本发明涉及培养基领域，具体涉及一种基于DMEM的霉菌固体培养基及其制备方法。
背景技术：
目前真菌的培养基主要包括沙保劳琼脂、察氏琼脂、马铃薯块培养基、玉米粉培养基、大米培养基、血琼脂、葡萄糖蛋白胨培养基、唐盐琼脂、尿素琼脂、保存琼脂等50余种。众所周知，DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的常用细胞培养基，它在MEM培养的基础上研制出来的。其葡萄糖含量低于4500mg/L，有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。该类培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养。虽然DMEM中葡萄糖含量低于一般真菌培养基的含量，但是含有丰富的非必需氨基酸、丙酮酸、维生素和铁离子等。通常用于细胞培养用的DMEM使用时均为液体状态，常不利于也不用于真菌的分离培养。
技术实现要素：
为解决上述问题，本发明提供了一种基于DMEM的霉菌固体培养基及其制备方法，既可用于细菌的培养，也适用于霉菌培养的营养需求，并且制作程序简化，培养基使用方便和便于结果的观察。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种基于DMEM的霉菌固体培养基，由以下原料制备而成：
优选地，所述双抗为青霉素与链霉素各20000U/mL。
本发明还提供了一种基于DMEM的霉菌固体培养基，包括如下步骤：
S1、取13.5g DMEM培养基粉末溶于1L超纯水中，加入3.7g NaHCO3，加3.5g葡萄糖，溶解后，滤过除菌，以100mL每瓶分装，2-8℃保存备用；
S2、用电子天平分别称量3g琼脂粉，0.5-1g氯化钠，置于盛有150mL蒸馏水或超纯水的三角瓶中，调pH值为7.0±0.4，高压蒸汽灭菌20-30分钟；
S3、培养基灭菌结束后，取50-100mL步骤S1制备的DMEM培养液在60-70℃水浴中预热；
S4、当高压蒸汽灭菌器压力降为零时，取出灭菌器内培养基，摇匀，等待温度降至60-70℃；
S5、向60-70℃培养基中加入50-100mL已预热至60-70℃的DMEM培养液，摇匀，依次加入2-3mL浓度为20000U/mL的双抗和0-6mL胎牛血清(犊牛血清)，摇匀后，倾倒于无菌培养皿中。
S6、培养基温度降低凝固后，进行包装放置2-8℃保存备用。
优选地，所述步骤S2中高压蒸汽灭菌的温度为121.3℃。
本发明具有以下有益效果：
所制备的培养基既可用于细菌的培养，也适用于霉菌培养的营养需求，并且制作程序简化，培养基使用方便和便于结果的观察。
具体实施方式
为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
以下实施例中所使用的DMEM为市售，其营养成份见表1
表1DMEM(A)细胞培养基(粉末型)成份
实施例1
一种基于DMEM的霉菌固体培养基，由以下原料制备而成：
所述双抗为青霉素与链霉素各20000U/mL。
实施例2
一种基于DMEM的霉菌固体培养基，包括如下步骤：
S1、取13.5g DMEM培养基粉末溶于1L超纯水中，加入3.7g NaHCO3，加3.5g葡萄糖，溶解后，滤过除菌，以100mL每瓶分装，2-8℃保存备用；
S2、用电子天平分别称量3g琼脂粉，0.5-1g氯化钠，置于盛有150mL蒸馏水或超纯水的三角瓶中，调pH值为7.0±0.4，高压蒸汽灭菌20-30分钟；
S3、培养基灭菌结束后，取50-100mL步骤S1制备的DMEM培养液在60-70℃水浴中预热；
S4、当高压蒸汽灭菌器压力降为零时，取出灭菌器内培养基，摇匀，等待温度降至60-70℃；
S5、向60-70℃培养基中加入50-100mL已预热至60-70℃的DMEM培养液，摇匀，依次加入2-3mL浓度为20000U/mL的双抗和0-6mL胎牛血清(犊牛血清)，摇匀后，倾倒于无菌培养皿中。
S6、培养基温度降低凝固后，进行包装放置2-8℃保存备用。
所述步骤S2中高压蒸汽灭菌的温度为121.3℃。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。