牛樟芝化合物在制备治疗肾脏疾病的药物中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种分离自牛樟芝的化合物的医疗用途，特别是涉及一种牛樟芝化合 物在制备治疗肾脏疾病的药物的用途。
【背景技术】
[0002] 牛樟芝（Antrodia camphorata)，又称樟芝、牛樟燕或红樟芝等，属于非裙菌目 (Aphyllophorales)、多孔菌科（Polyporaceae)的多年生蕈菌类，为台湾特有种真菌，仅生 长于台湾保育类树种-牛樟树（Cinnamoumkanehirai Hay)的中空腐朽心材内壁上。由于 牛樟树分布数量极为稀少，加上人为的盗伐，使得寄生于其中方能生长的野生牛樟芝数量 更形稀少，且由于其子实体生长相当缓慢，生长期亦仅在六月至十月之间，因此价格非常昂 贵。在台湾民俗医学上，牛樟芝具有解毒、减轻腹泻症状、消炎、治疗肝脏相关疾病及抗癌 等功用。牛樟芝如同一般食药用的蕈菇类，具有许多复杂的成分，已知的生理活性成分中， 包括：三廠类化合物（triterpenoids)、多醣体（polysaccharides,如β-D-葡聚醣）、腺 苷（adenosine)、维生素（如维生素 B、烟碱酸）、蛋白质（含免疫球蛋白）、超氧歧化酵素 (superoxide dismutase，S0D)、微量元素（如：|丐、磷、锗）、核酸、固醇类以及血压稳定物质 (如antodia acid)等，此些生理活性成分被认为具有抗肿瘤、增加免疫能力、抗过敏、抗病 菌、抗高血压、降血糖及降胆固醇等多种功效。同时在近年来，已开始陆续发现其中的特定 成分可能具有抗发炎的功效，特别是可用于治疗肾脏疾病等。
[0003] -般常见的肾脏疾病，常是透过攻击肾丝球而影响肾脏功能。肾丝球疾病包括多 种基因及环境因素所导致的许多病症，但不外乎主要分成肾丝球硬化症及肾丝球肾炎两大 类。肾丝球硬化症是指肾脏中的肾丝球硬化。一般是指肾脏的微血管、肾丝球、及用以从血 液过滤尿液的肾脏功能单元损伤。尿蛋白（尿液中量最多的蛋白质）是肾丝球硬化症的讯 号之一。肾脏损伤会影响肾脏过滤功能，且造成蛋白由血液渗漏至尿液中。然而，肾丝球硬 化症仅为尿蛋白许多的成因之一。而肾脏切片可能为一判断病人是否罹患肾丝球硬化症或 其他肾脏疾病的必要判断依据。肾丝球硬化症，可特别意指局部性肾丝球硬化症（FSGS)及 结节性肾丝球硬化症。
[0004] 局部性肾丝球硬化症（FSGS)是以局部肾丝球硬化及足细胞足突扁平化（foot process effacemen)的损伤特征来判断。近20年的研究显示，患有FSGS病患其末期肾脏 疾病发生率介于13至78%之间。虽然FSGS病源及发病原因尚未清楚，但主要应该是起因 于肾丝球上皮细胞本身损害，而导致肾丝球中复杂的反应产生，进而造成肾丝球硬化。
[0005] 结节性肾丝球硬化症或毛细血管间肾小球肾炎，亦可称之为糖尿病肾脏病变（糖 尿病肾病）或基-威二氏症（Kimmelstiel-Wilson syndrome),是一种进行性肾并，其是起 因于肾丝球的毛细血管病变。此病的特征为肾病变及弥漫性肾丝球硬化；并起因于长时间 罹患糖尿病，且各国的主要治疗方式为洗肾。
[0006] 截至目前为止，虽然类固醇及免疫制剂为主要用于治疗罹患原发性FSGS的方法， 但此些疗法对于肾损伤发展的治疗上效果仍然有线，且因其会产生各种副作用，故治疗方 法仅仅是基于经验法则，而较少根据病理证据。
[0007] 肾丝球肾炎则意指肾脏膜组织的发炎反应，其中膜组织是具有过滤功能，而可从 血液中分离废弃物及多于流体。
[0008] 最常见的肾丝球肾炎为免疫球蛋白A型肾丝球肾炎（IgAN)，造成此肾炎加速发展 的病因仍无法预测，且临床上仍无法预防及治疗，故被视为可能会造成肾病的慢性肾衰竭 的主要因素之一。因此，在IgAN病患的肾脏中，即便其他免疫上、临床上及病理上的因素阶 会造成肾衰竭，但系统性T细胞活化及淋巴球/巨噬细胞/嗜中性白血球浸润等不正常增 加，被视为造成IgAN转换成慢性肾衰竭的主要过程之一。再者，氧化压力亦为主要造成病 患中及动物模型中IgAN增加及发展的因素；曾有报导指出，在多数的人类及实验性肾病中 (包括IgAN)，活性氧（R0S)会直接引发疾病。
[0009] 虽然醣质皮质固醇（glucocorticoid steroid)已广泛应用在治疗IgAN病患，但其 对于IgAN的维持肾脏功能且减缓尿蛋白的效果仍不清楚，且因长时间使用所导致的潜在 无法控制的抑制免疫反应的副作用，仍造成用药上的问题。
[0010]目前诸多的实验已得知牛樟芝萃取物具有诸多医疗功效，且其所含成分亦陆续被 分析出，但牛樟芝萃取物中是否具有其他可有效治疗肾脏疾病的化合物，仍是亟待解决之 一课题。
【发明内容】
[0011] 据此，本发明是主要针对两种萃取自牛樟芝的化合物，检测其是否具有可治疗肾 脏疾病以及抗肾脏发炎的效果。
[0012] 本发明的一目的是提供一种牛樟芝化合物在制备治疗肾脏疾病的药物的用途，该 化合物以式I表示：
[0014] 其中，该肾脏疾病为肾丝球硬化症或肾丝球肾炎。
[0015] 较佳地，其中该肾丝球硬化症为局部性肾丝球硬化症（FSGS)或结节性肾丝球硬 化症。
[0016] 较佳地，其中该肾丝球肾炎为免疫球蛋白A型肾丝球肾炎（IgAN)。
[0017] 在上述化合物中，LT1对于肾炎细胞皆具有抗氧化的效果，由此可知，未来可利用 上述牛樟芝化合物于制备治疗肾脏疾病的药物，可预期地对于目前已知的肾脏疾病，包括 肾丝球硬化症及肾丝球肾炎，特别是局部性肾丝球硬化症（FSGS)、结节性肾丝球硬化症、免 疫球蛋白A型肾丝球肾炎（IgAN)等皆具有抗发炎的功效。
【附图说明】
[0018] 图1A和图1B图分别表示2种牛樟芝化合物的细胞存活率分析（MTT cell viability assay)的结果。
[0019] 图2A和图2B分别表示2种牛樟芝化合物对于抗氧化的测定结果。
[0020] 图3A和图3B分别表示2种牛樟芝化合物进行抗发炎反应（MCP-1)的分析结果。
【具体实施方式】
[0021] 本发明主要针对两种萃取自牛樟芝的化合物，检测其是否具有可治疗肾脏疾病以 及抗肾脏发炎的效果。Antrocamol LTl、Antrocamol LT2为发明人发现的新化合物，以下将 提供上述的萃取及结构鉴定数据。
[0022] 牛樟芝成分的萃取
[0023] 取牛樟芝（Antrodia camphorata)菌丝体、子实体或二者的混合物（1. 0kg)以10 倍量的酒精抽取2次后，合并浓缩可得粗抽物约230g (LT-E)，粗抽物以二氯甲烷/水（1:1) 进行分配萃取法3次，分为二氯甲烷层约102. 6g (LT-E-D)及水层约127. 4g (LT-E-W)，取二 氯甲烷层6. 0g以硅胶柱层析法经过正己烷/二氯甲烷（1:4)、二氯甲烷、甲醇/二氯甲烷 (5:95)的溶媒分离，分为 ANCA-E-D-1、ANCA-E-D-2、ANCA-E-D-3、ANCA-E-D-4 等四层。
[0024] 依据上述结果，将ANCA-E-D-2及ANCA-E-D-3进一步进行纯化，将ANCA-E-D-3层 经制备型逆相柱层析法（C-18逆相层析管柱）以80% Me0H/H20在18. 75分钟附近可得一 新化合物Antrocamol LT1约150mg，而LT-E-D-2层经制备型逆相柱层析法（C-18逆相层析 管柱）以80% Me0H/H20在25. 10分钟附近可得另一新化合物Antrocamol LT2约170mg。
[0025] Antrocamol LT1为无色的液体产物，经分析该化合物的分子式为C24H3S05，分子量 为406,完整中文英名称为4-羟基-2, 3-二甲氧基-6-甲基-5-(9-羟基-3, 7, 11-三甲 基-2, 6, 10-十二碳三烯）_2_ 环己烯酮、4-hydroxy-5-[9_hydroxy-3, 7, ll-trimethyldode ca_2, 6, l0-trienyl]_2, 3-dimethoxy-6-methyl-cyclohex-2_enone〇
[0026] LT1 结构鉴定数据"H-NMRGOOMHz, CDC13) : 1. 12 (3H, d, J = 7. 2Hz,), 1.61(3H ,s), 1. 64 (3H, s), L 66 (3H, s), 1. 68 (3H, s), 1. 72 (1H, m), L 98 - 2. 30 (8H), 2. 51 (1H, dq, J =11. 6, 7. 2Hz), 3. 62(3H, s), 4. 02(3H, s), 4. 33(1H, d, J = 2. 8Hz), 4. 35 (1H, dt, J = 9. 2, 4. 0Hz), 5. 09 (1H, d, J = 8. 4Hz), 5. 14 (1H, t, J = 7. 2Hz), 5. 15 (1H, t, J = 7. 2Hz) ；13C- NMR (100MHz, CDC13) : 12. 17 (q)，15. 95 (q)，16. 19 (q)，18. 13 (q)，25. 72 (q)，25. 93 (t)，26. 78 (t), 39. 41 (t), 39. 98 (d), 43. 29 (d), 47. 94 (t), 58. 81 (q), 60. 48 (q), 65. 35 (d), 67