憐脂，C)至少一种液晶硬化剂，和d)至少一种二价或多价金属盐制备，如果必要，通过加 热或使用均化器制备。所述均化器可W是高压均化器、超声均化器、珠磨化eadmill)均化 器等。
[0071] 如上所述，本发明的持续释放脂质预浓缩物可W是运样的药物组合物，其在不存 在水性流体时作为脂质液相存在并在水性流体存在下形成液晶。由于其表现为可W使用选 自注射、涂敷、滴注、填充、口服施用和喷雾的途径施用到身体的药物组合物，本发明的预浓 缩物优选地可W配制成多种剂型，包括注射剂、软膏剂、凝胶剂、洗剂、胶囊剂、片剂、溶液、 混悬剂、喷雾剂、吸入剂、滴眼剂、粘合剂、硬膏剂和压敏粘合剂，并且更优选配制成注射剂。 [007引具体地，当采取注射途径时，取决于使用的药理学活性物质的性质，本发明的预浓 缩物可通过皮下或肌内注射施用。
[0073] 本发明的药物组合物可W优选地采用选自下述的制剂形式：注射剂、软膏剂、凝胶 剂、洗剂、胶囊剂、片剂、溶液、混悬剂、喷雾剂、吸入剂、滴眼剂、粘合剂、硬膏剂和压敏粘合 剂，并且更优选地配制成注射剂。
[0074] 本发明的药物组合物可W通过将药理学活性物质添加到本发明的预浓缩物中而 制备。当需要时，可W在本发明的药物组合物的制备中使用加热或均化器，但是运不是本发 明的限制因素。
[00巧]本发明的药物组合物的剂量遵循所用的药理学活性物质的公知的剂量，并且可W 依据包括患者状况、年龄和性别在内的多种因素而改变。其可W口服或肠胃外施用。
[0076] 根据其另外的方面，本发明预期通过将本发明的药物组合物施用给包括人在内的 哺乳动物经由药理学活性物质的持续释放而保持药学功效的方法，和所述药物组合物用于 持续释放药理学活性物质的应用。
[0077] 发明的有益效果
[0078] 如迄今为止所述，基于在所形成的液晶内的二价或多价金属盐与阴离子药理学活 性物质之间的离子相互作用，根据本发明的持续释放脂质预浓缩物和药物组合物保证所述 药理学活性物质的极好的持续释放。
[0079] 附图简述
[0080] 图1是示意图，其显示在持续释放脂质预浓缩物内的二价或多价金属盐与阴离子 药理学活性物质之间的部分或完全的离子相互作用。
[0081] 图2显示实施例1和3的持续释放脂质预浓缩物、实施例21和27的药物组合物 和比较例3和5的脂质预浓缩物的体内生物降解性。
[0082] 图3显示实施例21与比较例21和29的组合物的药理学活性物质（嚷托漠锭 (tiotropiumbromide))的体内药物释放行为。
[0083] 图4显示实施例26与比较例22的组合物的药理学活性物质（棚替佐米）的体内 药物释放行为。
[0084] 图5显示实施例4与比较例22和27的组合物在暴露于水性流体后的相变行为。 [00财发明的方式
[0086] 通过下述实施例可W获得对本发明的更好的理解，描述所述实施例是为了举例说 明，而不应该解释为限制本发明。
[0087] 用于本发明的添加剂和赋形剂满足韩国药典的需要，并且购自Al化ich，Lipoid, Crod曰和Seppic。
[0088] 「连施俩I1-201制备巧含二价或《价舍属曲的胎质预浓缩物
[0089] W下表1给出的重量比，将液晶形成剂、憐脂、液晶硬化剂和二价或多价金属盐任 选地在溶剂中混合。
[0090] 在实施例1-20中，在保持在20~75°C的水浴中使用均化器（PowerGenmodel 125，Fisher)W1，000~3, 000巧m将所述物质均匀混合0. 5~3小时。然后，将得到的脂 质溶液放置在室溫W在25°C达到热平衡，然后装载到Icc一次性注射器中。将脂质溶液注 射到水（2g去离子水）中来提供本发明的包含金属盐的预浓缩物。
[00川[表U[0092]
[00巧] 「连施例21-321具有药理学活忡物质的药物紀合物
[0096] W下表2中给出的重量比，任选地在溶剂中混合液晶形成剂、憐脂、液晶硬化剂、 二价或多价金属盐和阴离子药理学活性物质。
[0097] 在实施例21-32中，在保持在20~75°C的水浴中使用均化器（PowerGenmodel 125,Fisher)W1, 000~3, 00化pm将所述物质均匀混合0. 5~3小时。将得到的脂质溶液 放置在室溫W在25°C达到热平衡，然后向其中加入下述各种药理学活性物质：嚷托漠锭， 异丙托漠锭（ipratropiumbromide)和棚替佐米。然后，将所述物质均化约1~5小时W 提供在溶液相中的药物组合物。
[0098][表 2]
阳…。「比巧俩I1-201制备不含二价或《价舍属曲的预浓缩物
[0102] W下表3中给出的重量比，在溶剂中混合液晶形成剂、憐脂和液晶硬化剂。
[0103] 在比较例1-20中，在保持在20~75°C的水浴中使用均化器（PowerGen model 125，Fisher) W 1，000~3,000巧m将所述物质混合0.5~3小时。然后，将得到的脂质溶 液放置在室溫W在25°C达到热平衡，然后装载到Icc一次性注射器中。将脂质溶液注射到 水（2g去离子水）中来提供根据比较例1-20的预浓缩物。
[0104] [表引
7]「比巧例21-261制备不含二价或《价舍属曲的药物紀合物[010引 W下表4中给出的重量比，任选地在溶剂中混合液晶形成剂、憐脂、液晶硬化剂和 阴离子药理学活性物质。
[0109] 在比较例21-26中，在保持在20~75°C的水浴中使用均化器（PowerGenmodel 125,Fisher)W1, 000~3, 00化pm将所述物质均匀混合约0. 5~3小时。将得到的脂质 溶液放置在室溫W在25°C达到热平衡，然后向其中加入下述各种药理学活性物质：嚷托漠 锭，异丙托漠锭和棚替佐米。然后，将所述物质均化约1~5小时W提供在溶液相中的药物 组合物。
[0110] [表 4]
。"引「比巧例27巧2引制备不含液晶形成剂的预浓缩物
[0114] 通过在保持在20~75°C的水浴中使用均化器（PowerGenmodel125,Fisher)W 1，000~3, 0(K)rpm将聚氧乙締脱水山梨醇单油酸醋、憐脂酷胆碱和生育酪乙酸醋均匀混合 约0. 5~3小时而制备比较例27和28的预浓缩物。此处，聚氧乙締脱水山梨醇单油酸醋 在脱水山梨醇极性头上具有取代-OH基团的聚氧乙締基团，并且与用于本发明的脱水山梨 醇单油酸醋不同。聚氧乙締脱水山梨醇单油酸醋通常用作亲水性表面活性剂。
[01"][表引
。…]「比巧例29巧301夫加裁到预浓缩物的阴离子药理学活忡物质的制剂
[0118] 对于比较例29的制剂，将2.2 yg嚷托漠锭加入到1血生理盐水中，然后在室溫均 化。
[0119] 比较例30的制剂通过在室溫将5mg棚替佐米溶解在7mL生理盐水和300y1乙醇 的混合物中而制备。 。120] 「连輪例1]体外安仓忡测定
[0121] 使用提取集落测定巧XtractionColonyAssay)进行细胞毒性检测，W检验本发 明的组合物的体外安全性。
[0122] 在18血补充有10 %胎牛血清的Eagle'S最小必需培养基（EMEM)中提取 (extracted)2g实施例I、5、21和27W及比较例3和5的各种组合物。将L929细胞（小鼠 成纤维细胞，美国典型培养物中屯、）W IxlO2个细胞/孔的密度接种到6孔平板中，并且在 37°C在5% %湿润的培养箱中稳定24小时。将提取物在EMEM中稀释（0, 5, 25, 50% )，然 后W2mL/孔的量放置与稳定的L929细胞接触。
[012引在37°C在5% %湿润的培养箱中培养7天后，用10%福尔马林溶液固定细胞，并 且用Giemsa溶液染色，W计数集落。结果总结在下表6中。
[0124][表6]
[0126] *相对集落形成率（％)=测试培养基上的集落数/0%培养基上的集落数 x100 (% )
[0127] **提取培养基％=提取培养基/(稀释的培养基+提取培养基）x100 (%)
[0128] 从表6的数据了解，比较例3和5的组在每种稀释培养基巧％，25%和50% )中 W正常速率生长，在实施例1、5、21和27W及比较例3和5的组之间观察到生长速率的相 似性。因此，证明本发明的脂质预浓缩物和药物组合物是对身体高度安全的。 。12引「连輪例21体内牛物降解忡测定
[0130] 如下评价本发明的组合物的体内生物降解性。
[013。 将实施例1、3、21和27的每种组合物W300mg的剂量皮下注射到SD大鼠的背部， 并且监测预定的时间。为了比较，W相同的方式检测比较例3和5的组合物。注射后一个 月对注射部位拍照，并且显示在图2中。
[0132] 在图2中可W看出，注射后一个月，在比较例3和5的组中，液晶凝胶体积减少到 初始体积的约1/3至2/3,运表明组合物的生物降解。
[0133] 类似地，在注射后一个月，施用实施例1、3、21和27的组合物的SD大鼠的肿胀组 织体积减少到初始体积的1/3至2/3。因此，本发明的组合物可W在体内降解到与比较例3 和5的那些相似的程度。
[0134] 为参照，已知常规广泛使用的持续释放基质PLGA[聚（乳酸-共-乙醇酸）]保持 不降解达2~3个月之久。
[0135] 因此，本发明的包含二价或多价金属盐的脂质预浓缩物表现出与不含金属盐的组 合物相似的生物降解性，并且克服了常规持续释放制剂的缺陷，即甚至在药物释放结束后 载体仍然在体内保留长时间。 阳13引「连輪例31体内檢测嚷巧演锭的持续释放
[0137] 在下述检测中检验嚷托漠锭自本发明的组合物的药物释放行为。
[0138] 使用一次性注射器，将实施例21的组合物W0. 4mg/kg的嚷托漠锭剂量皮下注射 到6只9周龄平均体重为300g的SD大鼠（雄性）中。
[0139] 使用LC-MS/MS(液相色谱-串联质谱）分析取自SD大鼠的血浆样品中的嚷托漠 锭浓度，W绘制PK特征曲线（药代动力学特征曲线）。