一种Rink酰胺树脂的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种Rink酰胺树脂的制备方法，其包括以下步骤：采用聚苯乙烯微球种子溶胀带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯与二乙烯基苯，以过氧化苯甲酰为引发剂，聚乙烯醇为稳定剂，十二烷基硫酸钠为乳化剂，制备得到Rink酰胺树脂微球。采用上述方案，本发明基于“种子法”一步制备，得到均一、单分散Rink酰胺树脂，方法简单，转化率高，载量可控，成本低廉，同时使用Fmoc-NH2少，生产成本低。具有很高的市场应用价值。
【专利说明】一种Rink酰胺树脂的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及固相合成树脂，尤其涉及的是，一种Rink酰胺树脂的制备方法。
【背景技术】
[0002] Rink Amide Resin,即Rink酰胺树脂，是一种固相合成树脂，广泛用于固相肽的合 成中；该树脂详情可参考http://www. rinkamideresin. com/ ;其连接到氨甲基树脂或者甲 基二苯甲基胺树脂后可以得到Rink Amide AM树脂、Rink Amide MBHA树脂。
[0003] Rink(音译为林克）酰胺树脂应用广泛，下面给出两个应用的例子。
[0004] 例如，中国专利200510025924. 8公开了一种固相多肽合成特利加压素的制备方 法，包括如下步骤：以Rink Amide树脂（包括Rink Amide MBHA树脂、Rink Amide AM树 脂）为起始原料，以Fmoc保护的氨基酸为单体，以TBTU或HBTU/HOBt为缩合剂，依次逐个 接上氨基酸，最后一个肽链采用Boc-Gly-OH ;然后加入切肽试剂进行切肽，加入乙醚沉淀， 获得还原型粗品，加入碱性物质，在PH为7. 5-10. 0的条件下通空气氧化，获得氧化型粗品， 最后采用C18(或C8)柱进行分离纯化，获得目标产物。该发明的方法，生产成本低，工艺简 单，环境污染低，收率高，便于工业化实施。
[0005] 又如，中国专利200910189087. 0公开了一种制备伐普肽的方法，包括以下步骤： 1、 由 Fmoc-Trp (Boc)-OH 和 Rink Amide 树脂出发，得到 Fmoc-Trp (Boc)-RinkAmide 树脂； 2、 将Fmoc-Trp(Boc)-Rink Amide树脂采用固相合成法按肽序偶联得到线性伐普肽-Rink Amide树脂；3、采用固相氧化伐普肽-Rink Amide树脂；4、裂解伐普肽-Rink Amide树脂， 纯化、冻干得到伐普肽。该发明采用了在固相中碘氧化线性伐普肽树脂，避免了传统的液相 氧化带来操作上的麻烦，并提高10% -20 %的氧化收率。本发明工艺具有反应操作简单、原 料投入少、成本低、收率较高等特点，反应的总产出率可达68 %，粗肽纯度85 %，具有可观 的经济实用价值。
[0006] 由此可见，Rink酰胺树脂具有广泛的应用价值。
[0007] 但是，这些专利方法，仅仅是利用Rink酰胺树脂，不涉及Rink酰胺树脂的合成方 法。Rink酰胺树脂的合成方法是Hans Rink在1987年tetrahedron Letters上报道的多 步后修饰法，此方法路线长，每步转化率低，从而导致树脂上功能团类型多、载量低；同时， 此方法大量使用Fmoc-NH2(芴甲氧羰酰胺）作为原料，生产成本高。
[0008] 因此,现有技术需要改进。
【发明内容】
[0009] 本发明所要解决的技术问题是提供一种新的Rink酰胺树脂的制备方法。
[0010] 本发明的技术方案如下：一种Rink酰胺树脂的制备方法，其包括以下步骤：采用 聚苯乙烯微球种子溶胀带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯与二乙烯基苯，以过氧化苯甲酰 为引发剂，聚乙烯醇为稳定剂，十二烷基硫酸钠为乳化剂，制备得到Rink酰胺树脂微球。
[0011] 优选的，制备得到Rink酰胺树脂微球之后，对所述微球进行清洗，然后烘干。
[0012] 优选的，带双键的Fmoc-酰胺单体为（2, 4-二甲氧基苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧 基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷。
[0013] 优选的，2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧基）二苯甲醇加入芴基氧羰酰胺，再加 入苯磺酸，置于601：-651：油浴中反应，得到（2,4-二甲氧基苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧 基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷。
[0014] 优选的，2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧基）二苯甲酮加入甲醇溶解，缓慢加入 硼氢化钠后，反应得到2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧基）二苯甲醇。
[0015] 优选的，2, 4-二甲氧基-4' -羟基二苯甲酮与对乙烯基苄氯混和后加入碳酸钾与 四氢呋喃，在50°C下反应得到2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧基）二苯甲酮。
[0016] 优选的，对羟基苯甲酸与间苯二甲醚混和后加入三氯化铝与三氯氧磷，反应后将 产物倒入冰水中，搅拌至放热结束；再用氢氧化钠溶液调pH值至6. 0,加入乙酸乙酯萃取， 然后对乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，50°C减压旋转蒸发至残留液体，停止旋蒸，静置，得 到2, 4-二甲氧基-4' -羟基二苯甲酮。
[0017] 优选的，所述聚苯乙烯微球种子为粒径均一的25 iim聚苯乙烯微球。
[0018] 优选的，所述制备方法包括以下步骤：配制聚苯乙烯高分子微球反应体系的水相 溶液，其中含聚乙烯醇l〇g/L、含十二烷基硫酸钠2. 5g/L ;取部分所述水相溶液，将单分散 的25 y m粒径均一的聚苯乙烯微球悬浮分散于水相溶液中，其中含聚苯乙烯微球2. 5g/L， 得到聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液；将过氧化苯甲酰溶于含有苯乙烯单体，（2, 4-二甲 氧基苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷，以及二乙烯基苯的 混和液中，得到油性溶液，其中，过氧化苯甲酰的质量百分比为0.9%至1. 1% ;另取部分所 述水相溶液，将所述油性溶液加入到水相溶液中，得到油水两相分层的混合体系，超声混匀 制成乳浊液，其中，分散的油性小液滴直径小于Ium;将聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液 加入到所述乳浊液，置于20°C至45°C油浴，在机械搅拌作用下溶胀15至30小时后，升温到 66°C至82°C并保持机械搅拌进行聚合反应20至32小时，用十二烷基硫酸钠水溶液重力沉 降分级，去除小粒径的聚苯乙烯微球，得到粒径均一的Rink酰胺树脂微球。
[0019] 优选的，过氧化苯甲酰与所述混和液的质量百分比为0. 98%至0. 99% : 1 ;油水两 相分层的混合体系中，油水两相的体积比为I: (1. 8至4. 2);所述油浴的温度是30°C ;所述 机械搅拌转速为150rpm，在机械搅拌作用下溶胀时间为18小时，升温到75°C并保持机械搅 拌进行聚合反应24小时，得到的产物用2. 5g/L的十二烷基硫酸钠水溶液500mL重力沉降 分级3次，去除微小粒径的少量聚苯乙烯微球，得到粒径均一的Rink酰胺树脂微球。
[0020] 采用上述方案，本发明方法简单，转化率高，载量可控，成本低廉，同时使用 Fmoc-NH2少，生产成本低。具有很高的市场应用价值。
【专利附图】
【附图说明】
[0021] 图1为本发明的一个实施例的反应示意图；
[0022] 图2为本发明的一个实施例的单体制备反应示意图；
[0023] 图3为本发明的一个实施例的Rink酰胺树脂制备反应示意图；
[0024] 图4为本发明的一个实施例制得的Rink酰胺树脂显微镜照片。
【具体实施方式】
[0025] 为了便于理解本发明，下面结合附图和具体实施例，对本发明进行更详细的说明。 需要说明的是，当元件被表述"固定于"另一个元件，它可以直接在另一个元件上、或者其间 可以存在一个或多个居中的元件。当一个元件被表述"连接"另一个元件，它可以是直接连 接到另一个元件、或者其间可以存在一个或多个居中的元件。本说明书所使用的术语"垂直 的"、"水平的"、"左"、"右"以及类似的表述只是为了说明的目的。
[0026] 除非另有定义，本说明书所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领 域的技术人员通常理解的含义相同。本说明书中在本发明的说明书中所使用的术语只是为 了描述具体的实施例的目的，不是用于限制本发明。本说明书所使用的术语"和/或"包括 一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
[0027] 如图1所示，本发明的一个实施例是，一种Rink酰胺树脂的制备方法，其包括以 下步骤：采用聚苯乙烯微球种子溶胀带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯与二乙烯基苯，以过 氧化苯甲酰为引发剂，聚乙烯醇为稳定剂，十二烷基硫酸钠为乳化剂，制备得到Rink酰胺 树脂微球。例如，制备方法分成以下三个步骤：1、制备聚苯乙烯微球种子；2、制备带双键的 Fmoc (莉甲氧羰基）-酰胺单体；3、以双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯、二乙烯基苯按不同比 例调配，得到不同交联度、不同载量的Rink amide(酰胺）固相合成树脂微球，具有非常高 的实用价值。其中，交联度及载量可根据逻辑推理或有限试验确定。
[0028] 例如，一种Rink酰胺树脂的制备方法，其包括以下步骤：采用聚苯乙烯微球种子 溶胀带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯与二乙烯基苯，以过氧化苯甲酰为引发剂，聚乙烯醇 为稳定剂，十二烷基硫酸钠为乳化剂，制备得到Rink酰胺树脂微球；又如，还包括步骤：采 用所述Rink酰胺树脂微球制备Rink酰胺树脂，S卩，制备得到Rink酰胺树脂微球之后采用 这些Rink酰胺树脂微球制备Rink酰胺树脂。例如，二乙烯基苯为对二乙烯基苯。优选的， 所述聚苯乙烯微球种子为粒径均一的25 y m聚苯乙烯微球；例如，采用4. 5 y m粒径均一 的PS微球，溶胀苯乙烯（Styrene，C8H8)，再次聚合，得到25 ii m粒径均一的PS微球。优选 的，制备得到Rink酰胺树脂微球之后，对所述微球用有机试剂清洗，然后烘干；所述有机试 剂包括丙酮、二氯甲烷和/或甲醇等。例如，制备得到Rink酰胺树脂微球之后，对所述微 球用丙酮、二氯甲烷和/或甲醇清洗，然后烘干；然后采用这些烘干后的微球制备Rink酰 胺树脂。其中，带双键的Fmoc-酰胺单体为（2, 4-二甲氧基苯基）-(4'（4'烯基苄氧基） 苯基）_(莉基氧撰醜氨基）甲烧，例如（2, 4-二甲氧基苯基）_(4'（4'乙烯基节氧基）苯 基）_(芴基氧羰酰氨基）甲烷。下面的例子主要以（2, 4-二甲氧基苯基）-(4'（4'乙烯基 苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷为例，带双键的Fmoc-酰胺单体除了（2, 4-二甲 氧基苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷之外还可以选择其 他结构稳定、尤其是价格便宜的具有双键的Fmoc-酰胺单体。优选的，（2, 4-二甲氧基苯 基）-(4'（4'乙烯基苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷、苯乙烯与二乙烯基苯的质量 比为（1至5) : (1至5) : (0. 05至0. 1)，例如，三者的质量比为（1至4) : (1至4) : (0. 05至 0. 1);又如，三者的质量比为（2至3): (2至3) :(0.05至0.075);优选的，（2, 4-二甲氧基 苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷与苯乙烯的总质量（即两 者质量之和值），与二乙烯基苯的质量比为8:0. 1，例如，（2, 4-二甲氧基苯基）-(4'（4'乙 烯基苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷与苯乙烯的质量比为（2至3):(2至3);优 选的，两者的质量比为1:1。
[0029] 例如，一种Rink酰胺树脂的制备方法，其包括以下步骤：采用聚苯乙烯微球种子 溶胀带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯与二乙烯基苯，以过氧化苯甲酰为引发剂，聚乙烯醇 为稳定剂，十二烷基硫酸钠为乳化剂，制备得到Rink酰胺树脂微球；其中，聚苯乙烯微球 种子置于聚苯乙烯高分子微球反应体系的水相溶液中；例如，所述水相溶液中含聚乙烯醇 8-20g/L、含十二烷基硫酸钠 I. 5-4g/L ;又如，所述水相溶液中含聚乙烯醇8-15g/L、含十二 烷基硫酸钠2-3g/L ;优选的，所述水相溶液含聚乙烯醇10g/L、含十二烷基硫酸钠2. 5g/L。 然后，将单分散的、粒径均一的聚苯乙烯微球悬浮分散于水相溶液中，得到聚苯乙烯种子微 球悬浮分散溶液。例如，聚苯乙烯微球粒径为20 ii m至30 ii m，又如，聚苯乙烯微球粒径为 22 y m至28 y m ;优选的，聚苯乙烯微球粒径为25 y m。例如，其中，聚苯乙烯种子微球悬浮 分散溶液含聚苯乙烯微球I. 5-5g/L，又如，聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液含聚苯乙烯微 球2-4g/L，优选的，聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液含聚苯乙烯微球2. 5g/L。又如，聚苯乙 烯种子微球悬浮分散溶液中，聚苯乙烯微球与十二烷基硫酸钠含量相同，这样，有利于得到 分散性较好的聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液。
[0030] 优选的，2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧基）二苯甲醇加入芴基氧羰酰胺，再加 入苯磺酸，置于601：-651：油浴中反应，得到（2,4-二甲氧基苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧 基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷，例如，置于60°C、62°C、63°C或65°C的油浴中反应，得 到（2, 4-二甲氧基苯基）_(4'（4'乙烯基苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷。优选 的，在氮气或者惰性气体的保护下，置于60°C - 65°C油浴中反应；考虑到实现成本，优选氮 气。又如，2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧基）二苯甲酮加入甲醇溶解，缓慢加入硼氢化 钠后，反应得到2, 4-二甲氧基-4'（4'烯基苄氧基）二苯甲醇；例如，所述缓慢加入硼氢化 钠，包括将硼氢化钠轻轻地放置入甲醇及其相关溶液中或者缓慢地倾入到甲醇及其相关溶 液中。其中，2, 4-二甲氧基-4' -羟基二苯甲酮与对乙烯基苄氯混和后加入碳酸钾与四氢 呋喃，在50°C下反应得到2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧基）二苯甲酮。其中，对羟基 苯甲酸与间苯二甲醚混和后加入三氯化铝与三氯氧磷，反应后将产物倒入冰水中，搅拌至 放热结束；再用氢氧化钠溶液调pH值至6. 0,加入乙酸乙酯萃取，然后对乙酸乙酯层用无水 硫酸钠干燥，50°C减压旋转蒸发至残留液体，停止旋蒸，静置，得到2, 4-二甲氧基-4'-羟基 二苯甲酮；例如，旋蒸至残留液体少于180mL、150mL或者IOOmL等，又如，旋蒸至残留液体开 始出现肉眼可见固态等。
[0031] 优选的，所述制备方法包括以下步骤：配制聚苯乙烯高分子微球反应体系的水相 溶液，其中含聚乙烯醇l〇g/L、含十二烷基硫酸钠2. 5g/L ;取部分所述水相溶液，将单分散 的25 y m粒径均一的聚苯乙烯微球悬浮分散于水相溶液中，其中含聚苯乙烯微球2. 5g/L， 得到聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液；将过氧化苯甲酰溶于含有苯乙烯单体，（2, 4-二甲 氧基苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷，以及二乙烯基苯的 混和液中，得到油性溶液，其中，过氧化苯甲酰的质量百分比为0.9%至1. 1%;例如，过氧化 苯甲酰的质量百分比为1%;优选的，过氧化苯甲酰与所述混和液的质量百分比为0.98%至 0.99% :1 ;又如，过氧化苯甲酰在油性溶液中的质量百分比为0.95%至1%。另取部分所述 水相溶液，将所述油性溶液加入到水相溶液中，得到油水两相分层的混合体系，超声混匀制 成乳浊液，其中，分散的油性小液滴直径小于I U m。优选的，制备乳浊液时，油性溶液与水相 溶液的比例为I: (1至5)，优选的，油水两相的体积比为I: (I. 8至4. 2)，又如，油性溶液与 水相溶液的比例为I: (1. 5至2. 5)。然后，将聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液加入到所述乳 浊液，置于20°C至45°C油浴，例如，置于25°C至40°C油浴，优选的，置于28°C至32°C油浴； 优选的，所述油浴的温度是30°C ;并在机械搅拌作用下溶胀15至30小时，例如，在机械搅 拌作用下溶胀15、18、21、22、25、28或30小时；又如，机械搅拌的转速为100至200转/分， 例如，机械搅拌的转速为120至180转/分；优选的，机械搅拌的转速为140至160转/分； 然后，升温到66°C至82°C并保持机械搅拌进行聚合反应20至32小时，例如，升温到72°C 至78°C，又如，升温到75°C或76°C ;又如，保持机械搅拌的转速为120至180转/分；优选 的，机械搅拌的转速为140至160转/分；优选的，溶胀时的机械搅拌与聚合时的机械搅拌， 两者转速相同；例如，所述机械搅拌转速为150rpm，在机械搅拌作用下溶胀时间为18小时， 升温到75°C并保持机械搅拌进行聚合反应24小时；然后，用十二烷基硫酸钠水溶液重力沉 降分级，去除小粒径的聚苯乙烯微球，得到粒径均一的Rink amide微球。优选的，用十二烧 基硫酸钠水溶液重力沉降分级多次，这样去除效果较好。优选的，得到的产物用2. 5g/L的 十二烷基硫酸钠水溶液500mL重力沉降分级3次，去除微小粒径的少量聚苯乙烯微球，得到 粒径均一的Rink amide微球，即Rink酰胺树脂微球。
[0032] 例如，一种Rink酰胺树脂的制备方法，其包括以下步骤：
[0033] 1、PS种子制备，分散聚合物制备得到4. 5 y m粒径均一 PS微球，溶胀苯乙烯，再次 聚合，得到25 y m粒径均一 PS微球，此PS微球作为固相合成树脂微球的种子。
[0034] 2、单体制备
[0035] 对羟基苯甲酸与1.2eq间苯二甲醚进行傅克酰基化反应得到2,4_二甲氧 基-4'-羟基二苯甲酮，产物用乙酸乙酯重结晶，产率90%。2,4_二甲氧基-4'-羟基二苯 甲酮与对乙烯基苄氯反应，再用NaBH 4还原，得到中间体；此中间体再与Fmoc-NH2反应就可 得到最终产物，总产率可达100 %或者近似于100%。
[0036] 各单体及制备流程如图2所示，相关的合成方法与反应条件可采用现有技术实 现，不同原料比例下，都可以得到产物，本发明不要求保护具体的单体制备方法，但是对于 整个制备流程及其后续制备Rink酰胺树脂的制备方法，属于本发明所要求保护范围。各单 体及制备流程中，优选的，一种原料相对过量，这样，对最终产物的收率比较有利。例如，间 苯二甲醚越多越好，但太多增加成本，1. 2当量是反应较优选择。
[0037] 3、固相合成树脂制备
[0038] 以上述步骤1所制备的PS种子溶胀不同比例的带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙 烯、二乙烯基苯，以BP0(Benzoyl peroxide,过氧化苯甲酰）为引发剂，PVA(聚乙烯醇）为 稳定剂，SDS (十二烷基硫酸钠）为乳化剂，制备得到80至120 ii m的三苯基甲基氯固相合 成树脂微球，微球用丙酮和/或甲醇清洗，烘干，完成生产。
[0039] 例如，微球清洗步骤如下：100g分级处理后的微球，首先用500mL丙酮清洗一遍， 抽滤；再加入500mL甲醇清洗一遍，抽滤；再重复用丙酮、甲醇清洗，重复以上程序三遍。产 物在60°C下12h烘干，直接包装，作为产品。
[0040] 下面举例说明PS种子的制备方法。
[0041] 例如，4. 5iim粒径均一的聚苯乙烯微球制备，具体过程如下：290mg自由基引发 剂偶氮二异丁腈（AIBN)溶于8mL(7.248g)苯乙烯（Styrene)单体中，使AIBN占苯乙烯单 体的质量百分比为4%。0.624g聚乙烯吡咯烷酮（PVP)和0.6g Triton X-100(0.572mL) 溶于32mL无水乙醇中，将8mL溶有偶氮二异丁腈的苯乙烯单体溶液加入到上述无水乙醇 溶液中，使得最终混合溶液中聚乙烯吡咯烷酮和Triton X-100的浓度分别为15. 6g/L和 15. Og/L，苯乙烯单体占整个溶液的体积百分比为20%。在氮气保护下，将上述混合溶液以 150rpm.的机械搅拌速率搅拌30min，然后将盛有上述混合溶液的三口圆底烧瓶置于温度 为70°C的油浴中，将机械搅拌速率调整为IOOrpm后反应24h。反应结束后将产物单分散聚 苯乙烯（PS)高分子微球用无水乙醇洗涤3-5次，得到4.5 粒径均一的聚苯乙烯微球。
[0042] 又如，25 ii m粒径均一聚苯乙烯微球制备如下：
[0043] 1、配制含聚乙烯醇（PVA)为10g/L和含十二烷基硫酸钠（SDS)为2. 5g/L的水溶 液IL作为制备聚苯乙烯高分子微球反应体系的水相溶液。
[0044] 2、将0. 4g单分散4. 5 ii m粒径均一的聚苯乙烯微球悬浮分散于20mL上述含有 10g/L PVA和2. 5g/L SDS的水溶液中，得到PS种子微球悬浮分散溶液。
[0045] 3、将857mg自由基引发剂偶氮二异丁腈（AIBN)溶于含有85. 7g(86. 6mL)苯乙烯 单体中，自由基引发剂占高分子聚合单体的质量百分比为1%。将得到的油性溶液加入到 173mL含有10g/L PVA和2. 5g/L SDS的水溶液中，得到油水两相分层的混合体系，其中，油 水两相的体积比为1: 2。通过超声作用将该油水两相分层的混合体系制成乳浊液，所使用的 超声功率为300W，超声时间为9s，间隔时间为3s，重复次数为90次，在光学显微镜下观察最 终的乳浊液中分散的油性小液滴直径小于I U m。
[0046] 4、将20mL聚苯乙烯种子微球悬浮溶液加入到上述乳浊液中，将该溶胀混合物体 系置于30°C油浴中，在150rpm的机械搅拌作用下溶胀18h，聚苯乙烯种子微球吸收乳池液 中的油性小液滴后直径尺寸增大。至聚苯乙烯种子微球吸收绝大部分乳浊液中的油性小液 滴后，将温度升至70°C，保持搅拌速度聚合反应24h，得到的产物25 y m粒径均一聚苯乙烯 微球，和少量小于I U m粒径的聚苯乙烯微球，用2. 5g/L SDS的水溶液500mL重力沉降分级 3次去除I y m粒径的聚苯乙烯微球，得到25 y m粒径均一的聚苯乙烯微球种子。
[0047] 下面继续举例说明图2中的反应以及其中各单体的制备方法，这些单体也可以采 用其他方法实现。
[0048] 化合物5(2,4_二甲氧基-4' -羟基二苯甲酮）制备：100g对羟基苯甲酸⑴与 120g间苯二甲醚（2)1.2eq，加入500mL圆底烧瓶，再加入10.5g三氯化铝（3)1. leq，22g三 氯氧磷2eq ;置于60°C - 65°C油浴中反应2h。反应结束后，将产物倒入IOOOmL冰水中，搅 拌至放热结束。再用30 %氢氧化钠溶液调pH值至6. 0,加入500mL乙酸乙酯萃取三遍，乙 酸乙酯层用无水硫酸钠干燥12h。50°C减压旋转蒸发至残留150mL液体，停止旋蒸，静置，析 出168g产物5,产率约为90%。
[0049] 化合物8(2,4_二甲氧基_4'_(4'乙烯基苄氧基）二苯甲酮）制备：100g化合物5 与58. 9g对乙烯基苄氯（6)加入500mL圆底烧瓶中，加入107g碳酸钾（7)2eq，再加入200mL 四氢呋喃，50°C反应3h。得到144. 5g化合物6,产率约为99%-100%，通常可以达到100%。
[0050] 化合物10 (2,4-二甲氧基）-4' _(4'乙烯基苄氧基）二苯甲醇）制备：IOOg化合 物5加入200mL甲醇溶解，常温下缓慢加入12g硼氢化钠（9) I. 2eq，加完后，再反应20min， 得到l〇〇g产物10,产率约为99% -100%。
[0051] 化合物13 ((2,4-二甲氧基苯基），（4' _(4'乙烯基苄氧基）苯基），（芴基氧羰 酰氨基）甲烧）制备：l〇〇g化合物10,加入95. 3g莉基氧羰酰胺（11) I. 5eq，加入8. 4g苯 磺酸（12)0. 2eq，置于60°C - 65°C油浴中反应6h，就可得到158g最终产物13,产率约为 99% -100%。
[0052] 固相合成树脂制备如图3所示，例如，以上述方法制备的PS种子溶胀不同比例的 化合物13单体、苯乙烯、二乙烯基苯，以BP0(Benzoyl peroxide,过氧化苯甲酰）为引发剂， PVA(聚乙烯醇）为稳定剂，SDS(十二烷基硫酸钠）为乳化剂，制备得到粒径范围为80 - 120 y m且粒径均一的Rink amide微球，然后将微球用丙酮、甲醇清洗，烘干，完成生产，在 显微镜下的相片如图4所示，由该相片可见，本制备方法所制得的Rink酰胺树脂微球粒径 均一'注非常好。
[0053] 下面再给出一些实施例并进行对比，说明本发明所述Rink酰胺树脂的制备方法。
[0054] 配制含PVA为10g/L和含SDS为2. 5g/L的水溶液IOL作为制备聚苯乙烯高分子 微球反应体系的水相溶液。
[0055] 将含0. 85g单分散25 ii m粒径均一的聚苯乙烯微球悬浮分散于350mL上述水相溶 液中，得到PS种子微球悬浮分散溶液。
[0056] 并且，将0.95g BPO溶于含有50g苯乙烯单体，50g化合物13,0.95g 80%二乙烯 基苯中，将得到的油性溶液加入到248mL上述水相溶液中，得到油水两相分层的混合体系。 通过超声作用将该油水两相分层的混合体系制成乳浊液，所使用的超声功率为450W，超声 时间为l〇s，间隔时间为2. 5s，重复次数为100次，油性小液滴直径小于I y m。
[0057] 将350mL聚苯乙烯种子微球悬浮溶液加入到上述乳浊液中，将该溶胀混合物体系 置于油浴中，按以下反应条件制备Rink酰胺树脂微球如下表1所示。
【权利要求】
1. 一种Rink酰胺树脂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 采用聚苯乙烯微球种子溶胀带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯与二乙烯基苯，以过氧 化苯甲酰为引发剂，聚乙烯醇为稳定剂，十二烷基硫酸钠为乳化剂，制备得到Rink酰胺树 脂微球。
2. 根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，制备得到Rink酰胺树脂微球之后，对所 述微球进行清洗，然后烘干。
3. 根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，带双键的Fmoc-酰胺单体为（2, 4-二甲 氧基苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷。
4. 根据权利要求3所述制备方法，其特征在于，2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧基） 二苯甲醇加入芴基氧羰酰胺，再加入苯磺酸，置于60°C - 65°C油浴中反应，得到（2, 4-二甲 氧基苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧基）苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷。
5. 根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧基） 二苯甲酮加入甲醇溶解，缓慢加入硼氢化钠后，反应得到2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯基苄氧 基）二苯甲醇。
6. 根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，2, 4-二甲氧基-4'-羟基二苯甲酮与对 乙烯基苄氯混和后加入碳酸钾与四氢呋喃，在50°C下反应得到2, 4-二甲氧基-4'（4'乙烯 基苄氧基）二苯甲酮。
7. 根据权利要求6所述制备方法，其特征在于，对羟基苯甲酸与间苯二甲醚混和后加 入三氯化铝与三氯氧磷，反应后将产物倒入冰水中，搅拌至放热结束；再用氢氧化钠溶液调 pH值至6.0,加入乙酸乙酯萃取，然后对乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，50°C减压旋转蒸发 至残留液体，停止旋蒸，静置，得到2, 4-二甲氧基-4' -羟基二苯甲酮。
8. 根据权利要求7所述制备方法，其特征在于，所述聚苯乙烯微球种子为粒径均一的 25 μ m聚苯乙烯微球。
9. 根据权利要求1至8任一所述制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 配制聚苯乙烯高分子微球反应体系的水相溶液，其中含聚乙烯醇l〇g/L、含十二烷基硫 酸钠 2. 5g/L ; 取部分所述水相溶液，将单分散的25 μ m粒径均一的聚苯乙烯微球悬浮分散于水相溶 液中，其中含聚苯乙烯微球2. 5g/L，得到聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液； 将过氧化苯甲酰溶于含有苯乙烯单体，（2, 4-二甲氧基苯基）-(4'（4'乙烯基苄氧基） 苯基）-(芴基氧羰酰氨基）甲烷，以及二乙烯基苯的混和液中，得到油性溶液，其中，过氧化 苯甲酰的质量百分比为〇. 9%至1. 1% ; 另取部分所述水相溶液，将所述油性溶液加入到水相溶液中，得到油水两相分层的混 合体系，超声混匀制成乳浊液，其中，分散的油性小液滴直径小于1 μ m ; 将聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液加入到所述乳浊液，置于20°C至45°C油浴，在机械 搅拌作用下溶胀15至30小时后，升温到66°C至82°C并保持机械搅拌进行聚合反应20至 32小时，用十二烷基硫酸钠水溶液重力沉降分级，去除小粒径的聚苯乙烯微球，得到粒径均 一的Rink酰胺树脂微球。
10. 根据权利要求9所述制备方法，其特征在于，过氧化苯甲酰与所述混和液的质量百 分比为0. 98%至0. 99% :1 ;油水两相分层的混合体系中，油水两相的体积比为1: (1. 8至 4.2);所述油浴的温度是30°C ;所述机械搅拌转速为150rpm，在机械搅拌作用下溶胀时间 为18小时，升温到75°C并保持机械搅拌进行聚合反应24小时，得到的产物用2. 5g/L的 十二烷基硫酸钠水溶液500mL重力沉降分级3次，去除微小粒径的少量聚苯乙烯微球，得到 粒径均一的Rink酰胺树脂微球。
【文档编号】C08F212/36GK104292394SQ201410488419
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年9月19日 优先权日:2014年9月19日
【发明者】任连兵, 王勇, 陈继伟, 黎秋萍, 刘宏红 申请人:深圳微球科技有限公司