一种双峰孔结构聚合物支架及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】一种双峰孔结构聚合物支架及其制备方法和应用，用氯化钠溶液浸渍生物模板藤后再煅烧，得藤的负模多孔氯化钠；再制备水溶性致孔剂微粒，用水溶性致孔剂微粒和生物高分子均质成生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液，再将藤的负模多孔氯化钠浸泡在生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液中，再依次去除溶剂和致孔剂微粒/负模后真空干燥得双峰孔结构聚合物支架。该方法原料易得、工艺简单、易批量制备。该支架的双峰孔结构由孔径为5～20微米的微孔和直径为50～300微米的管状孔构成，孔隙率为85～97%，孔径分布和孔隙率大小可调范围宽，孔间连通性高，适用于制备基于组织工程的组织再生修复用支架和肿瘤细胞体外三维培养模型建立方面。
【专利说明】一种双峰孔结构聚合物支架及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物材料【技术领域】，具体涉及一种双峰孔结构聚合物支架及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002]多孔支架在组织工程中起着至关重要的作用，它不仅决定着工程化组织的外形和尺寸，而且对种植于其表面和内部细胞的存活和生长有重要影响。例如，在利用组织工程技术构建工程化组织时的常见问题是，支架外缘细胞/组织发育良好而中心部位不完善甚至坏死。公认原因是，孔结构不利于支架内物质交换造成的，即不利于种子细胞向支架中心渗透，造成接种时细胞分布不均匀，也不利于氧、营养物质传输至支架中心及细胞代谢产物排出，导致中心部位细胞数少和死亡。如利用溶剂浇铸/粒子浙滤法制成的丙交酯-乙交酯共聚物泡沫支架进行骨组织工程时发现，新生骨组织只在表层形成(〈240 μ m)，而内部细胞很少(Ishaug-Riley SL, et al.Biomaterials, 1998, 19:1405 ~12)。解决此类问题的根本方法是对支架孔结构进行仿生设计，制备类似待修复组织天然孔结构的支架，提高支架中心与外部的传质能力和细胞种植效果，才能更好地修复缺损组织。目前，多孔支架中孔的结构形式主要有泡沫状、网眼状、纤维状(开放式)、蜂窝状等。大量研究表明:高连通性、高孔隙率的蜂窝状孔结构支架效果最好，如蜂窝状胶原支架可实现软骨细胞在整个支架内均匀分布和高密度培养(Masuoka K, et al.J Biomed Mater Res, 2005，75B: 177 ~84),但这种支架力学性能较差。
[0003]由外伤或及疾病造成的肌腱、韧带、骨骼肌和周围神经等缺损在外科上较为常见，然而这类组织的再生修复非常困难。原因在它们具有特殊的类蜂窝状纵形形貌，常用的泡沫状、网眼状和纤维状多孔支架无法用于这些组织的再生修复，只能依靠具有蜂窝状结构的支架。然而，这类支架的制备一直 都是此类研究的瓶颈问题。目前，典型的蜂窝状支架制备方法包括具有类蜂窝状生物组织如周围神经/骨骼肌等脱细胞法、单向温度梯度冷冻干燥法、快速成型法。其中，生物组织脱细胞法存在来源有限、强度低、降解快和免疫原性等问题；单向温度梯度冷冻干燥法最大缺点是管孔间连通性差且孔径分布不均；而快速成型法虽然在孔结构设计方法具有灵活性和可控性，但其孔径尺寸精度目前难以小于100微米且孔隙率不够高，使其在蜂窝状孔结构制备中优势不明显。最近，专利号为201010602753.1的中国专利公开了一种利用植物多孔组织作为模板制备蜂窝状多孔支架的技术，可以获得孔径范围为10~160微米的蜂窝状孔结构，然而该方法步骤较多、工艺复杂，而且蜂窝状孔仅靠模板中少量纹孔连通，致使连通性不高。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种双峰孔结构聚合物支架及其制备方法和应用，该方法综合应用生物模板法和粒子浙滤法，工艺简单，能够获得由大量微孔实现高连通的蜂窝状双峰孔结构聚合物支架，能够应用于基于组织工程的组织再生修复和肿瘤细胞体外三维培养模型建立方面。
[0005]为达到上述目的，本发明采用的技术方案是:
[0006]一种双峰孔结构聚合物支架的制备方法，包括以下步骤:
[0007]I)负模多孔氯化钠的制备:将生物模板藤加工成样品，利用NaCl溶液对样品反复进行浸溃后干燥的操作，得到NaCl/藤复合物，然后将NaCl/藤复合物干燥后煅烧，按I~30C /分钟的升温速率从室温升温至350°C并保温2~6小时，再以10~30°C /分钟的升温速率升至790°C，保温20分钟~2小时后降至室温，得到藤的负模多孔氯化钠；
[0008]2)水溶性致孔剂微粒的制备:将固态的水溶性致孔剂和无水乙醇混合，球磨12~48小时，再筛分得到水溶性致孔剂微粒；
[0009]3)生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的制备:将生物高分子和水溶性致孔剂微粒按质量比为100: (20~60)加入到无水有机溶剂中，均质形成质量浓度为5~25%的生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液；
[0010]4)双峰孔结构聚合物支架的制备:将藤的负模多孔氯化钠置于生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液中，在真空环境中保持4~8小时，使生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液进入藤的负模多孔氯化钠，然后将浸溃了生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的藤的负模多孔氯化钠取出，真空干燥，再在水中浸泡以去除水溶性物质，最后经干燥即得到双峰孔结构聚合物支架。
[0011 ] 所述的步骤I)中的NaCl溶液为饱和溶液；
[0012]所述的步骤I)中的NaCl/藤复合物的干燥温度为120°C。
[0013]所述的步骤I)中的NaCl/`藤复合物中NaCl和藤的质量比为(150~200):100。
[0014]所述的步骤2)中的水溶性致孔剂为氯化钠、氯化钾或蔗糖；
[0015]所述的步骤2)中的水溶性致孔剂微粒的粒径为600~2500目。
[0016]所述的步骤3)和步骤4)中的生物高分子为聚乳酸、聚羟基乙酸、聚乳酸-羟基乙酸、聚己内酯或丝素蛋白，其中聚乳酸、聚羟基乙酸、聚乳酸-羟基乙酸、聚己内酯的分子量为2~10万。
[0017]所述的步骤3)中的无水有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃或甲酸。
[0018]所述的步骤4)中真空环境的真空度为-0.06~-0.09MPa ；
[0019]所述的真空干燥是在室温~50°C下真空干燥2天。
[0020]所述的步骤4)中在水中浸泡的时间为2天，浸泡期间每5小时换一次水。
[0021]根据所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法制备得到的双峰孔结构聚合物支架，其双峰孔结构为蜂窝状孔，由孔径为5~20微米的微孔和直径为50~300微米的管状孔构成，孔隙率为85~97%。
[0022]所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法制备得到的双峰孔结构聚合物支架在基于组织工程的组织再生修复用支架方面的应用，及在肿瘤细胞体外三维培养模型建立方面的应用。
[0023]与现有技术相比，本发明的有益效果在于:
[0024]本发明提供的双峰孔结构聚合物支架的制备方法，将生物模板法和粒子浙滤法有机结合起来，先制备藤的负模多孔氯化钠作为模板，然后制备生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液，再用生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液浸溃藤的负模多孔氯化钠，最后依次去除无水有机溶剂和水溶性致孔剂微粒/模板，得到双峰孔结构聚合物支架。与现有生物模板法相比，本发明提供的双峰孔结构聚合物支架的制备方法大大简化了制备工艺，具有原料易得、适用材料范围广、工艺简单、易批量制备、成本低等优点。而且通过选取不同的原料，可改变制得的双峰孔结构聚合物支架的孔径分布和孔隙率大小，使得其孔间连通性高，从根本上解决了双峰孔结构聚合物支架的管孔间连通性不高的问题。
[0025]本发明提供的双峰孔结构聚合物支架，其双峰孔结构的典型特征是由直径为50~300微米的蜂窝状孔(管状孔)和孔径为5~20微米的微孔组成，且直径为50~300微米的蜂窝状孔由大量5~20微米的微孔实现高连通，其孔隙率为85~97%，其孔径分布和孔隙率大小可调范围宽，孔间连通性高。与现有蜂窝状支架相比，本发明提供的双峰孔结构聚合物支架的管孔间连通性得到极大提高，孔径分布更加均匀，性能可控性更强；特殊的天然拟态结构赋予其更好的生物力学性能；大孔和小孔的有机结合不仅更利于细胞种植于支架内部和细胞粘附，还可提供顺畅的物质交换，为细胞生长提供充足的氧和养分，从而有望从根本上改善细胞培养中‘支架外活内死’的问题。不仅适用于各种组织尤其是具有纵形形貌组织及周围神经、肌腱和韧带等特殊形貌组织的再生修复用支架，而且可广泛用于各种组织工程和肿瘤细胞体外三维培养模型的建立。
【专利附图】
【附图说明】
[0026]图1为实施例1制备的双峰孔结构聚合物支架的扫描电镜照片。
[0027]图2为实施例2制备的双峰孔结构聚合物支架的扫描电镜照片。
[0028]图3为实施例3制备的双峰孔结构聚合物支架的扫描电镜照片。
[0029]图4为实施例4制备的双峰孔结构聚合物支架的扫描电镜照片。
【具体实施方式】
`[0030]本发明制备得到的双峰孔结构聚合物支架，其双峰孔结构为蜂窝状孔，由孔径为5~20微米的微孔和直径为50~300微米的管状孔(蜂窝状孔)构成，且直径为50~300微米的蜂窝状孔由大量5~20微米的微孔实现高连通，其孔隙率为85~97%。
[0031]下面结合实施例及附图对本发明的双峰孔结构聚合物支架制备方法做进一步详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
[0032]实施例1
[0033]双峰孔结构聚合物支架的制备方法，包括以下步骤:
[0034]I)负模多孔氯化钠的制备:将生物模板紫藤加工成圆柱形样品，利用饱和NaCl溶液对样品进行浸溃后干燥的操作，得到NaCl/藤复合物，重复浸溃后干燥这一操作直至NaCl/藤复合物中NaCl与藤的质量比为200:100，然后将NaCl/藤复合物在120°C干燥后置于马弗炉中，先按1°C /分钟的升温速率从室温升温至350°C并保温4小时，再以10°C /分钟的升温速率升至790°C，保温40分钟后随炉降至室温，得到藤的负模多孔氯化钠；
[0035]2)水溶性致孔剂微粒的制备:将粉状的氯化钠和无水乙醇混合，球磨24小时，筛分得到800~1250目的水溶性致孔剂微粒；
[0036]3)生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的制备:将分子量为2万的聚乳酸-羟基乙酸和水溶性致孔剂微粒按质量比为100:60加入到氯仿(无水)中，利用均质机形成质量浓度为20%的聚乳酸-羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液；
[0037]4)双峰孔结构聚合物支架的制备:首先将步骤I)得到的藤的负模多孔氯化钠置于步骤3)得到的聚乳酸-羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液中，在真空度为-0.06MPa的真空环境中保持4小时，使聚乳酸-羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液进入藤的负模多孔氯化钠(形成水溶性致孔剂微粒/模板)，然后将浸溃了聚乳酸-羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液的藤的负模多孔氯化钠取出，在35°C下真空干燥2天，再在蒸馏水中浸泡2天以去除水溶性物质(无水有机溶剂，即无水氯仿)，浸泡期间每5小时换一次蒸馏水，最后经干燥(去除水溶性致孔剂微粒/模板)后即得到双峰孔结构聚合物支架。
[0038]图1为实施例1制备的双峰孔结构聚合物支架的扫描电镜照片。由图1可以看出，该支架呈现典型的双峰孔结构特点，蜂窝状的大孔为直径为60~300微米的管状孔，较厚的管状孔壁由孔径大小为10~15微米的微孔构成，并实现了管状孔的高连通。
[0039]实施例2
[0040]双峰孔结构聚合物支架的制备方法，包括以下步骤:
[0041]I)负模多孔氯化钠的制备:将生物模板紫藤加工成圆柱形样品，利用饱和NaCl溶液对样品进行浸溃后干燥的操作，得到NaCl/藤复合物，重复浸溃后干燥这一操作直至NaCl/藤复合物中NaCl与藤的质量比为180:100，然后将NaCl/藤复合物在120°C干燥后置于马弗炉中，先按2V /分钟的升温速率从室温升温至350°C并保温6小时，再以30°C /分钟的升温速率升至790°C，保温2小时后随炉降至室温，得到藤的负模多孔氯化钠；
[0042]2)水溶性致孔剂微粒的制备:将粉状的氯化钾和无水乙醇混合，球磨12小时，筛分得到800~1250目的水溶性致孔剂微粒；
[0043]3)生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的制备:将分子量为10万的聚乳酸和水溶性致孔剂微粒按质量比为100 :50加入到二氯甲烷(无水)中，利用均质机形成质量浓度为12%的聚乳酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液；
[0044]4)双峰孔结构聚合物支架的制备:首先将步骤I)得到的藤的负模多孔氯化钠置于步骤3)得到的聚乳酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液中，在真空度为-0.06MPa的真空环境中保持8小时，使聚乳酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液进入藤的负模多孔氯化钠，然后将浸溃了聚乳酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液的藤的负模多孔氯化钠取出，在室温下真空干燥2天，再在蒸馏水中浸泡2天以去除水溶性物质，浸泡期间每5小时换一次蒸馏水，最后经干燥后即得到双峰孔结构聚合物支架。
[0045]图2为实施例2制备的双峰孔结构聚合物支架的扫描电镜照片。由图2可以看出，该支架呈现典型的双峰孔结构特点，蜂窝状的大孔为直径为50~200微米的管状孔，较厚的管状孔壁由孔径大小约为10微米的微孔构成，并实现了管状孔的高连通。
[0046]实施例3
[0047]双峰孔结构聚合物支架的制备方法，包括以下步骤:
[0048]I)负模多孔氯化钠的制备:将生物模板紫藤加工成圆柱形样品，利用饱和NaCl溶液反复对样品进行浸溃后干燥的操作，直至得到NaCl与藤的质量比为150:100的NaCl/藤复合物，然后将NaCl/藤复合物在120°C干燥后置于马弗炉中，先按3°C /分钟的升温速率从室温升温至350°C并保温2小时，再以15°C /分钟的升温速率升至790°C，保温20分钟后随炉降至室温，得到藤的负模多孔氯化钠；[0049]2)水溶性致孔剂微粒的制备:将粉状的蔗糖和无水乙醇混合，球磨12小时，筛分得到600~1250目的水溶性致孔剂微粒；
[0050]3)生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的制备:将分子量为3万的聚己内酯和水溶性致孔剂微粒按质量比为100:30加入到四氢呋喃(无水)中，利用均质机形成质量浓度为5%的聚己内酯/水溶性致孔剂微粒悬浮液；
[0051]4)双峰孔结构聚合物支架的制备:首先将步骤I)得到的藤的负模多孔氯化钠置于步骤3)得到的聚己内酯/水溶性致孔剂微粒悬浮液中，在真空度为-0.07MPa的真空环境中保持5小时，使聚己内酯/水溶性致孔剂微粒悬浮液进入藤的负模多孔氯化钠，然后将浸溃了聚己内酯/水溶性致孔剂微粒悬浮液的藤的负模多孔氯化钠取出，在30°C下真空干燥2天，再在蒸馏水中浸泡2天以去除水溶性物质，浸泡期间每5小时换一次蒸馏水，最后经干燥后即得到双峰孔结构聚合物支架。
[0052]图3为实施例3制备的双峰孔结构聚合物支架的扫描电镜照片。由图3可以看出，该支架呈现典型的双峰孔结构特点，蜂窝状的大孔为直径为80~200微米的管状孔，较厚的管状孔壁由孔径大小约为10微米的微孔构成，并实现了管状孔的高连通。
[0053]实施例4
[0054]双峰孔结构聚合物支架的制备方法，包括以下步骤:
[0055]I)负模多孔氯化钠的制备:将生物模板紫藤加工成圆柱形样品，利用饱和NaCl溶液反复对样品进行浸溃后干燥的操作，直至得到NaCl与藤的质量比为160:100的NaCl/藤复合物，然后将NaCl/藤复合物在120°C干燥后置于马弗炉中，先按2°C /分钟的升温速率从室温升温至350°C并保温6小时，再以10°C /分钟的升温速率升至790°C，保温60分钟后随炉降至室温，得到藤的负模`多孔氯化钠；
[0056]2)水溶性致孔剂微粒的制备:将粉状的氯化钠和无水乙醇混合，球磨12小时，筛分得到600~2500目的水溶性致孔剂微粒；
[0057]3)生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的制备:将丝素蛋白和水溶性致孔剂微粒按质量比为100:30加入到甲酸(无水)中，利用均质机形成质量浓度为8%的丝素蛋白/水溶性致孔剂微粒悬浮液；
[0058]4)双峰孔结构聚合物支架的制备:首先将步骤I)得到的藤的负模多孔氯化钠置于步骤3)得到的丝素蛋白/水溶性致孔剂微粒悬浮液中，在真空度为-0.09MPa的真空环境中保持8小时，使丝素蛋白/水溶性致孔剂微粒悬浮液进入藤的负模多孔氯化钠，然后将浸溃了丝素蛋白/水溶性致孔剂微粒悬浮液的藤的负模多孔氯化钠取出，在50°C下真空干燥2天，再在蒸馏水中浸泡2天以去除水溶性物质，浸泡期间每5小时换一次蒸馏水，最后经干燥后即得到双峰孔结构聚合物支架。
[0059]图4为实施例4制备的双峰孔结构聚合物支架的扫描电镜照片。由图4可以看出，该支架呈现典型的双峰孔结构特点，蜂窝状的大孔为直径为70~260微米的管状孔，较薄的管状孔壁由孔径大小为5~20微米的微孔构成，并实现了管状孔的高连通。
[0060]实施例5
[0061]双峰孔结构聚合物支架的制备方法，包括以下步骤:
[0062]I)负模多孔氯化钠的制备:将生物模板紫藤加工成圆柱形样品，利用饱和NaCl溶液反复对样品进行浸溃后干燥的操作，得到NaCl/藤复合物，NaCl/藤复合物中NaCl与藤的质量比为170:100，然后将NaCl/藤复合物在120°C干燥后置于马弗炉中，先按1.5°C/分钟的升温速率从室温升温至350°C并保温5小时，再以25°C /分钟的升温速率升至790°C，保温1.5小时后随炉降至室温，得到藤的负模多孔氯化钠；
[0063]2)水溶性致孔剂微粒的制备:将粉状的氯化钠和无水乙醇混合，球磨32小时，筛分得到600~1250目的水溶性致孔剂微粒；
[0064]3)生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的制备:将分子量为3万的聚羟基乙酸和水溶性致孔剂微粒按质量比为100:40加入到氯仿(无水)中，利用均质机形成质量浓度为7%的聚羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液；
[0065]4)双峰孔结构聚合物支架的制备:首先将步骤I)得到的藤的负模多孔氯化钠置于步骤3)得到的聚羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液中，在真空度为-0.0SMPa的真空环境中保持4小时，使聚羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液进入藤的负模多孔氯化钠，然后将浸溃了聚羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液的藤的负模多孔氯化钠取出，在45°C下真空干燥2天，再在蒸馏水中浸泡2天以去除水溶性物质，浸`泡期间每5小时换一次蒸馏水，最后经干燥后即得到双峰孔结构聚合物支架。
[0066]实施例6
[0067]双峰孔结构聚合物支架的制备方法，包括以下步骤:
[0068]I)负模多孔氯化钠的制备:将生物模板紫藤加工成圆柱形样品，利用饱和NaCl溶液反复对样品进行浸溃后干燥的操作，得到NaCl/藤复合物，NaCl/藤复合物中NaCl与藤的质量比为190:100，然后将NaCl/藤复合物在120°C干燥后置于马弗炉中，先按2.5°C /分钟的升温速率从室温升温至350°C并保温4.5小时，再以12°C /分钟的升温速率升至790°C，保温30分钟后随炉降至室温，得到藤的负模多孔氯化钠；
[0069]2)水溶性致孔剂微粒的制备:将粉状的氯化钾和无水乙醇混合，球磨48小时，筛分得到800~1250目的水溶性致孔剂微粒；
[0070]3)生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的制备:将分子量为8万的聚乳酸-羟基乙酸和水溶性致孔剂微粒按质量比为100:20加入到二氯甲烷(无水)中，利用均质机形成质量浓度为25%的聚乳酸-羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液；
[0071]4)双峰孔结构聚合物支架的制备:首先将步骤I)得到的藤的负模多孔氯化钠置于步骤3)得到的聚乳酸-羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液中，在真空度为-0.07MPa的真空环境中保持5小时，使聚乳酸-羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液进入藤的负模多孔氯化钠，然后将浸溃了聚乳酸-羟基乙酸/水溶性致孔剂微粒悬浮液的藤的负模多孔氯化钠取出，在40°C下真空干燥2天，再在蒸馏水中浸泡2天以去除水溶性物质，浸泡期间每5小时换一次蒸馏水，最后经干燥后即得到双峰孔结构聚合物支架。
[0072]以上内容是结合具体的优选实施例对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的【具体实施方式】仅限于此，对于本发明所属【技术领域】的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单的推演或替换，都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定专利保护范围。
【权利要求】
1.一种双峰孔结构聚合物支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: .1)负模多孔氯化钠的制备:将生物模板藤加工成样品，利用NaCl溶液对样品反复进行浸溃后干燥的操作，得到NaCl/藤复合物，然后将NaCl/藤复合物干燥后煅烧，按I~3°C /分钟的升温速率从室温升温至350°C并保温2~6小时，再以10~30°C /分钟的升温速率升至790°C，保温20分钟~2小时后降至室温，得到藤的负模多孔氯化钠； .2)水溶性致孔剂微粒的制备:将固态的水溶性致孔剂和无水乙醇混合，球磨12~48小时，再筛分得到水溶性致孔剂微粒； .3)生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的制备:将生物高分子和水溶性致孔剂微粒按质量比为100: (20~60)加入到无水有机溶剂中，均质形成质量浓度为5~25%的生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液； .4)双峰孔结构聚合物支架的制备:将藤的负模多孔氯化钠置于生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液中，在真空环境中保持4~8小时，使生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液进入藤的负模多孔氯化钠，然后将浸溃了生物高分子/水溶性致孔剂微粒悬浮液的藤的负模多孔氯化钠取出，真空干燥，再在水中浸泡以去除水溶性物质，最后经干燥即得到双峰孔结构聚合物支架。
2.根据权利要求1所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法，其特征在于:所述的步骤I)中的NaCl溶液为饱和溶液； 所述的步骤I)中的NaCl/藤复合物的干燥温度为120°C。
3.根据权利要求1所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法，其特征在于:所述的步骤I)中的NaCl/藤复合物中NaCl和藤的质量比为(150~200):100。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法，其特征在于:所述的步骤2)中的水溶性致孔剂为氯化钠、氯化钾或蔗糖； 所述的步骤2)中的水溶性致孔剂微粒的粒径为600~2500目。
5.根据权利要求1-3中任意一项所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法，其特征在于:所述的步骤3)和步骤4)中的生物高分子为聚乳酸、聚羟基乙酸、聚乳酸-羟基乙酸、聚己内酯或丝素蛋白，其中聚乳酸、聚羟基乙酸、聚乳酸-羟基乙酸、聚己内酯的分子量为2~10万。
6.根据权利要求1-3中任意一项所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法，其特征在于:所述的步骤3)中的无水有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃或甲酸。
7.根据权利要求1-3中任意一项所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法，其特征在于:所述的步骤4)中真空环境的真空度为-0.06~-0.09MPa ； 所述的真空干燥是在室温~50°C下真空干燥2天。
8.根据权利要求1-3中任意一项所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法，其特征在于:所述的步骤4)中在水中浸泡的时间为2天，浸泡期间每5小时换一次水。
9.根据权利要求要求1-8中任意一项所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法制备得到的双峰孔结构聚合物支架，其特征在于:其双峰孔结构为蜂窝状孔，由孔径为5~20微米的微孔和直径为50~300微米的管状孔构成，孔隙率为85~97%。
10.根据权利要求要求1-8中任意一项所述的双峰孔结构聚合物支架的制备方法制备得到的双峰孔结构聚合物支架在基于组织工程的组织再生修复用支架方面的应用，及在肿瘤细胞体外三维培养模型建 立 方面的应用。
【文档编号】C08J9/26GK103497353SQ201310407059
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2013年9月9日 优先权日:2013年9月9日
【发明者】钱军民, 胥伟军, 柳雪峰, 杨腾飞 申请人:西安交通大学