专利名称：取代的吲哚酸衍生物及其作为pai－1抑制剂的应用的制作方法
相关申请的交叉引用本申请要求2004年9月23日申请的美国申请号＿＿的优先权，该申请又要求2003年9月25日申请的美国临时申请60/505,820的优先权，上述申请的全部公开内容通过引用结合到本文中。
背景技术：
本发明总的来讲涉及取代的吲哚及其使用方法。
丝氨酸蛋白酶抑制剂PAI-1是纤维蛋白溶解系统的主要抑制剂之一。纤维蛋白溶解系统包括血纤维蛋白溶酶原，该酶原通过两种组织型血纤维蛋白溶酶原激活物t-PA和u-PA之一转化为活性酶，即纤维蛋白溶酶。PAI-1是t-PA和u-PA的主要生理性抑制剂。纤维蛋白溶解系统中纤维蛋白溶酶的主要作用之一是在血管损伤部位消化纤维蛋白。然而，纤维蛋白溶解系统不但负责从循环除去纤维蛋白，而且参与多种其它生物学过程，包括排卵、胚胎发生、内膜增生、血管生成、肿瘤发生和动脉粥样硬化。
高浓度PAI-1与多种疾病和病症有关，包括与纤维蛋白溶解系统障碍相关的疾病和病症。例如，高浓度的PAI-1涉及血栓性疾病，例如特征为血栓形成、阻塞局部血管的血流或脱落成栓子堵塞下游血流(血栓栓塞)的疾病。(Krishnamurti，Blood，69，798(1987)；Reilly，Arteriosclerosis and Thrombosis，11，1276(1991)；Carmeliet，Journalof Clinical Investigation，92，2756(1993)，Rocha，Fibrinolysis，8，294，1994；Aznar，Haemostasis 24，243(1994))。PAI-1活性的抗体中和作用促进内源性血栓溶解和再灌注(Biemond，Circulation，91，1175(1995)；Levi，Circulation 85，305，(1992))。在例如以下疾病中也涉及高浓度PAI-1多囊卵巢综合征(Nordt，Journal of clinicalEndocrinology and Metabolism，85，4，1563(2000))、雌激素缺乏症诱发的骨丢失(Daci，Journal of Bone and Mineral Research，15，8，1510(2000))、囊性纤维化、糖尿病、慢性牙周炎、淋巴瘤、胞外基质累积相关性疾病、新血管形成相关性恶性肿瘤和疾病、炎性疾病、伴随感染的血管损伤以及伴随uPA浓度增高的疾病(例如乳腺癌和卵巢癌)。
考虑到以上原因，有需要鉴定PAI-1活性抑制剂，并且需要利用所鉴定的抑制剂调节患者PAI-1的表达或活性从而治疗高浓度PAI-1相关性疾病的方法。
发明概述本发明提供取代的吲哚及其使用方法。在某些实施方案中，提供取代的1-芳烷基或1-芳基-1H-吲哚，包括下式化合物 式1其中X为化学键或C1-C6亚烷基；R1和R2独立地为氢、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基、杂环基、-C(＝O)C1-C6烷基、-C(＝O)芳基、-C(＝O)杂环、-C(＝O)N(R6)C1-C6烷基、-C(＝O)N(R6)芳基、-C(＝O)N(R6)杂环、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-芳基或-SO2-杂环；或者R1和R2一起构成杂环；
R3和R4独立地为氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、-C(＝O)C1-C3烷基、-OH、-NH2或-NO2；R5为氢、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基或杂环基；A为氢、C6-C10芳基或杂环基；R6为氢、C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、C6-C10芳基、杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、C1-C6烷基氨基、二烷基氨基(每个烷基部分都含有1-6个碳原子)、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基或-NHSO2-杂环。
本发明还提供尤其是式1的药物可接受的盐或酯形式。
本发明还进一步提供取代的吲哚的使用方法。在本发明的一个方面，将治疗有效量的一种或多种取代吲哚给予患者，从而通过例如抑制患者的PAI-1活性而治疗PAI-1相关性疾病。PAI-1活性与许多疾病和病症相关。例如，在本发明一个实施方案中，PAI-1活性与纤维蛋白溶解系统障碍相关。在其它实施方案中，PAI-1活性与以下疾病和病症相关血栓形成(例如静脉血栓形成、动脉血栓形成、脑血栓形成和深静脉血栓形成)、心房纤维性颤动、肺纤维化、外科手术的血栓栓塞性并发症、心血管疾病例如心肌缺血、动脉粥样硬化斑块形成、慢性阻塞性肺病、肾纤维化、多囊卵巢综合征、阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease)或癌症。
发明详述A.总论本发明提供抑制PAI-1活性的化合物、制备这样的化合物的方法、包含这样的化合物的药物组合物以及在医学治疗中使用这样的化合物的方法。本发明化合物具有可用于治疗(包括预防和抑制)多种不同疾病和病症的特性，所述疾病和病症包括涉及PAI-1的产生和/或作用的疾病和病症。它们包括纤维蛋白溶解系统障碍导致的疾病，包括但不限于血栓形成、冠心病、肾纤维化、动脉粥样硬化斑块形成、肺病、心肌缺血、心房纤维性颤动、凝血综合征、外科手术的血栓栓塞性并发症、外周动脉闭塞和肺纤维化。其它疾病包括但不限于多囊卵巢综合征、阿尔茨海默病以及癌症。
无论是单独使用还是作为另一基团的组成部分使用，本文使用的术语“烷基”和“亚烷基”均指取代或未取代的脂族烃链，区别在于烷基本质上是单价的(即端基)，而亚烷基是二价的并且通常作为连接基。除非另有明确的说明，否则这两种基团均包括但不限于含1个至约12个碳原子、优选1个至约6个碳原子的直链和支链。例如，术语“烷基”包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基和叔丁基。“烷基”的定义明确包括那些任选取代的脂族烃链。在本发明代表性实施方案中，任选取代基可以包括C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、任选被R4取代的芳基、任选被R7取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-杂环。
R7为卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、羟基、-C(＝O)C1-C7烷基、-SO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基或烷氧基羰基烷基。在某些实施方案中，R7包括C2-7酰基。
本文定义中的碳数目是指主链碳和支链碳，但是不包括取代基(例如烷氧基取代基等)的碳原子。
无论是单独使用还是作为另一基团的组成部分使用，本文使用的术语“烯基”是指取代或未取代的脂族烃链，包括但不限于含有2个至约10个碳原子(除非另有明确的说明)以及至少一个双键的直链和支链。优选烯基部分含有1-2个双键。这样的烯基部分可以为E型或Z型构象，本发明化合物包括这两种构象。“烯基”的定义明确包括那些任选取代的脂族烃链。在本发明代表性实施方案中，任选取代基可以包括C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、任选被R7取代的芳基、任选被R7取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-杂环。连接烯基的杂原子(例如O或S)不应该与连接双键的碳原子连接。
除非另有说明，否则本文定义的单独使用或结合其它术语使用的术语“酰基”，是指共价连接至指定化学结构的碳原子被氧化为羰基氧化态的芳基烷基、杂芳基烷基、(C2-C10)直链或(C4-C11)支链单价烃基。这样的烃基可以是单不饱和或多不饱和的，并且可以为E或Z构型。本发明化合物包括所有可能的E和Z构型。酰基的实例包括但不限于这样的化学基团乙酰基、丙酰基、丁酰基、3，3-二甲基丁酰基、三氟乙酰基、新戊酰基、己酰基、己烯酰基、癸酰基、苯甲酰基、烟酰基、异烟酰基及其同系物、异构体等。
无论是单独使用还是作为另一基团的组成部分使用，本文使用的术语“炔基”是指取代或未取代的脂族烃链，包括但不限于含有2个至约10个碳原子(除非另有明确的说明)以及至少一个三键的直链和支链。优选炔基部分含有约2个至约7个碳原子。在某些实施方案中，炔基可以包含不止一个三键，在这样的情况下，炔基必须包含至少三个碳原子。在本发明代表性实施方案中，任选取代基可以包括C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、任选被R7取代的芳基、任选被R7取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-杂环。连接炔基的杂原子(例如O或S)不应该与连接三键的碳原子连接。
无论是单独使用还是作为另一基团的组成部分使用，本文使用的术语“环烷基”是指含有3个至约20个碳原子(除非另有明确的说明)、优选3个至约8个碳原子的取代或未取代的脂环烃基。“环烷基”的定义明确包括那些任选取代的脂环烃基。在本发明代表性实施方案中，任选取代基可以包括C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、任选被R7取代的芳基、任选被R7取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-杂环。
无论是单独使用还是作为另一基团的组成部分使用，本文使用的术语“芳基”定义为含有5个至约50个碳原子(除非另有明确的说明)、优选约6个至约10个碳原子的取代或未取代的芳烃环基。“芳基”可以有一个环或多个稠环。术语“芳基”包括但不限于苯基、α-萘基、β-萘基、联苯基、蒽基、四氢萘基、芴基、茚满基、亚联苯基和苊基。“芳基”的定义明确包括那些任选取代的芳族基团。例如，在本发明代表性实施方案中，“芳基”任选被1-5个选自以下的取代基取代酰氧基、羟基、芳基、酰基、烷酰基、1-6个碳原子的烷基、1-6个碳原子的烷氧基、2-6个碳原子的烯基、2-6个碳原子的炔基、取代烷基、取代烷氧基、取代烯基、取代炔基、氨基、被1-2个含有1-6个碳原子的烷基取代的氨基、氨基酰基、酰基氨基、叠氮基、氰基、卤素、硝基、1-6个碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6个碳原子的硫代烷氧基和三卤代甲基。在本发明示例性实施方案中，所述任选取代基包括C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、任选被R7取代的芳基、任选被R7取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6全氟烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-杂环。
本文使用的术语“烷氧基”是指R5-O-，其中Ra为上文定义的烷基。“烷氧基”的定义明确包括那些任选取代的烷氧基。
本文使用的术语“芳基-氧基”是指Rb-O-，其中Rb为上文定义的芳基。
本文使用的术语“烷酰基”是指-C(＝O)-烷基，其中烷基的定义同上。示例性烷酰基包括但不限于乙酰基、正丙酰基、正丁酰基、2-甲基丙酰基、正戊酰基、2-甲基丁酰基、3-甲基丁酰基、2，2-二甲基丙酰基、庚酰基和癸酰基。烷酰基的烷基部分可以任选被取代。
术语“芳基烷基”或“芳烷基”是指-Ra-Rb，其中Ra是被上文定义的芳基Rb取代的上文定义的烷基。优选所述烷基具有1-6个碳原子。芳基烷基的实例包括但不限于苄基、1-苯基乙基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、2-苯基丙基等。
本文使用的术语“烷氧基羰基烷基”是指Rc-O-C(＝O)Rc-，其中Rc为上文定义的烷基。优选烷氧基羰基烷基具有3-13个碳原子。
本文使用的术语“烷基氨基”是指Rc-NH-，其中Rc为上文定义的烷基，并且优选具有1-6个碳原子。
本文使用的术语“二烷基氨基”是指-N(C1-C6烷基)2。
本文使用的术语“-SO2-C1-C6烷基”是指-S(O2)-Ra，其中Ra是以上定义的1-6个碳原子的烷基。
术语“二环烷基”是指结构中具有2个桥接环并且包含约7个至约20个碳原子(除非另有明确的说明)(以及各范围的所有组合与再组合以及其中的具体碳原子数目)、优选约7个至约11个碳原子的任选取代的烷基。示例性二环烷基环结构包括但不限于降冰片基、冰片基、[2.2.2]-二环辛基、顺蒎烷基、反蒎烷基、莰基、异冰片基和葑基。代表性的取代基包括例如C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、任选被R7取代的芳基、任选被R7取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-杂环。
无论是单独使用还是作为另一基团的组成部分使用，本文使用的术语“杂环”是指稳定的含碳原子和1-4个选自氮、氧和硫的杂原子的3元环至约10元环。本发明的杂环可以是单环或二环系统，并且可以是饱和、不饱和或部分饱和的。杂环可以任选与苯环稠合。杂环基包括但不限于吖丙啶基、氮杂环丁烷基、1，4-二烷基、六氢吖庚因基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑基、二氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、二氢-1，4-二烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢喹啉基和四氢异喹啉基。优选的杂环部分包括(a)含1-2个氮原子的饱和、部分不饱和或不饱和的6元杂环，任选稠合苯环；(b)含1-3个氮原子、氧原子或硫原子的饱和、部分饱和或不饱和的5元杂环，任选稠合苯环；(c)含1-4个氮原子、氧原子或硫原子的饱和、部分不饱和或不饱和的二环杂环；(d)咔唑、二苯并呋喃和二苯并噻吩。“杂环”的定义明确包括那些任选取代的杂环。代表性的取代基包括例如C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、任选被R7取代的芳基、任选被R7取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基和-NHSO2-杂环。
本文使用的术语“杂芳基”定义为取代或未取代的芳族杂环系(单环或二环)。杂芳基可以具有例如约3个至约50个碳原子(除非另有明确的说明)，优选约4个至约10个碳原子。在某些实施方案中，杂芳基是具有约4个至约14个环原子(包括碳原子和1-4个选自氧、氮或硫的杂原子)的芳族杂环系。代表性杂芳基基团为呋喃、噻吩、吲哚、氮杂吲哚、唑、噻唑、异唑、异噻唑、咪唑、N-甲基咪唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、吡咯、N-甲基吡咯、吡唑、N-甲基吡唑、1，3，4-二唑、1，2，4-三唑、1-甲基-1，2，4-三唑、1H-四唑、1-甲基四唑、苯并唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并异唑、苯并咪唑、N-甲基苯并咪唑、氮杂苯并咪唑、吲唑、喹唑啉、喹啉和异喹啉。二环芳族杂芳基包括稠合以下环的苯基、吡啶、嘧啶或哒嗪(pyridizine)环(a)含1个氮原子的6元芳族(不饱和)杂环；(b)含2个氮原子的5-6元芳族(不饱和)杂环；(c)含1个氮原子以及1个氧原子或1个硫原子的5元芳族(不饱和)杂环；或(d)含1个选自O、N或S的杂原子的5元芳族(不饱和)杂环。“杂芳基”的定义明确包括那些任选取代的芳族基团。因此，本文描述的杂芳基(例如吡啶基)是指未取代或取代的基团。在本发明代表性实施方案中，“杂芳基”任选被1-5个选自以下的取代基取代酰氧基、羟基、酰基、1-6个碳原子的烷基、1-6个碳原子的烷氧基、2-6个碳原子的烯基、2-6个碳原子的炔基、取代烷基、取代烷氧基、取代烯基、取代炔基、氨基、被1-2个含1-6个碳原子的烷基取代的氨基、氨基酰基、酰基氨基、叠氮基、氰基、卤素、硝基、1-6个碳原子的硫代烷氧基、取代的1-6个碳原子的硫代烷氧基和三卤代甲基。
无论是单独使用还是作为另一基团的组成部分使用，本文使用的术语“全氟烷基”是指含1-6个碳原子以及2个或2个以上的氟原子的饱和脂族烃基，包括但不限于直链或支链，例如-CF3、-CH2CF3、-CF2CF3和-CH(CF3)2。
术语“卤素”或“卤代”是指氯、溴、氟和碘。
术语“治疗”是指任何成功改善损伤、病理或疾病的指征，包括任何客观或主观参数，例如症状的减轻、缓解或减少，或者使患者更能忍受损伤、病理或疾病；减慢变性或衰退速率；减弱最终的变性点；或者改善患者的身体或精神健康状况。症状的治疗或改善可以基于客观或主观参数；包括身体检查、神经病学检查和/或精神病学评价的结果。“治疗PAI-1相关性疾病”包括预防患者(可能易患PAI-1相关性疾病，但是还没有感觉或出现该病症状的患者)症状的发生(预防性治疗)、抑制该病的症状(减慢或阻止其发展)、缓解该病的症状或副作用(包括姑息疗法)和/或消除该病的症状(使症状消退)。因此，术语“治疗”包括将本发明化合物或药物给予患者以预防或延迟、减轻、阻止或抑制PAI-1相关性疾病的症状或病症(例如癌症相关的肿瘤生长)的发展。熟练的医务人员知道如何利用标准方法确定患者是否患有与PAI-1的浓度和/或活性提高相关的疾病，例如通过检查患者后确定患者是否患有已知与PAI-1的浓度和/或活性提高有关的疾病，或者分析怀疑患有PAI-1相关性疾病个体的血浆或组织的PAI-1浓度，然后与健康个体的血浆或组织的PAI-1浓度相比较。PAI-1浓度增高表示有病。因此，本发明还特别提供将本发明化合物给予患者的方法以及测定患者PAI-1浓度的方法。患者的PAI-1浓度可以在给予化合物之前和/或之后进行测定。
在健康个体中，PAI-1在血浆中的浓度低(约5-26ng/ml)，但是在许多PAI-1相关性疾病中的浓度升高，包括例如动脉粥样硬化(Schneiderman J.等，Proc Natl Acad Sci 896998-7002，1992)、深静脉血栓形成(Juhan-Vague I等，Thromb Haemost 5767-72，1987)以及非胰岛素依赖性糖尿病(Juhan-Vague I等，Thromb Haemost 78565-660，1997)。PAI-1使动脉血栓以及静脉血栓稳定，分别促使心肌梗塞后冠状动脉闭塞(Hamsten A等，Lancet 23-9，1987)以及矫形外科手术痊愈后的静脉血栓形成。(Siemens HJ等，J Clin Anesthesia11622-629，1999)。例如，绝经后妇女的血浆PAI-1也会升高，因此认为这是造成此类人群心血管疾病的发病率提高的原因(Koh K等，N Engl J Med 336683-690，1997)。
术语“PAI-1相关性疾病”是指与PAI-1表达或活性提高或增强相关的、或者与编码PAI-1的基因的表达或活性提高或增强相关的任何疾病或病症。这样的活性或表达的提高的实例可能包括一种或多种下述情况蛋白活性或蛋白编码基因表达超过正常受治疗者的相应水平；在正常受治疗者中通常不能检出蛋白活性或蛋白编码基因表达的器官、组织或细胞中检测到蛋白活性或蛋白编码基因表达(即蛋白的空间分布或蛋白编码基因的表达发生改变)；当蛋白活性或蛋白编码基因表达在器官、组织或细胞中存在的时间比在正常受治疗者中存在的时间长时，蛋白活性或蛋白编码基因表达增强(即蛋白活性或蛋白编码基因表达的持续时间增加)。正常或健康受治疗者是没有患PAI-1相关性疾病的受治疗者。
术语“药物可接受的赋形剂”是指可用于制备药物组合物的赋形剂，通常安全、无毒且符合要求，包括兽用及人用药物可接受的赋形剂。这样的赋形剂可以是固体、液体、半固体，或者就气雾剂组合物而论还可以为气体。
“药物可接受的盐和酯”是指药物可接受的并且具有所需药理学性质的盐和酯。例如，这样的盐包括在化合物中存在酸性质子时能与无机碱或有机碱反应形成的盐。合适的无机盐包括例如与碱金属或碱土金属(例如钠和钾，镁、钙和铝)形成的盐。合适的有机盐包括例如与有机碱(例如胺碱，例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等)形成的盐。药物可接受的盐还可以包括酸加成盐，酸加成盐通过母体化合物中的碱性部分(例如胺)与无机酸(例如盐酸和氢溴酸)以及有机酸(例如乙酸、柠檬酸、马来酸、烷烃磺酸和芳烃磺酸，例如甲磺酸和苯磺酸)反应生成。药物可接受的酯包括由本发明化合物中存在的羧基、磺酰氧基和膦酰氧基形成的酯，例如C1-6烷基酯。当存在两个酸性基团时，药物可接受的盐或酯可以为单酸单盐、单酸单酯、二盐或二酯；类似地，当存在两个以上酸性基团时，部分或全部这样的基团可以被盐化或酯化。本发明中命名的化合物可以未盐化或未酯化形式、或者盐化和/或酯化形式存在，并且这样的化合物命名包括原化合物(未盐化未酯化)及其药物可接受的盐和酯。另外，本发明中命名的某些化合物可能存在一种以上立体异构形式，这样的化合物命名包括所有单一立体异构体和这样的立体异构体的所有混合物(不管是外消旋的还是其它形式的)。
表达或活性的“抑制剂”、“激活物”和“调节剂”分别是指采用表达或活性的体外及体内试验所鉴定的抑制性、激活性或调节性分子。本发明抑制剂是具有下述功能的组合物抑制PAI-1表达或者抑制结合PAI-1，部分或完全阻断PAI-1活性的刺激作用，降低PAI-1活性，阻止PAI-1活性，延迟PAI-1活性的激活作用，钝化PAI-1活性，脱敏PAI-1活性，或者下调PAI-1活性。包含PAI-1的样品或被分析物可以用本发明组合物处理，然后与没有本发明组合物的对照样品比较。可以指定对照样品(未用本发明组合物处理)的相对活性值为100％。在某些实施方案中，当相对于对照的活性值为约80％或80％以下时，任选为50％、25％、10％、5％或1％时，则实现对PAI-1的抑制。
在涉及组合物、载体、稀释剂和试剂时，术语“药物可接受的”、“生理上可耐受的”以及它们的其它说法可互换使用，并且表示所述材料能够给予人，而不会产生可能达到禁止给予本发明化合物程度的不良生理作用，例如恶心、头晕、胃部不适等。
“治疗有效量”或“药用有效量”是指给予患者后产生所需作用的剂量。举例来讲，为了抑制PAI-1活性而给予患者时，“治疗有效量”足以抑制PAI-1活性。为了治疗某种疾病而给予患者时，“治疗有效量”足以有效治疗该种疾病。
除非另有说明，否则术语“受治疗者”或“患者”可互换使用，并且是指哺乳动物，例如病人和非人类灵长类以及实验动物(例如兔、大鼠和小鼠)和其它动物。因此，本文使用的术语“受治疗者”或“患者”是指可以给予本发明化合物的任何哺乳动物患者或受治疗者。在本发明示例性实施方案中，为了确定用本发明方法治疗的患者，采用公认的筛选方法确定与目标或怀疑的疾病或病症相关的风险因素，或者确定患者现有疾病或病症的状态。例如，这些筛选方法包括用于确定与目标或怀疑的疾病或病症相关的风险因素的常规检查。以上方法及其它常规方法允许临床医师选出需要使用本发明方法和制剂治疗的患者。
当任何变量在任何组分或结构式中不止出现一次时，该变量在每次出现时的定义独立于其在其它每次出现时的定义。取代基和/或变量的组合只有在这样的组合能产生稳定的化合物时才被允许。
B.取代的吲哚本发明提供取代的吲哚。优选给予这样的化合物用于抑制患者的PAI-1表达或活性，最终治疗患者的与PAI-1活性增加相关的疾病或病症，例如PAI-1相关性疾病。
取代的吲哚包括下式化合物
式1其中X为化学键或C1-C6亚烷基；R1和R2独立地为氢、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基、杂环基、-C(＝O)C1-C6烷基、-C(＝O)芳基、-C(＝O)杂环、-C(＝O)N(R6)C1-C6烷基、-C(＝O)N(R6)芳基、-C(＝O)N(R6)杂环、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-芳基或-SO2-杂环；或者R1和R2一起构成杂环；R3和R4独立地为氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、-C(＝O)C1-C3烷基、-OH、-NH2或-NO2；R5为氢、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基或杂环基；A为氢、C6-C10芳基或杂环基；R6为氢、C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、任选被R7取代的C6-C10芳基、任选被R7取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、C1-C6烷基氨基、二烷基氨基(每个烷基部分都含有1-6个碳原子)、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基或-NHSO2-杂环。
本发明化合物还包括式1的前药、立体异构体或者药物可接受的盐或酯形式。
对于本发明的用途来讲，R1和R2可以为氢、C1-C6烷基、Cx-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基、杂环基、-C(＝O)C1-C6烷基、-C(＝O)芳基、-C(＝O)杂环、-C(＝O)N(R6)C1-C6烷基、-C(＝O)N(R6)芳基、-C(＝O)N(R6)杂环、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-芳基或-SO2-杂环。在本发明某些示例性实施方案中，R1或R2独立地为氢、SO2-烷基或任选被-OCF3、芳基或烷基取代的SO2-芳基。在某些优选实施方案中，R1为氢，R2为SO2-甲基或任选被-OCF3、苯基或叔丁基取代的SO2-苯基。在这样的实施方案中，R3、R4、R5、R6、X和A如本文中定义。
在本发明部分示例性实施方案中，R1和R2一起构成杂环。例如，在某些实施方案中，R1和R2一起构成吡咯。在这样的实施方案中，R3、R4、R5、R6、X和A如本文中定义。
R3和R4可以为氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、-C(＝O)C1-C3烷基、-OH、-NH2或-NO2。在本发明部分实施方案中，R3和R4独立地为氢或任选被卤素、-CN或烷氧基取代的烷基。在某些优选实施方案中，R3和R4为氢。在这样的实施方案中，R1、R2、R5、R6、X和A如本文中定义。
R5可以为氢、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基或杂环基。在本发明某些示例性实施方案中，R5为氢。在这样的实施方案中，R1、R2、R3、R4、R6、X和A如本文中定义。
R6可以为C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、任选被R7取代的C6-C10芳基、任选被R7取代的杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、C1-C6烷基氨基、二烷基氨基(每个烷基部分都含有1-6个碳原子)、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基或-NHSO2-杂环。
A可以为氢、C6-C10芳基或杂环基。在本发明某些示例性实施方案中，A为氢、苯基或噻吩。在这样的实施方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R6和X如本文中定义。
本发明的优选化合物包括这样的化合物其中X为化学键或未取代的C1-C6亚烷基；R1和R2独立地为氢、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基、杂环基、未取代的-C(＝O)C1-C6烷基、未取代的-C(＝O)芳基、未取代的-C(＝O)杂环、未取代的-C(＝O)N(R6)C1-C6烷基、未取代的-C(＝O)N(R6)芳基、未取代的-C(＝O)N(R6)杂环、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-SO2-芳基或未取代的-SO2-杂环；其中所述C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基、杂环基任选被以下基团取代未取代的C1-C6烷基、卤素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、未取代的C3-C8环烷基、未取代的芳烷基、羟基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、未取代的-OCO2C1-C6烷基、未取代的CO2C1-C6烷基、未取代的-CO2-芳基、未取代的-CO2(C1-C6烷基)芳基、未取代的-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、未取代的氨基、未取代的烷基氨基、未取代的二烷基氨基、未取代的-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-芳基、未取代的-NHSO2-杂环、芳基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)或杂环基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)；或者R1和R2一起构成任选被以下基团取代的杂环未取代的C1-C6烷基、卤素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、未取代的C3-C8环烷基、未取代的芳烷基、羟基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、未取代的-OCO2C1-C6烷基、未取代的CO2C1-C6烷基、未取代的-CO2-芳基、未取代的-CO2(C1-C6烷基)芳基、未取代的-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、未取代的氨基、未取代的烷基氨基、未取代的二烷基氨基、未取代的-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-芳基、未取代的-NHSO2-杂环、芳基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)或杂环基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)；R3和R4独立地为氢、卤素、未取代的C1-C3全氟烷基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C3-C8环烷基、未取代的-C(＝O)C1-C3烷基、-OH、-NH2、-NO2或任选被卤素、-CN或C1-C3烷氧基取代的C1-C6烷基；R5为氢、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基或杂环基，其中所述C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基或杂环基任选被以下基团取代未取代的C1-C6烷基、卤素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、未取代的C3-C8环烷基、未取代的芳烷基、羟基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、未取代的-OCO2C1-C6烷基、未取代的CO2C1-C6烷基、未取代的-CO2-芳基、未取代的-CO2(C1-C6烷基)芳基、未取代的-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、未取代的氨基、未取代的烷基氨基、未取代的二烷基氨基、未取代的-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-芳基、未取代的-NHSO2-杂环、芳基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)或杂环基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)；A为氢、C6-C10芳基或杂环基，其中所述芳基或杂环基任选被以下基团取代未取代的C1-C6烷基、卤素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、未取代的C3-C8环烷基、未取代的芳烷基、羟基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、未取代的-OCO2C1-C6烷基、未取代的CO2C1-C6烷基、未取代的-CO2-芳基、未取代的-CO2(C1-C6烷基)芳基、未取代的-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、未取代的氨基、未取代的烷基氨基、未取代的二烷基氨基、未取代的-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-芳基、未取代的-NHSO2-杂环、芳基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)或杂环基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)；R6为氢、未取代的C1-C6烷基、卤素、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、未取代的C3-C8环烷基、未取代的芳烷基、羟基、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、未取代的-OCO2C1-C6烷基、未取代的CO2C1-C6烷基、未取代的-CO2-芳基、未取代的-CO2(C1-C6烷基)芳基、未取代的-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、未取代的氨基、未取代的烷基氨基、未取代的二烷基氨基、未取代的-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-C1-C6烷基、未取代的-NHSO2-芳基、未取代的-NHSO2-杂环、芳基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)或杂环基(任选被以下基团取代卤素、未取代的C1-C6烷氧基、未取代的C1-C6烷基、未取代的C2-C7烯基、未取代的C2-C7炔基、羟基、未取代的-C(＝O)C1-C7烷基、未取代的-SO2-C1-C6烷基、未取代的-CO2-C1-C6烷基或未取代的烷氧基羰基烷基)。
在本发明某些实施方案中，取代的吲哚包括下式化合物 式2其中R3、R4、X、A和n的定义同上，Y为-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基、-NHSO2-杂环、吡咯、-NH-芳基或-NH-杂环。
在本发明代表性实施方案中，所述吡咯基被以下基团取代C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、n为1-6的芳烷基、芳基、杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基或-NHSO2-杂环。
本发明示例性的取代的1-芳烷基或1-芳基-1H-吲哚包括但不限于下列化合物(1)1-[4-({[4-(三氟甲氧基)苯基]磺酰基}氨基)苯基]-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(2)1-[4-(1H-吡咯-1-基)苯基]-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(3)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(4)1-(4-{[(4-叔丁基苯基)磺酰基]氨基}苄基)-1H-吲哚-5-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(5)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-5-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(6)1-(4-{[(4-叔丁基苯基)磺酰基]氨基}苄基)-1H-吲哚-3-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(7)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-3-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(8)1-(4-{[(4-叔丁基苯基)磺酰基]氨基}苄基)-1H-吲哚-4-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(9)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-4-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(10)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-6-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(11)3-苯基-1-{4-[(苯基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(12)1-{4-[(甲基磺酰基)氨基]苄基}-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(13)1-{4-[(苯基磺酰基)氨基]苄基}-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(14)1-{4-[(甲基磺酰基)氨基]苄基}-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(15)1-[4-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)苄基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(16)1-(4-苯胺基苄基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(17)1-(4-苯胺基苄基)-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式。
本发明还提供组合物，该组合物包含取代吲哚(包括式1和式2的化合物或其立体异构体或药物可接受的盐)以及一种或多种药物可接受的载体、赋形剂或稀释剂。这样的组合物包括用于治疗或控制与PAI-1活性增强相关的疾病或病症的药物组合物。在某些实施方案中，所述组合物包含一种或多种取代吲哚的混合物。
式1和式2的部分化合物包含手性(stereogenic)碳原子或其它手性元素，由此产生立体异构体，包括对映异构体和非对映异构体。本发明包括式1和式2的所有立体异构体以及这些立体异构体的混合物。在本申请全文中，未指出不对称中心的绝对构型时，产品名称包括各立体异构体以及立体异构体混合物。
在优选某种对映异构体时，在部分实施方案中可以提供基本没有相应对映异构体的优选对映异构体。因此，基本没有相应对映异构体的对映异构体，是指经分离技术分离的或者制备的没有相应对映异构体的化合物。本文使用的“基本没有”是指所述化合物由占很大比例的一种对映异构体组成。在优选的实施方案中，所述化合物含至少约90％(重量)的优选对映异构体。在本发明其它实施方案中，所述化合物含至少约99％(重量)的优选对映异构体。优选的对映异构体可以通过采用本领域技术人员已知的任何方法从外消旋混合物分离出来，包括高效液相色谱法(HPLC)以及形成并结晶手性盐，或者优选的对映异构体可以通过本文介绍的方法制备。优选对映异构体的制备方法在例如以下文献中有描述Jacques等，Enantiomers，Racemates and Resolutions(Wiley Interscience，New York，1981)；Wilen，S.H.等，Tetrahedron 332725(1977)；Eliel，E.L.Stereochemistryof Carbon Compounds(McGraw-Hill，NY，1962)；Wilen，S.H.Tablesof Resolving Agents and Optical Resolutions第268页(E.L.Eliel编辑，Univ.of Notre Dame Press，Notre Dame，IN 1972)。
本发明化合物的示例性盐形式包括但不限于钠盐和钾盐。这些化合物的其它示例性盐形式包括但不限于与本领域已知的药物可接受的无机碱、有机碱、无机酸或有机酸形成的盐。当本发明化合物包含碱性部分时，所述酸包括例如乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、丙二酸、扁桃酸、苹果酸、苯二甲酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、萘磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、樟脑磺酸以及已知的类似可接受的酸。用无机碱制备的盐形式包括治疗上可接受的碱金属或碱土金属(例如钠、钾、镁、钙等)的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐。可接受的有机碱包括胺，例如苄胺、单烷基胺、二烷基胺和三烷基胺(优选具有1-6个碳原子的烷基，更优选1-3个碳原子的烷基)，例如甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、单乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺。示例性的盐还包括最多含6个碳原子的亚烷基二胺，例如六亚甲基二胺；最多含6个碳原子的环状饱和或不饱和的碱，包括吡咯烷、哌啶、吗啉、哌嗪及其N-烷基和N-羟基烷基衍生物，例如N-甲基-吗啉和N-(2-羟乙基)-哌啶，或吡啶。也可形成季铵盐，例如四烷基形式(例如四甲基形式)、烷基-烷醇形式(例如甲基-三乙醇或三甲基-单乙醇形式)以及环状铵盐形式(例如N-甲基吡啶盐、N-甲基-N-(2-羟乙基)-吗啉盐、N，N-二甲基吗啉盐、N-甲基-N-(2-羟乙基)-吗啉盐或N，N-二甲基-哌啶盐形式)。这些盐形式可以用式1或式2的酸性化合物和本领域已知的方法制备。
本发明化合物的示例性酯形式包括但不限于含1-6个碳原子的直链烷基酯或含1-6个碳原子的支链烷基酯(包括甲基酯、乙基酯、丙基酯、丁基酯、2-甲基丙基酯和1，1-二甲基乙基酯)、环烷基酯、烷基芳基酯、苄基酯等。其它示例性酯包括但不限于式-COOR12的酯，其中R12选自下式 其中R8、R9、R10和R11独立选自氢、1-10个碳原子的烷基、6-12个碳原子的芳基、6-12个碳原子的芳基烷基；杂芳基或烷基杂芳基(其中杂芳基环连接1-6个碳原子的烷基链)。
本发明的优选化合物抑制PAI-1活性。因此，本发明化合物可用于治疗(包括预防、抑制和/或改善)患者的PAI-1相关性疾病，包括例如非胰岛素依赖性糖尿病、心血管疾病以及与冠状动脉和脑血管病相关的血栓形成事件。采用本发明方法，熟练的医务人员知道如何将取代吲哚(包括式1和式2表示的化合物)给予患有与PAI-1活性或表达增强相关的任何疾病(例如糖尿病或心血管疾病)的患者，以便有效治疗该种疾病。
在一个示例性实施方案中，将取代吲哚给予患者以便治疗涉及血栓形成以及血栓形成前状态的疾病过程，包括但不限于动脉粥样硬化斑块形成、静脉和动脉血栓形成、心肌缺血、心房纤维性颤动、深静脉血栓形成、凝血综合征、肺血栓形成、脑血栓形成、外科手术(例如关节或髋关节置换手术)的血栓栓塞性并发症以及外周动脉闭塞。
患者的任何与PAI-1活性或表达增强相关的疾病或病症都可以用本发明的取代吲哚进行治疗。示例性的疾病和病症包括中风，例如与心房纤维性颤动相关的或心房纤维性颤动导致的中风；胞外基质累积相关性疾病，包括但不限于肾纤维化、慢性阻塞性肺病、多囊卵巢综合征、再狭窄、肾血管病以及器官移植排斥反应；与新血管生成相关的疾病，包括但不限于糖尿病性视网膜病；阿尔茨海默病，例如通过使患者的纤维蛋白溶酶浓度水平升高或恢复正常进行治疗；伴随骨髓外化生的骨髓纤维化，例如通过调节基质细胞增殖以及胞外基质蛋白增多进行治疗；糖尿病性肾病以及伴随肾病的肾透析病；恶性肿瘤或癌症，包括但不限于白血病、乳腺癌和卵巢癌；肿瘤，包括但不限于脂肉瘤和上皮瘤；败血症；肥胖症；胰岛素抵抗；增殖性疾病，包括但不限于牛皮癣；伴随凝血平衡异常的疾病；低恶性度血管炎症；脑血管疾病；高血压；痴呆；骨质疏松症；关节炎；呼吸道疾病，例如哮喘；心力衰竭；心律失常；绞痛，包括但不限于心绞痛；动脉粥样硬化及其后遗症；肾衰竭；多发性硬化；骨质疏松症；骨质减少；痴呆；外周血管疾病；外周动脉疾病；急性血管综合症；微脉管疾病，包括但不限于肾病、神经病、视网膜病和肾病综合征；高血压；I型和II型糖尿病及相关疾病；高血糖症；高胰岛素血症；恶性病变；癌前病变；胃肠恶性肿瘤；冠心病，包括但不限于一级及二级预防心肌梗塞、稳定和不稳定心绞痛，一级预防冠状事件以及二级预防心血管事件；炎性疾病，包括但不限于败血症性休克和伴随感染的血管损伤。
本发明化合物还可以联合第二种治疗药物(包括但不限于促溶血栓药(prothrombolytic)、溶纤维蛋白药和抗凝血药)给予患者，或者结合其它疗法治疗，例如含蛋白酶抑制剂的高活性抗逆转录病毒疗法(HAART)，该疗法用于治疗由纤维蛋白溶解障碍以及HIV-1感染者的高凝固性引起的疾病。在某些实施方案中，本发明化合物可以结合涉及维持血管开放的疗法和/或在所述疗法之后给药，所述疗法包括但不限于血管手术、血管移植、置入支架(stent patency)、器官、组织和细胞植入法和移植术。本发明化合物还可用于处理透析中使用的血液和血液制品、液态储存的血液，尤其用于离体血小板聚集。本发明化合物还可以作为激素替代药物给予患者，或者用于减少炎症标志或C反应蛋白。可以给予本发明化合物以改善凝血平衡、内皮功能或者局部用于伤口愈合(例如预防瘢疤形成)。本发明化合物可以给予患者以降低进行心肌换血管术的风险。本发明化合物也可在用医院装置进行血液化学分析以测定血浆纤维蛋白溶解能力时加入人血浆中。在某些实施方案中，本发明化合物可以作为造影剂用于确认转移性癌。
C.取代吲哚的合成有机合成领域技术人员可以通过采用常规方法及容易获得的试剂和原料，制备本发明化合物。本发明代表性化合物可以按照以下合成流程制备。技术人员知道如何变化这些方法步骤，这些变化本身是本领域公知的。在以下反应流程中，R1、R2、R3、R4、R5、R6和Ar(芳基)的定义同以上式I中的定义。
流程1 1H-吲哚1可以用取代的硝基苄基卤在碱(例如K2CO3、Cs2CO3、KOH或NaH)存在下烷基化，使用惰性溶剂例如THF、二烷、吡啶、DMF、NMP或DMSO，反应温度为-40℃至100℃。所得硝基中间体2可以用Raney镍在肼与乙醇的混合物中于0-40℃处理后，还原为苯胺3。然后在0-40℃，将化合物3用磺酰卤(优选烷基、芳基或杂环基的磺酰氯)和碱(例如N，N-二异丙基乙胺)在无水溶剂(例如二氯甲烷)中处理0.5-24小时，转化为磺酰胺4，其中R13为烷基、芳基或Het。使苯胺3与过量1，4-二羰基化合物(例如丙酮基丙酮)缩合，利用迪安斯-斯达克榻分水器(Dean-Stark trap)除去共沸水，得到吡咯基吲哚6(Paal-Knorr合成法)，其中R14和R15独立地为氢、烷基、芳基或杂环基。可以使用Paal-Knorr合成法的变化方法合成1-取代的吡咯，即苯胺3与过量环状缩醛2，5-二甲氧基四氢呋喃反应。在室温下，苯胺3也可用硼酸在碱(优选2，6-二甲基吡啶)、添加剂(例如肉豆蔻酸)和Cu(OAc)2存在下于惰性溶剂(例如甲苯)中转化为二芳基胺8。碱水解相应的酯4、6或8得到最终产物酸5、7或9。在此反应中，氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾等可以用作碱，水或者水与甲醇、乙醇、二烷等的混合物可以用作溶剂。最终产物可以通过重结晶、研磨、制备型薄层色谱法、硅胶快速柱色谱法或高效液相色谱法纯化。中间体的纯化可以通过相同的方法实现。任选通过加入酸或碱(例如氯化氢气体或盐酸)制备盐。
流程II 芳基吲哚衍生物12也很容易通过文献介绍的方法或本领域技术人员已知的方法制备。例如，流程II所示的方法，在0-40℃，1H-吲哚1可以用取代的4-氟硝基苯在碱(例如Cs2CO3)存在下于惰性溶剂(例如DMF)中芳基化。所得硝基中间体10可以用Raney镍在肼与乙醇的混合物中于0-40℃处理后，还原为所需苯胺11。苯胺11可以按照流程1介绍的方法转化为N-芳基吲哚衍生物12，例如磺酰胺、吡咯和二芳基胺。
流程III C3芳基或杂环基取代的吲哚衍生物16(其中R16是芳基或杂环基)可以很容易按照流程III所示方法制备。首先，将取代吲哚1用已知的卤化剂(例如氯、溴、N-氯代丁二酰亚胺、N-溴代丁二酰亚胺等)在吲哚C3位上卤化，溶剂使用例如四氯化碳、氯仿、二甲基甲酰胺(DMF)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)，反应温度为0-30℃。化合物13的卤素为氯、溴或碘。C3-R16可以在碱(优选Na2CO3)和Pd(PPh3)4存在下通过Suzuki偶合反应引入，使用惰性溶剂例如甲苯，反应温度80-100℃。然后将1H-吲哚中间体14烷基化或芳基化得到所需中间体15，将其按照流程1和流程2介绍的方法转化为最终产物16。
D.用作药物组合物的取代吲哚本发明提供用作药物的取代吲哚。在一个优选实施方案中，取代的吲哚被配制为药物，从而通过例如抑制患者的PAI-1活性而治疗与PAI-1活性增加相关的疾病。
通常，取代的吲哚可以通过给予治疗药物领域已知的任何方法以药物组合物给予，包括口服、含服、局部、全身性(例如透皮、鼻内或通过栓剂给药)或胃肠外(例如肌内、皮下或静脉注射)给药。组合物可以采用片剂、丸剂、胶囊剂、半固体制剂、散剂、缓释制剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、酏剂、气雾剂或任何其它合适的组合物形式；并且包含至少一种本发明化合物以及至少一种药物可接受的赋形剂。合适的赋形剂为本领域普通技术人员所熟知，合适的赋形剂以及配制组合物的方法可以参见例如以下标准参考文献Alfonso AR，Remington′s Pharmaceutical Sciences，第17版，MackPublishing Company，Easton PA，1985。合适的液体载体(尤其是用于注射溶液剂的液体载体)包括水、盐水溶液、葡萄糖水溶液和乙二醇。在本发明部分实施方案中，适合用于本发明实践的取代吲哚将被单独给予或者联合至少一种本发明其它化合物给予。适合用于本发明实践的取代吲哚还可与至少一种用于所治疗疾病的其它常规治疗药物联合用药。
本发明水性混悬剂可以包含取代吲哚以及适合制备水性混悬剂的赋形剂。这样的赋形剂可以包括悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯树胶；以及分散剂或润湿剂，例如天然的磷脂(例如卵磷脂)、环氧烷烃与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物(例如十七碳乙烯氧基鲸蜡醇(heptadecaethylene oxycetanol))、环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物(例如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯)、或者环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物(例如聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯)。水性混悬剂还可包含一种或多种防腐剂(例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯)、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂以及一种或多种甜味剂(例如蔗糖、阿司帕坦或糖精)。可以调节制剂的摩尔渗透压浓度。
将取代吲哚悬浮于植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)、矿物油(例如液体石蜡)或它们的混合物中，可以配制油性混悬剂。油性混悬剂可以包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。可以加入甜味剂例如甘油、山梨糖醇或蔗糖，以提供适口的口服制剂。这些制剂可以通过加入抗氧化剂(例如抗坏血酸)保存。注射用油性溶媒的实例参见Minto，J.Pharmacol.Exp.Ther.28193-102，1997。本发明药物制剂也可为水包油型乳剂。油相可以为上述的植物油或矿物油或其混合物。合适的乳化剂包括天然树胶(例如阿拉伯树胶和西黄蓍胶)、天然磷脂(例如大豆卵磷脂)、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如山梨聚糖单油酸酯)、以及这些偏酯与环氧乙烷的缩合产物(例如聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯)。乳剂还可以包含与糖浆剂和酏剂中一样的甜味剂和矫味剂。这样的制剂还可以包含缓和剂、防腐剂或着色剂。
所选化合物可以单独或联合其它合适的成分制备为气雾剂(即它们可以被“雾化”)，用于吸入给药。可以将气雾剂放置到可接受的加压抛射剂，例如二氯二氟甲烷、丙烷、氮气等。
适合胃肠外(例如关节内、静脉内、肌内、真皮内、腹膜内以及皮下)途径给药的制剂，包括水性及非水性等渗无菌注射溶液剂(它们可以包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂以及使制剂与预定接受者血液等渗的溶质)以及水性和非水性无菌混悬剂(它们可以包含悬浮剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂)。可以使用的可接受的溶媒和溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠。另外，无菌不挥发油通常可以用作溶剂或悬浮介质。为此可以使用任何温和不挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸(例如油酸)同样可用于注射制剂。这些溶液是无菌的，并且通常不含不需要的物质。当化合物有足够的溶解性时，它们可以直接溶于生理盐水，可使用或不使用合适的有机溶剂(例如丙二醇或聚乙二醇)。微细化合物的分散体可以在淀粉或羧甲基纤维素钠的水溶液、或合适的油(例如花生油)中制备。这些制剂可以通过常规公知的灭菌技术除菌。所述制剂可以包含接近生理条件所需的药物可接受的辅助物质，例如pH调节剂和缓冲剂、毒性调节剂，例如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等。这些制剂中的取代吲哚浓度可以在较宽范围内变化，并且根据所选择的具体给药方式以及患者的需要，主要基于液体体积、粘度、体重等因素作出选择。对于静脉内给药，制剂可以为无菌注射制剂，例如无菌注射水性或油性混悬剂。这种混悬剂可以使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂按照已知技术配制。无菌注射制剂也可为无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液剂或混悬剂，例如1，3-丁二醇中的溶液剂。推荐的制剂可以装在单位剂量或多剂量密封容器例如安瓿和小瓶中。
注射溶液剂和混悬剂可以用前述类型的无菌粉针剂、颗粒剂和片剂制备。
适用于本发明实践的取代吲哚可口服给予。根据组合物类型、单位剂量大小、赋形剂种类以及本领域普通技术人员熟知的其它因素，组合物中本发明化合物用量可在较宽范围内变化。通常，最终组合物可以包含例如0.000001％-10％重量(％w)的取代吲哚，优选0.00001％w至1％w，其余的成分为一种或多种赋形剂。
口服药物制剂可以用本领域公知的药物可接受的载体以适合口服的剂量配制。这样的载体使得药物制剂能够配制为适合患者摄入的单位剂型片剂、丸剂、散剂、糖锭剂、胶囊剂、液体制剂、锭剂、凝胶剂、糖浆剂、浆状剂、混悬剂等。适合口服的制剂可包括(a)液体溶液剂，例如有效量的包装核酸悬浮于稀释剂，例如水、盐水或PEG 400；(b)胶囊剂、小药囊或片剂，各自包含预定量的为液体、固体、颗粒或明胶的活性成分；(c)适当液体中的混悬剂；(d)合适的乳剂。
口服药物制剂可以如下获得如果需要，将本发明化合物与固体赋形剂混合，任选研磨所得混合物，然后加工颗粒混合物，酌情加入适宜的其它化合物后得到片剂或糖锭核。合适的固体赋形剂有糖类或蛋白质填充剂，包括但不限于食糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；玉米、小麦、水稻、马铃薯或其它植物的淀粉；纤维素，例如甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素钠；以及树胶，包括阿拉伯树胶和西黄蓍胶；以及蛋白质，例如明胶和胶原。如果需要，可以加入崩解剂或增溶剂，例如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、海藻酸或它们的盐，例如海藻酸钠。片剂可以包括一种或多种乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、磷酸钙、玉米淀粉、马铃薯淀粉、微晶纤维素、明胶、胶态二氧化硅、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸以及其它赋形剂、着色剂、填充剂、粘合剂、稀释剂、缓冲剂、润湿剂、防腐剂、矫味剂、染料、崩解剂以及药物相容的载体。锭剂可以在矫味剂(例如蔗糖)中包含活性成分，也可在惰性基质(例如明胶和甘油或者蔗糖和阿拉伯树胶的乳状液、凝胶等)中包含活性成分，除活性成分外，还包含本领域已知的载体。
本发明的取代吲哚还可以栓剂形式用于直肠给药。这些制剂可以通过药物与合适的非刺激性赋形剂混合制备，所述赋形剂在常温是固体，而在直肠温度是液体，因此将在直肠熔化释放药物。这样的材料有可可脂和聚乙二醇。
本发明化合物还可以通过鼻内、眼内、阴道内以及直肠内途径给药，包括栓剂、吹入剂、散剂和气雾剂(例如类固醇吸入剂，参见Rohatagi，J.Clin.Pharmacol.351187-1193，1995；Tjwa，Ann.AllergyAsthma Immunol.75107-111，1995)。
本发明的取代吲哚可以通过局部途径透皮给药，可以配制为涂药棒、溶液剂、混悬剂、乳剂、凝胶剂、乳膏剂、软膏剂、糊剂、胶冻剂(jellies)、涂剂、散剂和气雾剂。
包囊材料也可与本发明化合物一起使用，术语“组合物”作为制剂可包括活性成分以及包囊材料，含有或不含其它载体。例如，本发明化合物还可以微球给药，用于在体内缓慢释放。在一个实施方案中，微球可以通过真皮内注射含药物的微球给予，它们在皮下缓慢释放药物(参见Rao，J.Biomater Sci.Polym.Ed.7623-645，1995；作为生物可降解的注射凝胶剂(参见例如Gao，Pharm.Res.12857-863，1995)；或者作为口服微球(参见例如Eyles，J.Pharm.Pharmacol.49669-674，1997)。透皮以及真皮内途径给药均提供数周或数月的恒定释药。扁囊剂也可用于给予本发明化合物，例如抗动脉粥样硬化药物。
在另一个实施方案中，本发明化合物可以利用脂质体给药，脂质体与细胞膜融合，或者被内吞，即利用连接脂质体的配体或直接连接寡核苷酸的配体结合到细胞的表面膜蛋白受体上，从而导致内吞作用。通过利用脂质体，尤其是在脂质体表面载有靶细胞特异性配体或在其它方面优先定向特定器官的时候，可以将化合物集中给予体内的靶细胞。(参见例如Al-Muhammed，J.Microencapsul.13293-306，1996；Chonn，Curr.Opin.Biotechnol.6698-708，1995；Ostro，Am.J.Hosp.Pharm.461576-1587，1989)。
在其它情况下，优选的制剂可以为冻干粉针剂，它可以包含例如以下任何或全部成分1mM-50mM组氨酸，0.1％-2％蔗糖，2％-7％甘露醇，pH 4.5-5.5，此制剂可在临用前与缓冲液混合。
本发明药物组合物除包含取代吲哚外，还可任选包含至少一种其它用于治疗与PAI-1活性增加相关的疾病或病症的治疗药物。
药物组合物通常配制为无菌、基本等渗的，并且完全符合美国食品与药品管理局的药品生产质量管理规范(Good ManufacturingPractice，GMP)的所有规定。
E.确定取代吲哚的剂量方案本发明提供采用取代吲哚抑制患者的PAI-1活性以治疗与PAI-1活性增加相关的疾病和病症的方法。在本发明示例性实施方案中，技术人员将用本发明化合物治疗患有与PAI-1浓度和/或活性增加相关的疾病的患者。
对于治疗目的来讲，本文公开的组合物或化合物可按单次大剂量给药，通过长时间连续给药方式(例如连续透皮、粘膜或静脉给药)给予患者，或者按多次给药方案给予患者(例如按每小时、每天、每周计的多次给药方案)。例如，本发明药物制剂可以每天给予一次或多次，每周3次或者每周1次。在本发明示例性实施方案中，本发明药物制剂每天口服给药1次或2次。
关于这点，生物活性药物的治疗有效剂量可以包括长期治疗方案内的多次剂量，所述方案将在临床上获得显著疗效，从而缓解一种或多种与PAI-1活性增加相关的症状或可检出的病症。就此而言，确定有效剂量通常基于动物模型研究，然后是人体临床试验，并且通过测定有效剂量和显著减少患者目标症状或疾病的发生或严重程度的给药方案确定。在这方面，合适的模型包括例如鼠、大鼠、猪、猫、非人类灵长类动物以及本领域已知的其它可接受的动物模型。或者，有效剂量可以用体外模型(例如免疫学分析和组织病理学分析)测定。使用这样的模型时，通常只需要常规的计算和调整就可确定给予治疗有效量(例如鼻内、透皮、静脉或肌内有效引起所需反应的量)的生物活性药物所需的适当浓度和剂量。在替代实施方案中，对于治疗或诊断目的来讲，生物活性药物的“有效量”或“治疗有效剂量”将仅仅抑制或增强一种或多种与上述疾病或病症相关的所选生物活性。
当然，生物活性药物的实际剂量将根据各种因素而变化，例如作用范围和患者的具体状态(例如患者的年龄、体型、健康状况、症状程度、敏感性因素等)、给药时间、给药途径以及同时给予的其它药物或疗法。可以调整剂量方案以获得最佳预防性或治疗性反应。本文的“治疗有效剂量”是指给药后产生作用的剂量。更具体地讲，本发明化合物的治疗有效剂量优选缓解与PAI-1活性增加相关的疾病的症状、并发症或生化指标。准确剂量将取决于治疗目的，并且由本领域技术人员用已知技术确定(参见例如Lieberman，PharmaceuticalDosage Forms(第1-3卷，1992)；Lloyd，1999，The Art，Science，andTechnology of Pharmaceutical Compounding；Pickar，1999，DosageCalculations)。治疗有效剂量也是这样的剂量用临床术语来讲，就是活性药物的治疗有益作用超过其任何毒性或有害副作用。需要进一步注意的是，对于每个具体患者，具体的剂量方案应该根据个体需要以及监管化合物给予的专业人员的判断进行评价并随时间作出调整。
在本发明示例性实施方案中，制备化合物的单位剂型用于标准给药方案。这样，在医师指导下组合物很容易再分成更小的剂量。例如，单位剂量可以为包装的散剂、小瓶或安瓿，优选为胶囊剂或片剂。组合物的这些单位剂型中的活性化合物含量可以为例如约1克至约15克或更多，根据患者的具体需要每天一次或多次给药。开始的治疗方案用约1克的最小日剂量，可以利用PAI-1的血液浓度以及患者症状缓解分析确定是需要更大还是更小的剂量。例如，本发明化合物的有效口服剂量可以为约0.1mg/kg/天至约1,000mg/kg/天。优选给予约10mg/kg/天至约600mg/kg/天，更优选约25mg/kg/天至约200mg/kg/天，甚至更优选约50mg/kg/天至约100mg/kg/天。
在某些实施方案中，本发明涉及式1和式2化合物的前药。本文使用的术语“前药”是指通过代谢方式(例如水解)在体内转化为式1或式2化合物的化合物。前药的各种形式是本领域已知的，例如以下文献阐述的形式Bundgaard(编辑)，Design of Prodrugs，Elsevier(1985)；Widder等(编辑)，Methods in Enzymology，第4卷，AcademicPress(1985)；Krogsgaard-Larsen等(编辑)，“Design and Application ofProdrugs，Textbook ofDrug Design and Development，第5章，113-191(1991)，Bundgaard等，Journal of Drug Delivery Reviews，81-38(1992)，Bundgaard，J.of Pharmaceutical Sciences，77285以及下列等等(1988)；Higuchi和Stella(编辑)，Prodrugs as Novel Drug DeliverySystems，American Chemical Society(1975)。
F.药盒在包含取代吲哚的药物配制于合适载体中后，可以将其装入适当的容器，并贴上用于治疗PAI-1相关性疾病(例如白血病)的标签。另外，包含至少一种可用于治疗PAI-1相关性疾病的其它治疗药物的另一药物也可以装入容器并贴上用于治疗相应适应症的标签。或者，单一药物包含取代吲哚和至少一种可用于治疗PAI-1相关性疾病的其它治疗药物，将其装入适当的容器并且贴上治疗用标签。对于包含取代吲哚的药物以及在一种药物中包含取代吲哚和至少一种可用于治疗PAI-1相关性疾病的其它治疗药物的联合药物的给药，这样的标签将包括例如有关给药剂量、给药频率及给药方法的说明。类似地，对于容器中提供的多种药物的给药，这样的标签将包括例如关于各药物的给药剂量、给药频率及给药方法的说明。
实施例实施例1-17分别描述化合物1-17的合成。
实施例11-[4-({[4-(三氟甲氧基)苯基]磺酰基}氨基)苯基]-1H-吲哚-2-甲酸的合成步骤1将大量过量Raney镍分批加入到1-(4-硝基苯基)-1H-吲哚-2-甲酸(1.40g、5.0mmol)、肼(1.0ml、32mmol)的20ml乙醇搅拌溶液中。在室温搅拌2小时后，催化剂通过Celite521短垫过滤除去。浓缩滤液，得到1-(4-氨基苯基)-1H-吲哚-2-甲酸(1.0g，80％)，为淡棕色固体MS(ESI)m/z 253(MH+)；MS(ESI)m/z 251([M-H]-)。
步骤2向搅拌的1-(4-氨基苯基)-1H-吲哚-2-甲酸(0.4g，1.59mmol)的10ml 1∶1二氯甲烷/碳酸氢钠饱和水溶液中，加入4-三氟甲氧基-苯磺酰氯(0.40g，1.53mmol)。在室温搅拌1小时后，收集固体，用半制备型HPLC纯化(色谱柱Phenomenex C18Luna 21.6mm×60mm，5μM；溶剂A水(0.1％TFA缓冲液)；溶剂B乙腈(0.1％TFA缓冲液)；溶剂梯度0分钟0％B；10分钟100％B；保持100％B 5min。流速22.5ml/min)，得到0.105g(15％)标题化合物，为浅黄色固体
1H NMR(DMSO-d6)δ6.89(d，J＝8.3Hz，1H)，7.10-7.30(m，6H)，7.39(d，J＝2.1Hz，1H)，7.60(d，J＝7.2Hz，2H)，7.71(d，J＝6.0Hz，1H)，7.90-8.00(m，2H)，10.63(br s，1H)，12.74(br s，1H)；MS(ESI)m/z 477(MH+)；MS(ESI)m/z475([M-H]-)；C22H16F3N2O5S HRMS计算值477.0721；实测值(ESI+)477.0719；C22H15F3N2O5S·0.2H2O分析计算值C，55.05；H，3.23；N，5.84。实测值C，54.97；H，3.41；N，5.82。
实施例21-[4-(1H-吡咯-1-基)苯基]-1H-吲哚-2-甲酸的合成将1-(4-氨基苯基)-1H-吲哚-2-甲酸(0.4g，1.59mmol)和2，5-二甲氧基四氢呋喃(0.50g，3.78mmol)的15ml冰醋酸溶液在90℃加热1.5小时。在除去溶剂后，残余物用半制备型HPLC纯化，得到标题化合物(0.095mg，20％，淡棕色固体)1H NMR(DMSO-d6)δ6.32(s，2H)，7.08(d，J＝8.4Hz，1H)，7.15-7.25(m，1H)，7.25-7.35(m，1H)，7.40-7.55(m，5H)，7.60-7.70(m，3H)，12.82(br s，1H)；MS(ESI)m/z303(MH+)；MS(ESI)m/z 301([M-H]-)；C19H15N2O2HRMS计算值303.1122；实测值(ESI+)303.1124；C19H14N2O2·0.1H2O分析计算值C，75.0；H，4.71；N，9.21。实测值C，74.90；H，4.42；N，9.33。
实施例31-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-2-甲酸的合成步骤1将4-硝基苄基溴(1.85g，8.56mmol)、1H-吲哚-2-甲酸乙酯(1.62g，8.56mmol)、碳酸钾(4.17g，30mmol)和100ml丙酮的混合物回流1天。在冷却至室温后，通过加入水猝灭反应物，然后在水和二氯甲烷间分配。有机相经硫酸镁干燥，浓缩，得到1-(4-硝基苄基)-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(2.0g，72％，灰白色固体)
1H NMR(DMSO-d6)δ1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，4.26(q，J＝7.1Hz，3H)，5.99(s，2H)，7.18(t，J＝7.0Hz，1H)，7.22(d，J＝9.0Hz，2H)，7.34(t，J＝7.0Hz，1H)，7.43(s，1H)，7.58(d，J＝13.8Hz，1H)，7.76(d，J＝13.8Hz，1H)，8.15(d，J＝9.0Hz，2H)；MS(ESI)m/z325(MH+).
步骤2将大量过量Raney镍分批加入到1-(4-硝基苄基)-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(0.65g，2mmol)、肼(0.5ml，16mmol)的25ml乙醇搅拌溶液中。在室温搅拌2小时后，催化剂通过Celite521短垫过滤除去。浓缩滤液，得到树胶状固体1-(4-氨基苄基)-1H-吲哚-2-甲酸乙酯(MS(ESI)m/z 294.2(MH+))。然后将该树胶状固体溶于15ml二氯甲烷中。向溶液中加入二异丙基乙胺(0.5ml，2.9mmol)和联苯基4-磺酰氯(0.5g，1.0mmol)。在室温搅拌过夜后浓缩反应物，将残余物重新溶于15ml 2∶1∶1THF/MeOH/水中。加入氢氧化锂一水合物(0.2g，4.8mmol)，将混合物在室温搅拌过夜。除去大部分有机溶剂，将反应混合物用冰醋酸酸化(pH 6)，收集固体，用半制备型HPLC纯化。根据UV吸收收集产物，浓缩，得到标题化合物(0.11g，22％，褐色固体)1H NMR(DMSO-d6)δ5.75(s，2H)，6.93(d，J＝8.9Hz，2H)，7.01(d，J＝8.9Hz，2H)，7.09(t，J＝8.0Hz，1H)，7.43(t，J＝8.0Hz，1H)，7.49(s，1H)，7.40-7.55(m，4H)；7.65-7.80(m，3H)，7.75-7.82(m，4H)，10.30(s，1H)，12.93(s，1H)；C28H23N2O4S HRMS计算值483.1367；实测值(ESI+)483.1374；C28H22N2O4S·0.2H2O分析计算值C，69.18；H，4.64；N，5.76。实测值C，69.21；H，4.60；N，5.78。
实施例41-(4-{[(4-叔丁基苯基)磺酰基]氨基}苄基)-1H-吲哚-5-甲酸的合成步骤1按照实施例3步骤1的方法，使用1H-吲哚-5-甲酸甲酯和4-硝基苄基溴，制备1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-5-甲酸甲酯，得到黄色粉末
1H NMR(DMSO-d6)δ3.84(s，3H)，5.67(s，2H)，6.71(dd，J＝3.2，0.8Hz，1H)，7.40(d，J＝8.8Hz，2H)，7.54(d，J＝8.7Hz，1H)，7.67(d，J＝0.8Hz，1H)，7.73(dd，J＝8.8，1.7Hz，1H)，8.19(d，J＝8.8Hz，2H)，8.29(d，J＝1.0Hz，1H)；MS(ESI)m/z 311(MH+)，309([M-H]-)；C17H15N2O4HRMS计算值311.1030；实测值(ESI+)311.1021。
步骤2按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-5-甲酸甲酯和4-叔丁基苯磺酰氯，制备标题化合物，得到浅褐色固体1H NMR(DMSO-d6)δ1.24(s，9H)，5.33(s，2H)，6.59(d，J＝3.2Hz，1H)，7.02(d，J＝8.7Hz，2H)，7.07(d，J＝8.7Hz，2H)，7.45(d，J＝8.7Hz，1H)，7.51-7.54(m，3H)，7.65(d，J＝8.5Hz，2H)，7.69(d，J＝1.7Hz，1H)，8.21(d，J＝1.3Hz，1H)，10.23(br s，1H)，12.39(br s，1H)；MS(ESI)m/z463(MH+)，461([M-H]-)；C26H26N2O4S HRMS计算值463.1690；实测值(ESI+)463.1681。
实施例51-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-5-甲酸的合成按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-5-甲酸甲酯和联苯基-4-磺酰氯，制备标题化合物，得到白色固体1H NMR(DMSO-d6)δ5.34(s，3H)，6.59(d，J＝3.1Hz，1H)，7.06(d，J＝11.2Hz，2H)，7.10(d，J＝8.7Hz，2H)，7.40-7.48(m，4H)，7.52(d，J＝3.1Hz，1H)，7.67-7.70(m，3H)，7.75-7.85(m，4H)，8.21(d，J＝1.4Hz，1H)，10.34(br s，1H)，12.37(br s，1H)；MS(ESI)m/z483(MH+)，481([M-H]-)；C28H23N2O4S HRMS计算值483.1376；实测值(ESI+)483.1368。
实施例61-(4-{[(4-叔丁基苯基)磺酰基]氨基}苄基)-1H-吲哚-3-甲酸的合成步骤1按照实施例3步骤1的方法，使用1H-吲哚-3-甲酸甲酯和4-硝基苄基溴，制备1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-3-甲酸甲酯(113220-11)，得到黄色粉末
1H NMR(DMSO-d6)δ3.83(s，3H)，5.70(s，2H)，7.23(ddd，J＝9.9，4.6，0.8Hz，2H)，7.47(d，J＝8.8Hz，2H)，7.50(ddd，J＝9.9，4.6，0.8Hz，1H)，8.05(ddd，J＝9.9，4.6，0.8Hz，1H)，8.19(d，J＝8.8Hz，2H)，8.40(s，1H)；MS(ESI)m/z311(MH+)，309([M-H]-).
步骤2按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-3-甲酸甲酯和4-叔丁基苯磺酰氯，制备标题化合物，得到浅褐色固体1H NMR(DMSO-d6)δ1.24(s，9H)，5.36(s，2H)，7.04(d，J＝8.5Hz，2H)，7.13-7.18(m，4H)，7.45(dd，J＝6.1，2.6Hz，1H)，7.52(d，J＝8.8Hz，2H)，7.66(d，J＝8.8Hz，2H)，8.00(dd，J＝6.1，2.6Hz，1H)，8.13(s，1H)，10.23(br s，1H)，11.98(br s，1H)；MS(ESI)m/z463(MH+)，461([M-H]-)；C26H27N2O4S HRMS计算值463.1690；实测值(ESI+)463.1681；计算值C26H26N2O4S·0.06TFAC，67.51；H，5.67；N，6.06。实测值C，67.40；H，5.65；N，6.04。
实施例71-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-3-甲酸的合成按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-3-甲酸甲酯和联苯基-4-磺酰氯，制备标题化合物，为灰白色固体1H NMR(DMSO-d6)δ5.37(s，2H)，7.07(d，J＝8.7Hz，2H)，7.13-7.18(m，4H)，7.40-7.51(m，4H)，7.67(d，J＝7.1Hz，2H)，7.75-7.85(m，4H)，8.00(dd，J＝5.8，0.7Hz，1H)，8.14(s，1H)，10.36(br s，1H)，12.01(br s，1H)；MS(ESI)m/z483(MH+)，481([M-H]-)；C28H23N2O4S HRMS计算值，483.1376；实测值(ESI+)483.1367；C28H22N2O4S·0.1TFA分析计算值C，68.57；H，4.51；N，5.67。实测值C，68.67；H，4.50；N，5.70。
实施例81-(4-{[(4-叔丁基苯基)磺酰基]氨基}苄基)-1H-吲哚-4-甲酸的合成步骤1按照实施例3步骤1的方法，使用1H-吲哚-4-甲酸甲酯和4-硝基苄基溴，制备1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-4-甲酸甲酯，得到黄色粉末1H NMR(DMSO-d6)δ3.90(s，3H)，5.69(s，2H)，7.05(dd，J＝3.1，0.9Hz，1H)，7.22(t，J＝7.6Hz，1H)，7.36(d，J＝8.9Hz，2H)，7.75(td，J＝7.6，3.1Hz，3H)，8.18(d，J＝8.9Hz，2H)；MS(ESI)m/z311(MH+)，309([M-H]-)；C17H14N2O4分析计算值C，65.80；H，4.55；N，9.03。实测值C，65.81；H，4.50；N，8.98。
步骤2按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-4-甲酸甲酯和4-叔丁基苯磺酰氯，制备标题化合物，得到浅桃红色固体1H NMR(DMSO-d6)δ1.24(s，9H)，5.35(s，2H)，6.96(d，J＝3.1Hz，1H)，7.03(d，J＝8.7Hz，2H)，7.07(d，J＝8.0Hz，2H)，7.15(t，J＝7.8Hz，1H)，7.53(d，J＝8.8Hz，2H)，7.57(d，J＝3.2Hz，1H)，7.62-7.68(m，3H)，7.70(dd，J＝7.5，0.9Hz，1H)，10.26(br s，1H)，12.59(br s，1H)；MS(ESI)m/z463(MH+)，461([M-H]-)；C26H27N2O4S HRMS计算值463.1690；实测值(ESI+)463.1674。
实施例91-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-4-甲酸的合成按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-4-甲酸甲酯和联苯基-4-磺酰氯，制备标题化合物，得到灰白色固体1H NMR(DMSO-d6)δ5.36(s，2H)，6.96(d，J＝3.1Hz，1H)，7.05(d，J＝8.0Hz，2H)，7.09(d，J＝9.0Hz，2H)，7.15(t，J＝7.8Hz，1H)，7.40-7.47(m，1H)，7.49-7.51(m，2H)，7.57(d，J＝3.1Hz，1H)，7.64-7.71(m，4H)，7.75-7.85(m，4H)，10.33(br s，1H)，12.58(br s，1H)；MS(ESI)m/z 483(MH+)；481([M-H]-)；C28H23N2O4S HRMS计算值483.1376；实测值(ESI+)483.1367。
实施例101-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-6-甲酸的合成步骤1按照实施例3步骤1的方法，使用1H-吲哚-6-甲酸甲酯和4-硝基苄基溴，制备1-(4-硝基苄基)-1H-吲哚-6-甲酸甲酯，得到黄色粉末1H NMR(DMSO-d6)δ3.85(s，3H)，5.75(s，2H)，6.66(dd，J＝3.1，0.6Hz，1H)，7.34(d，J＝8.7Hz，2H)，7.60(t，J＝2.8Hz，1H)，7.79(d，J＝3.1Hz，1H)，8.07(s，1H)，8.15(s，1H)，8.19(d，J＝8.8Hz，1H)，8.28(d，J＝8.7Hz，2H)；MS(ESI)m/z 311(MH+)；309([M-H]-).
步骤2按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-1H-吲哚-6-甲酸甲酯和联苯基-4-磺酰氯，制备标题化合物，得到浅黄色固体1H NMR(DMSO-d6)δ5.40(s，2H)，6.55(d，J＝3.9Hz，1H)，7.06(s，4H)，7.40-7.43(m，1H)，7.47-7.51(m，2H)，7.60(d，J＝1.2Hz，1H)，7.63(d，J＝3.1Hz，1H)，7.67(dt，J＝7.0，1.2Hz，2H)，7.75-7.85(m，4H)，7.99(d，J＝0.9Hz，1H)，10.32(br s，1H)，12.55(br s，1H)；MS(ESI)m/z 483(MH+)；481([M-H]-)；C28H23N2O4S HRMS计算值483.1376；实测值(ESI+)483.1368；C28H22N2O4S·0.02TFA分析计算值C，69.21；H，4.60；N，5.76。实测值C，69.01；H，4.48；N，5.78。
实施例113-苯基-1-{4-[(苯基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-2-甲酸的合成步骤1在0～5℃，将N-溴代丁二酰亚胺(4.94g，27.7mmol)的DMF(20ml)溶液滴加到1H-吲哚-2-甲酸乙酯(5.0g，26.4mmol)的DMF(15ml)搅拌溶液中。加入完毕后，将反应物加热至室温，再连续搅拌1.5小时。将反应混合物倒在冰水上，收集所得沉淀，干燥，得到3-溴-1H-吲哚甲酸乙酯(6.68g，81％)，为白色固体1H NMR(DMSO-d6)δ1.37(t，J＝7.2Hz，3H)，4.38(q，J＝7.2Hz，2H)，7.18-7.22(m，1H)，7.34-7.38(m，1H)，7.50(dd，J＝8.3，0.8Hz，1H)，7.55(dd，J＝8.3，0.8Hz，1H)，12.22(br s，1H)；MS(ESI)m/z 268(MH+)；266([M-H]-).
步骤2将3-溴-1H-吲哚甲酸乙酯(0.50g，1.87mmol)、苯基硼酸(0.27g，2.25mmol)、2M碳酸钠水溶液(8ml)、四(三苯基膦)合钯(O)(0.20g，0.17mmol)、乙醇(16ml)和甲苯(30ml)的混合物在65℃加热16小时，然后冷却。反应混合物用1N盐酸稀释，然后用乙酸乙酯萃取。有机萃取液用水洗涤，经硫酸镁干燥，浓缩。用快速硅胶色谱法纯化(用乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂)，得到0.34g(68％)3-苯基-1H-吲哚甲酸乙酯，为粉红色固体1H NMR(DMSO-d6)δ1.18(t，J＝7.2Hz，3H)，4.22(q，J＝7.2Hz，2H)，7.07-7.11(m，1H)，7.29-7.33(m，1H)7.45(dd，J＝8.3，0.8Hz，1H)，7.48-7.50(m，5H)，7.50(dd，J＝8.3，0.8Hz，1H)，11.90(br s，1H)；MS(ESI)m/z 266(MH+)；264([M-H]-).
步骤3按照实施例3步骤1的方法，使用3-苯基-1H-吲哚甲酸乙酯和4-硝基苄基溴，制备1-(4-硝基-苄基)-3-苯基-1H-吲哚甲酸乙酯，得到黄色粉末1H NMR(DMSO-d6)δ1HNMR(DMSO-d6)δ0.91(t，J＝7.2Hz，3H)，4.05(q，J＝7.2Hz，2H)，5.97(s，2H)，7.17-7.23(m，1H)，7.32(d，J＝8.8Hz，2H)，7.36-7.42(m，1H)，7.38-7.42(m，1H)，7.45-7.48(m，4H)，7.52(d，J＝8.2Hz，1H)，7.62(d，J＝8.2Hz，1H)，8.19(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(ESI)m/z 401(MH+)；399([M-H]-)；C24H21N2O4HRMS计算值401.1490；实测值(ESI+)401.1494；C24H20N2O4·0.05TFA分析计算值C，71.99；H，5.03；N，7.00。实测值C，71.27；H，4.98；N，6.90。
步骤4按照实施例1步骤1的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-3-苯基-1H-吲哚甲酸乙酯，制备1-(4-氨基-苄基)-3-苯基-1H-吲哚甲酸乙酯，得到黄色浆状物1H NMR(DMSO-d6)δ0.98(t，J＝7.2Hz，3H)，4.11(q，J＝7.2Hz，2H)，4.99(br s，2H)，5.59(s，2H)，6.44(d，J＝8.41Hz，2H)，6.85(d，J＝8.4Hz，2H)，7.13(td，J＝7.1，0.8Hz，1H)，7.34(td，J＝7.1，0.8Hz，1H)，7.38-7.41(m，3H)，7.44-7.49(m，3H)，7.69(d，J＝8.4Hz，1H)；MS(ESI)m/z 371(MH+)；369([M-H]-)；C24H22N2O2·0.04TFA分析计算值C，71.12；H，5.92；N，7.47。实测值C，71.03；H，5.87；N，7.36。
步骤5按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-氨基-苄基)-3-苯基-1H-吲哚甲酸乙酯和苯磺酰氯，制备标题化合物，得到灰白色固体1H NMR(DMSO-d6)δ5.72(s，2H)，6.95-7.00(m，4H)，7.09-7.13(m，1H)，7.27-7.31(m，1H)，7.33-7.37(m，1H)，7.42-7.45(m，5H)，7.49-7.55(m，3H)，7.57-7.61(m，1H)，7.72(dd，J＝7.1，1.4Hz，2H)，10.26(br s，1H)，12.83(br s，1H)；MS(ESI)m/z 481([M-H]-)；C28H21N2O4S HRMS计算值481.1224；实测值(ESI-)481.1228。
实施例121-{4-[(甲基磺酰基)氨基]苄基}-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸的合成按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-3-苯基-1H-吲哚甲酸乙酯和甲磺酰氯，制备标题化合物，得到灰白色固体1H NMR(DMSO-d6)δ2.94(s，3H)，5.80(s，2H)，7.05-7.15(m，5H)，7.31-7.38(m，2H)，7.43-7.47(m，5H)，7.62(d，J＝8.4Hz，1H)，9.68(br s，1H)，12.87(br s，1H)；MS(ESI)m/z 419([M-H]-)；C23H19N2O4S HRMS计算值419.1068；实测值(ESI-)419.1074。
实施例131-{4-[(苯基磺酰基)氨基]苄基}-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸的合成步骤1按照实施例11步骤2的方法，使用3-溴-1H-吲哚甲酸乙酯和2-噻吩硼酸，制备3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯，得到浅黄色粉末1H NMR(DMSO-d6)δ1.27(t，J＝7.2Hz，3H)，4.30(q，J＝7.2Hz，2H)，7.12-7.16(m，1H)，7.17-7.20(m，1H)，7.31-7.34(m，1H)，7.36(dd，J＝5.1，1.5Hz，1H)，7.51(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63(d，J＝6.3Hz，1H)，7.71(d，J＝8.2Hz，1H)，12.02(br s，1H)；MS(ESI)m/z 272(MH+)；270([M-H]-).
步骤2按照实施例3步骤1的方法，使用3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯和4-硝基苄基溴，制备1-(4-硝基-苄基)-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯，得到黄色粉末
1H NMR(DMSO-d6)δ1.02(t，J＝7.2Hz，3H)，4.15(q，J＝7.2Hz，2H)，7.20(dd，J＝6.9，3.4Hz，1H)，7.24(dd，J＝6.2，0.8Hz，1H)，7.25-7.27(m，1H)，7.31(d，J＝8.8Hz，2H)，7.37-7.43(m，1H)，7.62(d，J＝8.4Hz，1H)，7.68(dd，J＝5.2，1.2Hz，1H)，7.71(d，J＝4.1Hz，1H)，8.19(d，J＝8.8Hz，2H)；MS(ESI)m/z 407(MH+)；405([M-H]-)；C22H18N2O4S分析计算值C，65.01；H，4.46；N，6.89。实测值C，65.04；H，6.62；N，6.82。
步骤3按照实施例1步骤1的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯，制备1-(4-氨基-苄基)-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯1H NMR(DMSO-d6)δ1.10(t，J＝7.2Hz，3H)，4.20(q，J＝7.2Hz，2H)，5.01(brs，2H)，5.55(s，2H)，6.45(d，J＝8.5Hz，2H)，6.84(d，J＝8.5Hz，2H)，7.16-7.20(m，3H)，7.35(td，J＝7.3，1.0Hz，1H)，7.62(dd，J＝5.2，1.2Hz，1H)，7.65(d，J＝4.1Hz，1H)，7.71(d，J＝8.8Hz，1H)；MS(ESI)m/z 377(MH+)；375([M-H]-)；C22H20N2O2S·0.05TFA分析计算值C，69.46；H，5.29；N，7.33。实测值C，69.66；H，5.04；N，7.72。
步骤4按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-氨基-苄基)-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯和苯磺酰氯，制备标题化合物，得到浅褐色固体1H NMR(DMSO-d6)δ5.67(s，2H)，6.95-7.05(m，4H)，7.14-7.23(m，3H)，7.30-735(m，1H)，7.49-7.75(m，8H)，10.26(br s，1H)，13.24(br s，1H)；MS(ESI)m/z 489(MH+)；C26H21N2O4S2HRMS计算值489.0940；实测值(ESI+)489.0935。
实施例141-{4-[(甲基磺酰基)氨基]苄基}-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸的合成按照实施例3步骤2的方法，使用1-(4-硝基-苄基)-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯和甲磺酰氯，制备标题化合物，得到浅黄色固体
1H NMR(DMSO-d6)δ2.94(s，3H)，5.76(s，2H)，7.08-7.24(m，7H)，7.34(td，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.60-7.70(m，3H)，9.69(br s，1H)，13.25(brs，1H)；MS(ESI)m/z 427(MH+)；MS(ESI)m/z 425([M-H]-)；C21H19N2O4S2HRMS计算值427.0784；实测值(ESI+)427.0779。
实施例151-[4-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)苄基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸的合成在氮气氛下，将1-(4-氨基-苄基)-3-苯基-1H-吲哚甲酸乙酯(0.20g，0.54mmol)、丙酮基丙酮(0.16ml，1.35mmol)和甲苯(15ml)的混合物回流加热6小时，使用迪安斯-斯达克榻分水器(Dean-Starktrap)。反应物冷却后浓缩。将残余物重新溶于10ml 2∶1∶1THF/MeOH/水中。加入氢氧化锂一水合物(0.09g，2.1mmol)，将混合物在室温搅拌过夜。除去大部分有机溶剂，将反应混合物用冰醋酸酸化(pH 6)，收集固体，用HPLC纯化，得到标题化合物(0.027g，6％，褐色固体)1H NMR(DMSO-d6)δ1.91(s，6H)，5.75(s，2H)，7.01-7.30(m，6H)，7.32-7.38(m，2H)，7.40-7.50(m，6H)，7.68(d，J＝8.54Hz，1H)，12.80(br s，1H)；MS(ESI)m/z 421(MH+)；MS(ESI)m/z 419([M-H]-)；C28H26N2O2HRMS计算值421.1905；实测值(ESI+)421.1915。
实施例161-(4-苯胺基苄基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸的合成将苯基硼酸(0.16g，0.81mmol)、Cu(OAc)2(0.049g，0.27mmol)和肉豆蔻酸(0.037g，0.16mmol)在配备大搅拌棒的100ml圆底烧瓶中混合。装上橡胶隔片，依次加入无水甲苯(2ml)、2，6-二甲基吡啶(0.066ml，0.57mmol)和1-(4-氨基-苄基)-3-苯基-1H-吲哚甲酸乙酯(0.20g，0.54mmol)。将所得混合物高速搅拌24小时，用乙酸乙酯(10ml)稀释，通过硅胶垫过滤，然后用柱色谱法纯化(5-25％EtOAc/己烷)，得到树胶状固体。向搅拌的树胶状固体的15ml 2∶1∶1THF/MeOH/水溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.1g，2.4mmol)。在40℃搅拌反应物5小时。除去大部分有机溶剂，将反应混合物用冰醋酸酸化(pH 6)，收集固体，用HPLC纯化，得到白色粉末(0.023g，10％)1H NMR(DMSO-d6)δ5.64(s，2H)，6.77(t，J＝7.4Hz，1H)，6.96(d，J＝8.5Hz，2H)，7.00(dd，J＝7.6，0.9Hz，2H)，7.04(t，J＝7.1Hz，1H)，7.15-7.19(m，4H)，7.25(t，J＝7.11Hz，1H)，7.39(t，J＝7.4Hz，2H)，7.46-7.53(m，1H)，7.53(t，J＝7.4Hz，2H)，7.54-7.56(m，2H)，8.08(br s，1H)，13.01(br s，1H)；MS(ESI)m/z 419(MH+)；MS(ESI)m/z 417([M-H]-)；C28H23N2O2HRMS计算值419.1757；实测值(ESI+)419.1755。
实施例171-(4-苯胺基苄基)-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸的合成按照实施例16的方法，使用1-(4-氨基-苄基)-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸乙酯和苯基硼酸，制备标题化合物，得到浅绿色固体1H NMR(DMSO-d6)δ5.70(s，2H)，6.78(td，J＝7.4，1.0Hz，1H)，6.98(d，J＝8.7Hz，2H)，7.01(dd，J＝8.5，1.0Hz，2H)，7.04(d，J＝8.7Hz，2H)，7.16(t，J＝3.5Hz，1H)，7.17(dd，J＝5.2，1.6Hz，2H)，7.21(dd，J＝6.9，2.1Hz，2H)，7.33-7.37(m，1H)，7.61(dd，J＝5.1，1.3Hz，1H)，7.66(t，J＝8.7Hz，2H)，8.12(br s，1H)，13.34(br s，1H)；MS(ESI)m/z 425(MH+)；MS(ESI)m/z 423([M-H]-)；C26H21N2O2S HRMS计算值425.1321；实测值(ESI+)425.1319。
实施例18PAI-1抑制的初步筛选将试验化合物溶于DMSO，终浓度为10mM，然后用生理缓冲液稀释100倍。抑制试验首先将试验化合物(终浓度1-100μM，0.2％的最大DMSO浓度)加入到含140nM重组人血纤维蛋白溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1；Molecular Innovations，Royal Oak，MI)的缓冲液(pH 6.6)中。在室温下温育1小时后，加入70nM重组人组织血纤维蛋白溶酶原激活物(tPA)，将试验化合物、PAI-1和tPA的混合物再温育30分钟。第二次温育后，加入tPA的生色底物Spectrozyme-tPA(American Diagnostica，Greenwich，CT)，在第0分钟和第60分钟于405nm读出吸光度。相对PAI-1抑制等于在试验化合物和PAI-1存在下的残留tPA活性。对照处理包括在没有任何试验化合物作用于tPA的情况下，TPA被PAI-1(摩尔比2∶1)完全抑制。
实施例19确定抑制PAI-1的IC50的试验该试验基于tPA与活性PAI-1之间的非SDS可解离相互作用。首先，将试验板用人tPA(10μg/ml)包被。将本发明试验化合物溶于DMSO，浓度为10mM，然后用生理缓冲液(pH 7.5)稀释至终浓度为1-50μM。将试验化合物与人PAI-1(50ng/ml)一起在室温下温育15分钟。tPA包被板用0.05％吐温(Tween)-20和0.1％BSA的溶液洗涤，然后将该板用3％BSA溶液封闭。向tPA包被板中加入取代吲哚/PAI-1溶液的等分试样，室温下温育1小时，然后洗涤。如下评价结合板的活性PAI-1加入1∶1000稀释度的抗人PAI-1的33B8单克隆抗体的等分试样，将该板在室温下温育1小时(Molecular Innovations，RoyalOak，MI)。再次洗涤板，加入用山羊血清按1∶50,000稀释的山羊抗小鼠IgG-碱性磷酸酶缀合物溶液。将该板在室温下温育30分钟，洗涤，然后加入碱性磷酸酶底物溶液。将该板在室温下温育45分钟，在OD405nm测定显色。在不同试验化合物浓度下定量测定结合tPA的活性PAI-1，以测定IC50。运用对数最佳拟合方程对结果进行分析。根据0-100ng/ml的标准曲线试验，得出灵敏度为5ng/ml人PAI-1。
本发明化合物抑制血纤维蛋白溶酶原激活物抑制剂-1，结果见表1。
表1
尽管为了清楚理解起见，上文通过实施例详细描述了本发明，对于技术人员来说显而易见的是，所公开内容中包括某些变化和改进，这些变化和改进无需过多实验就可付诸实施，因而落入所附权利要求书的范围内，实施例是说明性而非限制性的。
以上引用的所有出版物和专利文献通过引用全部结合到本文中用于所有目的，其程度如同每个出版物或专利文献单独指明结合到本文中一样。
权利要求
1.一种具有下式结构的化合物或其药物可接受的盐或酯形式 其中X为化学键或C1-C6亚烷基；R1和R2独立地为氢、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基、杂环基、-C(＝O)C1-C6烷基、-C(＝O)芳基、-C(＝O)杂环、-C(＝O)N(R6)C1-C6烷基、-C(＝O)N(R6)芳基、-C(＝O)N(R6)杂环、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-芳基或-SO2-杂环；或者R1和R2一起构成杂环；R3和R4独立地为氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C3全氟烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、-C(＝O)C1-C3烷基、-OH、-NH2或-NO2；R5为氢、C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基或杂环基；A存在时为氢、C6-C10芳基或杂环基；R6为氢、C1-C6烷基、卤素、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、芳烷基、C6-C10芳基、杂环基、羟基、C1-C6烷氧基、芳基-氧基、氧代(＝O)、-CN、-C(＝O)H、-CO2H、-OCO2C1-C6烷基、-CO2C1-C6烷基、-CO2-芳基、-CO2(C1-C6烷基)芳基、-OCO2-芳基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHOH、氨基、C1-C6烷基氨基、每个烷基部分都含有1-6个碳原子的二烷基氨基、-NHC(＝O)NH-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基、-NHSO2-芳基或-NHSO2-杂环；其中所述烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基各自任选被1、2、3个或更多个取代基取代。
2.权利要求1的化合物或其药物可接受的盐或酯形式，所述化合物具有下式结构 其中Y为NHSO2-C1-C6烷基、NHSO2-芳基、NHSO2-杂环、吡咯、NH-芳基或NH-杂环。
3.权利要求1的化合物，其中R1和R2独立地为氢、未取代的C1-C6烷基、C2-C7烯基、C2-C7炔基、C3-C8环烷基、C7-C11二环烷基、C6-C10芳基、杂环基、-C(＝O)C1-C6烷基、-C(＝O)芳基、-C(＝O)杂环、-C(＝O)N(R6)C1-C6烷基、-C(＝O)N(R6)芳基、-C(＝O)N(R6)杂环、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-芳基或-SO2-杂环。
4.权利要求1的化合物，其中R1和R2独立地为氢、未取代的SO2-烷基、未取代的SO2-芳基或者任选被-OCF3、芳基或烷基取代的SO2-芳基。
5.权利要求1的化合物，其中R1和R2与氮一起构成杂环。
6.权利要求5的化合物，其中R1和R2与氮一起构成任选被1-2个C1-C6烷基取代的吡咯。
7.权利要求1-6中任一项的化合物，其中R3和R4独立地为氢、卤素、C1-C3全氟烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、-C(＝O)C1-C3烷基、-OH、-NH2、-NO2、未取代的C1-C6烷基或被卤素、-CN或烷氧基取代的C1-C6烷基。
8.权利要求1-7中任一项的化合物，其中R5为氢。
9.权利要求1-8中任一项的化合物，其中A存在时为氢、苯基或噻吩。
10.权利要求1的化合物，所述化合物是下列化合物之一(1)1-[4-({[4-(三氟甲氧基)苯基]磺酰基}氨基)苯基]-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(2)1-[4-(1H-吡咯-1-基)苯基]-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(3)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(4)1-(4-{[(4-叔丁基苯基)磺酰基]氨基}苄基)-1H-吲哚-5-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；或(5)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-5-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式。
11.权利要求1的化合物，所述化合物是下列化合物之一(1)1-(4-{[(4-叔丁基苯基)磺酰基]氨基}苄基)-1H-吲哚-3-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(2)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-3-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(3)1-(4-{[(4-叔丁基苯基)磺酰基]氨基}苄基)-1H-吲哚-4-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(4)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-4-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；或(5)1-{4-[(1，1′-联苯-4-基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-6-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式。
12.权利要求1的化合物，所述化合物是下列化合物之一(1)3-苯基-1-{4-[(苯基磺酰基)氨基]苄基}-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(2)1-{4-[(甲基磺酰基)氨基]苄基}-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(3)1-{4-[(苯基磺酰基)氨基]苄基}-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；(4)1-{4-[(甲基磺酰基)氨基]苄基}-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式；或(5)1-[4-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)苄基]-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式。
13.权利要求1的化合物，所述化合物是1-(4-苯胺基苄基)-3-苯基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式。
14.权利要求1的化合物，所述化合物是1-(4-苯胺基苄基)-3-噻吩-2-基-1H-吲哚-2-甲酸或其药物可接受的盐或酯形式。
15.一种抑制PAI-1活性的方法，该方法包括给予需要这种抑制的患者治疗有效量的权利要求1-15中任一项的化合物。
16.一种治疗PAI-1相关性疾病的方法，该方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求1-15中任一项的化合物。
17.权利要求16的方法，其中所述PAI-1相关性疾病是纤维蛋白溶解系统障碍。
18.权利要求16的方法，其中所述PAI-1相关性疾病是血栓形成、心房纤维性颤动、肺纤维化、心肌缺血、中风、外科手术的血栓栓塞性并发症、心血管疾病、动脉粥样硬化斑块形成、慢性阻塞性肺病、肾纤维化、多囊卵巢综合征、糖尿病、阿尔茨海默病或癌症。
19.权利要求19的方法，其中所述血栓形成选自静脉血栓形成、动脉血栓形成、脑血栓形成和深静脉血栓形成。
20.权利要求18的方法，其中所述PAI-1相关性疾病是由患者的非胰岛素依赖性糖尿病引起的心血管疾病。
21.权利要求16-21中任一项的方法，其中所述治疗有效量为25mg/kg/天至200mg/kg/天。
22.一种药物组合物，该组合物包含权利要求1-15中任一项的化合物或其药物可接受的盐或酯形式以及药物可接受的赋形剂或载体。
23.一种治疗血栓形成、心房纤维性颤动、肺纤维化、外科手术的血栓栓塞性并发症、中风、心肌缺血、动脉粥样硬化斑块形成、慢性阻塞性肺病或肾纤维化的方法，该方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求1-15中任一项的化合物。
全文摘要
本发明涉及式I的取代吲哚及其作为PAI－1抑制剂的应用。
文档编号C07D403/10GK1882537SQ200480034453
公开日2006年12月20日 申请日期2004年9月24日 优先权日2003年9月25日
发明者B·胡, J·W·杰特 申请人:惠氏公司