本发明涉及食品制备领域，具体涉及一种啤酒废酵母制备多肽的方法。
背景技术：
许多小分子肽不仅能提供人体生长、发育所需的营养物质与能量，而且还具有防病治病、调节人体生理机能的功能。这些功能是原蛋白质和其组成氨基酸所不具备的，目前已从酪蛋白、乳清蛋白、大豆蛋白、豌豆蛋白、玉米蛋白、卵白蛋白、丝蛋白、胶原蛋白、水产蛋白等的酶解物中制得一系列功能各异的生物活性肽。但是利用啤酒废酵母制备多肽的研究却未见报道。
技术实现要素：
本发明提供了一种啤酒废酵母制备多肽的方法。首先对啤酒废酵母进行预处理，除去杂质，之后对预处理后的啤酒废酵母与水搅拌均匀，添加木瓜蛋白酶酶解，之后灭酶，然后离心收集上清液，制备啤酒废酵母多肽液，制得的啤酒废酵母多肽液采用等电点沉淀法去除核酸，之后对去除核酸的多肽液进行脱色处理，然后进行凝胶层析，经过真空浓缩后，干燥得多肽。
所述的对啤酒废酵母的预处理方法为将啤酒废酵母加入两倍0～4℃无菌水，添加啤酒废酵母质量1％的NaHCO3，反应15min，倾去上清液，再用蒸馏水洗涤两次，离心得干净废酵母。
所述的木瓜蛋白酶酶解制备啤酒废酵母多肽液具体操作为，称取预处理后的酵母泥与蒸馏水，预处理后的酵母泥与蒸馏水质量比为1∶2，调节pH至7～7.5，酶解温度为55～60℃，酶解时间12h，酶的用量为预处理后的酵母泥质量的3～3.5％。
所述的等电点法去除核酸为用6mol/L HCl溶液将啤酒废酵母多肽液pH调整至核酸等电点，将核酸沉淀下来，然后通过离心去除杂质，取得上清液。
所述的脱色处理为将去除核酸的啤酒废酵母多肽液的pH调节至3～3.5，加入去除核酸的啤酒废酵母多肽液质量3％的颗粒状活性炭，在温度40～50℃下脱色3～4h。
所述的凝胶层析法用到的凝胶为经过pH等于7.0Tris-HCl缓冲液溶胀的凝 胶SephadexG-25，洗脱流速为0.5mL/min。
所述的干燥得多肽的方法为真空冷冻干燥。
有益效果
本发明利用啤酒废酵母作为丰富的蛋白原料制备多肽，不仅综合利用了啤酒厂的大量废渣一啤酒废酵母，既减轻了废酵母对环境的污染程度，又能给啤酒厂带来一定的经济效益，有利于啤酒厂的可持续性发展，这实为一个一举多得的办法，为解决啤酒厂废渣环境污染问题提供了一种新的思路和方法。此外，多肽还可用于食品和制药等工业，因此这方面的研究具有较大的实际意义。
具体实施方式
原料及仪器
啤酒废酵母 北京燕京啤酒股份有限公司；
NaCl、NaHCO3、NaOH、HCl、三氯乙酸 分析纯天津大茂化学试剂厂
木瓜蛋白酶 上海伯奥生物科技公司；
PHS-25型精密数显酸度计 上海伟业仪器厂；
TG328A型分析天平 奥豪斯国际贸易(上海)有限公司；
梅特勒一托利多AG135天平 上海梅特勒仪器公司；
电热恒温水浴锅 天津太斯特仪器有限公司；
TDL-40B型离心机 上海安亭科学仪器厂；
YXQ-LS-50SI型立式压力蒸汽灭菌器 上海博迅实业有限公司医疗设备厂；
SephadexG-25 Superfine Amersham Biosciences公司；
UV-2550紫外分光光度计 日本岛津公司；
Biochrom30型氨基酸自动分析仪 Amersham Biosciences公司；
AKTA purifine制备色谱仪 Amersham Biosciences公司；
F 1.6×100cm层析柱 上海亚荣公司；
旋转蒸发仪RE-52B 上海亚荣生化仪器厂；
真空干燥器 上海跃进医疗器械厂；
ALPHAl-4 冷冻干燥机德国；
实施例1
将北京燕京啤酒股份有限公司的啤酒废酵母加入两倍4℃无菌水，添加啤酒 废酵母质量1％的NaHCO3，反应15min，倾去上清液，再用蒸馏水洗涤两次，离心得干净废酵母。称取预处理后的酵母泥与蒸馏水，预处理后的酵母泥与蒸馏水质量比为1∶2，加入预处理后的酵母泥质量3％的木瓜蛋白酶，将溶液的pH调至7.0，在温度为55℃下酶解12h，得啤酒废酵母多肽液。用6mol/L HCl溶液将啤酒废酵母多肽液pH调整至核酸等电点，将核酸沉淀下来，然后通过离心去除杂质，取得上清液。将去除核酸的啤酒废酵母多肽液的pH调节至3.5，加入去除核酸的啤酒废酵母多肽液质量3％的颗粒状活性炭，在温度50℃下脱色4h。之后用经过pH等于7.0Tris-HCl缓冲液溶胀的凝胶SephadexG-25进行凝胶层析，洗脱流速为0.5mL/min。真空浓缩后，真空冷冻干燥得多肽。
经过精制后所得到的啤酒废酵母多肽液为澄清透明黄色液体，略带苦味，有酵母特殊的香味。
将啤酒废酵母多肽液经过凝胶层析分离、冷冻干燥所得啤酒废酵每多肽为乳白色精细粉末，略微发黄，略带苦味，有酵母特殊的香味，易溶于水。
制得的多肽含有16种氨基酸，其中包括7种人体必需氨基酸，氨基酸总量为1002mg/100mL。
以上实施例可以说明本发明制得的多肽中氨基酸含量丰富，具有较高的营养价值，同时制备工艺简单。