化合物Chaetomugilide A及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】对银杏内生球毛壳菌0510-TY1进行发酵培养和次生代谢产物的分离，获得单体化合物，鉴定为ChaetomugilideA，属于嗜氮酮类生物碱，其在30μg/片滤纸（直径6mm）的情况下，对大肠杆菌的抑菌直径达到21.0mm，能够用于抗大肠杆菌药物的制备。
【专利说明】化合物Chaetomugi I ide A及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]利用银杏内生球毛壳菌0510---1发酵液分离制备Chaetomugilide A,能够用于抗大肠杆菌药物的制备。
【背景技术】
[0002]植物内生真菌(Endophytic fungi)是指生活史的一定阶段或全部阶段在健康植物的各种组织或器官内部的真菌。自从1993年，美国蒙大拿州立大学的StiObel小组在短叶红豆杉^r<9Ki/b7ia)内生真菌Taxomyces andreanae中发现抗癌药物紫杉醇，并应用于开发，国内外掀起药用植物内生真菌的研究热潮，很多新颖结构的成分被发现。近年来，从内生真菌中寻找和发现新的具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒、提高免疫力、抗炎等活性化合物已成为开发新型药物的重要途径。
[0003]球毛壳菌{Chaetomium globosum)属于子囊菌门(Ascomycota),幾壳菌纲(Sordariomycetes),幾壳菌目(Sordariales),毛壳菌科(Chaetomiaceae),毛壳菌属{Chaetomiumsv.)。球毛壳菌不但分布广泛，而且已被认为是各种结构多样性次生代谢产物的丰富来源。现在已经发现了大量结构不同的新的具有生物活性的次生代谢产物，如球毛壳素类化合物，azaphilones，蒽醌，色酮，萜类化合物，留体化合物。其中有许多化合物都具有显著的生物活性，如抗肿瘤、抗炎、细胞毒性、酶抑制活性、抗菌活性等。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于从银杏内生球毛壳菌0510-TY1发酵液中分离制备结构新颖的azaphilones类生物碱Chaetomugilide A,并进行抗大肠杆菌的应用。
[0005]为实现上述任务，本发明采用如下技术方案:
1.化合物Chaetomugilide A,其结构式为:
【权利要求】
1.化合物ChaetomugilideA,其结构式为:
2.权利要求1所述的化合物在制备大肠杆菌药物中的应用。
3.权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤: 步骤(1)首先将球毛壳菌株05 IO-TYl在PDA培养基上活化5d，然后接种在种子H)液体培养基，180 rpm、28°C大型恒温振荡摇床培养5d,培养后的种子F1D液体培养基按照体积比为10%的比例转接入装有燕麦液体培养基1.2L的2L三角瓶中，28°C静置发酵培养60d ； 步骤(2)过滤掉三角瓶液体发酵液中的菌丝体，得到红色发酵滤液，发酵滤液缓慢流经大孔吸附树脂DlOl柱，然后用蒸馏水冲洗分离柱至流出液为无色，随后用50%的甲醇冲洗分离柱至流出液为基本无色，接着用70%的甲醇冲洗分离柱至流出液基本无色，收集70%的甲醇洗脱液，50°C减压蒸馏除去甲醇，剩余水溶液用乙酸乙酯萃取三次，并将乙酸乙酯萃取液浓缩至干得到红色浸膏；步骤(3)将红色浸膏用适量甲醇溶解，通过凝胶SephadexLH-20柱层析，用甲醇洗脱，收集最下边的红色条带洗脱液，并在50°C下将该部分洗脱液浓缩至20%体积，然后在30°C下利用旋转蒸发仪进一步缓慢蒸发至10%体积，然后将其放在烧杯中静置敞口挥发，挥发至1%体积时除去残留液，并收集在烧杯中析出的红色针状晶体，即化合物 Chaetomugilide A。
4.根据权利要求3的制备方法，其特征在于，所述活化PDA培养基的组成为土豆200g，葡萄糖20 g，琼脂粉20 g和水1000 mL ;所述种子H)液体培养基的组成为土豆200 g，葡萄糖20 g，水1000mL ;所述的燕麦液体培养基的组成为燕麦片20 g，麦芽糖20 g，水lOOOmL。
【文档编号】C07D491/048GK103694247SQ201310646143
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月6日 优先权日:2013年12月6日
【发明者】秦建春, 张雅梅, 田野, 李想, 王大成, 邱大任, 梁炜薇 申请人:秦建春