一种同时制备甜茶甙和甜茶总多酚的工艺的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天然产物化学技术领域，尤其涉及一种同时制备甜茶甙和甜茶总多酚的工艺。
【背景技术】
[0002]甜茶为我国独有生物资源，甜茶甙(Rubusoside)是甜茶的主要活性成分之一，由于甜茶甙的甜度约为蔗糖甜度的300倍，是一种甜度高，低热值，健康安全的天然甜味剂，已广泛应用于食品，保健等行业，因此，对甜茶甙的分离，纯化已有较多研究报道，且已有规模化的工业生产。甜茶总多酚也是甜茶叶主要活性成分之一，具有抗氧化、防辐射、防癌症等生物活性，尤其是甜茶多酚还具有抗炎、抗过敏的能力，对过敏性疾病如鼻炎、花粉症、皮炎、气喘等有明显改善作用，近年来引起了极大关注，其相关产品具有较好的应用前景。
[0003]尽管已有较多甜茶甙及甜茶多酚的研究报道，但绝大多是从甜茶叶中获取一种活性成分，而同时获取两种成分的工艺却鲜见报道。为了提高甜茶叶的综合利用，减少资源浪费，本文在现有提取甜茶甙的工艺基础上，通过改变甜茶甙的工艺流程，探索出一条同时制备甜茶甙和甜茶总多酚的工艺，简化了甜茶甙生产的工艺流程，提高甜茶甙产率的同时得到了总多酚产品。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种同时制备甜茶甙和甜茶总多酚的工艺，在提取甜茶叶主要活性成分甜茶甙的同时获取甜茶多酚的方法，提高甜茶的综合利用。
[0005]为实现上述目的，本发明采取的技术方案为:
[0006]一种同时制备甜茶甙和甜茶总多酚的工艺，包括如下步骤:
[0007]步骤一:将甜茶干叶与热水按1: 10的比例混合后，浸提两次，过滤，合并滤液得到甜茶提取液；
[0008]步骤二:将所得甜茶提取液通过D101、AB-8、LSA-10或SA-3大孔树脂富集甜茶甙，收集柱流液；
[0009]步骤三:将步骤二所得的甜茶甙富集柱用低浓度乙醇洗脱，收集洗脱液；并将步骤二所得的柱流液与低浓度乙醇洗脱液合并，浓缩至多酚浓度为2-3mg/ml后，用HPD-826、LSA-21或HPD-100大孔树脂吸附直至饱和；
[0010]步骤四:将步骤三所得的甜茶甙富集柱用75%乙醇洗脱，得75%乙醇洗脱液，经减压浓缩、干燥，得甜茶甙含量彡40%的产品；同时，将吸附饱和的HPD-826、LSA-21或HPD-100大孔树脂水洗，并用40 %乙醇洗脱，得40 %乙醇洗脱液浓缩，干燥，得多酚含量彡60%的产品；
[0011]步骤五:将步骤三所得的甜茶甙富集柱用75%乙醇洗脱后，将所得的75%乙醇洗脱液过聚酰胺柱精制，得聚酰胺柱流出液，经减压浓缩、干燥，得甜茶甙含量多70%的产品。
[0012]其中，所述步骤三中乙醇浓度不超过40%。
[0013]本发明具有以下有益效果:
[0014]本发明采用梯度洗脱的方式，将甜茶多酚，黄酮类化合物等与甜茶甙进行了初步分离，提高了甜茶甙的纯度，因而减少了纯化甜茶甙的过程，同时，少过了树脂，减少了纯化过程甜茶甙的损失，甜茶甙的产率得到明显提高；本发明不仅可以将甜茶甙富集柱的柱流液用于回收多酚，还将梯度洗脱中低浓度乙醇洗脱液用于回收多酚，使得多酚的产率较高。
【具体实施方式】
[0015]为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0016]实施例1
[0017]步骤一，称取干燥粉碎的甜茶叶15g，以料液比为1: 10用水回流提取两次，每次I小时，过滤合并滤液得到甜茶提取液300ml ;
[0018]步骤二，将甜茶提取液300ml以树脂2BV/h的流速缓慢通过30ml预处理好的DlOl大孔树脂；
[0019]步骤三，DlOl大孔树脂先用90ml35%的乙醇以3BV/h洗脱后再用90ml75%的乙醇以3BV/h洗脱；
[0020]步骤四，75%的乙醇洗脱液经减压浓缩、干燥得到甜茶甙产品0.96g，产率6.4%,纯度42%。
[0021]相同条件下如果用75%的乙醇一步洗脱，甜茶甙产品纯度仅有29%。
[0022]实施例2
[0023]步骤一，称取干燥粉碎的甜茶叶20g，以料液比为1: 10用水回流提取两次，每次I小时，过滤合并滤液得到甜茶提取液400ml ;
[0024]步骤二，将甜茶提取液400ml以树脂2BV/h的流速缓慢通过30ml预处理好的SA-3大孔树脂；
[0025]步骤三，SA-3大孔树脂先用210ml20%的乙醇以3BV/h洗脱后再用180ml75%的乙醇以3BV/h洗脱；
[0026]步骤四，75%的乙醇洗脱液经减压浓缩、干燥得到甜茶甙产品1.48g，产率7.4%,纯度44%。
[0027]相同条件下如果用75%的乙醇一步洗脱，甜茶甙产品纯度仅有32%。
[0028]实施例3
[0029]步骤一，称取干燥粉碎的甜茶叶20g，以料液比为1: 10用水回流提取两次，每次I小时，过滤合并滤液得到甜茶提取液400ml ;
[0030]步骤二，将甜茶提取液400ml以树脂2BV/h的流速缓慢通过30ml预处理好的SA-3大孔树脂；
[0031]步骤三，SA-3大孔树脂先用210ml20%的乙醇以3BV/h洗脱后再用180ml75%的乙醇以3BV/h洗脱；
[0032]步骤四，75%的乙醇洗脱液以lBV/h过90ml聚酰胺柱，收集聚酰胺柱过柱流出液；
[0033]步骤五，聚酰胺柱过柱流出液经减压浓缩、干燥得到甜茶甙产品0.68g，产率3.4%，纯度 72%。
[0034]相同条件下如果用75%的乙醇一步洗脱，甜茶甙产品纯度仅有56%。
[0035]实施例4
[0036]步骤一，称取干燥粉碎的甜茶叶20g，以料液比为1: 10用水回流提取两次，每次I小时，过滤合并滤液得到甜茶提取液400ml ;
[0037]步骤二，将甜茶提取液400ml以树脂2BV/h的流速缓慢通过30ml预处理好的SA-3大孔树脂，收集过柱流出液；
[0038]步骤三，SA-3大孔树脂先用210ml20%的乙醇以3BV/h洗脱后再用180ml75%的乙醇以3BV/h洗脱，180ml75%的乙醇洗脱液按案例2提取甜茶甙；
[0039]步骤四，合并400mlSA-3大孔树脂过柱流出液和21ml20%的乙醇洗脱液，得到浓度为2.4mg/ml的多酚溶液610ml ;
[0040]步骤五，将610ml多酚溶液以2BV/h通过300mlHPD_826大孔树脂吸附；
[0041]步骤六:将吸附多酚的HPD-826树脂先用水洗，然后用900ml40%乙醇洗脱；
[0042]步骤七、最后将40%乙醇洗脱液浓缩、干燥得到多酚产品2.04g，产率10.2%，纯度61 %，多酚提取率达到6.2%。
[0043]现有生产甜茶甙的工艺中，甜茶甙富集柱经75%乙醇一步洗脱得到洗脱液，由于乙醇浓度较高，在甜茶甙洗脱下来的同时，也将多酚，黄酮等也洗脱下来，因此，甜茶甙纯度不高，只有再过聚酰胺进一步精制才能纯度达到40%以上；如果需要纯度大于70%的甜茶素产品，洗脱液则需过732阳离交换柱、707阴离交换柱、聚酰胺树脂才能得到。本发明在原工艺的基础上，对甜茶甙富集柱采用梯度洗脱的方式，先用低浓度乙醇将部分黄酮，多酚等杂质洗脱下来，再用75%乙醇将甜茶素洗脱，这样，75%乙醇洗脱液中的多酚、黄酮等的含量大幅度减少，甜茶素的纯度就得到了提高，再次纯化甜茶素的步骤即可减少，75%乙醇洗脱液不再过柱，经减压浓缩、干燥即可得到甜茶甙含量多40%的产品，如果需要纯度大于70 %的甜茶素产品，75 %乙醇洗脱液只需再过聚酰胺树脂即可。
[0044]本具体实施解决了提取甜茶甙的工艺中，甜茶多酚废弃的问题，提高甜茶的综合利用，而且甜茶甙、甜茶多酚制备工艺简单，易于操作，成本低，乙醇可回收，大孔树脂可再生，均可反复利用，产品纯度较高，溶剂仅为水和乙醇，符合工业绿色化要求。
[0045]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种同时制备甜茶甙和甜茶总多酚的工艺，其特征在于，包括如下步骤: 步骤一:将甜茶干叶与热水按1: 10的比例混合后，浸提两次，过滤，合并滤液得到甜茶提取液； 步骤二:将所得甜茶提取液通过DlOl、AB-8、LSA-10或SA-3大孔树脂富集甜茶甙，收集柱流液； 步骤三:将步骤二所得的甜茶甙富集柱用低浓度乙醇洗脱，收集洗脱液；并将步骤二所得的柱流液与低浓度乙醇洗脱液合并，浓缩至多酚浓度为2-3mg/ml后，用HPD-826、LSA-21或HPD-100大孔树脂吸附直至饱和； 步骤四:将步骤三所得的甜茶甙富集柱用75%乙醇洗脱，得75%乙醇洗脱液，经减压浓缩、干燥，得甜茶甙含量彡40%的产品；同时，将吸附饱和的HPD-826、LSA-21或HPD-100大孔树脂水洗，并用40%乙醇洗脱，得40%乙醇洗脱液浓缩，干燥，得多酚含量多60%的产品; 步骤五:将步骤三所得的甜茶甙富集柱用75%乙醇洗脱后，将所得的75%乙醇洗脱液过聚酰胺柱精制，得聚酰胺柱流出液，经减压浓缩、干燥，得甜茶甙含量多70%的产品。2.根据权利要求1所述的一种同时制备甜茶甙和甜茶总多酚的工艺，其特征在于，所述步骤三中乙醇浓度不超过40%。
【专利摘要】本发明公开了一种同时制备甜茶甙和甜茶总多酚的工艺，对甜茶甙富集柱采用梯度洗脱的方式，先用低浓度乙醇将部分黄酮，多酚等杂质洗脱下来，再用75％乙醇将甜茶素洗脱，这样，75％乙醇洗脱液中的多酚、黄酮等的含量大幅度减少，甜茶素的纯度就得到了提高，再次纯化甜茶素的步骤即可减少，75％乙醇洗脱液不再过柱，经减压浓缩、干燥即可得到甜茶甙含量≥40％的产品，如果需要纯度大于70％的甜茶素产品，75％乙醇洗脱液只需再过聚酰胺树脂即可。本发明在提取甜茶叶主要活性成分甜茶甙的同时获取甜茶多酚的方法，提高甜茶的综合利用。
【IPC分类】C07H1/08, C07H15/256, A61K36/185
【公开号】CN105213441
【申请号】CN201510700707
【发明人】廖莉玲, 鲍晨阳, 崔紫姣, 陈显刚
【申请人】贵州师范大学
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年10月16日