来自蓼属的生物活性分提物和化合物、其用于抗腹泻的用途和制备方法
【专利摘要】来自蓼属的生物活性分提物和化合物、其用于抗腹泻的用途和制备方法。本发明公开了来自火炭母(Polygonum?chinense?Linn)的分提物和化合物用于抗腹泻的效用。本发明还包括其制备和用于抗腹泻治疗的应用方法。
【专利说明】来自蓼属的生物活性分提物和化合物、其用于抗腹泻的用途和制备方法
[0001]相关串请的交叉引用
[0002]本专利申请要求于2012年6月21日提交的美国临时专利申请第61/662，354号的优先权，所述美国临时专利申请的公开内容以全文引用的方式并入本文。
【技术领域】
[0003]本发明涉及来自火炭母(Polygonum chinense Linn)的分提物和化合物用于抗腹泻的治疗应用。本发明还包含制备和用于抗腹泻治疗的应用方法。
【背景技术】
[0004]腹泻是一种常见胃肠道病症，其特征在于排便频率增加和粪便稠度改变。腹泻可能是致命的并且每年在全世界造成3百万到4百万婴儿和儿童死亡，腹泻在许多其它疾病的症状中也会出现。诱发腹泻的可能的相关因素可以包括从感染到免疫和营养的因素。虽然营养补充物已被证实对于急性腹泻有利，但是慢性腹泻仍然是难以逃避的并且如果不治疗的话通常会造成严重后果。为了保护个人不被腹泻困扰，因此使用天然产物是值得的，因为使用化学药物产生副作用的倾向很高。Heinrich等人已经报道了，虽然针对腹泻可以使用简单且廉价的治疗，但是许多地区的医生和患者仍然依赖于当地可以获得的植物药物。众所周知，植物长期以来一直是新药物的一个非常重要的来源。已经从许多植物物种中筛选出了具有治疗活性的物质。医药植物是抗腹泻药物的一个有希望的来源。为此，包括世界卫生组织(WHO)在内的国际组织已经鼓励了与使用传统医学实践来治疗和预防腹泻疾病相关的研究。这些研究形成了具有抗腹泻活性的中药植物的研究基础。
[0005]火炭母是一种多年生草本植物，它属于寥科，主要分布在中国西南部并且通常用于治疗肠炎。关于火炭母的抗腹泻活性未有`报道。
[0006]在该部分或本申请的任何其它部分中对任何参考文献的引用或认同都不应解释为承认所述参考文献可作为本申请的现有技术。
【发明内容】
[0007]本专利申请公开了火炭母的新的且有效的抗腹泻活性。本发明的目的是通过植物药疗法提供新的抗腹泻治疗。
[0008]根据本发明的一个方面，提供了一种用于从天然来源提取和分离并用于抗腹泻治疗的分提物和化合物的方法。
[0009]在本发明的另一个方面中，提供了一种腹泻相关疾病的治疗法，其包括施用包含治疗有效量的来自火炭母的生物活性分提物、化合物或其混合物的组合物。
[0010]所属领域技术人员将意识到，除了具体描述的变化和修改以外，易于对本文描述的发明进行其它改变和修改。
[0011]本发明包含所有这些变化和修改。本发明还包含本说明书中单独地或共同地提到或指出的所有步骤和特征，和这些步骤或特征的任何和所有组合或任何两个或两个以上的步骤或特征。
[0012]在本说明书通篇中，除非上下文另外要求，表述“包含”或例如“包含于”或“包含着”等变型形式将被理解为暗示包括所述的要素或要素组，但不排除任何其它要素或要素组。还应注意，在本公开书中且尤其在权利要求书和/或段落中，例如“包含”、“包含于”、“包含着”等术语具有适用专利法赋予其的意义，例如它们的意思可以是“包括”、“包括于”、“包括着”等；并且例如“基本上由...组成”和“基本上由...组成的”等术语具有适用专利法赋予其的意义，例如它们涵盖未明确叙述的要素，但排除在现有技术中存在的或影响本发明的基础或新颖性特征的要素。
[0013]此外，在本说明书和权利要求书通篇中，除非上下文另外要求，表述“包括”或例如“包括于”或“包括着”等变型形式将被理解为暗示包括所述的要素或要素组，但不排除任何其它要素或要素组。
[0014]对于本文使用的所选术语的其它定义可以在本发明的【具体实施方式】中找到并且贯穿全文适用。除非另外定义，否则本文所用的所有其它技术术语的含义与本发明所属领域的普通技术人员通常所了解的含义相同。
[0015]通过阅览以下描述，本发明的其它方面和优点对于所属领域技术人员而言是显而易见的。
【专利附图】
【附图说明】
[0016]根据本发明的以下描述并结合附图，本发明的上述和其它目标和特征将变得显而易见，其中:
[0017]图1显示了火炭母的各种分提物在UPLC下的特征。图1A是TF25 (254nm)的UPLC色谱图；图1B是TF50 (254nm)的UPLC色谱图；图1C是在TF25的UPLC色谱图中，7.815min的保留时间处的峰的MS和MS/MS光谱；且图1D是在TF25的UPLC色谱图中，10.219min的保留时间处的峰的MS和MS/MS光谱。
[0018]图2显示由蓖麻油或硫酸镁诱发的小鼠腹泻在用火炭母乙醇提取物(EE)治疗之后的湿粪率、湿粪等级和腹泻指数(N = 9)。
[0019]图3是标准参照物鞣云实精(图3Α)和鞣花酸(图3Β)和火炭母乙醇提取物(EE ；图3C)的HPLC色谱图。
[0020]图4显示由蓖麻油或硫酸镁诱发的小鼠腹泻在用火炭母乙醇提取物(EE)的各种分提物治疗之后的湿粪率、湿粪等级和腹泻指数(N = 9)。
[0021]图5显示由蓖麻油和硫酸镁诱发的小鼠腹泻在用来自BF和AF的组合(TF)的亚分提物治疗之后的湿粪率、湿粪等级和腹泻指数(N = 8-9)。
[0022]图6显示由蓖麻油或硫酸镁诱发的小鼠腹泻在用鞣花酸或鞣云实精治疗之后的湿粪率、湿粪等级和腹泻指数(N = 9-10)。
[0023]图7显示鞣花酸和鞣云实精在小鼠中的抗肠液累积和肠道通过活性(N = 8-9)。【具体实施方式】
[0024]详细描述了本发明的目前优选的实施方案，所述实施方案用于解释本发明的原理。足够详细地描述了本文公开的实施方案和实施例，以便所属领域技术人员能够实施本发明，并且应当理解还可以利用其它实施方案，并且可以在不偏离本发明精神的情况下作出改变。
[0025]本发明涉及一种用于抗腹泻治疗和/或相关疾病的组合物和其制备方法。所述组合物包含治疗有效量的来自寥科草本植物的生物活性分提物、化合物或提取物、式(I)或
(2)的化合物、其盐、衍生物或其组合。式(I)和(2)化合物的化学结构如下所示:
[0026]
【权利要求】
1.一种用于在有需要的受试者中预防和治疗腹泻和相关疾病的组合物，其包含治疗有效量的来自寥科草本植物的生物活性分提物、化合物或提取物、式(I)或(2)的化合物、其盐、其衍生物或其组合:
2.根据权利要求1所述的组合物,其中所述组合物包含来自寥科草本植物的生物活性分提物、化合物或提取物，所述组合物以不小于1.117克/千克体重/天的剂量经口施予所述有需要的受试者。
3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述剂量为2.355克/千克体重/天。
4.根据权利要求2所述的组合物，其中所述剂量为4.710克/千克体重/天。
5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述化合物是式(I)，且所述组合物以不小于15毫克/千克体重/天的剂量经口施予所述有需要的受试者。
6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述剂量为30毫克/千克体重/天。
7.根据权利要求1所述的组合物，其中所述化合物是式(2)，且所述组合物以不小于30毫克/千克体重/天的剂量经口施予所述有需要的受试者。
8.根据权利要求7所述的组合物，其中所述剂量为60毫克/千克体重/天。
9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述草本植物是火炭母(PolygonumchinenseLinn)。
10.根据权利要求1所述的组合物，其中所述受试者是人。
11.根据权利要求1所述的组合物，其中所述腹泻相关疾病包括肠炎、痢疾、炎症性肠病、肠易激惹综合征、储袋易激综合征。
12.一种用于预防和治疗腹泻和相关疾病的方法，其包括对有需要的受试者施用根据权利要求1所述的组合物。
13.—种从寥科草本植物制备用于治疗腹泻和相关疾病的生物活性分提物或化合物的方法，其包括 从所述寥科草本植物至少两次提取粘性乙醇提取物， 在减压下蒸发所述粘性乙醇提取物以去除所述乙醇并浓缩所述提取物； 使用正丁醇分配分离所述粘性乙醇提取物，产生正丁醇分提物和剩余的水性分提物； 合并所述正丁醇分提物和所述水性分提物以形成组合分提物， 使用大孔吸附树脂柱，通过首先将所述组合分提物溶解在热水中，然后缓慢加入到经过预处理的大孔吸附树脂柱中，来分提所述组合分提物； 在达到吸附平衡之后，然后用预定浓度的溶液洗脱树脂以产生所述提取物的溶解分提物； 浓缩并真空干燥所述溶解分提物以产生来自所述草本植物的所述生物活性分提物或化合物。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述草本植物是火炭母。
15.根据权利要求13所述的方法，其中所述粘性乙醇提取物是使用六倍75%EtOH，每次持续2小时来进行提取的。
【文档编号】C07D493/06GK103705586SQ201310240061
【公开日】2014年4月9日 申请日期:2013年6月17日 优先权日:2012年6月21日
【发明者】卞兆祥, 肖海涛, 陈士林, 杨大坚, 徐宏喜, 吕爱平, 陈新滋 申请人:香港浸会大学