专利名称：喹唑啉衍生物、其制备方法及用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及作为酪氨酸激酶不可逆抑制剂的化合物，尤其是喹唑啉类衍生物。本发明还涉及其制备方法，以及一种包含喹唑啉衍生物的药物组合物。
背景技术：
癌症被认为是细胞内信号传导系统或信号传导机制的疾病。细胞接受许多来自细胞外的指令，指导细胞是否增殖，信号传导系统的目的是接受细胞表面的这些或其它信号，将其导入细胞内，然后将这些信号传递到细胞核、细胞骨架，以及转运和蛋白合成结构。
癌症的最常见病因是一系列的缺损，所述缺损可以是某些蛋白质的缺损(当其突变时)，或者是对细胞内蛋白质的量的调节的缺损，从而使蛋白过度产生或产生不足。通常，在细胞内存在重要损伤，该损伤导致组成型状态，由此使细胞核收到增殖信号，而事实上这些信号并不存在。这可以通过多种机制发生。有时细胞会在不应该的情况下开始生产其自身受体的真正的生长因子，所谓的自分泌环机制。
细胞表面存在大量的受体，生长因子与这些受体的相互作用是细胞生长正常调节的必需事件。然而，在某些条件下，由于这些受体或者突变或者过量表达，这些受体可变为异常，其结果是细胞繁殖不受控制，这导致肿瘤生长，最终癌症。
表皮生长因子受体(EGFR)被确定为在细胞生长和繁殖过程中至关重要的驱动因素，在常见的肿瘤，如非小细胞肺癌中，表皮生长因子受体大量表达，远远超出正常范围。表皮生长因子受体家族由EGFR(Erb-B1)、Erb-B2(HER-2/neu)、Erb-B3和Erb-B4组成。表皮生长因子受体与大部分癌症的疾病进程有关，特别是结肠癌和乳腺癌。该受体的过度表达和突变已被明确证实是预后不好的乳腺癌的主要危险因素。此外，已证实该受体家族的所有四个成员均可与该家族的其它成员聚合为异源二聚体，形成信号传导复合物，如果该家族中有一个以上的成员在恶性肿瘤中过度表达，便可导致协同的信号传导作用。
EGFR属于蛋白酪氨酸激酶(PTK)家族，蛋白酪氨酸激酶是一类将磷酸基团从ATP催化转移到位于蛋白质底物的酪氨酸残基的酶。蛋白酪氨酸激酶在正常细胞生长中起作用。EGFR的过度表达，导致受体在缺乏配体的条件下被激活，使某些蛋白发生磷酸化，产生了细胞分裂的信号。因此，EGFR通过自身酪氨酸激酶的作用，导致了弱信号的过度放大，引起了细胞的过量增值。
由于异常的受体激酶在癌发病机理中所起作用的重要性，因此最近的许多研究都涉及作为潜在抗癌治疗药物的特异的PTK抑制剂的研制。欧洲专利申请520722 A1公开了某些4-苯胺基间二氮杂萘具有PTK抑制剂活性。欧洲专利申请566226 A1公开了在位置5-8含有许多取代基的4-苯胺基间二氮杂萘具有PTK抑制剂活性。从欧洲专利申请635498 A1得知，在位置6含有许多取代基、在位置7必须有一个卤素的某些4-苯胺基间二氮杂萘也具有PTK抑制剂活性。
WO 96/30347(中国专利CN96102992)涉及一些4-(取代苯氨基)喹唑啉衍生物、其前药和其药学上可接受的盐，用于治疗过度增生疾病。
WO97/38983(中国专利CN97194458)提供了作为酪氨酸激酶不可逆抑制剂的化合物。
WO00/06555(中国专利CN99808949)也涉及某些取代的喹唑啉的衍生物具有PTK抑制剂活性。
WO99/35146(中国专利CN99803887)公开了作为蛋白酪氨酸激酶抑制剂的二环杂芳族化合物。
然而，本领域仍迫切需要开发有效抑制蛋白酪氨酸激酶的化合物。
发明内容
本发明提供了一种下式I化合物、或其药学上可接受的盐或其溶剂化物，
其中，R1选自 (a)卤素、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、甲氧基乙氧基、N-吗啉丙氧基、酯基、酰胺基、或磺酰胺基； (b)取代或未取代的苯基；其中所述的取代基为1-3个选自下组的基团卤素、-OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、-C1-C4烷基-OH、C1-C4烷氧基甲基、C2-C4酯基、或磺酸酯； (c)取代或未取代的呋喃基、取代或未取代的噻吩基，其中所述的取代基为1-3个选自下组的基团卤素、-OH、-NH2、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、烷氧基甲基，酯基，或磺酸酯； 或者R1为以下结构
式中，R1通过氧原子与环相连，且X选自呋喃基、吡咯基，吡啶基，噁唑啉，噻唑基，或噻吩基； R1′选自氢、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、或卤素取代的C1-C4烷氧基； R2、R2′分别独立地选自苄基，一卤代-、二卤代或三卤代苄基、苯甲酰基、吡啶基甲基、吡啶基甲醚基、苯氧基、一卤代-、二卤代或三卤代苯氧基或苯磺酰基、呋喃基甲基、吡咯基甲基、吡咯基甲氧基、卤素、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基，其中所述的苄基、苯基、吡啶基、呋喃基和吡咯基可具有1-3个选自下组的取代基卤素、-OH、-NH2、C1-C4烷基、或C1-C4烷氧基。
本发明还提供了本发明所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明还提供了一种药物组合物，含有0.05-100mg的式I化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
本发明还提供了一种治疗肿瘤(尤其是由蛋白酪氨酸激酶介导的肿瘤)的方法，包括步骤给需要治疗的病人使用0.05-100mg/kg体重/天的式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了一种制备药物组合物的方法，其特征在于，包括步骤将式I化合物、或其药学上可接受的盐或其溶剂化物与药学上可接受的载体的混合，从而形成药物组合物。
在另一优选例中，R2选自苄氧基、一卤代-、二卤代或三卤代苄氧基；而R2’表示卤素。
在另一优选例中，R1选自卤素、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、甲氧基乙氧基、N-吗啉丙氧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、苯基、呋喃基，或者R1为以下结构
其中，X选自呋喃基。
在另一优选例中，R1为酰胺基
其中，R3选自H、N，N-二甲基胺基甲基、N，N-二乙基胺基甲基、N，N-二丙基胺基甲基、或N-吗啉甲基。
在另一优选例中，R1为酰胺基
其中，R3选自H、或N，N-二甲基胺基甲基。
在另一优选例中，R1选自α、β-不饱和磺酰胺，或者芳香基磺酰胺，或者 R1选自被烷基、烷氧基、烷氧基甲基、酯基、磺酸酯、羟甲基取代的苯基。
在另一优选例中，所述的R1选自具有烷氧基、烷氧基甲基、酯基、羟甲基取代的苯基。
本发明优选的化合物选自下组 N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺； N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-对甲苯磺酰胺； N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺； N-[4-(3-氯-4-苄氧基-苯基胺基)-喹唑啉-6-基-]-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺； N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-三氟乙氧基-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺； N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺； N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺； N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺； N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺； O-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-乙酸酯； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-羟基-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-氧代-丁氧基)-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6，7-二甲氧基-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-溴-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(4-甲氧基苯基)-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基-苯基)-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基乙酸酯-苯基)-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(3-氧代-丁氧基-甲基)-苯基]-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基甲磺酸酯-呋喃-2-基)-喹唑啉； 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-二甲基胺甲基-呋喃-2-基-甲氧基)-喹唑啉；或 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-7-甲氧基-喹唑啉。
图1显示了本发明化合物对Erb-B2激酶磷酸化的抑制作用。
在本发明中， 卤素是指氟、氯、溴、碘等，优选氟、氯、溴。
C1-C4烷基是指甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；优选甲基、乙基、丙基、异丙基或丁基，更优选甲基。
C1-C4烷氧基是指甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异丙氧基、正-丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；优选甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基或丁氧基；更优选甲氧基。
酯基，如甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯，优选乙酸酯。
酰胺基，如甲酰胺基、乙酰胺基、丙酰胺基；优选α、β-不饱和丙酰胺。
磺酰胺基，如甲磺酰胺基、乙基磺酰胺基、丙基磺酰胺基、异丙基磺酰胺基，优选甲磺酰胺基。
苯基包括取代或未取代的苯基；其中所述的取代基为1-3个选自下组的基团卤素、-OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、-C1-C4烷基-OH、C1-C4烷氧基甲基、C2-C4酯基、或磺酸酯；较佳地，苯基具有烷基，烷氧基，烷氧基甲基，酯基，磺酸酯，羟甲基等取代基，优选具有烷氧基、烷氧基甲基、酯基、和/或羟甲基取代的苯基。
呋喃基包括取代或未取代的呋喃基，其中所述的取代基为1-3个选自下组的基团卤素、-OH、-NH2、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、烷氧基甲基，C2-C4酯基，或磺酸酯。较佳地，呋喃基具有烷基，烷氧基，烷氧基甲基，酯基，磺酸酯，和/或羟基等取代基。
噻吩基包括取代或未取代的噻吩基，其中所述的取代基为1-3个选自下组的基团卤素、-OH、-NH2、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、烷氧基甲基，C2-C4酯基，或磺酸酯。较佳地噻吩基具有烷基，烷氧基，烷氧基甲基，酯基，磺酸酯，和/或羟基等取代。
本发明还提供了制备式I化合物的方法。通常，本发明化合物由取代的喹唑啉中间体与3-氯-4-(间氟苄氧基)苯胺在有机溶剂中发生亲核反应得到。通常为回流反应。待析出大量固体后，过滤后用少量乙酸乙酯洗涤滤饼，真空60℃干燥过夜，可得本发明化合物产物。
在本发明的制备方法中，各反应在-10℃至回流温度下进行，通常在室温(约25℃)至回流温度下进行。较佳地，反应温度为5-100℃，更佳地为20-80℃。反应时间通常没有特别限制，通常为1分钟-24小时，较佳地为1-20小时。其中，所用的溶剂通常为惰性溶剂，如水、DMF、醇(如甲醇、乙醇、异丙醇等)。
本发明的化合物可给药于人和动物，可以口服、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、局部给药(粉剂、软膏剂或滴剂)、或瘤内给药。所述化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物联合给药。需要指出，本发明的化合物可以混合给药。
用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。
固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。
用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆、注射剂或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。
除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、娇味剂和香料。
除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。
用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。
用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。
本发明中，术语“药学上可接受的盐”是指相对无毒的本发明化合物的无机酸加成盐和有机酸加成盐。这些盐可在化合物最后的分离和提纯过程中现场制备，或者是使纯化的化合物以其游离碱形式与适宜的有机或无机酸进行反应，再将形成的盐分离而制成。代表性盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐、乙酸盐、草酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、硼酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯甲酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、葡萄糖酸盐、乳糖酸盐和月桂基磺酸盐等。它们可包含基于碱金属和碱土金属的阳离子，如钠、锂、钾、钙、镁等，以及无毒胺、季胺和胺阳离子，包括但不限于胺、四甲基胺、四乙基胺、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。
本发明的化合物可用于治疗由蛋白酪氨酸激酶介导的疾病，例如乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、胃癌、胰腺癌等肿瘤。
本发明的主要优点在于本发明化合物具有优异的抗肿瘤活性和抑制Erb-B2磷酸化活性。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则份数和百分比为重量份和重量百分比。
实施例1 3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯胺
在一装有回流冷凝装置的250ml的烧瓶内加入2-氯-4-硝基苯酚4.65g(26.6mmol)，间氟苄溴3.31ml(27.0mmol，1eq)，碳酸钾9.4g(54mmol，2eq)，DMF 50ml，加热回流。反应4h后，取出趁热滤去固体，滤液冷至室温。向体系中加入300ml乙酸乙酯稀释，用水洗涤3次，有机相干燥，浓缩，柱层析纯化得固体产物。
将上述固体产物置于一个装有回流冷凝装置的250ml烧瓶内，加入还原铁粉4.7g(87mmol)，冰醋酸10ml，无水乙醇50ml。加热回流，5h后取出，冷却至室温，用大量水-乙酸乙酯混和溶剂萃取，合并有机相，用碳酸氢钠溶液洗涤两次，干燥，浓缩，柱层析纯化样品，得到浅棕色固体，经鉴别该产物为标题化合物。总收率75％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38-7.29(1H，m)，7.23-7.16(2H，m)，7.04-6.96(1H，m)，6.79-6.74(2H，m)，6.50(1H，dd，J＝2.75Hz，8.61Hz)，5.03(2H，s)，3.50(2H，br). 实施例2 3-氯-4-苄氧基苯胺
在一装有回流冷凝装置的250ml的烧瓶内加入2-氯-4-硝基苯酚4.65g(26.6mmol)，苄溴2.97ml(27.0mmol，1eq)，碳酸钾9.4g(54mmol，2eq)，DMF60ml，加热回流。操作参照实例1，柱层析纯化样品，得到浅棕色固体，经鉴别该产物为标题化合物。总收率73％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.30-7.28(1H，m)，7.23-7.16(3H，m)，7.08-6.99(1H，m)，6.80-6.75(2H，m)，6.52(1H，dd，J＝2.75Hz，8.61Hz)，4.83(2H，s)，3.20(2H，br). 实施例3 4-氯-6-硝基喹唑啉
在一装有回流冷凝装置的100ml烧瓶中加入6-硝基喹唑酮2.85g(15mmol)，三氯氧磷25ml，105℃回流反应3h，取出小心顷入150ml冰水体系中，慢慢析出鳞片状固体，过滤干燥，经鉴别该化合物为目标化合物。收率78％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.22(2H，s)，8.74(1H，dd，J＝2.57Hz，9.16Hz)，8.27(1H，d，J＝9.16Hz). 实施例4 4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉
在一装有回流冷凝装置的100ml烧瓶中加入6，7-二甲氧基喹唑酮4.5g(20mmol)，三氯氧磷45ml，105℃回流反应2h，取出小心顷入100ml冰水体系中，慢慢析出类白色鳞片状固体，过滤干燥，经鉴别该化合物为目标化合物。收率80％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.89(1H，s)，7.47(1H，s)，7.41(1H，s)，4.02(3H，s)，4.00(3H，s). 实施例5 O-(4-氯-喹唑啉-6-基)-乙酸酯
在一装有回流冷凝装置的100ml烧瓶中加入6-乙酸酯基喹唑酮3.06g(15mmol)，三氯氧磷35ml，105℃回流反应2h，取出小心顷入150ml冰水体系中，慢慢析出大量固体，过滤干燥，经鉴别该化合物为目标化合物。收率74％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.05(1H，s)，8.11(1H，d，J＝9.06Hz)，8.01(1H，d，J＝2.52Hz)，7.73(1H，dd，J＝2.52Hz，9.06Hz)，2.40(3H，s). 实施例6 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-硝基喹唑啉
在一个装有冷凝装置的烧瓶中，将原料6-硝基-4-氯-喹唑啉1.20g(5.7mmol)和4-间氟苄氧基-3-氯苯胺1.37g(5.6mmol)溶于80ml异丙醇，回流反应3h，体系中析出大量黄色固体，过滤，样品真空干燥，经鉴别该化合物为目标化合物，收率67％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ11.30(1H，br)，9.54-9.48(1H，m)，8.45-8.41(1H，m)，8.31-8.25(1H，m)，7.98-7.89(1H，m)，7.50-7.47(1H，m)，7.35-7.26(1H，m)，7.05-6.96(1H，m)，6.90-6.80(2H，m)，7.74-7.60(2H，m)，4.84(2H，s). 实施例7 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-胺基喹唑啉
在一个装有回流冷凝装置的烧瓶中加入实施例6制备的硝基取代物1.60g(3.77mmol)，还原铁粉1.05g(18.85mmol，5eq)，冰醋酸2ml，甲醇40ml，85℃油浴下回流反应2.5h后，过滤除去铁粉，滤液用乙酸乙酯稀释，碳酸氢钠溶液洗涤，水洗，有机相干燥浓缩，得到黄色固体，经鉴别该化合物为目标化合物，收率61％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.32(1H，s)，8.31(1H，s)，8.04(1H，d，J＝2.64Hz)，7.73(1H，dd，J＝2.64Hz，8.80Hz)，7.54-7.43(2H，m)，7.36-7.28(3H，m)，7.26-7.14(3H，m)，5.57(2H，br)，5.27(2H，s). 实施例8 N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺
在一个100ml烧瓶中，在冰浴下加入实施例7氨基化合物1.2g(3.04mmol)，三乙胺0.61ml(4.2mmol，1.5eq)，丙烯酰氯0.25ml(3.04mmol，1eq)，THF40ml，逐渐升至室温反应，3h后，停止反应，用乙酸乙酯-水混和体系萃取，合并有机相，干燥浓缩，硅胶柱分离，得到固体1.0g，经鉴别该化合物为目标化合物，收率67％。
1H NMR(400MHz，CDCl3+DMSO)δ8.75(1H，s)，8.60-8.52(2H，m)，7.81(1H，d，J＝2.44Hz)，7.69(2H，s)，7.54(1H，dd，J＝2.56Hz，8.92Hz)，7.30-7.22(2H，m)，7.18-7.08(2H，m)，6.96-6.86(2H，m)，6.37(2H，d，J＝5.86Hz)，5.67(1H，t，J＝5.86Hz)，5.06(2H，s). 实施例9 N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-对甲苯磺酰胺
在一个50ml烧瓶中，在冰浴下加入实施例7氨基化合物1.2g(3.04mmol)，三乙胺1.22ml(8.4mmol，3eq)，对甲苯磺酰氯0.25ml(3.04mmol，1eq)，THF40ml，逐渐升至室温反应，3h后，停止反应，用乙酸乙酯-水混和体系萃取，合并有机相，干燥浓缩，硅胶柱分离，得到固体1.0g，经鉴别该化合物为目标化合物，收率67％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.52(1H，s)，8.45(1H，s)，8.09(1H，d，J＝2.61Hz)，7.95-7.88(3H，m)，7.82-7.77(2H，m)，7.64(1H，d，J＝8.80Hz)，7.55-7.44(3H，m)，7.35-7.15(5H，m)，5.25(2H，s)，3.05(3H，s). 实施例10 N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
在一个50ml烧瓶中加入3-N，N-二甲胺基甲基丙烯酰氯0.4g(2.7mmol)，10ml无水THF溶解，在0℃强力搅拌下向其中滴加实例1中所得芳胺1.06g(2.7mmol)配成无水THF的15ml溶液，保持0℃，滴加二异丙基乙基胺0.2ml的5ml无水THF溶液，冰水浴下强烈搅拌3h。加入乙酸乙酯-水混和体系萃取，水层用乙酸乙酯-THF洗涤3次，合并有机相，干燥，浓缩，硅胶柱分离纯化，得到固体0.73g，经鉴别该化合物为目标化合物，收率54％。
1H NMR(400MHz，CDCl3+DMSO)δ8.77(1H，s)，8.61-8.52(2H，m)，7.80(1H，d，J＝2.44Hz)，7.69(2H，s)，7.55(1H，dd，J＝2.54Hz，8.90Hz)，7.32-7.24(2H，m)，7.18-7.08(2H，m)，7.00-6.86(3H，m)，6.21(1H，dt，J＝1.56Hz，15.65Hz)，5.10(2H，s)，3.07(2H，d，J＝7.14Hz)，2.18(6H，s). 实施例11 N-[4-(3-氯-4-苄氧基-苯基胺基)-喹唑啉-6-基-]-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
使用实例2中的产物(0.97g，2.7mmol)代替实例10中的取代芳胺，其它反应条件不变，硅胶柱层析，得到固体0.67g，经鉴别该化合物为目标化合物，收率51％。
1H NMR(400MHz，CDCl3+DMSO)δ8.76(1H，s)，8.60-8.52(2H，m)，7.82(1H，d，J＝2.45Hz)，7.69(2H，s)，7.55(1H，dd，J＝2.56Hz，9.02Hz)，7.32-7.24(2H，m)，7.18-7.06(3H，m)，7.00-6.86(3H，m)，6.18(1H，dd，J＝1.56Hz，15.65Hz)，5.08(2H，s)，3.10(2H，d，J＝7.14Hz)，2.21(6H，s). 实施例12 N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-三氟乙氧基-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
4-氯-2-胺基苯甲酸10.0g溶于50ml甲酰胺，回流反应5h，析出大量固体，过滤干燥得7-氯喹唑酮11.5g。取10.0g喹唑酮，冰浴下缓慢加入到浓硫酸和发烟硝酸(1∶1)混酸40ml中，然后升温90℃反应3h，体系澄清溶液，小心倾入300ml冰水中，析出浅黄色固体，过滤水洗，再溶于热的冰醋酸中，析出6-硝基-7-氯喹唑酮晶体，收集得产物6.50g。取4.00g该产物与15ml三氯氧磷一起回流反应2h，倾入冰水中，过滤干燥得6-硝基-4，7-二氯喹唑啉中间体；将之溶于30ml异丙醇中，加入3.00g 3-氯-4-(间氟苄氧基)-苯胺回流反应2h，析出大量固体，过滤真空干燥得6-硝基-7-氯-4-胺基取代的喹唑啉固体产物3.83g。
取上述中间体2.00g溶于50ml无水THF中，加入三氟乙氧醇钠盐0.64g，回流反应16h，后处理得6-硝基-7-三氟乙氧基-4-胺基取代喹唑啉产物1.78g。
取上述制备的三氟乙氧基取代中间体1.60g，还原铁粉1.05g(17.85mmol，5eq)，冰醋酸2ml，甲醇40ml，85℃油浴下回流反应2.5h后，过滤除去铁粉，滤液用乙酸乙酯稀释，碳酸氢钠溶液洗涤，水洗，有机相干燥浓缩，得到浅黄色固体0.90g，经鉴别该化合物为6-胺基-7-三氟乙氧基-4-胺基取代喹唑啉，收率61％。
在一个50ml烧瓶中，加入上述还原芳胺0.50g溶于30ml无水THF中，0℃下，依次滴加二异丙基乙基胺试剂0.18ml和3-N，N-二甲胺基甲基丙烯酰氯0.17g(1.1mmol)，维持温度反应3h。加入乙酸乙酯-水混和体系萃取，水层用乙酸乙酯洗涤3次，合并有机相，干燥，浓缩，硅胶柱分离纯化，得到固态标题化合物0.45g，收率72％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.77(1H，s)，8.61-8.52(2H，m)，7.80(1H，d，J＝2.46Hz)，7.69(2H，m)，7.55(1H，dd，J＝2.56Hz，8.94Hz)，7.32-7.24(1H，m)，7.18-7.08(2H，m)，7.00-6.86(3H，m)，6.23(1H，dd，J＝1.55Hz，15.59Hz)，5.10(2H，s)，4.48(2H，m)，3.11(2H，d，J＝7.15Hz)，2.19(6H，s). 实施例13 N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
实验操作流程同实施例12，只是6-硝基-7-氯-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉改为与甲醇钠-甲醇体系反应，最后生成6-硝基-7-甲氧基-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉；接着还原硝基，再与3-N，N-二甲胺基甲基丙烯酰氯反应，纯化后得标题产物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.80(1H，s)，9.70(1H，s)，8.91(1H，s)，8.50(1H，s)，7.98(1H，d，J＝2.44Hz)，7.69(1H，dd，J＝2.44Hz，9.16Hz)，7.51-7.42(1H，m)，7.39-7.16(5H，m)，6.90-6.87(1H，m)，6.19(1H，dd，J＝2.14Hz，10.06Hz)，5.27(2H，s)，4.02(3H，s)，3.07(2H，d，J＝3.8Hz)，2.18(6H，s)。
实施例14 N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺
实验操作流程同实施例12，只是6-硝基-7-氯-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉改为与甲醇钠-甲醇体系反应，最后生成6-硝基-7-甲氧基-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉；接着还原硝基，再与丙烯酰氯反应，纯化后得标题产物。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.80(1H，s)，9.70(1H，s)，8.91(1H，s)，8.50(1H，s)，7.98(1H，d，J＝2.44Hz)，7.69(1H，dd，J＝2.44Hz，9.16Hz)，7.51-7.42(1H，m)，7.39-7.16(5H，m)，6.75(1H，q，J＝10.06Hz，16.78Hz)，6.31(1H，dd，J＝2.14Hz，7.09Hz)，5.80(1H，dd，J＝2.14Hz，10.06Hz)，5.27(2H，s)，4.02(3H，s)。
实施例15 N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
实验操作流程同实施例12，只是中间体6-硝基-7-氯-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉直接还原硝基成胺基，再与3-N，N-二甲胺基甲基丙烯酰氯反应，纯化后得标题产物。
实施例16 N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺
实验操作流程同实施例12，只是中间体6-硝基-7-氯-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉直接还原硝基成胺基，再与丙烯酰氯反应，纯化后得标题产物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.18(1H，s)，9.97(1H，s)，8.80(1H，s)，8.59(1H，s)，7.95(1H，m)，7.71(1H，m)，7.54-7.41(1H，m)，7.39-7.10(5H，m)，6.67(1H，q，J＝10.17Hz，17.21Hz)，6.35(1H，dd，J＝1.57Hz，16.83Hz)，5.87(1H，dd，J＝1.57Hz，10.17Hz)，5.24(2H，s)。
实施例17 O-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-乙酸酯
6-乙酸酯基-4-氯喹唑啉原料(0.90g，4.04mmol)和3-氯-4-(间氟苄氧基)苯胺(1.00g，3.97mmol)溶于40ml异丙醇中，回流反应3h，析出大量浅灰色固体，过滤后用少量乙酸乙酯洗涤滤饼，真空60℃干燥过夜，得目标产物1.65g，收率95％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.68(1H，s)，7.89-7.81(2H，m)，7.58-7.48(2H，m)，7.40-7.32(1H，m)，7.27-7.19(3H，m)，7.16(1H，d，J＝2.46Hz)，7.07-6.96(2H，m)，5.14(2H，s)，2.11(3H，s). 实施例18 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-羟基-喹唑啉
6-乙酸酯基-4-胺基喹唑啉中间体0.47g溶于12ml甲醇中，滴加入1ml浓氨水，立即析出浅黄色固体。室温反应3h，过滤得一部分产物，液相浓缩后层析纯化又得一部分固体产物，合计0.41g，收率97％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.68(1H，s)，7.88-7.81(2H，m)，7.58-7.48(2H，m)，7.40-7.32(1H，m)，7.27-7.19(3H，m)，7.16(1H，d，J＝2.44Hz)，7.07-6.96(2H，m)，5.15(2H，s). 实施例19 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-氧代-丁氧基)-喹唑啉
6-羟基-4-胺基喹唑啉原料0.20g和2-甲氧基溴乙烷0.07ml，(1.5eq.)溶于15ml DMF中，加入催化量的四丁基碘化铵和0.14g K2CO3固体，60℃反应过夜。趁热过滤，减压蒸去溶剂，残余物干法上柱，层析纯化得产物0.17g，产率74％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.67(1H，s)，7.88-7.81(2H，m)，7.56-7.47(2H，m)，7.41-7.32(1H，m)，7.27-7.19(3H，m)，7.15(1H，d，J＝2.44Hz)，7.06-6.96(2H，m)，5.16(2H，s)，4.29-4.24(2H，m)，3.85-3.81(2H，m)，3.49(3，s). 实施例20 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-喹唑啉
操作同实施例15，原料6-羟基-4-胺基喹唑啉0.10g和过量3-(N-吗啉)1-氯丙烷反应，最终得产物0.09g，产率70％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.69(1H，s)，7.87-7.82(2H，m)，7.55(1H，dd，J＝2.56Hz，8.87Hz)，7.46(1H，dd，J＝2.56Hz，9.17Hz)，7.40-7.32(1H，m)，7.29-7.19(3H，m)，7.16(1H，d，J＝2.49Hz)，7.10-6.96(2H，m)，5.17(2H，s)，4.17(2H，t，J＝6.45Hz)，3.74(4H，t，J＝4.69Hz)，2.57(2H，t，J＝7.18Hz)，2.50(4H，t，J＝4.61Hz)，2.10-2.01(2H，m). 实施例21 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6，7-二甲氧基-喹唑啉
4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉1.50g与3-氯-4-(间氟苄氧基)苯胺1.70g溶于150ml异丙醇中，回流反应3h，析出大量浅黄色固体，过滤后用少量冰乙醇洗涤滤饼，真空60℃干燥过夜，得目标产物2.50g，收率84％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ1 1.30(1H，br)，8.83(1H，s)，8.25(1H，s)，7.86(1H，d，J＝2.64Hz)，7.62(1H，dd，J＝2.63Hz，9.08Hz)，7.52-7.44(4H，m)，7.23-15(1H，m)，5.30(2H，s)，4.01(3H，s)，3.99(3H，s). 实施例22 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-溴-喹唑啉
6-溴-4-氯喹唑啉1.36g与3-氯-4-(间氟苄氧基)苯胺1.42g溶于50ml异丙醇中，回流反应3h，析出大量黄色固体，过滤后用少量冰乙醇洗涤滤饼，真空60℃干燥过夜，得6-溴-4-胺基喹唑啉产物2.20g，收率86％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ11.33(1H，s)，9.07(1H，s)，8.94(1H，s)，8.25-8.16(1H，m)，7.94(1H，d，J＝2.64Hz)，7.85(1H，d，J＝9.09Hz)，7.69-7.61(1H，m)，7.53-7.44(1H，m)，7.38-7.29(3H，m)，7.24-7.16(1H，m)，5.30(2H，s). 实施例23 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(4-甲氧基苯基)-喹唑啉
6-溴4-胺基取代的喹唑啉中间体0.30g与4-甲氧基苯基硼酸0.15g溶于20mlDMF溶剂中，氮气氛围中，加入0.15g Pd(PPh3)4催化剂和0.14g Na2CO3固体，60℃反应3h。减压蒸去溶剂，残余物干法上柱，柱纯析纯化，得6-(4-甲氧基苯基)-4-胺基取代的喹唑啉产物0.21g，收率66％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.78(1H，s)，8.04-7.89(3H，m)，7.85(1H，d，J＝2.75Hz)，7.63-7.53(3H，m)，7.46(1H，m)，7.40-7.32(1H，m)，7.27-7.19(2H，m)，7.06-6.96(4H，m)，5.19(2H，s)，3.88(3H，s). 实施例24 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基-苯基)-喹唑啉
6-溴4-胺基取代的喹唑啉中间体1.50g与3-甲酰基苯基硼酸1.37g溶于100ml1，4-二氧六环溶剂中，氮气氛围中，加入0.76g Pd(PPh3)4催化剂和20％K2CO3水溶液5ml，升温回流反应0.5h。减压蒸去溶剂，残余物干法上柱，柱纯析纯化，得6-(3-甲酰基苯基)-4-胺基取代的喹唑啉中间体1.45g。
将上述中间产物溶于60ml THF/MeOH(2∶1)混合溶剂中，0℃搅拌下分批加入0.12g NaBH4固体，体系颜色逐渐变暗，30min后减压蒸去大部分溶剂，残余物用乙酸乙酯溶解，有机相用饱和食盐水洗涤，干燥后硅胶柱层析纯化得标题化合物0.82g，两步总收率51％。
1H NMR(400MHz，DMSO+CDCl3)δ9.34(1H，s)，8.40(1H，s)，8.33(1H，d，J＝3.69Hz)，7.75(1H，dt，J＝2.02Hz，8.56Hz)，7.65(1H，t，J＝2.27Hz)，7.59-7.44(3H，m)，7.39-7.14(1H，m)，7.20-7.03(3H，m)，6.98-6.88(2H，m)，6.76-6.67(2H，m)，4.87(2H，s)，4.52(1H，t，J＝5.70Hz)，4.42(2H，d，J＝5.70Hz). 实施例25 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基乙酸酯-苯基)-喹唑啉
6-[1-(3-羟甲基苯基)]-4-胺基取代喹唑啉原料108mg溶于10ml THF溶剂中，冰浴下依次加入0.19ml Et3N和乙酰氯(0.03ml，1.8eq.)，反应3h，后处理得乙酸酯类产物422mg，收率72％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.79(1H，s)，8.06-7.96(3H，m)，7.86(1H，d，J＝2.69Hz)，7.69-7.48(5H，m)，7.44-7.33(2H，m)，7.26-7.19(1H，m)，7.07-6.97(2H，m)，5.20(2H，s)，5.17(2H，s)，2.13(3H，s). 实施例26 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(3-氧代-丁氧基-甲基)-苯基)-喹唑啉
6-[1-(3-羟甲基苯基)]-4-胺基取代喹唑啉原料112mg溶于10ml DMF溶剂中，加入2-甲氧基1-溴乙烷0.04ml，四丁基碘化铵10mg和碳酸钾100mg，升温60℃反应8h.后处理得目标产物64mg，收率51％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.67(1H，d，J＝2.2Hz)，7.82(1H，dd，J＝2.3Hz，8.7Hz)，7.74-7.68(2H，m)，7.60(1H，d，J＝7.69Hz)，7.45(1H，t，J＝7.69Hz)，7.39-7.30(2H，m)，7.29-7.19(5H，m)，7.03-6.92(3H，m)，5.01(2H，s)，4.78(2H，s)，4.10(2H，t，J＝4.95Hz)，3.69(2H，t，J＝4.95Hz)，3.35(3H，s). 实施例27 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉
6-溴4-胺基取代的喹唑啉中间体3.00g与5-甲酰基-2-呋喃硼酸1.37g溶于150ml 1，4-二氧六环溶剂中，氮气氛围中，加入1.50g Pd(PPh3)4催化剂和20％Na2CO3水溶液7ml，升温100℃回流反应2h。减压蒸去溶剂，残余物干法上样，柱纯析纯化，得6-[2-(5-甲酰基呋喃基)]-4-胺基取代的喹唑啉中间体。
上述中间产物溶于THF/MeOH(2∶1)混合溶剂中，0℃搅拌下分批加入NaBH4固体，体系颜色逐渐变暗，30min后减压蒸去大部分溶剂，残余物用乙酸乙酯溶解，有机相用饱和食盐水洗涤，干燥后硅胶柱层析纯化得标题化合物2.18g，两步总收率70％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.29(1H，s)，8.36(1H，s)，8.21(1H，d，J＝8.38Hz，)，7.73-7.68(1H，m)，7.60-7.58(1H，m)，7.45-7.35(2H，m)，7.04-6.96(1H，m)，6.92-6.82(2H，m)，6.70-6.60(2H，m)，6.50-6.47(1H，m)，6.08-6.02(1H，m)，4.80(2H，d，J＝6.04Hz)，4.61(1H，t，J＝5.63Hz)，4.25(2H，t，J＝6.87Hz). 实施例28 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基甲磺酸酯-呋喃-2-基)-喹唑啉
上述6-[2-(5-羟甲基呋喃基)]-4-胺基取代的喹唑啉原料250mg溶于25mlDMF中，室温搅拌下依次加入Et3N(0.22ml，3.0eq.)和甲磺酰氯(0.06ml，1.5eq.)，反应完全后，体系用大量乙酸乙酯稀释后，用冰水和饱和氯化铵溶液洗涤，有机相干燥后，浓缩层析纯化得标的产物178mg，收率61％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.66(1H，s)，8.19(1H，d，J＝1.18Hz)，8.03(1H，dd，J＝1.57Hz，9.00Hz)，7.91-7.87(1H，m)，7.62-7.55(2H，m)，7.40-7.33(1H，m)，7.28-7.20(3H，m)，7.06-7.68(2H，m)，6.77(1H，d，J＝3.1 3Hz)，6.49(1H，d，J＝3.52Hz)，5.17(2H，s)，4.51(2H，s)，3.44(3H，s). 实施例29 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-二甲基胺甲基-呋喃-2-基-甲氧基)-喹唑啉
原料二甲胺，甲醛，呋喃甲醇按文献方法操作，最后制备得到5-二甲胺基甲基2-呋喃甲醇油状物。该化合物0.50g溶于20ml CH2Cl2中，依次加入Et3N和甲磺酰氯，室温反应3h，后处理得5-二甲胺基甲基2-呋喃甲醇甲磺酸酯中间体0.45g。
取上述甲磺酸脂0.20g溶于20ml DMF溶剂中，加入6-羟基4-胺基取代喹唑啉原料0.20g以及四丁基碘化铵30mg和碳酸钾105mg，升温50℃反应4h。后处理得目标产物-29mg，收率48％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.70(1H，s)，7.88-7.80(2H，m)，7.58-7.48(2H，m)，7.40-7.32(1H，m)，7.27-7.19(3H，m)，7.16(1H，d，J＝2.44Hz)，7.07-6.98(2H，m)，6.21-6.18(1H，m)，6.14-6.10(1H，m)，5.19(2H，s)，4.64(2H，s)，3.51(2H，s)，2.20(6H，s). 实施例30 4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-7-甲氧基-喹唑啉
6，7-二甲氧基喹唑酮在甲磺酸和L-蛋氨酸溶液回流2小时后，倒入冰水中析出固体，为6-羟基-7-甲氧基喹唑酮中间体，将其羟基乙酰化保护后，在SOCl2体系下转化成4-氯-6-乙酰氧基-7-甲氧基喹唑啉。
该片段按照上述相关方法与3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基在异丙醇溶剂中反应制备得到4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-乙酰氧基-7-甲氧基-喹唑啉；该化合物在氨水作用下脱出乙酰基，得到中间体4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-羟基-7-甲氧基-喹唑啉。
接着按照实施例15操作，该中间体与过量3-(N-吗啉)1-氯丙烷反应，最终得标题产物。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.46(1H，s)，8.45(1H，s)，7.95(1H，d，J＝2.75Hz)，7.80(1H，s)，7.59(1H，dd，J＝2.44Hz，8.85Hz)，7.52-7.44(1H，m)，7.39-7.26(3H，m)，7.23-7.15(2H，m)，5.25(2H，s)，4.17(2H，t，J＝6.26Hz)，3.93(3H，s)，3.59(4H，m)，2.49(2H，m)，2.39(4H，m)，2.00(2H，m)。
另外，用类似方法，制得表A中的化合物30a。
在本发明中，化合物的抑瘤实验方法如下 将本发明化合物配制成5个浓度梯度，参照活细胞的改良MTT方法，将1×105A431(人表皮样鳞癌细胞)悬液100ul接种于96孔培养板内，然后加入不同浓度药液10ul，使其达到终浓度；置37℃湿性培养箱中，72小时后取出培养板，每孔再加MTT，继续培养6hr，加入100ul SDS终止液。在自动酶标仪测定各孔光密度(OD)值，计算出抑制率，并计算50％抑制浓度IC50。其中 IC50＜1μM，以“+++”表示； IC50＝1-10μM，以“++”表示； IC50＝10-50μM，以“+”表示； IC50＞50μM，以“-”表示。
本发明实施例化合物经肿瘤细胞抑制实验，计算IC50结果如下 实施例31 药物组合物 配方如下 实施例8化合物23g 淀粉 140g 微晶纤维素 67g 按常规方法，将上述物质混合均匀后，装入普通明胶胶囊，得到1000颗胶囊。
按类似方法，制得含实施例9化合物的胶囊。
实施例32 1、细胞株A431人表皮样鳞癌细胞 再次按照实施例30的方法，将化合物配制成5个浓度梯度，测定50％抑制浓度IC50。细胞实验结果见表A。
2、细胞株BT-474人乳腺癌细胞 细胞与不同浓度化合物(分别为10-0.001μM)温育5天，采用SRB方法评价化合物对细胞增殖的抑制程度，计算抑制率，根据抑制率采用Logit方法计算IC50，比较化合物的体外抗肿瘤活性。细胞实验结果见表A。
表A
注实施例8-30中制备的化合物分别命名为化合物8-30和30a。
*两次试验的两个结果。
实施例33 化合物8和化合物14对Erb-B2磷酸化的抑制作用 人乳腺癌BT474细胞调整到合适浓度，接种于培养板，经各个化合物处理1.5小时；然后，收集并裂解细胞，定蛋白到相同的量。蛋白变性后，进行SDS-PAGE，转移到硝酸纤维素膜，分别与抗磷酸化抗体(一抗)，抗β-tublin抗体(一抗)，抗小鼠IgG抗体(二抗)杂交，最后用ECL试剂盒检测，X光片曝光。根据相应蛋白条带的大小及密度，评价化合物对Erb-B2激酶的抑制程度。
结果如图1所示与市售药物Iressa相比，化合物8和14在0.1μM和1μM下具有更优的抑制活性。
实施例34 化合物8对移植于裸鼠的人体表皮癌A431的抑瘤作用取生长良好的A431实体瘤，无菌条件下切割成2-3mm大小的均匀小块，用套管针每只小鼠右腋皮下接种一块，接种后7日起开始给药，连续经口灌胃13天，并用游标卡尺每4天测瘤块的长径(a)、短径(b)，根据公式V＝ab2/2计算肿瘤体积(mm3)，接种后23天脱颈处死动物，解剖取瘤块，称瘤重，计算抑瘤率。
结果如下表所示，表明本发明化合物有明显的抑瘤作用。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
权利要求
1、一种下式I化合物、或其药学上可接受的盐或其溶剂化物，
其中，R1选自
(a)卤素、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、甲氧基乙氧基、N-吗啉丙氧基、酯基、酰胺基、或磺酰胺基；
(b)取代或未取代的苯基；其中所述的取代基为1-3个选自下组的基团卤素、-OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、-C1-C4烷基-OH、C1-C4烷氧基甲基、C2-C4酯基、或磺酸酯；
(c)取代或未取代的呋喃基、取代或未取代的噻吩基，其中所述的取代基为1-3个选自下组的基团卤素、-OH、-NH2、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、烷氧基甲基，酯基，或磺酸酯；
或者R1为以下结构
式中，R1通过氧原子与环相连，且X选自呋喃基、吡咯基，吡啶基，噁唑啉，噻唑基，或噻吩基；
R1′选自氢、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、或卤素取代的C1-C4烷氧基；
R2、R2′分别独立地选自苄基，一卤代-、二卤代或三卤代苄基、苯甲酰基、吡啶基甲基、吡啶基甲醚基、苯氧基、一卤代-、二卤代或三卤代苯氧基或苯磺酰基、呋喃基甲基、吡咯基甲基、吡咯基甲氧基、卤素、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基，其中所述的苄基、苯基、吡啶基、呋喃基和吡咯基可具有1-3个选自下组的取代基卤素、-OH、-NH2、C1-C4烷基、或C1-C4烷氧基。
2、如权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化物，其特征在于，R2选自苄氧基、一卤代-、二卤代或三卤代苄氧基；而R2’表示卤素。
3、如权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化物，其中，R1选自卤素、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、甲氧基乙氧基、N-吗啉丙氧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、苯基、呋喃基，或者R1为以下结构
其中，X选自呋喃基。
4、如权利要求3所述的化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化物，其中，R1为酰胺基
其中，R3选自H、N，N-二甲基胺基甲基、N，N-二乙基胺基甲基、N，N-二丙基胺基甲基、或N-吗啉甲基。
5、如权利要求4所述的化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化物，其中，
R1为酰胺基
其中，R3选自H、或N，N-二甲基胺基甲基。
6、如权利要求3所述的化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化物，其中，
R1选自α、β-不饱和磺酰胺，或者芳香基磺酰胺，或者
R1选自被烷基、烷氧基、烷氧基甲基、酯基、磺酸酯、羟甲基取代的苯基。
7、如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化物，其特征在于，所述的化合物选自下组
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺；
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-对甲苯磺酰胺；
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺；
N-[4-(3-氯-4-苄氧基-苯基胺基)-喹唑啉-6-基-]-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺；
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-三氟乙氧基-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺；
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺；
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺；
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-E，4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺；
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺；
O-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-乙酸酯；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-羟基-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-氧代-丁氧基)-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6，7-二甲氧基-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-溴-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(4-甲氧基苯基)-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基-苯基)-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基乙酸酯-苯基)-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(3-氧代-丁氧基-甲基)-苯基]-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基甲磺酸酯-呋喃-2-基)-喹唑啉；
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-二甲基胺甲基-呋喃-2-基-甲氧基)-喹唑啉；或
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-7-甲氧基-喹唑啉。
8、权利要求1-7中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或其溶剂化物在制备抗肿瘤药物中的应用。
9、一种药物组合物，其特征在于，含有0.05-100mg权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
10、一种治疗肿瘤的方法，包括步骤给需要治疗的病人使用0.05-100mg/kg体重/天的权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐。
全文摘要
本发明公开了一类酪氨酸激酶不可逆抑制剂的化合物和其药学上可接受的盐或其溶剂化物。本发明还公开了制备它们的方法、含有它们的药物组合物，以及它们在制备抗肿瘤药物中的应用。
文档编号C07D403/12GK101103005SQ200680001251
公开日2008年1月9日 申请日期2006年10月20日 优先权日2006年1月20日
发明者郭建辉, 猛 王, 勇 姜, 张晓芳 申请人:上海艾力斯医药科技有限公司