转移素衍生物及其用途的制作方法

专利名称：转移素衍生物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新颖的转移素(metastin)衍生物及其用途。
背景技术：
已经公知癌症是全球导致死亡的主要病因之一。最近治疗癌症的策略已经集中于转移。在该方法中，癌症细胞从恶性肿瘤上脱落并然后侵袭周围或远的组织，并在那里增殖。已经发现KiSS-1基因的产物抑制人黑素瘤和乳腺癌症的转移。
KiSS1肽最初确定为在C8161黑素瘤细胞中分化上调，所述的细胞已经利用微细胞-介导的人染色体的转移使其不具有转移性。(Lee，JH等，J NatlCancer Inst 1996，88，1731-7).。已经发现KiSS1转染进入人黑素瘤和乳腺癌细胞可防止这些细胞转移并不会导致细胞增殖。(Lee，JH等，Cancer Res 1997，57，2384-87)。此外，已经表明KiSS1基因产物通过减少NF-κB与启动子的结合抑制92-kDa 4型胶原酶(MM对9)表达。(Yan，C.等，J Biol Chem 2001，276，1164-72)。发现KiSS1基因产物在正常的人胎盘、睾丸、脑、胰腺和肝脏中表达。(Muir，AI等，J Biol Chem 2001，276，28969-75)。
KiSS-1编码145-氨基酸残基肽，其通过进一步的加工成C-端酰胺化的最终54-氨基酸肽。54个氨基酸肽称为“metastin”，为已知为OT7T175或AXOR 12的G-蛋白-偶联的孤儿受体的配体。(Muir，AI.等，supra；Ohtaki，T，等，Nature 2001，411，613-7；Hori，A.等，Biochem Biophys Res Commun 2001，286，958-63；Kotani，M.等，J Biol Chem 2001，276，34631-6).。该受体与大鼠孤儿七螺旋区受体GPR54高度同源(Lee，DK.等，FEBS Lett 1999，446，103-7)(81％氨基酸一致性)，暗示这两种受体为直向同源。转移素增强粘着斑激酶的表达和活性，并减弱体内hOT7T175转染的B16-BL6黑素瘤的肺转移。(Ohtaki，T.等，supra.)。也发现转移素体外抑制hOT7T175转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的趋化性和侵袭，并活化磷脂酶C以及释放花生四烯酸以及磷酸化ERK。(Hori，A.等，supra和Kotani，M.等，supra.)。尽管这些通路典型地诱导细胞增殖，没有观察到细胞生长的变化。
KiSS1基因位于人染色体1q32-q41上。(West，A.等，Genomics 1998，54，145-8)。但是，后来的实验证据暗示KiSS1的表达很可能被位于介于6q16.3-q23之间的40-cM区域的一种基因或多种基因调节。(Lee，JH.等，JNatl Cancer Inst 1996，88，1731-7)。在胰腺癌症中，经常观察到6q、8p、9p、17p和18q位点并且这些改变倾向于引起淋巴结转移以及较远的转移，暗示在这些区域存在负责胰腺癌转移的一种转移抑制子基因或多种基因。(Rigaud，G，等，Int J Cancer 2000，88，772-7；Yatsuoka，T.等，Am J Gastroenterol2000，95，2080-5；Harada，T.等，Oncology 2002，62，251-8).。这些结果暗示胰腺癌症与转移素的表达下调有关。此外，与正常的组织相比，在其他的癌症如卵巢和乳腺癌以及甲状腺乳突癌症中，转移素受体hOT7T175的过表达已经得到证实(Muir，AI.等，supra；Ohtaki，T.等，supra)，尽管转移素自身在肿瘤组织中过表达更不常见。(Lee，JH.等，supra)。KiSS-1的表达，即，转移素的产生以及其受体在胰腺癌中的表达迄今为止还未研究。类似地，对内源性表达受体的癌症细胞运动的影响还没有进行研究。
这些发现表明KiSS1-hOT7T175充当转移抑制子系统。由于转移素抑制癌症细胞的转移且不影响正常细胞的细胞生长活性，迫切期望靶向转移素受体以治疗癌症。因此，期望具有结合转移素受体的化合物，抑制癌症转移和/或抑制癌症增殖。此外，有用地具有转移抑制活性并可用来治疗急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症的化合物。
WO00/24890公开了人转移素，WO01/75104公开了小鼠或大鼠转移素并且WO02/85399公开了包括转移素的缓释制剂。这些参考公开了转移素可抑制癌症转移。但是，期望发展抑制癌症转移和癌症增殖并可用作癌症治疗有用的治疗剂的化合物。
发明概述本发明者发现通过对相应于或类似于转移素氨基酸序列部分的肽进行一定的修饰，得到的衍生物是稳定的并且显示突出的癌症转移抑制活性和癌症增殖抑制活性。
本发明提供了下式表示的转移素衍生物X-AA1-AA2-AA3-AA4-Z(I)
其中X为下式表示的基团 其中Y为下式表示的基团 或(v)
其中R1、R2、R3和R4各自选自氢原子或C1-6烷基；W1和W2各自选自氢原子、C1-6烷基、C6-14芳基或杂环基；R为下式表示的基团 或 n为0、1或2；AA1为天然或非天然的芳香族氨基酸；AA2为Gly、Ala、Pro或Pic；AA3为脂肪族氨基酸；AA4为碱性氨基酸或瓜氨酸；Z选自(i)天然或非天然的芳香族氨基酸，或其酰胺，或其酯，(ii)下式表示的基团 其中n1为0、1或2(iii)下式表示的基团 其中n2为0、1或2，或(iv)下式表示的基团
其中n2为0、1或2，或其盐；本发明还提供了如上定义的转移素衍生物(I)，其为4-[N，N-双(2-吡啶基甲基)氨基甲基]苯甲酰基-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NH2(FM052a)(SEQ ID NO4)、4-(胍基甲基)苯甲酰基-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NH2(FM053)(SEQ ID NO3)或其盐。
本发明还提供了如上定义的转移素衍生物(I)或其盐的前药。
本发明还提供了药物组合物，包括如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。本发明的药物组合物为用于抑制癌症转移的有用药物或用于抑制癌症增殖的有用药物。本发明的药物组合物也为预防或治疗癌症的有用药物。
本发明的药物组合物还为调节胰腺功能的有用药物。本发明的药物组合物尤其为用于预防或治疗急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症的有用药物。
本发明还提供了药物组合物，包括如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药，其为调节胎盘功能的有用药物。
本发明还提供了药物组合物，包括如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药，其为预防或治疗纤毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂质代谢障碍或引产的有用的药物。
本发明还提供了一种用于抑制哺乳动物中癌症转移或抑制癌症增殖的方法，所述的方法包括对哺乳动物施用有效量的如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种用于预防或治疗哺乳动物中癌症的方法，所述的方法包括对哺乳动物施用有效量的如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种调节哺乳动物胰腺功能的方法，所述的方法包括对哺乳动物给予有效量的如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种用于预防或治疗哺乳动物中急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症的方法，所述的方法包括对哺乳动物给予有效量的如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种调节哺乳动物胎盘功能的方法，所述的方法包括对哺乳动物施用有效量的如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种用于预防或治疗哺乳动物中纤毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂质代谢障碍或引产的方法，所述的方法包括对哺乳动物施用有效量的如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种用于抑制癌症转移的药物或用于抑制癌症增殖的药物，包括如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种用于预防或治疗癌症的药物，包括如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种用于调节哺乳动物胰腺功能的药物，包括如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种用于预防或治疗急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症的制剂，包括如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种用于调节胎盘功能的药物，包括如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了一种用于预防或治疗纤毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂质代谢障碍或引产的药物，包括如上定义的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
本发明还提供了转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于抑制癌症转移或抑制癌症增殖的药物中的用途。
本发明还提供了转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于预防或治疗癌症增殖的药物中的用途。
本发明还提供了转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于调节哺乳动物胰腺功能的药物中的用途。
本发明还提供了转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于预防或治疗哺乳动物的急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症的药物中的用途。
本发明还提供了转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于调节哺乳动物的胎盘功能的药物中的用途。
本发明还提供了转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于预防或治疗哺乳动物中纤毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂质代谢障碍或引产的药物中的用途。
附图简述

图1A显示了转移素mRNA在胰腺癌症组织中的表达。
图1B显示了hOT7T175 mRNA在胰腺癌症组织中的表达。
图2显示了KiSS-1 mRNA和hOT7T175 mRNA在6种胰腺癌症细胞株中的表达。
图3显示了转移素对胰腺癌症细胞生长(AsPC-1和Panc-1)的影响。线条为平均值±SD。
图4A显示了用标示的转移素浓度作用12小时的AsPC-1和Panc-1迁移分析。线条为平均值±SD。*表示相对于对照p＜0.01。
图4B显示用转移素处理12小时后AsPC-1和Panc-1细胞的侵袭分析。线条为平均值±SD。*表示相对于对照p＜0.01。
图5A显示了用转移素处理以后AsPC-1细胞和Panc-1细胞中MAPK激活的蛋白印迹分析。
图5B显示了用转移素处理后AsPC-1和Panc-1细胞中的pERK1/2和pp38的相对强度。结果为3个独立实验的代表。线条为平均值±SD。*表示相对于AsPC-1，p＜0.01。
图6显示KiSS-1肽的肽序列(SEQ ID NO2)以及其衍生物(按照出现的顺序分别地表示SEQ ID NOS 1、3 & 4)。
图7A显示用KiSS-1的短衍生物进行的Panc-1的增殖分析。
图7B显示用这些衍生物进行的Panc-1迁移分析。线条为平均值±SD。*表示相对于对照p＜0.05。
图7C显示了两种衍生物的连接对MAPK的激活。
发明详述在结构式中，X为下式表示的基团 其中各符号具有如上定义的相同的含义。
Y为下式表示的基团
或 其中R1至R4各自选自氢原子或C1-6烷基，并且W1和W2各自选自氢原子、C1-6烷基、C6-14芳基或杂环基。
C1-6烷基包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基等。在一个实施方案中，C1-3烷基如甲基、乙基是优选的。
在一种实施方案中，Y为Y3，R1至R4各自优选地为氢原子。
C6-14芳基包括苯基、1-萘基、2-萘基、2-联苯基、3-联苯基、4-联苯基和2-蒽基。
用于W1和W2的杂环基包括5～14员(单环、二环或三环的)杂环基，除碳原子以外，包含1～4个选自氮原子、硫原子和氧原子的杂原子。优选地使用(i)5～14员(优选地5～10员)芳香性杂环基，(ii)5～10员非芳香性杂环基或(iii)从7～10员杂环桥环等上去除任意一个氢原子得到的一价基团和6员芳香性杂环基。杂环基的具体的实例包括，但不限于，芳香性杂环基如噻吩基(2-噻吩基、3-噻吩基)、呋喃基(2-呋喃基、3-呋喃基)、吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基)、噻唑基(2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基)、噁唑基(2-噁唑基、4-噁唑基)、喹啉基(2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基、5-喹啉基、8-喹啉基)、异喹啉基(1-异喹啉基、3-异喹啉基、4-异喹啉基、5-异喹啉基)、吡嗪基(pirazinyl)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基)、吡咯基(1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基)、咪唑基(1-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基)、吡唑基(1-吡唑基、3-吡唑基、4-吡唑基)、哒嗪基(3-哒嗪基、4-哒嗪基)、异噻唑基(3-异噻唑基)、异噁唑基(3-异噁唑基)、吲哚基(1-吲哚基、2-吲哚基、3-吲哚基)、2-苯并噻唑基、苯并[b]噻吩基(2-苯并[b]噻吩基、3-苯并[b]噻吩基)、苯并[b]呋喃基(2-苯并[b]呋喃基、3-苯并[b]呋喃基)等，以及非-芳香性的杂环基如吡咯烷基(1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基)、噁唑烷基(2-噁唑烷基)、咪唑啉基(1-咪唑啉基、2-咪唑啉基、4-咪唑啉基)、哌啶基(1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基)、哌嗪基(1-哌嗪基、2-哌嗪基)、吗啉基、硫吗啉基等。
优选的W1和W2的实例包括2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基等。
在优选的实施方案中，Y选自Y3、Y5、N，N-双-(2-吡啶基甲基)氨基和4-胍基。
R为 或 在一种实施方案种，R优选地为
在本发明的化合物中，n为0、1或2。在一种实施方案中，n＝1更优选。
优选的X的实例为4-(N，N-双-(2-吡啶基甲基)氨基甲基)苯甲酰基或4-(胍基甲基)苯甲酰基。
AA1为天然或非天然的芳香族氨基酸。有用的芳香族氨基酸的实例包括Phe、Trp、Tyr、His或1-或2-萘基丙氨酸。在一些实施方案中，AA1优选为Phe。
AA2选自Gly、Ala、Pro或Pic。优选的AA2的实例为Gly、D-Ala、D-Pro或D-Pic。在一种实施方案中，AA2优选为Gly。
AA3为脂肪族氨基酸。有用的脂肪族氨基酸的实例包括Leu、Ile、Val、NIe、Ala和Met。在一种实施方案中，AA3优选为Leu。
AA4为碱性氨基酸或瓜氨酸。有用的碱性氨基酸的实例为Arg、Lys或Orn。在一种实施方案中，AA4优选为Arg。
Z选自(i)天然或非天然的芳香族氨基酸，或其酰胺，或其酯，(ii)下式表示的基团 其中n1为0、1或2，(iii)下式表示的基团 其中n2为0、1或2，或(iv)下式表示的基团
其中n2为0、1或2，或其盐。
对Z有用的芳香族氨基酸的实例包括Phe、Trp、Tyr、His或1-或2-萘基丙氨酸的酰胺。在一个实施方案中，Z优选为Trp的酰胺。
优选的本发明的转移素衍生物(I)的实例为在下述制备实施例中产生的化合物。最优选的本发明的转移素衍生物包括FM052a和FM053a。
本发明的转移素衍生物(I)可通过本领域中公知的合成肽的方法进行制备。合成肽的方法可为，例如，或者通过固相合成方法或液相合成方法。即，最终肽可通过缩合构成本发明肽的部分肽或氨基酸以及剩余部分进行制备，当产物具有保护基的时候，去除保护基。已知的缩合方法以及去除保护基的方法的实例包括在下述(1)～(5)中记载的方法，这里以其整体引入作为参考(1)M.Bodanszky和M.A.Ondetti，Peptide Synthesis，IntersciencePublishers，New York(1966)；(2)Schroeder and Luebke，The Peptide，Academic Press，New York(1965)；(3)Nobuo Izumiya等，Fundament and Experiment of Peptide Synthesis，Maruzen(K.K.)(1975)；(4)Haruaki Yazima and Syunpei Sakakibara，Biochemistry ExperimentalCourse 1，Protein Chemistry IV，205，(1977)；以及(5)Supervised by Haruaki Yazima，Development of Medicaments，secondseries，vol.14，Peptide Synthesis，Hirokawa Shoten.
此外，反应之后，本发明的肽可通过组合常规的纯化方法进行分离和纯化，例如，溶剂萃取、蒸馏、柱层析、液相层析以及重结晶。当用上述方法得到的肽是游离肽的时候，可利用已知的方法将其转化成合适的盐，并且相反地，当得到的肽是盐的形式的时候，可利用已知的方法转化成游离肽。
关于保护的氨基酸或肽的缩合，可以使用用于肽合成的多种活化剂，具体地三取代的鏻盐(trisphosphonium salt)、四甲基脲盐(tetramethyluraniumsalt)、碳二亚胺是合适的。三取代的鏻盐的实例包括苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸(PyBOP)、溴三(吡咯烷基)鏻盐六氟磷酸(PyBroP)和7-氮杂苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸(PyAOP)，四甲基脲盐的实例包括2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-六氟磷酸盐(HBTU)、2-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-六氟磷酸盐(HATU)、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU)、2-(5-降冰片烯-2，3-二羧基酰亚胺基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(TNTU)和O-(N-琥珀酰亚胺基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(TSTU)，并且碳二亚胺的实例包括DCC、N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIPCDI)和N-乙基-N’-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI·HCl)。缩合的时候，优选加入消旋化抑制剂(如HONB、HOBt、HOAt、HOOBt等)。用于缩合的溶剂适当地选自已知用于肽缩合反应中的溶剂。例如，使用酰胺类如无水或含水的N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮，卤代烃如二氯甲烷和氯仿，醇如三氟乙醇和苯酚，亚碸类如二甲基亚碸，叔胺如吡啶，醚类如二噁烷和四氢呋喃，腈类如乙腈和丙腈，酯如乙酸甲酯和乙酸乙酯，或其合适的混合物。反应温度从肽连接形成反应中使用的公知的温度范围之内进行适当地选择，并且通常在约-20℃至50℃的温度范围之内选择。活化的氨基酸衍生物通常过量1.5～6-倍使用。在固相合成的情形下，当缩合不足以用茚三酮反应判断结果的时候，足够的缩合可通过不去除保护基的反复进行缩合反应来实现。当利用反复的反应不能实现足够的缩合的时候，未反应的氨基酸可利用乙酸酐或乙酰基咪唑进行酰化，不对后续反应带来任何影响。
可用于原料的氨基的保护基的实例包括Z、Boc、叔戊基氧基羰基、异龙脑基氧基羰基、4-甲氧基苄基氧基羰基、Cl-Z、Br-Z、金刚烷基氧基羰基、三氟乙酰基、邻苯二甲酰基、甲酰基、2-硝基苯基亚磺酰基、二苯基硫膦基(phosphinothioyl)、Fmoc或本领域中公知的其他基团。羧基保护基的实例包括，除了前述的C1-6烷基以外，C3-8环烷基和C7-14芳烷基作为R，烯丙基、2-金刚烷基、4-硝基苄基、4-甲氧基苄基、4-氯苄基、苯甲酰甲基、苄基氧基羰基肼、叔丁氧基羰基肼、三苯甲基肼、或本领域中公知的其他基团。
丝氨酸和苏氨酸的羟基可进行保护，例如，通过酯化或醚化。适合该酯化反应的基团的实例包括衍生自低级(C2-4)烷酰基如乙酰基，以及芳酰基如苯甲酰基的基团，或本领域中公知的其他基团。此外，醚化合适的基团的实例包括苄基、四氢吡喃基、叔丁基以及三苯甲基(Trt)。
酪氨酸的酚羟基保护基的实例包括Bzl、2，6-二氯苄基、2-硝基苄基、Br-Z、叔丁基，或本领域中公知的其他基团。
组氨酸的咪唑的保护基的实例包括Tos、4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基(Mtr)、DNP、Bom、Bum、Boc、Trt、Fmoc或本领域中公知的其他基团。
精氨酸的胍基的保护基的实例包括Tos、Z、4-甲氧基-2，3，6-三甲基苯磺酰基(Mtr)、对甲氧基苯磺酰基(MBS)、2，2，5，7，8-五甲基色满-6-磺酰基(Pmc)、三苯甲基-2-磺酰基(Mts)、2，2，4，6，7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基(Pbf)、Boc、Z、NO2或本领域中公知的其他基团。
赖氨酸侧链氨基保护基的实例包括Z、Cl-Z、三氟乙酰基、Boc、Fmoc、Trt、Mtr、4，4-二甲基-2，6-二氧代环己亚基(2，6-dioxocyclohexylideneyl，Dde)，或本领域中公知的其他基团。
色氨酸的吲哚基保护基的实例包括甲酰基(For)、Z、Boc、Mts、Mtr或本领域中公知的其他基团。
天冬酰胺和谷酰胺的保护基包括Trt、氧杂蒽基(xanthyl)(Xan)、4，4’-二甲氧基二苯甲基(Mbh)和2，4，6-三甲氧基苄基(Tmob)或本领域中公知的其他基团。
活化原料羧基的实例包括相应的酸酐、叠氮化物以及活化的酯(与醇(如五氯苯酚、2，4，5-三氯苯酚、2，4-二硝基苯酚、氰基甲基醇、对硝基苯酚、HONB、N-羟基琥珀酰亚胺、1-羟基苯并三唑(HOBt)、1-羟基1-7-氮杂苯并三唑(HOAt)形成的酯))。活化原料氨基基团的实例包括相应的亚磷酸酰胺。
脱去(去除)保护基方法的实例包括在催化剂如Pd黑或Pd碳存在下在氢气流中的催化还原，用无水氟化氢、甲烷磺酸、三氟甲烷磺酸、三氟乙酸、溴化三磺酰基硅烷(trimesylsilane bromide，TMSBr)、三甲基甲硅基三氟甲烷磺酸酯、四氟硼酸、三(三氟)硼、三溴化硼或其混合溶液进行的酸处理，用二异丙基乙基胺、三乙基胺、哌啶或哌嗪以及用钠/液氨的还原进行的碱处理。利用前述酸处理去除反应通常在温度-20℃～40℃之间进行，并且，在酸处理中，记入酸捕集剂如苯甲醚、苯酚、茴香硫醚、间甲酚和对甲酚或二甲基硫醚、1，4-丁二硫醇或1，2-乙二硫醇是有效的。此外，用作组氨酸的咪唑的保护基的2，4-二硝基苯基利用苯硫酚处理去除，并且用作色氨酸的吲哚保护基的甲酰基通过用稀氢氧化钠或稀氨水的碱处理而除去，除了利用在前述1，2-乙二硫醇或1，4-丁二硫醇存在下的酸处理脱保护以外。
用于不涉及原料反应的官能团保护的保护基可方便地根据已知的保护基或其他方式进行选择。类似地，参与反应的保护基的去除以及官能团的活化可通过本领域中公知的方法实现。
为了得到肽的酰胺，酰胺利用酰胺合成树脂进行固相合成，或羧基-端氨基酸的α-羧基被酰胺化，肽链在氨基侧被延伸至需要的链长，并且只有肽链的N-端α-氨基的保护基被去除以制备肽，以及只有C-端羧基的保护基被去除以制备肽(或氨基酸)，并且两种肽在前述的混合溶剂中缩合。缩合反应的细节与上述描述的方法相同。纯化利用缩合得到的保护的肽并利用前述的方法去除所有的保护基，从而得到需要的粗肽。该粗肽可利用公知的多种纯化方式进行纯化，并且主要的级分可进行冻干得到需要肽的酰胺。
当本发明的转移素衍生物(I)以构象异构体、消旋体、构象异构体等存在的时候，需要的时候，各异构体可通过前述分离和纯化手段分离得到。此外，当本发明的化合物未消旋体的时候，可通过常规的光学拆分手段分离成S异构体和R异构体。
当本发明的转移素衍生物(I)具有立体异构体的时候，本发明包括单独异构体的情形以及异构体以混合物存在的情形。
此外，本发明的转移素衍生物(I)可为水合的或未被水合的。
本发明的转移素衍生物(I)可利用同位素(如3H、14C、35S)等进行标记。
在这里描述的肽中，根据常规的肽标示方法，左端为N-端(氨基端)并且右端为C-端(羧基端)。肽的C-端可为酰胺(-CONH2)、羧基(-COOH)、羧酸根(-COO-)、烷基酰胺(-CONRR)或酯(-COOR)以及，尤其是，酰胺(-CONH2)是优选的。酯或烷基酰胺的R的实例包括C1-6烷基如甲基、乙基、正丙基、异丙基和正丁基，C3-8环烷基如环戊基和环己基、C6-12芳基如苯基和α-萘基，苯基-C1-2烷基如苄基、苯乙基和二苯甲基和C7-14芳烷基如α-萘基-C1-2烷基如α-萘基甲基以及，另外地，通常用作口服酯的新戊酰氧基甲基。
本发明转移素衍生物(I)盐的实例包括金属盐、与铵形成的盐、与有机碱形成的盐、与无机酸形成的盐、与有机酸形成的盐、与碱性或酸性氨基酸形成的盐等。优选的金属盐的实例包括碱金属盐如钠盐、钾盐等；碱土金属盐如钙盐、镁盐、钡盐等；铝盐等。优选的与有机碱形成的盐的实例包括与三甲基胺、三乙基胺、吡啶、甲基吡啶、2，6-二甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、环己基胺、二环己基胺、N，N’-二苄基乙二胺等形成的盐。优选的与无机酸形成的盐的实例包括与氢氯酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等形成的盐。优选的与有机酸形成的盐的实例包括与甲酸、乙酸、三氟乙酸、酞酸、富马酸、草酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等形成的盐。优选的与碱性氨基酸形成的盐的实例包括与精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸等形成的盐，并且优选的与酸性氨基酸形成的盐的实例包括与天冬氨酸、谷氨酸等形成的盐。
其中，药用盐是优选的。例如，当化合物具有酸性官能团的时候，无机盐如碱金属盐(如钠盐、钾盐等)、碱土金属盐(如钙盐、镁盐、钡盐等)、铵盐等是优选的。当化合物具有碱性官能团的时候，与无机酸如与盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等形成的盐，以及与有机酸如乙酸、邻苯二甲酸、富马酸、草酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、甲烷磺酸、对甲苯磺酸等形成的盐是优选的。
转移素衍生物(I)或其盐的前药(下文中指为本发明的转移素衍生物(I))指在活体内在生理条件下或由于与酶、胃酸等的反应转化成本发明的转移素衍生物(I)的化合物。即，本发明的前药是由于，如，酶或胃酸等的氧化、还原、水解等转化成本发明的转移素衍生物(I)的化合物。
本发明转移素衍生物(I)的前药的实例包括(a)化合物，其中本发明的转移素衍生物(I)的氨基被酰基、烷基、磷酸等取代(如，化合物，其中本发明的转移素衍生物(I)的氨基被二十烷酰、丙氨酰基、戊基氨基羰基(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧代戊烯-4-基)甲氧基羰基、四氢呋喃基、吡咯烷基甲基、新戊酰氧基甲基、叔丁基等取代)；(b)化合物，其中本发明的转移素衍生物(I)的羟基被酰基、烷基、磷酸、硼酸等取代(如化合物，其中本发明的转移素衍生物(I)的羟基被乙酰基、棕榈酰基、丙酰基、新戊酰、琥珀酰基、富马酰基、丙氨酰基、二甲基氨基甲基羰基等取代)；以及(c)化合物，其中本发明的转移素衍生物(I)的羧基被酯、酰胺等取代(如，化合物，其中本发明的转移素衍生物(I)的羧基被乙基酯、苯基酯、羧基甲基酯、二甲基氨基甲基酯、新戊酰氧基甲基酯、乙氧基羰基氧基乙基酯、2-苯并[c]呋喃酮基酯、(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧代戊烯-4-基)甲基酯、环己基氧基羰基乙基酯、甲基酰胺等取代)。
这些前药可利用已知的方法从本发明的转移素衍生物(I)制备得到。
本发明的转移素衍生物(I)的前药可为在生理条件下转化成本发明的转移素衍生物(I)的化合物，如″Pharmaceutical Research and Development″，Vol.7(Drug Design)，第163-198页，1990年由Hirokawa PublishingCo.(Tokyo，Japan)出版中所记载。
本发明的转移素衍生物(I)或其盐或其前药(下文指本发明的化合物)具有癌症转移抑制活性或癌症增殖抑制活性。因此，本发明的转移素化合物可用于制备药物组合物，如预防或治疗所有的癌症(如，肺癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌、直肠癌、结肠癌、前列腺癌、卵巢癌、子宫子宫颈癌、乳腺癌、肾脏癌、膀胱癌、脑瘤等)的药物。
本发明的化合物也具有调节胰腺功能的活性并因此可用作药物组合物，所述的组合物可用作预防或治疗一些类型的胰腺疾病(如，急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症等)的治疗药物。
本发明的化合物也具有胎盘功能调节活性并因此可用作药物组合物，将可用作用于预防或治疗纤毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂质代谢障碍或引产的药物。
包括本发明的化合物的药物组合物具有低毒性，并可根据制药领域通常使用的公知的方法进行配制，以其自身或与可药用载体一起，制备成例如片剂(包括糖-包衣片剂和膜-包衣片剂)、散剂、颗粒、胶囊(包括软胶囊)、液体、注射剂、栓剂、缓释制剂等，并安全地经口服或肠胃外给药(如，局部、直肠、静脉内给药等)。本发明的化合物在本发明制剂中的含量为约0.01～约100wt％，基于整个制剂。本发明的化合物的剂量随给药的对象、靶器官、病症、给药途径等而变化；在口服给药中，如，对癌症病人，剂量通常为约0.1mg～约100mg，优选地约1.0～约50mg，并且更优选地为约1.0～约20mg每天(对60kg体重)。在肠胃外给药中，单一剂量随给药对象、靶器官、病症、给药途径等而变化，但是有利地，如，对于癌症病人，以约0.01～约30mg，优选地约0.1～约20mg，并且更优选地约0.1～约10mg(对60kg体重)的日剂量静脉内施用本发明的化合物。剂量可按照本领域中已知的方法根据患者的体重进行调整。
可用于本发明制剂的可药用载体包括多种常规的有机或无机载体物质。制剂物质还包括，如，在固体制剂中的赋形剂、增白剂、粘合剂和崩解剂，以及在液体制剂中的溶剂、助溶剂、助悬剂、等张剂、缓冲剂、抚慰剂等。此外，如果必要，常规的添加剂如防腐剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂、吸附剂、润湿剂等可以适当的量加入。
有用的赋形剂的实例包括，但不限于，乳糖、蔗糖、D-甘露醇、淀粉、玉米淀粉、结晶纤维素、轻质无水硅酸等。
有用的增白剂的实例包括，但不限于，硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石、胶体二氧化硅等。
有用的粘合剂的实例包括，但不限于，结晶纤维素、蔗糖、D-甘露醇、糊精、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、淀粉、蔗糖、明胶、甲基纤维素、羧基甲基纤维素钠等。
有用的崩解剂的实例包括，但不限于，淀粉、羧基甲基纤维素、羧基甲基纤维素钙、羧基甲基淀粉钠和L-羟基丙基纤维素。
有用的溶剂的实例包括，但不限于，注射剂水、醇、丙二醇、Macrogol、芝麻油、玉米油和橄榄油。
有用的溶解助剂的实例包括，但不限于，聚乙二醇、丙二醇、D-甘露醇、苯甲酸苄基酯、乙醇、三氨基甲烷、胆固醇、三乙醇胺、碳酸钠和柠檬酸钠。
有用的助悬剂的实例包括，但不限于，表面活性剂如硬脂酰三乙醇胺、月桂基硫酸钠、月桂基氨基丙酸、卵磷脂、氯化苯甲烃铵、氯化苄乙氧铵、甘油单硬脂酸等；亲水聚合物如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧基甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟基甲基纤维素、羟基乙基纤维素、羟基丙基纤维素等。
有用的等张剂的实例包括，但不限于，葡萄糖、D-山梨醇、氯化钠、甘油和D-甘露醇。
有用的缓冲剂的实例包括，但不限于，磷酸盐、乙酸盐、碳酸盐和柠檬酸盐的缓冲溶液。
有用的抚慰剂的实例包括，但不限于，苄基醇等。
有用的防腐剂的实例包括，但不限于，对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苄基醇、苯乙基醇、脱氢醋酸和山梨酸。
有用的抗氧化剂的实例包括，但不限于，亚硫酸盐、抗坏血酸和α-生育酚。
有用的本发明化合物的实例可与本发明的化合物以外的药物同时使用。可与本发明的化合物同时使用的药物(下文指组合药物)的实例包括治疗癌症的药物如化疗药物、激素治疗剂以及免疫治疗剂。
化疗药物的实例包括，但不限于，烷化剂、抗代谢物拮抗剂、抗癌症抗生素以及衍生自植物的抗癌药物。
烷化剂的实例包括，但不限于，氮芥、盐酸氮芥-N-氧化物、苯丁酸氮芥(chloram butyl)、环磷酰胺、异磷酰胺、塞替派、卡波醌、甲磺酸英丙舒凡、白消安、盐酸尼莫司丁、二溴甘露醇、美法兰、达卡巴嗪、雷莫司汀、雌莫司汀磷酸钠、三亚胺嗪、卡莫司汀、洛莫司汀、链唑霉素、哌泊溴烷、依托格鲁、卡铂、顺铂、米铂、奈达铂、奥沙利铂、六甲蜜胺、氨莫司汀、螺溴丙酰胺、福莫司汀、泼尼莫司汀、嘌嘧替派、威他霉素、替莫唑胺、苏消安(treosulphan)、氯乙环磷酰胺、净司他丁斯酯、卡波醌、阿多来新、半胱胺亚硝脲和比折来新。
抗代谢物的实例包括，但不限于，巯嘌呤、6-硫代肌苷、琉嘌呤苷、甲氨蝶呤、依诺他滨、阿糖胞苷、阿糖胞酯、盐酸安西他滨、5-FU药物(如，氟尿嘧啶、替加氟、UFT、脱氧氟尿苷、嘧福禄、gallocitabine、emmitefur)、氨蝶呤钠、亚叶酸钙、tabloid、甘氨硫嘌呤、亚叶酸钙、左亚叶酸钙、克拉屈滨、乙嘧替氟、氟达拉滨、吉西他滨、羟基脲、喷司他丁、吡曲克辛、碘苷、米托胍腙、thiazophrine和氨莫司汀。
抗癌症抗生素的实例包括，但不限于，放线菌素-D、放线菌素-C、丝裂霉素-C、色霉素-A3、盐酸博来霉素、硫酸博来霉素、硫酸培洛霉素、盐酸柔红霉素、盐酸多柔比星、盐酸阿柔比星、盐酸吡柔比星、盐酸表柔比星、新制癌菌素、光辉霉素、肉瘤霉素、嗜癌霉素、米托坦、盐酸佐柔比星、盐酸米托蒽醌和盐酸伊达比星。
衍生自植物的抗癌药的实例包括，但不限于，依托泊苷、磷酸依托泊苷、长春花碱、硫酸长春新碱、硫酸长春地辛、替尼泊苷、紫杉醇、多西他赛和长春瑞滨。
激素治疗剂的实例包括，但不限于，磷雌酚、己烯雌酚、氯烯雌醚、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸氯地孕酮、醋酸环丙氯地孕酮、达那唑、烯丙雌醇、孕三烯酮、美帕曲星、雷洛昔芬、奥美昔芬、左美洛昔芬、抗雌激素药(如，枸橼酸他莫昔芬、枸橼酸托瑞米芬)、pill preparations、美雄烷、testrolactone、氨鲁米特、LH-RH激动剂(如，醋酸性瑞林、布舍瑞林、亮丙瑞林)、屈洛昔芬、表硫雄醇、硫酸炔雌醇、芳香酶抑制剂(如，盐酸法倔唑、阿那曲唑、retrozole、依西美坦、伏氯唑、福美坦)、抗雄激素药(如，氟他胺、bicartamide、尼鲁米特)、5α-还原酶抑制剂(如，非那司提、依立雄胺)、adrenocorticohormone药(如，地塞米松、氢化泼尼松、倍他米松、曲安西龙)、雄激素合成抑制剂(如，阿比特龙)、和维生素A类以及阻滞维生素A类代谢的药物(如，利阿唑)。LH-RH激动剂(如，醋酸性瑞林、布舍瑞林、亮丙瑞林)是优选的。
免疫治疗剂(BRM)的实例包括，但不限于，溶链菌、云芝多糖、西佐糖、香菇多糖、乌苯美司、干扰素、白细胞介素、巨噬细胞集落-刺激因子、粒细胞集落-刺激因子、促红细胞生成素、淋巴细胞毒素、BCG疫苗、短小棒状杆菌、左旋咪唑、多糖K和丙考达唑。
本发明的化合物与组合药物的联用提供了下述有益的效果(1)剂量减少，与本发明的化合物或组合药物单独给药的情形相比；(2)与本发明的化合物联用的药物可根据病人的症状(轻度、严重等)进行选择；(3)通过选择与本发明的化合物具有不同作用机制的组合药物，可延长治疗期；(4)通过选择与本发明的化合物具有不同作用机制的组合药物，可使治疗效果持续；以及(5)通过使本发明的化合物和组合药物联用，能得到协同效果。
下文中，本发明的化合物(I)与组合药物的联用称为“本发明的联用药”。
当利用本发明的联用药的时候，本发明的化合物和组合药物的给药时间没有限制，并且本发明的化合物或其药物组合物以及组合药物或其药物组合物可以对给药对象同时给药，或在不同的时间给药。组合药物的剂量可根据临床给药量进行确定，并可根据给药对象、给药途径、疾病、组合等进行适当的选择。
本发明的联用药的给药方式没有具体的限制，只要本发明的化合物和组合药物联合给药。所述的给药方式的实例包括下述方法(1)本发明的化合物和组合药物同时制备得到单一的制剂进行给药；(2)本发明的化合物和组合药物单独制备以得到两种制剂，利用同样的途径同时给药；(3)本发明的化合物和组合药物单独制备以得到两种制剂，可利用同样的给药途径进行给药，只是给药的时间不同；(4)本发明的化合物和组合药物单独制备以得到两种制剂，利用不同的给药途径同时给药；以及(5)本发明的化合物和组合药物单独制备以得到两种制剂，在不同的时间利用不同的给药途径给药(例如，以本发明的化合物和组合药物这种顺序，或以相反的顺序给药)。
本发明的联用药具有低毒性。因此，本发明的化合物和/或上述组合药物可根据本领域中已知的方法进行混和，用可药理上允许的载体以得到药物组合物，例如，片剂(包括糖-包衣的片剂、膜包衣的片剂)、散剂、颗粒、胶囊(包括软胶囊)、溶液、注射剂、栓剂、缓释制剂等，可经口服或肠胃外途径(如，局部、直肠、静脉等)安全地给药。注射剂可经静脉内、肌肉内、皮下或器官内途径给药，或直接对受损部位给药。
任何本领域中公知的药理允许载体可用于制备本发明药物组合物的联用药中，如，常规使用的多种有机或无机载体物质。其他成分的实例包括固体制剂中的赋形剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂，或液体制剂中的溶剂、溶解助剂、助悬剂、等张剂、缓冲剂、抚慰剂等。此外，如果需要，常规的添加剂如防腐剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂、吸附剂、润湿剂等也可以适当的量合适地使用。
有用的赋形剂的实例包括，但不限于，乳糖、蔗糖、D-甘露醇、淀粉、玉米淀粉、结晶纤维素、轻质无水硅酸等。
有用的润滑剂包括的实例，但不限于，硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石、胶体二氧化硅等。
有用的粘合剂的实例包括，但不限于，结晶纤维素、蔗糖、D-甘露醇、糊精、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、淀粉、蔗糖、明胶、甲基纤维素、羧基甲基纤维素钠等。
有用的崩解剂的实例包括淀粉、羧基甲基纤维素、羧基甲基纤维素钙、羧基甲基淀粉钠、L-羟基丙基纤维素等。
有用的溶剂的实例包括注射剂用水、醇、丙二醇、macrogol、芝麻油、玉米油、橄榄油等。
公开作为溶解助剂的实例为聚乙二醇、丙二醇、D-甘露醇、苄基苯甲酸酯、乙醇、三氨基甲烷、胆固醇、三乙醇胺、碳酸钠、柠檬酸钠等。
公开的助悬剂的实例为表面活性剂如硬脂酰三乙醇胺、月桂基硫酸钠、月桂基氨基丙酸、卵磷脂、氯苄烷铵、benzetonium chloride、甘油单硬脂酸酯等；亲水聚合物如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧基甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟基甲基纤维素、羟基乙基纤维素、羟基丙基纤维素等。
有用的等张剂的实例包括，但不限于，葡萄糖、D-山梨醇、氯化钠、甘油、D-甘露醇等。
有用的缓冲剂的实例包括，但不限于，磷酸盐、乙酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐等的缓冲溶液。
有用的抚慰剂的实例包括，但不限于，苄基醇等。
防腐剂的实例包括对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苄基醇、苯乙醇(phenetylalcohol)、脱氢醋酸、山梨酸等。
抗氧化剂的实例包括亚硫酸盐、抗坏血酸、α-生育酚等。
本发明的化合物与组合药物在本发明的联用药中的混和比率根据给药对象、给药途径、疾病等进行适当的选择。
例如，本发明的化合物在本发明的联用药中的含量根据剂型而不同，并通常为约0.01～100％重量，优选地从约0.1～50％重量，还优选地从约0.5～20％重量，基于制剂。
组合药物在本发明的联用药中的含量随制剂形式不同而异，并通常为约0.01～100％重量，优选地约0.1～50％重量，还优选地约0.5～20％重量，基于制剂。
添加剂如载体等在本发明的联用药中的含量随制剂形式不同而异，并通常为约1～99.99％重量，优选地为约10～90％重量，基于制剂。
当本发明的化合物和组合药物分开制剂的时候，可采用同样的含量。
这些制剂可利用本领域中已知的方法进行制备。例如，本发明的化合物和组合药物可与下列成分一起配制成水性注射剂分散剂(如，Tween80(由Atlas Powder制造，US)、HCO 60(由Nikko Chemicals制造)、聚乙二醇、羧基甲基纤维素、藻酸钠、羟基丙基甲基纤维素、糊精等)、稳定剂(如，抗坏血酸、焦亚硫酸钠等)、表面活性剂(如，聚山梨醇酯80、macrogol等)、助溶剂(如，甘油、乙醇等)、缓冲剂(如，磷酸及其碱金属盐、柠檬酸及其碱金属盐等)、等张剂(如，氯化钠、氯化钾、甘露醇、山梨醇、葡萄糖等)、pH调节剂(如，盐酸、氢氧化钠等)、防腐剂(如，对羟基苯甲酸乙基酯、苯甲酸、对羟基苯甲酸甲基酯、对羟基苯甲酸丙基酯、苄基醇等)、助溶剂(如，浓甘油、甲葡胺等)、溶解助剂(如，丙二醇、蔗糖等)、抚慰剂(如，葡萄糖、苄基醇等)等，或在植物油如橄榄油、芝麻油、玉米籽油、玉米油等或溶解助剂如丙二醇中溶解、悬浮或乳化并加工成油性注射剂。
当制剂为口服给药给药的情形，赋形剂(如，乳糖、蔗糖、淀粉等)、崩解剂(如，淀粉、碳酸钙等)、粘合剂(如、淀粉、阿拉伯胶、羧基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羟基丙基纤维素等)、润滑剂(如，滑石、硬脂酸镁、聚乙二醇6000等)等，例如，可加入到本发明的化合物或组合药物中，根据本身已知的方法，并将混合物压制成型，然后如果需要，为了掩盖味道、获得肠溶特性或持久性，将成型产品利用本身已知的方法进行包衣，以得到口服给药的制剂。作为包衣剂，例如，羟基丙基甲基纤维素、乙基纤维素、羟基甲基纤维素、羟基丙基纤维素、聚氧乙二醇、Tween 80、PluronicF68、醋酸酞酸纤维素、酞酸羟基丙基甲基纤维素、醋酸琥珀酸羟基甲基纤维素、Eudoragit(甲基丙烯酸·丙烯酸共聚物，由Rohm，DE制造)、颜料(如，黄氧化铁、二氧化钛等)等可以使用。口服给药的制剂可为快速释放制剂和缓释制剂中的任一种。
例如，在为栓剂的情形下，本发明的化合物和组合药物可根据本领域中公知的方法配制成油性或水性固体、半固体或液体栓剂。作为用于上述组合物中的油性基质，例如，高级脂肪酸甘油酯[如，可可脂，Witebsols(由Dynamite Novel，DE制造)等]、中级脂肪酸甘油酯[如，Myglyols(由DynamiteNovel，DE制造)等]、或植物油(如，芝麻油、大豆油、玉米籽油等)等可以使用。此外，作为水性基质，例如，聚乙二醇、丙二醇可以使用，并且作为水性凝胶基质，例如，天然树胶、纤维素衍生物、乙烯基聚合物、丙烯酸聚合物等可以使用。
缓释剂的实例包括但不限于缓释微胶囊。为了得到缓释微胶囊，可以采用本领域中公知的方法，并且例如，优选在给药前加工成下面部分(2)中显示的缓释制剂。
本发明的化合物优选加工成口服给药制剂如固体制剂(如，散剂、颗粒、片剂、胶囊)等，或加工成直肠给药制剂如栓剂。具体地，口服给药制剂是优选的。
取决于药物的种类，组合药物可加工成上述药物形式。
本发明的化合物或组合药物的注射剂及其制备、本发明的化合物或组合药物的缓释制剂或快速释放制剂及其制备，以及本发明的化合物或组合药物的舌下、含服或口内快速崩解剂及其制备，都描述在下面。
(1)注射剂及其制备通过将本发明的化合物或组合药物溶解在水中制备的注射剂是优选的。注射剂可包含苯甲酸盐和/或水杨酸盐。
通过将本发明的化合物或组合药物以及如果合适，苯甲酸盐和/或水杨酸盐溶解在水中得到注射剂。
作为上述的苯甲酸和水杨酸盐，例如，碱金属盐如钠、钾等，碱土金属盐如钙、镁等，铵盐、甲葡胺盐、有机酸盐如氨基丁三醇等可以使用。
本发明的化合物或组合药物在注射剂中的浓度为0.5～50w/v％，优选地约3～20w/v％。苯甲酸盐或/和水杨酸盐的浓度为0.5～50w/v％，优选地3～20w/v％。
为了制备本发明的制剂，适当地混和通常用于制备注射剂的添加剂。例如，稳定剂(抗坏血酸、焦亚硫酸钠等)、表面活性剂(聚山梨醇酯80、macrogol等)、助溶剂(甘油、乙醇等)、缓冲剂(磷酸及其碱金属盐、柠檬酸及其碱金属盐等)、等张剂(氯化钠、氯化钾等)、分散剂(羟基丙基甲基纤维素、糊精)、pH调节剂(盐酸、氢氧化钠等)、防腐剂(对羟基苯甲酸乙基酯、苯甲酸等)、助溶剂(浓甘油、甲葡胺等)、溶解助剂(丙二醇、蔗糖等)、抚慰剂(葡萄糖、苄基醇等)等可以加入。这些添加剂一般以通常用于注射剂的比例进行混和。
有利地，通过加入pH调节剂，注射剂的pH控制为2～12，优选地2.5～8.0。
通过将本发明的化合物或组合药物以及如果需要，苯甲酸盐和/或水杨酸盐，并且如果必要，上述添加剂溶解在水中得到注射剂。这些成分可以任何顺序溶解，并且可以制备注射剂的常规方法的同样的方式进行适当地溶解。
可以常规注射剂使用的同样的方式，将注射剂的水溶液可有利地进行加热，或者，例如，过滤灭菌、高压加热灭菌等以提供注射剂。
有利地，注射水溶液在100～121℃进行高压热灭菌5～30分钟。
此外，也可制备具有抗菌特性的溶液制剂以使其用作制剂，其可分开并可多次给药。
(2)缓释制剂或快速释放制剂以及其配制缓释制剂优选地通过下述方式得到，如果需要，用膜剂如水-不溶物质、可溶胀的聚合物等包衣包含本发明的化合物或组合药物的核。例如，每天口服给药一次的缓释制剂是优选的。
作为用于膜剂的水-不溶物质，可以使用，例如，纤维素醚如乙基纤维素、丁基纤维素等，纤维素酯如硬脂酸纤维素、丙酸纤维素等、聚乙烯酯如聚乙烯乙酸酯、聚乙烯丁酸酯等、丙烯酸/甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸甲基酯共聚物、乙氧基乙基甲基丙烯酸酯/肉桂乙基甲基丙烯酸酯/氨基烷基甲基丙烯酸酯共聚物、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、甲基丙烯酸烷基酰胺共聚物、聚(甲基丙烯酸甲基酯)、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基丙烯酰胺、氨基烷基甲基丙烯酸酯共聚物、聚(甲基丙烯酸酐)、甘油基甲基丙烯酸酯共聚物，具体地，基于丙烯酸的聚合物如Eudoragits(Rhom Farma)如Eudoragit RS-100、RL-100、RS-30D、RL-30D、RL-PO、RS-PO(丙烯酸乙基酯·甲基丙烯酸甲酯·三甲基氯化物甲基丙烯酸酯·铵甲基共聚物)、Eudoragit NE-30D(甲基丙烯酸甲基酯·丙烯酸乙基酯共聚物)等，氢化油如氢化蓖麻油(如，Lovery wax(Freunt)等)，蜡如巴西棕榈蜡、脂肪酸甘油酯、石蜡等、聚甘油脂肪酯等。
作为可溶胀的聚合物，具有酸性离解基团并且显示pH依赖性溶胀的聚合物是优选的，并且在酸性区域如在胃中显示小的溶胀并且在中性区域如在小肠和大肠中显示大的溶胀的聚合物是优选的。
作为如此的具有酸性离解基团并且显示pH依赖性溶胀的聚合物，可交联的聚丙烯酸共聚物如，例如，Carbomer 934P、940、941、974P、980、1342等，聚卡波非，聚卡波非钙(后两种由BF Goodrich制造)、Hibiswako103、104、105、304(都由Wako Purechemical Co.，Ltd.制造)等可以使用。
用于缓释制剂的膜剂还可包含亲水物质。作为亲水物质，例如，可以使用包含磺酸基的聚糖类如pullulan、糊精、藻酸碱金属盐等，具有羟基烷基或羧基烷基的聚糖类如羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、羧基甲基纤维素钠等，甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚乙二醇等。
缓释制剂的膜剂中的水-不溶物质的含量为约30～90％(w/w)，优选地约35～80％(w/w)，还优选地约40～75％(w/w)，可溶胀的聚合物的含量为约3～30％(w/w)，优选地约3～15％(w/w)。膜剂还可包含亲水物质，并且在这种情形下，亲水物质在膜剂中的含量为约50％(w/w)或更少，优选地约5～40％(w/w)，还优选地约5～35％(w/w)。％(w/w)表示基于膜剂组合物的％重量，所述的膜剂组合物通过从膜剂溶液去除溶剂(如，水、低级醇如甲醇、乙醇等)而得到。
缓释制剂制备如下通过制备如下例举的包含药物的核，然后，用膜剂溶液包衣得到的核，所述的膜剂溶液通过热溶水-不溶物质、可溶胀的聚合物等或通过将其溶解或分散在溶剂中进行制备。
I.包含药物的核制备将用膜剂包衣的包含药物的核(下文中，有时简单称为核)没有具体地限制，并优选地，核形成为颗粒如颗粒或细颗粒。当核由颗粒或细颗粒组成的时候，其平均粒径优选为约150～2000μm，还优选地，约500～1400μm。
核的制备可利用常规的制备方法进行，例如，合适的赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂等混和到药物中，并将混合物进行湿法挤出制粒方法、流化床制粒方法等以制备核。
在核中的药物含量为约0.5～95％(w/w)，优选地约5.0～80％(w/w)，还优选地约30～70％(w/w)。
作为包含在核中的赋形剂，例如，糖类如蔗糖、乳糖、甘露醇、葡萄糖等、淀粉、结晶纤维素、磷酸钙、玉米淀粉等可以使用。其中，结晶纤维素、玉米淀粉是优选的。
作为粘合剂，例如，使用聚乙烯醇、羟基丙基纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、Pluronic F68、阿拉伯胶、明胶、淀粉等。作为崩解剂，使用例如，羧基甲基纤维素钙(ECG505)、crosscarmelose钠(Ac-二-Sol)、交联的聚乙烯吡咯烷酮(Crosspovidone)、低取代羟基丙基纤维素(L-HPC)等。其中，羟基丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟基丙基纤维素是优选的。作为润滑剂和凝结抑制剂，使用例如，滑石、硬脂酸镁和无机盐，并且作为润滑剂，使用聚乙二醇等。作为稳定剂，使用酸如酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸、马来酸等。
除了上述方法以外，核还可通过例如，旋转制粒方法(其中药物或药物与赋形剂、润滑剂等的混合物部分地加入到为核的核心的惰性载体颗粒上，同时喷洒溶解在合适的溶剂如水、低级醇(如，甲醇、乙醇等)等中的粘合剂)、锅包衣方法、流化床包衣方法或熔融制粒方法进行制备。作为惰性载体颗粒，例如，可以使用由蔗糖、乳糖、淀粉、结晶纤维素、蜡制备的那些，并且其平均粒径优选为约100μm～1500μm。
为了将包含在核中地药物以及膜剂分开，核的表面可用保护剂进行包衣。作为保护基，使用例如，上述亲水物质、水-不溶物质等。作为保护剂，优选地聚乙二醇和具有羟基烷基或羧基烷基的多糖，更优选地，使用羟基丙基甲基纤维素和羟基丙基纤维素。保护剂可包含，作为稳定剂，酸如酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸、马来酸等，以及润滑剂如滑石等。当使用保护剂的时候，包衣量为约1～15％(w/w)，优选地约1～10％(w/w)，还优选地约2～8％(w/w)，基于核。
保护剂可利用常规的包衣方法进行包衣，并且具体地，保护剂可利用例如，流化床包衣方法、锅包衣方法等进行包衣。
II.用膜剂包衣核上述步骤I中得到的核用膜剂溶液进行包衣以得到缓释制剂，膜剂溶液通过将上述水-不溶物质和pH-依赖性可溶胀的聚合物和亲水物质进行热融或通过将它们溶解或分散在溶剂中。
作为用膜剂溶液包衣核的方法，例如，喷雾包衣方法等可以使用。
水-不溶物质、可溶胀的聚合物和亲水物质在膜剂溶液中的混和比例进行适当地选择以使这些成分在包衣膜中的含量分别为上述含量。
膜剂的包衣量为约1～90％(w/w)，优选地约5～50％(w/w)，还优选地约5～35％(w/w)，基于核(不包括保护剂的包衣量)。
作为膜剂溶液中的溶剂，水或有机溶剂可以单独或以混合物的形式使用。在以混合物使用的时候，水与有机溶剂的混合比(水/有机溶剂重量)可在1～100％范围内变化，并优选地1～约30％。有机溶剂没有具体地限制只要其溶解水-不溶物质，并且例如，低级醇如甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇等，低级烷酮如丙酮等、乙腈、氯仿、二氯甲烷等可以使用。其中，低级醇是优选的，并且乙醇和异丙醇是具体地优选的。水，以及水和有机溶剂的混合物优选用作膜剂的溶剂。在这种情形下，如果必要，酸如酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸、马来酸等也可加入到膜剂溶液中以稳定膜剂溶液。
通过喷雾包衣的包衣操作可利用常规的包衣方法进行实现，并且具体地，可以利用流化床包衣方法、锅包衣方法等将膜剂溶液喷雾到核上。在这种情形下，如果必要，滑石、二氧化钛、硬脂酸镁、硬脂酸钙、轻质无水硅酸等也可加入作为润滑剂，并且甘油脂肪酯、氢化蓖麻油、三乙基柠檬酸酯、十六烷醇、硬脂酰醇等也可加入作为增塑剂。
用膜剂包衣后，如果必要，抗静电剂如滑石等可以混和。
快速释放制剂可为液体(溶液、悬浮剂、乳剂等)或固体(颗粒、丸剂、片剂等)。口服剂和肠胃外剂如注射剂等可以使用，并且口服剂是优选的。
除活性成分药物以外，快速释放制剂可包含，还有载体、添加剂和常规用于制剂领域的赋形剂(下文中，有时简称为赋形剂)。使用的制剂赋形剂没有具体的限制只要其为通常用作制剂赋形剂的赋形剂。例如，作为口服固体制剂的赋形剂，乳糖、淀粉、玉米淀粉、结晶纤维素(Avicel PH101，由Asahi Chemical Industry Co.，Ltd.制造，等)、粉末糖、颗粒糖、甘露醇、轻质无水硅酸、碳酸镁、碳酸钙、L-半胱氨酸等可以使用，并且优选地，玉米淀粉和甘露醇等可以使用。这些赋形剂可单独使用或以两种或多种组合使用。赋形剂的含量为，例如，约4.5～99.4w/w％，优选地约20～98.5w/w％，还优选地约30～97w/w％，基于快速释放制剂的总量。
快速释放制剂的药物的含量可在约0.5～95％，优选地约1～60％的范围内进行适当地选择，基于快速释放制剂的总量。
当快速释放制剂为口服固体制剂的时候，其通常包含，除上述成分以外，还有崩解剂。作为崩解剂，可以使用，例如，羧基甲基纤维素钙(ECG-505，由Gotoku Yakuhin制造)、crosscarmelose钠(例如，Actisol，由AsahiChemical Industry Co.，Ltd.制造)、crosspovidone(例如，Kollidon CL，由BASF制造)、低取代羟基丙基纤维素(由Shin-Etsu Chemical Co.，Ltd.制造)、羧基甲基淀粉(由Matsutani Kagaku K.K.制造)、羧基甲基淀粉钠(Exprotab，由Kimura Sangyo制造)、部分微粉化的(α-nized)淀粉(PCS，由Asahi Chemical Industry Co.，Ltd.制造)等可以使用，并且例如，可以使用崩解颗粒的下述这些崩解剂与水接触后吸收水引起膨胀或构成核的有效成分和赋形剂之间产生通道。这些崩解剂可单独使用或以两种或多种组合使用。崩解剂的用量适当地根据使用化合物的种类以及混合量、释放特性的设计等进行选择，并且例如，从约0.05～30w/w％，优选地从约0.5～15w/w％，基于快速释放剂的总量。
当快速释放制剂为口服固体制剂的时候，除上述组合物以外，如果需要其还可包含，固体制剂中常规使用的添加剂。作为添加剂，可以使用，例如，粘合剂(如，蔗糖、明胶、阿拉伯胶粉末、甲基纤维素、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、羧基甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮、pluran、糊精等)、润滑剂(如，聚乙二醇、硬脂酸镁、滑石、轻质无水硅酸(例如，aerosil(Nippon Aerosil))、表面活性剂(如，阴离子表面活性剂如烷基硫酸钠等、非离子性表面活性剂如聚氧乙烯脂肪酸酯和聚氧乙烯山梨聚糖脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻油衍生物等)、着色剂(如，焦油着色物质(tar coloringmatter)、焦糖、红氧化铁、二氧化钛、核黄素)，如果必要，食欲促进剂(如，甜味剂、香味剂等)、吸附剂、防腐剂、润湿剂、抗静电剂等。此外，作为稳定剂，有机酸如酒石酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸等也可加入。
作为上述的粘合剂，羟基丙基纤维素、聚乙二醇和聚乙烯吡咯烷酮等优选地使用。
快速释放制剂可基于制剂的常规技术进行配制，混和上述成分，并且如果必要，进一步揉捏混合物，并模压成型。上述混和利用通常使用的方法进行，例如，混和、揉捏等。具体地，当快速释放制剂形成为例如颗粒的时候，可根据与上述制备缓释制剂的核的方法同样的方法进行配制，利用立式制粒机、通用揉捏机(由Hata Tekkosho制造)、流化床制粒机FD-5S(由Pulek制造)等混和各成分，然后，将混合物进行湿法挤出制粒方法、流化床制粒方法等。
由此得到的快速释放制剂和缓释释放制剂可分别地利用通常的方法以其自身制成产品或与制剂赋形剂等适当地制备成产品，然后，同时给药或以任何给药间隔联合给药，或它们可以自身制成一种口服制剂(如，颗粒、细颗粒、片剂、胶囊等)或与制剂赋形剂等一起加工成口服制剂。也可加工成颗粒或细颗粒，并填充在同样的胶囊中用作口服给药的制剂。
(3)舌下、含服或口内快速崩解剂及其制备。
舌下、含服或口内快速崩解剂可为固体制剂如片剂等，或可为口服粘膜贴片(膜)。
作为舌下、含服或口内快速崩解剂、包含本发明的化合物或组合药物以及赋形剂的制剂是优选的。其还可包含佐剂如润滑剂/等张剂/亲水载体/水-可分散聚合物/稳定剂等。此外，为了易于吸收以及增加体内使用效率，β-环糊精或β-环糊精衍生物(如，羟基丙基-β-环糊精等)等也可以包括在其中。
作为上述的赋形剂、乳糖、蔗糖、D-甘露醇、淀粉、结晶纤维素、轻质无水硅酸等可以使用。作为润滑剂，硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石、胶体二氧化硅等可以使用，并且具体地，硬脂酸镁和胶体二氧化硅是优选的。作为等张剂，氯化钠、葡萄糖、果糖、甘露醇、山梨醇、乳糖、蔗糖、甘油、脲等可以使用，并且具体地，甘露醇是优选的。作为亲水载体，可溶胀的亲水载体如结晶纤维素、乙基纤维素、可交联的聚乙烯吡咯烷酮、轻质无水硅酸、硅酸、磷酸氢钙、碳酸钙等可以使用，并且具体地，结晶纤维素(如，细结晶纤维素等)是优选的。作为水-可分散聚合物，胶(如，西黄蓍胶、阿拉伯胶、瓜尔胶)、藻酸盐(如，藻酸钠)、纤维素衍生物(如，甲基纤维素、羧基甲基纤维素、羟基甲基纤维素、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素)、明胶、水溶淀粉、聚丙烯酸(如，卡波姆)、聚甲基丙烯酸、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚卡波非、抗坏血酸棕榈酸盐等可以使用，以及羟基丙基甲基纤维素、聚丙烯酸、藻酸盐、明胶、羧基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮/聚乙二醇等是优选的。具体地，羟基丙基甲基纤维素是优选的。作为稳定剂，半胱氨酸、硫代山梨醇、酒石酸、柠檬酸、碳酸钠、抗坏血酸、甘氨酸、亚硫酸钠等可以使用，并且具体地，柠檬酸和抗坏血酸是优选的。
舌下、含服或口内快速崩解剂可利用本领域中已知的方法通过混和本发明的化合物或组合药物和赋形剂进行制备。此外，如果需要，佐剂如润滑剂、等张剂、亲水载体、水-可分散聚合物、稳定剂、着色剂、甜味剂、防腐剂等可进行混和。舌下、含服或口内快速崩解剂按照下述方法得到通过同时或以一定的时间间隔混和上述成分，然后将混合物在压力下按照片剂模压成型。为了得到合适的硬度，也可以利用溶剂如水、醇等湿润物质，如果需要在制片前或后以及模压成型后，将物质干燥得到产品。
在模压成型成粘膜贴片(膜)的情形下，本发明的化合物或组合药物以及上述水-可分散聚合物(优选地，羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素)、赋形剂等溶解在溶剂如水等中，并将得到的溶液抛射得到膜。此外，添加剂如增塑剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、着色剂、缓冲剂、甜味剂等也可加入。为了使膜具有合适的弹性，二醇如聚乙二醇、丙二醇等也可包含在其中，或为了提高膜对口内粘膜的粘附，生物粘附聚合物(如，聚聚卡波非、聚羧乙烯)也可包含在其中。在抛射的情形下，溶液倾倒在非粘附表面上，利用工具如医生刀片等延伸至匀一的厚度(优选地，约10～1000微米)，然后，将溶液干燥成膜。有利地将如此形成的膜在室温或在加热下干燥并切割成给定的面积。
作为优选的口内快速崩解剂，列出的有由网状体组成的固体快速分散剂量剂，所述的网状体包括本发明的化合物或组合药物以及对本发明的化合物或组合药物呈惰性的水溶或水-可扩散载体。这种网状体通过从固体组合物中升华溶剂得到，所述的固体组合物通过将本发明的化合物或组合药物溶解在合适的溶剂而制备得到的溶液构成。
除了本发明的化合物或组合药物以外，优选地口内快速崩解剂组合物包含基质形成剂和次级成分。
基质形成剂的实例包括动物蛋白或植物蛋白如明胶、糊精以及大豆、小麦以及psyllium种子蛋白等；橡胶物质如阿拉伯胶、瓜尔胶、琼脂、xathanegum等；聚糖类；藻酸类；羧基甲基纤维素；鹿角菜胶；葡聚糖；pectines；合成的聚合物如聚乙烯吡咯烷酮等；衍生自明胶-阿拉伯胶复合物的物质等。此外，糖类如甘露醇、葡聚糖、乳糖、半乳糖、海藻糖等；环状糖类如环糊精等；无机盐如磷酸钠、氯化钠和硅酸铝等；具有2～12碳原子的氨基酸如甘氨酸、L-丙氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-羟基脯氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-苯基丙氨酸等可以使用。
在固化前，可将一或多种基质形成剂导入到溶液或悬浮剂中。基质形成剂可与表面活性剂一起存在，或在排除表面活性剂的情形下存在。除了形成基质以外，基质形成剂有助于保持本发明的化合物或组合药物在溶液或悬浮剂中的分散状态。
组合物可包含次级成分如防腐剂、抗氧化剂、表面活性剂、增稠剂、着色剂、pH控制剂、调味剂、甜味剂、食品遮味剂等。作为合适的着色剂，可以有，黑色的和黄氧化铁以及由Elis and Eberald制造的FD & C染料如FD & C蓝2、FD & C红40等。合适的调味剂的实例包括薄荷、黑莓、甘草、柑桔、柠檬、葡萄、焦糖、香草、樱桃、葡萄香味及其组合。合适的pH控制剂的实例包括柠檬酸、酒石酸、磷酸、盐酸和马来酸。合适的甜味剂的实例包括阿司帕坦、乙酰舒泛K和索马汀等。合适的食品遮味剂的实例包括碳酸氢钠、离子交换树脂、环糊精-包含化合物、吸附剂物质和微囊封化合物。
所述的制剂包含本发明的化合物或组合药物的量通常为从约0.1～50％重量，优选地从约0.1～30％重量并优选地为下述制剂(如上述的舌下剂、含服剂等)，其可在约1～60分钟的范围内，优选地约1～16分钟，更优选地约2～5分钟溶解90％或更多的本发明的化合物或组合药物(进入水)，以及口内快速崩解制剂，其在放置在口腔之后在1～60秒，优选地1～30秒，还优选地1～10秒内崩解。
上述赋形剂在整个制剂中的含量为约10～99％重量，优选地约30～90％重量。β-环糊精或β-环糊精衍生物在整个制剂中的含量为0～约30％重量。在整个制剂中润滑剂的含量为约0.01～10％重量，优选地约1～5％重量。等张剂在整个制剂中的含量为约0.1～90％重量，优选地，约10～70％重量。亲水载体剂在整个制剂中的含量为约0.1～50％重量，优选地，约10～30％重量。水-可分散聚合物在整个制剂中的含量为约0.1～30％重量，优选地，约10～25％重量。稳定剂在整个制剂中的含量为约0.1～10％重量，优选地，约1～5％重量。如果必要，上述制剂还可包含添加剂如着色剂、甜味剂、防腐剂等。
本发明的化合物的剂量随给药对象、靶器官、疾病、给药途径等而变化；在口服给药中，如，对于癌症病人，剂量通常为约0.1mg～约100mg，优选地约1.0～约50mg，并且更优选地约1.0～约20mg每天(对60kg体重)。在肠胃外给药中，单剂量随给药对象、靶器官、疾病、给药途径等而变化，但是有利地，如，对于癌症病人，以约0.01～约30mg，优选地约0.1～约20mg，并且更优选地约0.1～约10mg(对60kg体重)的日剂量经静脉内施用本发明的化合物。剂量可根据本领域已知的方法依照给药对象的体重进行调整。当然，由于上述剂量随多种条件而变，小于上述剂量的量有时候也是足够的。此外，有时候也必须给予大于上述剂量范围的量。
除非副作用成为问题，组合药物的量可设定为任何值。组合药物的日剂量随疾病的严重程度、年龄、性别、体重、对象敏感性差异、给药时期、间隔以及药用制剂的性质、药物以及种类、有效成分的种类等而不同，并且没有具体地限制，在口服给药的情形下，药物的量通常为，例如，从约0.001～2000mg，优选地从约0.01～500mg，还优选地从约0.1～100mg/kg哺乳动物，并且通常一天给药一次或分成每天4-次给药。
在本发明的药物组合物给药中，本发明的化合物可在给药组合药物之后给药或组合药物，在给药本发明的化合物之后给药。或者，它们可以同时给药。当以时间间隔给药的时候，时间间隔随有效成分、药物形式以及给药方法而不同，并且例如，当组合药物首先给药的时候，举例性的给药方法为其中本发明的化合物在给药组合药物以后的1分钟～3天，优选地10分钟～1天，更优选地15分钟～1小时的时间范围内给药。当本发明的化合物的首先给药的时候，举例性的给药方法为其中组合药物在给药本发明的化合物以后的1分钟～1天，优选地10分钟～6小时，更优选地15分钟～1小时的时间范围内给药。
在优选的给药方法中，例如，加工成口服给药制剂的组合药物以约0.001～200mg/kg的日剂量经口服给药，并在15分钟之后，加工成肠胃外给药制剂的本发明的化合物以约0.005～0.5mg/kg的日剂量经肠胃外给药。
本发明还将利用下述参考例、实施例和实验例进行详细解释，但是这些实施例只是举例性的并不限制本发明，并且在不偏离本发明范围的基础上，可能有变化。
在下述实施例中，“室温”通常表示约10℃～约35℃。％在为产率的情形下表示mol/mol％，在为层析中使用的溶剂的情形下表示体积％，并且在其他的情形下表示重量％。在质子NMR谱中，由于较宽而不能证实的质子如OH和NH质子，在数据中没有记载。
用于说明书的其他缩写表示下述含义。
DMFN，N-二甲基甲酰胺BisPyN，N-双(2-吡啶基甲基)TFA三氟乙酸Gu-Amb4-(胍基甲基)苯甲酰基Pic2-哌啶酸在说明书中，氨基酸、肽、保护基、活化基以及其他基团的代码按照IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature表示或利用本领域中的通用代码表示，代码实例显示在下面。对于可能具有光学异构体的氨基酸，除非另有指明，为L形式。
Gly甘氨酸Ala丙氨酸Val缬氨酸Leu亮氨酸Ile异亮氨酸Ser丝氨酸Thr苏氨酸Met蛋氨酸Glu谷氨酸Asp天冬氨酸Lys赖氨酸Arg精氨酸His组氨酸Phe苯基丙氨酸Tyr酪氨酸Trp色氨酸Pro脯氨酸Asn天冬酰胺Gln谷酰胺Cys半胱氨酸NIe正亮氨酸Orn鸟氨酸Asx天冬酰胺或天冬氨酸Glx谷酰胺或谷氨酸Amb4-(氨基甲基)苯甲酸ATP腺苷三磷酸在说明书中的序列识别号(SEQ ID NO)表示了下述序列。人转移素的氨基酸序列下述实施例更详细地举例说明了本发明，但是这些并不限制本发明的范围。
实施例保护的肽树脂合成的一般步骤。
保护的肽-树脂利用基于Fmoc的固相肽合成通过手工构建。Pbf用于Arg侧链保护。Fmoc脱保护利用20％哌啶的DMF溶液实现(2×1分钟，1×20分钟)。Fmoc-氨基酸按照下述方法偶联相对于游离的氨基利用5当量的试剂(Fmoc-氨基酸、N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIPCDI)和HOBt·H2O)在DMF中反应1.5小时。
制备例1BisPy-Amb-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NH2(FM052a)(SEQ ID NO4).
利用通常的偶联步骤将Trp、Arg(Pbf)、Leu、Gly、Phe、Amb残基依次偶联在Fmoc-Rink树脂(0.51mmol/g，78.4mg，0.04mmol)上。用20％哌啶处理后，N-端氨基按照下述方法进行修饰用2-吡啶甲醛(32μL，0.338mmol)和NaBH(OAc)3(112mg，0.528mmol)在DMF-二氯甲烷在25℃反应2小时处理保护的肽树脂。将树脂用TFA/茴香硫醚/m-甲酚/1，2-乙二硫醇/H2O(160∶10∶10∶5∶10∶4，5mL)在0℃处理2小时。通过过滤从反应混合物中分离出树脂，用TFA洗涤两次，并将滤液和洗液合并以在减压下浓缩。在减压下浓缩后，加入冰冷的Et2O。离心收集得到的粉末并倾析以与上清液分离，并将粉末用Et2O洗涤三次，溶解在1N乙酸中，并用蒸馏水稀释。经制备性HPLC(Cosmosil 5C18 AR-II柱，Nacalai Tesque乙腈∶水)纯化后，得到单峰多肽并冻干。肽的纯度用HPLC测定。由此得到的标题肽FM052a为四-TFA盐的形式(8.43mg，15％产率)，为无色冻干粉末。
制备例2Gu-Amb-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NH2(FM053a)(SEQ ID NO3)利用基本上类似于上述针对FM052a制备的步骤进行FM053a的合成，除了吡啶-2-甲醛和氢化的三乙酰氧基硼钠。N-端氨基的修饰利用1H-吡唑-1-甲酰胺-盐酸盐(29mg，0.200mmol)和N，N-二异丙基乙基胺(70mL，0.400mmol)在DMF中处理进行以得到目标肽FM053a的二-TFA盐(5.96mg，14％产率)的无色冻干粉末。
缩写Pbf＝2，2，4，6，7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基；DMF＝N，N-二甲基甲酰胺；BisPy＝N，N-双(2-吡啶基甲基)；TFA＝三氟乙酸；Gu-Amb＝4-(胍基甲基)苯甲酰基；实验例转移素衍生物FM052a和FM053a对胰腺癌症细胞迁移的影响(i)细胞培养胰腺癌症细胞系AsPC-1、BxPC-3、Capan-2、CFPAC-1、Panc-1和Suit-2从American Type Culture Collection购得。将细胞在补充有10％胎牛血清、100单位/ml青霉素和100μg/ml链霉素的适当培养基中培养成单层，在37℃在5％CO2/95％空气的湿度下。对于AsPC-1和Panc-1，一旦达到80％融合，去除培养基，将细胞在磷酸-缓冲盐(PBS)中洗涤，并用带有10％胎牛血清的渐增剂量的转移素(Takeda Chemical Industries，Osaka，Japan)处理，并在15分钟后按照如下的方法分离蛋白。
(ii)病人以及肿瘤样品本研究中包括患有胰腺十二指肠腺癌的30位病人，他们为在1998年1月和2001年6月间在我们部门接受胰腺切除术的患者。排除患有其他胰腺恶性疾病如管内乳突粘蛋白腺癌、腺泡细胞癌以及内分泌肿瘤的病人。组织病理学诊断由Department of Pathology of Kyoto University Hospital证实。胰腺癌症根据pTNM(UICC)系统进行分期(Sobin，L.H.和Fleming，I.D.TNM Classification of Malignant Tumors，fifth edition(1997).UnionInternationale Contre le Cancer and the American Joint Committee on Cancer，Cancer.801803-4.，1997)。在获得病人知情同意后按照制度规定收集肿瘤标本。用于测定mRNA表达的样品在手术时立即在液氮中冷冻并在-80℃储存。
(iii)定量RT-PCR为了监测基因表达，进行定量实时RT-PCR分析。该方法使用DNA聚合酶(AmpliTaq Gold)的5’核酸外切酶活性(Bieche，I.等，Cancer Res.592759-65.，1999；Schmittgen，T.D.等，Anal Biochem.285194-204.，2000；and Yuan，A.等，Lab Invest.801671-80.，2000)。
简言之，在基因特异性PCR引物对限定的扩增区域内，构建用两种荧光染料标记的寡核苷酸探针并指定为TaqMan探针。只要探针是完整的，在5’端报告染料(6-羧基-荧光素，FAM)的发射被在3’端的第二种荧光染料(6-羧基-四甲基-罗丹明，TAMRA)所淬灭。在PCR的延伸期，聚合酶断裂TaqMan探针，导致报告染料的释放。报告染料发射的增加量利用组合分析软件的自动序列检测器(ABI Prism 7700 Sequence Detection System；PEApplied Biosystems)进行检测。反应条件按照厂商的步骤。5μl的cDNA(反转录混合物)与25μl TaqMan Universal PCR Master Mix(PE AppliedBiosystems)和寡核苷酸(对引物终浓度为0.3μM；对TaqMan杂交探针终浓度为0.2μM)在50μl体积中进行分析。
下述引物和TaqMan探针用于分析(TAKEDA)。
对KiSS-1上游引物5’-ACTCACTGGTTTCTTGGCAGC-3’(SEQ ID NO5)下游引物5’-ACCTTTTCTAATGGCTCCCCA-3’(SEQ ID NO6)TaqMan探针5’(FAM)-ACTGCTTTCCTCTGTGCCACCCACT-(TAMRA)3’(SEQ IDNO7)以及，对于hOT7T175，上游引物5’-CGACTTCATGTGCAAGTTCGTC-3’(SEQ ID NO8)下游引物5’-CACACTCATGGCGGTCAGAG-3’(SEQ ID NO9)TaqMan探针5’(FAM)-ACTACATCCAGCAGGTCTCGGTGCAGG-(TAMRA)3’(SEQ IDNO10)热循环参数为95℃进行10分钟(热活化Taq-聚合酶)、然后40个循环的95℃15sec以及60℃1分钟。GAPDH RNA的质量以及标准化评价用TaqMan GAPDH Control Reagent kit(PE Applied Biosystems)进行，后者使用标准的TaqMan探针化学方法。
(iv)蛋白提取以及蛋白印迹用细胞刮刀将细胞收集到微管中并在包含50mM HEPES(pH 7.0)、250mM NaCl、0.1％Nonidet对40、1mM苯基甲基磺酰基氟(PMSF)和20μg/ml加贝酯的磷酸化-抑制性RIPA缓冲剂中裂解60分钟，然后将裂解液超声处理10秒。在4℃在12,000rpm离心10分钟纯化总提取物，收集上清液。利用蛋白分析试剂盒(Tonein-TP，Otsuka Pharmaceutical，Tokyo，Japan)测量蛋白浓度。裂解液再悬浮于1体积的凝胶负载缓冲液中，所述的负载缓冲液包含50mM Tris-HCl(pH 6.7)、4％SDS、0.02％溴酚蓝、20％甘油和4％2-巯基乙醇，并且然后在95℃煮沸90秒。将提取的蛋白如前所述的方法(Wada，M.等，Pancreas.15176-82.，1997)进行蛋白印迹。简言之，将30μg等分的蛋白利用SDS-PAGE(12％凝胶)进行在一维上大小-分级并在半干电转印迹仪器(Bio-Rad，Richmond，CA)上转印迹至0.45-μm聚二氟乙烯膜(Bio-Rad，Richmond，CA)上。然后将印迹利用TBST缓冲液洗涤三次并在室温在第一抗体溶液中孵育2小时，所述的第一抗体溶液包含抗-磷酸ERK抗体(#pTEpY，Promega，Madison，WI)、抗-磷酸p38 MAPK(#pTGpY，Promega，Madison，WI)或抗-磷酸JNK(#pTPpY，Promega，Madison，WI)、0.2％I-block(Promega，Madison，WI)。在TBST缓冲液中洗涤3次后，将印迹与用TBST缓冲液以1∶2000稀释的辣根过氧化酶偶联的抗-兔IgG在室温孵育1小时。在TBST缓冲液中洗涤3次后，将膜用增强的化学发光试剂(AmershamLife Sciences，Amersham，UK)根据厂家的方案进行处理。将膜曝光X-射线膜5-60秒。利用ATTO密度-分析系统AE-6920M(ATTO Corporation，TokyoJapan)测定蛋白表达并将定量表述成数字的形式。靶蛋白的量除以β肌动蛋白并得到相对强度。
(v)细胞增殖分析为了分析增殖，将AsPC-1和Panc-1细胞(1×104细胞/3cm直径的培养皿)接种在10％FBS培养基中，并与渐增剂量的转移素孵育48和96小时。将细胞胰蛋白酶化并用血细胞计数器对细胞计数。
(vi)细胞迁移以及Matrigel侵袭分析将无聚乙烯吡咯烷酮的聚碳酸支架的滤器(8μm pores)安装在微趋化室(Corning Coster Corp.，Cambridge，MA)中。将细胞(2×106细胞的溶液，对AsPC-1而言为200μl RPMI164O，并且对Panc-1而言为200μl DMEM)和肽加入到上室中，并在37℃孵育12小时以容许迁移至下室中，下室对于AsPC-1包含10％FBS/RPMI164O或对于Pane-1包含5％FBS/DMEM作为趋化物。利用棉签从膜的上表面去除未迁移的细胞后，将下表面的细胞固定，用Diff-Quick(International Reagent，Kobe，Japan)染色。定量的时候，将细胞在显微镜下在5个预定的区域以X200计数。
将细胞和肽(2×106细胞，对于AsPC-1为200μl RPMI164O；并且对于Panc-1为200μl DMEM)加入到Matrigel-包被的Transwell(8μm pores，BectonDickinson Labware，Bedford，MA)中，并在37℃孵育12小时，而下室对AsPC-1包含10％FBS/RPMI164O或对Panc-1包含5％FBS/DMEM。除去Matrigel并从膜的上表面去除细胞后，将下表面的细胞固定，用Diff-quick染色并同时定量。侵袭指数定义为侵袭细胞的数目/迁移的细胞。
(vii)统计分析对于重复测量，首先利用双向变量分析(ANOVA)进行密度计量或迁移活性组间的比较统计学评价，然后利用Turkey Kramer HDS进行post-hoc检验。为了比较胰腺组织中的mRNA水平，进行Wilcoxon秩和检验。利用秩方检验(或Fisher′s精确概率检测)，比较带有高和低KiSS-1或hOT7T175的30位病人中临床病理特征。所有的分析独立进行三次。利用适合Macintosh的JMP统计软件(版本3.02)进行统计分析。概率p值＜0.05认为统计显著。
(viii)胰腺癌症组织中的KiSS-1和hOT7T175表达首先，利用实时RT-PCR考察了在30例侵袭性十二指肠癌以及在5例邻近正常胰腺中的KiSS1及其受体hOT7T175的mRNA水平(图1)。在5/5正常胰腺组织中检测到低水平的转移素mRNA，而只有14/30的胰腺十二指肠癌组织表达转移素。与正常胰腺组织相比，胰腺癌症组织倾向于表达低水平的转移素mRNA。相反，转移素受体hOT7T175 mRNA的表达在30/30胰腺癌症中检测到，尽管在正常胰腺组织中没有观察到表达。
从统计学的角度讲，胰腺癌症组织可能比正常胰腺组织表达较少的转移素(p＝0.0183)，并且与正常胰腺组织相比可能表达更高的转移素受体hOT7T175(p＝0.0272)。在成对的5份样品中，与邻近的正常胰腺组织标本相比，hOT7T175表达在所有的胰腺癌症中过表达(数据未显示)。没有发现转移素和hOT7T175表达水平与临床病理因素如肿瘤大小、TNM状态、腹膜后侵袭或神经侵袭之间的明显相关性。
(ix)转移素及其受体在胰腺癌症细胞系中的表达如上所述，转移素mRNA及其受体hOT7T175 mRNA在6种胰腺癌症细胞系中的的表达利用实时RT-PCR进行检测(图2)。在6种胰腺癌症细胞中，AsPC-1和Suit-2表达低水平的转移素而其他4种细胞系没有表达。相反，所有的细胞系表达hOT7T175，一种人转移素受体，并且Panc-1表达最为强烈。根据这些结果，AsPC-1细胞系选择作为低表达hOT7T175的代表并且Panc-1细胞系选择作为高表达hOT7T175的代表，并将AsPC-1和Panc-1用于后续研究中。
(x)内源性转移素受体对增殖、迁移和侵袭的影响利用上述两种细胞系考察了转移素对胰腺癌症增殖的影响。将重组的转移素加入到指数生长期的AsPC-1细胞和Panc-1细胞中，终浓度为0、100nM、1μM和10μM并处理48小时和96小时。图3显示了AsPC-1细胞或Panc-1细胞在转移素培养下的细胞生长曲线。无论是AsPC-1还是Panc-1都没有显示在转移素孵育下的生长延迟，暗示转移素对胰腺癌症细胞生长没有影响。
接着，考察在这些细胞系中转移素对迁移活性以及对侵袭活性的影响。图4A显示了用渐增剂量的转移素(0nM、100nM、1μM、10μM)处理12小时后AsPC-1和Panc-1的迁移判分。将2×106/ml细胞与转移素在上层室中孵育以容许迁移至下层室，下层室中包含10％FBS/培养基作为趋化物。转移素抑制高达40％下降的Panc-1细胞的迁移活性(p＜0.01)，但是AsPC-1显示受到很小的影响。与AsPC-1相比，在1和10μM加入的转移素，Panc-1的迁移评分也显著地下降(p＜0.01，二者都)，尽管只观察到轻微下降的AsPC-1细胞迁移。相反，当被迁移活性补偿的时候，无一种细胞系显示与转移素伴随孵育的任何侵袭性下降(图4B)。图4b显示AsPC-1和Panc-1细胞在用转移素处理12小时后的侵袭分析。将细胞和肽(2×106细胞/ml)加入到Matrigel-包被的Transwell中，并在37℃孵育12小时，下层室中包含10％FBS/培养基。加入10μM转移素，AsPC-1和Panc-1的侵袭活性都不受影响。
(xi)通过内源性转移素受体的ERK激活为了评价胰腺癌症中由内源性转移素受体激活的信号通路，考察了通过用转移素处理的MAPK激活。在迁移或侵袭分析情形下，将指数期的细胞在包含血清的培养基中培养，并且然后转移到带有转移素的1％BSA培养基中。在与渐增剂量的转移素(0μM，0.1μM，1μM，10μM)培养15分钟后，利用免疫印迹测量ERK1/2、p38和JNK1/2的激活(图5A)。蛋白印迹分析证实相应于磷酸化ERK1(pERK1)和磷酸化ERK2(pERK2)的双带、磷酸化p38(pp38)的单带以及显示磷酸化JNK1(pJNK1)和磷酸化JNK2(pJNK2)的双带。在AsPC-1和在Panc-1中，pERK1都随着附加的转移素的剂量的增加而增加。在Panc-1中观察到轻微的p38的激活而在AsPC-1中没有观察到。在加入转移素的情形下，没有观察到pJNKs的下降或增加。图5B显示了在AsPC-1和在Panc-1细胞中的pERK1/2和pp38的相对强度。在Panc-1中和在AsPC-1中，转移素都增加了ERK1的活化，并且在Panc-1中轻微活化的p38而不是JNK在这些条件下呈剂量依赖的方式(图5B)。
(xii)KiSS-1衍生肽，FMO53a和FMO52a降低表达hOT7T175的癌症细胞系的迁移利用如上的方法合成转移素-52肽的两个更短的变体并分别定义为FMO53a和FMO52a(图6)。潜在的二碱断裂位点(RK/RR)和裂解/酰胺化位点(GKR)用粗体字母表示。下划线字母显示预测的信号肽。考察了它们对对强烈表达hOT7T175的Panc-1细胞的生物活性。图7A显示了在两种肽，KiSS-1短衍生物，FMO53a和FMO52a诱导下的Panc-1的增殖活性。正如所预期的，细胞生长不被这两种衍生物所影响。在迁移活性分析中，这两种肽降低了Panc-1细胞的迁移指数，尽管FMO53a的抑制活性弱于FMO52a，后者具有与转移素几乎相同的活性(图7B)。为了比较这些肽与转移素的信号转导，利用如上的免疫印迹考察了ERK1/2、p38和JNK的活化。利用这两种肽以及转移素在Panc-1细胞中观察到ERK1的活化。但是，与FMO52a相比，带有FMO53a接触的Panc-1细胞显示较少的pERK1活化，该结果与前述的迁移抑制结果一致。在与这两种衍生物孵育后，pp38被轻微地活化并且pJNKs没有增加(图7C)。ERK激活速率似乎与这些的肽迁移-抑制程度紧密相关。
工业适用性本发明的转移素衍生物(I)或其盐或其前药具有优良的癌症转移抑制活性和癌症增殖抑制活性，并可用作癌症(如肺癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌、直肠癌、结肠癌、前列腺癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、肾脏癌、膀胱癌、脑瘤等)的预防或治疗药物。本发明的转移素衍生物或其盐或其前药具有胰腺功能调节活性，并可用作预防或治疗胰腺疾病(如急性或慢性胰腺炎、胰腺癌等)的药物。本发明的转移素衍生物或其盐或其前药具有胎盘功能调节活性，并且可用作绒毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂肪代谢障碍或分娩诱导的预防或治疗药物。
序列表<110>武田药品工业株式会社(TAKEDA PHARMACEUTICAL COMPANYLIMITED)<120>转移素衍生物及其用途<130>
<160>1<210>1<211>54<212>PRT<213>人<400>1Gly Thr Ser Leu Ser Pro Pro Pro Glu Ser Ser Gly Ser Arg Gln Gln1 5 10 15Pro Gly Leu Ser Ala Pro His Ser Arg Gln Ile Pro Ala Pro Gln Gly2025 30Ala Val Leu Val Gln Arg Glu Lys Asp Leu Pro Asn Tyr Asn Trp Asn3540 45Ser Phe Gly Leu Arg Phe50<210>2<211>145<212>PRT<213>人(Homo sapiens)<400>2Met Asn Ser Leu Val Ser Trp Gln Leu Leu Leu Phe Leu Cys Ala Thr1 5 10 15His Phe Gly Glu Pro Leu Glu Lys Val Ala Ser Val Gly Asn Ser Arg20 25 30
Pro Thr Gly Gln Gln Leu Glu Ser Leu Gly Leu Leu Ala Pro Gly Glu35 40 45Gln Ser Leu Pro Cys Thr Glu Arg Lys Pro Ala Ala Thr Ala Arg Leu50 55 60Ser Arg Arg Gly Thr Ser Leu Ser Pro Pro Pro Glu Ser Ser Gly Ser65 70 75 80Arg Gln Gln Pro Gly Leu Ser Ala Pro His Ser Arg Gln Ile Pro Ala85 90 95Pro Gln Gly Ala Val Leu Val Gln Arg Glu Lys Asp Leu Pro Asn Tyr100 105 110Asn Trp Asn Ser Phe Gly Leu Arg Phe Gly Lys Arg Glu Ala Ala Pro115 120 125Gly Asn His Gly Arg Ser Ala Gly Arg Gly Trp Gly Ala Gly Ala Gly130 135 140Gln145<210>3<211>5<212>PRT<213>人工序列<220>
<223>人工序列的描述合成的肽FMO53a<220>
<223>C-端酰胺化<400>3Phe Gly Leu Arg Trp1 5
<210>4<211>5<212>PRT<213>人工序列<220>
<223>人工序列的描述合成的肽FMO52a<220>
<223>C-端酰胺化<400>4Phe Gly Leu Arg Trp1 5<210>5<211>21<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列的描述引物<400>5actcactggt ttcttggcag c 21<210>6<211>21<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列的描述引物
<400>6accttttcta atggctcccc a 21<210>7<211>25<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列的描述探针<400>7actgctttcc tctgtgccac ccact 25<210>8<211>22<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列的描述引物<400>8cgacttcatg tgcaagttcg tc 22<210>9<211>20<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列的描述引物<400>9cacactcatg gcggtcagag 20<210>10<211>27<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>人工序列的描述探针<400>10actacatcca gcaggtctcg gtgcagg 2权利要求
1.下式表示的转移素衍生物，或其盐X-AA1-AA2-AA3-AA4-Z(I)其中X为下式表示的基团 其中Y为下式表示的基团 或 其中R1、R2、R3和R4各自选自氢原子或C1-6烷基，W1和W2各自选自氢原子、C1-6烷基、C6-14芳基或杂环基，R为下式表示的基团 或 n为0、1或2，AA1为天然或非天然的芳香族氨基酸，AA2为Gly、Ala、Pro或Pic，AA3为脂肪族氨基酸，AA4为碱性氨基酸或瓜氨酸，以及Z选自(i)天然或非天然的芳香族氨基酸，或其酰胺，或其酯，(ii)下式表示的基团 其中n1为0、1或2，(iii)下式表示的基团 其中n2为0、1或2，或(iv)下式表示的基团 其中n2为0、1或2。
2.权利要求1的转移素衍生物(I)，选自4-[N，N-双(2-吡啶基甲基)氨基甲基]苯甲酰基-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NH2(FM052a)(SEQ ID NO4)、4-(胍基甲基)苯甲酰基-Phe-Gly-Leu-Arg-Trp-NH2(FM053a)(SEQ ID NO3)或其盐。
3.权利要求1的转移素衍生物(I)或其盐的前药。
4.一种药物组合物，包括药学上可接受的载体和治疗有效量的权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
5.权利要求4的药物组合物，其为抑制癌症转移的药物或抑制癌症增殖的药物。
6.权利要求4的药物组合物，其为预防或治疗癌症的药物。
7.权利要求4的药物组合物，其为调节胰腺功能的药物。
8.权利要求4的药物组合物，其为预防或治疗急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症的药物。
9.权利要求4的药物组合物，其为调节哺乳动物胎盘功能的药物。
10.权利要求4的药物组合物，其为预防或治疗纤毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂质代谢障碍或引产的药物。
11.一种抑制哺乳动物中癌症转移或癌症增殖的方法，所述的方法包括向哺乳动物施用有效量的权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
12.一种预防或治疗哺乳动物中癌症的方法，包括向哺乳动物施用有效量的权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
13.一种调节哺乳动物中胰腺功能的方法，包括向哺乳动物施用有效量的权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
14.一种预防或治疗哺乳动物中急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症的方法，包括向哺乳动物施用有效量的权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
15.一种调节哺乳动物胎盘功能的方法，包括向哺乳动物施用有效量的权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
16.一种预防或治疗哺乳动物中下列疾病的方法纤毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂质代谢障碍或引产，所述的方法包括向哺乳动物施用有效量的权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
17.一种用于抑制癌症转移或抑制癌症增殖的药物，包括权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
18.一种用于预防或治疗癌症的药物，包括权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
19.一种用于调节哺乳动物胰腺功能的药物，包括权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
20.一种用于预防或治疗哺乳动物急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症的药物，包括权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
21.一种用于调节哺乳动物胎盘功能的药物，包括权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
22.一种用于预防或治疗哺乳动物中纤毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂质代谢障碍或引产的药物，包括权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药。
23.权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于抑制癌症转移或抑制癌症增殖的药物中的用途。
24.权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于预防或治疗癌症增殖的药物中的用途。
25.权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于调节哺乳动物胰腺功能的药物中的用途。
26.权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于预防或治疗哺乳动物急性或慢性胰腺炎或胰腺癌症的药物中的用途。
27.权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于调节哺乳动物胎盘功能的药物中的用途。
28.权利要求1的转移素衍生物(I)，或其盐或其前药在制备用于预防或治疗哺乳动物中纤毛癌症、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、流产、胎儿发育不全、糖代谢障碍、脂质代谢障碍或引产的药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及由式X－AA
文档编号C07K7/06GK1756765SQ200480006089
公开日2006年4月5日 申请日期2004年1月5日 优先权日2003年1月6日
发明者藤井信孝, 土井隆一郎, 大石真也 申请人:武田药品工业株式会社