1.一种匹马霉素A菌株的基因工程改造方法,其特征在于,通过在菌株Streptomyces chattanoogensis QZ12中过表达后修饰基因pimD与pimF,实现了匹马霉素A产量的大幅度提高,并降低了匹马霉素B的产生。
2.如权利要求书1所述的匹马霉素A菌株的基因工程改造方法,其特征在于,所述pimD为P450单加氧酶基因,pimD基因的序列如SEQ ID NO.1所示。
3.如权利要求书1所述的匹马霉素A菌株的基因工程改造方法,其特征在于,所述pimF为铁氧还蛋白基因,所编码的铁氧还蛋白为P450单加氧酶PimD的辅助蛋白,pimF基因序列如SEQ ID NO.2所示。
4.如权利要求书1所述的匹马霉素A菌株的基因工程改造方法,其特征在于,所述通过在菌株Streptomyces chattanoogensis QZ12中过表达后修饰基因pimD与pimF的构建步骤如下:
一、设计并构建用于基因pimD与pimF过表达的质粒I;
二、将第一步构建得到的质粒I接合转移导入受体菌株QZ12中;
三、通过对突变株的PCR验证及阿泊拉霉素抗性验证筛选得到过表达菌株QZ14。
5.权利要求书4所述匹马霉素A菌株的基因工程改造方法,其特征在于,步骤一中所述质粒I的构建方法是,在质粒pPM927的EcoRI位点依次插入两拷贝1.4kb测序确认的红霉素启动子控制下的基因pimD的PCR片段及0.4kb测序确认的红霉素启动子控制下的基因pimF的PCR片段。