆品功能性多样化的增加，营养物质的添加会使微生物极易在产品中生长繁殖，而添加防腐剂会抑制这些微生物的滋生，防止产品的腐败变质，减少因产品变质给皮肤带来的危害，在此层面防腐剂是化妆品中必不可少的成分。
但随着近年来人们对防腐剂安全性的认识和对于合成型防腐剂的“谈虎色变”，经过长期研究发现，化学合成的防腐剂是化妆品配方中导致人体皮肤刺激、过敏、发炎以及潜在安全风险的重要因素之一。除此之外，此类防腐剂的使用还会对人体造成累积性的慢性危害，例如：形成不健全的角质层、加速皮肤老化等。因此，寻求一种天然的绿色防腐剂成为了化妆品生产中的一种趋势。
天然抑菌提取物主要以植物多酚、黄酮、皂苷、生物碱、有机酸等物质来达到抑菌的效果。但单一的植物提取物往往存在抑菌效果较差、抑菌谱窄等不足，因此，通过将具有不同抑菌活性的植物提取物进行适当的复配，得到抑菌效果好，并且广谱的天然防腐体系，是目前化妆品天然防腐的可行方案之一。
技术实现要素：
本发明的目的是为了替代或降低化学防腐剂的用量，并克服单一植物抑菌提取物抑菌活性差的缺陷，提供一种含有若干种植物提取物的防腐组合物，通过充分发挥组合物之间的协同增效作用，大大提高防腐组合物的抑菌效果和抑菌谱。而且天然来源，对人体更温和、安全、无刺激。
为了实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一种用于化妆品的强效广谱天然防腐组合物，其特征在于由2～8种抗细菌和真菌的植物提取物复配组成，每种提取物的重量百分比为10～80％。
作为本发明所述的天然防腐组合物的一种优选方案，其中：所述组合物由抑制细菌的植物提取物：透骨草、紫苏、厚朴、毛竹、荷叶、桑叶、紫花地丁、蒲公英、铁皮石斛、牛蒡子、金银花和鱼腥草中的一种或几种组成。
作为本发明所述的天然防腐组合物的一种优选方案，其中：所述组合物由抑制真菌的植物提取物：肉桂、石菖蒲、决明子、苦参、大黄、红花、银杏叶和青蒿中的一种或几种组成。
作为本发明所述的天然防腐组合物的一种优选方案，其中：天然防腐组合物中不同植物提取物对细菌和真菌的作用部位不同，可分别作用于细胞壁、细胞膜、核酸以及酶蛋白部位，并通过协同作用，提高组合物的抑菌能力。
作为本发明所述的天然防腐组合物的一种优选方案，其中：天然防腐组合物的制备方法为将各原料粉碎后分别用水、乙醇、丙酮和石油醚浸提，然后按不同比例复配，即得到广谱、强效的天然防腐组合物。
作为本发明所述的天然防腐组合物的一种优选方案，其中：植物浸提时间为1～4h，浸提温度为40～80℃，料液比为10～40倍。
作为本发明所述的天然防腐组合物的一种优选方案，其中：天然防腐组合物具有抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌以及黑曲霉菌的作用。
本发明的天然防腐组合物，能安全、有效的应用于面膜、膏霜、乳液、香波、洗面奶、沐浴乳等化妆品体系。
本发明的有益效果：
(1)提供化妆品用的天然防腐组合物，用以替代化学防腐剂或降低化学防腐剂的用量，避免化学防腐剂对人体安全的潜在风险；(2)该组合物能抑制革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌以及霉菌，具有较宽的抑菌谱，且充分体现组合物协同增效的作用，具有比单一提取物更高效的抑菌效果；(3)另外，植物提取物还具有抗炎、抗氧化、抗紫外线、抗衰老以及美白等护肤功效，这是化学合成防腐剂所不能相比的。
具体实施方式
以下通过具体实施例来对本发明作进一步的说明，但这些实施例只是为了说明，不是对本发明的限制。
实施例1 天然防腐组合物
实施例2 天然防腐组合物抑菌效果评价
1.样品溶液的制备
分别称取等量的厚朴提取物、毛竹叶提取物、透骨草提取物以及肉桂提取物，用乙醇水溶液配成200mg/mL的样品溶液，按照实施例1中的配比进行组合，备用。
2.菌悬液的配制
1)试验菌株：金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠杆菌(ATCC11229)、白色假丝酵母(ATCC10231)、黑曲霉菌(ATCC16404)。
2)培养基：
牛肉膏蛋白胨培养基(细菌用)：牛肉浸膏3g，胰蛋白胨10g，氯化钠5g，加水至1000mL，调节pH7.2～7.4，高压湿热灭菌(103.4kPa，121℃，20min)，备用。配制固体培养基时加入20g琼脂。
麦芽汁培养基(酵母菌用)：将发酵啤酒的原料(未加酒花)，稀释至10柏林，高压湿热灭，备用。配制固体培养基时加入20g琼脂。
马铃薯培养基(霉菌用)：将去皮马铃薯200g切成小块，加水煮沸20min，用三层纱布过滤，加入20g葡萄糖，将滤液补足1000mL，高压湿热灭菌，备用。配制固体培养基时加入20g琼脂。
3)活化菌种并配制菌悬液：用接种环挑取一环菌株(细菌和酵母菌)于灭菌的液体培养基中，霉菌用接种环挑取孢子在斜面培养基上划线接种，传代培养2～3代活化菌种。将活化好的菌悬液(孢子悬液)调节至1×108CFU/mL，通过对数稀释法稀释至所需浓度。
3.纸片法测定抑菌效果
根据试验菌所需营养物质配制相应的固体培养基，当培养基温度在45～50℃时取20mL于直径为90mm的培养皿中，待培养基冷却凝固后置于37℃的培养箱中干燥20～25min。吸取1×106CFU/mL的菌悬液(孢子悬液)100μL接种于培养皿中，涂布均匀。待培养基表面水分完全吸收后，用无菌镊子取直径6mm的滤纸片贴于培养基表面，再从纸片中心缓慢滴加10μL 200mg/mL的植物提取液。在接种后15min内完成以上操作，每皿2～3张纸片(以抑菌圈明显，且无重叠为准)，重复3皿。将培养皿倒置于生化培养箱中，细菌在37℃下孵育24h，酵母菌和霉菌在28℃下孵育48h，用游标卡尺十字交叉法量取抑菌圈直径。
以上工作均在超净台上完成。
4.试验结果
抑菌实验结果见表1。
表1
由表1可知，厚朴提取物、毛竹叶提取物具有较广谱的抑菌活性，但抑菌能力较弱；透骨草提取物对细菌的抑制效果较好，而对真菌的抑制作用较差；肉桂提取物对细菌的抑制效果较差，对酵母菌和霉菌的抑制效果突出。天然防腐组合物具有更为广谱的抑菌活性，且抑菌效果增加。
实施例3 天然防腐组合物的最小抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC)的测定
1.最小抑菌浓度(MIC)
最小抑菌浓度的测定采用常量肉汤稀释法。将植物提取物用二甲亚砜(DMSO)溶解成1000mg/mL作为原液，再连续倍比稀释至一系列浓度。取若干灭菌试管，每支试管加入1.8mL液体培养基，0.1mL1×107CFU/mL的菌悬液(孢子悬液)以及0.1mL植物提取液。细菌在37℃的恒温水浴震荡器(200r/min)中孵育24h，酵母菌和霉菌在28℃的水浴摇床中孵育48h，然后观察每支试管中是否有菌生长，以抑制菌体生长的最低浓度作为MIC。每个样品重复3次。
2.最小杀菌浓度(MBC)
最小杀菌浓度定义为99.9％的菌体被抗菌物质杀死时的最低浓度。取等于和低于MIC处理的菌液100μL于含有固体培养基的培养皿表面，涂布均匀。将培养皿置于生化培养箱中，细菌在37℃下孵育24h，酵母菌和霉菌在28℃下孵育48h，小于0.01％的菌落生长时抑菌物质的浓度为MBC。
3.MIC和MBC结果
MIC的结果见表2，MBC的结果见表3。
表2
注：---表示未能在实验浓度范围内检测到最小抑菌浓度
表3
注：---表示未能在实验浓度范围内检测到最小杀菌浓度
由表2和表3可知，单一植物提取物相比，天然防腐组合物具有高效、广谱的抑菌活性。单一植物提取物的MBC均大于或等于各自的MIC值，说明单一植物提取物在最小抑菌浓度下杀菌效率较差，而天然防腐组合物的MBC与MIC值相等，这也从侧面说明在天然防腐组合物的最小抑菌浓度下具有很好的杀菌效果，在实际应用中可以适当降低添加量的情况下满足防腐要求。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，仅为本发明的优选实施例而已，并不限制本发明。对于本领域技术人员而言，本发明可以有各种更改和变化。因此，在不脱离本发明精神和范围下所作的变化、修改以及改进，均应包含在本发明的保护范围之内。