经修饰的透明质酸衍生物及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及透明质酸衍生物和它们在医学和化妆品领域中的用途或作为饮食添 加物的用途。本发明另外涉及含有这样的衍生物的药物组合物以及得到它们的方法。
【背景技术】
[0002] 长久以来，研宄人员已经已经做出了大量努力来鉴别新的组织修复医疗装置，以 提供克服以前的装置的某些缺点的新工具，或者更加适用于特定组织。近十年来，所述努力 甚至已经增加，也因为人们渴望简单地通过改变正常老化进程来改变他们的美学表像的需 要日益增加。
[0003] 公认的是，皮肤是可以被多种天然和非天然因素改变的感觉组织，所述因素诸如 紫外线暴露、老化、吸烟、烧伤、痤疮、疾病等…
[0004] 在健康的受试者中，组织修复或组织再生在伤害所述组织的损伤以后通过愈合过 程而发生。在老化过程中，透明质酸和/或胶原在软组织中的产生减少，伴随着加速的降解 速率。这样的机制会导致凹陷区（depressed area)诸如纹线、皱纹、纹理和裙皱的形成。
[0005] 目前可得到的克服软组织缺陷的方法包括外科手术（例如，自体或异种移植）或 涉及使用真皮填充剂的更低侵袭性技术的应用。
[0006] 皮肤是由3个主要层组成的高度机化的结构，每个层具有它自身的功能。被称作 表皮的外层主要由角质形成细胞组成，并且担任保护免于外界因素（诸如病原体、由紫外 线引起的氧化剂应激、化学试剂的侵害）的作用，同时调节通过经表皮损失从身体释放的 水的量。
[0007] 中层是真皮，且是基本上由3种纤维蛋白蛋白质（即胶原、弹性蛋白和网硬蛋白） 以及支持基质组成的致密弹性纤维结缔组织。所述支持基质由糖胺聚糖（即，GAG)组成， 所述糖胺聚糖是能够结合大量水的长链多糖。它们一起形成不会泄漏真皮的凝胶。
[0008] 最后，被称作下皮的内层是纤维脂肪层，其松散地连接至真皮，起隔断层和保护垫 的作用。
[0009] 真皮-表皮连接决定了皮肤的表面。因而，具有锚定结构完整性的真皮-表皮连 接会维持折叠，由此增加真皮和表皮之间的接触的表面积，并促进这2种组织之间的可扩 散因子的交换，从而强化它们的粘结力和改善皮肤的外观。在改变锚定结构的情况下，特别 是由于胶原IV、胶原VII、层粘连蛋白V的合成的缺乏和/或由于老化或疾病，这会造成真 皮-表皮连接的扁平化。实际上，已经证实，胶原IV和胶原VII在创伤愈合过程中是非常 重要的（Betz P,等人，Int. J. Legal. Med.，1992, 105, 93)。
[0010] 组织修复也涵盖了慢性创伤和/或非愈合性创伤。这样的创伤的患病率在年龄相 关的疾病中、在受获得性免疫缺陷综合征（AIDS)影响的人中、或在癌症干预以后面临辐射 的患者中增加。慢性创伤（诸如静脉腿溃疡）需要长期护理，且花费非常大。此外，这样的 创伤经常在愈合的18个月内复发。在过去的40年中，潮湿创伤愈合的概念已经被普遍接 受，从而产生了数百种不同的敷料技术，它们的目的在于改善愈合过程的时间和质量。除了 传统的纱布以外，大多数目前可得到的敷料属于下述类别之一：泡沫、水胶体、水凝胶、海藻 酸盐和膜；前2种代表全球潮湿创伤敷料市场的最大份额。水胶体最常见地由羧甲纤维素、 明胶或果胶制成，且可以与海藻酸盐、透明质酸盐或胶原或其混合物相组合。涉及生物材料 (诸如胶原、透明质酸、壳聚糖、海藻酸盐或弹性蛋白）的敷料被称作生物敷料。
[0011] 由于胶原是细胞外基质（ECM)的最丰富蛋白，基于胶原的生物敷料已经被广泛地 开发，但是已经逐渐被新生代的敷料替代。
[0012] 已经证实，基于海藻酸盐的敷料能够促进细胞活性诸如附着和增殖（Thomas S.，J. Wound Care，2000, 9, 2, 56 ;Thomas S.，J. Wound Care，2000, 9, 3, 115 ;Thomas S.，J. Wound Care, 2000, 9, 4, 163) 〇
[0013] 由于假定的成纤维细胞形成的刺激和增加的与愈合有关的早期反应，壳 聚糖多糖已经被用于治疗烧伤和创伤（Paul W.，等人，1^11(1813;[011^61\41'1^· Organs, 2004, 18, 18) 0
[0014] 最后，存在多种含有透明质酸盐的敷料，其中透明质酸已经经过化学修饰，并同时 维持它的天然的生物相容性、生物可降解性和免疫原性缺乏。透明质酸是以高浓度存在于 皮肤和结缔组织中的内源多糖。在皮肤中，聚合的透明质酸可以结合水，从而形成辅助水合 和充盈的粘稠物质。因此，透明质酸随着老化的损失与增加的脱水和皮肤的起皱有关。除 了皮肤以外，透明质酸（即，HA)作为细胞内基质的核心组分也天然地存在于身体的不同的 其它组织（诸如肌腱、肌肉、软骨和玻璃体液）中，从而使得它非常适合靶向这些组织的生 物医学应用。
[0015] 基于HA的生物材料敷料的例子是这样的，其中HA :
[0016] V未经过修饰，如它的钠盐（例如，ialugen，Ibsa)，呈乳膏剂的形式或在含有4g ialugen的纱布垫中，用于局部施用。
[0017] V如在专利EP0216453中描述的，经由羧酸部分而完全地或部分地酯化（例如， HyaffTBy)，用于药物（例如，外科手术皮肤病学、眼科学、牙医学：Ballini A.，等人，Int. J. Med. Sci.，2009, 6, 2, 65)或化妆品领域中。这些HA-酯可以被挤出以产生膜和纤维，被低 压冻干以得到海绵状物，或通过喷雾干燥、提取和蒸发进行加工以产生微球。
[0018] V经由羟基部分而酯化（W02004013182)。
[0019] V与其它生物活性成分连接：
[0020] 〇紫杉醇，以防止外科手术后的粘着形成（Jackson J. K.，等人，Pharm. Res. , 2002, 19, 4, 411 ；W002090390)；
[0021] ο 氨苄西林（GB2207142);
[0022] V与下述物质交联以形成分子网络
[0023] οα羟酸的聚合物诸如聚乳酸（W02006069578) ;1，4_ 丁二醇二缩水甘油基醚； 1，3_二胺丙烷；多功能的环氧衍生物（ΕΡ0161887);或可以
[0024] 〇在葡萄糖胺残基的脱乙酰化的氨基部分与葡糖醛酸部分的羧酸基团之间 自交联，或在葡糖醛酸部分的羧酸基团与任何单元的羟基基团之间自交联（例如， US5676964B1，Hyalobarrier?，其在腹腔-骨盆外科手术以后充当保护和隔开组织的屏 障，并由此避免粘着并发症）。
[0025] V沉积在膜/纱布上。
[0026] 有些敷料可以进一步含有补充性的生物活性成分诸如抗生素、抗炎药、镇痛药或 生长因子或它们的混合物。这样的产品的非穷尽列表中的代表可以为：Solaraze?,它是 含有3%双氯芬酸（在2. 5%透明质酸中）的局部用凝胶，最近被批准用于治疗光化性角化 病；或Regranex，即含有重组人血小板衍生的生长因子-BB的凝胶，目前处于III期临床试 验中，用于神经病的糖尿病性溃疡。
[0027] W02007048522 公开了一种由透明质酸钠 （sodium hyaluronate acid)、甘氨酸和 脯氨酸和可能含有的赖氨酸和亮氨酸组成的乳膏组合物，其在快速的创伤愈合过程中可有 效地促进细胞再聚合。
[0028] W02010003797公开了具有不同分子量的基于HA的组合物，其用于治疗角膜创伤。 它声称，低分子量HA级分（即，51kDa和320kDa)会增进愈合过程，同时高分子量HA级分 (即，1500kDa)可能因为过于粘稠而不会促进的创伤愈合。
[0029] W02008015249公开了由高分子量HA和多胺（例如，腐胺（putrecine))的颗粒制 成的组合物，优选胶体，其用作填充剂（即，抗-皱纹填充剂或唇填充剂），用于治疗创伤 愈合和用于保护人皮肤免于紫外（UVA)辐射，但是也用于保护人皮肤对抗自由基的有害作 用。公开的唯一实验数据关注不同组合物的吸光度结果，因此被指示用作皮肤保护组合物。
[0030] 还已经将主要由交联的HA制成的水凝胶报道为聚合基质，其可用于培养细胞（例 如，形成软骨的细胞、形成骨的细胞、肌细胞、成纤维细胞和器官细胞）和将所述细胞植入 特定器官中（US6129761)。
[0031] 真皮填充剂是本领域众所周知，且通常由基于胶原和/或透明质酸的衍生物制 成。在过去，最广泛地使用的填充剂是基于牛或人胶原，且倾向于持续3-6个月。更近的填 充剂类别是基于透明质酸（HA)，它们之间在HA的交联模式（即，类型和程度）、粒度和制剂 方面存在差异。对这些参数中的每一种已经进行了大量研宄和精细调节，以产生有目的地 适合不同身体区域的填充剂。
[0032] 为了克服HA不稳定性和/或容易被透明质酸酶降解，在过去的十年中出现了具有 提高的半衰期的交联HA填充剂。普遍接受的是，具有低粘度的基于HA的真皮填充剂（诸 如轻度交联的和/或由低分子量组成的那些）在体内的持续时间短于高度交联的和/或由 高分子量HA组成的那些真皮填充剂。从高度修饰的HA衍生出的第二类填充剂通常是优选 的，因为所述填充剂不需要象低粘度填充剂那样频繁地注射给患者。
[0033] 已经于2003年12月得到FDA批准的第一类基于HA的交联的真皮填充剂是 Restylane?，即它在欧洲被批准以后7年。Restylane?也被称作非动物的稳定化的透明 质酸（NASHA)，是由具有大约100万分子量的透明质酸组成的可注射填充剂，其已经与两 臂交联剂（即，1，4- 丁二醇